Autorización para Publicar en un E-ReDositorio de Acceso Abierto Apellido y nombres: ALVAREZ, Cecilia Diamela DNI: Correo electrónico: calvarez@inidep.edu.ar AUTORIZO por la presente a la Biblioteca y Servicio de Documentación INIDEP a publicar en texto completo el trabajo final de Tesis/Monografía/Informe de mi autoría que se detalla, permitiendo la consulta de la misma por Internet, así como la entrega por Biblioteca de copias unitarios a los usuarios que lo soliciten con fines de investigación y estudio. Título del trabajo: "Diversidad de tiburones espinosos del género Squalus (Chondrichthyes: Squalidae) en el océano Atlántico Sudoccidental, entre 34° y 42° S". 92 pgs. Año: 2016 Título y/o grado que opta: Tesis (licenciatura) Facultad: Universidad Nacional de Mar del Plata, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Firma: l , )L --1"<;7 ~. Fecha: ay /ü';:t )~- ASFA AN: OceanDocs: Tesis de Licenciatura Diversidad de tiburones espinosos del género Squalus (Chondrichthyes: Squalidae) en el océano Atlántico Sudoccidental, entre 34° y 42°S Alumna: Cecilia Diamela Alvarez Director: Dr. Jorge H. Colonello Co-Director: Dr. Daniel E. Figueroa Universidad Nacional de Mar del Plata Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2016 ÍNDICE RESUMEN ……………………………………………………………………………….......... INTRODUCCIÓN …...……………………………………………………………………….. 1 3 Objetivos ..………………………………………………………………………………….. 7 Área de estudio ..…………………………………………………………………………... 8 MATERIALES Y MÉTODOS Muestreo y análisis de datos ...…………………………………………………………… RESULTADOS Morfología y morfometría ..……………………………………………………………….. 9 16 Relaciones LT-PT y reproducción ……………………………………………………….. 23 DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES …………………………………………………………… 29 Distribución …………………………………………………………………………………. BIBLIOGRAFÍA ………………………………………………………………………………... TABLAS Y FIGURAS …………………………………………………………………………. AGRADECIMIENTOS ………………………………………………………………………… 28 39 47 92 RESUMEN Los miembros del género Squalus son el grupo de tiburones más problemáticos en cuanto a su identificación específica, debido a que morfológicamente son muy similares. En la región del Atlántico Sudoccidental, entre 34° y 42°S, ocurren 3 especies del género Squalus: S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis. Las claves taxonómicas para identificar a estas especies en la región permiten distinguir fácilmente a S. acanthias, sin embargo las características que se utilizan para diferenciar a las otras especies son complejas. En la presente Tesis se plantean como objetivos la identificación de características que permitan diferenciar fácilmente las 3 especies del género Squalus en la región comprendida entre 34° y 42°S del Atlántico Sudoccidental y estudiar algunos parámetros reproductivos. Para ello, se colectaron ejemplares provenientes de 4 campañas de investigación realizadas entre 2011 y 2013. Se determinaron características morfológicas y medidas morfométricas que permitan diferenciar las especies, se describió el crecimiento alométrico de los órganos reproductivos y se estimó la fecundidad y fertilidad para las 3 especies. Los ejemplares de S. acanthias se diferenciaron de S. mitsukurii y S. cubensis, debido a la presencia de manchas blancas en los flancos, mientras que las variables morfométricas que mejor discriminaron entre S. mitsukurii y S. cubensis fueron la longitud pre oral y la longitud pre narina externa; ambas medidas mayores en S. mitsukurii. También se encontraron diferencias entre S. mitsukurii y S. cubensis, en cuanto al patrón de coloración y a la morfología de las aletas pectorales y caudal. Las aletas pectorales de S. mitsukurii presentaron el borde posterior menos cóncavo y el lóbulo proximal menos aguzado. En contraste, las aletas pectorales de S. cubensis presentaron el borde posterior más cóncavo y el lóbulo proximal más aguzado, además en el borde posterior de la aleta caudal se distinguió un margen de color blancuzco. Se pudo comprobar que las 1 variables morfométricas y los análisis morfométricos utilizados en la presente Tesis sirven para diferenciar a las 3 especies. Sobre la base de estas características se propuso una clave taxonómica para la identificación de las especies de Squalus en la región. Las 3 especies presentaron diferencias en cuanto a los rangos de longitud total y valores de longitud total máxima. En S. acanthias las hembras adultas fueron las más frecuentes en los ejemplares analizados, mientras que en las otras 2 especies fueron más frecuentes los machos adultos. Se determinaron los rangos entre el ejemplar adulto más pequeño y el ejemplar juvenil más grande para ambos sexos de S. acanthias (604 a 832 mm en hembras, 530 a 665 mm en machos) y para machos de S. mitsukurii (548 a 575 mm). Estos rangos no se pudieron calcular en hembras de S. mitsukurii y en hembras y machos de S. cubensis debido al bajo número de ejemplares juveniles analizados. En S. acanthias la fecundidad promedio fue 8,6 ± 3,4 y la fertilidad varió entre 1 y 13, en S. mitsukurii la fecundidad promedio fue 5,7 ± 1,5 y la fertilidad varió entre 2 y 7. Estos parámetros estuvieron correlacionados positivamente con la talla de las hembras. S. cubensis presentó los valores más bajos de fecundidad promedio (3,8 ± 1,6) y la fertilidad varió entre 1 y 4, en este caso los parámetros no estuvieron correlacionados con la talla de las hembras posiblemente debido al bajo número de ejemplares analizados. Los resultados de esta Tesis y la bibliografía consultada confirman que en la región de estudio ocurren 3 especies del género Squalus que presentarían diferencias en sus parámetros reproductivos. Se debe poner énfasis en la correcta identificación de estos tiburones en la región, especialmente en la separación entre S. mitsukurii y S. cubensis. Una correcta identificación de estas especies en muestreos a bordo ó de desembarque, permitirá una adecuada evaluación y un manejo más eficiente de estos recursos. Además, deberían realizarse estudios genéticos para validar los resultados hallados en la presente Tesis a partir del estudio de características fenotípicas. PALABRAS CLAVE: Squalus acanthias, S. mitsukurii, S. cubensis, morfometría, reproducción. 2 INTRODUCCIÓN Los condrictios o peces cartilaginosos (Clase Chondrichthyes) son un grupo de exitosos peces con una larga y compleja historia evolutiva, caracterizada por un moderado o lento crecimiento, tardía madurez sexual, baja fecundidad y largos períodos de gestación (Compagno, 1990; Hoenig & Gruber, 1990; Cortés, 2000). Estas características resultan en un bajo potencial reproductivo y una particular vulnerabilidad al impacto humano (Hoenig & Gruber, 1990; Massa et al., 2004; García et al., 2008). Los condrictios están representados por los holocéfalos (Subclase Holocephalii) y los elasmobranquios (Subclase Elasmobranchii) (Compagno, 1984; Nelson 2006; Cousseau, 2010). Los holocéfalos incluyen al pez gallo y las quimeras, mientras que los elasmobranquios corresponden a los batoideos (chuchos y mantas, rayas y peces guitarra, torpedos y peces sierra) y a los tiburones (Compagno, 1984; Nelson, 2006; Cousseau, 2010). Dentro de los condrictios, los holocéfalos presentan la menor diversidad, con 3 familias y menos de 50 especies descriptas (Cousseau, 2010). Los batoideos presentan la mayor diversidad con 17 familias y por lo menos 534 especies, en orden decreciente le siguen los tiburones con 34 familias y al menos 402 especies (Nelson, 2006; Cousseau, 2010). Los tiburones de la familia Squalidae comprenden dos géneros: Cirrhigaleus con 3 especies y Squalus con al menos 24 especies válidas en la actualidad (Nelson, 2006; Last et al., 2007). En su gran mayoría, son tiburones demersales que se distribuyen en todos los océanos del mundo y habitan casi exclusivamente aguas profundas (Compagno, 1984; Nelson, 2006). Los miembros de esta familia se caracterizan por la presencia de una conspicua espina delante de cada una de las dos aletas dorsales (Nelson, 2006), de 3 allí el nombre de tiburones espinosos. Los integrantes del género Squalus, a nivel mundial, son el grupo de tiburones más problemático en cuanto a su identificación específica (Last et al., 2007). Actualmente, las especies del género Squalus pueden ser divididas en tres complejos de especies ó “grupos taxonómicos” de acuerdo a su morfología externa, que pueden o no representar grupos monofiléticos: el grupo Squalus acanthias (formado por 2 especies), el grupo Squalus mitsukurii (formado por 16 especies) y el grupo Squalus megalops (formado por 6 especies) (Menni et al., 1986; Ward et al., 2007; Ebert et al., 2010; Viana de Figueirêdo, 2011). Los nombres refieren a las especies cuyas características morfológicas y morfométricas definen al grupo. En el Atlántico Sudoccidental, al sur de los 34ºS, la familia Squalidae está representada por el género Squalus (Menni & Lucifora, 2007). En cuanto a la composición específica del género en la región Compagno (1984) menciona a S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis e indica que las citas argentinas de S. blainvillei deben ser referidas a S. mitsukurii. Por su parte, Gosztonyi & Kuba (1998) realizaron un estudio morfométrico de S. mitsukurii confirmando la presencia de esta especie en aguas argentinas, pero ponen en duda la presencia de S. cubensis. Asimismo, Menni & Lucifora (2007) en una revisión taxonómica de los condrictios que se encuentran en aguas argentinas y uruguayas, coinciden con lo propuesto por Compagno (1984) y citan a las mismas tres especies del género Squalus: S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis. Trabajos preliminares de Mas et al. (2014) concluyen que, a partir de análisis morfométricos y moleculares, en el Atlántico Sudoccidental entre 34° y 39°S ocurren al menos tres especies del género Squalus (S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis). La