IMAGEN Herpes Simplex Virus (HSV) K610611-2 ES Prueba de inmunofluorescencia directa para la detección del HSV 1 y el HSV 2. 1. INDICACIONES DE USO La prueba de tipaje IMAGEN™ Herpes Simplex Virus es una prueba cualitativa de inmunofluorescencia directa para la detección y tipaje del virus del herpes simple 1 (HSV 1) y el virus del herpes simple 2 (HSV 2) en cultivos celulares. 2. RESUMEN El virus del herpes simple es un virus ADN que contiene una nucleocápside icosaédrica rodeada por una envoltura que contiene lípidos. El HSV humano se clasifica dentro de la familia de los Herpesviridae y es uno de los miembros de la subfamilia Alphaherpesviridae. El género Simplexvirus incluye dos tipos de especies de virus del herpes simple humano, el HSV 1 y el HSV 21. La infección por el HSV es una infección común y universal en los seres humanos, que se asocia con una amplia variedad de enfermedades clínicas tanto en los pacientes inmunocompetentes como en los inmunocomprometidos. Ambos virus HSV 1 y 2 se encuentran frecuentemente involucrados en infecciones vesiculares localizadas en la piel, la conjuntiva y las membranas mucosas de la cavidad bucal y los genitales2,3,4. Una vez que la infección primaria se ha resuelto el virus puede existir en forma latente en los tejidos nerviosos y volver a aparecer en ciertas condiciones, provocando una recidiva de los síntomas. Las infecciones primarias del sistema nervioso central pueden conducir a la encefalitis herpética, que puede tener un mal pronóstico si no se trata rápidamente4,5. La infección primaria que se desarrolla en los estadios finales del embarazo puede provocar una infección neonatal grave. Estas infecciones tienen tasas elevadas de morbilidad y mortalidad4,5. En los pacientes inmunocomprometidos pueden desarrollarse infecciones sistémicas graves potencialmente mortales, que en ocasiones afectan a múltiples órganos5. Está ampliamente difundido el uso de tratamientos antivíricos seguros y eficaces para el manejo de las infecciones primarias y recurrentes por HSV3,6 y, por lo tanto, es importante realizar el diagnóstico rápido de laboratorio de la infección por HSV como aval para el manejo y tratamiento de los pacientes infectados. La identificación del tipo de HSV desempeña un papel importante en la investigación y monitorización de los pacientes infectados4. Los métodos diagnósticos más importantes que se utilizan incluyen el aislamiento del virus viable en monocapas de cultivos celulares inoculados con las muestras clínicas o la detección directa del virus o de las proteínas víricas en las muestras clínicas4,7. Se puede lograr el aislamiento del HSV a partir de muestras clínicas en diversas líneas celulares que incluyen fibroblastos diploides, células de riñón de conejo, células Vero y células amnióticas humanas, en las que el HSV se replica rápidamente y muestra un efecto citopático7. Se han utilizado varias técnicas para detectar y confirmar la identificación de los gérmenes aislados y para diferenciar entre el HSV 1 y el HSV 2, que incluyen la hibridización del ADN, el análisis con enzimas de restricción, las pruebas de neutralización y los cultivos en huevos embrionados4,7. Estas técnicas pueden ser complejas, laboriosas y, con frecuencia, inapropiadas para su uso sistemático. Se han descrito pruebas de inmunofluorescencia que utilizan anticuerpos monoclonales específicos para el HSV 1 o el HSV 2, que se emplean para la identificación y el tipaje de los HSV aislados y para la detección del HSV en cultivos celulares antes de que se pongan de manifiesto los efectos citopáticos (ECP)7,8,9. Las pruebas de inmunofluorescencia directa, como el IMAGEN Herpes Simplex Virus, que utilizan anticuerpos monoclonales específicos, ofrecen un método rápido, sensible y específico para la detección y la diferenciación de los HSV 1 y los HSV 2 aislados en monocapas de cultivos celulares. IMAGEN Herpes Simplex Virus utiliza anticuerpos monoclonales específicos para detectar epítopos de glicoproteínas del HSV específicas del HSV 1 o el HSV 2. 