VITICULTURA El análisis de ADN muestra un papel relevante de la variedad ‘Cayetana Blanca’ en la red genética de variedades de vid de la Península Ibérica L. Hasna Zinelabidine1, 2, A. Haddioui2, V. Rodríguez3, F. Cabello4, J. E. Eiras-Dias5, J. M. Martínez Zapater1,3, J. Ibáñez1 1 Instituto de Ciencias de la Vid y del Vino (CSIC-Universidad de La Rioja-Gobierno de La Rioja). Complejo Científico Tecnológico. C/ Madre de Dios 51. 26006 Logroño. Spain. 2 Laboratoire de Gestion et Valorisation des Ressources Naturelles, Equipe de Génétique et Biotechnologie Végétale, Faculté des Sciences et Techniques, Université Sultan Moulay Slimane, Béni Mellal, Maroc. 3 Dpto. de Genética Molecular de Plantas, Centro Nacional de Biotecnología, CSIC. C/Darwin 3, 28049, Madrid. Spain. 4 Instituto Madrileño de Investigación y Desarrollo Rural, Agrario y Alimentario (IMIDRA). Finca "El Encín". Ctra A2, Km 38.200. 28800 Alcalá de Henares. Madrid. Spain. 5 Instituto Nacional de Recursos Biológicos (INRB), INIA-Dois Portos, Quinta d’Almoinha, 2565-191 Dois Portos, Portugal. Palabras Clave: marcadores moleculares, pedigríes, SNP, Vitis vinifera. Resumen ‘Cayetana Blanca’ es una variedad de vid (Vitis vinifera L.) ampliamente distribuida en la península Ibérica (España y Portugal). El alto número de sus sinonimias e incluso su presencia en el norte de África apuntan a una larga historia de cultivo en esta zona geográfica. El objetivo de este trabajo era identificar las relaciones genéticas existentes entre esta variedad y otras variedades ibéricas y mediterráneas, utilizando un panel de marcadores de ADN tipo SNP (Single Nucleotide Polymorphism). Para ello se empleó una base de datos con 427 genotipos no redundantes para una selección de 243 SNPs, que permitió detectar sinonimias, así como relaciones genéticas de primer grado. En este trabajo se presentan los resultados obtenidos en relación con la variedad ‘Cayetana Blanca’: 1) Se obtuvieron o confirmaron las siguientes sinonimias para la variedad Cayetana Blanca: ‘Jaen Blanco’, ‘Djinani’ (Marruecos), ‘Morisca’, ‘Sarigo’ (Portugal), y la variante somática para el color de la uva ‘Jaén Rosado’. 2) El análisis de SNPs permitió identificar un total de seis pedigríes que implicaban a ‘Cayetana blanca’ como progenitor, con valores de fiabilidad muy altos. En cinco de estos pedigríes aparecía la variedad portuguesa ‘Alfrocheiro Preto’ como el otro progenitor, dando lugar a cinco variedades hermanas cultivadas en Portugal, y en algún caso, también en España: ‘Cornifesto’, ‘Camarate’, ‘Mouratón’, ‘Malvasia Preta’ y ‘Periquita’. La variedad española ‘Jaén Tinto’ se confirmó como descendiente de un cruce entre ‘Cayetana blanca’ y ‘Listán Prieto’. 3) No se pudo encontrar el pedigrí de la variedad ‘Cayetana Blanca’. Sin embargo, el trabajo sí permitió descartar el origen genético publicado para esta variedad. El análisis de 243 SNPs y de 20 marcadores microsatélites adicionales, demostró que un cruce entre las variedades portuguesas ‘Antão Vaz’ y ‘Rabo de Ovelha’ no pudo originar la variedad ‘Cayetana Blanca’. INTRODUCCIÓN ‘Cayetana Blanca’ es una variedad de vid (Vitis vinifera L.) ampliamente distribuida en la península Ibérica (España y Portugal). El alto número de sus sinonimias 576 ACTAS DE HORTICULTURA Nº 60 (65 en el catálogo internacional de variedades de vid, VIVC, www.vivc.de) e incluso su presencia en el norte de África apuntan a una larga historia de cultivo en esta zona geográfica. El nombre más común en España para esta variedad es ‘Jaén Blanco’, y de la complejidad de este grupo varietal ya dio cuenta Rojas Clemente en 1807: “El primero que dé á conocer con exâctitud todos los vidueños que se llaman Jaenes en España hará á su patria un servicio real”. Entre las sinonimias de ‘Cayetana Blanca’ existentes en España están: ‘Baladí’, ‘Baladí Verdejo’ y ‘Balay (en