distribución espacial de S. acanthias en el Atlántico Sudoccidental abarca hasta latitudes australes (García de la Rosa, 1998; Gosztonyi & Kuba, 1998; Hozbor et al., 2011), por su parte la distribución de S. mitsukurii está relacionada con aguas templadocálidas (Gosztonyi & Kuba, 1998; Lessa et al., 1999; Meneses & Paesch, 1999) al igual 4 que ocurre con S. cubensis (Lessa et al., 1999). La co-ocurrencia de estas tres especies estaría asociada a una región del Atlántico Sudoccidental al norte de los 36°S, que presenta condiciones oceanográficas dinámicas, relacionadas con la descarga del Río de la Plata, la confluencia de corrientes (i.e. Corriente de Brasil y Corriente de Malvinas) y el talud como principales forzantes (Guerrero & Piola, 1997; Piola & Rivas, 1997; Piola & Matano, 2001; Acha et al., 2004; Cousseau & Perrota, 2004). Las especies de tiburones que son muy similares y usualmente confundidas, conocidas como “especies crípticas”, pueden presentar diferencias en cuanto a sus características biológicas y ecológicas. Por lo tanto la correcta identificación de las especies de tiburones, en particular de las “especies cripticas”, resulta de fundamental importancia en el estudio y conservación de las mismas (Massa et al., 2004). Si bien las especies del género Squalus se capturan como fauna acompañante en las principales pesquerías industriales, habitualmente son descartadas a bordo (Van Der Moler et al., 1998; García de la Rosa et al., 2000; Massa et al., 2004; Cedrola et al., 2012; Sánchez et al., 2012). De acuerdo con datos provenientes del Programa de Observadores a Bordo perteneciente al Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero, se sabe que aproximadamente el 95% de los tiburones espinosos son descartados a bordo en buques comerciales (Colonello, com. pers.). Las claves taxonómicas para identificar a las especies del género Squalus en el Atlántico Sudoccidental permiten distinguir fácilmente a S. acanthias debido a que presenta manchas blancas en los flancos (Meneses & Paesch, 2003; Gomes et al., 2010; Figueroa, 2011). Sin embargo, las características que permiten diferenciar a S. mitsukurii de S. cubensis resultan más complejas. De acuerdo con las claves disponibles, ambas especies difieren en la relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y la distancia entre ésta y el surco labial superior (siendo mayor en S. mitsukurii que en S. cubensis) y en el tipo de dentículos dérmicos (tricuspidados en S. 5 mitukurii, unicuspidados en S. cubensis) (Meneses & Paesch, 2003; Gomes et al., 2010; Figueroa, 2011). Los tiburones espinosos son especies vivíparas lecitotróficas (Hamlett et al., 2005). Las hembras retienen a los ovocitos fecundados en sus úteros hasta el nacimiento de los embriones y estos, durante la gestación, se alimentan exclusivamente del vitelo almacenado en los ovocitos (Compagno, 1990; Hamlett et al., 2005). Los trabajos que analizan la biología de estas especies en el océano Atlántico Sudoccidental (García de la Rosa, 1998; Lucifora et al., 1999; Fischer et al., 2006; Oddone et al., 2010; Belleggia & Sánchez, 2011; Belleggia et al., 2012; Colonello et al., 2012; Chavez, 2014), sugieren que los tiburones espinosos son predadores con alto nivel trófico que presentan una elevada talla de madurez sexual, baja fertilidad y complejos ciclos reproductivos. Hasta el momento son pocos los trabajos que analizan la biología de S. cubensis en la región. Sobre la base de la información disponible de esta especie en otras regiones (Jones et al., 2013) y los trabajos realizados en la región de estudio sobre S. acanthias (García de la Rosa, 1998; Belleggia & Sánchez, 2011; Belleggia et al., 2012; Colonello et al., 2012; Chavez, 2014) y S. mitsukurii (Lucifora et al., 1999; Fischer et al., 2006; Oddone et al., 2010) es factible sugerir que estos tres tiburones espinosos presentarían diferencias en sus parámetros de historia de vida. En este contexto, teniendo en cuenta la alta vulnerabilidad de este grupo de especies, como hipótesis de trabajo se plantea que en la región comprendida entre 34° y 42°S del océano Atlántico Sudoccidental, ocurren tres especies del género Squalus, las cuales presentan diferencias en sus parámetros reproductivos. 6 Objetivos Objetivo general: _ Identificar características que permitan diferenciar las tres especies del género Squalus en la región comprendida entre 34° y 42°S del océano Atlántico Sudoccidental, con énfasis en la diferenciación entre S. mitsukurii y S. cubensis. Objetivos particulares: _ Determinar características morfométricas que permitan diferenciar a S. mitsukurii y S. cubensis. _ Establecer si el patrón morfológico y la coloración de las aletas permiten diferenciar a S. mitsukurii y S. cubensis. _ Determinar los rangos de madurez sexual en las especies del género Squalus, definido entre la longitud total del ejemplar adulto más pequeño y el juvenil más grande. _ Estimar la fecundidad potencial máxima y la fertilidad en hembras de las especies del género Squalus. 7 MATERIALES Y MÉTODOS Área de estudio El área de estudio corresponde a la región del océano Atlántico Sudoccidental comprendida entre los 34° y 42°S, a profundidades entre 50 y 300 m (Figura 1). En cuanto a sus características oceanográficas pertenece al sistema de la Plataforma Central Norte (PCN), con salinidades entre 33,4 y 33,7 (Guerrero & Piola, 1997). La PCN se caracteriza por presentar una estratificación estacional, debido al calentamiento atmosférico que ocurre en primavera y verano. Esta estratificación se manifiesta con la formación de una capa de agua templada, superficial, homogénea, producto de la mezcla por el viento y otra capa de fondo fría, mantenida por la advección media de las aguas de plataforma provenientes de altas latitudes (Cousseau & Perrota, 2004). Al norte de los 38°S es evidente la influencia, en superficie, de las aguas diluidas por el aporte del Río de la Plata (< 33,0) (Guerrero & Piola, 1997). Al norte de los 36°S, y en su límite con el talud, las aguas de la PCN también se ven influenciadas por la Corriente de Brasil (Guerrero & Piola, 1997; Cousseau & Perrota, 2004) que se dirige hacia el sur llevando aguas subtropicales cálidas y con salinidades altas (> 16°C; > 35,0) (Piola & Rivas, 1997; Piola & Matano, 2001; Cousseau & Perrota, 2004). La ecología y los principales patrones de distribución de los peces en aguas de plataforma en el océano Atlántico Sudoccidental han permitido definir dos Provincias Biogeográficas: la Provincia Argentina y la Provincia Magallánica (Balech & Ehrlich, 2008). La primera se caracteriza por presentar aguas templado-cálidas y se extiende desde la Península de Valdés (42°S, Argentina) hasta Río de Janeiro (23°S, Brasil). La Provincia Magallánica presenta aguas templado-frías y se extiende desde el Cabo de Hornos hasta 8 la Península de Valdés y a partir de los 43°S bordea el este de la Provincia Argentina hasta los 34-33°S (Balech & Ehrlich, 2008; Menni et al., 2010). Muestreo y análisis de datos Se analizaron ejemplares de tiburones espinosos: S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis, colectados en campañas de investigación realizadas en el Buque de Investigación Pesquera (BIP) “Dr. Eduardo Holmberg” del Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP). Las campañas se realizaron en primavera del año 2011 (EH0411), otoño de 2012 (EH0412), primavera de 2012 (EH0612) y otoño de 2013 (EH0313) (Tablas 1 y 2, Figura 2), con el objetivo de evaluar el stock norte de merluza común Merluccius hubbsi. De la campaña EH0411 sólo se analizaron los ejemplares de S. acanthias. Se registró la talla, el peso y el sexo de los ejemplares a bordo, luego fueron congelados para su análisis en el laboratorio. La preservación de ejemplares se realizó de acuerdo a la capacidad de bodega del BIP. En aquellos lances donde la captura de ejemplares fue demasiado elevada, se procedió a preservar una muestra representativa de los mismos. Una vez en el laboratorio se registró el sexo, la longitud total (LT), el peso total (PT) y el estadio de madurez sexual a partir de la observación macroscópica de los órganos reproductivos siguiendo la escala propuesta por Colonello et al. (2011). Con respecto al estadio de madurez sexual, en las hembras se analizó el desarrollo de los ovarios, las glándulas oviductales y los úteros; mientras que en los machos se consideró la longitud y grado de calcificación de los claspers, los ductos espermáticos y los testículos. La longitud interna de los claspers se midió desde el extremo distal de la cloaca hasta el extremo distal de los claspers. En las hembras se midió el ancho de las glándulas oviductales y el ancho de los úteros, y se registró el número y diámetro de los folículos ováricos. En hembras adultas con embriones (estadio 5), se contó el número total de 9 embriones. Todas las medidas fueron tomadas al milímetro inferior y los pesos fueron registrados con precisión de 1 gramo. En las campañas EH0412 y EH0612 la identificación de tiburones espinosos realizada a bordo y en el laboratorio coincidieron en identificar a S. acanthias y S. mitsukurii. No obstante, durante el muestreo en el laboratorio de ejemplares de la campaña EH0313 se determinó la presencia de S. cubensis en ejemplares identificados a bordo como S. mitsukurii. Los ejemplares que presentaron manchas blancas en el cuerpo fueron determinados como S. acanthias. Para la determinación de los ejemplares de S. mitsukurii y S. cubensis se tuvo en cuenta la forma de los dentículos dérmicos, la forma y coloración de las aletas pectorales y caudal, la forma del cuerpo y de la segunda aleta dorsal (Figura 3). A raíz de esto, además del muestreo biológico, de la campaña EH0313 se preservaron 41 ejemplares al azar de las tres especies de Squalus para realizar un análisis morfométrico. Todos los análisis fueron implementados en el software estadístico R 2.15.0 (R Development Core Team, 2012). Morfometría y Morfología Los caracteres morfométricos fueron tomados sobre el flanco izquierdo de cada individuo, como distancias lineales rectas, mediante la utilización de un ictiómetro, una cinta métrica y un calibre digital con precisión de 0,1 milímetros. Se utilizaron los 41 ejemplares preservados al azar de las tres especies de Squalus obtenidos de la campaña EH0313. En cada individuo, se registraron 69 medidas morfométricas, de acuerdo con la metodología propuesta por Last et al. (2007) (Tabla 4). Sin embargo, el número de variables utilizadas en los análisis varió debido a lesiones en el cuerpo de los ejemplares (principalmente en las aletas dorsales y sus respectivas espinas). 