3. PRINCIPIO DE LA PRUEBA Los reactivos del IMAGEN HSV contienen anticuerpos monoclonales conjugados con isotiocianato de fluoresceína (FITC). Los anticuerpos conjugados se unen en forma específica a los epítopos conservados del HSV 1 o del HSV 2. Los reactivos se utilizan en una técnica de inmunofluorescencia directa de un solo paso. Los especímenes se incuban con los reactivos de anticuerpo conjugado con FITC durante 30 minutos y luego el reactivo excedente se lava con solución salina tamponada con fosfatos (PBS). Se montan las áreas teñidas y se observan con el microscopio mediante iluminación por epifluorescencia. Si los virus del herpes simple 1 o 2 se encuentran presentes, se observa una fluorescencia de color verde manzana brillante característica en las células cultivadas, que contrasta con la tinción roja de fondo de las células no infectadas. El reactivo con el cual se observa la fluorescencia específica indicará si se trata de un HSV 1 o un HSV 2. Reconocimiento Los anticuerpos monoclonales utilizados en esta prueba se han preparado en el Departamento de Patología de la Universidad de Cambridge, Cambridge, Reino Unido. 4. DEFINICIONES En la información del producto se han utilizado los siguientes símbolos. Número de catálogo Consulte las instrucciones de uso N Contenido suficiente para <N> ensayos Fabricante Producto sanitario para diagnóstico in vitro Fecha de caducidad Código de lote Límite de temperatura 5. REACTIVOS SUMINISTRADOS 50 - Cada kit contiene material suficiente para analizar 50 preparados de cultivo celular. - La vida útil del kit es la indicada en la etiqueta del embalaje exterior. 5.1. CONTENIDO DEL KIT DE LA PRUEBA IMAGEN HSV Un folleto de instrucciones de uso. Portaobjetos de control positivo con pocillos en 2 x 2 que contienen fibroblastos humanos infectados con el HSV 1 o el HSV 2 y fijados en acetona. Un frasco de cada uno de los siguientes: 3mL de medio de montaje. El medio de montaje contiene un inhibidor de la fotodecoloración en una solución de glicerol (pH 10,0). 1,4mL de reactivo tipo 1 de IMAGEN HSV. El reactivo contiene anticuerpos monoclonales murinos purificados específicos para el HSV 1, conjugados con FITC. Los conjugados se preparan en una solución tampón estabilizada con proteínas (pH 7,5) que contiene azul de Evans como contratinción y 15 mmol/L de azida sódica como conservante. 1,4mL de reactivo tipo 2 de IMAGEN HSV. El reactivo contiene anticuerpos monoclonales murinos purificados específicos para el HSV 2, conjugados con FITC. Los conjugados se preparan en una solución tampón estabilizada con proteínas (pH 7,5) que contiene azul de Evans como contratinción y 15 mmol/L de azida sódica como conservante. 5.2. PREPARACIÓN, ALMACENAMIENTO Y REUTILIZACIÓN DE LOS COMPONENTES DEL KIT Para asegurar la eficacia optima del kit, es importante que todos los componentes no utilizados del mismo se almacenen de acuerdo con las siguientes instrucciones. 5.3. PORTAOBJETOS DE CONTROL POSITIVO - Los portaobjetos de control positivo se proporcionan por separado en bolsas metálicas selladas que contienen nitrógeno. Almacene los portaobjetos no utilizados a 2-8°C. El portaobjetos debe permanecer 5 minutos a temperatura ambiente (15-30°C) antes de ser abierto. Realice la tinción del portaobjetos inmediatamente después de ser abierto. 