Córdoba), ‘Blanca Cayetana’ y ‘Pardina’ (Badajoz), ‘Cagazal’, ‘Calagraño’ y ‘Jainas’ (La Rioja), ‘Cayetana’ (Cáceres), ‘Cirial’ (Jaén), ‘Maizancho’ (Ciudad Real) y ‘Robal’ (Zaragoza). La superficie cultivada de esta variedad ha disminuido en España desde 71.709 ha en 1990 hasta 45.580 ha en 2007 (Inventario del Potencial Vitícola Campaña 2008/2009. MARM); sin embargo, todavía está en la sexta posición entre las variedades más cultivadas en España. Actualmente se cultiva en la región centro y sur-suroeste de la península Ibérica (Extremadura, Andalucía, CastillaLa Mancha y Madrid). El objetivo de este trabajo era identificar las relaciones genéticas existentes entre la variedad ‘Cayetana Blanca’ y otras variedades ibéricas y mediterráneas, utilizando principalmente un panel de marcadores de ADN tipo SNP (Single Nucleotide Polymorphism). !"#$%&"'()(!*#+,+-( En este estudio se ha utilizado una base de datos con 427 genotipos no redundantes para una selección de 243 SNPs (Cabezas et al. 2011). Este conjunto de marcadores permitió detectar sinonimias, así como relaciones genéticas de primer grado. Adicionalmente, en algunas muestras se emplearon 20 marcadores de microsatélites nucleares para confirmar las conclusiones obtenidas, así como 4 marcadores de microsatélites cloroplásticos para determinar la dirección de los cruces identificados(Ibáñez et al. 2009). Las variedades analizadas se cultivan en España: ‘Castellana Blanca’ (Nº de variedad del VIVC: 40016), ‘Castillo de Arcos’ (2328), ‘Dona Blanca’ (15673), ‘Mission’ (7873), ‘Garrido Macho’ (4471), ‘Cayetana Blanca’ (5648), ‘Jaen Negro’ (5652), ‘Doradilla’ (3654), ‘Rocia’ (40057)’ y ‘Puerto Alto’ (9619); en Portugal: ‘Agua Santa’ (123), ‘Alfrocheiro Preto’ (277), ‘Antao Vaz’ (493), ‘Camarate Tinto’ (2018), ‘Cornifesto’ (2846), ‘Malvasia Preta’ (15647), ‘Periquita’ (9152), ‘Rabo de Ovelha’ (16956) y ‘Mouraton (8082); ésta última también se cultiva en España. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los resultados del análisis de marcadores SNP permitieron identificar o confirmaron las siguientes sinonimias para la variedad ‘Cayetana Blanca’: ‘Jaen Blanco’, ‘Djinani’ (Marruecos), ‘Morisca’, ‘Sarigo’ (Portugal), así como la variante somática para el color de la uva ‘Jaén Rosado’. Asimismo, el análisis de 243 SNPs permitió identificar un total de seis pedigríes que implicaban a ‘Cayetana Blanca’ como progenitor, con valores de fiabilidad muy altos (Tabla 1). En cinco de estos pedigríes aparecía la variedad portuguesa ‘Alfrocheiro Preto’ como el otro progenitor, dando lugar a cinco variedades hermanas cultivadas en Portugal, y en algún caso, también en España: ‘Cornifesto’, ‘Camarate’, ‘Mouratón’, ‘Malvasia 577 VITICULTURA Preta’ y ‘Periquita’. La variedad española ‘Jaén Tinto’ se confirmó como un híbrido derivado del cruzamiento entre ‘Cayetana Blanca’ y ‘Listán Prieto’. También se identificó un “doble” nieto de ‘Cayetana Blanca’ y ‘Alfrocheiro Preto’, la variedad ‘Agua Santa’, que es descendiente de dos variedades hermanas derivadas de hibridaciones espontáneas entre esas dos variedades (Tabla 1). El estudio de los haplotipos cloroplásticos no permitió determinar qué variedad actuó como progenitor femenino en ninguno de estos cruces, salvo el que originó ‘Jaén Tinto’, donde los haplotipos de ambos progenitores son distintos, y se pudo concluir que ‘Listán Prieto’ es la madre de esa variedad. Además, se observó que ‘Cayetana Blanca’ está relacionada directamente con otras variedades españolas: ‘Puerto Alto’, ‘Cigüente’, ‘Castellana Blanca’, ‘Plateado’, ‘Rocia’, ‘Castillo de Arcos’ y ‘Garrido Macho’, con las que comparte al menos un alelo por marcador, lo que indica una posible relación padre-hijo o madre-hijo entre ‘Cayetana Blanca’ y cada una de estas variedades. No se pudo identificar el pedigrí de la variedad ‘Cayetana Blanca’. Sin