Nuevo Agilent 6490 QQQ. Máxima sensibilidad gracias a la

Nuevo
Agilent 6490
QQQ. Máxima
sensibilidad
gracias a la
Tecnología
iFunnel
Manuel Gayo González
Responsable de Ventas Zona Centro
Consultor GCMS&QQQ
¿PERO PORQUÉ UN DETECTOR QQQ?
.
MUESTRA
CUANTITATIVO
CUALITATIVO
MATRIZ SUCIA?
¿Sabemos lo que
Buscamos?
SI
Necesitamos
masa exacta
No
TOF
No
No
Menor de 5 pg
En columna?
SI
>1 ng en columna
QQQ
SI
No
SI
Necesitamos
SI
Qualifiers
Ions/Spectrum?
No
o Multi ion SIM
Aceptable
%RSD: >8%
Q
No
No
SI
Si-spectrum
or MS/MS qualifiers
SI
Trampa
CONCENTRACIÓN?
Q
QQQ Trampa
TOF
SI
Necesitamos MS/MS?
Bbaja concentración
$$$>
QQQ
$$>
$
No
Q
TOF
6490 Triple Cuadrupolo LC/MS
¡Sensibilidad a nivel de zeptomoles!
Mucho mejor rendimiento en un equipo de tamaño reducido
iFunnel Technology
• Novedades en el sistema de muestreo iónico a Patm
• Mejoras en sensibilidad ESI 10X
• Mejora la robustez del ensayo, simplifica la preparación de muestra
Celda de colisión curva de diámetro disminuido
• Transmisión iónica eficiente, reducción de ruido
• Diseño Compacto
Nuevas capacidades de medida
• Aislamiento de precursores 0.4 m/z para reducción de interferencias
• Dynamic MRM
• Scanning dependiente de resultados
6490 Triple Quadrupole LC/MS System
with iFunnel Technology
¿Qué es un zeptomol?
FACTOR POR EL QUE HAY QUE MULTIPLICAR LA UNIDAD
MULTIPLO
PREFIJO
ABREVIATURA
1.000.000.000.000.000.000.000.000 gramo
1024 gramo
yottagramo
Yg
1.000.000.000.000.000.000.000 gramo
1021 gramo
zettagramo
Zg
1.000.000.000.000.000.000 gramo
1018 gramo
exagramo
Eg
1.000.000.000.000.000 gramo
1015 gramo
petagramo
Pg
1.000.000.000.000 gramo
1012 gramo
teragramo
Tg
1.000.000.000 gramo
109 gramo
gigagramo
Gg
1.000.000 gramo
106 gramo
megagramo
Mg
1.000 gramo
103 gramo
kilogramo
kg
100 gramo
102 gramo
hectogramo
hg
10 gramo
10 gramo
decagramo
dag
0,1 gramo
10-1 gramo
decigramo
dg
0,01 gramo
10-2 gramo
centigramo
cg
0,0001 gramo
10-3 gramo
miligramo
mg
0,0000001 gramo
10-6 gramo
microgramo
μg
0,0000000001 gramo
10-9 gramo
nanogramo
ng
0,0000000000001 gramo
10-12 gramo
picogramo
pg
0,0000000000000001 gramo
10-15 gramo
femtogramo
fg
0,0000000000000000001 gramo
10-18 gramo
atogramo
ag
0,0000000000000000000001 gramo
10-21 gramo
zeptogramo
zg
0,0000000000000000000000001 gramo
10-24 gramo
yoctogramo
yg
La Via Láctea vista desde el telescopio Hubble
A 1021 metros de la tierra se encuentra el límite del universo
conocido
Cuantificación - Sensibilidad
“…only about one out of every 103 to 105
ions
generated by ESI at atmospheric
pressure
is actually detected using present
instrument designs.”
(Page, Smith, et al; JASMS, 2007, 18, 1582-1590)
Novedades en la Configuración
Instrumental
6460 LC/MS (Skimmer Configuration)
Ion Detector
Cap
RF Ion
Guide
Q1
Coll
Cell
Q3
Ion Detector
Q3
6490 LC/MS (iFunnel Configuration)
Curved Collision cell
HB Cap
Dual Ion
Funnels
RF ion
guide
Q1
La tecnología iFunnel captura 10X más iones
Agilent Jet Stream
• Confinamiento térmico
del cono ESI
• Desolvatación más
eficiente para generar
iones en fase gas
Capilar de entrada con
seis canales
• 6 entradas al capilar
• Muestreo de 10X de gas
proveniente de
la fuente
iónico
• Creación de zona de alta
• Captura de la mayor parte
riqueza iónica
del gas que proviene de la
zona de la fuente
Dual Ion Funnel
• Elimina el gas pero
captura los iones
• Elimina el ruido de
neutros
• Incrementa la vida
media de las bombas
turbo
Jet Stream Tecnología en el Triple Quad 6490
aumento de sensibilidad
Agilent Jet Stream
LC Flujo
Focalización termicar
produce una
desolvatación más
eficiente y una mejor
generación del ión.
