Guía: Observación Celular ESCUELA SALUD GUÍA OBSERVACIÓN CELULAR DIRIGIDO A: Alumnos de la Escuela de Salud PRE-REQUISITO: No tiene Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular INTRODUCCIÓN Los seres humanos iniciamos la vida como un solo óvulo recién fecundado que contiene, como toda célula con núcleo, todas las instrucciones necesarias para su futuro crecimiento y desarrollo. El término <<célula>> fue aplicado por primera vez por Robert Hooke, un científico inglés del siglo XVII, que comparó la estructura interna de un trozo de corcho con las celdas de los monjes de un monasterio (del latín cella, celda). La célula es la unidad fundamental de la vida. Es la estructura más pequeña del cuerpo, capaz de realizar todos los procesos que definen la vida: respiración, movimiento, digestión y reproducción, aunque no todas las células pueden realizar todas estas funciones. La mayoría de las células son invisibles para el ojo humano. Hasta el óvulo femenino, la célula más grande del cuerpo, no es más grande que el punto situado al final de esta frase. El tamaño y la forma varían con las funciones celulares. Y éste, precisamente es el tema que desea tratar este taller además los tipos de células que existen, procariontes y eucariontes; las diferencias y semejanzas que entre ellos existen. Así también los dos tipos de células eucariontes animal y vegetal. OBJETIVO. Al finalizar el taller el alumno será capaz de: Iniciarse en las técnicas de preparación y observación microscópicas. Identificar mediante la observación, células animales y vegetales. Observar células de la mucosa bucal del ser humano que le permitirán ir comprendiendo e integrando conceptos nuevos. Dibujar e interpretar lo observado en el microscopio Trabajar en orden y limpieza REALIZADO POR: Tecnólogo Médico, Bioquímico de laboratorio clínico, Medico laboratorista. DURACIÓN: 90 minutos NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE Máximo 20 alumnos Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular MARCO TEÓRICO Las estructuras celulares comunes para las células animal y vegetal son: Membrana Plasmática: Características: La membrana consta de una bicapa de lípidos en la cual las proteínas se hallan "sumergidas", asomando hacia uno, otro o ambos lados. Funciones: La membrana plasmática efectúa el control cualitativo y cuantitativo de la entrada y salida de sustancias. Como consecuencia de la captación selectiva de nutrientes, y de la excreción de desechos que lleva a cabo, la membrana plasmática contribuye a determinar la composición del citoplasma. Es una membrana semipermeable o de permeabilidad selectiva. Esto significa que permite el paso de solventes y de solutos de tamaño pequeño, pero no es atravesada por solutos de tamaños mayores. Aparato de Golgi o Dictiosoma: Características: Se presenta como un apilamiento de sacos aplanados, con bordes dilatados, y vesículas y vacuolas ubicadas cerca de esos bordes. Todas estas estructuras están compuestas por membranas En células vegetales, hay numerosas estructuras separadas y dispersas en el citoplasma, que equivalen al aparato de Golgi, y que reciben el nombre de dictiosomas. El tamaño, la distribución dentro de la célula y otras características, como el número de sacos apilados de este sistema, varían de acuerdo al estado metabólico de la célula. Funciones: El aparato de Golgi se encarga de: Circulación intracelular de sustancias; Síntesis de algunos hidratos de carbono de alto peso molecular: celulosa, polisacáridos complejos; Conjugación entre proteínas e hidratos de carbono para formar glucoproteínas de secreción; Vacuola: Características: Son vesículas de diámetros diversos, limitadas por una unidad de membranas. En general, su función es la de almacenamiento. En las células vegetales, por lo común, hay una única vacuola que ocupa el 8090% del volumen celular. La membrana que la limita se denomina tonoplasto y es semipermeable. El contenido de la vacuola está integrado por agua y altas concentraciones de sales inorgánicas, azúcares y otras sustancias. El citoplasma y el núcleo quedan comprimidos por esta vacuola contra la membrana plasmática y la pared celular. En esa fina capa periférica se observan los movimientos citoplasmáticos, como la ciclosis. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Funciones: La vacuola contribuye a controlar la turgencia de la célula vegetal, ya que la presión que ejerce sobre el tonoplasto se transmite al citoplasma y mantiene a la membrana plasmática adherida contra la pared celular. Mitocondria: Características: Las mitocondrias presentan diversas morfología, pero por lo general son aproximadamente cilíndricas u ovoides; hay también esféricas y en forma de Y. Su tamaño también es variable, pero habitualmente presentan un solo tamaño. La mitocondria es un organelo limitado por dos membranas: una externa, lisa, separada por un espacio o cámara externa de la membrana interna, plagada hacia adentro formando proyecciones llamadas crestas. La membrana interna con sus crestas delimita una cámara interna ocupada por la matriz mitocondrial. Las crestas presentan, a su vez, proyecciones en forma de hongo, que se denominan partículas elementales o conjuntos respiratorios. Las mitocondrias son organelos semi-autónomos y autoduplicables. En la matriz