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XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica
VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica
X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular
DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE LA HORMONA SOMATOMEDINA (IGF-1) EN LA
LECHE COMERCIAL DE LA CIUDAD DE DURANGO
AUTORES Marín Quiroga, Arlette; Villanueva Fierro, Ignacio
DIRECCIÓN: CIIDIR IPN Durango. Sigma 119 Fracc. 20 de Noviembre II CP 34220 Durango Dgo. México.
Email: arlive@prodigy.net.mx
INTRODUCCIÓN
Para un aumento en producción de leche se utiliza
la hormona recombinante bovina de crecimiento
(rBGH) quien desencadena una elevada producción
de la hormona llamada factor de crecimiento tipo
insulina (IGF-1) que en los bovinos puede provocar
20 enfermedades entre las que destaca la mastitis.
Debido a que la IGF-1 es activa en los humanos,
existe la hipótesis de una ingesta por el humano de
leche procedente de vacas inyectadas con rBGH
podría desencadenar la excesiva producción de
IGF-1
provocando
división
y
crecimiento
incontrolable de las células; sin embargo también
hay efectos benéficos como ayudar a los bovinos a
recuperarse de problemas reproductivos. Aunque
esta hormona se comercializa en México y
específicamente
en
Durango,
no
existen
regulaciones para el uso o distribución; a diferencia
de la Unión Europea donde está prohibida su
comercialización. Por tal razón surge la necesidad
de proponer una metodología para detectar y
cuantificar la hormona IGF-1 en la leche comercial
de la ciudad de Durango.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se utilizó el equipo de electroforesis capilar (EC)
para cuantificar la concentración de IGF-1 en las
diferentes marcas y tipos de leche. Al equipo de EC
se le instaló una fuente de alto voltaje de 30kV, se
acopló al sistema un convertidor analógico digital
de 24 bits “Futek DAQ 1211”; el equipo tiene como
detector un tubo fotomultiplicador. La información
obtenida se comprobará en un equipo comercial
Beckman Coulter PACE-MDQ ubicado en la unidad
profesional interdisciplinaria de biotecnología
(UPIBI). Adicionalmente se hará una comprobación
utilizando un análisis de cromatografía de líquidos
acoplada a un detector de masas (LC-MS).
DESARROLLO
Se está trabajando en la estandarización del
equipo. Se realiza una desestabilización láctica
para concentrar las proteínas en las muestras de
leche. Se han optimizado las condiciones de
operación, como tiempo de inyección, voltaje de
operación, tiempo de análisis, detector utilizado. Se
prepararán capilares rellenandolos con diferentes
polímeros capaces de separar y cuantificar IGF-1.
Se propondrá una preparación de la muestra a
analizar. Se validará la metodología utilizada.
RESULTADOS
Se ha comprobado que el detector de tubo
fotomultiplicador es 10 veces más sensible que el
detector de capacitancia, se instaló un convertidor
analógico digital con lo que se logró tener un ruido
en el sistema de 0.5 mV, se logró estandarizar una
técnica para lograr la polimerización de N,N,N
trietilamonio-2-hidroxipropil-metacrilato-co-divinil
benceno,
así
mismo
se
estandarizó
la
polimeriazción de Glicidil metacrilato y Etilenglicol
dimetacrilato. El mejor buffer para el trabajo fue a
base de ácido cítrico y metil hidroxietil celulosa.
DISCUSIÓN
Se hicieron modificaciones en los parámetros de
operación y concentración descritos por Wieder et
al. (2006) en el monolito a base de GMA y DVB
para evitar que se saturen los poros con el
polímero, del mismo modo se agregaron
condiciones externas para rellenar el capilar y evitar
polimerización instantánea en el monolito a base de
EDMA y GMA propuesto por Ueki et al. en el 2004.
CONCLUSIONES
De acuerdo a lo observado en el laboratorio hay
diferencias en el tiempo de desestabilización de la
leche libre de rBGH y la leche comercial sin
etiquetar como libre de hormona.
Se utilizará en análisis posteriores el detector
de tubo fotomultiplicador para evaluar los dos
polímeros con los que se rellenaron los capilares.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1.Casado, S. Cortacero, S. Carrasco, A. Segura, A.
Fernández, A. 2006. Comparative study between a
commercial
and
a
homemade
capillary
electrophoresis instrument for the simultaneos
determination of aminated compounds by induced
fluorescence detection. Springer- Verlag. 386:
1835-1847.
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