TÉCNICA DE MICROSCOPIA ELECTRÓNICA Sr Luis Magán Perea Técnico Microscopia Electrónica Hospital del Mar, Barcelona PROCESOS DE M.E. • • • • • OBTENCIÓN DE LA MUESTRA FIJACIÓN INCLUSIÓN ULTRAMICROTOMÍA TINCIÓN OBTENCIÓN DE LA MUESTRA • TEJIDO EN FRESCO • MATERIAL CITOLÓGICO • TEJIDO INCLUIDO EN PARAFINA FIJACIÓN FIJADORES FIJACIÓN Glutaraldehido 2 % 30 m- 24 h Lavados tampón cacodilato 0,2 M Tetróxido de osmio 2% 1h Lavados tampón cacodilato 0,2 M INCLUSIÓN RESINAS • Gran poder de infiltración • Polimerización uniforme • Endurecimiento homogéneo • Buena elasticidad • Consistencia estable INCLUSIÓN Etanol de 96 º 2 veces 10 m Etanol de 100 º 2 veces 10 m Oxido de propileno Inclusión en resinas 2 veces 5 m 25% 50% 75% 100% 100% ULTRAMICROTOMIA CUCHILLAS TIPOS DE CORTES • CORTES SEMIFINOS • CORTES ULTRAFINOS TINCIÓN • CORTES SEMIFINOS: Azul de Toluidina • CORTES ULTRAFINOS: Acetato de uranilo Acetato de plomo PROCEDIMIENTOS ESPECIALES • MATERIAL INCLUIDO EN PARAFINA • MATERIAL HEMATOLÓGICO • DISCINESIAS CILIARES MATERIAL INCLUIDO EN PARAFINA PROTOCOLO DE INCLUSIÓN MATERIAL PARAFINADO Xilol 50 ºC 2h Etanol de 100 º 1h Etanol de 96 º 1h Cacodilato sódico 1h Tetróxido de osmio 1h Cacodilato sódico lavado MATERIAL HEMATOLÓGICO DISCINESIAS CILIARES CELULAS CILIADAS • • • • • Epitelio nasal Epitelio bronquial Epitelio oído medio Epitelio tubárico Encéfalo y médula Perdida aislada dos brazos MEDIDAS DE SEGURIDAD MEDIDAS DE SEGURIDAD