Transcripción

Víctor Hugo Casco
Principales tipos de ARN
producidos en las Células
Tipo de ARN
Función
ARN mensajero
Código para la síntesis de proteínas
ARN ribosomal
Forma la estructura básica de los ribosomas y cataliza la
síntesis de proteínas
ARN de
transferencia
Centrales para la síntesis de proteínas como adaptadores
entre el ARNm y los aminoácidos
ARNs pequeños
nucleares
Funcionan en una variedad de procesos nucleares,
incluyendo el splicing de pre-ARNm
ARNs pequeños
nucleolares
Usados para procesar y modificar químicamente ARNrs
Otros ARNs no
codificantes
Actúan en diversos procesos celulares, incluyendo la síntesis
de los ARNs de la síntesis de telómeros, inactivación del
cromosoma-X, transporte de proteínas hacia el RER.
ARN polimerasa de E. coli
ω
ARN polimerasa de E. coli
β

β´

ω
Transcripción por la ARN polimerasa de E. coli
Terminación de la Transcripción
ADN
Formación del stem loop
ARN
Disociación del ARN a partir de
molde de ADN
Repetición rica
en GC - invertida
ADN
Control negativo del operón lac
Control positivo del operón lac por glucosa
Proteína activadora
de genes catabólicos
Separación e identificación de las tres ARN
polimerasas eucariontes
Experimento usando - amanitina
(octapéptido de acción
diferencial)
 Polimerasa I: nucleolar
(pre-ARNrs)
 Polimerasa II: ARNm y
cuatro ARNnps
 Polimerasa III: ARNts,
ARNr 5,S y ARNp
estables (U6, S7)
En eucariotas ARN que transcribe cada
ARN Polimerasa también es diferente
 ARN polimerasa I produce pre-ARN ribosómico (pre-ARNr)
18S, 5.8S y 28S
 ARN polimerasa II produce pre-ARN mensajero (pre-
ARNm) y ARN pequeño nuclear (ARNsn)
 ARN polimerasa III produce el pre-ARN de transferencia
(pre-ARNt), ARNr 5S y otros ARNsn
 ARN
polimerasa
mitocondrial
mitocondrial
produce
el
ARN
Comparación de las
subunidades de las
ARN polimerasas
de las Levaduras
con las de E. coli
ARN polimerasa II holoenzima
 La holoenzima consiste de un
complejo preformado
de
ARN Polimerasa II, los
factores de transcripción
generales:
TFIIB,
TFIIE,
TFIIF, and TFIIH, y otras
proteínas que activan la
transcripción
 Este
complejo puede ser
reclutado directamente a un
promotor vía la interacción
con TFIID (TBP + TAFs).
Complejo de
Iniciación de la
Polimerasa II y
factores de
transcripción
generales aislados
Complejos ARN polimerasa - mediador
Iniciación de la transcripción del ADNr
Transcripción de los genes de la polimerasa III
Un promotor eucariótico típico
Ejemplo del promotor del gen de timidina-quinasa del gen de
virus herpes simple contiene tres elementos de secuencias
corriente arriba de la caja TATA que son requeridos para una
transcripción eficiente: una caja CCAAT y dos cajas GC
(secuencias consensa GGGCGG).
El amplificador SV40
El promotor de SV40 para la expresión de genes de expresión temprana contiene
una caja TATA y seis cajas GC agrupadas en tres conjuntos de secuencias
repetidas. Adicionalmente, la transcripción eficiente requiere de un amplificador
corriente arriba consistente de dos repeticiones de 72 pares de bases
Acción de los amplificadores
 Sin un amplificador, el gen es
transcripto a un bajo nivel basal (A).
 La adición de un amplificador
E
para el ejemplo del SV40 las
repeticiones de 72-pares de bases
estimula la transcripción.
 El amplificador es activo no sólo
cuando se lo coloca muy próximo
corriente arriba sino (B), sino que
también lo hace cuando se lo ubica
varias kilobases corriente arriba o
abajo (C y D).
 Adicionalmente los amplificadores
son activos tanto en orientación
forward o backward (E).
Torsión del ADN
Secuencias reguladoras de genes
ADN espaciador
Factores generales
de transcripción
Proteínas
reguladoras
de genes
ARN polimerasa
Caja TATA
Corriente abajo
Promotor
Comienzo de la
transcripción
Las distintas etapas en el metabolismo del ARNm
pueden ser reguladas
Núcleo
ADN
ARN
Transcripto
primario
Control
transcripcional
ARNm inactivo
Citosol
Control de la
Degradación del
ARNm
ARNm
Control del
procesamiento
del ARNm
ARNm
Control del
transporte
del ARNm
Control de la
traducción
Control de la
actividad
proteica
Proteína
Proteína
Inactiva
Splicing
El proceso consiste en el corte de los intrones y empalme de los
exones
Splicing
Formación del extremo 3´ de ARNms
eucariotas