10 Para eliminar el efecto de la talla se utilizó la técnica propuesta por Lleonart et al. (2000), que sirve para escalar datos que exhiben crecimiento alométrico. Dicha técnica, remueve la información relacionada con la talla no sólo escalando a todos los individuos a un mismo tamaño, sino también ajustando la forma que ellos tendrían en el nuevo tamaño. La longitud total (LT) fue usada como variable independiente, el resto de las medidas morfométricas tomadas fueron consideradas variables dependientes. Los parámetros de las proporciones alométricas entre variables independientes y dependientes fueron calculados de la siguiente manera: Yij = ai LTjbi donde LTj es la longitud total del individuo j, Yij es la variable i del individuo j, ai y bi representan los coeficientes de alometría entre la longitud total y la variable i. El procedimiento de normalización de los datos se realizó para las tres especies por igual, según la ecuación: Yij* = Yij (LT0/LTj)bi donde Yij* es el valor de la variable Yij luego de la transformación, y LT0 representa el valor de referencia (LT0 = X0 = 500 mm) al cual todos los individuos han sido llevados, ya sea reduciéndolos o amplificándolos (Lombarte & Lleonart, 1993; Ibáñez-Aguirre & Lleonart, 1996). El valor de referencia elegido corresponde al valor medio de la longitud total, calculado para las tres especies juntas. A partir de los datos transformados se realizó una selección de medidas morfométricas, debido a que el alto número de las mismas dificultaba la interpretación de los resultados en los análisis multivariados. Para esto se hizo un Análisis de Varianza (ANOVA) el cual permitió seleccionar las medidas morfométricas que presentaban diferencias entre S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis. Se seleccionaron aquellas medidas que presentaron diferencias significativas y cumplieron con los supuestos del 11 ANOVA. Mediante el Test de Shapiro – Wilk y el Test de Levene se analizaron los supuestos de normalidad y homogeneidad de varianzas, respectivamente. Si bien los ejemplares de S. acanthias estuvieron poco representados en la muestra aleatoria que se preservó para el análisis morfométrico (N=5), se los incluyó en un estudio morfométrico preliminar (Análisis de Componentes Principales y Análisis Discriminante Lineal), con el objetivo de comprobar si los métodos utilizados eran útiles para separar a las tres especies en base a las medidas morfométricas seleccionadas. Se realizó un Análisis de Componentes Principales (ACP) con las variables que presentaron diferencias significativas en el ANOVA. En el presente trabajo las Componentes Principales (CPs) fueron definidas por las variables con las cuales presentaron correlación mayor o igual a 0,49 en valor absoluto. En el caso particular en el que una variable presentaba alta correlación con más de una Componente Principal (CP), se consideró que dicha variable explicaba mejor a la CP con la cual presentaba la correlación más alta y no se la utilizó para definir a las otras CPs con las cuales presentaba una correlación mayor o igual a 0,49. Para el ACP se definieron tres protocolos, de acuerdo a las variables morfométricas y al número de ejemplares utilizados. El protocolo “cabeza-tronco-aletas” fue realizado con 24 variables morfométricas y 35 ejemplares (Tabla 5), en este caso se utilizaron medidas del cuerpo en general. El protocolo “segunda aleta dorsal” fue realizado con 10 variables morfométricas y 19 ejemplares (Tabla 6), para este caso se utilizaron medidas relacionadas con la segunda aleta dorsal. El protocolo “espinas” fue realizado con 6 variables morfométricas y 18 ejemplares (Tabla 7), en el cual se utilizaron medidas relacionadas con las espinas de las aletas dorsales. Se realizó un Análisis Discriminante Lineal (ADL) a partir de las variables que más contribuyeron a la separación de S. mitsukurii y S. cubensis de acuerdo con el ACP. Además se tuvo en cuenta que las variables sean representativas de las diferencias 12 macroscópicas en la morfología externa observadas durante el muestreo de ambas especies, por último se consideró su facilidad de medición. El ADL se realizó con 20 ejemplares de S. mitsukurii, 16 ejemplares de S. cubensis y las siguientes variables: longitud pre narina externa (LPNE), longitud pre oral (LPOa), longitud pre cloaca (LPCl), espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal (EPC), ancho del pedúnculo caudal (AnPC), longitud de la segunda aleta dorsal (LD2) y margen anterior dorsal de la aleta caudal (MCD). Se utilizó el estadístico Λ de Wilks para determinar las diferencias entre grupos y analizar si la separación entre ellos era significativa de acuerdo a las variables utilizadas. Se analizaron los supuestos de normalidad e igualdad de matrices de covarianza. Se analizó la proporción de LT que representaban las medidas morfométricas utilizadas en el ADL, para S. mitsukurii y S. cubensis. Se realizó un Análisis de Varianza (ANOVA) para analizar si dichas medidas presentaban diferencias significativas entre ambas especies. Mediante el Test de Shapiro – Wilk y el Test de Levene se analizaron los supuestos de normalidad y homogeneidad de varianzas, respectivamente. Se analizó la relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y la distancia entre ésta y el surco labial superior (LPNE/ENL) en S. mitsukurii y S. cubensis. Esta relación es ampliamente utilizada en las claves de identificación para separar a ambas especies (Meneses & Paesch, 2003; Gomes et al., 2010; Figueroa, 2011). Se tomaron fotografías de los ejemplares de S. mitsukurii y S. cubensis para comparar y describir los patrones de coloración y la morfología de las aletas pectorales y caudal. Teniendo en cuenta las medidas morfométricas que más contribuyeron a la diferenciación entre S. mitsukurii y S. cubensis y las características observadas, se 13 propuso una clave dicotómica para la identificación de las especies del género Squalus presentes en la Plataforma Continental Argentina. Reproducción Se calculó la relación LT vs. PT para cada sexo y especie por separado (PT = a LTb). Se utilizaron los datos transformados en logaritmo natural para convertir en lineal la relación Ln (PT) = Ln a + b Ln (LT). Las pendientes y los interceptos de las rectas obtenidas para cada sexo dentro de una misma especie se compararon mediante una prueba t de Student (Zar, 2010). Se plantearon las hipótesis nulas de igualdad de pendientes (H0: b1 = b2) e igualdad de interceptos (H0: a1 = a2) entre ambas rectas. A partir del análisis macroscópico de los órganos reproductivos, se determinó el rango entre la LT del ejemplar adulto más pequeño y la LT del juvenil más grande. En las hembras se tuvo en cuenta el desarrollo de los ovarios, el ancho de las glándulas oviductales y el ancho de los úteros; en los machos se consideró el desarrollo de los testículos y la longitud interna de los claspers. La fecundidad se estimó a partir del número de folículos ováricos (FO), observados macroscópicamente, presentes en hembras adultas no ovuladas recientemente (estadios 3 y 5); la fertilidad se estimó como el número total de embriones en los úteros de las hembras (estadio 5). Ambas variables fueron correlacionadas con la LT y se evaluó la hipótesis nula de no correlación. Se realizó un Análisis Discriminante Lineal con las variables reproductivas de los ejemplares obtenidos de la campaña EH0313. En las hembras, se consideró la longitud total, el peso total y el ancho de las glándulas oviductales y en los machos, la longitud total, el peso total y la longitud de los claspers. Se consideraron sólo los ejemplares adultos debido a que los juveniles estaban poco representados (Tabla 8). Se utilizó el 14 estadístico Λ de Wilks para determinar las diferencias entre grupos, y analizar si la separación entre ellos era significativa de acuerdo a las variables utilizadas. Se analizaron los supuestos de normalidad e igualdad de matrices de covarianza. Dada la capacidad de la Función Discriminante para distinguir entre S. mitsukurii y S. cubensis, se utilizó la misma para explorar si en las campañas EH0412 y EH0612 pudiera haber ocurrido una identificación errónea de las especies. Sobre la base de los datos corregidos se analizaron las relaciones morfométricas y el crecimiento alométrico de los órganos reproductivos. 