CLAVO DE OLOR, botón floral

Caryophylli flos
CLAVO DE OLOR, botón floral
La droga vegetal está constituida por los botones florales secos de Syzygium
aromaticum (L.) Merr. & L.M. Perry, conteniendo, como mínimo, 15% de aceite
volátil.
Los botones florales poseen olor fuerte y aromático característico; los botones exudan
aceite al ser presionados.
Ensayos de identificación
Descripción macroscópica. El botón floral tiene coloración castaño‐negruzca, con 1,0 a 2,1 cm de largo y 0,2 a 0,4 cm de diámetro en la porción del botón; presenta en su porción inferior un hipanto subcilíndrico, de cuatro lados algo achatados, el cual contiene en la porción interna y superior un ovario ínfero, con dos lóculos, mostrando varios rudimentos seminales adheridos a una placenta axilar. En la extremidad superior del hipanto existe un cáliz con cuatro sépalos divergentes, puntiagudos, espesos, con cerca de 0,3 cm de largo, los cuales circundan una región globosa formada por cuatro pétalos imbricados, membranosos, de coloración más clara, dispuestos en forma de cúpula, sobre la cual se encuentran numerosos estambres recurvados hacia adentro, insertos en un disco nectarífero cóncavo, circundando un único estilete erecto y subulado, de cerca de 0,3 cm de largo. Descripción microscópica. En vista frontal, la epidermis del hipanto muestra células
poligonales de paredes engrosadas y numerosos estomas anomocíticos, casi circulares,
de 30 a 35 m de diámetro. Por transparencia se observan glándulas esquizolisígenas y
agrupamientos de cristales de oxalato de calcio, de tipo drusas o cristales prismáticos.
En sección transversal, se observan cutícula espesa y lisa, células epidérmicas tubulosas,
estomas elevados y cámara subestomática bien definida, seguidos de un parénquima con
zonas distintas: zona externa, de coloración castaño-amarillenta, con glándulas
esquizolisígenas ovoides, de eje radial largo, midiendo hasta 200 m de largo,
distribuidas próximas unas de otras, en dos o tres hileras, acompañadas de
agrupamientos de células conteniendo drusas; zona media formada por células
parenquimáticas, de aspecto colenquimático, con un anillo de haces vasculares
bicolaterales, redondeados, envueltos por un anillo incompleto de fibras, más de allá de
las fibras ocasionales aisladas o en grupos de dos o tres células y lumen lleno de
contenido castaño; haces vasculares rodeados por células parenquimáticas conteniendo
cristales prismáticos; debajo de los haces presenta un tejido parenquimático flojo, de
tipo aerénquima, seguido de un anillo con aproximadamente 17 haces vasculares
bicolaterales menores, rodeados por algunas fibras; zona central ocupada por un
parénquima de relleno, con células conteniendo cristales de tipo drusa. Ocasionalmente
presenta esclereidas ovales a subretangulares, de paredes estriadas y fuertemente
engrosadas, presentando numerosas puntuaciones simples o ramificadas y con lumen frecuentemente relleno con contenido castaño. En el cáliz, corola, filamento de la antera
y estilo también presentan células con cristales semejantes a los ya descritos, y
glándulas esquizolisígenas. La antera, en sección transversal, presenta una capa fibrosa
de células epidérmicas alargadas tangencialmente, con engrosamiento lignificado en las
paredes anticlinales; en el ápice del conectivo presenta una glándula esquizolisígena.
Los granos de polen miden de 15 a 20 m de diámetro, son biconvexos, de contorno
redondeado a triangular, con exina lisa. Los granos de almidón están ausentes.
Descripción microscópica del polvo. El polvo cumple todas las exigencias establecidas
para la especie, menos los caracteres macroscópicos. Son característicos: coloración
castaño-negruzca a castaño-rojiza; fragmentos del parénquima del hipanto con
glándulas esquizolisígenas; fragmentos de la epidermis del hipanto en vista frontal, con
estomas anomocíticos grandes y glándulas subyacentes; fragmentos de parénquima del
hipanto con células conteniendo cristales de tipo drusa; fragmentos de aerénquima de
hipanto; porción del hipanto, en sección transversal, mostrando cutícula gruesa,
epidermis y parénquima subyacente con glándulas; esclereides del hipanto, aislados;
fragmentos de capa fibrosa de la antera en vista frontal; fragmentos de la epidermis del
filamento de la antera en vista frontal, mostrando cutícula estriada; filamento de la
antera con cordón vascular central y células parenquimáticas con drusas; granos de
polen; fibras puntiagudas con paredes gruesas, asociadas a células parenquimáticas.
