laboratorio de virologia #1

UNIVERSIDAD DE SANTANDER - UDES
PROGRAMA MEDICINA VETERINARIA
VIROLOGIA VETERINARIA
DOCENTE: JOHN JAIRO URIBE GONZALEZ-BACTERIOLOGO.
PRACTICA N° 1
AGLUTINACION (Grupos sanguíneos) SISTEMA ABO, PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD
EN BOVINOS Y CANINOS (dog croosmatching)
OBJETIVO:
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Conocer los diferentes grupos sanguíneos en algunas especies, así como su
importancia clínica.
Conocer las técnicas para determinar de compatibilidad sanguínea.
MARCO TEORICO:
Los grupos sanguíneos en el hombre son cuatro según la clasificación de hizo landsteiner,
clasificación hoy universal, y se denominan O,A,B, AB. Se caracterizan por las diferentes de
dos aglutinógenos existentes en los glóbulos rojos y de dos aglutininas contenidas en el
suero.
Grupos sanguíneos es cada uno de los diversos tipos en que se ha clasificado el tejido
sanguíneo en relación con la compatibilidad de los hematíes (eritrocitos o glóbulos rojos)
y sueros de un individuo donador de sangre con los hematíes y suero de otro individuo
que la recibe. La determinación de estos grupos, que al principio se limitaban a la
selección de donantes y receptores para la transfusión sanguínea se ha extendido a la
determinación de paternidad y a la identificación en criminología.
Perros: Se reconocen varios Sistemas de determinación de grupos sanguíneos han sido
reconocidos en el perro. Se ha estandarizado el uso del sistema D.E.A. (Dog Erythrocyte
Antigen), seguido de un número, Los D.E.A. 1.1 es el grupo de mayor relevancia clínica ya
que puede causar reacciones pos transfusionales en segunda transfusión. Los animales
que tienen D.E.A. 1.1 negativo (1.2, 3, 4, 5, 7, 8) se les considera donante universal.
En los animales mamíferos domésticos (y también en los no domésticos, así como en aves,
reptiles, anfibios y peces) existen marcadores de superficie eritrocitaria parcialmente
solubles, mejor conocidos como grupos sanguíneos. Aunque no son del mismo tipo que
en humanos, también expresan mecanismos de antigenicidad y receptores específicos
determinados por un Sistema de Histocompatibilidad mayor y menor, semejante al HLA y
todos los factores genéticos que determinan los tipos en humanos. La serotipificación es
esencial para realizar intervenciones como la transfusión, dado que los eritrocitos expresan
sustancias potencialmente antigénicas en su superficie (así como el CMH o LHA humano),
las cuales, aunque no tienen aún un papel bien conocido, sí interfieren de manera
importante en el fenómeno de rechazo cuando la sangre es transfundida de un individuo a
otro. Dichos antígenos de superficies son lo que llamamos grupos sanguíneos.
GATOS: Se reconocen tres grupos A (el más frecuente), B, AB, debido a dos alelos A y B,
(dominancia de A sobre B) y el grupo AB se determina por un tercer alelo que es recesivo
a A y codominante para B.
No existe donante universal en gato. Los gatos poseen aloanticuerpos naturales en contra
del antígeno sanguíneo diferente al que poseen. En los gatos tipo B, tienen
aloanticuerpos contra A, pero en este caso los títulos son altos. El tipo AB no tiene
aloanticuerpos para A o B.
En un transfusión de sangre en gatos obligatorio realizar análisis de grupo sanguíneo
tanto al donante como al receptor, además de una prueba de reacción cruzada o Coombs
indirecto debido a que las incompatibles de grupo pueden llegar a provocar la muerte de
receptor.
EQUINOS: Las pruebas usadas para tipificar grupos sanguíneos son de aglutinación,
hemolisis y antiglobulina. El sustrato de complemento empleado proviene de conejos. Los
grupos sanguíneos de equinos son 7 (A, C, D, K, P, Q y U).La determinación de los grupos
sanguíneos se realiza por medio de pruebas de aglutinación y lisis de los eritrocitos del
equino problema. Para ello se utilizan antisueros obtenidos por hiperinmunización de
caballos y conejos, y además para la prueba de lisis se necesita también suero de conejo
previamente absorbido con eritrocitos de equino, como complemento.
