LEY DE BEER - grupogalileos.com

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA
FACULTAD DE CIENCIAS
INFORME Nº 2
TEMA
:
“ CURVA ESPECTRAL Y LEY DE BEER ”
CURSO
:
INSTRUMENTACION QUIMICA I
PROFESOR (A)
:
ISRAEL JIMENEZ
ALUMNO(S)
: POMA LLANTOY VICTOR RAÚL
FECHA DE REALIZACIÓN :
FECHA DE PRESENTACIÓN :
08-09-2009
15-09-2009
2009
1.- OBJETIVOS :
 Graficar las curvas espectrales y determinar los máximos de absorción
 Determinar la longitud de onda de máxima absorción
 Graficar la correspondiente curva de calibración
Determinar la cantidad de la correspondiente sustancia absorbente ( analito)
2.- MARCO TEÓRICO:
2.1.- Introducción
Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de
radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la
Absorbancia, y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de
interés en dicha muestra.
Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda
características de la radiación electromagnética. En este proceso, la radiación es
transferida temporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intensidad
de la radiación . Dicha disminución, debida a la absorción experimentada por el analito,
puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia , A , la
más comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se
define por la expresión:
donde A es la Absorbancia, P0 la potencia del haz de radiación incidente y P la potencia
de dicho haz tras atravesar la muestra.
2.2.- Ley de Beer
De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la
concentración de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la
radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es:
donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la
concentración c se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante de
proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo e, y,
puesto que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1
mol-1. En este caso, la ley de Beer adquiere la forma:
2.3.- Transmitancía y Absorbancia
Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad Io incide
perpendicularmente sobre una disolución de un compuesto químico que absorbe luz o
cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la radiación incidente (Ia) y dejará
pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It
La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz
transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la cantidad
de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa normalmente en tanto por ciento:
% T = It/Io x 100
La transmitancia nos da una medida física de la relación de intensidad incidente y
transmitida al pasar por la muestra. La relación entre %T y la concentración no es lineal,
pero asume una relación logarítmica inversa.
La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos
indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T,
en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io.
Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del
100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y
entonces A vale log 1 = 0.
La cantidad de luz absorbida dependerá de la distancia que atraviesa la luz a través de la
solución del cromóforo y de la concentración de éste.
2.4.- Espectros de absorción
Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito
(o de otra magnitud equivalente) en función de la longitud de onda de la radiación , l ,
(o de otro parámetro relacionado con la energía de la radiación utilizada). El máximo de
absorbancia obtenido en el espectro de absorción de un analito, nos dará la longitud de
onda que proporciona la mayor sensibilidad posible, y por tanto será la que se utilizará
en el análisis espectrofotométrico de dicho
analito. Todas las disoluciones que presentan color, absorben radiación
electromagnética perteneciente al espectro visible, el cual puede dividirse en varias
zonas según se muestra en la tabla
siguiente:
En dicha tabla, la columna del "color" indica la porción del espectro que es absorbida,
mientras que la correspondiente al "color complementario" indica la porción de
radiación electromagnética que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a
través de ella y puede ser captada por el ojo humano (color de la disolución). Así, por
ejemplo, una disolución de color amarillo absorbe la radiación de color azul, y por tanto
cabe esperar que presente un máximo de absorbancia en la zona de longitud de onda en
la banda de 435-480 nm
3.- PARTE EXPERIMENTAL
3.1 .- Materiales

Espectrofotómetro UV-Visible-1201V-SHIMADZU, con celdas de 1cm







05 fiolas
01 bureta de 50 ml
01 Vaso de 50 ml
02 vasos de 100ml
01 bagueta
01 piceta
3.2 .- Reactivos



