NAUPLIOS DE ARTEMIA SELECCION DEL LOTE DE ARTEMIA DE QUISTES El valor de la Artemia como fuente económico y nutricional para larvas de peces y de camarones es determinado por un número de factores: • • • • almacenamiento de los quistes morfometría de los nauplios la calidad nutricional de los nauplios características de eclosión de los quistes ALMACENAMIENTODE LOS QUISTES El lapso de tiempo entre el envasado de los quistes y su consumo en el laboratorio puede variar desde unas pocas semanas hasta varios años. Su viabilidad durante este período depende principalmente de las condiciones de procesamiento, transporte y almacenamiento del cual sólo parte del último está bajo completo control del acuacultor. De ser posible, se debería limitar a comprar aquellos lotes de Artemia que han sido almacenados bajo condiciones de refrigeración. Es también una buena práctica examinar el contenido de agua de los quistes ya que este parámetro correlaciona negativamente l a duración de vida de los quistes: quistes con buena eclosión pero con un contenido de agua sobre el 8% deberían únicamente ser considerados para inmediato consumo. Condición procesamiento envasado almacenamiento transporte almacenamiento almacenamiento Responsable productor productor productor productor /distribuidor distribuidor acuacultor Comentarios producto limpio, humedad< 8% al vacío o atmósfera inerte refrigerado (2-10 °C) transporte refrigerado almacenamiento refrigerado (2-10 °C) - almacenamiento refrigerado (2-10 °C): almacenamiento prolongado - almacenamiento en frío (sala con aire acondicionado ): período corto de almacenamiento DIMENSIONES DE LOS NAUPLIOS DE ARTEMIA Cuando el tamaño de la presa no permite su captura e ingestión por parte del predador su valor nutricional se reduce a cero. Por otra parte es buena práctica ofrecer a las larvas organismos alimentarios vivos del mayor tamaño como le sea posible manipular ya que entonces la energía relativa de captura es óptima. Dentro de las cepas de Artemia disponibles comercialmente la longitud del nauplio en Instar I varía entre 420-500 µm. Aunque las diferencias pueden parecer pequeña, permite a l acuacultor seleccionar la cepa más apropiada para las larvas cultivadas. Especialmente en la producción de larvas de peces marinos el tamaño correcto de la presa es importante ya que estos organismos ingieren la presa capturada en su totalidad. En las larvas de camarones penaeidos, el tamaño de la presa es menos crítico a causa de su hábito de desgarrar la presa en pedazos de tamaño manipulable. Es sin embargo bien conocido que la Artemia de mayor tamaño (e.g. originaria del Gran Lago Salado, UTAH-EUA) son ingeridas por la zoea III con gran dificultad mientras que los nauplios de menor tamaño cosechados (e.g. salina cerca de San Francisco) son capturadas fácilmente por las mismas larvas. Manual para la producción y Uso de organismos Zooplanctónicos 8 Ambas cepas pertenecen a la misma especies hermana Artemia franciscana, sin embargo a veces los productores de Artemia tratan de confundir a sus clientes relacionando el nombre de las especie hermana directamente e incondicionalmente al de la cepa de San Francisco con el consiguiente tamaño naupliuar y mayor costo. En caso de duda la longitud de los nauplios recién eclosionados deberá ser verificado por medición microscópica directa. Una manera indirecta confiable para la estimación de la longitud naupliar, es la medida del diámetro del quiste: un alto y positivo grado de correlación ha sido ciertamente demostrado entre esas dos medidas biométricas. Medición del diámetro de los quistes de Artemia y de la longitud de los nauplios recién eclosionados - Materiales y equipos requeridos - microscopio binocular -dispositivo de calibración (e. g. micrómetro ocular o hematocitómetro) - cristalería: erlenmeyer, pipetas, cajas petri - sistema en pequeña escala para incubar quistes de Artemia (botellas de 1 l o conos de Imhoff) - reactivos:lugol - agua de mar - Procedimiento (veáse también la ilustración: SELECCION DE LA CEPA ADEQUADA DE ARTEMIA, Determinación del tamaño de los nauplios recién eclosionados) - calibración del equipo de medición - medida de la longitud de los nauplios recién eclosionados - incubar los quistes de Artemia bajo condiciones óptimas a una densidad de 1 g•l-1 - cosechar los nauplios eclosionados al T90 - medir una muestra de por lo menos 100 nauplios teñidos y calcular el valor promedio - continuar la medición de muestras de 100 nauplios hasta que la desviación estándard se encuentre debajo del 10% del promedio de las longitudes de los nauplios - medición del diámetro de los quistes -hidratar alrededor de 0,1 g de quistes durante 2 h en agua de mar a 25 °C -medir una muestra de por lo menos 100 quistes y calcular el valor promedio -continuar la medición de muestras de 100 nauplios hasta que la desviación estándard se encuentre debajo del 10% del promedio de las longitudes de los nauplios -estimación de la longitud de los nauplius en base al diámetro de los quistes -aplicar la fórmula: Y= 1.5 x X + 92.1 (R2= 0.80) donde: Y= longitud de los nauplios X= diámetro de los quistes a y b son valores constantes igualando a a y b respectivamente CARACTERÍSTICAS DE ECLOSION