15 RESULTADOS Morfometría y Morfología A partir del Análisis de Varianza (ANOVA) se seleccionaron 35 medidas morfométricas, las cuales presentaron diferencias significativas entre las tres especies de Squalus y cumplieron con los supuestos del análisis (Tabla 9). De las 35 variables seleccionadas, sólo 24 pudieron ser medidas en todos los ejemplares (N=41). Análisis morfométrico preliminar: S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis El Análisis de Componentes Principales (ACP) separó a las tres especies de Squalus en base a las medidas morfométricas seleccionadas a partir del ANOVA (24 variables morfométricas, 41 ejemplares), siendo todas estas medidas importantes en la separación. El ACP produjo cinco Componentes Principales mayores a uno, las cuales explicaron más del 78% de la varianza total. La primer Componente Principal permitió separar a S. cubensis de S. mitsukurii y S. acanthias. Las variables que favorecieron esta separación fueron: las longitudes pre caudal (LPCa), pre segunda aleta dorsal (LPD2), pre orbital (LPOb), pre narina externa (LPNE), pre oral (LPOa) y el espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal (EPC), por la longitud de la segunda aleta dorsal (LD2) y sus márgenes anterior (MAD2), posterior (MPD2) e interior (MID2), por la longitud de la base (LBAPc) y el margen anterior de la aleta pectoral (MAAPc), por el margen anterior dorsal (MCD) y la longitud de la hendidura (LHC) de la aleta caudal, por los anchos de la boca (AnB), de la cola (AnCo) y del pedúnculo caudal (AnPC) y por las alturas de la cola (AlCo) y del primer (AlPB1) y quinto (AlPB5) pliegue branquial. La segunda Componente Principal permitió separar a S. mitsukurii de S. acanthias. Las variables que favorecieron esta separación fueron: la longitud pre cloaca (LPCl), el margen anterior de la primer aleta 16 dorsal (MAD1), la altura de la segunda aleta dorsal (AlD2) y el ancho de la cabeza (AnCa) (Figura 4 A). El Análisis Discriminante realizado con las variables morfométricas seleccionadas a partir del ANOVA permitió diferenciar claramente tres grupos, con un porcentaje de clasificación correcto del 100% para las tres especies (Figura 4 B). Análisis de Componentes Principales: S. mitsukurii y S. cubensis Protocolo “cabeza-tronco-aletas” El ACP confeccionado con las medidas morfométricas del cuerpo seleccionadas a partir del ANOVA, produjo cinco Componentes Principales (CPs) con autovalores mayores a uno (Tabla 10). Estas cinco CPs explicaron más del 77% de la varianza total, la CP1 explicó el 49,2% de la varianza total (Tabla 10, Figura 5). Excepto la longitud pre cloaca (LPCl), el resto de las medidas utilizadas en el ACP presentaron alta correlación (> 0,49) con la primer Componente Principal. La CP1 estuvo definida por: las longitudes pre caudal (LPCa), pre segunda aleta dorsal (LPD2), pre orbital (LPOb), pre narina externa (LPNE), pre oral (LPOa) y el espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal (EPC), por el margen anterior de la primer aleta dorsal (MAD1), por la longitud de la segunda aleta dorsal (LD2) y sus márgenes anterior (MAD2), posterior (MPD2) e interior (MID2), por la longitud de la base (LBAPc) y el margen anterior de la aleta pectoral (MAAPc), por el margen anterior dorsal (MCD) y la longitud de la hendidura (LHC) de la aleta caudal, por los anchos de la boca (AnB), de la cola (AnCo) y del pedúnculo caudal (AnPC) y por las alturas de la cola (AlCo) y del primer (AlPB1) y quinto (AlPB5) pliegue branquial. La CP2 estuvo definida por el ancho de la cabeza (AnCa). La CP3 estuvo definida por la longitud pre cloaca (LPCl) y por la altura de la segunda aleta dorsal (AlD2) (Tabla 11). 17 De acuerdo al ACP los ejemplares de S. mitsukurii presentaron mayor longitud pre cloaca (LPCl), mayor longitud pre narina externa (LPNE), pre orbita (LPOb) y pre oral (LPOa), primera aleta dorsal con margen anterior más largo (MAD1), segunda aleta dorsal con mayor longitud (LD2) y altura (AlD2), y con márgenes anterior (MAD2), posterior (MPD2) e interior (MID2) más largos, aletas pectorales con márgenes anteriores (MAAPc) y bases mayores (LBAPc), aleta caudal con margen anterior dorsal más largo (MCD) y mayor longitud de la hendidura caudal (LHC). En oposición, los ejemplares de S. cubensis presentaron mayor altura del primer (AlPB1) y quinto (AlPB5) pliegue branquial, mayor distancia entre las aletas pélvicas y la aleta caudal (EPC), cola más ancha (AnCo) y alta (AlCo), pedúnculo caudal más ancho (AnPC), boca (AnB) y cabeza más anchas (AnCa), y mayor longitud pre caudal (LPCa) y pre segunda aleta dorsal (LPD2) (Figura 6). Protocolo “segunda aleta dorsal” El ACP confeccionado con las medidas morfométricas de la segunda aleta dorsal, seleccionadas a partir del ANOVA, produjo tres CPs con autovalores mayores a uno. Estas tres CPs explicaron más del 90% de la varianza total. Ambas especies presentaron cierto grado de separación, principalmente sobre el eje de la CP1 (61,6% de la varianza, Tabla 12) (Figura 7). Todas las medidas morfométricas utilizadas en el ACP presentaron alta correlación con la CP1 (> 0,64), sin embargo la altura diagonal de la segunda aleta dorsal (AlDD2) presentó mayor correlación con la CP2 (0,76). La CP1 quedó definida por las siguientes medidas morfométricas de la segunda aleta dorsal: la longitud (LD2) y la longitud de la base (LBD2), los márgenes anterior (MAD2), posterior (MPD2), interior (MID2), posterior superior (MPSD2) y posterior inferior (MPID2), la altura (AlD2) y el ancho de la hendidura (AnHD2). La CP2 quedó definida por la altura diagonal de la segunda aleta dorsal (AlDD2) (Tabla 13). 18 Los ejemplares de S. mitsukurii presentaron una segunda aleta dorsal más larga, con márgenes más largos y de mayor altura en comparación con la segunda aleta dorsal de los ejemplares de S. cubensis (Figura 8). Protocolo “espinas” El ACP confeccionado con las medidas morfométricas de las espinas de las aletas dorsales, seleccionadas a partir del ANOVA, produjo una CP con un autovalor mayor a uno. La CP1 y la CP2 explicaron más del 81% de la varianza total, la CP1 explicó el 66,5% de la varianza total (Tabla 14, Figura 9). La CP1 presentó alta correlación con todas las medidas (> 0,6), sin embargo la distancia desde la base de la espina a la punta posterior de la primera aleta dorsal (D1SFL), presentó mayor correlación con la CP2 (0,74). La CP1 estuvo definida por: las longitudes y los anchos de las espinas de la primera (LED1, AnED1) y la segunda (LED2, AnED2) aleta dorsal, y por la distancia desde la base de la espina a la punta posterior de la segunda aleta dorsal (D2SFL). La CP2 estuvo definida por la distancia desde la base de la espina a la punta posterior de la primera aleta dorsal (D1SFL) (Tabla 15). Los ejemplares de S. mitsukurii exhibieron la primera y la segunda aleta dorsal más largas respecto de S. cubensis. Por otro lado, los ejemplares de S. cubensis presentaron las espinas de las aletas dorsales más largas y anchas en relación a S. mitsukurii (Figura 10). 19 Análisis Discriminante Lineal: S. mitsukurii y S. cubensis La discriminación entre S. mitsukurii y S. cubensis fue significativa (Λ = 0,072; F = 39,4; p < 0,0001). La Función Discriminante explicó el 100% de la varianza y estuvo definida por: Y1 = -0,001 (EPC) – 0,456 (AnPC) + 0,505 (LPOa) + 0,502 (LPNE) + 0,134 (MCD) + + 0,057 (LD2) + 0,05 (LPCl) donde EPC es el espacio entre las aletas pélvicas y la aleta caudal, AnPC es el ancho del pedúnculo caudal, LPOa es la longitud pre oral, LPNE es la longitud pre narina externa, MCD es el margen anterior dorsal de la aleta caudal, LD2 es la longitud de la segunda aleta dorsal y LPCl es la longitud pre cloaca. Dos grupos quedaron definidos como resultado del ADL (Figura 11). La Función Discriminante (Y1) tomó valores negativos para S. cubensis y valores positivos para S. mitsukurii. La LPOa y la LPNE fueron las variables con el valor absoluto más alto de coeficiente de correlación ó de estructura, seguidas en orden de importancia por el AnPC y el MCD (Tabla 16). Sobre la base de la Función Discriminante, y de acuerdo a la distancia que cada ejemplar presentó respecto al centroide de los grupos de origen, el porcentaje de clasificación correcto fue del 100% para ambas especies. Proporción respecto a LT La longitud pre oral (LPOa) fue mayor al 9,29% de la LT en los ejemplares de S. mitsukurii y menor al 9,26% de la LT en los ejemplares de S. cubensis. Asimismo, la longitud pre narina externa (LPNE) fue mayor al 4,4% de la LT en los ejemplares de S. mitsukurii y menor al 4,2% de la LT en S. cubensis. De las medidas utilizadas en el ADL la LPOa y la LPNE fueron las únicas que no presentaron solapamiento en los rangos entre 20 ambas especies, además las dos medidas fueron mayores en S. mitsukurii respecto a S. cubensis al comparar ejemplares de una misma talla (Tabla 17, Figuras 12 y 13). Los rangos de la longitud pre cloaca (LPCl), el margen anterior dorsal de la aleta caudal (MCD) y la longitud de la segunda aleta dorsal (LD2) resultaron ser mayores en los ejemplares de S. mitsukurii, mientras que los rangos del ancho del pedúnculo caudal (AnPC) y el espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal fueron mayores en los ejemplares de S. cubensis. Estos rangos presentaron cierto grado de solapamiento entre ambas especies (Tabla 17, Figura 13). Todas las variables utilizadas presentaron diferencias significativas entre ambas especies de acuerdo al Análisis de Varianza (ANOVA) (Tabla 18). Relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y la distancia entre ésta y el surco labial superior (LPNE/ENL) Esta relación fue mayor en los ejemplares de S. mitsukurii (promedio 1,07 ± 0,05) que en los de S. cubensis (promedio 0,91 ± 0,05) (Figura 14). Si bien la mayoría de los ejemplares analizados de S. mitsukurii presentaron valores mayores a 1 para la relación LPNE/ENL, dos machos juveniles de 440 y 480 mm de LT presentaron una relación LPNE/ENL menor a 1 (0,986 y 0,996; respectivamente), y una hembra juvenil (LT = 356 mm) presentó un valor de LPNE/ENL = 0,991. Sólo un macho adulto de S. cubensis de 455 mm de LT presentó un valor mayor a 1 para la relación LPNE/ENL (1,002). En base a estos resultados se observó cierto grado de solapamiento para dicha relación en los ejemplares analizados. 