Universidad Veracruzana Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia Determinación de BABESIA GAÑIS en Frotis Sanguíneos y su Correlación con el Estado Físico-Clínico del Perro en el Puerto de Veracruz. TESIS PROFESIONAL QUE PARA O B T E N E R EL TITULO D E : Médico Veterinario Zooiecnista P R E S E N T A : LUIS AGOSTA AGUILAR VERACRUZ, VER. 198S COHTENIIX) CAPITULO I . - INTHODUCCIOti a) ,- mPORTAHGIA b) .- HISTORIA c) .- CARACTEai3TICA3 f¡0IÍF0L0GICA3 d) .- CICLO BIOLOGICO e) .- TRANSKISION f ) .- DISTRIBUCION GEOCRAPICA g) .- L A ENFERMEDAD E N EL PEHRO h) .- PATOGENIA i ) .- SIKTOfilATOLOGIA ¡ ) . - LESIONES k ) . - INMUNIDAD 1 ) . - DIAGNOSTICO m).- TRATAKIENTO n ) . - CONTHOL CAPITULO I I . - H A T K A I A L Y SÜETCDC a ) M A T E R I A L BIOLOGICO b}.- MATERIAL DE LABORATORIO c) .- SUSTANCIAS d) .- METODO e) .- TECNICA CAPITULO I I I , - RESULTADOS CAPITULO I V . - CONCLUSIONES CAPITULO V.- SUGERENCIAS CAPITULO V I . - BIBLIOGRAFIA , CAPITULO I níTHODUCCION IMPORTANCIA. La babesiosis es una infestacián p a r a s i t a r i a , causada por un protozoario, en e l perro l a Babesia canis, l a cual ge- neralmente es transmitida por garrapatas. Este microorganismo se alberga en l a sangre y ataca principalmente a l o s e r i t r o c i t o s , caijsando su destrucciSn y produciendo hemolisis, cuyo efecto se r e f l e j a como una anemia grave, p a l i d e s de mucosas,— f i e b r e a l t a , hemoglobinuria, t r i s t e z a , anorexia, rápida ema— ciación, postración e i n c l u s o l a muerte,(2,3,8,9,11,13,15) E l p r i n c i p a l transmisor de l a Babesia canis es l a g a r r a — pata, aunque tenemos machas especies, l a más importante es l a d e l gánero Rhipicephalus sanguineus, que es probablemente l a más ampliamente d i s t r i b u i d a en e l mundo, esta garrapata, además ha sido implicada en l a transmisián de c i e r t o ntSmero de infecciones protozoariaa, v i r a l e s y r i c k e t t s i a l e s de l o s £inimales domésticos y d e l hombre.(2,11,13,15) La babesiosis es un importante problema patológico, ya — que se ha reportado en c a s i todo e l mundo y a f e c t a a l o s a n i - males domésticos y s a l v a j e s ; ha sido diagnosticada en bovinos, equinos, suinos, ovicaprinos, f e l i n o s y c i e r t a s variedades de aves, en e l género canidae, como son e l perro doméstico y s a i vaje, chacales, coyotes y lobos. Se d e s a r r o l l a principalmente ' ' en todas aquellas partes don de e x i s t e n vectores adecuados, pero especialmente en zonas — costeras y v a l l e s con clima t r o p i c a l húmedo y s u b t r o p i c a l , — donde es. mayormente p r o p i c i o e l d e s a r r o l l o de 13) vectores,(2,3,2 E l estudio de l a babesiosis tiene gran ijnportancia^ además, debido a s u carácter de antropozoonosis, ya que e l hombre puede i n f e s t a r s e por d i f e r e n t e s especies de babesias. Se han r e — portado casos clínicos en humanos, donde l a infestacián se debía posiblemente a 3 6 4 especies d i f e r e n t e s , l a enfermedad a l p r i n c i p i o había sido diagnosticada como paludismo.(3^.5) La introducción de animales, importados Q de razas puras con fines reproductivos que son trasladados o en tránsito de zonas l i b r e s de b a b e s i o s i s o de garrapatas a zonas ensooticas, está l i m i t a d a , debido a que estos son más susceptibles y p r i n cipalmente l o s más afectados por esta enfermedad, l a cual cursa en e l l o s con síntomas graves y en forma aguda, y debiéndose también a l a restricción de movimientos que imponen l a s leyes de cuarentena. Contrariamente, l o s a n i m a l e s - c r i o l l o s o cruzas existentes en l a región, son más r e s i s t e n t e s por tener c i e r t a inmunidad n a t u r a l , adquirida por e l constante contacto con l o s agentes transmisores, y por l o s anticuerpos obtenidos de l a ma dre a través d e l calostro O por vía t r a n s p l a c e n t a r i a , por l o cual l a mayoría de l o s casos cursan en forma crónica con s i g — nos leves o asintomáticos.(2,3,11,13,15,18) La babesiosis l a t e n t e es muy frecuente en l o s animales, ya que l o s que han padecido l a enfermedad albergan parásitos en sus e r i t r o c i t o s durante meses, incluso años después de curada l a misma, siendo estos, r e s e r v o r i o s que mantienen parásitos en su organismo, que mediante vectores apropiados son e l pimto de P ^ t i d a para l a difusión de l a enfermedad a otros animales de 1^ misma especie y a l hombre.(2,3,13) . Debido a l a importancia de l a enfermedad, es n e c e s a r i a l a •^^teccién de l o s casos p o s i t i v o s a l a infestación por Babesiacania, mediante un diagnóstico p r e c i s o , e l cual sólo se determina CQj^ 2.S. demostración d e l microorganismo, en finos f r o t i s - sanguíneos, teñidos mediante d i f e r e n t e s métodos de coloración, CODO son, l o s de (íiemsa, Wright, Romanowsky y Naranja de A c r i dina. Las babesisia 3on demostrables algunas veces aun cuando — l o s animales no presenten sintomatología d e l padecimiento. (2,10,5) HISTORIA. La Babesia canis, es un hemoparásito de clasificación — completa aún i n c i e r t a , agrupado por algjunoa autores en^el Phy— lum protozoa y en l a Clase esporozoo. Es una de l a s babesias que primeramente se descubrieron, fue v i s t o por primera vez en I t a l i a por Piaña y G a l l i - V a l e r i o en 1895 en l a sangre de vn pe r r o enfermo. La enfermedad causada por este parásito, fue posteriormente observada por Purbis, Duncsn, Hutoheon y Lounsbury en e l SIAT de A f r i c a , por Eoch en e l Este de A f r i c a y por M a r — choux en e l Sénegal; en Francia fue v i s t a por Nocard y Almy en perros de caza y estudiada minuciosamente por Nocard y Motas en 1902. (8.) Su biología l a estudiaron además, sobre todo N u t t a l l y Gra bam-Smith y Christophers en 1907, y riiás recientemente observada a l microscopio electrónico de s u p e r f i c i e y de fijación por Simpson y colaboradores en 1963.