N2 sobre calentado
Gas de Nebulización
N2
Agilent Jet Stream
Maximizando la señal – Minimizando el ruido
-La repulsión entre las gotas
cargadas en ESI tradicional hace
que la liberación iónica ocurra
frecuentemente en lugares alejados
de la entrada del sistema MS
-Agilent JetStream impide la
expansión del cono, colima la
formación iónica en la entrada del
MS y favorece la desolvatación
-La consecuencia es un notable
incremento en S/N respecto a ESI
clásica
Necesitamos aumentar la cantidad de iones que
se introducen en el analizador
• Muchos de los iones formados en la fuente Jet Stream no son
capturados por el sistema de masas.
• La máxima generación de iones se produce a 3-5 mm. en una
región horizontal en el centro.
Agilent’s Hexabore
6 Bore
Capillary
Seis orificios
de entrada
• Casi 12x de cantidad de
gas.
Y
• 5 - 10x número
de iones
que se introducen en el
sistema en todo el rango
de masas.
Problema: Moléculas Extra de Gas
Capilares
estandar
son de
180mm
El sistema Agilent de dos etapas Ion Funnel puede trabajar
con este incremento de gas
Alta
presión
Etapa 1
Baja
presión
Etapa 2
RF Ion
Guide
Etapa 1
8-12 Torr
Etapa 2
1-3 Torr
Etapa 1 el offset evita la alta presión de gas generada en el Hexabore Capillary
¿Cómo trabaja el sistema Ion Funnel?
El voltaje RF
focaliza los
iones en el
centro.
Unidad RF
Salida de
iones
focalizados
Entrada de iones y
gas no focalizados
El voltaje DC
acelera los
iones hacía la
salida
Unidad DC
¿Cómo se ha fabricado el Ion Funnel?
Antes con multiples placas de metal
El diseño 6490 utiliza la tecnología de
placa de circuito impreso
Recubiertos
de oro
Nueva celda de colisión hexapolar curva
Nueva celda de
Colisión Hexapolar
Curva de alta
presión con
aceleración lineal,
optimiza la
fragmentación
MS/MS a la vez que
elimina el “efecto
memoria” incluso a
muy bajos “dwell
times” (tiempos de
monitorización).
Cuantificación de esteroides sin
derivatizar en plasma
- MRM (271.3 -> 145.2) 10pgmL-E2-E1-10uL-r001.d
x101
4.85
10 pg/mL de 17ßestradiol (E2) sin
derivatizar en
muestras de plasma
0.665 min.
4.8
4.75
4.7
4.65
4.6
4.55
4.5
4.45
4.4
4.35
4.3
4.25
4.2
0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8 0.85 0.9 0.95 1 1.05 1.1 1.15
Acquisition Time (min)
Agilent 6490 Triple Cuadrupolo
Agilent Triple Cuadrupolo 2006 – 2010
Mejora continua en especificaciones S/N
6490
SNR 1 pg reserpina
10000
9000
8000
7000
6000
5000
4000
6460
3000
2000
6430
6410
1000
0
2006
2007
2008
2009
2010
Ultra trazas de pesticidas en agua potable
Triazinas a 50 partes por cuatrillon
Atraton S/N =: 819
Simacina S/N = 18
Simetrina S/N = 9
Secbumeton S/N = 51
Prometon S/N = 40
Atrazina S/N = 28
6490 Triple
Cuadrupolo con
enriquecimiento
on-line
Mejora de la eficacia de la detección de iones
con la tecnología iFunnel
Agilent Jet Stream
positive ion
Agilent Jet Stream
negative ion
11x
7x
7x
7x
6490
5x
14x
10x
7x
5x
10x
622
118
6460
922
322
302
1034
1222
113
200
400
600 800 1000 1200 1400
m/z
200 400 600 800 1000 1200 1400
m/z
6490 con iFunnel vs 6460 en positive ion mode
1 pg Reserpine (7X)
1 pg Alprazolam (6X)
x103
x103
6490
6490
3
2
1
6460
6460
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Acquisition Time (min)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Acquisition Time (min)
6490 with iFunnel vs 6460 in negative ion mode
1 pg Chloramphenicol (8X)
1 pg Acid red 4 (9X)
x103
x103
3
2
6490
Relative
Increase in
signal of
Triton vs. 6460
Triton
6x
1
6460
0
BB1:
CAT CC
only
6460
0.5
1
1.5
2
Acquisition Time (min)
3
1.1
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
6490
6460
0.2 0.4 0.6 0.8 1
Acquisition Time (min)
iFunnel
Los datos de la tabla son un promedio de 10 inyecciones
Skimmer Config.
iFunnel
Config.
Ganancia
Área
737.9
4566.5
6.2
Altura
401.2
2184.2
5.4
S/N
1182:1
15183:1
12.8
x1000
x100
Alprazolam
(C17H13N4Cl)
1pg/uL, 1uL inj.
Counts vs acquisition time (min)
Counts vs acquisition time (min)
6490 Conclusiones:
 Sensiblidad a niveles de Zeptomoles
 Amplio rango de linealidad
 Nueva tecnología iFunnel
•
“Permite cuantificar a niveles sin precedentes”
Contacto Manuel Gayo
Web: www.chem.agilent.com
Mail: manuel_gayo@non.agilent.com
Teléfono: 901.11.68.90