Microbiología general

GUIA DE MICROBIOLOGIA GENERAL
BIOTECNOLOGIA
BIOSEGURIDAD Y CONCEPTOS DE ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCION
La bioseguridad en el laboratorio se refiere al conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la
salud de las personas que allí trabajan. El propósito básico es obtener un ambiente de trabajo seguro y
ordenado.
En el año 1987 el Centro para el Control de enfermedades Infecciosas (CDC) en Estados Unidos publicó las
Recomendaciones para la prevención de la transmisión del VIH en el personal de la salud, Posteriormente, en
1996 el mismo CDC publicó las Precauciones Estándar que enfatizan que la sangre, todos los fluidos
corporales, secreciones, excreciones, piel no intacta y membranas de todos los pacientes deben ser
consideradas potencialmente infecciosas, independientemente del contenido visible de sangre.
ELEMENTO DE CONTENCIÓN EQUIPOS DE SEGURIDAD
DISEÑO DEL LABORATORIO
PRACTICAS DE TRABAJO
− EQUIPOS DE SEGURIDAD (Contención primaria). Los elementos de contención primaria deben permitir
al operador la preparación y transferencia del material potencialmente infeccioso sin romper la barrera. Estos,
incluyen elementos simples como guantes, delantal, mascarilla, tubos de centrífuga con tapón,
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homogenizadores de tejido con sistemas cerrados, propipetas, etc, y otros elementos de mayor tecnología y de
mayor importancia como las cámaras de bioseguridad.
− DISEÑO DEL LABORATORIO (contención secundaria). El diseño debe estar pensado para proteger al
personal de laboratorio, como también a las personas que trabajan en otras áreas de la institución y a la
comunidad.
Debe estar localizado fuera del área de atención de los pacientes, visitas, y con acceso limitado. El diseño y
los materiales de laboratorio deben permitir una fácil limpieza. Cada sección requiere además un lavamanos.
Según el nivel de bioseguridad que el laboratorio requiera deben cumplirse otras especificaciones resumidas
en la Tabla 1−1.
− PRACTICAS DE TRABAJO. Corresponde a la utilización estricta de los procedimientos y técnicas
especialmente diseñadas para disminuir el riesgo. Para ello el personal debe estar consciente de los riesgos de
la manipulación de agentes infecciosos. Su importancia relativa es mayor al 95% en cuanto a la prevención de
infección en el laboratorio. Es importante la aceptación y compromiso de cada uno de los miembros del
laboratorio acerca de las medidas de seguridad que sean implementadas.
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA
PRACTICO N°1
MATERIAL DE USO HABITUAL EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Y CONCEPTOS DE
ESTERILIZACIÓN, DESINFECCION Y ANTISEPSIA
Material de vidrio
Material
Tubos de ensayo
Tubos de hemólisis
Placas de Petri
Pipetas graduadas
Pipetas Pasteur
Asa de Drigalsky
Matraces Erlenmeyer
Matraces Monod
Matraces Kitasato
Probetas
Portaobjetos
Cubreobjetos
Portaobjeto excavado
Campana Durham
Vasos de precipitado
Utilización
Contener medios de cultivo
Contener medios de cultivo
Siembra en medio sólido en superficie
Traspaso de líquidos en volúmenes exactos
Traspaso de líquidos en volúmenes pequeños
Extensión de siembra en placa
Contener medios de cultivo
Determina turbidimétricamente del crecimiento
bacteriano
Filtración al vacío de medios de cultivo y otros
líquidos
Medición de volúmenes exactos
Observaciones microscópicas
Observaciones microscópicas
Observaciones microscópicas
Detección de gases
Contener y preparar soluciones
Material diverso
Asa en loop
Siembra de microorganismos en superficie
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Asa recta
Filtros millipore
Discos de antibióticos
Mechero Bunsen
Porta pipetas
Papel pH
Cestillo metálico
Siembra de microorganismos en picadura
Esterilización de medios líquidos termolábiles por
filtración
Valoración de antibióticos
Esterilización al rojo y flameado
Contener pipetas estériles
Determinación del pH de medios de cultivo y
soluciones
Contener material a esterilizar en autoclave
Aparatos
Microscopio óptico
Autoclave
Horno Pasteur
Refrigerador
Incubadora o Estufa
Cámara de siembra
Cámara de anaerobiosis
Cuenta colonias
Ph metro
Destilador
Shaker
Freeser
Observación de preparaciones
Esterilización por calor húmedo
Esterilización por calor seco
Mantención de cultivos
Crecimiento de cultivos en condiciones controladas de
temperatura
Siembra en condiciones asépticas
Contener cultivos anaerobios
Recuento de colonias de microorganismos
Ajustar el pH de medios de cultivo o soluciones
Obtención de agua destilada para preparación de
medios de cultivo
Cultivo aireado de microorganismos
Almacenamiento prolongado de medios de cultivo
En los prácticos de microbiología es necesario tener todo el material a usar libres de microorganismos viables
y limpio. De esta manera se impide el crecimiento de múltiples contaminantes que pueden interferir con un
microorganismo inoculado asépticamente que constituye el objeto de estudio.