(8,12) Además de ésta, e l perro es infestado por otras especies — de babesias como son l a B. v o g e l i y l a B. g i b s o n i , l a s cuales ban sido reportadas en A s i a y A f r i c a , y más recientemente en Japón, India y E.D.; o t r a especie ha sido l o c a l i z a d a también en perros de América d e l Sur, l a . c u a l ha sido d e s c r i t a con un gánero a d i c i o n a l , l a Rangelia v i t a l i i . ( 1 1 , 6 ) CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS. La Babesia canis. es e l parásito más grande dentro de su género, sus medidas o s c i l a n entre 2 , 5 - 3^u x 4 - 7t., siendo por tanto l a más l a r g a de l a a babesias que afectan a l o s canideos, es uaualmente observada como un organismo piriforme o con f o r ma de lágrima, dentro d e l e r i t r o c i t o , en e l cual pueden s e r — observados de 1 a 16 parásitos,,aunque 2 es mSs comón. Tales — congregaciones r e s u l t a n de l a invasión múltiple d e l e r i t r o c i t o , seguida por l a división de l o s organismos. La n a t u r a l e z a p o l i m o r f i c a de l a s babesias puede s e r observada, s i un f r o t i s s u f i c i e n t e de sangre es examinado. Dos cuer pos pueden e s t a r enlazados por bandas eosinófilas, se observan todas l a s fases de l a evolución de estas, y a veces con aspecto s i n g u l a r en d i f e r e n t e s eritrocitos.(3,5,6,10,11) Las babesias se rodean de una membrana citoplasmática v i - s i b l e , dentro de cuyo conjunto hay un solo núcleo prominente,contenido en una membrana doble, e l citoplasma de estos p a r á s i t o s contiene una red extensa de retículo endoplásmico entre e l cual asientan granulos, organitos densos y raras veces v a cuolas a l i m e n t i c i a s , ( 1 2 ) Se han encontrado estos microorganismos en e l plasma s a n — guineo fuera de l o s e r i t r o c i t o s abundantemente, mostrando f o r mas redondeadas y amiboideas.(9,11) La Babesia gibsoni se describe brevemente a continuación para f a c i l i t a r s u diferenciación con l a B. canis, ya qize t a m bién i n f e s t a considerablemente a l o s canideos, y ea de i m p o r t a n c i a porque prevalece en algunas regiones. Es un organismo pequeño, mide 1.1- 2 ^ x 1,2- 4yW y muy p o — l i m o r f i c o , l o s parásitos generalmente son hallados solos, pero 2 ó más t r o f o z o i t o s ocasionalmente son v i s t o s en un solo trocito.(6) eri— CICLO BIOLOGICO. E l d e s a r r o l l o ¿e las babesias, se ha demostrado con ma—• yor c l a r i d a d en l a Babesia canis. y u t i l i z a n d o como transmisor a l a garrapata Denaacentor r e t i c u l a t u s . ( 3 ) Después de ingerida l a sangre d e l hospedador enfermo, por l a garrapata hembra sexualmente madura, l a mayor parte de l a s baiaesiaa mueren en su i n t e s t i n o , pero algunas (ameboides) pene tran en l a s células e p i t e l i a l e s y después de una intensa m u í — tiplicación, se transforman en formaciones con aspecto de s a l chichas, de 15yW de l o n g i t u d (quinetos), que l l e g a n a l ovario a través de l a cavidad general del artrápodo, atacando a l o s évu l o s en cuyo i n t e r i o r adoptan forma redondeada. La invasión es tan abundante, que prácticamente todos l o s huevos están i n f e s tados hasta con 20 parásitos. En e l l o s se dividen v a r i a s veces y se convierten en formas muy pequeñas y redondeadas. Las g a rrapatas procedentes de estos huevos contaminados, inicialmen— te están parasitados en l a s células i n t e s t i n a l e s , a p a r t i r de l a s cuales l a s babesias emigran hacia laí grandes células de l a s glándulas s a l i v a l e s . S i n embargo, e l d e s a r r o l l o raras v e — oes se prosigue en e l estado l a r v a r i o , sino que l o más pronto se reanuda en l a fase n i n f a l . La multiplicación (división b i naria) principalmente se r e a l i z a en l o s machos y hembras a d u l tas, en l o s que l a s glándulas pueden estar parásitadas en e l 50 por ciento de l o s casos, EL comienzo de, l a succión de s a n gre da a l o s parásitos l a señal para i n i c i a r una intensa re producción, por l o que mediante repetidas f i s i o n e s b i n a r i a s , su námero puede elevarse a v a r i o s m i l l a r e s , hasta que f i n a l "lente, a l o s 3 días, se ha producido un ac&nulo de individuos Vermiformes diminutos, que se evacúan hacia e l lÜL.en de l a s — Slándulas y que l l e g a n a l a sangre d e l perro con l a s a l i v a , a través de l a herida fraguada por l a picadura. Lo noraal, QZ que l a infestación adquirida por l a garrapat a , no ce t r a n s a i t a en sucesivos actos de succiones a otro donante, p'jro en cambio, en contri- de l o qua sucede con l a s Thei^ l e r i a s , s i pasan a l a descíindencia, en ocasiones a través de v e r i a s generrciones. Zn l a s garrapatas de un solo hospedador, l a infestación solamente se produce a través d e l contagio de l a descendencia, Tambión existe un término d e l c i c l o de d é s e — r r o l l o dentro de una misma generación de garrapatas, por ejemplo, s i l a s l a r v a s de Rhipicephelus s a n ^ i n e u s han ingerido — sangre contaminada por babesias (3. v o g e l i ) , entonces l o s para s i t o s serán transmitidos por l a s n i n f a s , pero s i l a s i n f e s t a — das han sido estas, l a transmisión l a realizarán l e s g a r r a p a — tas adultas. En l a s n i n f a s l a s formas p a r a s i t a r i a s inicialmen— te proceden de l a s células i n t e s t i n a l e s , emigran hacia l a s cél u l a s musculares que no son destruidas durante l a muda, se muí t i p l i c a n en e l l a y una vez completada l a metamorfosis se d i r i gen hacia l a s nuevas células de l a s glándulas s a l i v a l e s , donde concluye su desarrollo.