Kit DxSelect para virus dengue IgG Características de rendimiento

El centro de investigación 4 evaluó la sensibilidad de infecciones previas
con sueros de pacientes que no mostraron signos ni síntomas de la
enfermedad pero dieron positivo con IH.
Sensibilidad del ELISA IgG Focus con suero de infecciones previas
(centro 4)
Afección
Positivo con IH
endémico*
Kit DxSelect para virus dengue IgG
Código del producto: EL1500G
Rev. F
Características de rendimiento
Sensibilidad
39%* (13/33)
IC 95%
22,9-57,9%
* Se esperan resultados positivos con una población asintomática desde que
la IgG se ha detectado en pacientes hasta sesenta años después de la infección.
Las personas asintomáticas se incluyen en la sección sobre la sensibilidad en
vez de en la de la especificidad porque el objetivo de la prueba es «establecer
una exposición previa» y no ayudar en el diagnóstico.
No para su distribución en Estados Unidos
El centro de investigación 5 evaluó la sensibilidad con pares de sueros de
pacientes con dengue (total de pacientes = 30, total de muestras = 61). Los
sueros se detectaron como sigue:
SENSIBILIDAD
El centro de investigación 1 evaluó la sensibilidad mediante un ensayo de
los sueros bien caracterizados. Cada suero fue:
1. Cada paciente fue sospechoso de estar infectado con el virus del dengue
2. Los pares mostraron seroconversión por IHA o al menos un aumento dos
veces mayor del título del anticuerpo para los pares de muestras por IHA
3. Al menos uno de los pares de muestras dio positivo en IgM mediante el
ELISA del investigador.
1) Obtenido de pacientes que mostraron síntomas de fiebre del dengue (FD)
o fiebre del dengue hemorrágico (FDH).
2) La muestra primaria inicial del paciente
3) Obtenido entre 1 y 16 días del inicio
4) Confirmado anteriormente como infectado con el virus del dengue por
ELISA, IH y/o PCR.
Sensibilidad del ELISA IgG Focus en suero agudo (centro 1)
Afección
FD
FDH
Total
Sensibilidad
98% (49/50)
93% (27/29)
96% (76/79)
IC 95%
89,4-99.,9%
77,2-99,2%
89,3-99,2%
El centro de investigación 2 evaluó la sensibilidad mediante un ensayo de
pares de sueros (n = 34) de 17 pacientes sospechosos de estar infectados por
el virus del dengue. Cada paciente fue examinado al inicio y de 7 a 10 días
tras el inicio. El investigador realizó un ensayo de los sueros utilizando el
producto y el ELISA IgG del investigador.
Sensibilidad con pares de sueros agudos (centro 2)
Prueba
Tiempo tras el inicio
ELISA Focus
0 días
ELISA Focus
7-10 días
ELISA del investigador
0 días
ELISA del investigador
7-10 días
Sensibilidad
100% (17/17)
100% (17/17)
100% (17/17)
100% (17/17)
IC 95%
80,5-100%
80,5-100%
80,5-100%
80,5-100%
El centro de investigación 3 evaluó la sensibilidad con sueros de pacientes
con dengue que dieron positivo en el cultivo (específico para tipo dengue) o
dieron positivo en la inhibición de la hemaglutinación (IH).
Sensibilidad del ELISA IgG Focus con cultivo o positivos con IH (centro
3)
Afección
Cultivo positivo tipo 1
Cultivo positivo tipo 2
Cultivo positivo tipo 3
Cultivo positivo tipo 4
IH positivo
Total
Sensibilidad
88% (7/8)
100% (1/1)
100% (5/5)
100% (1/1)
96% (23/24)
95% (37/39)
IC 95%
47,3-99,7%
ND
47,8-100%
ND
78,9-99,9%
82,7-99,4%
Sensibilidad con pares de sueros (centro 5)
Prueba
Primera muestra
Segunda muestra
Tercera muestra
Sensibilidad IC 95% Sensibilidad IC 95% Sensibilidad IC 95%
IH del
13%
100%
100%
3,8-30,7%
88,4-100%
ND
investigador
(4/30)
(30/30)
(1/1)
ELISA IgM
20%
100%
100%
del
7,7-38,6%
88,4-100%
ND
(6/30)
(30/30)
(1/1)
investigador
ELISA IgG
30%
90%
0%
14,7-49,4%
73,5-97,9%
ND
Focus
(9/30)
(27/30)
(0/1)
ESPECIFICIDAD
Los centros de investigación 4 y 5 evaluaron la especificidad examinando
los sueros de personas asintomáticas de zonas endémicas y no endémicas.
Especificidad del ELISA IgG Focus con sueros normales (centros 4 y 5)
Afección
Especificidad
Normal no endémico (centro 4) 99% (158/160)
Niños endémicos (centro 5)
100% (43/43)
Adultos endémicos (centro 5)
77% (52/68)
IC 95%
95,6-99,9%
91,8-100%
64,6-85,9%
Endémico general
86% (95/111)
77,7-91,5%
Endémico general y
no endémico
93% (253/271)
89,7-96%
REACTIVIDAD CRUZADA
El centro de investigación 2 evaluó la reactividad cruzada mediante el
examen de pacientes vacunados con el virus de la fiebre amarilla y de
pacientes con infección por gripe.