21 Descripción de las aletas de S. mitsukurii y S. cubensis En cuanto a la coloración de las aletas pectorales y caudal, en los ejemplares analizados de S. cubensis se observó un margen de color blancuzco en el borde posterior que no se observó en los ejemplares de S. mitsukurii. Dicho margen fue más ancho y notorio en la aleta caudal que en las aletas pectorales. También se observaron diferencias en cuanto a la morfología de las aletas pectorales: los ejemplares de S. mitsukurii presentaron el borde posterior menos cóncavo y el lóbulo proximal menos aguzado, mientras que el borde posterior resultó ser más cóncavo y el lóbulo proximal presentó una forma más aguzada en los ejemplares de S. cubensis (Figura 15). Clave propuesta para la identificación de las especies del género Squalus presentes en la Plataforma Continental Argentina 1.a. Cuerpo con manchas blancas redondeadas en los flancos………… Squalus acanthias 1.b. Cuerpo sin manchas blancas………………………………………………………………. 2 2.a. Aleta caudal con margen blancuzco y ancho en el borde posterior; altas pectorales con borde posterior fuertemente cóncavo y el lóbulo proximal fuertemente aguzado; distancia entre la punta del hocico y la narina externa menor al 4,2% de la longitud total; distancia entre la punta del hocico y el punto medio de la boca menor al 9,3% de la longitud total ………………………………………….................................... Squalus cubensis 2.b. Aleta caudal sin margen blancuzco en el borde posterior; aletas pectorales con borde posterior levemente cóncavo y el lóbulo proximal levemente aguzado; distancia entre la punta del hocico y la narina externa mayor al 4,4% de la longitud total; distancia entre la punta del hocico y el punto medio de la boca mayor al 9,3% de la longitud total……………………………………………………………………………... Squalus mitsukurii 22 Relaciones LT-PT y reproducción Análisis Discriminante Lineal: corrección de ejemplares identificados erróneamente El Análisis Discriminante Lineal (ADL) efectuado con las variables longitud total (LT), peso total (PT) y ancho de las glándulas oviductales (AGO), realizado con las hembras adultas de S. mitsukurii (N=32) y S. cubensis (N=12) obtenidas de la campaña EH0313, fue significativo (Λ = 0,103; F = 107,3; p < 0,0001). Dos grupos claramente separados quedaron definidos a partir del ADL (Figura 16 A). La Función Discriminante (FD) obtenida a partir de las tres variables, explicó el 100% de la varianza y estuvo definida por: Y hembras = – 0,005 (PT) + 0,067 (LT) + 0,047 (AGO) la cual tomó valores negativos para S. cubensis y valores positivos para S. mitsukurii. Con dicha función se determinó que de las 38 hembras adultas obtenidas de las campañas EH0412 y EH0612 identificadas como S. mitsukurii, 17 correspondían a S. cubensis (Tabla 3, Figura 16 B). El Análisis Discriminante Lineal efectuado con las variables longitud total (LT), peso total (PT) y longitud interna de los claspers (LC), realizado con los machos adultos de S. mitsukurii (N=133) y S. cubensis (N=107) obtenidos de la campaña EH0313, fue significativo (Λ = 0,047; F = 1551,3; p < 0,0001). Dos grupos claramente separados quedaron definidos a partir del ADL (Figura 17 A). La Función Discriminante (FD) obtenida a partir de las tres variables, explicó el 100% de la varianza y estuvo definida por: Y machos = – 0,004 (PT) + 0,063 (LT) + 0,079 (LC) 23 la cual tomó valores negativos para S. cubensis y valores positivos para S. mitsukurii. Con dicha función se determinó que de los 197 machos adultos obtenidos de las campañas EH0412 y EH0612 identificados como S. mitsukurii, 96 correspondían a S. cubensis (Tabla 3, Figura 17 B). Luego de aplicar las Funciones Discriminantes (Y hembras, Y machos) y corregidos los errores en la identificación de especies, se realizó una distribución de frecuencias de talla en 834 ejemplares de Squalus acanthias (550 hembras y 284 machos), 470 ejemplares de S. mitsukurii (158 hembras y 312 machos) y 236 ejemplares de S. cubensis (34 hembras y 202 machos). El rango de longitud total de los ejemplares de S. acanthias fue de 410 a 968 mm en hembras y de 305 a 748 mm en machos. Los ejemplares menores a 460 mm de LT estuvieron poco representados en las capturas y los mayores a 710 mm de LT fueron principalmente hembras. Las tallas más frecuentes en hembras correspondieron al rango 520-820 mm y en machos al rango 480-680 mm (Figura 18). En los ejemplares de S. mitsukurii el rango de longitud total fue de 262 a 850 mm en hembras y de 279 a 690 mm en machos. Los machos entre 570 y 660 mm de LT fueron los más frecuentes en las capturas, los ejemplares menores a 570 mm de LT estuvieron poco representados y los mayores a 680 mm de LT fueron principalmente hembras. Se capturaron hembras que representaron casi todo el rango de tallas (262-850 mm) pero en baja frecuencia. Las tallas más frecuentes en hembras correspondieron al rango 630-640 mm (Figura 19). El rango de longitud total de los ejemplares de S. cubensis, fue de 455 a 604 mm en hembras y de 430 a 543 mm en machos. Los machos entre 430 y 500 mm de LT fueron los más frecuentes en las capturas, los ejemplares menores a 430 mm de LT no estuvieron representados y los mayores a 500 mm de LT fueron principalmente hembras. Sólo se capturó una hembra de 458 mm de LT, el resto presentaron tallas mayores a 500 24 mm de LT y en baja frecuencia. Las tallas más frecuentes en hembras correspondieron al rango 520-550 mm (Figura 20). Relación LT-PT En S. acanthias la relación entre la LT y PT de las hembras fue PT = 2E-07 LT 3,479 (R2 = 0,96), mientras que en los machos fue PT = 2E-06 LT 3,113 (R2 = 0,94). Las regresiones lineales de las variables logarítmicas LN(LT) – LN(PT) fueron significativamente diferentes entre sexos en el coeficiente b (t = -39,1; P < 0,0001; g.l. = 829) y en el coeficiente a (t = -11,6; P < 0,0001; g.l. = 830) (Figura 21). En S. mitsukurii la relación entre la LT y el PT de las hembras fue PT = 8E-07 LT 3,268 (R2 = 0,98), mientras que en los machos fue PT = 5E-06 LT 2,960 (R2 = 0,96). Las regresiones lineales de las variables logarítmicas LN(LT) – LN(PT) fueron significativamente diferentes entre sexos en el coeficiente b (t = -6,3; P < 0,0001; g.l. = 466) y en el coeficiente a (t = -11,8; P < 0,0001; g.l. = 467) (Figura 22). La relación LT-PT no se pudo calcular en S. cubensis debido al bajo número de ejemplares juveniles analizados (las tallas menores a 430 mm no estuvieron representadas en las capturas). Longitud de madurez sexual A partir del análisis macroscópico de los órganos reproductivos de hembras de S. acanthias, se determinó que el rango de LT entre el ejemplar adulto (estadio 3) más pequeño y el juvenil (estadio 2) más grande fue de 604 a 832 mm (Figura 23). En general, el ancho de las glándulas oviductales (AGO) aumentó en relación a la LT, con un mayor incremento entre 550 y 750 mm, representado principalmente por hembras juveniles en estadio 2 y adultas en estadio 3 (Figura 23 A). El ancho de los úteros (AU) aumentó en relación a la LT, con un mayor incremento a partir de los 600 mm, representado 25 principalmente por hembras juveniles en estadio 2 y adultas (sin embriones y recientemente ovuladas) (Figura 23 B). En el análisis del índice gonadosomático (IGS = peso de ovarios / peso total x 100) en función de la LT se observó una gran dispersión de los valores para cada LT. Las hembras juveniles en estadio 2 y adultas recientemente ovuladas (estadio 4) presentaron valores del IGS similares, lo mismo ocurrió en hembras adultas sin embriones (estadios 3) y hembras con embriones (estadio 5) (Figura 23 C). A partir del análisis macroscópico de los órganos reproductivos en machos de S. acanthias, se determinó que el rango de LT entre el ejemplar adulto (estadio 3) más pequeño y el juvenil (estadio 2) más grande fue de 530 a 665 mm (Figura 24). La longitud interna de los claspers (LC) aumentó con la LT y el estado de madurez sexual de los individuos. La LC presentó un mayor incremento en ejemplares cuyo rango de LT fue entre 500 y 600 mm, representado en su mayoría por machos juveniles en estadio 2 (Figura 24 A). En el análisis del índice gonadosomático (IGS = peso de testículos / peso total x 100) en función de la LT se observó una gran dispersión de los valores para cada LT. El IGS se mantuvo estable con el incremento de la LT en individuos juveniles en estadio 1, y en los individuos juveniles en estadio 2 y adultos (estadio 3) se observó un amplio rango de valores del IGS para una misma LT (Figura 24 B). A partir del análisis macroscópico de los órganos reproductivos en machos de S. mitsukurii, se determinó que el rango de LT entre el ejemplar adulto (estadio 3) más pequeño y el ejemplar juvenil (estadio 2) más grande fue de 548 a 575 mm (Figura 25). La longitud interna de los claspers (LC) aumentó con la LT y la maduración sexual de los individuos. La LC presentó un mayor incremento en ejemplares cuyo rango de longitud total fue entre 400 y 550 mm, representado por juveniles en estadio 1 y 2 (Figura 25 A). En el análisis del índice gonadosomático (IGS = peso de testículos / peso total x 100) en función de la LT se observó una gran dispersión de los valores para cada LT. El IGS 26 presentó un amplio rango de valores para una misma LT en individuos juveniles y adultos (Figura 25 B). El rango entre el ejemplar adulto más pequeño y el juvenil más grande en hembras de S. mitsukurii y en hembras y machos de S. cubensis no se pudo calcular debido al bajo número de ejemplares juveniles analizados. A partir de los machos de S. cubensis identificados de la campaña EH0313 y de los transformados de las campañas EH0412 y EH0612, se pudo constatar que todos correspondieron a ejemplares adultos, de entre 430 y 543 mm LT (Figura 26). Fecundidad y fertilidad Squalus acanthias Sobre la base de la distribución de frecuencias del diámetro de los folículos ováricos de 204 hembras adultas (estadios 3 y 5), se consideró a los mayores de 10 mm como los que aportan a la fecundidad potencial máxima (Figura 27). La fecundidad promedio por hembra fue de 8,6 ± 3,4 y estuvo correlacionada con la LT (r = 0,7; t = 13,8; P < 0,0001; g.l. = 202) (Figura 28). En cuanto a la fertilidad, 140 hembras adultas de 670 a 968 mm LT