A r c h . Biol. M e d d E x p e r . 3:33-38, 19-66 N<? !51 METABOLISMO DEL ETANOL EN RATAS CON CIRROSIS HEPÁTICA EXPERIMENTAL PRODUCIDA POR CCL. III. DESTINO DEL ETANOL-1-C INCUBADO CON CORTES DE T E J I D O ADIPOSO EN PRESENCIA Y EN AUSENCIA DE G L U C O S A * 14 Ethanol metabolism in rats with experimental liver cirrhosis. I I I . F a t e of e t h a n o l - l - C incubated with adipose tissue slices in presence and absence of glucose. 14 WANDA SOLODKOWSKA, ROSA ALVARADO, ELIANA MUÑOZ, NORA NATIVIDAD Instituto de Investigaciones SEGOVIA-RIQUELME sobre Alcoholismo. Santiago, y JORGE Universidad JARA, MARDOTJES de Chile, Casilla 12967, Chile. Recibido para publicación el 2 3 de Febrero de 1 9 6 6 . RESUMEN 1 4 E n e x p e r i m e n t o s de i n c u b a c i ó n de e t a n o l - l - C e n c o n c e n t r a c i o n e s de 0,2 y 2 m g / m l e n p r e s e n c i a de cortes de t e j i d o a d i p o s o se e s t u d i ó la o x i d a c i ó n hasta C 0 y la i n c o r p o r a c i ó n e n lípidos. El tejido a d i p o s o p r o v e n í a de ratas de a m b o s s e x o s de l i n a j e "no b e b e d o r " ( A ) y "bebedor" ( B ) c o n cirrosis h e p á t i c a o c a s i o n a d a p o r C C 1 y testigos. Se e s t u d i ó a d e m á s el e f e c t o de la p r e s e n c i a d e g l u c o s a en el m e d i o de i n c u b a c i ó n . L o s r e s u l t a d o s m o s t r a r o n que no h a y diferencia en la c a n t i d a d de e t a n o l o x i d a d o a C 0 e n t r e l o s a n i m a l e s tratados con C C 1 y testigos. E n c a m b i o la i n c o r p o r a c i ó n en l í p i d o s f u e s i g n i f i c a t i v a m e n t e m a y o r en l o s a n i m a l e s tratados q u e e n l o s t e s t i g o s ( 2 P < 0 , 0 0 1 ) . La p r e s e n c i a de g l u c o s a en el m e d i o de i n c u b a c i ó n a u m e n t ó en f o r m a alt a m e n t e s i g n i f i c a t i v a ( 2 P < 0 , O Ü ! l ) la i n c o r p o r a c i ó n de carbono 1 del etanol, t a n t o e n el tejido adiposo p r o v e n i e n t e de a n i m a l e s t r a t a d o s c o n C C 1 c o m o de t e s t i g o s ; pero no i n f l u y ó sobre la v e l o c i d a d de o x i d a c i ó n de e s t e substrato. En l o s e x p e r i m e n t o s c o n 2 m g / m l de e t a n o l la o x i d a c i ó n de e s t e substrato hasta C0 fue significativamente m a y o r q u e e n la c o n c e n t r a c i ó n de 0,2 m g / m l ( P < 0 , 0 0 1 ) , m i e n t r a s q u e la i n c o r p o r a c i ó n de e t a n o l e n l í p i d o s n o f u e difer e n t e e n l o s e x p e r i m e n t o s t e s t i g o s con 0,2 y 2 m g / m l de e t a n o l y l e v e m e n t e m a y o r ( 2 P < 0 , 0 5 ) en l o s e x p e r i m e n t o s de i n c u b a c i ó n de t e j i d o a d i p o s o d e ratas cirróticas c o n 2 m g / m l de e t a n o l e n el m e d i o . N o se o b s e r v ó d i f e r e n c i a s de s e x o ni de l i n a j e e n n i n g u n o de los g r u p o s experimentales. 2 4 2 4 4 2 INTRODUCCIÓN dad de oxidación de este substrato hasta C 0 fue equivalente en cirro ticos y testigos. Esta diferencia no parece ser causada por una diversa velocidad de incorporación del etanol en lípidos hepáticos, puesto que la actividad encontrada en la grasa de cortes de hígado incubados con e t a n o l - l - C fue equivalente en los animales cirróticos y en los testigos ( 2 ) . Es un hecho bien establecido que en el tejido adiposo de la rata se forman lípidos a partir de hidratos de carbono y de acetato (3, 4 ) . P o r este motivo hemos estudiado si la intoxicación crónica con 2 En una comunicación anterior (1) hemos mostrado q u e las ratas con cirrosis hepática experimental producida por intoxicación crónica con CClt eliminaban más rápidamente el etanol de la sangre que los testigos, mientras que la veloci* L o s gastos del presente trabajo h a n sido financiados parcialmente p o r la C o m i s i ó n de A y u d a a la I n vestigación C i e n t í f k a de la Facultad de Medicina. U n i versidad de Chile ( P r o y e c t o N 6 1 . 