ESTERILIZACION, DESINFECCION Y ANTISEPSIA
El control de la transmisión de las enfermedades infecciosas es una medida esencial para evitar el desarrollo
de epidemias. Para el control de la transmisión se utilizan técnicas de esterilización, desinfección, antisepsia,
o simplemente de higiene (higienización), dependiendo del riesgo de contagio y de sí deben aplicarse a
materiales sensibles o resistentes, o al cuerpo humano.
El laboratorio de microbiología, como lugar en el que se cultivan y manipulan microorganismos patógenos,
requiere medidas especiales de seguridad y control, para proteger del contagio al personal que trabaja en él y
evitar el paso de microorganismos al medio externo.
ESTERILIZACION.
La esterilización es la completa eliminación de microorganismos y sus formas de resistencia (esporas).En el
laboratorio de microbiología se esteriliza todo el material y los medios empleados para el cultivo de
microorganismos. Asimismo deben esterilizarse los desechos, procedentes del laboratorio o de los pacientes,
que puedan contener microorganismos patógenos, antes de ser vertidos de pasar al servicio de recogida de
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basuras.
La esterilización puede realizarse mediante agentes físicos (calor, filtración o radiaciones) o químicos.
CUADRO 1
ESTERILIZACION CON CALOR Y AGENTES QUÍMICOS
Agente Esterilizante
Calor húmedo (vapor de
agua a sobrepresión)
Temperatura
121°C
Tiempo
15 a 30 minutos
132°C
160°C
10−15 minutos
120 minutos
Aplicaciones
Líquidos, tejidos, vidrio,
goma, acero inoxidable
Vidrio, metal
Calor seco (horno pasteur) 170°C
60 minutos
Sustancias oleaginosas
180°C
27−37°C
30 minutos
5−5 ½ horas
55−60°C
2−3 horas
Oxido de etileno
Plástico, goma,
instrumental médico
Esterilización por calor
El calor húmedo (vapor de agua sobrecalentado) producido en autoclave es el agente esterilizante más
utilizado. Posee una buena capacidad de penetración, provocando la coagulación de las proteínas y
consiguiéndose una esterilización rápida.
Para medios de cultivo se emplea el vapor a 121°C (1 atmósfera sobrepresión) durante 15−30 minutos. El
tiempo depende del volumen de medio a esterilizar, ya que el calor debe alcanzar toda la masa
uniformemente. Al disponer los recipientes debe evitarse que puedan quedar bolsas de aire que no sean
desplazadas por el vapor, ya que no se alcanzaría la temperatura correcta.
El calor seco se emplea para estandarizar materiales en los que el vapor no puede penetrar (sustancias oleosas,
como la vaselina), o en los que no conviene que se deposite humedad (instrumental metálico o material de
vidrio). Actúa fundamentalmente por oxidación, y es menos eficaz que el calor húmedo, por lo que deben
emplearse temperaturas o tiempos de esterilización mayores. Se utilizan hornos de aire caliente (horno
Pasteur).
