GLANDULAS SALIVALES BIOQUÍMICA DE LA SALIVA MAYORES Y MENORES SALIVA Flujo reposo: 0.02-0.05 a 1.8 ml/min Flujo estimulado: 2.5- 5ml/min Cavidad oral: 1 ml de saliva – Forma una película de 100 µm de espesor – Facilita el intercambio iónico entre saliva y esmalte – Recambio 700-800 veces/día, elimina exceso de bacterias y restos alimenticios Cátedra de Bioquímica General y Bucal- Facultad de Odontología- UBA FUNCIONES DE LA SALIVA Suma de secreciones de las GS mayores y menores + Líquido gingival (transudado seroso) Saliva total Líquido turbio, posee partículas en suspensión (bacterias, leucocitos, células descamadas del epitelio bucal, restos alimenticios) Saliva Parcial Saliva parotídea o mezcla de saliva submaxilar y sublingual sin contaminación con el medio bucal Líquido límpido y estéril ALIMENTACIÓN Y COMUNICACIÓN Humedecer Degustación – secreción parotídea Lubricar Bolo alimenticio, fonación, – mucinas submaxilares, sublinguales y gl. menores – glicoproteínas rica en prolina (parotídea) INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS Limpieza físico-mecánica: por dilución y/o barrido. Lubricar y mantener mucosa bucal mucinas – elásticas y adhesivas Digerir Amilasa salival – células serosas parotídeas y seromucosas submaxilares – rol secundario sobre restos alimentarios entre dientes – – glándulas linguales de Von Ebner – imp. en recién nacido Sobre mucosas proveen barrera contra desecación y agentes irritantes de alimentos o toxinas (limita Digerir Lipasa lingual Glucoproteínas muy hidratadas, poco solubles, viscosas, permeabilidad) – Atemperante de alimentos muy fríos o calientes – Aglutinación de bacterias evitando su adhesión INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS Reducir el tiempo de Hemorragia lisozima y Ca – REGULATORIAS –HOMEOSTASIS– – – Cicatrización de heridas bucales factores de crecimiento – Bicarbonato/ácido carbónico Péptidos ricos en histidina Fosfatos Nervioso (FCN) y epidérmico (FCE) Acción antimicrobiana Inmumoglobulinas, enzimas y péptidos. pH bucal 6,8 -7,2 mediante buffers Activadores de coagulación – IgAs, IgG, IgM: aglutinan, opsonizan, facilitan fagocitosis – Lisozima: hidroliza unión α 1-4 del ácido N-acetilmurámico y Integridad dentaria Ca2+, PO43-,F-, Mg2+ – – – – capacidad buffer maduración post-eruptiva del esmalte limpieza mecánica y aglutinación (mucinas de bajo PM) favorecer el ambiente iónico para una potencial remineralización sin precipitación espontánea Interviene en la formación de la película adquirida del esmalte N-acetilglucosamina en pared bacteriana – Peroxidasa: 2H2O2 – Lactoferrina: bacteriostático quela Fe – Histatinas: antifúngicos – 2H2O + O2 MODELO DE SECRECIÓN SALIVAL Equilibrio hídrico sensación de “boca seca” MOVIMIENTOS IONICOS ACTIVOS Y PASIVOS Activo SIALONA: unidad fisiológica mínima Acinos y Conductos Intercalares Secreción primaria: K, Na, Ca, HCO3 Cond. Estriados: Reabsorción: Na Liberación: K, HCO3 Saliva primaria: isotónica respecto al plasma Na+ Conductos estriados Pasivo K+ Ingreso a células acinares: Na, Ca, H2O, CO2 Cl - HCO HCO3 3- Conductos excretores Cond. Estriados: Cl, Na, K y excretores: Na, H2O, K, Cl, HCO3 Saliva final (secundaria): hipotónica. Se modifica su composición durante el pasaje por los conductos COMPOSICION QUÍIMICA Tomada de Fisiología oral, Jenkins GN, 4ta. Edición, 1978 COMPOSICIÓN SALIVA COMPLETA VERSUS SANGRE Componente saliva mixta humana Agua 99% puede llegar a 94-95 % Sólidos < 1% 0,5 % (estimulada) - 6,0 % (no estimulada) Peso específico 1,002 - 1,008 pH (rango) 6,8 – 7,2 Flujo (ml/min) pH Bicarbonato(mM) Sodio(mM) Potasio(mM) Calcio(mM) Magnesio (mM) Cloruro(mM) Fósforo inorg.