3 6 ) y la F u n d a ción Rockefeller en u n p r o g r a m a c o n j u n t o ( G r a n t N? 6 3 0 1 5 ) . 9 14 34 W. SOLODKOWSKA ET AL. CC1 m o d i f i c a l a v e l o c i d a d d e i n c o r p o r a ción del etanol en los lípidos del tejido adiposo, c u a n d o se incuba una solución d e etanol con cortes de este tejido. P o r o t r a p a r t e , d i v e r s o s a u t o r e s ( 5 , 6, 7) h a n m o s t r a d o q u e la v e l o c i d a d d e incorporación del acetato en lípidos del tejido adiposo es a c e l e r a d a c u a n d o la incubación se realiza en presencia de glucosa. E r a e n t o n c e s d e i n t e r é s c o n o c e r la i n f l u e n c i a d e la g l u c o s a e n la i n c o r p o r a ción del etanol e n los lípidos de cortes d e tejido adiposo provenientes de ratas int o x i c a d a s c o n CCI4 y n o r m a l e s . P o r ú l timo, convenía hacer estos experimentos en ratas de ambos sexos de los linajes "bebedor" y "no bebedor" (8) para estudiar una influencia eventual del sexo o del linaje. 4 MATERIAL Y MÉTODOS S e u t i l i z a r o n ratas a l b i n a s de a m b o s s e x o s p r o v e n i e n t e s de los l i n a j e s "no b e b e d o r " ( A ) y "bebedor" ( B ) de este I n s t i t u t o , a l i m e n t a d a s c o n la dieta c o m ú n del p l a n t e l . U n g r u p o de ratas se s o m e t i ó d i a r i a m e n t e a la i n h a l a c i ó n de u n a a t m ó s e f r a de C C 1 d e n t r o de una c a m p a n a de v i d r i o , d u r a n t e un m i n u to. D e s p u é s de al m e n o s 10 s e m a n a s de trat a m i e n t o se dio m u e r t e a l o s a n i m a l e s y se e x t r a j o r á p i d a m e n t e el t e j i d o a d i p o s o del m e s e n t e r i o , del cual se h i c i e r o n cortes c o n una tijera fina y se c o l o c a r o n e n s o l u c i ó n de R i n g e r K r e b s fosfato ( p H 7,2) e n b a ñ o de h i e l o . S o l a m e n t e se e m p l e a r o n e n los e x p e r i m e n t o s las ratas tratadas q u e p r e s e n t a b a n s i g n o s m a c r o s c ó p i c o s claros de cirrosis h e p á tica. L o s cortes de tejido a d i p o s o del g r u p o t e s t i g o se p r e p a r a r o n de la m i s m a m a n e r a . l u c i ó n se d e t e r m i n ó el c o n t e n i d o de c a r b o nato, l i b e r a n d o el CO., c o n ácido l á c t i c o e n el a p a r a t o de V a n S l y k e m a n o m é t r i c o , y e n otra se p r e c i p i t ó con B a C l y se m i d i ó la rad i o a c t i v i d a d del p r e c i p i t a d o e n capas de grosor infinito. D e s p u é s de la i n c u b a c i ó n se l a v a r o n los cortes r e p e t i d a s v e c e s c o n R i n g e r y agua d e s tilada para a s e g u r a r s e de q u e se había elim i n a d o t o d o el e t a n o l libre. L u e g o se s e c a ron l o s c o r t e s en p a p e l filtro, se l e s a g r e g ó s u l f a t o de sodio a n h i d r o y se e x t r a j e r o n los lípidos con éter en a p a r a t o de S o x h l e t d u rante 3 horas. El r e s i d u o de la e v a p o r a c i ó n del e x t r a c t o e t é r e o se p e s ó , se t r a s l a d ó a p l a n c h e t a s y su r a d i o a c t i v i d a d se m i d i ó e n forma