Esterilización por filtración.
Los filtros de alta eficiencia (filtros HEPA), capaces de retener todo tipo de partículas en suspensión, se
emplean para esterilizar el aire de las campanas de flujo laminar y de algunas habitaciones.
En el laboratorio se emplean membranas de filtros para esterilizar soluciones sensibles al calor. Pueden
emplearse tamaños de poro de 0.45 micras, que retienen la mayor parte de las bacterias y hongos, o de 0.22
micras que eliminan hasta las bacterias mas pequeñas, pero no los virus (lo que no tiene importancia para el
cultivo de bacterias).
DESINFECCIÓN Y ANTISEPSIA
La desinfección es la destrucción de microorganismos patógenos presentes en la superficie de objetos,
utilizando sustancias químicas (desinfectantes). No implica esterilización; es decir, no siempre se eliminan
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todos los microorganismos. Puede distinguirse de desinfección de alto nivel, que supone la destrucción de
todas las formas vegetativas (pero no necesariamente las esporas) y la de nivel medio, que alcanza a
Mycobacterium tuberculosis, pero no a algunos virus y hongos, ni tampoco a las esporas. Por debajo de este
criterio se habla de desinfección de bajo nivel.
La antisepsia es la desinfección aplicada a las superficies del cuerpo humano. Las sustancias empleadas
(antisépticos) deben ser bien toleradas por los tejidos, por lo que son menos enérgicas que los desinfectantes
y, en consecuencia, menos eficaces. A veces se usan soluciones más diluidas de los mismos desinfectantes.
Las principales aplicaciones de los antisépticos son el lavado quirúrgico de manos, la desinfección de la piel
del paciente antes de una intervención quirúrgica y la desinfección de heridas.
La actividad de los desinfectantes y antisépticos se reduce por la suciedad (especialmente si contiene materia
orgánica) por la presencia de un gran número de microorganismos y por interferencias con algunas otras
sustancias y por un pH inadecuado.
CARACTERÍSTICAS Y APLICACIONES DE LOS PRINCIPALES DESINFECTANTES Y
ANTISÉPTICOS.
La acción antimicrobiana de muchos agentes desinfectantes es poco específica, actuando sobre distintos
componentes o funciones del microorganismo, a menudo en función de la concentración empleada, y en otros
casos se ignoran los detalles.
TABLA 1. Terminología relacionada con el control del crecimiento microbiano
Termino
Términos referidos a la
destrucción de los
microorganismos
Esterilización
Desinfección
Antisepsia
Germicida (cida, que mata)
Definición
Comentarios
El proceso de destrucción de todas
las formas de vida en un objeto o
material, incluidas las endosporas,
las formas más resistentes de vida
microbiana. La esterilización es
absoluta; no hay grados de
esterilidad.
El proceso de destrucción de las
formas vegetativas de los
patógenos, pero no necesariamente
endosporas o virus. Normalmente
un desinfectante es un compuesto
químico que se aplica sobre un
objeto o material. Los
desinfectantes tienden a reducir o
inhibir el crecimiento; no suelen
esterilizar.
Las temperaturas requeridas
normalmente son: calor húmedo,
121°C durante 15 minutos; calor
seco, 170°C durante dos horas.
Otros métodos son radiaciones
ionizantes y gases, como el óxido de
etileno.
Desinfección química de la piel,
mucosas u otros tejidos, en vivo.
Un agente químico que mata
rápidamente a los microbios, pero
no necesariamente a sus esporas.
Este término se suele aplicar al uso
de soluciones químicas sobre
superficies o a la eliminación de
patógenos del agua, como en la
cloración de aguas.
Término aplicado específicamente
al tratamiento de heridas. Antisepsia
es un tipo concreto de desinfección.
Un bactericida mata bacterias, un
esporicida destruye esporas, un
fungicida hongos, un viricida virus
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y un amebicida matan amebas.
Términos referidos a la
supresión de los
microorganismos.