5.4. MEDIO DE MONTAJE Listo para usar. Almacene el medio de montaje no utilizado a 2-8°C. El medio de montaje debe permanecer 5 minutos a temperatura ambiente (15-30°C) antes de su uso. / 5.5. REACTIVOS 1 Y 2 Listos para usar. Almacene los reactivos 1 y 2 no usados a 2-8°C. Los reactivos 1 y 2 deben almacenarse en la oscuridad a 2-8°C y deben permanecer a temperatura ambiente (15-30°C) durante 5 minutos antes de su uso. 6. REACTIVOS ADICIONALES 6.1. REACTIVOS Acetona (para fijación). Solución salina tamponada con fosfatos (PBS) de pH 7,5 para lavar los especímenes teñidos y para la preparación de los mismos. 6.2. ACCESORIOS Generales Portaobjetos de vidrio para microscopio recubiertos de Teflón, con pocillos de 6mm de diámetro (100 portaobjetos por caja) disponibles en su distribuidor local IMAGEN Positive Control Slide (No de código S611030-2). Para confirmación de cultivos Hisopos estériles, medio de transporte vírico y un recipiente adecuado para la recogida, transporte y cultivo del HSV. Líneas celulares para cultivo recomendadas para el cultivo y aislamiento del HSV. 7. Equipo necesario no suministrado Pipeta de precisión y puntas desechables que permitan la medición de hasta 25µL Recipiente para lavado Cubreobjetos adecuados para cubrir pocillos de 6 mm de diámetro Aceite de inmersión no fluorescente Microscopio de epifluorescencia con sistema de filtro para FITC (longitud de onda de excitación máxima de 490nm, longitud de onda de emisión media de 520nm) y lentes de aumento de 200X–500X Incubador a 37°C 8. PRECAUCIONES - Producto sanitario para diagnóstico in vitro. Cualquier persona que realice un ensayo con este producto debe estar entrenada para su uso y debe tener experiencia en los procedimientos de laboratorio. 8.1. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD 8.1.1 Los reactivos IMAGEN HSV contienen 15mmol/L de azida sódica; que es tóxica. La azida sódica puede reaccionar con las cañerías de plomo y cobre, formando azidas metálicas altamente explosivas. Deseche siempre el material que contenga azida aclarando con agua abundante. 8.1.2 Se ha demostrado que el HSV presente en el portaobjetos de control positivo no es infeccioso en los cultivos celulares; sin embargo, se debería manejar y desechar el portaobjetos como material potencialmente infeccioso. 8.1.3 El reactivo contiene azul de Evans, que puede ser carcinogénico, por lo que debe evitarse el contacto con la piel. 8.1.4 Proceda con cuidado al utilizar el medio de montaje, ya que éste puede causar irritaciones cutáneas. Si el contacto se produce, aclare la piel con agua abundante. 8.1.5 No se aplique cosméticos, beba, coma, ni almacene o prepare alimentos dentro del área de trabajo designada. 8.1.6 No pipetee los materiales con la boca. 8.1.7 Lleve guantes desechables cuando manipule especímenes clínicos y lávese siempre las manos después de trabajar con materiales infecciosos. 8.1.8 Deseche todos los especímenes clínicos con arreglo a la legislación local. 8.1.9 La hoja de datos sobre seguridad se encuentra disponible a petición del usuario profesional. 8.2. PRECAUCIONES TÉCNICAS 8.2.1 Los componentes no deben utilizarse después de la fecha de caducidad impresa en las etiquetas. No mezcle lotes diferentes de reactivos. 8.2.2 Los reactivos se proporcionan a concentraciones de trabajo fijas. La eficacia de la prueba se verá afectada negativamente con cualquier tipo de modificación de los reactivos o si éstos se almacenan con arreglo a condiciones diferentes a las que se detallan en la Sección 5. 8.2.3 Prepare la solución salina tamponada con fosfatos (PBS) fresca, según lo requiera el día que vaya a utilizarla. 8.2.4 Evite la contaminación microbiana de los reactivos. 8.2.5 No se deben congelar los reactivos. 9. RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LOS ESPECÍMENES La recogida y preparación de los especímenes es de suma importancia para el diagnóstico por cultivo celular de la infección por HSV. Los especímenes deben ser recogidos del sitio de infección de manera tal que contengan tanto material infectado como sea posible. 