ESPECIALIZACION EN REPRODUCCIÓN BOVINA INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC) Jerónimo Luis de Cabrera 106 (5000) Córdoba, Argentina Telefax: 54 351 471 5418 e-mail: irac@iracbiogen.com,ar Curso de Transferencia de Embriones. Fecha: 20 de Junio de 2011 Nombre: Juan Pablo Vélez Ruiz 1. 20 puntos. Formule dos protocolos de superovulación: uno para vacas Holstein y otro para vacas Brahman. Fundamente cada uno de los procesos y drogas a utilizar y las ventajas y desventajas del tratamiento elegido para cada caso. RESPUESTA: Tratamiento para Holstein: Dia 0: am Dia 4: am pm Dia 5: am pm Dia 6: am pm Dia 7: am pm Dia 8: am pm Dia 9: am pm Día 15: pm Dispositivo con P4 + 2.5mg de Benzoato de estradiol + 50 mg de P4 4 ml de Folltropin 4 ml de Folltropin 3 ml de Folltropin 3 ml de Folltropin 2 ml de Folltropin + Cloprostenol 2ml 2 ml de Folltropin 1 ml de Folltropin 1 ml de Folltropin + Sacar dispositivo de P4 GnRH IA IA Colección de Embriones La idea de utilizar este protocolo de superovulacion a base de FSH (Folltropin) se basa en el hecho de ser un producto de fácil acceso y que gracias a sus altas concentraciones de FSH, genera una excelente respuesta en el crecimiento de los folículos. El uso del Folltropin en 8b dosis decrecientes durante 4 días lo hago ya que con este método logro obtener concentraciones en sangre de FSH por encima de 1 ng/ml lo cual es una ventaja, y Así dar un estimulo continuo al ovario y los folículos que en las razas Taurus es vital pues deben alcanzar diámetros superiores a 10 mm para así poder ovular. Solo estoy usando una dosis de prostaglandina en el día 6 pues está comprobado que la utilización de una o media dosis adicional en la tarde del día 6 no representa cambios significativos en la lisis del cuerpo lúteo presente. Una posible desventaja de este protocolo es el alto número de encierros que deben hacerse para cumplir con los protocolos, sin embargo al ser ganadería lechera y si las vacas están en lactancia es sencillo llevarlo a cabo dado que estos animales son llevados a corral almenos 2 veces por día. Una ventaja importante es que con este protocolo no se depende de la detección de celo para realizar la inseminación. Una desventaja es que para el operador que aplique el protocolo es fácil llegar a confundirse si no está bien entrenado. Tratamiento para Brahman: Dia 0: am Dia 4: am Dia 6: am pm Dia 7: am Dia 8: am Dia 9: am Dia 15: am Dispositivo con P4 + 2.5mg de Benzoato de estradiol + 50 mg de P4 100 mg de Folltropin en 2.5 ml de SRF 40 mg de Folltropin en 1.2 ml de SRF + Cloprostenol 2ml Cloprostenol 2 ml Retiro del dispositivo GnRH IATF Colección de Embriones La idea básica de este protocolo para trabajar con vacas Brahman radica en que por ser animales de carne y generalmente de menor manejo y encierros, es indispensable disminuir el número de encierros al máximo para lo cual considero que este protocolo se ajusta muy bien, además de tener buenos resultados. Solo se usa una dosis total de 140mg de FSH (Folltropin) dado que los cebuinos son mucho más sensibles a este componente que los taurinos. El funcionamiento básico de ambos protocolos es el siguiente: La inyección de P4 mas Benzoato de estradiol van a producir un bloqueo de una nueva onda folicular y la rápida atresia de los folículos en crecimiento por lo cual se va a generar una nueva onda folicular donde los folículos van a crecer superestimulados por la FSH inyectada pero que no van a llegar a ser ovula torios debido al dispositivo de progesterona, en el momento en que se retira el dispositivo de P4 y se inyecta el Cloprostenol, los folículos ováricos en avanzado estado de desarrollo pierden el efecto inhibitorio de la progesterona para ovular y con la aplicación de GnRH se crea un pico de LH desde el hipotálamo que genera la ovulación de todos lo folículos preovulatorios, teniendo así una superovulacion. Una vez dado esto se puede proceder a inseminar a las 24 horas y recolectar los embriones en más o menos 6 días. 2. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca de Simmental con un tratamiento de 8 dosis decrecientes cada 12 horas. Porque vía administraría la Folltropin? A: Intramuscular B: Subcutánea en la tabla del cuello C: Subcutánea detrás de la paleta 3. 