presentaron embriones en los úteros. El número total de embriones varió entre 1 y 13 (Figura 29) y estuvo correlacionado con la LT (r = 0,6; t = 9,1; P < 0,0001; g.l. = 138). La fertilidad promedio por hembra fue de 6,2 ± 2,8. Squalus mitsukurii Sobre la base de la distribución de frecuencias del diámetro de los folículos ováricos de 33 hembras adultas (estadios 3 y 5), se consideró a los mayores de 10 mm como los que aportan a la fecundidad potencial máxima (Figura 30). La fecundidad 27 promedio por hembra fue de 5,7 ± 1,5 y estuvo correlacionada con la LT (r = 0,8; t = 7; P < 0,0001; g.l. = 31) (Figura 31). En cuanto a la fertilidad, 24 hembras adultas de 527 a 835 mm LT presentaron embriones en los úteros. El número total de embriones varió entre 2 y 7 (Figura 32) y estuvo correlacionado con la LT (r = 0,7; t = 4,1; P = 0,0005; g.l. = 22). La fertilidad promedio por hembra fue de 4,9 ± 2. Squalus cubensis Sobre la base de la distribución de frecuencias del diámetro de los folículos ováricos de 18 hembras adultas (estadios 3 y 5), se consideró a los mayores de 10 mm como los que aportan a la fecundidad potencial máxima (Figura 33). La fecundidad promedio por hembra fue de 3,8 ± 1,6 y no estuvo correlacionada con la LT (r = 0,2; t = 0,8; P = 0,4492; g.l. = 16) (Figura 34). En cuanto a la fertilidad, 15 hembras adultas de 507 a 586 mm LT presentaron embriones en los úteros. El número total de embriones varió entre 1 y 4 (Figura 35) y no estuvo correlacionado con la LT (r = 0,4; t = 1,7; P = 0,105; g.l. = 13). La fertilidad promedio por hembra fue de 2,9 ± 1. Distribución La ocurrencia de S. acanthias se registró en todos los lances realizados en el área de estudio para las cuatro campañas de investigación analizadas, mientras que en el caso de S. mitsukurii sólo se registraron lances con captura al norte de los 38°S. Los ejemplares identificados como S. cubensis en el laboratorio, fueron capturados en lances realizados entre 34° y 36°S (Figura 2). 28 DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES Los resultados de la presente Tesis confirman la ocurrencia de tres especies del género Squalus en la región de estudio: S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis. Esto concuerda con lo propuesto por Menni & Lucifora (2007) en una revisión taxonómica de los condrictios presentes en aguas argentinas y uruguayas, los cuales descartan la presencia de S. fernandinus y S. blainvillei. Además, de acuerdo a los resultados obtenidos, es factible sugerir que S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis presentarían parámetros reproductivos diferentes. Las especies de tiburones que son muy similares y usualmente confundidas, conocidas como “especies crípticas”, pueden presentar diferencias en cuanto a sus características biológicas y ecológicas, que tienen implicancias en los manejos poblacionales. Se debe poner énfasis en la correcta identificación de los tiburones espinosos del género Squalus en la región, especialmente en la separación entre S. mitsukurii y S. cubensis. Una correcta identificación de estas especies en muestreos a bordo ó de desembarque, permitirá una adecuada evaluación y un manejo más eficiente de estos recursos. Además, deberían realizarse estudios genéticos para validar y cumplimentar los resultados hallados en la presente Tesis. La problemática que presenta el género Squalus en cuanto a la clasificación de sus especies llevó a que varios autores agrupen a los individuos del género dentro de complejos de especies ó “grupos taxonómicos” de acuerdo a sus características morfológicas (Ward et al., 2007; Ebert et al., 2010; Gomes et al., 2010; Viana de Figueirêdo, 2011). Así, los individuos del género Squalus han sido incluidos dentro de tres “grupos taxonómicos”: el grupo Squalus acanthias (formado por 2 especies), el grupo Squalus mitsukurii (formado por 16 especies) y el grupo Squalus megalops (formado por 6 especies) (Ebert et al., 2010; Viana de Figueirêdo, 2011). Estos nombres refieren a las 29 especies cuyas características morfológicas y morfométricas definen el grupo. Los tres grupos están representados en la región de estudio. El grupo S. acanthias y el grupo S. mitsukurii están representados por las especies homónimas, mientras que el grupo S. megalops se encuentra representado por S. cubensis. Los ejemplares de S. acanthias fueron fácilmente diferenciados de S. mitsukurii y S. cubensis, debido a la presencia de manchas blancas en los flancos y a la posición de la base de la espina de la primera aleta dorsal por detrás de la punta libre de las aletas pectorales. Sin embargo, se pudo comprobar que las variables morfométricas y los análisis morfométricos utilizados en la presente Tesis también sirven para diferenciar a las tres especies. Estas variables morfométricas fueron empleadas con éxito por Ebert et al. (2010) para separar las especies S. acanthias y S. suckleyi en el océano Pacífico Norte. Es importante mencionar que durante muchos años los individuos de S. suckleyi fueron identificados como S. acanthias, debido a que morfológicamente son muy similares, del mismo modo que ocurre con S. mitsukurii y S. cubensis en la región de estudio. Las variables morfométricas, corregidas de acuerdo a la técnica propuesta por Lleonart et al. (2000), que mejor discriminaron entre S. mitsukurii y S. cubensis fueron la longitud pre oral y la longitud pre narina externa, siendo ambas medidas mayores en S. mitsukurii. El resto de las medidas morfométricas utilizadas también presentaron diferencias significativas y colaboraron en la discriminación entre ambas especies. La longitud pre cloaca, el margen anterior dorsal de la aleta caudal y la longitud de la segunda aleta dorsal resultaron ser mayores en S. mitsukurii, mientras que el ancho del pedúnculo caudal y el espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal fueron mayores en S. cubensis. Sin embargo, la diferencia entre S. mitsukurii y S. cubensis a partir de éstas últimas medidas morfométricas no fue tan evidente debido a que existió cierto grado de solapamiento entre especies. 30 Si bien las diferencias en la morfología externa entre S. mitsukurii y S. cubensis son sutiles, se pudo caracterizar comparativamente a ambas especies. S. mitsukurii posee cabeza y cuerpo más alargados y aletas pectorales, dorsales y caudal de mayor tamaño; además, la segunda aleta dorsal es más larga y alta y presenta márgenes más largos. Por su parte, S. cubensis posee una cabeza más ancha y un cuerpo más alto y ancho, además las espinas de las aletas dorsales son más largas y anchas. Se encontraron diferencias más notorias entre S. mitsukurii y S. cubensis, en cuanto al patrón de coloración y a la morfología de las aletas pectorales y caudal. Las aletas pectorales de S. mitsukurii presentan el borde posterior menos cóncavo y su lóbulo proximal menos aguzado. En contraste, las aletas pectorales de S. cubensis presentan el borde posterior más cóncavo y su lóbulo proximal es más aguzado, además en el borde posterior de la aleta caudal se distingue un margen de color blancuzco. El patrón de coloración y la morfología de las aletas han sido utilizados para caracterizar y distinguir a las especies del género Squalus (Compagno, 1984; Last et al., 2007; Figueroa, 2011). No se han encontrado trabajos que mencionen cambios en la coloración de las aletas de estas especies, que pudieran estar relacionados con variaciones en las condiciones ambientales. Si bien la variación en el patrón de coloración de S. mitsukurii y S. cubensis no es tan marcada, puede ser considerado como un criterio más dentro de un conjunto de características utilizadas para diferenciar estas especies. Son pocos los trabajos donde comparan morfométricamente las especies S. mitsukurii y S. cubensis. Mas et al. (2014) encontraron que las variables morfométricas que mejor discriminan entre S. mitsukurii y S. cubensis son la distancia entre las aletas pélvicas y la aleta caudal, la longitud pre cloaca, y la relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y la distancia entre ésta y el surco labial superior. Esta última relación ha sido utilizada ampliamente en las claves de identificación de las tres especies de Squalus estudiadas (Meneses & Paesch, 2003; Gomes et al., 31 2010; Figueroa, 2011). De acuerdo a Mas et al. (2014), S. mitsukurii presentó mayor longitud pre cloaca y la relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y la distancia entre ésta y el surco labial superior fue mayor. Mientras que S. cubensis presentó mayor distancia entre las aletas pélvicas y la aleta caudal. En esta Tesis se detectaron diferencias significativas en dicha relación, sin embargo se observó cierto grado de solapamiento entre S. mitsukurii y S. cubensis. Por lo tanto, esta característica no sería diagnóstica para diferenciar entre ambas especies. Al analizar la proporción que cada medida morfométrica representó de la longitud total, se encontró que la longitud pre oral y la longitud pre narina externa fueron las únicas medidas que no presentaron solapamiento en los rangos entre ambas especies. De esta manera, tales medidas podrían ser utilizadas como diagnósticas para separar a S. mitsukurii de S. cubensis. Es evidente que las características morfológicas y morfométricas propuestas para diferenciar entre S. mitsukurii y S. cubensis resultan difíciles de aplicar a bordo de buques de investigación. En la región de estudio existen problemáticas similares con respecto a las “especies crípticas”. Un ejemplo regional importante es lo que ocurre con el género Squatina representado por tres especies: S. guggenheim, S. argentina y S. occulta; las cuales presentan diferencias en sus parámetros reproductivos y en su ecología (Vooren & da Silva, 1991). En cuanto a su taxonomía, la primera se diferencia por presentar espinas en la línea media dorsal mientras que la diferenciación