CK- MB

CK- MB
Creatin-kinasa, isoenzima MB.
Ensayo cinético UV. NAC activado / Inmunológico.
Conservar de 2 a 8 °C.
Sólo para uso "in vitro".
INTRODUCCIÓN
La creatín kinasa está dividida en tres isoenzimas: MM o CK3 (del
músculo esquelético), BB o CK1 (cerebral) y MB o CK2 (cardiaca).
En el infarto del miocardio posee un valor diagnóstico (especialmente
la fracción MB) en los primeros días, junto a las transaminasas y a
la lactato deshidrogenasa.
APLICACIÓN PROPUESTA
El método es válido para determinar CK-MB en suero y plasma
humanos.
MATERIAL NECESARIO
Micropipetas.
Equipo fotométrico con posibilidad de lectura a 340 nm o de superior
calidad (programable o automático).
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La CK-MB está formada por las subunidades CK-B y CK-M. La
fracción CK-M está inhibida por un anticuerpo específico que no
influye en la fracción CK-B. La restante actividad de esta fracción
que corresponde a la mitad de la actividad de la CK-MB es determinada mediante técnica cinética UV al igual que CK-NAC.
CONTENIDO
R1 Tampón
CK-MB
R2 Comprimidos
CK-MB
Imidazol pH 6,7
Glucosa
Acetato Magnesio
EDTA
100 mmol/L
20 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
Ac. Anti-CK-M
ADP
AMP
Diadenosin-5-P
NADP+
Hexoquinasa (HK)
G-6-PDH
N-acetilcisteina
Creatin-fosfato
2000 UI/L
2 mmol/L
5 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
2500 UI/L
1500 UI/L
20 mmol/L
30 mmol/L
PREPARACIÓN Y ESTABILIDAD
Disolver un comprimido R2 en un frasco de Tampón R1.
La estabilidad del reactivo reconstituído es de 8 días de 2 a 8 ºC ó 24
horas de 15 a 25 ºC.
R3 es estable hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado ó con EDTA.
La hemólisis interfiere en el ensayo.
La actividad de la CK-MB en el suero disminuye: a 4 ºC un 10 % al
cabo de 24 horas, o bien a 25 ºC un 10 % al cabo de 1 hora.
TÉCNICA
Longitud de onda: 340 nm.
Temperatura: 25/30/37 ºC.
Cubeta: 1 cm paso de luz.
Lectura: frente aire o agua dest.
Reactivo al uso
Muestra
2,5 mL
100 μL
Mezclar y dejar reposar 10 minutos a 25/30/37 ºC.
Leer la absorbancia A1 y después de exactamente 5 min, leer la
extinción A 2
Calcular ΔA = A2 - A1
CÁLCULO
Cálculo de la CK-MB en la muestra: ΔA x 1651 = UI/L
Cálculo de la fracción CK-B: ΔA x 825 = UI/L
CONVERSIONES
1 μkat = 60 UI
1 UI = 16,67 x 10-3 μkat
LINEALIDAD
Antes de efectuar la determinación de CK-MB, se determinará la
actividad de CK Total mediante el método CK-NAC activado. Si la
actividad de CK es superior a 1000 UI/L, las muestras deberán
diluirse a 1:2 con NaCL al 0,9 % y multiplicar el resultado por 2.
VALORES DE REFERENCIA
La probabilidad de un infarto de miocardio es elevada si las siguientes
condiciones están reflejadas:
25 ºC
30 ºC
37 ºC
CK Hombres
> 80 UI/L
> 130 UI/L
> 190 UI/L
CK Mujeres
> 70 UI/L
> 110 UI/L
> 167 UI/L
CK-MB
> 10 UI/L
> 15 UI/L
> 24 UI/L
La actividad de la CK-MB se encuentra entre el 6 y el 25 % de la
actividad total de la CK.
En caso de sospecha de un infarto de miocardio y los valores de CKMB encontrados son inferiores a los límites indicados, podría
tratarse de un infarto reciente. En dicho caso se repetirá la determinación al cabo de 4 horas.
FACTORES DE CONVERSIÓN DE TEMPERATURAS
Temp.
reacción
Temperatura deseada
25 °C
30 °C
37 °C
25 °C
30 °C
37 °C
1,00
0,65
0,42
1,53
1,00
0,64
2,38
1,56
1,00
PRECAUCIONES
Contiene pequeñas cantidades de azida sódica. Evítese el contacto
con la piel dañada y las mucosas.
BIBLIOGRAFÍA
Rec. GSCC (DGKC); J.Clin.Chem. Clin. Biochem. 15, 255 (1977).
Szasz, G. Gruber, W. Clin. Chem. 22, 650 (1976).
Fischbach, F. A manual of Diagnostic Tests. 4ta edición. J. B. Lippinccott Company (1992).
Balcells, A. La clínica y el laboratorio. 18th edición. (1999).
PRESENTACIÓN
Cód.: 1001054
Cód.: 1001055
6 x 2,5 mL
19 x 2,5 mL + Control
6 Det. mínimas
19 Det. mínimas
Ed.Julio.2003
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