(3) THAHSMISION. La infestación n a t u r a l por Babesia canis, es generalmen-. te transmitida por garrapatas, l a s cuales d i f i e r e n en su género o especie segiSn l a comarca, como se describe en e l cuadro 1 de acuerdo a su orden de importancia, _ • E l c i c l o de v i d a de estas, en circunstancias normales suel e durar menos de 1 año, pero algunas garrapatas de 3 huespe— des pueden completar sólo una parte d e l c i c l o de v i d a a l año. Hay 3 fases p a r a s i t a r i a s en e l c i c l o de v i d a de l a s Argasidas e Ixodidasi La l a r v a , l a n i n f a y e l adulto. La l a r v a tiene 3 pares de patas en comparación con 4 pares en l a s otras fases, y puede pasar l a mayor parte de su v i d a separada d e l huésped. Cuadro tfo, 1.- Garrapatas transmisoras de l a Babesia canis, Begin BU dlBtribuoidn, modo de tran:BmÍBÍ<5n, ndmero de hueapadea y algunas caraoterístlcaa. Garrapata !Fran smialtSn No. da huespedes Distrlbacldn RhlplcepbaluB sanguineus. Hareditarla y de estadio a estadio. 3 India, A s i a , Sur da A f r i c a , Worte, Centro y Sur de Améri- BMBOiiliT'slalls leaohl. Hereditaria y de estadio a estadio 3 A s i a , India, Sur da A f r i c a , Norte do América. 3 A s i a y Sur de Earopa. Garacter1stíoaB Relacionada con criaderos de pa^ rroa. CQ. Dermacantor reticulatus. Dermaoentor plotus. Be estadio a estadio. Bermacantor anderaoni. Hyaloma margina tim. 1x0das riciniie. 1-3 3 Hereditaria 2-3 líusia, Ganadit, Pran c i a , Borto de li;áxi"co Norte y Oeate de Es tadOB Uiildos. o. y HE. ds B.D. Abunda en ¿ p o — cas oaluroana, P r i n c i p a l veotor en olimas fríos, Ciólo de 2-3 afios. Europa, India, Norte de A f r i c a , Sur de Rusia. Europa, A s i a y Norte de A f r i c a , Ciclo da 3 aüOB. (2,8,9.11,13) Una vez que se f i j a a un huésped adecuado, i n g i e r e sangre o -piasiTía durante 3 a 7 días hasta completar l a ingurgitación, a p a r t i r de esta fase, e l c i c l o de v i d a d i f i e r e segfin l a s e s p e cies.(13) De l a s garrapatas vectoras, Brump (1936) aseguró haber i n festado perros empleando garrapatas de estas especies, que no ge hablan alimentado de perros durante 5 generaciones, sino — que se habían mantenido únicamente en e r i z o s ; llegó a l a c o n — clusión de que dichas garrapatas mantuvieron l a infestación — durante 5 generaciones mediante l a multiplicación de l o s esporoblastos dentro de ellas.(11) Es también importante, tener en consideración como un me— dio de transmisión de este microorganismo, l o s materiales q u i rúrgicos, jeringas y agujas contaminadas, como a s i l a s t r a ñ s — fusiones sanguíneas procedentes de perros infestados,(2,3) DISTRIBUCIOn GLOGHÁFICA. La distribución geográfica de l a babesiosis canina se — puede considerar cosmopolita, pero su frecuencia se restringe principalmente a l o s países y zonas costeras con clima t r o p i — c a l hámedo y s u b t r o p i c a l y algunas de clima templado, aunque con menor frecuencia, tambiln se ha encontrado en climas fríos por ósto, constituye un problema patológico de importancia de acuerdo a l grado de distribución d e l agente causal, e l cual es directamente proporcional a l a distribución, localización y — d e s a r r o l l o de l o s insectos vectores que l a transmiten. Hasta hoy se ha observado en I t a l i a , Francia, Hungría, J a pón, China, India, S i r i a , Tiinez, en e l centro de Rusia, en e l Sur y Centro de América-, en E.U. primeramente fue d i a g n o s t i c a da en F l o r i d a , V i r g i n i a , Nueva York y C a l i f o r n i a , y ahora está presente en l a mayoría de l o s estados del Sur y Suroeste; r e — cientemente se reportaron 11 casos en Okinawa, Japán, entra — A b r i l de 1979 y Febrero de 198O. Todavía es dudoso s i también se presenta en Alemania.(3,6»7,11,13,14) LA ENPERMEDAD EN EL PERRO. La enfermedad en e l perro, causada por l a infestación — por Babesia canis y Babesias spp. se l e conoce como Babesiosis canina, Piroplasmosis canina, Fiebre b i l i a r , Fiebre por g a r r a patas e I c t e r i c i a maligna.(2,8,13,15) PATOGENIA. Cuando se i n f e s t a un animal, l a multiplicación de l o s ~ protozoarios en l o s vasos periféricos o en l o s vasos v i s c e r a l e s , alcanza un máximo con e l d e s a r r o l l o de hemáiiaia clínicamente i d e n t i f i c a b l e , después de un período de incubación de 7 a 20 días.(2) Estos parásitos, redondeados, inicialmente se l o c a l i z a n sobre l a s u p e r f i c i e de l o s e r i t r o c i t o s y se desplazan con movimientos ameboideos, s i n l e s i o n a r l o s . Durante l a d i v i sión b i n a r i a y cuádruple p o s t e r i o r , l o s individuos resultantes penetran en e l e r i t r o c i t o , en cuyo i n t e r i o r aparecen en l a mayoría de l o s caaos dos formas de pera, con sus extremos agudos aproximados. Como e l proceso de partición puede r e p e t i r s e , fi- nalmente e x i s t e n también v a r i a s estructuras piriformes.