THC ONE STEP RAPID TEST REF: OG06640 – CONTENIDO 20 PLACAS Test rápido para la detección cualitativa metabolitos de THC en orina humana. de USO PREVISTO La prueba THC One Step Rapid Test es un inmuno ensayo cromatográfico de flujo lateral para la detección cualitativa de metabolitos de THC (11-Nor-∆9-THC-9COOH) a concentraciones iguales o superiores a 50 ng/mL. Este ensayo proporciona sólo un resultado analítico preliminar. Debe emplearse un método alternativo químico para confirmar el resultado, como la cromatografía de gases/ espectrometría de masas (GC/MS). RESUMEN THC (∆9—tetrahidrocannabinol) es el principio activo del cannabis (marihuana). Cuando se fuma o se administra oralmente, el THC produce efectos de euforia. Los usuarios ven afectada la memoria reciente y la capacidad de aprendizaje. A largo tiempo, un uso relativamente frecuente se puede asociar a trastornos de comportamiento. El pico del efecto de la marihuana administrada fumando ocurre en 20-30 minutos y la duración es de 90-120 minutos después de un cigarro. Niveles elevados de metabolitos en la orina se encuentran al cabo de horas de exposición y permanecen detectables hasta 3-10 días después de fumar. El principal metabolito excretado en la orina es ácido 11-nor-∆9tetrahidrocarbinol-9- carboxílico (∆9-THC-COOH). THC One Step Rapid Test da un resultado positivo cuando la concentración de THC-COOH en orina excede de 50 ng/mL. Este es el valor límite de prueba establecido para muestras positivas por la Administración de los Servicios de la Salud Mental y Abuso de Sustancias (SAMHSA, USA) PRINCIPIO La prueba THC One Step Rapid Test es un ensayo inmunológico competitivo. Los metabolitos de THC que puedan estar presentes en muestras de orina, compiten contra el conjugado de metabolito de THC por los lugares de reacción de su anticuerpo específico. Durante la prueba, las muestras de orina migran por acción capilar. Si el metabolito de THC está presente en la muestra de orina por debajo de la concentración límite, no se saturarán los puntos de reacción del anticuerpo que reaccionarán con el conjugado de THC y se formará la línea en la región de test. Una muestra de orina positiva de droga no generará línea de color en la región de test porque el metabolito habrá saturado todos los puntos de reacción del anticuerpos impidiendo que reaccionen con el conjugado de THC. Siempre debe aparecer una línea coloreada en la región de control, indicando que se ha dispensado el volumen adecuado de muestra y que la difusión a lo largo de la membrana ha sido correcta. REACTIVOS La placa contiene conjugado de metabolito de THC y anticuerpos monoclonales anti-metabolito THC. La línea de control contiene anticuerpos policlonales de cabra. PRECAUCIONES Este test sólo puede ser empleado por personal profesional sanitario o de laboratorio debidamente cualificado. No usar después de la fecha de caducidad. El test debe permanecer con el precinto hasta su uso. Todas las muestras deben manipularse como potencialmente infecciosas. Los tests utilizados se deben desechar según normativa local vigente. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El kit es estable hasta fecha de caducidad si se guarda dentro del estuche cerrado a 2-30 ºC. NO CONGELAR. TOMA DE MUESTRAS Y PREPARACION Las muestras de orina se deben recolectar en un contenedor limpio y seco, pudiéndose emplear la orina de cualquier momento del día. Las muestras con precipitados visibles deben centrifugarse, filtrarse, o dejarse sedimentar para obtener una muestra adecuada para el análisis. Las muestras de orina se pueden almacenar a 2-8 ºC hasta 48 horas. Para almacenamientos prolongados, las muestras se pueden congelar y almacenar por debajo de -20ºC. Las muestras congeladas deben descongelarse y mezclarse bien. COMPONENTES DEL KIT - Placas - Cuentagotas desechable - Instrucciones Materiales necesarios no incluidos: Contenedor de recolección de muestras, controles externos y cronómetro. Tel: (+34) 93 480 80 47 Fax: (+34) 93 373 00 92 e-mail: ral@ral-sa.com web: www.ral-sa.com INSTRUCCIONES DE USO La placa, la muestra de orina y /o controles deben estar a temperatura ambiente (15-30ºC) antes del test. 1. Extraer la placa de su envase. 