directa e n c a p a s de g r o s o r infinito. Para p o d e r c o m p a r a r la a c t i v i d a d así m e d i d a con la q u e se e n c o n t r a b a e n el C O , del v a s o c e n t r a l y del o b t e n i d o por c o m b u s t i ó n del ttanol-l-C a g r e g a d o al m e d i o de i n c u b a ción, a m b a s m e d i d a s e n f o r m a de B a C O , se utilizó la f ó r m u l a de M e d e s et al. ( 9 ) q u e e s t a b l e c e e q u i v a l e n c i a c o n la a c t i v i d a d e n c o n trada e n la grasa m u l t i p l i c a n d o ésta por la r e l a c i ó n e n t r e el c o n t e n i d o de c a r b o n o e n el BaCO.. y e n á c i d o s grasos, a s a b e r por 6,08 : 76.2 = 0,079. E x p e r i m e n t o s de c o n t r o l en q u e una m i s m a m u e s t r a de grasa se m i d i ó direct a m e n t e y d e s p u é s se s o m e t i ó a c o m b u s t i ó n , r e c o l e c c i ó n del C O , y p r e c i p i t a c i ó n con E a C O , d e m o s t r a r o n q u e esta f ó r m u l a resulta aplicable con suficiente precisión. 2 1 4 q a 4 E n u n a serie de e x p e r i m e n t o s se i n c u b a r o n a l r e d e d o r de 500 m g de c o r t e s de tejido adip o s o e n 5 m i de s o l u c i ó n de R i n g e r K r e b s fosfato, al cual se a g r e g ó e t a n o l - l - C e n c o n c e n t r a c i ó n de 0,2 m g / m l . E n u n a s e g u n d a serie de e x p e r i m e n t o s se i n c u b a r o n s i m u l t á n e a m e n t e c o r t e s de tejido a d i p o s o del m i s m o a n i m a l e n R i n g e r K r e b s fosfato q u e c o n t e n í a e t a n o l - l - C en concent r a c i ó n de 2 m g / m l e n p r e s e n c i a de g l u c o s a ( 3 , 6 m g / m l ) y e n a u s e n c i a de este s u b s t r a t o . La i n c u b a c i ó n se e f e c t u ó e n m a t r a c e s de E r l e n m e y e r de 50 m l q u e t e n í a n en el c e n tro u n t u b o de v i d r i o s u s p e n d i d o , p r o v i s t o de u n p a p e l filtro i m p r e g n a d o en K O H al 3 0 % para absorber el CO.,. A n t e s de i n i c i a r la i n c u b a c i ó n se hizo circular o x í g e n o a t r a v é s de l o s v a s o s , d u r a n t e 3 m i n u t o s . La i n c u b a c i ó n se m a n t u v o d u rante 2 h o r a s a 3 7 ° C c o n a g i t a c i ó n c o n t i n u a . T e r m i n a d a la i n c u b a c i ó n , se d e t u v o el p r o ceso a g r e g a n d o a cada v a s o 0,2 m i de H S 0 5 N . S e e n f r i a r o n l o s v a s o s e n el r e f r i g e r a d o r d u r a n t e 30 m i n u t o s , se t r a s p a s ó la s o l u c i ó n de K O H del t u b o c e n t r a l a p r o b e t a s g r a d u a das y se e n t e r ó c o n agua d e s t i l a d a u n v o l u m e n de 10 m l . En una a l í c u o t a de esta s o 1 4 ] 4 9 4 E n a l g u n o s e x p e r i m e n t o s se i n c u b a r o n par a l e l a m e n t e cortes de tejido a d i p o s o p r e v i a m e n t e c a l e n t a d o s a la e b u l l i c i ó n , y e n otros se h i c i e r o n p r u e b a s e n b l a n c o s i m u l t á n e a s , sin c o r t e s de t e j i d o . E n n i n g u n o de estos casos se r e c u p e r ó a c t i v i d a d e n el CO., ni e n l o s lípidos. L o s r e s u l t a d o s se h a n e x p r e s a d o e n m i c r o m o l e s de e t a n o l - l - C , j o x i d a d o s hasta CO^ e i n c o r p o r a d o e n l í p i d o s por g de tejido adiposo fresco, e n 2 h o r a s de i n c u b a c i ó n . RESULTADOS Experimentos de incubación con etanoll-C en concentración de 0,2 mg/ml. Los resultados obtenidos en los experimentos en que se incubaron cortes de tejido adiposo de ratas de ambos