(3) La babesia, ejerce su acción e x p o l i a t r i z a l alimentarse de l a hemoglobina d e l e r i t r o c i t o , acción mecánica a l ocupar gran parte d e l espacio funcional de éste, acción traumática a l dest r u i r l o y acción mecánica a n i v e l de c a p i l a r e s ocasionando a — glomeraciones y acción tóxica por l o s productos de secresión y excreción.(15) La gravedad d e l proceso depende d e l grado de destrucción de l o s e r i t r o c i t o s , l o s cuales pueden estar parasitados d e l 1a l 10 por ciento," y destruidos hasta un 75 por ciento; y d e l - C i c l o que muestra l a forma habitual de multiplicaciáti de l a Babesia cajiis enl a sangre c i r c u l a n t e . grado de hemáligis, que clínicajaente se transforma en anemia, i c t e r i c i a y hemoglobinuria. Los e r i t r o c i t o s parasitados y sus restos ae aglutinan y forman trombos en l o s c a p i l a r e s de l o s órganos (cerebro, bazo, riñones, miocardio y mucosa i n t e s t i n a l ) , que dan lugar a trastornos funcionales, responsables d e l predominio de síntomas r e f e r i b l e s algunas veces a uno u otro sistema.(3,9) Sn l a babesiosis canina, especialmente se ha indicado c i e r t a variedad de manifestaciones desviadas, l a s cuales pueden — d i s c u r r i r de modo asintomátioo o con signos morbosos leves has t a graves e incluso mortales, l o s cuales no todos son a t r i b u i bles directamente a l o s parási^o^s, ya que algunos son c o n s e cuencia de l a f i e b r e y/o anemia, estas d i f e r e n c i a s en e l curso, pueden deberse también a l a d i s t i n t a v i r u l e n c i a de l o s parásitos, a s i como a l a r e s i s t e n c i a d e l hospedador,(2,3,9) La muerte probablemente dependa de una anoxia anémica,(2) SHíTOHATOLOdlA. ' • • Dependiendo de l a v i r u l e n c i a de l a s cepas l o c a l e s , l a en fermedad se puede manifestar en forma aguda, subaguda y crónica. Los síntomas d e l animal infestado serán de acuerdo a l a forma en que curse l a enfermedad,(15) PORBÍA AGUDA.- Tras una incubación de 7 a 10 días, l o s síntomas se pueden presentar como sigue: Inapetencia, malestar, decaimiento, f i e b r e (40-43 , p o l i d i p s i a , anemia, hipoxia, - hemoglobinuria sólo en casos muy agudos, adquiriendo l a o r i n a color vino de Oporto, hemoglobinemia, l a s mucosas v i s i b l e s se h a l l a n a l p r i n c i p i o rojizopálidas y más tarde cianóticas, emaciación rápida, puede también haber i c t e r i c i a , no son raros l a incoordinación, a t a x i a y rechinamiento de dientes, hay postración, coma y muerte. La orine de estos animales contiene albúmina, algunas v e ces glucosa y pigmentos b i l i a r e s , l o s cuales comunican a l a — o r i n a un t i n t e oscuro verdoso. La sangre es r o j o c l a r a y su sue ro r o j i z o o rojovordoso, e l número de e r i t r o c i t o s desciende a l a mitad, a l a t e r c e r a parte o menos aún de l a c i f r a notmal, en cambio e l de l e u c o c i t o s aumenta. POMA CHONICA.- Cuando l a enfermedad toma este curso, se presentan l i g e r a i c t e r i c i a , anemia hemolítica severa, decaí miento, deshidratacián, caquexia, otras veces hay manifestacio nes c i r c u l a t o r i a s con edema, purpura y a s c i t i s , también se pue den presentar problemas r e s p i r a t o r i o s con catarro, respiración difícil y acelerada (45/iEin.), e l pulso también está acelerado, a n i v e l o c u l a r hay q u e r a t i t i s e i r i t i s , hay dolores musculares y reumatoides o e l sistema nervioso c e n t r a l es afectado y aparecen problemas en l a locomoción con p a r e s i a o contracciones e p i l e p t i f o r m e s , otras veces con problemas cerebrales semejantes a l a r a b i a , debido a l a s aglomeraciones de t r o f o z o i t o s a n i v e l de c a p i l a r e s cerebrales, en l o s cachorros se observa un estado hemorrágico a n i v e l de bordes de l a o r e j a e i n t e r n a mente, hay estomatitis u l c e r a t i v a o g a s t r i t i s , l a s heces son blandas y algunas veces hay d i a r r e a hemorrágica, a l a p a l p a ción e l abdomen r e v e l a un aumento del tamaño d e l hígado y — bazo. E l examen hematológico r e v e l a una anemia hipocrómica p r o g r e s i v a , l a sangre tiene aspecto acuoso y su sedimentación es difásica, e l número de l e u c o c i t o s se encuentra aumentado y e l de e r i t r o c i t o s disminuido, a veces hasta en l a cuarta o q u i n — t a parte de l a c i f r a normal. S i l o s animales no sucumben agotados, desaparecen poco a poco l a s manifestaciones de l a anemia y acaban por curar d e l todo a l cabo de 3 a 6 semanas. En todos l o s casos clínicos se produce emaciación rápida, {2,3,8,9,6.7,10,11,13,14) LESIONES, Entre l a s lesiones más frecuentes y s i g n i f i c a t i v a s , teñe nos un aumento d e l volumen de l o s diversos ganglios linfáticos, e l bazo está aumentado de tamaño y su pulpa se h a l l a rojoazul oscura y firme o ligeramente reblandecida con corpósculos l i n foides prominentes, e l hígado aparece agrandado, hiperémico y amarillo con congestión c e n t r o l o b u l i l l a r y en ocasiones con — n e c r o s i s de idóntica localización, l o s ríñones muestren una de^ coloración ejnarillenta, e histopatológicamente un