entre S. argentina y S. occulta se realiza por la forma de las aletas pectorales y la fórmula dentaria (Vooren & da Silva, 1991; Milessi et al., 2001). Futuros estudios taxonómicos del género Squalus en la región deberían incluir caracteres merísticos como la fórmula dentaria, carácter que resulta de utilidad para diferenciar “especies crípticas” de tiburones. Además del análisis de características fenotípicas como las mencionadas, deberían efectuarse estudios genéticos dirigidos a analizar la estructura poblacional del género Squalus en el Atlántico 32 Sudoccidental, complementando el amplio estudio realizado por Ward et al. (2007) sobre este género en aguas Australianas. En la región de estudio los rangos de longitud total en S. acanthias fueron de 410 a 968 mm en hembras y de 305 a 748 mm en machos. Ambos rangos estuvieron representados principalmente por ejemplares adultos, siendo más frecuentes las hembras. Chavez (2014) analizó la biología reproductiva de esta especie y si bien las longitudes máximas en ambos sexos fueron similares a las encontradas en la presente Tesis, los rangos reportados por este autor fueron más acotados. Es probable que esta diferencia se deba a que Chavez (2014) analizó ejemplares provenientes de desembarques de pesca artesanal, en Puerto Quequén, cuyas longitudes totales están sesgadas al interés de los pescadores. Estudios realizados al sur de los 34°S revelaron una mayor amplitud en los rangos de longitud total de ambos sexos (García de la Rosa, 1998; Colonello et al., 2012). Asimismo, Colonello et al. (2012) encontraron segregación espacial por sexo y estadios de madurez sexual en S. acanthias, siendo más frecuentes los machos adultos al sur de 45°S y las hembras adultas en la región norte. Es probable que la segregación espacio temporal de S. acanthias en el océano Atlántico Sudoccidental afecte la estructura de tallas analizada en regiones acotadas de su distribución, tal como ocurre en el área de estudio entre 34° y 42°S. En S. mitsukurii los rangos de longitud total fueron de 262 a 850 mm en hembras y de 279 a 690 mm en machos. A diferencia de lo que ocurrió con S. acanthias, los machos adultos fueron los más frecuentes. Estos rangos de longitud total son similares a los observados por Oddone et al. (2010) en un estudio realizado en la misma región, durante otoño e invierno de los años 1995, 1996 y 1998. Por el contrario, Fischer et al. (2006) encontraron que S. mitsukurii en aguas del noreste de Brasil presenta rangos de longitud total mayores para ambos sexos (505 a 943 mm en hembras y 560 a 730 mm en 33 machos). Posiblemente estas diferencias se deban a que la región de estudio represente el extremo de la distribución total de la especie en aguas del Atlántico Sudoccidental. Los rangos de longitud total en S. cubensis fueron de 455 a 604 mm en hembras y de 430 a 543 mm en machos. Estos rangos fueron más acotados en comparación con las otras dos especies y estuvieron representados casi exclusivamente por adultos. Al igual que en S. mitsukurii los machos adultos fueron los más frecuentes. Al sur de los 34°S no se dispone de suficiente información sobre S. cubensis. Menni et al. (1986) analizaron datos provenientes de desembarques de buques comerciales en el puerto de Mar del Plata entre diciembre de 1977 y marzo de 1979. Estos autores examinaron 16 hembras cuyo rango de longitud total (437 a 605 mm) fue similar al encontrado en la presente Tesis y sólo obtuvieron un macho adulto de 470 mm de longitud total. En un estudio realizado por Jones et al. (2013) sobre la biología reproductiva de S. cubensis en el norte del Golfo de México los autores encontraron que el rango de longitud total fue de 212 a 564 mm en hembras y de 204 a 466 mm en machos. Estos resultados indican que en ese sector del océano Atlántico se encuentran juveniles y adultos, a diferencia de lo que ocurre en la región de estudio. Por otro lado, las tallas máximas encontradas por dichos autores fueron menores a las halladas en la presente Tesis para ambos sexos. El extremo sur de la distribución de S. cubensis se ubicaría entre 34° y 36°S, donde se capturarían casi exclusivamente machos adultos, producto de una posible segregación por sexo y estadio de madurez sexual. En la región de estudio las tres especies del género Squalus presentaron diferencias en cuanto a la longitud total máxima en hembras y machos, siendo S. acanthias la especie que presentó las mayores longitudes totales (968 y 748 mm para hembras y machos respectivamente) seguida por S. mitsukurii (850 y 690 mm para hembras y machos respectivamente) y por S. cubensis (604 y 543 mm para hembras y machos respectivamente). 34 Se obtuvieron los rangos entre el ejemplar adulto más pequeño y el ejemplar juvenil más grande para hembras y machos de S. acanthias y para machos de S. mitsukurii. Estos rangos pueden ser considerados como una aproximación a la longitud media de madurez sexual. Los parámetros que mejor caracterizarían el comienzo de la madurez sexual son el ancho de las glándulas oviductales, el ancho de los úteros y la longitud interna de los claspers. En las especies de tiburones vivíparos lecitotróficos con ciclos reproductivos extensos, el índice gonadosomático no es un buen parámetro debido a la variación de tamaño y peso de los folículos ováricos presentes en cada hembra durante el ciclo (e.g. el cazón Galeorhinus galeus [Lucifora, 2003]; el pez ángel Squatina guggenheim [Colonello et al., 2007]). El rango entre el ejemplar adulto más pequeño y el juvenil más grande de S. acanthias fue de 604 a 832 mm en hembras y de 530 a 665 mm en machos. Estos valores se corresponden con los presentados por Colonello et al. (2012) en un estudio sobre los parámetros reproductivos y poblacionales de S. acanthias en el Atlántico Sudoccidental, quienes además estimaron valores de la longitud media de madurez sexual de 649 mm en hembras y 564 mm en machos. Para S. mitsukurii el rango entre el macho adulto más pequeño y el juvenil más grande fue de 548 a 575 mm. Lucifora et al. (1999) informaron rangos similares para una campaña que se realizó en la desembocadura del Río de la Plata en diciembre de 1997, además obtuvieron el rango entre la hembra adulta más pequeña y la juvenil más grande el cual fue de 500 a 600 mm. En la presente Tesis la hembra adulta más pequeña presentó una longitud de 648 mm y la hembra juvenil más grande 632 mm, posiblemente estas diferencias se deban a la falta de datos disponibles para el análisis. Oddone et al. (2010) estimaron para la misma región de estudio, valores de la longitud media de madurez sexual de 559 mm en hembras y 431 mm en machos. En S. cubensis no se pudo establecer el rango entre el ejemplar adulto más pequeño y el juvenil más grande debido al bajo número de ejemplares analizados. En 35 el norte del Golfo de México, el rango de madurez sexual en S. cubensis varió entre 446 y 520 mm en hembras y entre 375 y 411 mm en machos, siendo la longitud media de madurez sexual estimada en 466 y 379 mm, respectivamente (Jones et al., 2013). En base a los resultados de esta Tesis y a la bibliografía consultada es factible sugerir que las tres especies del género Squalus, que habitan en la región de estudio, presentarían diferencias en cuanto a la longitud media de madurez sexual. La fertilidad promedio (6,2 ± 2,8) obtenida para S. acanthias en la región de estudio, concuerda con la encontrada por Colonello et al. (2012) y Chavez (2014). Sin embargo, el valor promedio de fecundidad (8,6 ± 3,4) resultó ser mayor en la presente Tesis que el encontrado por Colonello et al. (2012), probablemente debido a que dichos autores utilizaron los folículos ováricos presumiblemente pre ovulatorios para analizar el parámetro. Los valores de fecundidad (5,7 ± 1,5) y fertilidad (4,9 ± 2) promedio para S. mitsukurii fueron menores a los encontrados por Fischer et al. (2006) al noroeste de Brasil, lo cual podría estar relacionado con que en esa región las hembras presentaron mayor longitud total. En el caso de S. cubensis, la fecundidad promedio (3,8 ± 1,6) coincidió con la encontrada por Jones et al. (2013) en el norte del Golfo de México. Sin embargo, la fertilidad promedio (2,9 ±1) fue mayor a la encontrada por dichos autores al igual que ocurrió con la longitud total máxima de las hembras. En base a esto es factible sugerir que las tres especies del género Squalus encontradas en la región de estudio presentarían diferencias en cuanto a los valores de fecundidad y fertilidad. Cortés (2000) sostiene que la fecundidad y la fertilidad están correlacionadas positivamente con la longitud total de las hembras en tiburones vivíparos y que las especies más grandes tienden a tener mayor número de crías. Los resultados obtenidos en la presente Tesis confirman este patrón para S. acanthias y S. mitsukurii. Sin embargo en S. cubensis no se observó correlación entre dichos parámetros y la longitud total de las hembras, posiblemente debido al bajo número de ejemplares analizados. S. acanthias fue 36 la especie que presentó mayor longitud total máxima y mayor número de crías. Por el contrario, S. cubensis exhibió la menor longitud total máxima y el menor número de crías. S. mitsukurii presentó valores intermedios para ambas características reproductivas. En las hembras de las especies del género Squalus presentes en la región de estudio el desarrollo ovárico ocurre en simultáneo con la gestación, por lo tanto las hembras en post parto estarían listas para aparearse y ovular nuevamente (Squalus mitsukurii [Fischer et al., 2006]; Squalus acanthias [Colonello et al., 2012; Chavez, 2014]; Squalus cubensis [Jones et al., 2013]). Si bien en esta Tesis no se analizó la duración de los ciclos reproductivos, la variación que se observó en el índice gonadosomático y la bibliografía consultada sugieren que las tres especies tendrían ciclos reproductivos