BOVINOS: Los antígenos de los sistemas de grupos sanguíneos están presentes en cada
uno de sus eritrocitos, con cada sistema de grupo sanguíneo ocupando innumerables
locaciones en la superficie del eritrocito. En los bovinos, estos antígenos como el J también
se pueden encontrar en forma soluble en el plasma, saliva, leche, jugo gástrico, meconio,
fluidos seminales. El sistema B de la sangre del ganado es el más complejo conocido hasta
ahora con sus más de 60 antígenos y más de 1000 alelos diferentes. Estos antígenos
tienden a heredarse juntos por bloques, como fenogrupos. La tipificación de la sangre
bovina
La tipificación se hace compleja y difícil ya que existen 11 sistemas de grupos sanguíneos:
A,B,C,F,J,L,M,R,S,T y Z con cerca de 2 trillones de combinaciones posibles de alelos. Los
grupos sanguíneos B y J son los de mayor importancia clínica. En general debido a su
complejidad es imposible obtener sangre bovina de un donador que sea absolutamente
idéntica a la del receptor. La complejidad es tal que existen suficientes combinaciones
antigénicas diferentes como para proporcionar un carácter identificador único para cada
bovino del mundo. Este valor se usa para hacer identificación avanzada, precisa y única de
cada bovino porp arte de criaderos, al igual que para ayudar a la selección de esquemas
de cruzamiento de vacas Holstein al estimar la heredabilidad de ciertas características
como el ángulo de la grupa, la producción de lecha y de grasas. En machos se busca la
relación entre grupos sanguíneos y los índices cuantitativos de semen.
PREINFORME
1. Investigar diferentes tipos de coloración para células sanguíneas con su fundamento
teórico.
2. Describa los diferentes índices hematológicos de las especies, relacionadas con el
sistema inmune (glóbulos blancos, inmunoglobulinas.
3. Describa la utilidad de los grupos sanguíneos de animales en medicina y cirugía
veterinaria, así como posibles aplicaciones en otros campos.
Hemoclasificación ( humanos)
MATERIALES:
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Laminas portaobjetos
Aplicadores de madera
Muestras de sangre con EDTA
Muestras de suero
Antisueros A,B, AB y Anti D.
Tubos de ensayo
Solución salina
Albumina bovina
PROCEDIMIENTO:
Colocar una gota de antisuero en portaobjetos previamente identificados, adicionar una
gota de sangre con edta, mezclar y observar resultados.
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Mezclar una gota de muestra de sangre total directamente con otra muestra, mezclar y observar
resultados.
En muestras bovinas, con los eritrocitos de cada animal hacer una suspensión al 2% en S.S. (0.1
ml de eritrocitos en 5 ml de S.S.
Centrifugar los tubos a 1000 rpm/1 min/4°C.
Resuspender los eritrocitos con S.S y lavarlos tres veces
Resuspender los eritrocitos a la misma concentración
Tomar dos gotas de los eritroctos del bovino receptor con la pipeta pasteur y depositarlos en
un tubo de ensayo. Agregar dos gotas de eritrocitos del donador.
Tomar dos gotas de eritrocitos del perro receptor y depositarlas en un tubo de ensayo agregar
dos gotas del plasma del donador
Incubar los tubos durante 30 min
Observar la reacción en cada tubo.
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Prueba de dogcroosmatching.
Centrifugar muestras muestras de sangre caninas a 1000 rpm/1 min/4°C.
Remover el plasma de ambos tubos con pipeta pasteur y depositarlos en tubos de ensayo
limpios previamente indentificados (donador – receptor).
Con los eritrocitos de cada animal hacer una suspensión al 2% en S.S. (0.1 ml de eritorcitos en 5
ml de S.S.
Centrifugar los tubos a 1000 rpm/1 min/4°C.
Resuspender los eritrocitos con S.S y lavarlos tres veces
Resuspender los eritrocitos a la misma concentración
Tomar dos gotas de los eritroctos del perro receptor con la pipeta pasteur y depositarlos en un
tubo de ensayo. Agregar dos gotas de eritrocitos del donador (compatibilidad mayor o
dogcrossmatch)
Tomar dos gotas de eritrocitos del perro receptor y depositarlas en un tubo de ensayo agregar
dos gotas del plasma del donador (compatibilidad menor minorcrossmatch
Incubar los tubos durante 30 min
Observar la reacción en cada tubo.
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ANALISIS DE RESULTADOS.
CAUSAS DE ERROR.
CONCLUSIONES.
BIBLIOGRAFIA SUGERIDA
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