Cromatografía líquida Clasificación Cromatografía líquida convencional Adsorción Reparto Cambio iónico Exclusión Afinidad HPLC (CLAR) Cromatografía líquida plana Capa fina Papel Cromatografía líquida convencional eluyente capa protectora (arena, papel de filtro) relleno disco de vidrio sinterizado . vacío a) b) Cromatografía líquida ADSORCION (CLS) Adsorbentes: gel de sílice (SiO2.xH2O) (activación) alúmina (Al2O3.xH2O) Disolventes: serie eluotrópica (ordenación según la capacidad relativa para desplazar solutos de un adsorbente dado. Ej (gel de sílice) agua>metanol>acetona>ac. etilo>cloroformo>benceno>tolueno> etc REPARTO (CLL) Normal: fase estacionaria polar; Inversa: fase estacionaria no polar Soportes sólidos: gel de sílice, tierra de diatomeas, celulosa, almidón, microbolas de vidrio Fase estacionaria: agua (para muchos compuestos orgánicos) Eluyentes: cloroformo, Cl4C, hidrocarburos, etc. Cromatografía de cambio iónico R-H+ + M+ <--> R-M+ + H+ Kd = [M+]R [H+] / [M+] [H+]R Resinas de cambio iónico Resinas ácidas y básicas Exclusión molecular Exclusión molecular Exclusión molecular Separación de proteínas Geles O = CH2=CH–CONH2 (CH2=CH–C–NH–)2CH2 Acrilamida NN'-metilenbisacrilamida CONH2 CONH . – CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH – CONH CONH CH2 CONH CH2 CONH CONH2 CONH2 – CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH– CONH CH2 CONH2 CONH CONH2 –CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH– CONH CONH Cromatografía de afinidad C de A: fundamento Equipo HPCL Cromatógrafo HPLC Bomba recíproca Bomba recíproca Bomba de desplazamiento Válvula de entrada Eluyente Válvula de salida Columna Cámara conteniend eluyente Detector de índice de refracción Detector electroquímico Detector de fluorescencia Derivatización Bucle Columna Detector Baño de agua Bomba . Reactivo . Cromatografía plana Cromatografía en capa fina Cromatografía en capa fina Cromatografía en capa fina Cromatografía en capa fina Cromatografía en papel Cromatografía en papel Cromatografía de fluidos supercríticos Zona supercrítica 80 70 P, atms. Punto crítico (31.3ºC, 72.9 atms.) 60 Líquido 50 Sólido 40 30 Gas 20 10 Punto triple (–56.4 ºC, 5.11 atms.) –80 –60 –40 –20 0 20 t, ºC 40