9.1. ESPECÍMENES CLÍNICOS Recogida Recoger los especímenes clínicos del sitio de infección. Las úlceras o lesiones deben frotarse a fondo con un hisopo con punta de algodón, para poder obtener células infectadas y exudado de la base de la úlcera o lesión. Las vesículas deben abrirse cuidadosamente, para recoger el líquido con el hisopo y frotar la base de la lesión con el hisopo. Los hisopos deben colocarse en el medio de transporte de virus utilizado habitualmente y enviarse al laboratorio tan pronto como sea posible, para su procesamiento. Inoculación de cultivos celulares Los especímenes recogidos para el diagnóstico de la infección por el HSV deben inocularse en las líneas celulares que se utilizan habitualmente en el laboratorio, de acuerdo con los métodos establecidos del laboratorio y deben examinarse de forma regular para detectar la aparición de un efecto citopático (ECP). Preparación de los portaobjetos Si se observa un ECP indicativo de una infección por HSV, debe extraerse la monocapa de cultivo celular cuando aproximadamente el 70% de las células esté infectado. Introduzca las células en el medio de cultivo líquido raspando la lámina de células con una pipeta estéril. Deposite las células mediante una centrifugación suave a 200 x g durante 10 minutos a temperatura ambiente (15-30°C) y retire el sobrenadante. Lave las células mediante la resuspensión del depósito celular en PBS (véase la Sección 6.1) y repita la centrifugación. Retire el sobrenadante y resuspenda el depósito celular en un volumen pequeño de PBS fresco para mantener una densidad celular elevada. Coloque alícuotas de 25µL de la suspensión en los pocillos de los portaobjetos de microscopio revestidos de teflón. Se requieren dos pocillos por cada espécimen del paciente. Deje que se sequen a temperatura ambiente (15-30°C) y colóquelos en acetona fresca durante 10 minutos a temperatura ambiente (15-30°C). Si el espécimen no se tiñe de forma inmediata, debe almacenarse a 4°C durante toda la noche o congelarse a –20°C durante períodos más prolongados. 10. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO ANTES DE REALIZAR EL PROCEDIMIENTO DE ENSAYO, POR FAVOR CONSULTE LA SECCIÓN 8.2 PRECAUCIONES TÉCNICAS. 10.1. ADICIÓN DE LOS REACTIVOS 1 Y 2 Agregue 25µL de reactivo para HSV 1 a la preparación de células fijas de uno de los pocillos de 6mm de diámetro y 25µL de reactivo para HSV 2 a la preparación del otro pocillo de 6 mm de diámetro (véase la Sección 9) o agréguelo al portaobjetos de control positivo. Asegúrese de que los reactivos cubran toda el área del pocillo. 10.2. PRIMERA INCUBACIÓN Incube los portaobjetos con los reactivos en una cámara húmeda durante 30 minutos a 37°C. No permita que el reactivo se seque en el espécimen, dado que eso provocará la aparición de tinción inespecífica. 10.3. LAVADO DEL PORTAOBJETOS Lave el exceso de reactivo con solución salina tamponada con fosfatos (PBS) (véase la Sección 6.1) y luego lave suavemente el portaobjetos durante 5 minutos en un recipiente con agitación que contenga PBS. Escurra la PBS y deje que el portaobjetos se seque al aire a temperatura ambiente (15-30°C). 10.4. ADICIÓN DEL MEDIO DE MONTAJE Agregue una gota de medio de montaje IMAGEN en el centro de cada pocillo y coloque un cubreobjetos sobre el medio de montaje y el espécimen, asegurándose de que no queden burbujas de aire atrapadas. 