se encuentra ADN de tipo procarionte el cual codifica la estructura de algunas proteínas mitocondriales. En la misma mitocondria se realiza la síntesis de esas proteínas, sobre ribosomas de tipo procarionte, si bien la mayoría de las proteínas mitocondriales es de síntesis citoplasmática. Funciones: En la mitocondria se realizan oxidaciones de moléculas orgánicas, utilizando O2 como último concepto de electrones, con el objeto de obtener energía química para otros procesos celulares. En la matriz mitocondrial son oxidados el ácido pirúvico, los ácidos grasos y algunos aminoácidos. Retículo Endoplasmático Liso o Agranular (REL): Características: Se presenta como una serie de casos o bolsas aplanadas y túbulos membranosos, cuya localización y extensión es variable, y depende de la actividad metabólica particular de la célula. Funciones: Circulación intracelular de sustancias. Síntesis de lípidos: esteroides, fosfolípidos, triglicérido; Detoxificación de ciertas drogas, es decir, anulación de sus efectos farmacológicos por modificaciones en su estructura química. Por ejemplo, la administración de barbitúricos hace que se desarrolle considerablemente el REL. de los hepatocitos, encargados de desdoblar esos fármacos. En células musculares estriadas recibe el nombre de retículo sarcoplásmico y presenta una disposición muy particular, ligada con la coordinación de la contracción de la fibra muscular. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Retículo Endoplasmático Rugoso o Granular (RER.): Características: Presenta una imagen semejante a la del REL., es decir bolsas aplanadas y túbulos membranosos interconectados, pero se diferencia del anterior en que sus membranas están cubiertas en su superficie externa por ribosomas y polisomas. Los ribosomas y polisomas están adheridos a la membrana por su subunidad mayor. La extensión y distribución mayor del RER. es variables y depende de la actividad metabólica particular de la célula. El RER. también es llamado ergastoplasma o sustancia basófila; en las células nerviosas se lo denomina sustancias tigroide o corpúsculos de Nissl. Funciones: Circulación intracelular de sustancias que no se liberan al citoplasma; Síntesis de proteínas: esta función es llevada a cabo en los ribosomas adosados a sus membranas. Las proteínas formadas entran a los sacos membranosos, y siguen circulando por el sistema vacuolar citoplasmático. Las proteínas que se producen en el REG. son de dos tipos: Enzimas hidrolíticas que van a formar parte de los lisosomas. Proteínas de secreción, a las que también el aparato de Golgi proveerá de una membrana para su salida de la célula. El RER. está muy desarrollado en aquellas células con gran actividad secretora de proteínas, como los plasmocitos que fabrican anticuerpos, las células pancreáticas que fabrican enzimas digestivas, plasmáticas, etc. Lisosoma: Características: Se presentan como vesículas esféricas u ovales, limitadas por una unidad de membrana. Sus tamaños son muy variables, y pueden tener diámetros muy grandes. En el interior de estos organelos se encuentran enzimas hidrolíticas o hidrolasas, es decir, con capacidad para catalizar la degradación o digestión de diversas sustancias. Entre otras enzimas lisosomales se pueden citar: Fosfatasas: interviene en la hidrólisis de fosfatos de moléculas orgánicas; Lipasas y fosfolipasas: intervienen en la hidrólisis de lípidos y fosfolípidos; Glucosidasas: intervienen en la hidrólisis de polisacáridos simples y complejos; Catepsinas y otras proteasas; intervienen en la hidrólisis de proteínas; Nucleasas: intervienen en la hidrólisis de ácidos nucleicos. Las hidrolasas lisosomales sólo actúan en presencia de las sustancias a digerir. La membrana del lisosoma es normalmente estable pero, si es dañada, las enzimas que se liberan pueden degradar a todos los componentes celulares. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Funciones: Los lisosomas intervienen en la digestión intercelular. Las sustancias a digerir pueden provenir de la misma célula o pueden ser incorporadas desde el exterior por fago o pinocitosis. En el primer caso, el proceso se denomina autofagia, y por él una célula puede desdoblar organelos de su propio citoplasma, encerrados en vacuolas. Ribosoma: Características: Los ribosomas se presentan como cuerpos esféricos o elípticos, sin membrana limitante. Son gránulos compuestos por ARN ribosomal y proteínas. Funciones: La función de los ribosomas es la síntesis de proteínas. Este es el proceso mediante el cual el mensaje contenido en el ADN nuclear, que ha sido previamente trascrito en un ARN mensajero, es traducido en el citoplasma, juntamente con los ribosomas y los ARN de transferencia que transportan a los aminoácidos, para formar las proteínas celulares y de secreción . Citoplasma (Hialioplasma): Característica: Es un gel casi líquido, que durante mucho tiempo fue considerado como una matriz sin estructura; sin embrago, estudios más recientes han revelado que posee un sistema de fibras que constituyen un cito esqueleto, en el cual están suspendidos los organelos y las formaciones intracelulares identificables microscópicamente. La matriz citoplasmática está compuesta por agua, iones inorgánicos y moléculas orgánicas pequeñas, macromoléculas y enzimas solubles, y las