considerable grado de n e f r o s i s o n e f r i t i s i n t e r s t i c i a l , e l corazón se en cuentra a menudo pálido e ictérico y se advierten pequeñas hemorragias debajo d e l epicardio y endocardio, l a mucosa gastroentérica está pálida o ligeramente r o j a en algunos puntos, y presenta infiltración edematosa. Contienen, l a v e j i g a de l a — hiél, mucha b i l i s espesa, verde negruzca y algo grumosa, y l a u r i n a r i a con frecuencia orina hemoglobiniÜrica. £n estas, ade-^ más, completan e l cuadro signos'de anemia profunda y acumula— ción o efusiones de pequeño volumen de líquido seroso en l a s cavidades abdominal, p l e u r a l , pericárdica, y hemorragias en — membranas serosas y mucosas, en corazón, pleura, pulmón e i n testino. • , . Las a l t e r a c i o n e s anatómicas, generalmente son más manifies tas en l o s casos crónicos, exceptuando l a i c t e r i c i a que f a l t a en e l l o s , aparte l o s casos peragudos, en l o s cuales l a s a l t e r a cienes morbosas pueden faltar.(3,8,9,13,15) imiUNIDAD. Es muy probable que l o s hemoparásitos d e s c r i t o s simplemente como Babesia c E n i s , en diversos paises, no sean idánticos y que por tanto esta especie comprenda en r e a l i d a d v a r i a s , o por l o menos algunas variedades o cepas d i s t i n t a s inmunobio lógicamente. Wc. Fadysan y N u t t a l l observaron que hace ya l a r go tiempo, perros curados de babesiosia Indica, eran r e c e p t i vos para l a infección por una cepa A f r i c a n a d e l parásito, también experimentos de inmunización cruzada, hechos por Lav¿ ran y N a t t a n - L a r r i e r en 1913, demostraron que babesias A f r i c a ñas inmunizan también contra parásitos Europeos, pero estos no contra l o s Africanos.(8,9) Estas pruebas demuestran que, después de l a infestación con l o s d i f e r e n t e s géneros de babesias, se adquiere c i e r t a — inmunidad, aunque también comprobaron que no hay inmunidad — cruzada entre l a s d i f e r e n t e s cepas.(8,15) En zonas enzooticas, l o s animales más susceptibles a l a enfermedad son con mayor frecuencia l o s perros importados, de razas puras o l o s incorporados a l a región con f i n e s reproduc t i v o s o en tránsito. Los perros indigenas de estas regiones, se afectan r a r a vez por v i r t u d de l a r e s i s t e n c i a n a t u r a l de l o s animales muy jóvenes y por l a inmunidad brindada por anticuerpos c a l o s t r a l e s de l a s madres inmunes, dicha r e s i s t e n c i a innata es temporalmente elevada durante 1 ó 2 meses o gradualmente se con v i e r t e en un estado de premimición,(2,3) En estas áreas l o s ajiimales jóvenes quedan con f r e c u e n c i a infestados antes d e l año de edad. Una exposición durante este período protege a l a mayor parte de l o s animales de ataques subsiguientes, o l a — infección muchas veces pasa inadvertida, trayendo como oonse- cuencia inmunidad.(13) Entonces, l a infestación por Sabesias spp. confiere premu nición, l a cuei es una inmunidad o_ue sólo se manifiesta cuando e l parásito se encuentra en e l huésped, y cede muy pronto, después de eliminados todos l o s parásitos, por l o cual, no — existirá inmunidad s i n su presencia,(11,18) 3 i un animal sobrevive a l a enfermedad, se d e s a r r o l l a en él una inmunidad relativamente sólida y se convierte en p o r tador, en e l cual se mantiene una infestación subclínica inno cua, mediante un delicado e q u i l i b r i o inmunológico entre prot£ zoarios y anticuerpos. Las babesias pueden permanecer en e l — organismo durante 2 ó 3 años.(2,3,15) E l e q u i l i b r i o puede a l t e r a r s e fácilmente por stress am b i e n t a l , sobretodo transporte y privación de alimento o enfer medades i n t e r c u r r e n t e s . En este estadio de portador, e l a n i — mal sigue r e s i s t e n t e a l a enfermedad y p e r s i s t e a s i dui'ante aproximadamente 1 ano. En reinfecciones constantes, como ocur r e en situaciones enzoóticas, l a protección es constante, Aán cuando l a infestación p e r s i s t a , l a v i r u l e n c i a de l a s a n gre en experimentos de transmisión se pierde periódicamente porque desaparecen l a s formas i n f e c c i o s a s d e l parásito en l a sangre periférica.(2,3) • S i a l presentarse l a enfermedad se hace con urgencia e l tratamiento y éste r e s u l t a e f i c a z , entonces, l o s protozoarios serán eliminados antes que se produzcan l o s anticuerpos y no quedará inmunidad alguna.(2) Se pueden i n f e s t a r deliberadamente animales jóvenes, de manera que adquieran l o s parásitos mientras todavía son b a s tante r e s i s t e n t e s a l padecimiento, de esta manera, en adelante serán r e s i s t e n t e s a l a reinfección. l o s microorganiamoa u t i l i z a d o s en este método se atenúan primero por paso continuo en animales esplenectomizados y — luego se a p l i c a n a l o s animales receptores, en sangre compile t a . Como es de esperarse, l o s efectos c o l a t e r a l e s de este t_i po de infestacián controlada pueden s e r relativamente y de o r d i n a r i o se requiere quimioterapia para graves combatirlos. (2,13) La b a b e s i o s i s , es también un padecimiento interesante -— por e l hecho de que l a esplenectomia en l o s animales portad£ res d e l parásito agrava l a enfermedad clínica. E l bazo no s6 l o es fuente de anticuerpos en e l organismo, sino que tam bien destruye e r i t r o c i t o s infestados; s i estas funciones se pierden como resultado de l a esplenectomía, vuelve a manifes tarse e l padecimiento clínico.