Situación que inhibe el crecimiento
y multiplicación bacterianos pero
sin matar a las bacterias. Si se
Bacteriostasis (estasis,
elimina el agente bacteriostático
detención)
puede reanudarse el crecimiento. La
fungistasia se refiere a la inhibición
del crecimiento fúngico.
La ausencia de patógenos en un
objeto o zona. Las técnicas de
asepsia están diseñadas para
prevenir la entrada de patógenos en
el organismo. La asepsia quirúrgica
Asepsia (asepsia, sin infección)
pretende evitar todos los
microorganismos, mientras que la
asepsia médica sólo los
responsables de enfermedades
transmisibles.
La refrigeración es bacteriostática;
muchos compuestos químicos,
como los colorantes, son
bacteriostáticos más que
bactericidas.
La filtración del aire, la luz
ultravioleta, las mascarillas, guantes
y batas y la esterilización de
instrumentos son medidas para
conseguir la asepsia.
Desgerminación
Eliminación pasajera de microbios
de la piel mediante limpieza
mecánica o el empleo de un
antiséptico.
En el caso de las inyecciones se
utiliza con frecuencia un algodón
empapado en alcohol; antes de la
cirugía con frecuencia se utilizan
productos que contienen fósforo.
Higienización
La reducción del número de
patógenos que hay en un objeto
hasta niveles aceptables para la
salud pública mediante lavado
mecánico o con agentes químicos.
Cualquier compuesto empleado
debe ser compatible con la
seguridad y con los caracteres
organolépticos de los alimentos.
Temperatura.
Todo mundo está familiarizado con el uso del hielo o de la refrigeración mecánica para controlar el
crecimiento microbiano. Como todas las reacciones químicas las reacciones bioquímicas necesarias para el
crecimiento disminuyen considerablemente a bajas temperaturas. Frecuentemente los desinfectantes químicos
son también inhibidos por las bajas temperaturas. Ya que su actividad está en función de reacciones químicas
dependientes de la temperatura, los desinfectantes trabajan mejor en soluciones templadas. Es normal que las
instrucciones de los envases desinfectantes especifiquen que se utilice a una temperatura media.
Clase de microorganismos.
Muchos desinfectantes y antisépticos tienden a tener mayor efecto sobre las bacterias gram−positivas como
grupo que sobre las gram−negativas, aunque esta diferencia no es tan significativa como ocurre con la
actividad antibiótica. Por ejemplo, un cierto grupo de bacterias gram−negativa, pertenecientes al género
Pseudomonas, presentan una resistencia poco común a los agentes químicos e incluso crecen activamente en
algunos desinfectantes y antisépticos. Estas bacterias son capaces de mantenerse en substratos en
inverosímiles como una solución salina simple y son también resistentes a muchos antibióticos. Esta
resistencia a agentes antimicrobianos está relacionada probablemente con el tamaño de las porinas (estructuras
en forma de poro que hay en la membrana externa LPS) de Pseudomonas.
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MECANISMOS DE ACCION DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS.
Alteración de la permeabilidad de membrana.
La membrana citoplasmática, localizada bajo la pared celular, es el objetivo de muchos agentes
antimicrobianos. Esta membrana controla activamente el paso de los nutrientes a la célula y la eliminación de
los deshechos. La alteración de los lípidos o proteínas de la membrana citoplasmática por agentes
antimicrobianos, como los compuestos de amonio cuaternario, provoca la salida del contenido celular al
medio circundante e interfiere en el crecimiento de la célula. Varias clases de agentes químicos, así como de
antibióticos, actúan de forma más o menos similar.
Métodos físicos para el control microbiano.
Calor.
Probablemente es método más comúnmente empleado para destruir los microorganismos es el calor. Los
medios de cultivo, material de vidrio e instrumentos médicos son esterilizados normalmente por calor.
El calor no sólo es el agente de esterilización más ampliamente utilizado y el más eficaz sino también el más
económico y el más fácil de controlar. Aparentemente el calor mata a los microorganismos al desnaturalizar
sus enzimas. En la esterilización por calor cabe tenerse en cuenta el grado de resistencia de las bacterias a la
temperatura. La resistencia al calor varía entre los diferentes microorganismos; estas diferencias pueden
expresarse a través del concepto de punto térmico de muerte. El punto térmico de muerte (PTM) es la
temperatura más baja requerida para matar a todos los microorganismos de una suspensión líquida en 10
minutos.
