Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso Técnicas de siembra - 1 U.T. 15 -1 Bloque temático III Técnicas de siembra y recuento bacterianos Las técnicas de siembra se pueden dividir desde el punto de vista docente y práctico en tres apartados: - Inoculaciones o siembras - Aislamientos - Recuentos I. Técnicas de inoculación: Las técnicas de inoculación son aquellas cuya finalidad es depositar una parte de la muestra objeto de estudio sobre el medio de cultivo para obtener un crecimiento visible en forma de colonias. Pueden realizarse en: A. En medio líquido 1. En tubo: a. Con asa de platino (1) a partir de una colonia (2) a partir de una suspensión bacteriana (3) a partir de una muestra biológica b. Con torunda o escobillón (1) a partir de una muestra biológica (2) a partir de una suspensión bacteriana c. Con pipeta (1) a partir de una suspensión bacteriana B. En medio sólido 1. En placa a. Inoculación parcial (1) Con asa de platino (2) Con torunda b. Inoculación total (1) Con asa de platino (2) Con torunda (a) en una sola dirección (b) en tres direcciones (3) Por inundación (4) Por inmersión (5) Con asa de Drigalsky (6) En profundidad (7) Por contacto 2. En tubo a. Inclinado (1) Por picadura en profundidad (2) Por estría en superficie inclinada b. Recto (1) Por picadura en profundidad C. En medio semisólido 1. En tubo a. Por picadura en profundidad G.A. Díaz; Elvira Ibáñez I. E. S. Jaime Ferrán Clúa Profesores Técnicos de Formación Profesional. San Fernando de Henares. (28830 Madrid) Curso 2004-2005 Código 28038616 Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso Técnicas de siembra - 2 U.T. 15 -1 Bloque temático III II. Técnicas de aislamiento Las técnicas de aislamiento se realizan fundamentalmente sobre medio sólido en placa, salvo algunas excepciones. El objetivo de las técnicas de aislamiento es procurar la separación necesaria de las colonias bacterianas sobre la superficie del medio de cultivo para que éstas puedan ser procesadas individualmente. Pueden realizarse: A. En medio sólido: 1. En tubo: No se hace rutinariamente. 2. En placa a. Con asa de platino (estría) (1) Estría simple o agotamiento (2) 3 giros o estría múltiple (3) 4 cuadrantes b. Por dilución III. Recuentos celulares bacterianos Los recuentos bacterianos se efectúan para hacer un recuento del número de microorganismos que hay presentes en una muestra líquida. Los recuentos cuantitativos no se pueden efectuar sobre muestras no fluidas. A. En medio líquido 1. Turbidimetría: Escala de MacFarland 2. Cámaras de recuento 3. Bioluminiscencia (ATP) 4. Contadores electrónicos de partículas B. En medio sólido 1. Mediante asa calibrada e inoculación total a. Con asa de platino b. Con asa de Drigalsky 2. Mediante diluciones seriadas a.Inoculación total (1) en profundidad (2) en superficie G.A. Díaz; Elvira Ibáñez I. E. S. Jaime Ferrán Clúa Profesores Técnicos de Formación Profesional. San Fernando de Henares. (28830 Madrid) Curso 2004-2005 Código 28038616