DE LOS QUISTES DE ARTEMIA El potencial de eclosión de los quistes de Artemia es cuantificado por el porcentaje de eclosión (E%) y la eficiencia de eclosión (EE). El E% es de valor biológico ya que indica la viabilidad de los quistes como tal. La EE toma enconsideración no solamente los quistes pero también las posibles impurezas. La EE es de importancia económica para el acuacultor ya que representa el número de nauplios que eclosionan de 1g de producto tomando en consideración el producto entero (i.e. quistes e impurezas posibles). Manual para la producción y Uso de organismos Zooplanctónicos 9 Otra característica de eclosión de importancia práctica directa para el acuacultor es la tasa de eclosión (TE) o la evolución de la eclosión durante el período de incubación. Es importante que los quistes eclosionen de manera rápida y sincrónica. Los puntos característicos en la curva de eclosión son: • t10 • t50 • t90 • ts tiempo cuando el 10% de los quistes viables han eclosionado tiempo cuando el 50% de los quistes viables han eclosionado tiempo cuando el 90% de los quistes viables han eclosionado sincronización de la eclosión: t90-t10 Los procedimientos con respecto a la determinación de EE, E% y TE se plantean en las ilustraciones: SELECCION DE LA CEPA ADECUADA DE ARTEMIA, y determinación de las características de eclosión. Manual para la producción y Uso de organismos Zooplanctónicos 10 PRODUCCION DE NAUPLIOS DE ARTEMIA ECLOSION DE NAUPLIOS Ilustración: PRODUCCION DE NAUPLIOS DE ARTEMIA, Condiciones de eclosión La producción de nauplios de Artemia por eclosión de quistes es una rutina ampliamente conocida. El proceso consiste en tres fases: la desinfección de los quistes, la incubación de los quistes y la recolección de los nauplios. Desinfección de los quistes Debido a las grandes cargas bacterianas reportadas en los quistes de Artemia, deben ser desinfectados en una solución de cloro por 20 minutos (densidad de quistes: 50 g.l -1, concentración de cloro: 200 ppm de producto activo). Después de la desinfección, los quistes se enjuagan con agua dulce y son transferidos al medio de incubación. Incubación de los quistes Se pone los quistes previamente desinfectados en agua de mar en un tanque transparente de forma cilíndro-cónico, con aireación suficiente para mantenerlos en suspensión. La densidad de los quistes incubados no debe sobrepasar los 2 g.l-1. La temperatura se mantiene constante de preferencia en el rango de 28-30 °C y el pH debe ser superior a 8. La iluminación es continua, con una intensidad en la superficie del medio de incubación de no menos de 2,000 lux. Recolección de los nauplios eclosionados Después de 24 horas de incubación la aireación y la iluminación son interrumpidas y se cubre el tanque con una tapa opaca. Después de 5-10 minutos las cáscaras de los quistes vacíos flotan en la superficie y la mayoría de los nauplios se concentran en el fondo del tanque de donde son cosechados. Una segunda cosecha se efectúa después de otros 5-10 minutos. Con esta rutina se recoge virtualmente todos los nauplios eclosionados y se evita la contaminación por las cáscaras de quistes vacíos. DESCAPSULACION DE QUISTES DE ARTEMIA Ilustración: PRODUCCION DE NAUPLIOS DE ARTEMIA, Descapsulación La descapsulación de los quistes de Artemia consiste en la eliminación completa de la capa exterior (corión), mediante el uso de una solución concentrada de hipoclorito de cloro. Además de resolver el problema de la separación de nauplios y cáscaras de quistes durante la recolección de los nauplios recién eclosionados; la descapsulación ofrece otras ventajas: desinfección de los quistes, mejoramiento de la eclosión, disponibilidad de partículas alimenticias de menor tamaño y mas nutritivas que el nauplio. MEJORAMIENTO DEL VALOR NUTRICIONAL DEL ALIMENTO VIVO Ilustración: PRODUCCION DE NAUPLIOS DE ARTEMIA, Enriquecimiento Investigaciones realizadas han demostrado que el valor nutricional de ciertos tipos de alimento vivo no siempre cubre con los requerimientos de las especies cultivadas. Aprovechando la manera específica de alimentación de la Artemia (por medio de filtración no selectiva), se han desarrollado durante los últimos años técnicas para enriquecerlos. Los Manual para la producción y Uso de organismos Zooplanctónicos 11 procedimientos, hoy en día ya bien establecidos en el mundo acuicultor pueden ser aplicados para el enriquecimiento con ácidos grasos, proteínas, pro- y anti-bióticos, etc. PRESERVACION DEL VALOR NUTRITIVO DE NAUPLIOS DE ARTEMIA Ilustración: PRODUCCION DE NAUPLIOS DE ARTEMIA, Preservación al frío de los nauplios En los procedimientos rutinarios de la larvicultura es muy común de que por motivos económicos el alimento vivo quede almacenado durante un cierto tiempo después de su producción (p.ej. después de la eclosión los nauplios de Artemia son almacenados por 8 horas antes de ser distribuidos a las larvas). Si el almacenamiento ocurre bajo temperaturas ambientales (25 °C) el valor nutritivo disminuirá significativamente por los procesos metabólicos del alimento vivo mismo. Para evitar este inconveniente se aplica el almacenamiento a bajas temperatura (4-10 °C). Manual para la producción y Uso de organismos Zooplanctónicos 12