2. Colocar la placa sobre una superficie limpia y nivelada. Sostener el cuentagotas verticalmente y transferir 3 gotas llenas de orina (aproximadamente 100 µL) al pocillo de muestra (S) de la placa. Evitar la formación de burbujas en el pocillo de muestra (S). 3. Esperar hasta que aparezca la línea(s) de color. Los resultados deben leerse a los 5 minutos. No interpretar el resultado pasados 10 minutos del inicio del test. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS POSITIVO: No aparece la línea en la región del test (T). Aparece una línea de color en la región de control (C). Los resultados positivos indican que la concentración de metabolito de THC en la muestra de orina excede el valor límite definido. NEGATIVO: La aparición de una línea coloreada en la región de control (C) y una línea coloreada en la región de test (T) indica un resultado del test negativo. Este resultado negativo indica que la concentración del metabolito de THC en la muestra de orina está por debajo de los niveles límite definidos para esta prueba.* *NOTA: La sombra de color en la región del test (T) puede variar, pero debiera considerarse negativa siempre que aparezca una línea tenue. NO VÁLIDO: La línea de control no aparece. El volumen de la muestra es insuficiente o se ha realizado incorrectamente la prueba. Revisar el procedimiento y repetir la prueba con un nuevo test. Si persiste el problema, contactar con el distribuidor. CONTROL DE CALIDAD La línea coloreada que aparece en la región de control (C) es el control interno. Confirma que se ha dispensado un volumen de muestra suficiente, y que el sistema ha funcionado correctamente. No se suministran controles en este kit. Sin embargo, se recomienda analizar controles positivos y negativos para confirmar que el procedimiento del test es correcto. LIMITACIONES THC One Step Rapid Test proporciona sólo resultados analíticos preliminares cualitativos. Se debe utilizar un método de confirmación como la cromatografía de gases/ espectrometría de masas (GC/MS). Hay una posibilidad de que errores técnicos o de procedimiento, así como la interferencia de otras sustancias en las muestras de orina puedan causar resultados erróneos. Adulterantes, como lejía y/o alumbre en las muestras de orina pueden producir resultados erróneos a pesar del método analítico usado. Si se sospecha que haya adulteración, el test debe repetirse con otra muestra de orina. Un resultado positivo no indica el nivel de intoxicación, modo de administración o concentración en orina. Un resultado negativo puede no necesariamente indicar orina libre de droga. Se pueden obtener resultados negativos cuando la droga está presente a niveles inferiores del límite de detección. El test no distingue entre drogas de abuso y determinados medicamentos. CARACTERISTICAS TÉCNICAS Exactitud Se realizó una comparación empleando el THC One Step Rapid Test con tests rápidos de droga disponibles comercialmente. El test se realizó en muestras de orina provenientes de individuos a los que se debía realizar una prueba de drogas. Los resultados presuntamente positivos se confirmaron por GC/MS. Se obtuvieron los siguientes resultados: THC One Positivo Step Negativo Total % concordancia entre kits Otros tests rápidos Positivo Negativo 143 0 0 157 143 157 100% 100% Total 143 157 300 Resultados comparativos entre el kit THC One Step Rapid Test y GC/MS a 50 ng/ml: THC One Positivo Step Negativo Total % concordancia GC/MS GC/MS Positivo Negativo 119 24 3 154 122 178 98% > 87% Total 143 157 300 91% Resultados comparativos entre el kit THC One Step Rapid Test y GC/MS a 25 ng/ml: THC One Positivo Step Negativo Total % concordancia GC/MS Positivo 137 4 141 97% GC/MS Negativo 6 153 159 96% Total 143 157 300 97% Ochenta (80) de estas muestras fueron también analizadas por