Especificidad del ELISA IgG Focus con sueros potencialmente reactivos
cruzados (centro 2)
Afección
Vacunas del virus de
la fiebre amarilla*
Infección por gripe**
Especificidad total
Especificidad
50% (3/6)*
IC 95%
11,8-88,2%
60% (9/15)**
57% (12/21)
32,3-83,7%
34,0-78,2%
FOCUS Diagnostics
Dx Select para virus dengue IgG
Página 2
* El centro 2 también descubrió que el 33% (2/6) de los sueros con
vacunación del virus de la fiebre amarilla tenía títulos muy altos (más de
1/10.000) con el ELISA del investigador.
** El centro 2 descubrió que el 31% (5/16) de los sueros con infección por
gripe tenía títulos muy altos (más de 1/600) con el ELISA del investigador.
El centro de investigación 8 evaluó la reactividad cruzada examinando
sueros de pacientes con otros flavivirus y sueros de pacientes infectados con
otros virus. Se realizó un ensayo de ambos paneles de sueros mediante la
prueba Focus, la IH del investigador y el ELISA IgM del investigador. El
panel de sueros de flavivirus consistió en 33 sueros de pacientes infectados
con otros flavivirus: virus de la fiebre amarilla, virus del Oeste del Nilo, virus
Chikungunya, virus de la encefalitis japonesa, virus de la fiebre del tábano,
virus Langat, virus Bunya y virus Wesselsbron.
Reactividad cruzada con infecciones por flavivirus (centro 8)
Prueba
IH para dengue tipo 2
del investigador
ELISA IgM para
dengue del
investigador
ELISA IgG Focus para
dengue
Reactividad
cruzada
39% (13/33)
IC 95%
22,9-57,9%
12% (4/32)
3,5-29%
61% (20/33)
42,1-77,1%
Reactividad cruzada con ELISA IgG Focus para infecciones virales no
flavivirus (centro 8)
Prueba
VEB AVC
IH del
0%
investigador
(0/4)
ELISA IgG
25%
Focus
(1/4)
CMV
0%
(0/4)
0%
(0/4)
Reactividad cruzada
VHS
VVZ Parvovirus
0%
33%
20%
(0/5)
(1/3)
(1/5)
0%
33%
40%
(0/5)
(1/3)
(2/5)
Total
10%
(2/21)
19%
(4/21)
ESTABILIDAD
Se aceleraron componentes liberados a al menos el equivalente a 1 año a una
temperatura de entre 2 y 8 ºC mediante incubación a 37 ºC. Después, los
componentes acelerados fueron examinados según el prospecto en paralelo
con los componentes sin acelerar. Los componentes se consideran estables si
reúnen los criterios de CC especificados en el prospecto. La prueba pasó cada
uno de los criterios de CC.
REPRODUCIBILIDAD INTERENSAYO
El centro de investigación 4 evaluó la variación interensayo. Se procesaron
los controles y dos muestras diferentes (un suero en el límite y otro positivo)
una vez a la semana durante seis semanas. Cada ensayo se procesó como se
describe en el prospecto. Se calcularon la media, la desviación estándar (DE),
el coeficiente de variación (CV) y el porcentaje de concordancia para la
interpretación.
Reproducibilidad interensayo con el ELISA IgG Focus
Elemento
n
Media
DE
VC
DO del calibrador de punto
de corte
Índice de control no
detectable
Índice de control detectable
6
0,342
0,055
16,1%
%
Concordancia
ND
6
0,023
0,011
49,4%
100% (6/6)
6
2,125
0,105
5,0%
100% (6/6)
Índice de control positivo
alto (ya no está disponible)
Índice de suero en el límite
6
4,990
0,396
7,9%
100% (6/6)
6
0,965
0,148
15,4%
67% (4/6)
Índice de suero positivo
6
4,818
0,515
10,7%
100% (6/6)
REPRODUCIBILIDAD INTERLOTE
El centro de investigación 7 evaluó la variación interlote. Se procesaron los
controles y muestras diferentes (cinco sueros positivos y tres negativos) con
dos lotes de kits diferentes. La prueba mostró la siguiente reproducibilidad:
N.º de
muestra
QC 1
QC 3
QC 4
QC 6
QC 7
QC 8
QC 9
QC 10
Índice
Lote 1
0,412
0,899
1,294
2,540
3,726
7,136
13,521
0,062
Lote 2
0,166
0,482
1,596
2,750
4,174
6,449
10,504
0,114
Interpretación
% Concordancia
100%
100%
100%
100%
100%
100%
100%
100%
PC.EL1500G
Rev.F
Fecha de redacción: 11 ago. 2008
REPRODUCIBILIDAD INTRAENSAYO
El centro de investigación 4 evaluó la variación intraensayo. Se retiraron dos
tiras (8 pocillos por tira) de cada una de las seis placas y se colocaron en una
nueva placa (12 tiras en total, 96 pocillos en total). La nueva placa se utilizó
para procesar un ensayo según el prospecto mediante el calibrador de punto
de corte como muestra. La prueba demostró la siguiente variación intraensayo:
Reproducibilidad intraensayo con ELISA IgG Focus
Pocillos
Tiras
1y2
3y4
5y6
7y8
9 y10
11 y 12
Placa
1
2
3
4
5
6
Las doce tiras, dos tiras
de cada placa (n = 96 pocillos)
DO media
Coeficiente de
variación
0,143
0,142
0,139
0,134
0,136
0,143
3,2%
5%
4,6%
5,9%
4,8%
5,8%
0,139
5,4%
Cypress, California 90630 EE.UU.
www.focusdx.com