10 puntos. Si Ud. decide superestimular una vaca Angus qué dosis utilizaría? A. 200 mg NIH-FSH-P1 B. 320 mg NIH-FSH-P1 C. 500 mg NIH-FSH-P1 4. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Simmental que va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando prostaglandina e indique cuántas receptoras debe sincronizar para transferir todos los embriones frescos. RESPUESTA: Tomando como base de partida que de las 4 donantes 1 va a rechazar el tratamiento de superovulación, 1 va a producir excelente cantidad de embriones transferibles (6) y las restantes dos van a dar una producción promedio de los mismos (3 a 5 embriones transferibles), cuento con 12 a 15 embriones transferibles aproximadamente. Teniendo en cuenta que el tratamiento de sincronización de receptoras con prostaglandina genera un rechazo cercano al 50% y depende del grado de Detección de celo, lo cual genera una falla adicional he tomado la decisión de sincronizar 35 vacas. El tratamiento de sincronización que voy a utilizar consiste en: Día 0: Día 14: Día 14 a 17: 2 ml de Cloprostenol IM 2 ml de Cloprostenol IM Detección de Celo y TE 7 días luego del celo. Observación: La segunda dosis de Cloprostenol en las receptoras debe ser administrada entre 18 y 24 horas antes que la dosis de PGF en la donante. 5. 20 puntos. Ud. debe programar la sincronización de receptoras para 4 vacas Brahmam que va a colectar. Describa un tratamiento de sincronización de estas receptoras utilizando progestágenos, estrógenos y eCG e indique cuántas receptoras debe sincronizar para transferir todos los embriones frescos. RESPUESTA: Teniendo en cuenta las bases de la respuesta anterior y que las vacas cebuinas por poseer mayor numero de folículos por onda pueden responder mejor a los tratamientos superovulatorios; considero que de estos 4 animales puedo obtener alrededor de 20 embriones transferibles. El tratamiento de sincronización de las receptoras a base de Progestágenos, estrógenos y eCG que voy a utilizar consiste en: Día 0: Benzoato de estradiol (2mg) Cloprostenol (1m) Dispositivo de Progesterona Día 8: Retiro del dispositivo Cloprostenol (1ml) eCG (200mg) Benzoato de estradiol (1mg) Día 16: Transferencia de embriones a tiempo fijo El numero de receptoras que debo sincronizar trabajando con este protocolo esta dado por el porcentaje de eficacia de este protocolo, el cual se encuentra entre 20 y 30%. Por lo cual el número de receptoras que debo sincronizar para transferir los 20 embriones es de 26 vacas. 6. 20 puntos. Se colectan embriones de 10 vacas para transferirlos frescos en vaquillonas y/o congelarlos. De las 10 vacas se obtuvo un total de: 10 10 10 10 blastocistos grado 1 blastocistos tempranos grado 1 mórulas grado 1 mórulas grado 2 Se revisan las receptoras y se determinan como aptas 30 vaquillonas de las cuales: 5 estuvieron en celo hace 5.5 días 5 hace 6 días, 10 hace 7 días, 5 hace 8 días y 5 hace 8.5 días. Determine cuáles embriones congela y cuáles transfiere tratando de que coincida el estadio del embrión con el día del ciclo de la receptora. RESPUESTA: Los embriones que voy a congelar corresponden a los 10 blastocistos tempranos grado 1 que fueron lavados. Las 10 Morulas grado 2 las voy a transferir frescas en el grupo de 10 vacas que estuvieron en celo hace 7 días, es decir que ovularon hace aproximadamente 6 días, lo cual corresponde con la edad de los embriones. Las 10 Morulas grado 1 las voy a transferir frescas en los grupos de vacas que presentaron celo hace 5.5 y 6 días, es decir que ovularon hace más o menos 4.5 a 5 días, no corresponde exactamente a la edad de los embriones pero dado que son las de mejor calidad pueden tener mayor grado de preñez que las de grado 2, adicionalmente te cumple el máximo de asincronía permitido para embriones frescos que es de 36 horas. Los 10 blastocistos grado 1 los voy a transferir en los dos grupos de vacas que presentaron celo hace 8 y 8.5 días, es decir que ovularon hace 7 y 7.5 días. Es el grupo de blastocistos cuya edad encaja mejor con los días de celo y ovulación de estas vacas.