(18) DIAGNOSTICO. Antes de formular un diagnóstico, es necesario tomar en consideración l o s ^-j a^ij ontaa aspectos; La verificación de l a presencia d e l vector o s i e l a n i mal estuvo en contacto con e l , o residió en zonas enzoóticas l o s meses anteriores.(2) Desde e l punto de v i s t a clínico de be s e r considerada esta enfermedad cuando un perro con a p a rente anemia hemolítica tiene respuesta baja a l a t e r a p i a , presenta f i e b r e de moderada a a l t a , hemoglobinuria, l a s muco sas pálidas o cianóticas, emaciación rápida, anorexia, tris- teza, q u e r a t i t i s , y a l a palpación presenta e l abdomen d i s tendido revelando aumento del bazo e hígado.(2,7,8,10) S i bien posee v a l o r evidente para e l diagnóstico l a pres e n c i a en l a necropsia de un considerable aumento de tamaño d e l bazo y d e l hígado, hemoglobinuria en v e j i g a u r i n a r i a , y hemorragias en miocardio, es importante, s i n embargo, un — — diagnáatioo por exámenes de l a b o r a t o r i o , en l o s cuales l a s — pruebas hematolágicas son s i g n i f i c a t i v a s cuando revelan una a nemia regenerativa, caracterizada por p o i q u i l o s i t o s i s , poli— c r o m a t o f i l i a , r e t i c u l o s i t o s i s , l e u c o s i t o s i s en diverso grado, generalmente oon n e u t r o f i l i a , algunas veces e s f e r o o i t o s y número aumentado de e r i t r o c i t o s nucleado3.(2,5,6,9) . ~ Un diagnóstico certero, s i n embargo, sólo puede hacerse mediante l a comprobación de l a s babesias dentro de l o s e r i t r o c i t o s , l a s cuales sólo se observan generalmente en f r o t i s d e l gados y f i n o s r e a l i z a d o s con sangre proveniente de un animal p o s i t i v o , teñidos mediante l o s métodos de coloración de Giemsa, ííright, Romanovísky y Naranja de A c r i d i n a . Estos son observados a l microscopio mediante e l lente de inmersión en a c e i t e (100 x)', para su descubrimiento, se exige una minuciosa observación y e l conocimiento de l a morfología d e l parásito, ya que en algunos casos es muy difícil o imposi ble su localización. Cuando no se manifiestan en l a s extensio nes de sangre, algunas veces se l l e g a n a descubrir en improntas r e a l i z a d a s de órganos, particularmente de pulmón, también teñidas. En l o s casos en que l a investigación microscópica r e s u l t e negativa, l a inoculación de sangre sospechosa f r e s c a a perros jóvenes, a veces ofrece resultados p o s i t i v o s a l poner de man¿ f i e s t o estos, l o s signos de l a enfermedad. Los perros pueden e s t a r o no esplenectomizados,(2,5,6,8,9»10,12,l8) CONTROL, En e l c o n t r o l de l a enfermedad, posee importancia indudable e l conocimiento d e l c i c l o v i t a l de l a garrapata, ya que actfia como verdadero v e c t o r biolégioo en l a transmisión de l a Babesia canis.(2,13) La eliminación de l a b a b e s i o s i s de una zona determinada, depende de l a erradicación de l a s garrapatas vectoras, l o cual es un problema de Entomología a p l i c a d a . Aquellos ácaros que p a r a s i t a n solamente un huésped, son mSs fáciles de e r r a d ^ car jr producen menos propagación d e l padecimiento que l o s que p a r a s i t a n 2 Ó 3, por l o c u a l , e l control de l a s garrapatas que pueden s o b r e v i v i r en animales domésticos y s i l v e s t r e s plantea un problema de mayor importancia.(2) Otra característica d i ¿ na de mención es l a capacidad de l o s protozoarios para p e r s i s t i r a l o l a r g o de v a r i a s generaciones de garrapatas mediante pasos a favor de l o s huevos,(2,13,14) Comunmente e l c o n t r o l de l a s gai-rapatas 'en l o s perros, ae l l e v a a cabo por medio de baños o espolvoreaciones con s o l u — cienes o polvos i n s e c t i c i d a s como son: e l toxafeno, e l clorda no, l a s p i r e t r i n a s , e l D.D.T., e l Hexacloruro de benceno, l o s cuales se usan a concentraciones recomendadas por e l f a b r i c a n te, l a s cuales deben s e r exactas, ya que generalmente son a l tamente tóxicas, por l o cual se deben de usar y almacenar con precaución y en lugares seguros para e v i t a r accidentes,(14) La f r e c u e n c i a de l o s tratamientos comunmente es de cada 2 semanas, pero depende también de l a e f e c t i v i d a d d e l producto, su acción r e s i d u a l , su t o x i c i d a d y de l a p e r s i s t e n c i a de l a s garrapatas, l o s cuales j u s t i f i c a n su empleo continuo O l o res t r i n g e n . También se deben t r a t a r e l alojamiento y l a cama d e l animal•(14) Otro método de control consiste en que, conociendo l a i n c i d e n c i a d e l v e c t o r o de l a enfermedad, en una zona o región determinada, se evalúan, y en caso de considerarse a l t a s , l a prevención o control dependerá de 'ina cuarentena e f i c a z , r e s tringiendo l a entrada y s a l i d a de animales portadores posi bles, y l a aplicación de tratamientos adecuados.(2,13) Considerando e l m a t e r i a l quirúrgico, l a s jeringas y l a s agujas como medios de transmisión, se recomienda e l lavado, desinfección y esterilización de estos antes y después de su uso.(2) \ TRATAMIENTO. Para e l tratamiento de l a babesiosis canina aguda, Button ha diseñado un excelente régimen terapéutico, e l cual con s i s t e primeramente en un tratamiento de soporte, por ejemplo, transfusiones sanguíneas, agentes a l c a l i n i z a n t e s , solución — Hinger l a c t a t o , hematinicos, vitaminas del complejo B; estos deben s e r combinados con l a administración de un agente babes i c i d a , como pueden s e r l o s siguientes: (10) I50TIANA20 DE FENAKIDII{A.