UNIVERSIDAD INTERAMERICANA Recinto de Bayamón

UNIVERSIDAD INTERAMERICANA
Recinto de Bayamón
Laboratorio Bioquímica CHEM 4220
Lab #1: PREPARACIÓN DE SOLUCIONES
Introducción
En el laboratorio de Bioquímica, la preparación de soluciones de concentración
específica es un procedimiento importante. La molaridad (M, moles/Litro) y
miliMolaridad (mM, milimoles/Litro) son las medida de concentración más comunes. En
este experimento se prepararán soluciones de diferentes concentraciones de un
compuesto cristalizado y se les determinará su densidad. A pesar de que usaremos
cloruro de sodio, las soluciones de biomoléculas se trabajan de igual manera. Para
preparar una serie de soluciones interrelacionadas hay que realizar los siguientes
pasos generales:
1. Preparar la solución estándar basada en peso y volumen. De acuerdo al peso y
volumen se calcula la molaridad de la solución.
2. Utilizando la solución estándar, y en base a diluciones apropiadas, se
prepararán las soluciones adicionales. Deberá considerar que cristalería será la
más apropiada incluyendo el matraz a utilizar y la pipeta. Debe tomar en cuenta
utilizar el equipo que mejor minimice errores en la preparación de soluciones.
Objetivos
En este experimento se relacionará la densidad de una solución con su concentración.
Esto se hará usando dos instrumentos por separados: un pipeta graduada (o
serológica) de 1.00 mL y una micro-pipeta. En esta práctica se espera que el estudiante
se familiarice con cálculos y manejo de cantidades en escala micro y que analice la
precisión y exactitud de los instrumentos en base a sus resultados.
Procedimiento
1. Calcule la masa de NaCl que necesita para preparar 100 mL de 0.5 M NaCl y
prepare la solución. Esta será su solución estándar.
Nota: En caso que la masa que pesó no sea exactamente la que calculó, use la
que pesó para los próximos cálculos.
2. Determine los volúmenes de la solución estándar que necesita para preparar 2.0
mL de 500, 250 150 y 50 mM.
3. Enjuague, seque y pese el matraz de 2.0 mL vacío. Para secar el matraz,
agregue unas gotas de acetona y luego riéguelo con aire en el extractor. Esté
debe estar completamente seco antes de pesarlo.
4. Agregue, con una pipeta graduada o serológica, el volumen de la solución
estándar para una de las concentraciones del paso # 2, enrace con agua a 2.0
mL con un gotero y pese el matraz.
Nota: Sea totalmente preciso llenando el matraz. Cuando se trabaja con
cantidades pequeñas, una gota puede significar un error grande. En caso que
agregue más solución de la necesaria, descarte e inténtelo de nuevo.
5. Descarte la solución y enjuague y seque el matraz como hizo en el paso # 3.
6. Repita los pasos # 4 y 5 dos veces descartando la solución cada vez.
7. Repita los dos pasos anteriores con las otras tres concentraciones.
8. Repita los pasos anteriores usando una micro-pipeta. El instructor le indicará
como usarla.
Informe de laboratorio
1. Introducción: a) Explique qué parámetros buscaba relacionar en este
experimento. b) Explique de qué forma experimento buscaba relacionar esos
parámetros. c) Cuál era la relación que usted esperaba entre esos parámetros.
d) Explique si sus resultados estuvieron de acuerdo con lo que usted esperaba o
no.
2. Procedimiento: Resuma brevemente en sus propias palabras el procedimiento
que realizó en el laboratorio.
3. Datos: Presente una tabla con los datos que usó en el experimento; ej. masa,
volumen de solución estándar, concentraciones etc.
4. Cálculos: Para los datos con la pipeta graduada o serológica, calcule la densidad
de las tres medidas que hizo para cada concentración y el promedio de esas tres
densidades. Muestre un ejemplo de cada uno de los cálculos que hizo en el
experimento; ej. concentración, volumen de solución estándar, densidad etc.
Haga lo mismo para los datos con la micro-pipeta.
5. Resultados: En Excel, haga una gráfica de densidad versus concentración con
los datos usando la pipeta graduada o serológica y obtenga el cuadrado del
coeficiente de correlación, R2. Haga lo mismo con los datos de la micro-pipeta.
6. Discusión: a) Analice las gráficas de acuerdo a la relación que esperaba obtener.
b) Diga si esperaba mejores resultados con la pipeta graduada (o serológica) o
con la micro-pipeta y explique porqué. c) Explique si obtuvo los resultados que
esperaba o no haciendo referencia a los valores obtenidos. d) Si no obtuvo los
valores esperados, sugiera alguna explicación. e) Explique cuáles fueron las
posibles fuentes de errores.
J. R. Ramirez Vivoni, Ph.D. y A. Vivoni Alonso, enero 2014