Permanganato de potasio ( KMnO4).. 3X10-4 M
Acido sulfúrico concentrado ( H2SO4) 18M
Acido sulfúrico 0.1 M
3.3 .- Procedimiento Experimental
Preparación de soluciones
 Se preparo una solución de KMnO4 3X10-4 M. Añadiendo H2SO4 (CC) antes del
enrase
 Se preparo una solución de H2SO4 0.1 M
Curva espectral
 Desde la bureta se agrego 5 ml de la solución de KMnO4 a una fiola de 25 ml y
se enraso con un cierto volumen de H2SO4 0.1 M
 Se vació una pequeña cantidad de esta solución a la celda espectrofotométrica
y se registro respecto al blanco las absorbancias, usando longitudes de onda en el
rango de 400 a 620 nm
 Las mediciones realizadas fueron tomadas de la siguiente manera: 10 en 10
nm de 400-500 nm, 5 en 5nm de 500-560 y nuevamente de 10 en 10nm de 500560 nm
Corrección de absorbancia
 Se llenaron las 2 celdas con la solución de H2SO4 0.1 M hasta unos ¾ de su
altura. Se toma una de ellas como el blanco y se midió la absorbancia de la otra
como muestra. Se repitió el procedimiento girando la celda 180°.
Curva de calibración

Desde la bureta se agregó 2,4,6,8 y 10 ml de la solución de KMnO4 a fiolas
diferentes de 25 ml marcadas previamente con las letras E1,E2,E3,E4,E5
respectivamente, luego se enrasaron dichas fiolas con H2SO4 0.1 M por ultimo
se registro las absorbancias de cada uno de estos estándares a una longitud
de onda que es la de máxima absorción
4.- TABULACION DE DATOS OBTENIDOS Y GRAFICOS
4.1.- Datos
Preparación de soluciones
Tabla N°1
Masa del KMnO4
Volumen de agua para diluir el H2SO4(cc)
0.01185g
5.55 ml
4.2.- Curva espectral
Tabla N°2
λmax (nm)
Absorbancia
0.126
0.119
528.5
548.5
4.3.- Curva de calibración
Tabla N°3
Soluciones
Absorbancia
λ (nm)
[E1] = 0.24 x10-4 M
0
0
[E2] = 0.48x10-4 M
0
0
[E3] = 0.72 x10-4 M
0.049
0.052
0.159
0.167
0.202
0.212
549.5
529.5
548.5
529.5
548.5
529.5
[E4] = 0.96 x10-4 M
[E5] = 1.20 x10-4 M
0.161
512.5
Tabal Nº 4
L(nm)
ABS
410
0.006
420
0.006
430
0.009
450
0.013
460
0.023
480
0.035
500
0.088
520
0.115
530
0.127
540
0.12
550
0.112
570
0.078
580
0.041
590
0.016
600
0.007
620
0.006
4.4.- graficos :
Grafico Nº 1
curva espectral del permanganato
0.14
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
ABS max(0.126)
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
400
450
500
λmax =528.5
550
600
LONGITUD DE ONDA (nm)
650
700
Curva de calibración
Tabla N°5
Soluciones
λ (nm)
Absorbancia
[E1] = 0.24 x10-4 M
0
0
[E2] = 0.48x10-4 M
0
0
[E3] = 0.72 x10-4 M
0.049
0.052
0.159
0.167
0.202
0.212
0.161
549.5
529.5
548.5
529.5
548.5
529.5
512.5
[E4] = 0.96 x10-4 M
[E5] = 1.20 x10-4 M
Tabla Nº 6
Concentracion M Absorbancia
0.24
0
0.48
0
0.72
0.049
0.96
0.159
1.2
0.202
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
0.25
y = 0.2463x - 0.0911
R² = 0.909
ABSORBANCIA
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0
-0.05
0.2
0.4
0.6
0.8
CONCENTRACION 10-4 M
1
1.2
1.4
Tabla Nº 7
Concentración M
Absorbancia
0.24
0
0.48
0
0.72
0.052
0.96
0.167
1.2
0.212
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
0.25
y = 0.2463x - 0.0911
R² = 0.909
ABSORBANCIA
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0
0.2
-0.05