-(Ksy and Baker LTD England) .3 mg. por Kg. administrados por vía Subcutánea. IMa reacción de sensibilización puede o c u r r i r inmediatamente después de administrada l a droga, por ejemplo, ede ma f a c i a l , ó 10 minutos después, nauseas, vómitos, abcesos en e l s i t i o de l a inyección y hemorragias f a t a l e s en e l sistema nervioso central.(10,11) AGETUHATO DE DIMIHACINA.7 mg, por Kg. de una solución a l 7 ?é en dosis única, 3 mg. por Kg, de una solución a l 7 ^ d i a r i o s , durante 2 días, Su administración es Intramuscular, La dosis debe s e r exacta, pues excesos de cantidad produ cen l e s i o n e s f a t a l e s en e l sistema nervioso central y ixe morragias en cerebelo y tálamo.(10) TRIPAN AZUL,- 2.2 mg. por Kg. de una solución a l 1 ^ Su administración es Intravenosa. Se debe tener cuidado de no derramar en l o s t e j i d o s , ya que l o s tiñe de azul-verde, además de que por su acción c a i i s t i c a produce e s f a c e l o y n e c r o s i s del tejido a d h i a — cents a l a inyección,(2,3,8,3.0,11,13,15) ACAPRIN..25 mg. por Kg. 3 u administración es Subcutánea. Aproximadamente l a mitad de l o s animales tratados, pre- sentan respiración rápida, salivación excesiva, temblores, vómito, d i a r r e a , desasosiego, pero estos fenómenos desaparecen en 1 hora.(2,8,10,11,15). CAPITXJIO II KATEHIAL Y ÜLTODO líATEaiAL BIOLOGICO. Muestras de sangre de perros adultos (300) MATERIAL DE LABORATOHIO. Algodón ¡úicroscopio Portaobjetos Papel f i l t r o Vasos de C o p l i n Frascos oon gotero Pinza de disección Jeringas deseehables (5 mi.) Agujas bipodérmicas ( c a l . 21) Frascos de v i d r i o con tapón (10 mi.) ST3STAUCIAS. Alcohol de 96° Agua d e s t i l a d a Agua c o r r i e n t e A l c o h o l metílico ' A c e i t e de inmersión Colorante de Wright Colorante de Giemsa Antiooagulante a l 5 ?í (E.D.T.A.) r METODO. Tomar muestras de sangre de perros adultos, preferenteente de l a s colonias circundantes d e l Puerto de Veraoruz. Para muestrear l o s animales, debe sujetárseles l a mandibu ^ ^ ^ ^ a con \m ^^^e cordón r e s i s t e n t e a manera de bozal, preferentemen- con l a p r e s e n c i a o ayuda d e l dueño para mayor t r a n q u i l i d a d e l animal y seguridad personal, d e r r i b a r l o s y colocarlos en ecubito c o s t a l e i n m o v i l i z a r l o s miembros. Para l a obtención de l a sangre, hacer asepsia de l a zona puncionar, con un algodón impregnado de a l c o h o l , y p r e s i o — ^ j - j ^ a r manualmente en l a parte superior del miembro paz-a mejor xposición de l a vena, siendo esta l a Cefálica en e l miembro t e r i o r o l a Safena en e l p o s t e r i o r . Usar agujas secas y estériles para e v i t a r l a hemolisis, ues l a humedad hipotónica rompe algunos e r i t r o c i t o s , canali- í;ar l a vena y dejar f l u i r l a sangre libremente en l a j e r i n g a , j e r c e r l a menor acción de bombeo o aspiración del émbolo, en gunas ocasiones dar masaje suave sn e l trayecto superior de a vena para f a c i l i t a r l a circulación de l a sangre, y a s i e l leñado de l a j e r i n g a , siendo s u f i c i e n t e con 3 mi,, sacar l a j a de l a vena y hacer nuevamente a s e p s i a con e l algodón, iC17) Antes de pasar l a sangre de l a j e r i n g a a l frasco, e l cual ebe estar previamente est^^rilizado y adicionado con una gota e solución anticoagulante, q u i t a r l a aguja para e v i t a r for— j ^ - ^ a r e l paso de l a sangre y a s i impedir l a ruptura da l o a e r i • ^ ^ r o o i t o s . Una vez contenida l a sangre en e l frasco, a g i t a r — uavemente paia d i l u i r b i e n e l contenido y a s i e v i t a r l a coaación de l a muestra, l a cual se debe l l e v a r l o antes p o s i — l e a l l a b o r a t o r i o para hacer l o s f r o t i s y proceder a l a t i n ián y observación de ellos.£17) TECNICA. Lo más pronto posible después de obtenida l a muestra, - proceder a l a elaboración de 2 f r o t i s de cada una, para l o — cual se deben u t i l i z a r portaobjetos limpios y secos, l o s cual e s deben colocarse en un lugar l i s o y firme en posición h o r i z o n t a l , agregar una gota de sangre pequeña bien mezclada cer- ca de uno de sus extremos, extender con otro portaobjetos con borde perfectamente l i s o y s i n mellas, d e s l i z a r firme y suav£ mente en un ángulo de 30°, a g i t a r e l f r o t i s en e l a i r e para a c e l e r a r su secado, pues s i este es lento sale e l agua de l o a eritrocitos, l o que o r i g i n a su crenación. Una vez secos proce^ der a su tinción con l o s colorantes correspondientes para camela f r o t i s , ( 4 , 1 7 ) COLOHAIíTE DE QIZM3A. - ' ' ' 1, - Ya seco e l f r o t i s se debe f i j a r , paj^a l o cual se debe c u b r i r o sumergir en a l c o h o l metílico absoluto y d e j a r reaccionar durante 3 minutos. 2, - Sacar y e s c u r r i r , una vez que e l a l c o h o l se ha evapora do agregar s u f i c i e n t e colorante d i l u i d o de Giemsa para c u b r i r totalmente l a preparación, o bien se sumerge l a l a m i n i l l a en ua r e c i p i e n t e que contenga e l colorante. 3, - Dejar reaccionar e l colorante por espacio de 25 a 45 — minutos. 4, — Lavar con agua c o r r i e n t e y d e j a r secar. 