proteínas que constituyen el cito esqueleto. Funciones: En el hialoplasma se realizan, entre otras, las reacciones bioquímicas de la glucólisis y las fermentaciones, y la activación de los aminoácidos para la síntesis de proteínas. Núcleo: Características: El núcleo es el organelo más sobresaliente de la célula eucarionte animal y vegetal. Puede presentar formas regulares o irregulares. Su tamaño es variable, pero en general está relacionado con el tamaño de la célula. El número de núcleos por célula también es variable: es uno en la mayoría de las células; pueden ser dos, como en algunos hepatocitos, o muchos, como en los osteoblastos y las fibras musculares estriadas. El núcleo puede presentar en la célula diferentes localizaciones, pero en general su posición es fija y característica para una célula dada. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular El núcleo presenta una organización típica durante la interfase del ciclo vital de la célula. En esta etapa está constituido por: Una envoltura nuclear, que lo limita y separa del citoplasma; Jugo nuclear, carioplasma o nucleoplasma, un coloide en el cual se hallan suspendidos: La cromatina, donde se halla el material genético o hereditario; Y el o los nucleolos, lugar de armado de los ribosomas citoplasmáticos. Cuando la célula entra en división, el núcleo pierde esta organización; la envoltura nuclear se fragmenta, con lo cual no hay barrera que impida el contacto entre el hialoplasma y el nucleoplasma; el nucleolo desaparece, y la cromatina se condensa y forma los cuerpos compactos denominados cromosomas. Funciones: Debido al hecho de que contienen la cromatina, el núcleo resulta el depósito de prácticamente toda la información genética de la célula, y por los tanto es el centro de control de la actividad celular. Importancia de la teoría celular Todos los animales y vegetales están constituidos por células. La célula es la unidad básica de estructura y función en un organismo multicelular. La división celular da origen a la continuidad genética entre células progenitoras y sus descendientes. La vida del organismo depende del funcionamiento y control de todas sus células. Célula vegetal Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Célula animal INSUMOS Y EQUIPOS NECESARIOS PARA EL TALLER Sala de simulación con mecheros y lavamanos Microscopios (mínimo uno por 2 alumno) Aceite de inmersión Papel Tisue o suave Porta objetos (dos por alumno) Cubre objetos (dos por alumno) Azul de Metileno Pipetas Pasteur 1 cebolla TV. con coneccion a microscopio Frotis de Hemograma y secreciones Bronquiales. Jabón liquido. Clinic. Basurero Guantes (un par por alumno) bajalenguas Papel filtro Etanol Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Azul de Metileno KOH DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO Observación de células vegetales. 1.- Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue capa que esta pegada a la cara interna. 2.- Colocar un trocito de la membrana en un portaobjetos con unas gotas de azul de metileno, si es preciso se debe ayudar con unas pinzas metálicas para extender la membrana sobre el portaobjetos. 3.- Colocar sobre la preparación un cubreobjetos. 4.- Examinar al microscopio, pasando por los distintos aumentos y observar. CÉLULAS DE CEBOLLA CON AZUL DE METILENO Observación de células animales 1.- Se prepara un porta objetos con una gota de agua en el centro. 2.-Con un bajalengua tome una muestra del interior de boca frotando con suavidad la mucosa de la cara interna de la mejilla. 3.- Mezcle el material obtenido, con la gota de agua y extiéndalo. 4.-Fije la preparación con calor: pase el porta sobre la llama del mechero varias veces. Esto debe hacerse con cuidado, el porta se sujeta con los dedos y nunca debe quemar al tocar el dorso de la mano. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular 5.- Colocar el porta en el soporte de tinción y añada una gota de azul de metileno, déjelo actuar de 3 a 5 minutos. 6.- Lave con el frasco lavador, con cuidado pero con abundante agua hasta que no se destiña. 7.- Coloque el cubre y seque la preparación con papel filtro. Observe la preparación, empezando con el objetivo de menor aumento. Células de Mucosa bucal BIBLIOGRAFÍA La ciencia de la Biología, PaulB Weisz, Primera Edición, Guía de Laboratorio Clínico. Prof. Laura Otth. Universidad de La frontera. Enciclopedia Encarta METODOLOGÍA DE EVALUACIÓN: El taller será evaluado mediante la realización de dos dibujos de las células observadas y de la aplicación de una pauta referente a lo observado Actividad 1 Hacer dos dibujos de las células observadas indicando los aumentos con los que ha trabajado. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Actividad 2 Compare y dibuje las diferencias entre las células animales y células vegetales observadas en este taller. Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 Guía: Observación Celular Nombre del alumno: Fecha: Puntaje: Observación celular 1.Cumple con una correcta presentación personal: -delantal -pelo tomado -uñas cortas y limpias 2. Evaluación actividad 1 3. Evaluación actividad 2 4 Ordena y limpia su unidad al finalizar el taller Nota: C C: Competente MC: Medianamente Competente NC: No Competente Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110002 MC NC