(mM) Fluoruro(µg%) Glucosa(mg%) Amoníaco (mg%) Urea (mg%) Proteínas (mg%) Osmolaridad (mOsm/kg) Saliva completa No estimulada Estimulada 0.011 1.0 6.7 6.8-7.5 5 15-50 4-6 26 22 20 1.5-4 1.5-3 0.2 0.15-0.2 15 30-100 6 4 8-25 2-20 0.5-1.0 1.0 12 4-8 20 13-22 225-350 280-300 87.7 132.0 Suero, plasma o sangre -7.35-7.45 23-32 135-145 3.5-5.5 2-2.5 1-1.5 95-105 1-1.5 10-20 70-100 0.08-0.11 14-40 6.5-8.2 g% 296.0 COMPOSICIÓN DE LA SALIVA EN FUNCIÓN DE LA VELOCIDAD DE FLUJO SALIVAL VERSUS PLASMA CALCIO Y FOSFATOS SALIVALES CALCIO 50% IÓNICO 50% unido a proteínas. FOSFATOS w 80 % IÓNICO w PO43-, PO4H2-, PO4H- (pH salival) ÉSTERES ORGÁNICOS Saliva parotídea calcio iónico y fosfatos: "no estimulada", superan el producto de solubilidad de la hidroxiapatita. “ estimulada” superan también la del fosfato octacálcico y la del fosfato dicálcico (brucita). El calcio y el fosfato CALCIFICAR PLACA BACTERIANA sarro, tártaro o cálculos dentales. Saliva Submaxilar→ + [calcio ] pH - COMPONENTES PROTEICOS DE LA SALIVA COMPONENTES ORGÁNICOS SALIVA VERSUS PLASMA PAROTIDA SUBMAXILAR fuerza iónica → sarro cara lingual de incisivos inferiores ORIGEN = LUGAR DE SÍNTESIS PLASMA Amilasa, lipasa, mucinas, GP ricas en UREA 15 mg% 7 mg % 25 mg% AMONIACO 0.3 mg% 0.2mg % PROTEINAS 250 mg % 150 mg% 6000mg % 6.8-7.2 7.35 acinares prolina, GP básicas, P acídicas, P ricas en tirosina (estaterina), P ricas en histidina, peroxidasa, lactoferrina no acinares pH 6.8-7.2 Lisozima, IgAs, factores de crecimiento, péptidos regulatorios GP = GLICOPROTEÍNAS P = PROTEÍNAS Tomado de Ellison S.A.,1979 PROTEÍNAS ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DEL FLUJO SALIVAL PROTEÍNAS NO ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DE FLUJO SALIVAL VARÍAN EN FORMA DIRECTAMENTE PROPORCIONAL VARÍAN EN FORMA INVERSAMENTE PROPORCIONAL Glicoproteínas: IgAs: • Proteínas más abundantes • • Confieren propiedades de viscosidad y lubricación Sintetizada por células plasmáticas como dímeros con cadena proteica J • Cadenas laterales de heterosacáridos unidos covalentemente a la proteína y ramificados • Componente secretor aportado por células acinares es parte de una proteína trans-membrana receptora de IgA • Grupo carboxilo de ác. siálico (pK 2,6) ionizado a valores fisiológicos de pH , gran carga negativa Estaterina: fosfopéptido de 47 aa. Junto con trazas de PPi evita la formación de cristales fosfocálcicos en glándulas y conductos salivales. ELECTROFORESIS IONIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS DEPENDIENTE DEL PH SALIVA PAROTÍDEA ESTIMULADA CÁTODO Glucoproteína parotídea Peroxidasa COOH NH3+ COOH NH3+ COO – H OH NH3+ COO - + NH3 COO - + – OH NH2 NH2 COO - Ig As H+ Carga neta + polo negativo (cátodo) – Glucoproteína