linajes y sexos en presencia de e t a n o l - l - C en concentración de 0,2 m g / m l aparecen en la Tabla I. Como puede apreciarse la velocidad de oxidación a CO, fue del mismo orden en el tejido adiposo proveniente de ratas tratadas con CC1 y en el de testigos (2 P > 0,3). Los resultados con respecto a la velocidad de incorporación de etanol en lípidos están resumidos en la Tabla II. No se observa diferencia significativa entre sexos o linajes y por lo tanto es justificado considerar en conjunto los datos de ambos sexos y linajes. Los datos 11 14 4 METABOLISMO DEL E T A N O L E N T E J I D O TABLA 35 ADIPOSO I Actividad recuperada en el C O durante 2 horas de incubación de cortes de tejido adiposo de ratas testigos y tratadas con C C l en presencia de 0,2 mg/ml de etanol-l-C * y ausencia de glucosa. Los valores están expresados en micromoles de etanol oxidados hasta CO por gramo de tejido adiposo fresco en 2 horas. a 1 4 s Linaje Testigos nmole/g * Sexo N N Tratados con CC1 (xmole/g * F 4 4 0,71 ± 0,55 ± 0,06 0,07 8 8 0,67 ± 0,65 ± 0,09 0,12 B B M F 4 4 0,66 ± 0,03 0,78 ± 0,02 8 8 0,65 ± 0,58 ± 0,06 0,09 A + B M + F 16 32 0,63 ± 0,04 A A M 0,68 ± 0,03 4 M e d i a a r i t m é t i c a ± su error típico. así analizados m u e s t r a n que la velocidad de incorporación del e t a n o l - l - C en lí­ pidos de tejido adiposo en ratas cirróticas fue significativamente mayor de la ob­ servada en testigos (2 P < 0,001). 14 1 Experimentos con etanol-l-C * en con­ centración de 2 mg/ml en presencia y en ausencia de glucosa Los resultados obtenidos en la segunda serie, en que se empleó una concentra­ ción de 2 m g / m l de e t a n o l - l - C y en la cual se efectuaron experimentos pareados con y sin glucosa, aparecen resumidos en las Tablas III y IV. Los datos consignados en la Tabla III muestran q u e la presencia de glucosa no modificó en forma significativa la velo­ cidad de oxidación del etanol a COo. El 14 tejido adiposo proveniente de ratas cirró­ ticas aparece como dotado de mayor ca­ pacidad de oxidar el etanol a C 0 . Esa diferencia es significativa (t = 3,65; 2 P < 0,001), si se comparan los resultados de tratados y testigos con el conjunto de los experimentos sin glucosa. Las diferencias entre linajes y entre sexos no fueron sig­ nificativas, d e modo que la consideración de un promedio general es justificada. En los experimentos en que la incubación se hizo en presencia de glucosa se observó también un promedio superior en los co­ rrespondientes al tejido adiposo de ratas tratadas con CC1 ; pero la diferencia no fue significativa (t = 1,61; 2 P > 0 , 1 ) . Los resultados obtenidos con respecto a la incorporación de etanol en lípidos, que aparecen en la Tabla IV, muestran 2 4 TABLA II Actividad recuperada en los lípidos de cortes de tejido adiposo de ratas testigos y tratadas con C C l incubados durante 2 horas a 37<?C en presencia de 0,2 mg/ml de etanol-l-C * y en ausencia de glucosa. Los valores están expresados en micromoles de etanol incorporados en los lípidos por gramo de tejido adiposo fresco en 2 horas. 