0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
CONCENTRACION 10-4 M
Para calcular las curvas de calibración se convierte las concentraciones de
cada solución en ppm y µg/100ml
Tabla N°8
Concentración
ppm
µg/100ml
[E1] = 0.24 x10-4 M
1.318
131.8
[E2] = 0.48x10-4 M
2.637
263.7
[E3] = 0.72 x10-4 M
3.956
395.6
[E4] = 096 x10-4 M
5.274
527.4
[E5] = 1.20 x10-4 M
6.597
659.7
Ahora graficamos las curvas de calibración:
Tabla Nº 9
Absorbancia
ppm
0
0
3.956
0.052
5.274
0.167
6.597
0.212
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
0.25
ABSORBANCIA
0.2
y = 0.032x - 0.0189
0.15
0.1
0.05
0
0
-0.05
1
2
3
4
CONCENTRACION ppm
Tabla Nº 10
Concentracion
0
395.6
527.4
659.7
ABS
0
0.049
0.159
0.202
5
6
7
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
0.25
0.2
ABSORBANCIA
y = 0.0003x - 0.0181
0.15
0.1
0.05
0
0
100
200
-0.05
300
400
500
600
CONCENTRACION μg/100mL
5.- CALCULOS ANALÍTICOS
Ley de Beer:
A=  bc
Despejando:  
A
bc
A: Absorbancia
b : Paso óptico= 1cm.
C: concentración de la solución de permanganato de potasio ( 0.0003M )
Amax = 0.126
Entonces:
ξ = A / b. c = 0.126 / ( 1 cm ). ( 0.0003 M )
ξ = 410.0 ( M 1 .cm1 )
700
Determine los siguientes datos estadísticos: coeficiente de correlación r, la recta de
regresión de y sobre x y limite de detección (LDD) del método.
Resumen
Estadísticas de la regresión
Coeficiente de correlación
múltiple
0.99792586
Coeficiente de determinación
R^2
0.995856023
R^2 ajustado
0.994474697
Error típico
0.007879337
Observaciones
5
ANÁLISIS DE VARIANZA
Grados de
libertad
Promedio de los
cuadrados
Suma de cuadrados
F
Regresión
1
0.044758948
0.044758948
Residuos
3
0.000186252
6.2084E-05
Total
4
0.0449452
Coeficientes
Error típico
Estadístico t
720.942239
Probabilidad
Valor crítico de F
0.000113359
Inferior 95%
Superior 95%
Intercepción
-0.013081701
0.008263087
-1.583149271
0.21154625
-0.039378532
0.013215131
Variable X 1
2465.80125
91.83491597
26.85036758
0.00011336
2173.541561
2758.060939
r
 x  x y
i
i
y

i





2 
2 
 xi  x   yi  y  
 i

 i
1
2
Variable X 1 Curva de regresión ajustada
0.35
0.3
0.25
y = 2391.7x - 0.0057
R2 = 0.9962
Y
0.2
0.15
0.1
0.05
0
Y
Pronóstico para Y
Linear (Y)
Calculando el Límite de Detección (LDD):
La ecuación de la regresión y = 2391.7x - 0.0057
Calculando el Y = YB + 3SB
YB = 0.0057
para X = 0
El Limite de detección es SB = Sy/x
Entonces Y = YB + 3 Sy/x ... (1)
Calculando la desviación estándar Sy/x :
sy/ x
   y i  yˆ 2

