Pr_ctica_04 - Campus Montecillo

COLEGIO DE POSTGRADUADOS
Institución de Enseñanza en C iencias Agr ícolas
Campus Montecillo
ECOLOGÍA QUÍMICA DE INSECTOS
ENT-665
Práctica 04
EVALUACIÓN DE LA FEROMONA DE Copitarsia decolora Guenée
(Lepidoptera: Noctuidae) MEDIANTE DOS TIPOS DE TRAMPAS.
INTRODUCCIÓN
Los insectos poseen la capacidad de detectar y responder a moléculas de olor que se
encuentran en el ambiente, la respuesta puede ser a compuestos específicos o a
compuestos con estructura similar a los que tambien responden otras familias de insectos
(El-Sayed et al., 2009; Groot et al., 2009). Por ejemplo, Copitarsia decolora Guenée
(Lepidoptera: Noctuidae), insecto de importancia para México y cuarentena para Estados
Unidos, produce y responde a los componentes Z9-14: OH y Z9-14: Ac (Rojas et al.,
2006; Muñiz-Reyes et al., 2007). Sin embargo, a ambos componentes también responden
otras especies de lepidópteros (Tumlinson, 1981; Muñiz-Reyes et al., 2007) a los que se
denomina como especies no blanco (Hight y Carpenter, 2009). Aunado a esto,
recientemente se ha observado que la eficiencia del sistema de trampeo depende también de
otros factores como: 1) limitaciones del liberador, 2) factores ambientales, 3) condiciones
del insecto y del cultivo a proteger, 4) diseño, color y costo de la trampa (Weissling y
Giblin-Davis, 1993; Rojas et al., 2006; Funes et al., 2009; Dodds et al., 2010). Los últimos
factores podrían ser considerados de mayor importancia ya que el diseño debe ir acorde a
la biología del insecto, mientras que la trampa de preferencia debe ser hecha de material
barato y fácil de construir; sin sacrificar la eficiencia de la misma (Rojas et al., 2006).
Esta práctica tiene como objetivo la evaluación de la feromona de C. decolora y de dos
tipos en la captura de machos específicos y de insectos no blanco.
Durante la práctica tendremos los siguientes objetivos particulares:
a) Elaboración de las trampas: de ala y de cubeta.
b) Calculo de las concentraciones de los dos componentes a usar.
c) Formulación de los septos con las cargas respectivas.
d) Colocación y registro de capturas semanalmente durante dos meses.
e) Análisis de septos de campo por microextracción en fase sólida y cromatografía de
gas acoplada a espectrometría de masas.
f) Análisis y discusión de la información.
MATERIALES Y MÉTODOS
Elaboración de las trampas. Se tendrán las tapas superior e inferior de la trampa de ala
(Figura 1) para ser impregnadas con el adhesivo, teniendo cuidado en que se apliquen dos
capas sucesivas del pegamento. Posteriormente se armaran las trampas y se colocara el
septo en la posición correspondiente. Para las trampas de cubeta (Figura 2) se
Entomología y Acarología/Ecología Química de Insectos
jcibrian@colpos.mx, tel. 55 58045900-1657, 595 9511580
COLEGIO DE POSTGRADUADOS
Institución de Enseñanza en C iencias Agr ícolas
Campus Montecillo
proporcionaran los recipientes y se harán las aberturas necesarias de acuerdo a las
indicaciones del instructor.
Figura 1. Trampa de ala
Figura 2. Trampa de cubeta
En el cuadro 1 se observan los compuestos que conforman la feromona de Copitarsia
decolora así como su densidad y pureza respectiva. Calcule las concentraciones requeridas
para seis tratamientos con 10 repeticiones cada uno de ellos.
Cuadro 1. Compuestos que conforman la feromona de C. decolora.
Compuesto
Concentración (%)
Densidad mg/mL
Pureza
Z9-14:Ac
80
0.87
95
Z9-14:OH
20
0.82
96
Los septos llevaran cargas de un mg y de dos mg, para estimar la permanencia de los
compuestos en el septo bajo condiciones de campo, por lo que se prepararan un total de 110
septos, 50 para evaluar capturas (10 son de repuesto, si es el caso) y 60 para evaluar en
cromatógrafo-espectrometria de masas a los 0, 30 y 60 días. Las revisiones de las trampas
se harán semanalmente y al cumplir 0, 30 y 60 días de permanencia en campo se retiraran
cinco septos de cada tratamiento, para su evaluación mediante microextracción en fase
sólida y análisis por cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas.
Material y equipo de laboratorio
1.
2.
3.
4.
5.