Otro factor a considerar en la esterilización es el tiempo requerido para que el material quede estéril. Este se
expresa como tiempo de muerte térmica (TMT), el menor tiempo necesario para que todas las bacterias de
un cultivo líquido mueran a una temperatura determinada. Tanto el PMT como el TMT son guías útiles que
indican la severidad del tratamiento requerido para matar a una población dad de bacterias.
El tiempo de reducción decimal (TRD o valor D) es un tercer concepto relacionado con el grado de
resistencia al calor de las bacterias. Es el tiempo, en minutos, en que se destruye el 90% de la población de
bacterias a una temperatura determinada. El valor D es especialmente útil en la industria de conservas
enlatadas.
El calor utilizado en esterilización se puede aplicar en forma de calor húmedo o seco. El calor seco mata por
efectos de oxidación. Una analogía sencilla es la lenta carbonización del papel en un horno cuando la
temperatura está por debajo del punto de ignición del papel. El calor húmedo mata a los microorganismos más
rápidamente porque el agua acelera la rotura de los puentes de hidrógeno que mantienen la estructura
tridimensional de las proteínas.
CALOR HÚMEDO
Un tipo de esterilización por calor húmedo es la ebullición (100ºC al nivel del mar), que mata a las formas
vegetativas de las bacterias patógenas, muchos virus y hongos y sus esporas en unos 10 minutos. El vapor
fluente (sin presión) es el equivalente en temperatura al agua hirviendo. Las endosporas y algunos virus, sin
embargo, no se destruyen tan fácilmente. El virus de la hepatitis, por ejemplo, puede sobrevivir alrededor de
30 minutos de ebullición y algunas endosporas bacterianas han resistido a las temperaturas de ebullición
durante más de 20 horas. Por tanto la ebullición no es siempre un método de esterilización eficaz. Sin
embargo, unos pocos minutos de ebullición matan a la mayoría de los patógenos y suelen dejar los alimentos
y el agua en condiciones de seguridad para el consumo.
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Para esterilizar en forma eficaz mediante calor húmedo se necesitan temperaturas superiores a la ebullición
del agua. Estas altas temperaturas se consiguen normalmente mediante vapor a presión en un autoclave. Este
es el método preferido de esterilización y se utiliza a menos que el material a esterilizar pueda resultar dañado
por el calor o la humedad. En un autoclave el vapor a una atmósfera de sobre presión (121ºC) matará a todos
los microorganismos y a sus endosporas en unos 15 minutos o un poco más, dependiendo del tipo y volumen
del material que está siendo esterilizado.
El autoclave se utiliza para esterilizar medios de cultivo, instrumentos, ropas, instrumental de uso endovenoso
y externo, soluciones, jeringas, equipos de transfusión y muchos otros artículos que pueden soportar alta
temperatura y presión. Los autoclaves industriales pueden ser de gran tamaño, pero se utiliza el mismo
principio para la olla a presión para la olla a presión en la elaboración de conservas caseras.
PASTEURIZACION
En los primeros tiempos de la microbiología, se encontró un método práctico de prevenir el deterioro de la
cerveza y del vino. Pasteur utilizó un calentamiento moderado que resultaba suficiente para matar los
organismos que causaban el deterioro sin alterar notoriamente el sabor del producto. Más tarde se aplicó el
mismo principio a la leche para producir lo que llamamos leche pasteurizada. La leche se pasteurizaba en un
principio para eliminar el bacilo de la tuberculosis. Muchos microorganismos relativamente resistentes al
calor (termodúricos) sobreviven a la pasteurización, pero no son origen probable de enfermedades ni del
deterioro de la leche refrigerada en un tiempo razonable.