10.5. LECTURA DEL PORTAOBJETOS Examine todas las áreas del pocillo de 6mm que contienen la preparación de células teñidas con un microscopio de epifluorescencia. Como se describe en la Sección 11, la fluorescencia debería ser visible con un aumento de 200X–500X. (Para obtener mejores resultados, los portaobjetos deberían ser examinados inmediatamente después de realizada la tinción, pero se pueden almacenar a 2-8°C en la oscuridad durante 24 horas). 11. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DE LA PRUEBA 11.1. CONTROLES 11.1.1 Portaobjetos de control positivo Cuando se tiñe y se visualiza de acuerdo con lo descrito en la Sección 10 el portaobjetos de control positivo debería mostrar células fluorescentes con una fluorescencia intracelular de color verde manzana que contrasta con el fondo de material teñido con la contratinción. Deben utilizarse los portaobjetos de control positivo para asegurarse de que el procedimiento de tinción se ha realizado de forma satisfactoria. 11.1.2 Control negativo Si se require un portaobjetos de control negativo, se recomienda el uso de células intactas no infectadas, del tipo utilizado para el cultivo y el aislamiento del HSV. Las células deben prepararse y fijarse como se describe en la Sección 9.1 y deben teñirse como se describe en la Sección 10. 11.2. ESPECÍMENES CLÍNICOS 11.2.1 Aspecto de las células infectadas por el HSV Las células infectadas mostrarán gránulos citoplasmáticos intracelulares con una fluorescencia de color verde manzana. En algunas células infectadas, esta fluorescencia citoplasmática característica se puede acompañar de un efecto de “reborde” provocado por la tinción de la membrana celular. Las células no infectadas se tiñen de rojo con la contratinción de azul de Evans. 11.2.2 Interpretación Se realiza un diagnóstico positivo cuando al menos una célula teñida fijada muestra el patrón de fluorescencia descrito en la Sección 11.2.1 con el reactivo tipo 1 o tipo 2 para HSV. Se recomienda que se visualicen al menos 50 células del cultivo celular analizado en el área de cada pocillo del portaobjetos antes de informar un resultado negativo. En el caso de que las células presentes sean insuficientes, véase la Sección 11.2.3. 11.2.3 Células insuficientes Si el número de células de la preparación en el portaobjetos fuera insuficiente, debe centrifugarse el resto de la muestra del cultivo celular a 200 x g durante 10 minutos a temperatura ambiente (15-30°C). Resuspenda en un volumen menor de PBS antes de redistribuir (25µL) en las áreas de los pocillos de 6mm de diámetro en un portaobjetos para microscopio revestido de teflón, según lo descrito en la Sección 9.1. De forma alternativa, debe solicitarse la repetición de la toma del espécimen clínico. 12. Limitaciones del procedimiento 12.1. Utilice sólo el medio de montaje suministrado con el kit de la prueba IMAGEN HSV. 12.2. El aspecto visual de la imagen fluorescente obtenida puede variar en función del tipo de microscopio y de la fuente luminosa que se utilice. 12.3. Los reactivos se proporcionan a concentraciones de trabajo fijas. La eficacia de la prueba puede verse afectada con cualquier modificación de los reactivos o si éstos no se almacenan con acuerdo a las condiciones recomendadas, de acuerdo a lo expuesto en la Sección 5. 12.4. Se recomienda utilizar 25µL del reactivo para cubrir un área de pocillo de 6mm de diámetro. Una disminución de este volumen puede provocar dificultades para cubrir el área de la muestra y puede disminuir la sensibilidad. 12.5. La imposibilidad de detectar el HSV puede ser el resultado de ciertos factores como la recogida del espécimen en un momento inapropiado de la enfermedad, la toma y/o la manipulación incorrecta del espécimen, problemas con el cultivo celular, etc. Un resultado negativo no excluye la posibilidad de una infección por el HSV. 12.6. Los resultados de la prueba deben interpretarse junto con la información procedente de los estudios epidemiológicos y clínicos, la evaluación del paciente y otros procedimientos diagnósticos. 