1 ANEXO 1 DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE DIFTERIA 1. Muestra clínica: Obtener dos muestras de secreción faríngea mediante el empleo de tórulas de algodón. Si existe presencia de pseudomembrana, se deben obtener las dos muestras desde el borde de la misma, idealmente en profundidad. En caso de sospecha de difteria cutánea se debe obtener muestra de la zona de la piel afectada y también muestra faríngea. 2. Establecimientos sin facilidades de laboratorio para siembra y cultivo. Tomar dos muestras con dos tórulas diferentes. Una de las dos tórulas se deberá enviar al Instituto de Salud Pública. Si el tiempo de transporte es inferior a 4 horas, se envía la tórula destinada a cultivo bacteriano, en un tubo de vidrio estéril, de tapa rosca. Cuando el tiempo de transporte es mayor se recomienda enviar la tórula en un tubo con sílica gel. Con la segunda tórula se efectuará Tinción de Gram. 3. Establecimiento con facilidades para siembra y cultivo. El procesamiento de la muestra es el siguiente: 3.1. Para Tinción de Gram. Si en la tinción de Gram se observa bacilos grampositivos, con morfología característica, el laboratorio debe entregar un informe preliminar : “Bacilos grampositivos difteromorfos” ( tratando de establecer una cuantificación ). Si en el momento en que se toma la muestra, no se cuenta con personal efectuar Gram, la muestra deberá ser guardada. 3.2. experimentado en Para cultivos bacteriano. Sembrar la segunda tórula sobre la superficie de una placa de Ágar sangre de cordero 5% e incubar entre 35 a 37°C por 18 - 24 horas. En este medio Corynebacterium diphtheriae forma colonias de tamaño medio, 1 - 2 mm. de diámetro de color gris pizarra. Según las recomendaciones internacionales la identificación se basa en las al siguientes pruebas: a) Ágar sangre telurito cisteína ( Ágar infusión corazón suplementado con sangre de cordero y cisteína). b) Ágar Tinsdale modificado (Ágar base peptona enriquecido con suplemento Loeffler. Tinsdale) Agar Utilización de azúcares en caldo base con indicadores de andrade: Catalasa : + Ureasa Nitrasa Hemólisis Glucosa : + :Maltosa : + :+ Sacarosa : variable Manitol : Almidón : : + 4. Diagnóstico de confirmación. El diagnóstico de confirmación de Corynebacterium diphtheriae se efectúa en la cepa mediante el test de Elek e inoculación animal en caso que el primero sea negativo. Para confirmar el aislamiento, enviar la cepa al ISP, en un tubo de Agar sangre cordero de 5%, o Ágar tripcase soya, tendido, con tapa rosca, muy protegido con papel absorbente y con elementos amortiguadores en el interior de un receptáculo metálico. En caso que el laboratorio no disponga del medio de cultivo primario, deberá enviar la muestra en un tubo con sílica gel1. 1 Preparación de tubos con Sílica Gel. A. Colocar en un tubo de tapa rosca cristales de sílica gel en cantidad suficiente para cubrir el extremo algodonado de la tórula. _________________________________________________________________________ Servicio Salud Atacama / Departamento Programa de las Personas y Atención Primaria Unidad de Epidemiología / Fono Fax 52 - 211491 2 Todos los envíos en que se desea efectuar pesquisa de Corynebacterium diphtheriae deben venir a nombre de : INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE SECCIÓN BACTERIOLOGÍA CLÍNICA LABORATORIO DE REFERENCIA