PROCESAMIENTO DE ARN EN EUCARIOTAS Todo ARN se procesa. • Los ARNr se transcriben juntos y por corte se generan fragmentos menores. • Los ARNt se procesan y sufren modificaciones de bases. • Los ARNm sufren 4 tipos de modificaciones: - Capping. - Cola poli A. - Corte y empalme de intrones (Splicing) - Editing. 1 Transcripción Y Procesamiento de ARNr • Genes dispuestos en tándem: aproximadamente 200 copias de genes de ARNr en Genoma Humano. •En interfase se ven como Nucleolos: zonas de transcripción y unión a proteínas ribosómicas. 2 Unidad Transcripcional Ribosomal • Transcriptos como un gran precursor policistrónico de 13000 nt (ARNr 45S). •Los transcriptos son metilados. •Procesados secuencialmente (degradación de las secuencias intermedias). 3 Transcripción y Procesamiento del ARNt • Transcriptos como mono o policistrónicos. •Los transcriptos son procesados secuencialmente. •Formación del trébol •Degradación de extremos y adición de brazo aceptor CCA •Eliminación de intrones •Modificación de bases 4 Modificaciones de bases en el ARNt 5 Procesamiento de los ARN mensajeros 6 Capping • Estructura de la Caperuza 5´ 7 Poliadenilación en extremo 3´ 8 El mecanismo de la Poliadenilación Proceso secuencial dependiente de : •Reconocimiento de secuencias en el transcripto •Interacción ARN-proteinas específicas •Interacción proteína-proteína 9 Corte y empalme (splicing) de intrones y exones 10 Tipos de intrones 11 El proceso de corte y empalme •Ensamblado secuencial de partículas riboproteicas (SNURPs). •Apareamiento de bases con el mRNA. •Corte y empalme. •Liberación del intrón. U1 snRNP U2 snRNP Pre mRNA intron GU A AG Salida del U4, U6, U5 snRNP intron Ligacion de los exones 12 Reconocimiento de señales de procesamiento •Apareamiento de bases del ARN precursor con el ARN del SNURP •Ensamblado secuencial de partículas riboproteicas (SNURPs) 13 El spliceosoma •Estructura riboproteica encargada del procesamiento de los intrones. 14 El splicing consiste en dos transesterificaciones sucesivas 15 Ribozimas TIPO I Algunos genes de ARNr • ARN que elimina sus propios intrones. • ARN que elimina intrones de otros ARN. • ARN que cataliza su propia replicación. Estructura terciaria de un intrón tipo I de un ARN de Tetrahymena que se autoelimina del resto del ARN. TIPO II Mitocondria y cloroplastos 16 Una visión moderna de la expresión génica 17