13. VALORES ESPERADOS La infección por el virus del herpes simple en el hombre se observa en todas las regiones del mundo y más del 80% de la población adulta en los países occidentales habrá experimentado una infección primaria, de la cual la mayoría habrá sido asintomática10. Tras la infección primaria, aproximadamente el 45% de los individuos con infección oral y el 60% de los pacientes con infección genital experimentarán infecciones recurrentes por el herpes3. El HSV ha sido aislado del tracto genital en el 0,3 a 5,4% de los hombres y el 1,0 a 8,0% de las mujeres que concurren a los centros asistenciales debido a enfermedades de transmisión sexual11,12. Las infecciones oculares por herpes simple son una de las causas más importantes de remisión de pacientes a las clínicas oftalmológicas. En la infección primaria o recurrente sintomática, las lesiones del HSV se pueden encontrar en la piel, las membranas mucosas de la boca, la faringe y los genitales o en los ojos. En la enfermedad en neonatos o en individuos inmunocomprometidos la infección puede diseminarse ampliamente y afectar a órganos como el pulmón, el cerebro, el hígado, el bazo, etc. El HSV se puede cultivar a partir del líquido de las lesiones vesiculares o de las secreciones de otros sitios infectados (p. ej., ojos, faringe o genitales). Además, en el herpes diseminado, el HSV se puede cultivar a partir de tejidos infectados, p. ej., biopsia de cerebro en los pacientes con encefalitis por herpes simple. 14. características específicas 14.1. REACTIVIDAD DEL ANTICUERPO MONOCLONAL CON EL HSV TIPO 1 Y TIPO 2 Se ha demostrado que los anticuerpos monoclonales utilizados en esta prueba reaccionan con epítopos conservados específicos para cada tipo de antígeno del HSV 1 o del HSV 2. 14.2. Características específicas La prueba de tipaje IMAGEN HSV se evaluó en un centro de ensayos clínicos y los resultados fueron comparados con el mapeo con endonucleasas de restricción. Las muestras en este centro hospitalario fueron tomadas de varios sitios que incluyeron la nariz, la garganta, la lengua, la boca, la piel, la conjuntiva, el periné, la uretra, el pene, la vulva, los labios vaginales, la vagina y el cuello uterino de 187 pacientes que concurrieron al hospital. Los especímenes (hisopados) se colocaron en un medio de transporte y se trasladaron hasta el laboratorio para el aislamiento del HSV en el cultivo celular. Los 187 cultivos celulares fueron analizados por microscopía en el centro en el que se realizó el estudio, para buscar el efecto citopático típico del HSV y se evaluaron con reactivos IMAGEN HSV para determinar si el HSV1 o el HSV 2 estaban presentes. Se consideró que el HSV 1 estaba presente si una o más células mostraban la fluorescencia típica con el reactivo para el HSV 1. Se consideró que el HSV 2 estaba presente si una o más células mostraban la fluorescencia típica con el reactivo para el HSV 2 (véase la Sección 11). Detección del HSV De los 187 especímenes evaluados, 60 (32,1%) fueron positivos en el cultivo celular de referencia y en la prueba de tipaje IMAGEN HSV (Tabla 14.2.1). De los resultados positivos obtenidos, el 55,0% correspondieron a mujeres y el 45,0% correspondieron a hombres. La distribución de los resultados positivos según el sitio de aislamiento del HSV fue: 83,3% genital, 13,3% oral y 3,4% de otros sitios anatómicos. De los especímenes genitales positivos, el 40,0% correspondieron a HSV 1 y el 60,0% a HSV 2. Todos los especímenes orales positivos correspondieron a HSV 1. En todos los casos se obtuvieron resultados positivos por ambos métodos, lo que da un valor de correlación, especificidad, sensibilidad y valores predictivos positivo y negativo