 i
n2


1
2




y : valor pronosticado
n :numero de datos. En nuestro caso n=5
Sy/x = 0.007879337
Desviación estándar debido a la regresión.
En (1):
Y = 0.0057 + 3 x (0.007879337)
Y = 0.02934
Remplazando en la ecuación de la regresión: 0.02934= 2391.7x - 0.0057
5
X  1.465x10
5
Entonces el LDD es X  1.465x10
6.- DISCUSIONES:
En esta practica se tomo en cuenta la corrección de la absorbancia de la celda por lo
tanto los datos que obtenemos del espectrofotómetro tendrán mínima desviación del
valor verdadero.
De los resultados obtenidos de la rectas de regresión notamos q el valor de R2 o R
son aproximadamente la unidad lo q nos da una buena aproximación a la recta
pronosticada. Esto es, tenemos una buen recta de calibración para calcular la
concentración de una muestra problema cuya matriz es similar a la preparadas en
nuestro laboratorio,
7.- RECOMENDACIONES:
La precisión de las medidas de absorbancia depende mucho del uso y del
mantenimiento que se haga de las celdas. Las huellas dactilares, la grasa u otras
señales sobre las paredes de las celdas alteraran notablemente las características de
transmisión. Por ello es recomendable una limpieza completa antes y después de su
uso; la superficie de las ventanas no debe tocarse durante su manipulación. Las
cubetas contrastadas nunca deben secarse mediante la acción del calor, en un horno
o sobre una llama este tratamiento puede causar daños físicos o cambios en el camino
óptico. Las cubetas deberían calibrarse regularmente entre si con una disolución
absorbente.
La luz monocromática tiene "un solo color" (una longitud de onda). Aunque es
imposible producir luz monocromática, cuanto mejor es el monocromador más
estrecho es el intervalo de longitudes de onda del haz emergente.
8.- CONCLUSIONES :
9.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA:
- Skoog, D. A. y West, D. M., Análisis Instrumental, McGraw Hill, 1993
- Meloan, Clifton y Kiser, Robert, Problemas y Experimentos en Análisis
Instrumental, editorial Reverte Mexicana, S. A., 1973
- Miller, J. C. Y Miller, J. N., Estadística para Química Analítica, Adisson-Wesley
Iberoamericana, 1999.
10.- CUESTIONARIO
1. Son pocas las excepciones a la relación línea entre la absorbancia y la longitud de
trayecto a una concentración fija. Sin embargo es frecuente que se observen
desviaciones respecto de la proporcionalidad directa entre la absorbancia y
concentración cuando la longitud de trayecto b es constante. Entre ellas tenemos:
desviaciones reales, desviaciones instrumentales y desviaciones químicas. Describa
cada una de éstas desviaciones.
Las desviaciones a la Ley de Beer caen en tres categorías: reales, instrumentales y
químicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas ; si la absorbancia medida es mayor
que la real (+ ) o negativas (-) si la absorbancia medida es menor que la real , y llevan a
que no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la concentración.
Las desviaciones reales : provienen de los cambios en el índice de refracción del
sistema analítico, pues como e depende del índice de refracción de la muestra, la ley de
Beer sólo se cumple para bajas concentraciones, en donde el índice de refracción es
esencialmente constante, ya que no es la absortividad la que es constante sino la
expresión:
e = e verdadero h /(h 2+2)2
donde h es el índice de refracción de la solución.
Las desviaciones instrumentales provienen, en primer lugar de la utilización de luz no
monocromática, ya que la pureza espectral del haz de radiación proveniente de la
fuente, depende del ancho de banda espectral del monocromador. La deducción de la
ley de Beer supone radiación monocromática y los monocromadores en realidad
proporcionan una banda de longitudes de onda.
Cuando se hace una medida de transmitancia con luz de varias longitudes de onda, l' ,l''
... la intensidad del haz que emerge de la solución de muestra será ( Il' + Il'' ...) y la
intensidad del haz que emerge de la celda de referencia será ( I0l' + I0l '' ...) por lo que
la transmitancia leída será :
T = ( Il' + Il'' ...) / ( I0l ' + I0l'' ...) = ( Il' + Il '' ...) / ( I0l '10-e'bc + I0l ''10-e''bc...)
Entonces, la ley de Beer puede cumplirse con pequeños intervalos de error, si la
variación de la absortividad con la longitud de onda es constante en el intervalo de