un usuario no entrenado. A partir de los datos GC/MS, se observa una concordancia estadística similar para muestras positivas y muestras negativas con los resultados obtenidos por el personal del laboratorio. Sensibilidad analítica: A un pool de orina libre de droga se le agregó 11-Nor-∆9-THC-9 COOH a las concentraciones indicadas a continuación, obteniéndose los siguientes resultados: THC (ng/ml) 0 25 37.5 50 62.5 75 % cut-off N 0 -50% -25% Cut-off +25% +50% 30 30 30 30 30 30 Lectura visual Negativo Positivo 30 0 30 0 10 20 4 26 3 27 0 30 Especificidad: La tabla siguiente muestra la lista de las concentraciones de los componentes (ng/mL) que se detectan positivos en orina mediante la prueba THC One Step Rapid Test a los 5 minutos. Cannabinol 11-Nor-∆8-THC-9 COOH 11-Nor-∆9-THC-9 COOH ∆8-THC ∆9-THC 20000 30 50 15000 15000 Precisión: Se realizó un estudio en el que usuarios no entrenados emplearon 3 lotes distintos de producto para demostrar la precisión en el ciclo, entre ciclos y la del usuario en muestras de distintas concentraciones de THC, valoradas en GC/MS, obteniéndose los siguientes resultados: Concentraciones Inferior en 25% al cut-off ± 25% respecto del cut-off Superior en 25% al cut-off Total Concordancia resultados 98% 83% 100% 92% Efectos de la densidad específica urinaria: A veintiséis (26) muestras urinarias de densidad normal, alta y baja se les agregó 11-Nor-∆9-THC-9 COOH hasta concentraciones finales de 25 y 75 ng/ml. No se observaron diferencias entre las muestras de distinta densidad urinaria. Efectos del pH urinario: El pH de un pool de orinas negativas se ajustó a un rango (5 – 9) en incrementos de 1. Se le agregó 11-Nor-∆9-THC-9 COOH hasta concentraciones finales de 25 y 75 ng/ml. No se observaron diferencias entre las muestras de distinto pH. Reactividad cruzada: Un estudio fue realizado para determinar la reactividad cruzada del test THC One Step Rapid Test. Los siguientes componentes no muestran reactividad cruzada cuando se analizaron con THC One Step Rapid Test a una concentración de 100 µg/mL: Acetaminofen N- Acetilprocainamida Aminopirina Apomorfina Atropopina Ácido benzoico Bilirrubina Cafeína Cloralhidrato Clorotiacida Clorpromazina Colesterol Cortisona Creatinina Dextrometorfán Diflunisal Difenhidramina I-Ψ-Efedrina Estrone-3-sulfato [1R,2S] (-) Efedrina Eritromicina Furosemida Acetofenetidina Ácido Acetilsalicílico Amoxicilina I-Ácido ascórbico Aspartamo Ácido bencilíco Benzetamina* d/I-Clorofeniramina Cloroquina Clodinina I-Cotinina Deoxicorticosterona Diclofenco Digoxina Ecgonina metil ester β-Estradiol Etil-p-aminobenzoato I(-)_Epinefrina Fenoprofeno Ácido gentísico Hemoglobina Hidroclorotiacida Acido o-hidroxihipurico p-Hidroxitiramina Iproniacida Ixosuprina Ketoprofeno Loperamida Fenelcina I-Fenilefrina Fenilpropanolamina Quinacrina Ácido Salicílico Sulfametacina Tetraciclina Tetrahidrocortisona 3 (β-D-glucuronida) Tiamina d/I-Tirosina Triamtereno Timetroprim d/I- Triptófano Ácido úrico Zomepiraco Hidralazina Hidrocortisona p-Hidroxianfetamina Ibuprofeno d/I-Isoprterenol Ketamina Labetalol Meperidina Metoxifenamina Ácido nalidixico Naltrexona Niaciamina Noretindrona Noscapina Ácido oxálico Oximetazolina Penicilina-G Perferacina Trans-2-fenilciclo-propilamina hidroclorida β-Feniletamina Predinosolona d/I-Propanol d-Seudoefrina Quinina Ranitidina Serotonina Sulindaco Acetato-3- tetrahidrocortisona Tioridacina Tolbutamida Trifluorperacina Triptamina Tiramina Verapamilo BIBLIOGRAFÍA Stewart DI, T Inoba, M Ducassen, W Kalow. Clin. Pharmacol. Ther. 1979; 25:264 Ambre J. J. Anal. Toxicol. 1985; 9:241 Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd Ed. Biomedical Publ., Davis, CA. 1982: 488 Hawks RL, CN Chiang. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute for Drug Abuse (NIDA), Research Monograph 73, 1986 IU/OG06640/R0/0911 FABRICADO POR: ZHEJIANG ORIENT GENE BIOTECH CO, LTD. Ji’er road, Jiankang industrial area medicine, Anji economic development zone, Zhejiang, CHINA - www.orientgene.com