La mayoría de los procesos de pasteurización utilizados hoy en día emplean temperaturas mayores, al menos
de 72ºC, pero sólo durante unos 15 segundos. Este tratamiento, es conocido como pasteurización rápida a
alta temperatura.
ESTERILIZACION POR CALOR SECO
Uno de los métodos más sencillos de la esterilización con calor seco es el flameado.
Este método se utiliza muchas veces en el laboratorio de microbiología para esterilizar asas de siembra; todo
lo que hay que hacer es calentar el alambre al rojo y la eficacia es de 100%. Un principio similar se utiliza en
la incineración, una forma eficaz de esterilizar y eliminar recipientes de cartón, bolsas y ropa.
Otra forma de esterilización con calor seco es la esterilización por aire caliente. Los objetos a esterilizar por
este método se colocan en un horno, donde una temperatura, generalmente de unos 170ºC, mantenida durante
cerca de dos horas asegura la esterilización. Se requiere un período de tiempo mayor y una temperatura más
alta en comparación con el calor húmedo, ya que el calor del agua se transfiere más rápidamente a un cuerpo
frío que el calor del aire. Imagine, por ejemplo, los efectos de meter brevemente la mano en un baño de agua
hirviendo y de mantenerla en un horno a la misma temperatura (100ºC) y durante el mismo tiempo.
FILTRACION
La filtración es el paso de un líquido o gas a través de un material filtrante con poros lo suficientemente
pequeños para retener microorganismos (se usa a menudo el mismo aparato que para contar
microorganismos). Se crea un vacío en el frasco receptor que ayuda a la gravedad aspirando el líquido a través
del filtro. La filtración se utiliza para esterilizar materiales sensibles al calor, como algunos medios de cultivo,
enzimas, vacunas y soluciones de antibióticos.
En los comienzos de la Microbiología se utilizaban filtros cilíndricos en forma de vela, de porcelana no
vitrificada. Los largos e indirectos caminos a través de las paredes del filtro absorbían las bacterias. Los
patógenos desconocidos que pasaban a través de tales filtros (y que causaban enfermedades como la rabia) se
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denominaron virus filtrables.
En los últimos años los filtros de membrana, compuestos por sustancias como ésteres de celulosa o
polímeros plásticos, se han hecho de uso frecuente en la industria y en el laboratorio. Estos filtros tienen tan
sólo 0,1 mm de espesor y sus poros están muy igualados en tamaño. Algunos fabricantes irradian una película
de plástico de modo que se graban orificios muy uniformes, por donde han pasado las partículas de la
radiación. Los poros de los filtros de membrana incluyen tamaños de 0,22 y 0,45 um, diseñados para retener
bacterias y llegan hasta tan sólo 0,01 um, tamaño que retiene virus, e incluso a algunas moléculas grandes de
proteínas.
RADIACIONES
Dependiendo de su longitud de onda, intensidad y duración, las radiaciones tienen distintos efectos sobre las
células. Hay dos tipos de radiaciones esterilizantes: las ionizantes y las no ionizantes.
Las radiaciones ionizantes, como los rayos gamma o los haces de electrones de alta energía, tienen una
longitud de onda más corta que las de las radiaciones no ionizantes, menor de 1nm y transportan por ello
mucha más energía. Los rayos gamma son emitidos por cobalto radiactivo y los haces de electrones
acelerados hasta altas energías en máquinas especiales. Los rayos gamma penetran profundamente pero
pueden ser necesarias horas para esterilizar masas grandes; los electrones de alta energía tienen un poder de
penetración mucho menor pero bastan unos segundos de exposición. El principal efecto de la radiación
ionizante es la ionización del agua, que forma radicales hidrolizo altamente reactivos.