del 100%. Tabla 14.2.1 Comparación de los resultados de las pruebas con IMAGEN HSV y los métodos estándar de cultivo celular PRUEBA Cultivo Celular IMAGEN HSV Número de especímenes RESULTADOS Pos Neg Neg Pos Pos Neg Pos Neg 60 127 0 0 (32,1) (67,9) (0) (0) ( ) Se expresan como porcentaje del número total de especímenes analizados. Tipaje del HSV 1 y el HSV 2 Se analizó un total de 43 cepas de HSV aisladas en cultivo con la prueba IMAGEN HSV y el mapeo con endonucleasas de restricción (Tabla 14.2.2). En todos los casos se obtuvieron resultados positivos por ambos métodos, lo que da un valor de correlación, especificidad y sensibilidad del 100%. Tabla 14.2.2 Comparación del tipaje del HSV 1 y el HSV 2 mediante IMAGEN HSV y mapeo con endonucleasas de restricción (MER) PRUEBA MER IMAGEN HSV Número de especímenes RESULTADOS HSV 1 HSV 2 HSV 1 HSV 2 HSV 1 HSV 2 HSV 2 HSV 1 23 20 0 0 (53,5) (46,5) (0) (0) ( ) Se expresan como porcentaje del número total de especímenes analizados. 9. Pereira L., Dondero D.W., Gallo D., Devlin D. and Woodie J.D. (1982) Serological analysis of herpes simplex virus types 1 and 2 with monoclonal antibodies. Infection and Immunity 35: 363 367. 10. Nahmias A.J. and Roizman B. (1973) Infection with herpes-simplex virus 1 and 2. New England Journal of Medicine 289: 667-74. 11. Corey L., Adams H.G. Brown Z.A. and Holmes K.K. (1983) Genital herpes simplex virus infection: clinical manifestations course and complications. Annals lnternal Medicine 98: 918 72. 12. Corey L. and Holmes K.K. (1983) Genital herpes simplex virus infections: current concepts in diagnosis, therapy and presentation. Annal Internal Medicine 98: 973 83. 14.3. REACTIVIDAD CRUZADA Se realizó la prueba de tipaje IMAGEN HSV frente a otros virus con posibilidad de ser aislados en cultivos celulares de especímenes humanos. Todos los organismos evaluados (Tabla 14.3) fueron negativos con ambos reactivos IMAGEN HSV 1 e IMAGEN HSV 2. Tabla 14.3 Virus que fueron evaluados con la prueba IMAGEN HSV y que se encontró que no eran reactivos Adenovirus 2,3,4 Citomegalovirus Echovirus 11 Virus de Epstein Barr Herpes zóster Parainfluenza 1 Virus respiratorio sincitial 15. REFERENCIAS 1. Francki R.I.B., Fauquet C.M., Knudson D.L. and Brown F Classification and nomenclature of viruses. Fifth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. Archives of Virology, Supplement 2, Spurger Velacy, New York, pp 103-106. Adams E. (1982) 2. 3. Herpes Simplex Virus infections. In Herpes virus infections: clinical aspects (ed. Glaser, R.) Marcel Dekker Inc., New York, pp 1-55. Longson M. (1990) 4. Herpes simplex. In principles and practice of clinical virology (eds. A.J. Zuckerman et al) John Wiley and Sons Ltd, pp 3-42. Corey L. and Spear P.G. (1986) 5. Infections with Herpes Simplex Virus Part 2. New England Journal of Medicine 314: No 12: 749 757. Peterslund N.A. (1991) 6. Herpes virus infection: An overview of the clinical manifestations. Scand. J. Infect. Suppl. 78: 15 20. Balfour H.H. (1987) 7. Acyclovir. In antimicrobial agents annual 2 (eds. Peterson, P.K. and Verhoef. J.) Elsevier Science Publishers, pp 315-329. Corey L. (1986) 8. Laboratory diagnosis of Herpes Simplex Virus infections. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 4: 1115 1195. Gleaves C.A., Wilson D.J., Wold A.D. and Smith T.E. (1985) Detection and serotyping of Herpes Simplex virus in MRC-5 cells using centrifugation and monoclonal antibodies 16 hours post inoculation. J. Clin. Microbiol. 21: pp 29. IFU X7851 revisado octubre 2012 OXOID Limited, Wade Road, Basingstoke, Hampshire, RG24 8PW, Reino Unido SERVICIO DE ASISTENCIA TÉCNICA Y ATENCIÓN AL CLIENTE Para cualquier pregunta, por favor, contacte con la delegación o el distribuidor local de Oxoid.