longitudes de onda que el selector del instrumento deja pasar, siempre que el ajuste de la
longitud de onda nominal sea muy reproducible.
En el máximo de la curva del espectro de absorción, el coeficiente de absortividad
cambia más lentamente que en el resto de la banda, igualmente la sensibilidad a la
concentración es mayor en el máximo de la banda de absorción, porque la absortividad
tiene el valor máximo en ese punto. Es por esto, que normalmente se selecciona la
longitud de onda en el máximo de la banda para realizar las medidas
espectrofotométricas cuantitativas.
Se presentan también desviaciones instrumentales por luz desviada, entendiendo por
esta, la luz de otras longitudes de onda que se superponen a la banda de luz utilizada .
Cuando en los instrumentos se fija una longitud de onda nominal ,lx, el ancho de banda
espectral del monocromador condiciona la banda de luz que pasa, que corresponderá a
la región lx ± D l llamada región de la luz útil. La intensidad de esta banda de luz
disminuirá cuando ocurra la absorción de luz por parte de la muestra, al igual que puede
disminuir la intensidad de la luz desviada, sobre todo para l Ð 230 nm.
La luz que proviene de la celda de referencia induce una corriente fotoeléctrica en el
detector al igual que la luz que proviene de la muestra pero la luz desviada también
induce una corriente adicional en el detector, lo que lleva a una transmitancia falsa, T'' ,
que tiene el valor:
T'' = ( I + If ) / ( I0 + If ) donde If es la intensidad de la luz desviada.
Las desviaciones químicas a la ley de Beer también se llaman desviaciones aparentes
porque dependen de la naturaleza química del sistema en estudio y si se trabaja bajo
ciertas condiciones ( pH, concentración de reactivos, etc. ) es posible hacer que el
sistema cumpla dicha ley. Las desviaciones son causadas, generalmente, por equilibrios
en solución que involucran a la especie absorbente y alteran su concentración
originando desviaciones positivas o negativas.
Si alguna reacción química que ocurra en el sistema origina un producto que absorba
más fuertemente que la sustancia ensayada, a la longitud de onda a la cual se hace la
medida o longitud de onda analítica, se producirá una desviación positiva. Si, al
contrario, se origina un producto que no absorbe a la longitud de onda analítica, la
concentración de la sustancia se verá disminuida y se originará una desviación negativa.
Entre los tipos de reacciones químicas que llevan a desviaciones de la ley de Beer están:
reacciones de asociación-disociación, reacciones ácido-base, reacciones de
polimerización, reacciones de formación de complejos y reacciones con el solvente.
2. Evalúe las cantidades restantes de la tabla adjunta. Cuando sea necesario use 200
como masa molar del analito.
C
Solución
A
%T
0,172
 (Lmol cm
1
)
4,23x103
-1
-
44,9
0,52
a (ppn-1cm-1)
7,95x10
M
ppm
1.00
1,35x10-4
0,0258
3
1,00
39,6
0,0912
3,73x103
1,76
0,100
1,00
1,50
83,6
0,798
11,1
5,23
b (cm)
1,35x104
9,78x103
1,71x10-4
8,07x10-6
33,6
7,07x10-5
5,24
0,179
1,00
7,19x10-5
Solucion:
Solución
A
%T
0,172
0.348
0,52
0.40
0.064
0,078
0,798
0,954
0,281
0,179
67,3
44,9
30,2
39,6
86,3
83,6
15,9
11,1
5,23
66,2
 (Lmol
1
cm-1)
4,23x103
5.15 x103
7,95x103
18,3 x103
3,73x103
9,67x103
3,16x103
1,35x104
9,78x103
2,49 x103
C
a (ppn-1cm-1)
b
(cm)
M
ppm
0.0210
0,0258
0.0400
0,0912
0,0187
0,0484
0.3155
0,0688
0,0486
0,0124
1.00
0.50
1,00
2.49
0,100
1,00
1,50
0,98
1,10
1,00
0.41x10-4
1,35x10-4
0.65x10-4
0.088x10-4
1,71x10-4
8,07x10-6
1,68x10-4
7,07x10-5
2,62x10-5
7,19x10-5
8.20
27.0
13.0
1,76
34,2
1,61
33,6
14,14
5,24
14,38
-
3. Un compuesto X se determina mediante espectrofotometría UV/visible. Se prepara
una curva de calibración a partir de las soluciones patrón de X, con los resultados
siguientes: 0,50 ppm, A=0,24; 1,5 ppm, A=0,36; 2,5 ppm, A=0,44; 3,5 ppm, A=0,59
y 4,5 ppm, A=0,70. Halle la pendiente e intersección de la curva de calibración, el
error estándar de y, la concentración de la solución X desconocida que reporta una
absorbancia de 0,5.
C(ppm)
Absorbancia
0.5
0.24
1.5
0.36
2.5
0.44
3.5
0.59
4.5
0.7
Solución desconocida X: absorbancia=0.5
Reemplazando en la ecuación de la grafica:
0.5=0.115 x + 0.1785
X= 2.79 ppm
Entonces la concentración de la solución desconocida es 2.79 ppm.
Error estándar de y:
1
sy / x
   yi  yˆ 2  2


