SUPLEMENTO E INHIBIDORES Bacteriología General Catálogo 1603 ___________________________________________________ POLIENRIQUECIMIENTO GC USO Suplemento nutritivo enriquecido, complemento de medios de cultivo para el aislamiento de microorganismos con grandes requerimientos nutricionales y fastidiosos como Haemophilus y Neisserias. PRINCIPIO Nicotin Adenin Dinucleótido es una coenzima necesaria para la fermentación alcohólica de glucosa. La cocarboxilasa es el grupo prostético de la coenzima de levaduras, la cual está compuesta de una proteína apocarboxilasa y cocarboxilasa. Es la sustancia clave en la descarboxilación bioquímica de varios alfa-oxiácidos. La glucosa es la principal fuente de energía para los microorganismos. La adenina, cisteína, cictina, guanina, glutamina, nitrato férrico, PABA, tiamina y vitamina B12 actúan como factores de crecimiento. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA 1.0 Glutamina Adenina Cisteina 25.9 Glucosa Cistina 1.1 Nitrato férrico Cocarboxilasa 0.1 PABA NAD (nicotinamida adenin 0.25 Tiamina dinucleótido) Guanina 0.03 Vitamina B12 10.0 100.0 0.02 0.013 0.003 0.1 PREPARACION GELOSA CHOCOLATE CON POLIENRIQUECIMIENTO (Cat. 1214-P) : Rehidratar 36 g de la Base de Agar GC en 500 ml de agua destilada para obtener una base de concentración doble. Mezclar para homogeneizar. Reposar 10 A 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto. Simultáneamente preparar una suspensión al 2% de hemoglobina en 500 ml de agua destilada. Agregar gradualmente y en pequeños volúmenes el agua destilada. Mezclar con ayuda de perlas de vidrio, barra magnética o en licuadora. Sobre una probeta graduada filtrar la suspensión de hemoglobina a través de cuatro capas de gasa (de preferencia de malla apretada) y aforar el filtrado a 500 ml. Pasar a un matraz Erlenmeyer. Esterilizar ambas soluciones en autoclave a 121°C (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Reconstituir en condiciones de esterilidad con una jeringa estéril un vial de polienriquecimiento con su diluyente. Enfriar las soluciones aproximadamente a 45°C. Mezclar en condiciones de esterilidad la base y la hemoglobina. Agregar el vial reconstituido de polienriquecimiento. Mezclar suavemente para no formar burbujas. Vaciar en cajas de Petri estériles. Conservar en refrigeración de 2° a 8°C. Este mismo método puede usarse guardando la misma relación de los ingredientes para preparar mayores volúmenes del medio. MEDIO SELECTIVO DE THAYER MARTÍN (Cat. 1211-P) Este medio se prepara de igual forma que el medio de Gelosa Chocolate con Polienriquecimiento, reconstituir simultáneamente al vial de polienriquecimiento, un vial de la mezcla inhibidora VCN (Cat. 1604) o VCNT (Cat. 1605) y agregarlos a la base. DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3 SUPLEMENTO E INHIBIDORES Bacteriología General Catálogo 1603 ___________________________________________________ CONTROL DE ACTIVIDAD EN EL MEDIO AGAR THAYER MARTIN MICROORGANISMO Neisseria gonorrhoeae Haemophilus influenzae Staphylococcus aureus Candida albicans CEPA ATCC 49226 ATCC 49247 ATCC 23923 ATCC 10231 CRECIMIENTO Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio BIBLIOGRAFIA Thayer and Martin.. Informes de Salubridad 79:49, 1964 Piccolomini R., Di Bonaventura G., Festi D. Et Al J. Microbiol. 35, 1541 – 1544, 1997 Martin gs, Hackney and Thayer. Public Health Reportes, 82:361, 1967 PRESENTACION No. Catálogo 1603 Caja con 5 viales de suplemento Caja con 5 viales de diluyente con 10 ml - DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3