Las radiaciones no ionizantes tienen la longitud de onda mayor que las ionizantes, normalmente superior a 1
nm. Un buen ejemplo de radiación no ionizante es la luz ultravioleta (UV). La luz UV lesiona el DNA de las
células, formando enlaces entre timidinas adyacentes en las cadenas de DNA. Estos dímeros de timidina
inhiben la replicación correcta del DNA durante la reproducción celular. La longitud de onda UV más eficaz
para matar a los microorganismos está alrededor de 260 nm; estas longitudes de onda son absorbidas de forma
específica por el DNA de la célula. La radiación UV se utiliza para controlar los microorganismos del aire. En
las habitaciones de hospitales, guarderías, quirófanos y cafeterías se encuentran normalmente lámparas UV o
germicidas. La luz UV se utiliza también para esterilizar vacunas, sueros y toxinas y ocasionalmente para las
aguas residuales y de bebida.
TECNICAS DE DESCONTAMINACIÓN QUÍMICA
Hay que distinguir entre los métodos químicos de desinfección y los métodos químicos de esterilización.
METODOS QUIMICOS DE DESINFECCION
Van a producir la destrucción de todos los microorganismos patógenos. Son los desinfectantes y los
antisépticos. Los desinfectantes son sustancias químicas aplicadas sobre objetos y superficies. Los antisépticos
son sustancias químicas aplicadas sobre la piel y mucosas.
Todo buen método de desinfección deberá cumplir las siguientes condiciones:
− Matar el mayor número de gérmenes o, al menos, todos los patógenos
− Ser económico.
− No ser corrosivo, tóxico ni irritante para los tejidos.
− Se deberá diluir al menos en agua
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− Tener un olor agradable.
Los desinfectantes mas utilizados son:
• Detergentes catiónicos: Se pueden utilizar diluidos al 1% para la desinfección de manos. Su uso más
corriente es para la limpieza y desinfección de paredes, suelos, ropa y objetos en general.
• Clorofenoles: Son muy eficaces y se suelen asociar con los detergentes catiónicos para mejorar el
grado de desinfección.
• Compuestos clorados: Son utilizados para desinfección de superficies, ropas, urinarios, etc. Se
suelen usar diluidos en agua y un ejemplo típico lo constituyen las lejías (hipocloritos).
• Acido fénico: Se utiliza diluido al 5% para la limpieza de objetos y superficies.
Los antisépticos más utilizados son los siguientes:
• Alcoholes: Se utilizan para limpiar y desinfectar la piel, las manos, el filo del instrumental y algunas
superficies pequeñas. Se utiliza el etanol para tejidos y el metanol para superficies que no vayan a
estar en contacto con la piel.
• Mercuriocromo: En su composición aparece el mercurio, que tiene un efecto desinfectante muy
bueno. Es especialmente utilizado en heridas superficiales debido a que las desinfecta y las mantiene
secas y protegidas.
• Derivados yodados: Son utilizados para preparar la piel antes de una intervención quirúrgica, en la
punción lumbar, antes de punción para hemocultivo, etc. Son extraordinariamente efectivos y ejercen
su acción por oxidación.
METODOS QUIMICOS DE ESTERILIZACION
Los más empleados son:
• Oxido de etileno: Se emplea en forma de gas, mezclado con dióxido de carbono, ya que el óxido de
etileno puro es muy oxidante y al mezclarse con el óxido del aire podría explotar. Presenta un gran
poder de penetración y como método de esterilización es muy efectivo y duradero. La esterilización se
va a producir a temperaturas bajas (de menos de 40 grados) con una humedad relativa alta (40−60%)
durante un tiempo de 3 a 8 horas (media de 5). Para que todo esto suceda se requiere de cámaras o
instalaciones especificas para ello, que son muy caras. El óxido de etileno se puede aplicar a cualquier
material sensible al calor y que no pueda esterilizarse por otros métodos, por ejemplo instrumentos de
endoscopia, plásticos termolábiles, cauchos, material eléctrico.
• Glutaraldehído activado: Es un producto líquido que se utiliza diluido y a pH alcalino. En esta
solución se introduce el material limpio y se deja actuar unas 3 horas. No es un método muy usado.
• Vapores de formol: Es utilizado en aparatos de anestesia, respiradores, incubadoras, etc., a
temperaturas de esterilización que oscilan entre 17°C (durante 48 horas) y 50°C (en torno a las dos
horas). Antes de su utilización es necesario eliminar el olor residual de formol.
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