5, - Ya seco, examinar a l microscopio mediante e l objetivo de inmersión en a c e i t e (100 x ) , OOLOaANTE DE (4) WRIGHT. 1.- Dna vez seco e l f r o t i s , colocar en un puente de t i n cián y c u b r i r con e l colorante de Wright empleando un gotero, 2. - Esperar a que reaccione e l colorante de 1 a 5 minutos. 3 . — S i n e s c u r r i r e l colorante, agregar una cantidad i g u a l de agua d e s t i l a d a . 4. - Mezclar la-solución de colorante y agua d e s t i l a d a soplando o moviendo ligeramente hasta hacer pequeños r e molinos, 5. - Dejar reposar l a mezcla por espacio de 3 a 7 minutos. 6. - Proceder a l a v a r l a l a m i n i l l a con agua c o r r i e n t e por 30 segundos 7. - Dns. vez lavado deJEir secar, ya seco observar a l micros copio empleando e l o b j e t i v o de inmersión en a c e i t e ( (100 x ) . (4) Se diagnosticó como caso negativo a aquel animal a l cual,, mediante l o a 2 f r o t i s hechos de l a muestra sanguínea y teñidos con l o a colorantes correspondientes, después de una servación minuciosa de ambos, no se localizó un solo ob— eritro- c i t o parasitado con Babesia canis en ninguno de l o s 2. CAPITULO III HESÜLTADOS Después de haber r e a l i z a d o e l presente estudio, e l cual consistió en e l muestreo sanguíneo de 300 perros d e l — Puerto de Veraoruz, procedentes de l a s colonias circundantes, KO se encontró ningún f r o t i s sanguíneo p o s i t i v o a Babesia canis. CAPITULO IV C0NCLU3I0NES En base a l o s resultados obtenidos en dicho tra- bajo, s6lo se puede afirmar que l a Babesia canis no se pre senta, pero l5nicaiaente en e l área muestreada, y así como en l a fecha de Enero a Junio de 1985, que fué cuando se — r e a l i z a l a investigación y tomando en consideración e l nlS— mero de animales examinados, l a s características y l a s oon diciones de estos, por l o cual no es determinante. ;APITÜLO V SDGEREÍICIAS La NO determinación de Babesia canis en l o s f r o t i s sanguíneos elaborados de l a s 300 muestras de l o s animales ut i l i z a d o s en dicho estudio, no es un resultado d e f i n i t i v o — que determine a l o s perros d e l Puerto de Veracruz l i b r e s de l a infestación por dicho parásito, por l o cual, se sugiere e l continuar l a investigación sobre este tema, por l o que, sería interesante r e a l i z a r l o con un nfimero mayor de animales, muestrear una área más amplia, elaborar e l trabajo por perío do de un año, para a s i i n c l u i r estaciones l l u v i o s a s y caluro sas con variante i n c i d e n c i a de garrapatas, i n c l u i r en e l - — muestreo animales de razas puras o importados, ya que son e£ tos principalmente l o s má.s s u s c e p t i b l e s , jnuestreo de l a zona centro de l a Ciudad, r e a l i z a r l o con animales de rancho, ya que son l o s que están en contacto más estrecho con l a s garra patas, también ussir otros métodos de tinción de l o s f r o t i s o por e l método de improntas, considerar en e l musstreo a cual quier animal con aparente anemia o hemoglobinuria, a s i como rápida emaciación, l o s cuales no respondan a l o s t r a t a m i e n — tos terapéuticos. CAPITULO VI BIBLIOGRAFIA 1. - Acha K.P. & Szytres B. (1977). ZOON03I3 Y ENFEHMEDADSS TRANSMISIBLES •GOÍ'UNES DEL HOfcIBRE Y LOS ANIMALES. Editado por OPS,.OMS. p.p. 371-373. U.S.A. 2. - Blood D.C. & Henderaon J.A. y Cois. (1982). líEDICINA VETERINARIA. Ed, Interamerioana. p.p. 770-772. México. 3. - Borchert A. (1975). PARASITOLOGIA VETERINARIA. Ed. A c r i b i a . p.p. 543, 556, España. 4. - C o f f i n L.D. (1931). LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA. Ed. La Prensa Médica Mexicana, 318, 319. p.p. 313,- México, 5. - Coles E.H. y Cois, (1968). PATOLOGIA Y DIAGNOSTICO VETERINARIOS. Ed. Interamericana. 6. - Farwell G.E. y Gbls. (1982). p.p. 36, 37, México. CLINIGAL 0B3ERVATI0NS ON BABESIA GIB30NI AND BABESIA CANIS INFECTION IN DOGS. Journal American V e t e r i n a r y Medical A s o c i a t i o n . V o l . 180 Nos, 1-6. 7. - Grogan J.W. p.p. 507-511. (1953). PIR0PLASM03IS IN A DOG. . Journal American V e t e r i n a r y Medical A s o c i a t i o n . V o l . p.p. 23 234. J 8 . - Hutyra P., Mareck J . , Kenninger H. (1973). PATOLOGIA y TiRAPi^UTICA ESP^CIALiiS DE LOo AUnUiLSS DOllEoTICOS. Ed. Labor 3,A. p.p. 349-353- Esparia. 9. - Jubb K . V . P . , Kennedy P.C. D0KS3IIC0S, Tomo I 10. - K l i n e f e l t e r J-¡.R. PATOLOGIA DE LOS ANII^ALiS Parte 2. p.p. 377» 378. Ü.K.A.K. (1982). CAUSE DIAGÍI03ES AND TBhATMENT Veterinary Medicine and 3 m a l l OP CAHIME PIR0PLAS1.103IS. V o l . 77, Animal C l i n i c a n . Nos. 10-12. p.p. 1505-1508. •. 11. - Lapage G. (1983). PARASITOLOGIA VETLRIIJARIA. Ed, C.E.C.S.A. p.p^ 672, 674. KÍxico, 1 2 . - Medway -V. y Cois. (1963). PATOLOGIA CLINICA VETEHINAñlA. E d . U.T.E.H.A. p.p. 360-362. Kéxico. 13. - Merk 4 CO. i n c . • S d . Merk. ( I 9 8 1 ) . EL MAfiUAL UEHK DE VETERINARIA. p.p. 350-353, 609-611. 14. - Meyer J . ( I 9 8 O ) . Ed. U.T.E.H.A. 15. - Quiroz H.H. U.S.A. FARMACOLOGIA Y TERAPEUTICA VETSRINARIAS. p.p. 632. México. ( I 9 8 4 ) . PARASITOLOGIA Y ENFERMEDADES PARASI- TARIAS DE ANIMALES D0KE3TICOS. Ed. Limusa. p.p. 203-205, 1 8 7 - 1 8 9 . México. 16. - Salas B.V. (1971). INVESTIGACION HEIIATICA PARA DETERMINACION DE INCIDENCIA DE PIROPLASMOS13 CANINA EN EL PUERTO DE VERACRUZ. Tesis. Iftiiversidad Veracruzana. México. 3chaln O.w. (1964). Ed. U.T.E.K.A. p.p. T i z a r a I.H. (1979). Ed. Interamericana. HíJUTOLOCIA VETSaiNASIA. 25, 28, Mijcico. ÜÍHUIIOIOCIA VETEHItlAÍÍIA. p.p. 253. 257. México.