1 4 Linaje Sexo N * Testigos nmole/g * A A M F 4 4 0,37 0,32 B B M F 4 4 0,32 0,37 A + B M + F 16 0,35 M e d i a a r i t m é t i c a ± su error t í p i c o . ± ± N Tratados con CC1 (imole/g * 0,05 0,05 8 8 0,84 0,73 ± 0,10 0,09 0,05 0,07 6 8 0,73 ± 0,73 0,12 0,11 0,02 30 ± 0,05 0,76 4 36 W. SOLODKOWSKA TABLA ET A L . III Actividad recuperada en el C 0 durante 2 horas de incubación de cortes de tejido adiposo de ratas testigos y tratadas con C C l , incubados en presencia de 2 mg/ml de etanol-l-C * y de 3,6 mg/ml de glucosa o en ausencia de este substrato. Los valores están expresados en micromoles de etanol oxidados hasta C O por gramo de tejido adiposo fresco en 2 hrs. 2 1 4 a * Testigos Sin glucosa Con g l u c o s a umole/g * umole/g * Tratados con CC1 Con glucosa Sin g l u c o s a umole/g * umole/g * 4 Linaje Sexo N N A A M F 4 4 2,25 ± 0,51 3,45 ± 0,96 2,25 ± 0,51 4,15 ± 1,26 5 5 3,80 ± 0,80 4,60 ± 0,38 4,04 ± 0,80 3,80 ± 0,40 B B M F 7 4 2,91 ± 0,56 2,95 ± 0,52 3,01 ± 0,44 2,75 ± 0,32 8 4 3,91 ± 0,16 4,60 ± 1,01 3,26 ± 0,43 4,35 ± 0,88 A+ B M+ F 19 2,90 ± 0,24 3,04 ± 0,34 22 4,16 ± 0,25 3,76 ± 0,29 M e d i a a r i t m é t i c a ± su error típico. en primer lugar una mayor incorporación del carbón 1 del etanol en lípidos cuando la incubación se realiza en presencia de glucosa. Como no se observaron diferencias sig­ nificativas entre sexos o linajes, los da­ tos pueden considerarse en conjunto, tan­ to para la comparación del efecto de la glucosa como para el tratamiento con CCI4. La diferencia en la incorporación de etanol en los lípidos en los testigos incubados con y sin glucosa es altamente significativa (1 = 3,64; 2 P < 0,001). En el grupo de animales cirróticos esta diferen­ TABLA cia fue también significativa (t = 5,59; 2 P < 0,001). Si se compara la incorporación de eta­ nol en los lípidos del tejido adiposo pro­ veniente de ratas testigos y de cirróticas tanto en presencia como en ausencia de glucosa, se observa q u e la incorporación fue en ambos casos significativamente mayor en el grupo de animales cirróticos. La comparación del promedio de todos los grupos muestra q u e en los experimen­ tos en ausencia de glucosa la incorpora­ ción fue 4 veces mayor en el tejido adi­ poso proveniente de ratas cirróticas que IV Actividad recuperada en los lípidos de cortes de tejido adiposo incubados durante 2 horas en presencia de 2 mg/ml de etanol-l-C y de 3,6 mg/ml de glucosa o en ausencia de este substrato. Los valores están expresados en micromoles de etanol incorporados en lípipidos por gramo de tejido adiposo fresco en 2 horas. íi * Linaje Sexo N Testigos Sin glucosa Con g l u c o s a umole/g * umole/g * N Tratados Sin glucosa umole/g * con CC1 Con g l u c o s a umole/g * A A M F 4 4 0,40 ± 0,11 0,38 ± 0,14 1,00 ± 0,23 0,98 ± 0,38 5 4 1,26 ± 0,44 1,45 ± 0,47 3,32 ± 0,35 4,22 ± 0,81 B B M F 6 4 0,35 ± 0,08 0,18 ± 0,05 0,70 ± 0,14 0,45 ± 0,07 7 4 1,46 ± 0,45 0,55 ± 0,07 3,20 ± 0,87 4,08 ± 0,60 A+ B M+ F 18 0,33 ± 0,05 0,77 ± 0,11 20 1,23 ± 0,21 3,61 ± 0,37 M e d i a a r i t m é t i c a ± su error típico. 4 37 M E T A B O L I S M O DEL E T A N O L E N T E J I D O ADIPOSO en el de los testigos (t = 4,09; 2 P<0,001), y, en los experimentos realizados en presencia de glucosa los promedios fueron más de 4 veces superior en los cirróticos que en los testigos" (t = 7,39; 2 P < 0 , 0 0 1 ) . DISCUSIÓN Los resultados experimentales muestran claramente que en el animal expuesto crónicamente a la inhalación de CC1 d u r a n t e el tiempo necesario para que se produzca cirrosis hepática, se origina algún cambio que determina una mayor incorporación del etanol en los lípidos del tejido adiposo in vitro, y confirman que esta incorporación es facilitada por la presencia de glucosa en el medio de incubación. Como el objetivo principal de este estudio ha sido conocer si el descenso más rápido de la alcoholemia que se observa en los animales intoxicados con CC1 podría explicarse por una mayor salida del etanol por un camino metabóiico que no conduce directamente a C 0 , es necesario discutir