CITOESQUELETO Leticia Bucio Ortiz Lab. Fisiol. Celular. Dpto. Cs. de la Salud, D.C.B.S.UAM-Izt Membrana Membrana Plasmática Plasmática Vacuola Poro Nuclear Envoltura Nuclear Nucleolo Núcleo Ribosoma libre Mitocondria Lisosoma Centriolos Retículo Endoplásmico Rugoso Complejo De Golgy Retículo Endoplásmico Liso Citosol 4.5 Becker, W.M. et al. 2000.The world of the cell. 4a. ed. Addisson Wesley Longman. U.S.A. 878 pp. CITOESQUELETO 100nm CITOESQUELETO . . Celular División celular Organelos RNAm y otros componentes Proteínas Motoras Enzimas agrupadas - Movimiento: - Estructura y Sostén - Procesos: Señalización Adhesión Celular Microfilamentos 7-9 nm diam. Microtúbulos 24 nm diam. Filamentos Intermedios 10 nm diam. 22.1 Becker, W.M. et al. 2000.The world of the cell. 4a. ed. Addisson Wesley Longman. U.S.A. 878 pp. Lodish, H. et al. 2009. Molecular Cell Biology.. 5th Ed. Médica Panamericana. MICROFILAMENTOS MICROFILAMENTOS •Contracción muscular. •En Céls. Musc. Y casi toda cél. Eucar. •Función: locomotora. estructural. •Producen surcos citoquinésis. •Adhesión celular. Queratinocitos ... Lamelipodio Ameba ... Fibroblasto Filopodios 18.1 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Filamentos de actina Haces: Paralelos Reticulos: Entrecruzados •Se asocia con la M.P. plano, bidimensional, red o tela •Dentro de la célula tridimensional, el citosol:gel Lodish, H. et al. 2016. Biología Celular y Molecular. 7ª. Ed. Médica Panamericana. España. 1186 pp. Célula intestinal Microvillis Microfilamentos de actina Uniones entre membrana y microfilamentos Filamentos de Actina centrales (con enlaces cruzados de fimbrina y villina) Filamentos de Actina (raicillas) Cortex celular Fibras conectoras de espectrina Filamentos intermedios de queratina •Abundante. Actina •375 restos P.M. 42 000 •muy conservada •Ameba y animales 80%. Levadura-pollo 90% Céls. musculares 4 isoformas de actina a Céls. no musc. actina b actina g Epitelial •Proteínas Rel. Con Actina: ARPs Sim.con Actina. Levadura-pollo 50% . •Arp2/3 y Arp1 Mg2+, K+, Na+ Actina G Actina F 18.2 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Polaridad de la Actina Filamento decorado de actina 18.3 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. 22.17 Becker, W.M. et al. 2000.The world of the cell. 4a. ed. Addisson Wesley Longman. U.S.A. 878 pp. Polimerización de Actina ::: 18-11 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Etapas de la polimerización Iones: Mg, K y Na Actina G, en Cc- Cc+ Hidrólisis de ATP GTP No esencial (GTP o anal. No hidrol.) 18-12 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Velocidades de crecimiento en los extremos de un filamento de actina Cubierta protéica 18-13 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Cap Z 18-13 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Proteínas que regulan la polimerización Timosina b4 G--Timosina b4 Actina G 0.5 mM Cc 0.01 uM S.E.40% despolim. Profilina -Actina Timosina b4 Profilina 18-13 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. ADF/cofilina Modelo de funciones complementarias de profilina y timosina b4, en la regulación de la polimerización de actina 4,5 bifosfato de fosfoinositol Señal intracelular Vasp Mena G 18-11 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. TOXINAS •Citocalasina D Derivado fungal. Alcaloide • Despolimeriza final -, •se une al final +. •Latrunculina A Secretada por una esponja. Latrunculina magnífica • Inhibe polimerización. Se une a la Actina G •Faloidina Amanita phalloides. • Impide la despolimerización Hongo: “ángel de la muerte” •TÉCNICAS •Microscopia de inmunofluorescencia •Florescencia en células in vivo •Video digital computarizado de microscopias •Microscopia electrónica Mutaciones Biología molecular Microfilamentos • Nucleación Proteínas y lípidos de MP • Elongación Formación • Tasa de despolimerización Estabilidad Rompimiento Proteínas pequeñas • Regulan el enlace GTP. Rac Rho (Prots.G) Cdc42 • Que unen Actina. • Prot G monom. Ras • Fosfolípidos de inositol (Transd. Señal) •Proteínas Rel. Con Actina: ARPs ++++ Proteínas que enlazan a monómeos Filamentos cortados ---Filamentos en manojo Complejo Proteína-Actina G Monómeros de actina Filamento de actina Red de Filamentos (gel) Filamento cubierto Proteínas de enlaces cruzados entre actinas Fascina Filamina 18.5 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Proteínas que forman enlaces cruzados entre actinas Proteína PM P r 33,000 EF-1 o 50,000 Fascina t 55,000 Escruina e 102,000 Grupo II í Villina n 92,000 Dematina 48,000 a Grupo III (superfamilia de dominio CH) Grupo I 30 kDa Fimbrina Alfa actinina Espectrina 68,000 102,000 a: 280,000 b: 246,000 275,000 Distrofina 427,000 ABP 120 92,000 Organización de dominios Ubicación Filopodios,lamelipodios, fibras de estrés Seudópodos Filopodios,lamelipodios,fibras de estrés, microvellosidades,prolongaciones acrosómicas Prolongaciones acrosómicas Microvellosidades del borde en cepillo del intestino y el riñón Reticulo cortical del eritrocito Microvellosidades, estereocilias, placas de adhesión, cables de actina de levaduras Filopodios, lamelipodios, fibras de estrés, placas de adhesión Reticulos corticales Retículos corticales musculares Seudopodos Filopodios, seudópodos, fibras de estrés Filamina 280,000 Cuadro 18-1 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Trozos cortados a partir de un filamento grande que tienen protegido uno de los extremos. Gelsolina Formación de haces Estalmina Cofilina Unión a monómeros Monómeros libres Fimbrina Fimbrina Cofilina Filamina Formación de entramados Cofilina Filamina Trozos cortados a partir de un filamento grande Filamento largo de Actina Proteínas citosólicas que controlan la polimerización de Actina Acción de gelsolina en el corte de MF gel Proteína PM (KD) Cofilina 15 Corte gCAP39 Severina Gelsolina 40 40 87 Villina 92 Cubierta [extremo (+)] Corte, cubierta Corte, cubierta [extremo (+)] Enlaces cruzados, corte, cubierta CapZ 36 (a) 32 (b) 40 líquido tropomodulina Actividad Cubierta [extremo (+)] Cubierta [extremo (-)] 18-16 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Eritrocito humano Proteínas fijadoras de microfilamentos a la M.P. Morfología Unión: - simple (F. actina-P.Integral) -compleja (F. actina-P. integral-P. periférica) Complejo de unión 18.6 y 7 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Plaqueta durante coagulación Agente coagulante Forma discoid al Retracción del coagulo 18.8 y 9 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. Microvellosidades de célula intestinal Uniones entre membrana y microfilamentos miosina I y calmodulina Filamentos de Actina centrales (con enlaces cruzados de fimbrina y villina) Filamentos de Actina (raicillas) Fibras conectoras De espectrina fimbrina y vilina ERM Miosina espectrina Filamentos intermedios de queratina Ezrina Radixina Moesina mutación citocinesis secreción formación de microvilli 18.10 Lodish, H. et al. 2002. Biología Celular y Molecular. Panamericana. España. 1084 pp. 22.19 Becker, W.M. et al. 2000.The world of the cell. 4a. ed. Addisson Wesley Longman. U.S.A. 878 pp.