CORYNEBACTERIUM AV. MARATHÓN N°1.000 SANTIAGO “ ENTREGA A DOMICILIO ” B. Esterilizar el tubo en autoclave y secar en horno Pasteur. El color de los cristales de sílica gel en condiciones óptimas de secadoes es azul intenso. Al humedecerse pierde esta coloración, la que se recupera con un nuevo secado al horno. C. Al momento de obtener la muestra, se abre el tubo, se extrae la tórula, la cual se vuelve a introducir una vez que se ha tomado la muestra. _________________________________________________________________________ Servicio Salud Atacama / Departamento Programa de las Personas y Atención Primaria Unidad de Epidemiología / Fono Fax 52 - 211491 3 REPUBLICA DE CHILE MINISTERIO DE SALUD SERVICIO DE SALUD ATACAMA UNIDAD DE EPIDEMIOLOGÍA HOSPITAL :_______________ CASO N° :_________________ ANEXO 2 INVESTIGACIÓN CASO DE DIFTERIA I.- IDENTIFICACION : 1. NOMBRE PACIENTE:______________________________________________ 2. SEXO:_________________ 3. EDAD _________________ 4. DOMICILIO : _____________________________________________________ :_______________________________________________________ COMUNA II.- INFORMACIÓN CLÍNICA : 5. FECHA INICIO SINTAMOS: ____/____/____ 6. FECHA HOSPITALIZACIÓN: ____/____/____ 7. SIGNOS Y SINTAMOS : (Marque con un circulo lo que corresponda) palidez fatiga cefalea taquicardia hipotensión alteración conciencia oliguria otros:______________________________ 8. HIPÓTESIS DIAGNOSTICA : 1:_____________________________________ III.- INFORMACIÓN DE LABORATORIO : 9. FROTIS: SI NO FECHA:____/____/____ RESULTADO:___________ 10. CULTIVO : SI NO FECHA:____/____/____ RESULTADO:___________ 11. ENVIO MUESTRA ISP: SI NO (Si la respuesta es si responda lo sgte.) 12. FECHA ENVIO FROTIS : ____/____/____ RESULTADO:____________ 13. FECHA ENVIO CULTIVO: ____/____/____ RESULTADO:____________ IV. INVESTIGACIÓN EPIDEMIOLOGICA. ANTECEDENTE DE VACUNA ANTIDIFTERICA: 14. N° DOSIS D.P.T.: 1 2 3 4 5 IG2. NO FECHA ULTIMADOSIS:____/____/____ 15. N° DOSIS TOXOIDE D.T. : 1 2 3 IG. NO FECHA ULTIMA DOSIS:____/____/____ 16. IDENTIFICACION CASO PRIMARIO : SI NO 17. CASO SECUNDARIO: SI NO 18. IDENTIFICACION DE CONTACTOS : SI NO 19. N° DE CONTACTOS:_________ 20. N° VACUNADOS :____________ 21. N° NO VACUNADOS:________ 22. N° PERSONAS CON QUIMIOPROFILAXIS:__________ N° PERSONAS VACUNADOS:_________ 23. DIAGNOSTICO FINAL :___________________________________________ NOMBRE NVESTIGADOR:________________________________________________ NOTA: ESTE FORMULARIO NO REEMPLAZA AL RMC-14 DE NOTIFICACIONES OBLIGATORIA. 2 IG : Ignorado. _________________________________________________________________________ Servicio Salud Atacama / Departamento Programa de las Personas y Atención Primaria Unidad de Epidemiología / Fono Fax 52 - 211491 4 ANEXO 3 DATOS A INCLUIR EN EL PRIMER REPORTE DESDE EL HOSPITAL A EPIDEMIOLOGÍA, ANTES DE LA CONFIRMACIÓN DEL DIAGNÓSTICO 1. NOMBRE 2. EDAD 3. COMUNA DE RESIDENCIA 4. Nº DOSIS DPT 5. Nº DOSIS DT 6. FECHA DE ÚLTIMA DOSIS (DPT ó DT) 7. FECHA DE INICIO DE SÍNTOMAS 8. FECHA DE PRIMERA ATENCIÓN 9. FECHA DE LA TOMA DE MUESTRAS 10. FECHA DE INICIO DE ANTIBIOTERAPIA 11. FECHA DE LA INVESTIGACIÓN _________________________________________________________________________ Servicio Salud Atacama / Departamento Programa de las Personas y Atención Primaria Unidad de Epidemiología / Fono Fax 52 - 211491