si estos resultados muestran que esta vía podría ser la incorporación en los lípidos del tejido adiposo. El valor del descenso de la alcoholemia ( P ) en los animales cirróticos referidos en el trabajo anterior ya mencionado (1) fue de —0.236 mg por mi de sangre por hora y el de los testigos respectivamente de —0,157; la diferencia fue entonces de —'0,079 m g / m l / h o r a . El promedio de r en la r a t a encontrado por Aull et al. (10) fue de 0,90, de modo que la diferencia corresponde aproximadamente a 71 ug por gramo de peso corporal y por hora. Ahora bien, la diferencia de la velocidad de incorporación del etanol en lípidos del tejido adiposo entre cirróticos y testigos 'fue: 3,61 - 0,77 - 2,84 umole/g en 2 horas, o sea 1,42 umole/g y hora, lo que corresponde a 65 ug de etanol por gramo de tejido adiposo y por hora. En consecuencia, si la actividad metabólica del tejido adiposo in vitro fuera equivalente a la que se produce in vivo, la diferencia de la incorporación del etanol en el tejido adiposo de animales intoxicados con CC1 y testigos permitiría explicar sólo una p a r t e de la diferencia de la velocidad del descenso de la curva de la alcoholemia entre ambos. Si denominamos p el peso corporal de la r a t a en gramos y a la relación entre el peso 4 4 2 4 del tejido adiposo total y el peso corporal, esta p a r t e sería: ( 6 5 x p x a ) : (71 x p ) , o sea aproximadamente igual a a. En consecuencia esta diferencia sólo da cuenta aproximadamente de la proporción del descenso de la alcoholemia que corresponde a la proporción del peso total de la rata representada por el tejido adiposo. No es imposible que en el animal entero, donde las grasas del tejido adiposo son movilizadas a la circulación general, la velocidad de incorporación de etanol pudiera ser más alta que in vitro y, por consiguiente, pudiera explicarse una proporción mayor de la diferente velocidad de desaparición del etanol de la sangre en las ratas tratadas con CC1 y testigos. No tenemos elementos de juicio para saber si esta suposición es real y, menos aún, para estimar cuantitativamente la importancia que pudiera tener esta eventual diferencia entre lo que sucede in vivo e in vitro. Cerno es sabido q u e el acetato se incorpora también en los lípidos del tejido adiposo d u r a n t e la incubación, es posible que la incorporación del etanol se haga previa oxidación a acetato activo. Si así fuera, habría que pensar que el factor limitativo de la producción de C 0 a partir del etanol en la incubación de tejido adiposo no sería la deshidrogenasa alcohólica, porque en tal caso el aumento de la incorporación del etanol en lípidos del tejido adiposo —ya sea por la presencia de glucosa en el medio de incubación, ya sea por intoxicación previa del animal con CCI4— debería i r acompañado de una disminución de la proporción que llega a CO,, lo que no sucede. Al contrario, la actividad recuperada en el C 0 en los experimentos de incubación sin glucosa fue significativamente mayor en los experimentos realizados con tejido adiposo proveniente de animales tratados que en el grupo testigo. Los experimentos no permiten concluir nada con respecto a la naturaleza de las alteraciones producidas por el tratamiento con CCI4 que causan las diferencias mencionadas. La comparación de los resultados obtenidos en los experimentos realizados con 0,2 m g / m l de etanol en el medio con aquellos en que se usó 2 m g / m l , muestran que la oxidación fue significativamente mayor (testigos: t = 8,8; 2 P<0,001 4 2 2 38 W. SOLODKOWSKA E T A L . y cirróticos: t = 14,0; 2 P < 0,001) con concentración d e etanol más alta. En cambio, la incorporación en lípidos fue equivalente con ambas concentraciones de etanol en los experimentos testigos (t 0,35; 2 P > 0,7 y levemente mayor con concentración más alta de etanol en los experimentos realizados con tejido adiposo de ratas cirróticas (t = 2,15; 2 P < 0,05). SUMMARY The influence of chronic intoxication with OCl and of t h e presence of glucose in the incubation medium on t h e ethanol metabolism by adipose tissue w a s studied in slices of mesenteric fat from rats of both sexes belonging to t h e "nondrink e r " ( A ) and " d r i n k e r " ( B ) strains. Control groups of untreated rats w e r e studied. The experimental rats w e r e forced to breath an atmosphere containing CC1 vapors one m i n u t e daily during at least ten weeks. Only rats exhibiting clear macroscopic liver cirrhosis w e r e employed. About 500 mg of slices obtained immediately after killing t h e rats were incubated in 5 m l Krebs phosphate buffer containing 0.2 or 2 m g / m l of ethanol-1C . In some experiments glucose w a s added at a concentration of 3.6 m g / m l . After 2 hours of incubation, t h e proportion of the activity found in CO . and in the lipids w a s measured. The results obtained in experiments with 0.2 m g / m l of ethanol showed that the oxidation of t h e carbon one of ethanol to C O , (Table I) w a s not influenced by chronic intoxication with CC1 and that the incorporation of this carbon into lipids (Table I I ) w a s significantly higher (2 P < 0.001) in adipose tissue from rats exhibiting liver cirrhosis than in controls. In t h e experiments in which the incubation medium contained 2 m g / m l of ethanol and no glucose, t h e oxidation of etha4 4 ! 4 nol to C O 2 was significantly higher (2 P < 0 . 0 1 ) i n t h e adipose tissue of treated rats than in t h e controls. The addition of glucose to t h e incubation 'medium increased t h e incorporation of ethanol into lipids^ from either intoxicated or control rats (Table IV) and did not influence t h e oxidation of ethanol to C0 (Table I I I ) . The comparison of t h e data obtained in t h e experiments w i t h 0.2 and 2 m g / m l of ethanol showed t h a t t h e rate of oxidation to C 0 w a s significantly higher with t h e higher concentration (2 P < 0.001). In contradistinction t h e incorporation of ethanol into lipids w a s equivalent (2 P > 0.7) w i t h both concentrations in control experiments and only a little higher with the 2 m g / m l concentration in cirrhotic rats (2 P < 0 . 0 5 ) . No difference of sex o r strain concerning the studied fate of ethanol was observed. 2 2 REFERENCIAS 1 . — C A M P O S , I., S O L O D K O W S K A , W., M U Ñ O Z , E., S E G O V I A - R I Q U E L M E , N . , C E M B R A N O , J. y MARDONES, J . — Quart, J. Stud. Alcohol. 2 5 : 4 1 7 , 1 9 6 4 . 2 . — S O L O D K O W S K A , W., M U Ñ O Z , E., F I G U E R O LA, I . , S E G O V I A - R I Q U E L M E , N . y M A R D O - N E S , J. — Quart. J. S t u d . A l c o h o l . 2 5 : 423, 1 9 6 4 . - F R O E S H , E. R. L y G I N S B E R G , J. L. — J. - W I N E G A R D , A . J. y R E N O L D , A . E. — J. Biol. Chem. 2 3 7 : 3 3 1 7 , 1 9 6 2 . Biol. Chem. 2 3 3 : 2 6 7 , 1 9 5 8 . -LANDAU, Chem. B. R. y KATZ, J. — J. Biol. 239:697, 1 9 6 4 . - L I E E E R , S. y S C H M I D , R. — J. C l i n . I n vest. 4 0 : 3 9 4 , 1 9 6 1 . - V A U G H A N , M . — J. L i p i d . R e s . 2 : 2 9 3 , 1961. - M A R D O N E S , J. — Int. R e v . 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