Doble disco y Disco combinado: Cim (agar dilucion): 3

3-aminofenil
BORONICO
Sol madre (SM)
300 mg/ml
Solvente para la preparación de la SM según presentación
química del APB:
APB hemisulfato (Boron Molecular, catálogo BM563; Sigma Aldrich
catálogo A71751; Fluka catálogo 09198): agua
APB monohidrato (Boron Molecular, catálogo BM130; Sigma Aldrich
catálogo 287512): DMSO o N-N-dimetil-formamida
APB hidrocloridro (Sigma Aldrich catálogo 410705): agua
Conservar en freezer o refrigerado. Solución extemporánea. En todas las presentaciones descriptas, la
pureza de APB supera el 97% por lo que no es necesario efectuar correcciones
Doble disco y
Disco
combinado:
Diluir 1/10 SM en H2O
(cc. final 30 mg/ml = 30 µg/µl)
Agregar 10 µl por disco
(300 µg/disco)
Cim
(agar dilucion):
Diluir 1/50 SM en H2O (6 mg/ml)
Agregar 1 ml por placa, suplementar
con el ATB a ensayar y agregar
cantidad suficiente de Mueller Hinton
agar hasta volumen final de 20 ml.
(cc. final 0.3 mg/ml = 300 µg/ml).
PREPARACION DE DISCOS Y CIM CON ACIDO 3-AMINOFENIL-BORONICO
Servicio Antimicrobianos – INEI-ANLS “Dr. Carlos G. Malbran”
Buenos Aires, Argentina. © 2010
Pasteran y cols Journal Clinical Microbiology, 47:1631–1639, 2009
PREPARACION
DISCOS
EDTA/SMA
Preparar una solución acuosa de
EDTA (sal disódica dihidratada)
0,5 Molar pH 8.0*
(cualquier marca es compatible)
*Llevar hasta pH 8.0 con OHNa 0,1N o 1N,
Preparar una solución acuosa de
MERCAPTOACETICO DE SODIO o
TIOGLICOLATO DE SODIO 300 mg/ml
(Sigma catalogo T0632 )
de lo contrario el EDTA no se disolverá.
Almacenar a Temp. ambiente
Almacenar en heladera
MEZCLAR 2 VOLUMENES DE EDTA
COM 3 VOLUMENES DE SMA
Adicionar 10 μl por disco
CC. final 750 μg de EDTA + 1900 μg de SMA
PREPARACION DE DISCOS EDTA/SMA
Servicio Antimicrobianos – INEI-ANLS “Dr. Carlos G. Malbran”.
Buenos Aires, Argentina. © 2010
Lee K y cols Journal Clinical Microbiology, 41:4623-9; 2003