Matraces aforados de 1 mL
Micro-jeringas de 10 µL, 50 µL y 100 µL
Viales ámbar de 2 mL
Pipetas graduadas de 1 mL, 5 mL y 10 mL
Pipetas Pasteur
Entomología y Acarología/Ecología Química de Insectos
jcibrian@colpos.mx, tel. 55 58045900-1657, 595 9511580
COLEGIO DE POSTGRADUADOS
Institución de Enseñanza en C iencias Agr ícolas
Campus Montecillo
6. Micropipeta eppendorf de 1000 µL
7. Septos
8. Fibras MEFS
9. Trampas
10. Cromatógrafo acoplado a espectrometría de masas
Procedimiento
1. Realizar el cálculo para obtener 1 mg de volumen final de la mezcla de los compuestos
de la feromona de C. decolora (Cuadro 1).
2. Por separado, en un matraz aforado de 1mL, preparar una solución madre en hexano a
partir de los estándares de alta pureza. Considere la pureza y densidad (si se utiliza
volumen) para corregir la concentración.
3. En los matraces aforados de 1 mL prepare las concentraciones de cada compuesto y
deposite dicha concentración en un vial de 2 mL previamente etiquetado.
4. Verter el volumen deseado en cada septo, previamente lavado, con la ayuda de una
Micropipeta eppendorf.
5. Colocar los septos en la campana de extracción por 10 min a fin de acelerar la
evaporación del disolvente.
6. Preparar las trampas a evaluar en campo.
7. Colocar los septos en el interior de las trampas, enseguida, distribuir las trampa en
campo de manera aleatoria en un transecto, a una separación de 30 m a la par.
8. Revisar las trampas cada ocho días y clasificar por familia a los insectos capturados.
9. Determinar y comparar la frecuencia de las familias de insectos recolectadas con los
dos tipos de trampas.
10. Determinar la efectividad de feromona mediante el modelo estadístico Mixed.
LITERATURA CITADA
Dodds, K. J., G. D. Dubois, and E. R. Hoebeke. 2010. Trap type, lure placement, and habitat effects on
Cerambycidae and Scolytinae (Coleoptera) catches in the Northeastern United States. J. Econ.
Entomol. 103:698-707.
El-Sayed, A. M., D. M. Suckling, J. A. Byers, E. B. Jang, and C. H. Wearing. 2009. Potential of “lure and
kill” in long-term pest management and eradication of invasive species. J. Econ. Entomol. 102:815835.
Funes, H., E. Zerba, and P. González Audino. 2009. Comparison of three types of traps baited with sexual
pheromones for Ambrosia beetle Megaplatypus mutatus (Coleoptera: Platypodinae) in poplar
plantations. J. Econ. Entomol. 102:1546-1550.
Groot, A. T., O. Inglis, S. Bowdridge, R. G. Santangelo, C. Blanco, J. D. López, A. Terán Vargas, F. Gould,
and C. Schal. 2009. Geographic and temporal variation in moth chemical communication. Evolution
63:1987-2003.
Hight, S.D and J. Carpenter. 2009. Flight phenology of male Cactoblastis cactorum at different latitudes in
the Southeastern United State. Fla. Entomol, 92: 208-216.
Muñiz-Reyes, E., J. Cibrián-Tovar, J. Rojas-León, O. Diaz-Gomez, J. Valdes-Carrasco, and N. BautistaMartinez. 2007. Captures of Copitarsia decolora (Lepidoptera: Noctuidae) with traps baited with
varying ratios of sex pheromones. Agrociencia 41:575-581.
Entomología y Acarología/Ecología Química de Insectos
jcibrian@colpos.mx, tel. 55 58045900-1657, 595 9511580
COLEGIO DE POSTGRADUADOS
Institución de Enseñanza en C iencias Agr ícolas
Campus Montecillo
Rojas, J., H. H. González, M. C. Ruíz, R. D.N. Rangel, E.I. Ceja, C. G. Garcia, and L. I. Del Real. 2006a.
Simposio sobre trampas y atrayentes en detección, monitoreo y control de plagas de importancia
económica. pp: 51-56. In. Optimización de un sistema de monitoreo/trampeo masivo para el manejo
del picudo del agave, Scyphophorus acupunctatus gylh, Sociedad Mexicana de Entomología y El
Colegio de la Frontera Sur. Manzanillo, Colima, México.
Rojas, J. C., L. Cruz-lopez, E. A. Malo, O. Díaz-gómez, G. Calyecac, and J. Cibrián-Tovar. 2006b.
Identification of the sex pheromone of Copitarsia decolora (Lepidoptera: Noctuidae). J. Econ.
Entomol. 99:797-802.
Tumlinson, J. H., E. R. Mitchell, and P. E. Sonnet. 1981. Sex pheromone components of the beet armyworm,
Spodoptera exigua. J. Env. Sci. Health. Part A Enviro. Sci. Eng. 16:189-200.
Weissling, T. J. and R. M. Giblin-Davis. 1993. Water loss dynamics and humidity preference of
Rhynchophorus cruentatus (Coleoptera: Curculionidae) adults. J. Environ. Entomol. 22:93-98.
Entomología y Acarología/Ecología Química de Insectos
jcibrian@colpos.mx, tel. 55 58045900-1657, 595 9511580