 i

 n2 


Sy/x= {0.133/3}1/2 = 0.2107
4. Un método de análisis de Fe3+ que puede ser usado para una variedad de matrices,
forma complejos altamente coloreados de Fe3+-ácido tioglicólico. El complejo
absorbe fuertemente a 535 nm. La estandarización del método es difícil usando
estándares internos. Un estándar de trabajo con 10.00 ppm de Fe+3 es preparado
transfiriendo 10 mL de una solución stock de 100 ppm de Fe+3. Estándares de
calibración de 1.00, 2.00, 3.00, 4.00, and 5.00 ppm son preparados para luego
transferir cantidades apropiadas de solución stock de 100.00 ppm en una fiola
volumétrica de 50 mL conteniendo cada una 5mL de ácido tioglicólico, 2mL de 20
w/v de citrato de amonio y 5mL de 0.22M NH3. Después de diluir a un volumen
determinado y mezclar, los valores de absorbancia de los estándares externos son
medidos vs un blanco de trabajo apropiado. Las muestras son preparadas para
análisis tomando una porción de aproximadamente 0.1 g de Fe+3 , disolviendo con
una mínima cantidad de HNO3 y diluir a un volumen de 1L en una fiola
volumétrica. 1 mL de alícuota es la cantidad que es transferida a una fiola de 50 mL,
(a)
(b)
(c)
(d)
5.
con 5 mL de ácido tioglicólico, 2 mL de 20% w/v de citrato de amonio y 5 mL de
0.22 M de amoniaco y diluido a volumen. La absorbancia de la solución es usada
para determinar la concentración de Fe+3 en la muestra.
Cuál es el blanco apropiado para esta muestra
Citrato de amonio es agregado para prevenir la precipitación de Al+3. Cómo afectará
la presencia de trazas de Fe+3 en citrato de amonio en la concentración reportada de
Fe en la muestra.
Porqué el procedimiento usa una cantidad de aproximadamente 0.1g de Fe+3 en la
muestra
Es desconocido para el analista, que 100 mL volumétricos del estándar de trabajo de
Fe+3 con 10.00 ppm tiene un volumen significativamente menor que 100.00 mL
Cómo se afectaría la concentración reportada de Fe+3 en la muestra
Se desarrolló un método espectrofotométrico para análisis de analgésicos
conteniendo aspirina, fenacitina y cafeína, La muestra es disuelta en CHCl3 y
extraída con una solución acuosa de NaHCO3 para remover la aspirina. Después de
terminar la extracción, el cloroformo es transferido a una fiola volumétrica de 250
mL y diluido a volumen de CHCl3. Una porción de la solución de 2 mL con CHCl3
es diluida a un volumen de 200 mL con CHCl3 en una fiola volumétrica. La
absorbancia de la solución final medida a longitudes de onda de 250 nm y 275 nm
en las cuales las absorbancias: en ppm-1cm-1, para cafeína y fenacitina son a250 =
0.0131 y a275 = 0.0485 fenacitina: a250 = 0.0702 y a275 = 0.0159. La aspirina es
determinada por la neutralización de NaHCO3 en la solución acuosa y extrayendo la
aspirina con CHCl3. Los extractos son combinados y diluidos a 500 mL en una fiola
volumétrica. Una porción de 20 mL de la solución es colocada en una fiola de
100mL y diluida a volumen con CHCl3. La absorbancia de esta solución es medida a
227 nm, donde el valor que corresponde a la aspirina es 0.00682 ppm-1cm-1. Un
tableta de analgésico tratada para este procedimiento es encontrado con
absorbancias de 0.466 a 250 nm, 0.164 a 275 nm, y 0.600 a 277 nm cuando usamos
una celda de 1.00 cm de paso de luz. Reportar los miligramos de aspirina, cafeína y
fenacina en la tableta de analgésico