Cromatografía. Proceder conforme lo descrito en Cromatografía en capa fina en
Métodos generales.
Fase estacionaria: sílica-gel GF 254.
Fase móvil: tolueno y acetato de etilo (93:7).
Solución muestra: diluir en 1 mL de tolueno, 10 µL de aceite volátil de clavo de olor
obtenido conforme a Determinación de aceites volátiles en drogas vegetales.
Solución de referencia: diluir en 1 mL de tolueno, 10 µL de eugenol.
Revelador: Mezclar, en el siguiente orden, 0,5 mL de anisaldehído, 10 mL de ácido
acético glacial, 85 mL de metanol y 5 mL de ácido sulfúrico.
Procedimiento: Aplicar en la cromatoplaca, separadamente, en forma de banda, 5 L de
la Solución muestra y 5 L de la Solución de referencia. Desarrollar un cromatograma.
Extraer la cromatoplaca y dejar secar al aire. Nebulizar la placa con Revelador, calentar
a 100 °C durante 3 minutos.
Resultados: El esquema de abajo presenta la secuencia de zonas obtenidas con la
Solución referencia y la Solución muestra. Otras zonas pueden ocasionalmente estar
presentes.
Parte superior de la placa
Zona de coloración rosa
Eugenol: zona de
coloración violácea
Solución referencia
Ensayos de pureza
Zona de coloración violácea
Solución muestra
Determinación de materia extraña: Máximo 4% de pedúnculos, pecíolos y frutos, 2%
de botones florales alterados y 0,5% de otros elementos extraños. Está permitida la
presencia de 1% de peso seco de pedicelos de la inflorescencia.
Determinación de pérdida por secado: método azeotrópico (Referir al Método
General). Máximo 10%.
Determinación de cenizas totales: máximo 7%.
Ensayos de contaminantes
A. Metales tóxicos y arsénico. Debe cumplir con los requisitos.
B. Residuo de pesticidas. Debe cumplir con los requisitos.
Ensayo microbiológico. Debe cumplir con los requisitos.
VALORACIÓN
Aceite volátil
Proceder conforme a lo descrito en Determinación de aceites volátiles en drogas
vegetales. Utilizar balón de 250 mL conteniendo 100 mL de agua como líquido de
destilación y 0,5 mL de xileno en el tubo graduado. Moler 5 g de botones florales
desecados a polvo junto con 5 g de tierra de diatomea. Del polvo obtenido, pesar 4 g y
proceder inmediatamente a la determinación del aceite volátil. Destilar por 2 horas.
Acondicionamiento y almacenamiento
En recipiente herméticamente cerrado, protegido de la luz y del calor.
Rotulado
De acuerdo a la legislación vigente.
Figura 1 - Aspectos macroscópicos, microscópicos y microscópicos del polvo en
Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M. Perry
Complemento de la leyenda de la Figura 1. Las escalas corresponden en A a 0,5 cm, en
B a 500 µm, en D-K, M-P a 100 µm y en L a 500 µm.
A - exomorfología del botón floral en vista lateral. B - botón floral en sección
longitudinal a lo largo de la porción media. C a O - sección transversal del botón
floral: C - hipanto, debajo de la región del ovario. D - porción de epidermis y
parénquima cortical. E - glándula esquizolisígena. F - parénquima con células
alargadas radialmente. G – colénquima. H - aerénquima. I - parénquima. J porción del sépalo mostrando la glándula esquizolisígena. K - porción del pétalo.
L - antera. M - detalle de la glándula esquizolisígena del conectivo de la antera.
N - detalle de la capa fibrosa de la antera. O - granos de polen. P - haz vascular en
sección longitudinal.
Figura 2 - Aspectos macroscópicos, microscópicos y microscópicos del polvo en
Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M. Perry
Complemento de la legenda de la Figura 2. Las escalas corresponden en A a 0,5 cm, en
B a J a 100 µm.
A - pedúnculo y pedicelos de la inflorescencia. B - sección transversal del pedúnculo
como lo señalado en A. C - fibras en sección longitudinal. D - fibras en sección
transversal. E - esclereidas. F - cristales aislados. G - parénquima conteniendo drusas.
H - epidermis del hipanto en vista frontal mostrando estoma. I - epidermis del pétalo en
vista frontal. J - estambre en sección longitudinal. L - vista frontal de la epidermis del
filamento de la antera mostrando cutícula estriada.