responsable del grupo sanguíneo (A;B;O y de Lewis). – Mucinas (alto PM) Carga neta – polo positivo (ánodo) SALIVA SUBLINGUAL Secreción a predominio mucoso Mayor cantidad de aporte mucoso: – GP grupo sanguíneo – Mucinas Pieza sec libre Seroalbúmina Carga neta 0 SALIVA SUBMANDIBULAR Secreción a predominio seroso Concentración 5 veces menor que el de saliva parotídea. Composición más compleja aportada por células mucosas: VISCOELASTICIDAD medio básico pI Lisozima (pI alto) 3 Histonas Protamina 2 prot. Básicas (bajo PM) ven.serpiente AMILASA 2 polipéptidos Ricos en His medio ácido Proteínas catiónicas Glucoproteína (alto PM): – pI < 3 – Glúcidos 50% de su peso – Composición azúcares: neutros fucosa glucosamina ác. siálico PRP Proteínas aniónicas (pI bajo) película adquirida + ÁNODO Gel de poliacrilamida en columna BUFFER SALIVALES Aquellas soluci que resist en cambios ones bruscos de -agregar pH un ácido o una base- pH= -log (H+) SISTEMAS AMORTIGUADORES EN SALIVA = log 1/(H+) [CO3H-] [H+] Kd = [CO3H2 ] CO3H2 / CO3H- Ka= (sal) . [H+] (ácido) HPO42- / H2PO4- [H+] = (ácido). Ka (sal) pKa pH= log 1/(H+) = log ( sal) + log 1 (ácido) Ka pH = pKa + log (sal) (ácido) Ka= (CO3H- ) (H+) / (CO3H2) BUFFER SALIVAL pKa es el log negativo de la cte de disociación del ácido con el signo cambiado (es el pH en el cual el 50% está disociado) pH = pKa + log [SAL] [ACIDO] CO3H2 / CO3HNO ESTIMULADA ácido carbónico y bicarbonato (> reabsorción de bicarbonato) pH = pKa + log [CO3H- ] [CO3H2 ] 2-3 mM ESTIMULADA pH (pK de 6,1 ) 1ml/min o más (+bicarbonato) 30 - 60 mM. Ecuación de Henderson-Hasselbach pH de 7,5 - 7,8 EFECTO DEL FLUJO SALIVAL SOBRE EL PH PRODUCCIÓN DE BICARBONATO POR LA GLÁNDULA SALIVAL AC pK 6,1 AC Luego de la recolección, en la saliva en contacto con el aire el pH puede aumentar hasta 8,5-9,0 por la acción de la anhidrasa carbónica (AC). HPO42- / H2PO4 H2PO4- pH Crítico H+ + HPO42pK 6,8 NO ESTIMULADA pH 6,1 ( 5mM) ESTIMULADA 2 mM y el pH H2PO4- / HPO42- (cte) ( Henderson-Hasselbach), Este HPO42- es ahora el predominante, aunque su concentración es semejante en la saliva no estimulada. Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico TITULACIÓN DE SALIVA MIXTA CON ÁCIDO pH por debajo del cual el fluído en la superficie de los dientes se hace NO SATURADO respecto a la HA y permite la remoción de calcio y fosfato del esmalte. Si pH < pH crítico: disolución Si pH > pH crítico: precipitación Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico Por lo cual el producto iónico debe estar por encima del producto de solubilidad de la sal para proteger el esmalte Producción de amoníaco en saliva Regiones “buffers” : A, principalmente bicarbonato y fosfato; B, debido a proteínas salivales FACTORES QUE AFECTAN LA COMPOSICIÓN SALIVAL Contribución relativa de varias glándulas: Según la glándula que secrete varía la proporción de sus componentes Velocidad de flujo : Regulado fisiológicamente (ritmo circadiano) Nausea: incrementa salivación Miedo y anestesia: disminuye boca seca La naturaleza del estímulo: Comida seca y arena: salivación profusa y acuosa Carne: secreción espesa y mucosa Dietas ricas en hidratos de carbono: aumenta amilasa Gracias!