HPV

El HPV de alto riesgo es
transcripcionalmente activo en
un subgrupo de carcinomas
escamosos nasosinusales
Larqué AB, Hakim S, Ordi J, Nadal A, Diaz A, Pino M, Marimon L,
Alobid I, Cardesa A, Alos L
ablarque@clinic.ub.es
Hospital Clinic. Barcelona
CE de cabeza y cuello y HPV
Carcinoma escamoso de cabeza
y cuello
Orofaringe (25-70%)
Nasosinusal (20%)
CE de cabeza y cuello y HPV
• Epidemiología: varón entre 40 a 50 años, no fumador ni
bebedor
• Histología: carcinomas no queratinzantes, basaloide,
probremente diferenciado
• Biología: mejor respuesta a tratamientos adyuvantes
Oncogénesis asociada a HPV
E7
p16
p16
p16
cdk
Cyclin D
p16
1
P
p16
p16
p16
p16
p16
p16
p16
E2F
-4-
Rb
HPV
Bishop JA. Am J Surg Pathol, 2012
Objetivo
Demostrar la transcripción activa del HPV de alto riesgo
en una serie de carcinomas nasosinusales, mediante la
detección del mRNA del oncogén viral E7, en correlación con la
identificación del DNA del VPH mediante PCR e hibridación in
situ y la expresión inmunohistoquímica de p16.
Materiales y métodos
• Carcinomas escamoso nasosinusales diagnósticados en el
H. Clinic entre 1985 y 2010 (70 casos)
• Análisis realizados:
• DNA del HPV mediante PCR (SPF10, Innogenetics) e
hibridación in situ (sonda GenPoint de alto riesgo, DAKO)
• Inmunotinción frente a p16
• Detección del mRNA E7 mediante PCR en todos los casos
HPV positivos
Resultados: HPV DNA
CCS
HPVnasosinusales
DNA (PCR)
HPV +
HPV 20%
80%
n=70
7%
PCR HPV
HPV 16
HPV 35
93%
n=14
CE nasosinusal
Clasificación histológica (WHO 2005)
n
HPV+
HPV-
CE Queratinizante
49
2 (14.2%)
47 (83.9%)
CE No-queratinizante
14
8 (57.1%)
6 (10.7%)
CE Basaloide
5
2 (14.2%)
3 (5.3%)
CE Papilar
2
2 (14.2%)
0 (0%)
70
14 (100%)
56 (100%)
Casos totales
P <0.001
Hibridación in situ y
expresión de p16
n
HPV (+)
HPV (-)
Hibridación in situ 70 14 (100%) 0 (0%)
p16
70 14 (100%) 0 (0%)
Hibridación in situ
HPV -
mRNA E7
El mRNA E7 del VPH fue
detectado en 7 de los
carcinomas asociados con
VPH16
CE nasosinusal y HPV
Edad media (rango)
HPV+
positivo
(n=14)
HPVnegativo
(n=56)
66.5 (40-87)
62.7 (41-93)
Sexo, No. (%)
. 505
Hombre
9 (64.3)
43 (76.8)
Mujer
5 (35.7)
13 (23.2)
1 (7.1)
13 (23.2)
Asociación con papiloma
invertido
p
Localización
.272
.146
Cavidad nasal
4 (28.6)
7 (12.5)
Senos paranasales
2 (14.3)
20 (35.7)
Cavidad nasal y senos
paranasales
8 (57.1)
29 (51.8)
CE nasosinusal
Estadios (AJCC 2010)
N=70
Conclusiones
• Por primera vez se demuestra la transcripción activa del
VPH en un subgrupo de carcinomas nasosinusales
• Esto confirma que el HPV es el agente causal en estas
neoplasias
• La inmunotición para p16 es un marcador útil para
identificar estos carcinomas.
El HPV de alto riesgo es
transcripcionalmente activo en
un subgrupo de carcinomas
escamosos nasosinusales
Larqué AB, Hakim S, Ordi J, Nadal A, Diaz A, Pino M, Marimon L,
Alobid I, Cardesa A, Alos L
ablarque@clinic.ub.es
Hospital Clinic. Barcelona
1
Table 1 Primers designed to detect E7 mRNA expression of the HPV16 positive types. The U1
2
small nuclear ribonucleoprotein-specific A protein was included as a quality control of the
3
procedure.
Amplicon size
(bp)
Sequence
HPV16
F: 5’- CGGACAGAGCCCATTACAA-3’
Target gene
E7
109
Housekeeping
215
R: 5’- AACAGGTCTTCCAAAGTACGA-3’
snRNP U1A
F: 5’-CAGTATGCCAAGACCGACTCAGA-3’
R: 5’-GGCCCGGCATGTGGTGCATAA-3’
4
F, forward; R, reverse.
gene