embargo, los resultados de este trabajo permitieron descartar el origen genético previamente sugerido para esta variedad (Lopes et al. 2006). Concretamente, el análisis de 243 SNPs y de 20 marcadores microsatélites adicionales, demostró que ‘Cayetana Blanca’ no desciende del cruzamiento entre las variedades portuguesas ‘Antão Vaz’ y ‘Rabo de Ovelha’. Los marcadores analizados en los tres genotipos detectaron incompatibilidades en 10 marcadores SNP y 3 microsatélites. Sin embargo, ambas variedades comparten un alelo por locus con ‘Cayetana Blanca’, por relaciones padre-hijo o madre-hijo como las comentadas en el párrafo anterior sí son posibles entre ‘Cayetana Blanca’ y estas dos variedades. La zona de Alentejo-Badajoz, en el sudoeste de la península Ibérica, se ha propuesto como la región en la que pudo haberse originado esta variedad (Lopes et al. 2006). Los resultados obtenidos en este trabajo son compatibles con esa propuesta. Estos resultados ponen de manifiesto también la existencia de un elevado intercambio genético entre España y Portugal en relación con ‘Cayetana Blanca’, que lógicamente es más probable que suceda en zonas limítrofes donde la interacción está facilitada por la cercanía geográfica. En conjunto los resultados demuestran la conexión histórica existente entre las viticulturas española y portuguesa, que hace más adecuado hablar de viticultura ibérica, así como que la variedad Cayetana blanca tuvo un impacto genético considerable en esta viticultura ibérica, de la misma manera como se ha visto en trabajos de otras zonas vitícolas europeas relevantes, donde ciertas variedades funcionaron como progenitores de manera predominante. Nuestro trabajo pone además de manifiesto la necesidad de utilizar un número suficiente de marcadores para la confirmación de pedigríes varietales descartando posibles falsos tríos entre genotipos varietales muy relacionados. Agradecimientos Lalla Hasna Zinelabidine disfrutó para este trabajo de una beca de la Agencia Española de Cooperación Internacional (AECI). Agradecemos a José A. Cabezas por la recolección de algunas muestras y a Gema Bravo por su asistencia técnica. Este trabajo fue en parte financiado por un acuerdo internacional entre Genoma España y Genome Canada y por el proyecto EUI2008-03752 del MICINN (España). 578 ACTAS DE HORTICULTURA Nº 60 Referencias Cabezas, J.A., J. Ibáñez, D. Lijavetzky, M.D. Vélez, G. Bravo, V. Rodríguez, I. Carreño, A.M. Jermakow, J. Carreño, L. Ruiz-García, M.R. Thomas, and J.M. Martínez-Zapater. 2011. A 48 SNP set for grapevine cultivar identification. BMC Plant Biol 11: 153. Ibáñez, J., A.M. Vargas, M. Palancar, J. Borrego, and M.T. de Andrés. 2009. Genetic relationships among table-grape varieties. Am. J. Enol. Vitic. 60: 35-42. Lopes, M.S., M.R. dos Santos, J.E.E. Dias, D. Mendonca, and A.D. Machado. 2006. Discrimination of Portuguese grapevines based on microsatellite markers. Journal of Biotechnology 127: 34-44. Rojas Clemente y Rubio, S. 1807. Ensayo sobre las variedades de la vid común que vegetan en Andalucía. Edición facsimil (2002). Junta de Andalucía. Consejería de Agricultura y Pesca, Sevilla. Tabla 1. Resumen de los cruces encontrados donde aparecía la variedad ‘Cayetana Blanca’ o sus descendientes. Ha Progenitor 2 Ha Nº SNP Descendiente Ha Progenitor 1 LO comparado Db s Jaén Tinto D Listán Prieto D Cayetana Blanca A 220 80 Malvasia Preta A Cayetana A Alfrocheiro A 235 78 Blanca Preto Mouraton A Cayetana A Alfrocheiro A 233 76.1 Blanca Preto Cornifesto A Cayetana A Alfrocheiro A 232 62.9 Blanca Preto Camarate A Cayetana A Alfrocheiro A 232 69.2 Blanca Preto Periquita A Cayetana A Alfrocheiro A 234 75.3 Blanca Preto Água Santa A Camarate A Periquita A 232 81.3 a H: Haplotipo cloroplástico b LOD: Valor LOD para el trío, donde el progenitor candidato más probable es el que tiene mayor valor LOD. 579