Introducción

Introducción
La levadura tiene un tipo de nutrición saprófita, es decir, absorben las sustancias nutritivas directamente a
través de la membrana celular. Los saprófitos solo pueden desarrollarse donde se encuentren cuerpos de
animales o vegetales en descomposición, o masas de productos de desechos de los mismos.
Las levaduras solo necesitan sales inorgánicas, oxígeno y algunas clases de azúcares. A partir de éste obtienen
energía y con ella sintetizan todas las demás sustancias necesarias para la vida(proteinas, grasas, ácidos
nucleicos, vitaminas, etc.). Cuando disponen de mucho oxígeno, logran energía por oxidación completa de la
glucosa a dióxido de carbono y agua a través del ciclo del ácido tricarboxílico. Cuando el aporte de oxígeno es
limitado, fermenta la glucosa y forman alcohol y dióxido de carbono. Por esta vía, sólo producen la vigésima
parte de la energía correspondiente a la oxidación completa de la glucosa; por lo tanto, las levaduras crecen
muy lentamente en ausencia de oxígeno.
Las levaduras al respirar liberan dióxido de carbono, si se lleva a cabo una práctica en medio acuoso, se
formará ácido carbónico, que va acidificando el medio. La intensidad y velocidad de la respiración se detecta
con ayuda de bromotimol, que es un indicador de pH. El mismo tiene color azul en Ph alcalino, verde en Ph
neutro y amarillo en pH ácido.
Objetivo:
Realizar un experimento para demostrar la liberación de CO2 por respiración y fermentación.
Materiales:
• Tubos de ensayo.
• Gradilla.
• Mechero.
• Malla metálica.
• Trípode.
• Crisoles, triángulos porta crisoles.
• Pipetas de 1 ml y 10 ml.
Soluciones:
• Azul de bromotimol.
• Vaselina.
• Glucosa.
• Levadura de cerveza.
Desarrollo de la Práctica
Método Empleado:
• Parte de las levaduras se matan por ebullición durante al menos 15 min.
• Otra parte de las mismas se calcinan en un crisol.
• Se rotulan 8 tubos (que tendrán composición diferente).
• El azul de bromotimol se agrega cuando todos los tubos ya contengan la levadura y/o glucosa, según
lo indique.
• La vaselina se agrega a lo último, ya que su función es formar una capa aislante que impida el
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intercambio de gases con la atmósfera.
• Se observa el color de los tubos inicialmente, y a los 5, 10, 15, 30 y 60 min.
• En el tubo nº 8 el alumno soplara mediante una pipeta, para ver el viraje del indicador.
• Los resultados se anotaran en forma de cuadro.
Composición de los tubos de ensayo:
Tubo Nº
1
0,1
2
0,1
Levaduras muertas (g)
(calcinada) (ebull)
−
−
−
−
10
1
1
Levaduras vivas (g)
Glucosa (mg)
Azul de bromotimol 10
Vaselina líquida (ml)
3
4
5
6
7
8
−
−
−
−
−
−
0,1
−
10
1
0,1
10
10
1
0,1
10
10
−
−
−
10
1
−
10
10
1
0,1
−
10
1
Resultados Obtenidos:
Tubo Nº
1
0 min.
Azul
5 min.
=
2
Azul
azul
3
4
Azul
Azul
5
Azul
6
7
Azul
Azul
8
Azul
En donde está
la levadura
amarilla, cerca
de ella verde y
el resto azul.
En el fondo
amarillo, y
cerca un poco
de verde.
Luego todo
azul.
10 min.
15 min.
=
=
En donde esta
la levadura un
=
poco amarillo.
El resto azul.
30 min.
=
60 min.
=
=
=
Fondo naranja
claro,
siguiendo un
=
poco de verde.
El resto azul.
=
=
Amarillo el
fondo y el
resto todo
verde
El fondo
amarillo,
seguido de
Todo naranja.
naranja y en la
superficie
verde.
=
El fondo
amarillo y el
resto naranja
Naranja
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
El fondo
amarillo,
Fondo amarillo,
seguido de
y el resto verde.
naranja y el
resto verde
=
=
=
=
Inmediatamente
=
vira a verde
Conclusión
Debe prestarse atención al pH del agua con que se prepara la sc. de colorante, ya que el agua destilada del
laboratorio es agua desionizada, y suele tener pH ácido. El mismo puede interferir en los resultados, por lo
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que es preferible utilizar agua común.
En la comparación de los tubos 1 y 2 se llegó a la conclusión que por calcinación se murieron mayor número
de organismos que por ebullición. Por lo que es más efectiva la calcinación que la ebullición como método de
eliminación de organismos vivientes.
Comparando los tubos 3 y 4, comprobamos que al ser mayor la cantidad de glucosa (materia prima para la
respiración) las levaduras respiran más, liberando así mayor cantidad de CO2. Por lo tanto, se observa mayor
rapidez en el viraje del indicador.
El agregado de vaselina líquida asila el sistema del medio. Esto mismo se pudo comprobar mediante la
comparación de los tubos 4 y 5. En el sistema no aislado se pierde CO2, pero al estar mas en contacto con el
aire tiene mayor cantidad de oxígeno, lo cual se traduce a respiración más aeróbica que en otros tubos.
La vaselina líquida actúa como aislante para favorecer la disolución de CO2 en agua, dado que el mismo es
poco soluble en ésta, y de no existir la vaselina se perdería, pasando a formar parte del medio exterior.
La importancia de los tubos testigos radica en la posibilidad de verificar la eficacia de los procedimientos,
comparando la acción de los reactivos.
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