multianuales. García et al. (2008) analizaron los riesgos de extinción de los condrictios de acuerdo a su hábitat y mencionan al género Squalus como el grupo de tiburones de pequeño tamaño que presentan un alto riesgo de extinción. Estos autores hacen hincapié en que las medidas de conservación no deben estar restringidas sólo a las especies de tiburones de gran tamaño, sino que también se deben considerar a las especies de pequeño tamaño. La presente Tesis aporta información sobre la taxonomía y algunos parámetros reproductivos de las especies del género Squalus que habitan las aguas de la Plataforma Continental Argentina y la Zona Común de Pesca Argentino-Uruguaya, siendo esta información el primer aporte para S. cubensis en la región. A partir de los resultados obtenidos, es factible sugerir que S. acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis presentarían diferencias en cuanto a los parámetros reproductivos analizados. Independientemente de estas diferencias, al igual que la mayoría de los condrictios, los tiburones espinosos presentan una elevada talla de madurez sexual, baja fertilidad y complejos ciclos reproductivos. Tales características indican que estos tiburones son muy vulnerables a la 37 pesca. A esta vulnerabilidad se suma que S. mitsukurii y S. cubensis pueden ser consideradas como “especies crípticas”. Por lo tanto resulta fundamental su correcta identificación, en especial al norte de los 36°S en donde co-ocurren las tres especies. Se deben profundizar los estudios merísticos y genéticos de estas especies en la región, como así también avanzar en estudios que permitan determinar parámetros poblacionales y áreas esenciales para los tiburones Squalus en el océano Atlántico Sudoccidental. 38 BIBLIOGRAFÍA Acha, M.E., H.M. Mianzan, R.A. Guerrero, M. Favero & B. Bava. 2004. Marine fronts at the continental shelves of austral South America: physical and ecological processes. Journal of Marine Systems, 44: 83-105. Balech, E. & M. Ehrlich. 2008. Esquema Biogeográfico del Mar Argentino. Revista del Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero, 19: 45-75. Belleggia, M. & F. Sánchez. 2011. Cambios a largo plazo de la dieta y el rol trófico de Squalus acanthias en el Mar Argentino. INIDEP Inf. Invest. N° 69/11. Belleggia, M., D.E. Figueroa, F. Sánchez & C. Bremec. 2012. Long term changes in the spiny dogfish (Squalus acanthias) trophic role in the Southwestern Atlantic. Hydrobiologia, 684: 57-67. Cedrola, P., A. Gonzalez, G. Chiaramonte & A. Pettovello. 2012. Bycatch of sharks (Elasmobranchii) in the Patagonian red shrimp Pleoticus muelleri (Bate, 1888) fishery. Revista del Museo Argentino de Ciencias Naturales nueva serie, 14(2): 349-356. Chavez, L.N. 2014. Biología reproductiva del tiburón espinoso Squalus acanthias (Linnaeus, 1758) (Chondrichthyes: Squalidae) en Puerto Quequén, Provincia de Buenos Aires. Tesis de Grado, FCEyN, UNMdP, Argentina. 80 pp. Colonello, J.H., L.O. Lucifora & A.M. Massa. 2007. Reproduction of the angular angel shark (Squatina guggenheim): geographic differences, reproductive cycle, and sexual dimorphism. ICES Journal of Marine Science, 64: 131-140. 39 Colonello, J.H., H.E. Christiansen & G.J. Macchi. 2011. Escala de madurez sexual para peces cartilaginosos de la Plataforma Continental Argentina. En: Contribuciones sobre biología, pesca y comercialización de tiburones en la Argentina. Aportes para la elaboración del Plan de Acción Nacional (Wöhler, O.C., P. Cedrola & M.B. Cousseau, eds.): 115-128. Consejo Federal Pesquero, Buenos Aires, Argentina. 224 pp. Colonello, J.H., F. Cortés, M. Belleggia & P. Casagrande. 2012. Parámetros reproductivos y poblacionales del tiburón espinoso Squalus acanthias en el Atlántico Sudoccidental. INIDEP Inf. Invest. N° 66/12. Compagno, L.J.V. 1984. FAO Species Catalogue. Vol. 4. Sharks of the world: an annotated and illustrated catalogue of shark species known to date. Part 1 Hexanchiformes to Lamniformes. FAO Fisheries Synopsis, 125: 1-249. Compagno, L.J.V. 1990. Alternative life-history styles of cartilaginous fishes in time and space. Environmental Biology of Fishes, 28: 33-75. Cortés, E. 2000. Life history patterns and conservations in sharks. Reviews in Fisheries Science, 8: 299-344. Cousseau, M.B. & R.G. Perrota. 2004. Peces marinos de Argentina: Biología, distribución y pesca. INIDEP, Mar del Plata, Argentina. 167 pp. Cousseau, M.B. 2010. Los peces cartilaginosos (Clase Chondrichyes). En: Ictiología. Aspectos fundamentales. La vida de los peces sudamericanos (M.B. Cousseau, coord.): 91-238. Eudem, Mar del Plata, Argentina. 670 pp. Ebert, D.A., W.T. White, K.J. Goldman, L.J.V. Compagno, T.S. Daly–Engel & R.D. Ward. 2010. Resurrection and redescriptions of Squalus suckleyi (Girard, 1854) from the North Pacific, with comments on the Squalus acanthias subgroup (Squaliformes: Squalidae). Zootaxa, 2612: 22-40. 40 Figueroa, D.E. 2011. Clave ilustrada de agnatos y peces cartilaginosos de Argentina y Uruguay. En: Contribuciones sobre biología, pesca y comercialización de tiburones en la Argentina. Aportes para la elaboración del Plan de Acción Nacional (Wohler, O.C., P. Cedrola & M.B. Cousseau, eds.): 25-74. Consejo Federal Pesquero, Buenos Aires, Argentina. 224 pp. Fischer, A.F., D.P. Veras, F.H.V. Hazin, M.K. Broadhurst, G.H. Burgess & P.G.V. Oliveira. 2006. Maturation of Squalus mitsukurii and Cirrhigaleus asper (Squalidae, Squaliformes) in the southwestern equatorial Atlantic Ocean. Journal Applied Ichthyology, 22(6): 495-501. García de la Rosa, S.B. 1998. Estudios de las interrelaciones tróficas de dos elasmobranquios de la plataforma del Mar Argentino, en relación con las variaciones espacio-temporales y ambientales. Squalus acanthias (Squalidae) y Raja flavirostris (Rajidae). Tesis de Doctorado, FCEyN, UNMdP, Argentina. 216pp. García de la Rosa, S.B., F. Sánchez & B. Prenski. 2000. Tiburones, pesca de altura. En: Síntesis del estado de las pesquerías marítimas y de la Cuenca del Plata. Años 1997-1998, con una actualización de 1999 (S. Bezzi, R. Akselman & E. Boschi, eds.). Publicaciones especiales. INIDEP. Mar del Plata, Argentina. 288 pp. García, V.B., L.O. Lucifora & R.A. Myers. 2008. The importance of habitat and life history to extinction risk in sharks, skates, rays and chimaeras. Proceedings of the Royal Society of London, 275: 83-89. Gomes, U.L., C.N. Signori, O.B.F. Gadig & H.R.S. Santos. 2010. Guia para identificação de tubarões e raias do Rio de Janeiro. Technical Books Editora, Río de Janeiro, Brasil. 234 pp. Gosztonyi, A.E. & L. Kuba. 1998. Presencia de Squalus mitsukurii y aspectos de su biología y la de Squalus acanthias (Chondrichthyes, Squalidae) en aguas argentinas en febrero y junio-julio de 1983. Frente Marítimo, 17: 49-60. 41 Guerrero, R.A. & A.R. Piola. 1997. Masas de agua en la plataforma continental. En: El Mar Argentino y sus Recursos Pesquero, Tomo I: Antecedentes Históricos de las Exploraciones en el Mar y las Características Ambientales (E. Boschi, ed.): 107-119. Publicaciones especiales. INIDEP, Mar del Plata, Argentina. Hamlett, W.C., G. Kormanik, M. Storrie, B. Stevens & T.L. Walker. 2005. Chondrichthyan Parity, Lecitotrophy and Matotrophy. En: Reproductive Biology and Phylogeny of Chondrichthyes, Sharks, Batoid and Chimaeras, Vol. 3 (Hamlett W.C., ed.): 395-434. Enfield, NH: Science Publishers Incorporated, Estados Unidos. 562 pp. Hoening, J.M. & S.H. Gruber. 1990. Life-history patterns in the elasmobranchs: implications for fisheries management. En: Elasmobranchs as living Resources: Advances in the Biology, Ecology, Systematics, and the Status of the Fisheries (H.L. Pratt Jr., S.H. Gruber & T. Taniuchi, eds.): 1-16. NOAA Technical Report NMFS. 90 pp. Hozbor, N.M., J.H. Colonello & A.M. Massa. 2011. Composición específica y distribución de los peces cartilaginosos en el sector del Atlántico Sudoccidental comprendido entre 34°-55°S. Período 2003-2005. En: Contribuciones sobre biología, pesca y comercialización de tiburones en la Argentina. Aportes para la elaboración del Plan de Acción Nacional (O.C. Wohler, P. Cedrola & M.B. Cousseau, eds.): 89-100. Consejo Federal Pesquero, Buenos Aires, Argentina. 224 pp. Ibanez-Aguirre, A.L. & J. Lleonart. 1996. Relative growth comparative morphometric of Mugilcephalus L. and Mugil curema V. in the Gulf of Mexico. Scientia Marina, 60: 361-368. Jones, L.M., W.B. Driggers III, E.R. Hoffmayer, K.M. Hannan & A.N. Mathers. 2013. Reproductive biology of the Cuban dogfish in the northern Gulf of Mexico. Marine and Coastal Fisheries, 5(1): 152-158. 42 Last, P.R., W.T. White, J.J. Pogonski, D.C. Gledhill, G.K. Yearsley & R.D. Ward. 2007. Application of a rapid taxonomic approach to the genus Squalus. En: Descriptions of new dogfishes of the genus Squalus (Squaloidea: Squalidae) (Last, P.R., W.T. White & J.J. Pogonoski, eds.): 1-10. CISRO Marine and Atmospheric Researsch, Australia. 136 pp. Lessa, R., F.M. Santana, G. Rincón, O.B.F. Gadig & A.C.A. El-Dier. 1999. Biodiversidade de elasmobrânquios do Brasil. Relatório para o Programa Nacional de Diversidade Biológica (PRONABIO) – Necton – Elasmobrânquios. Ministério do Meio Ambiente, Recife. 119 pp. Lleonart, J., J. Salat & G.J. Torres. 2000. Removing Allometric Effects of Body Size in Morphological Analysis. Journal of Theoretical Biology, 205: 85-93. Lombarte, A. & J. Lleonart. 1993. Otolith size changes related with body growth, habitat depth and temperatura. Environmental Biology of Fishes, 37: 297-306. Lucifora, L.O. 2003. Ecología y conservación de los grandes tiburones costeros de Bahía Anegada, Provincia de Buenos Aires, Argentina. Tesis de Doctorado, FCEyN, UNMdP, Argentina. 405 pp. Lucifora, L.O., J.L. Valero & V.B. García. 1999. Length at maturity of the greeneye spurdog shark, Squalus mitsukurii (Elasmobranchii: Squalidae) from the SW Atlantic, with comparisons with other regions. Marine and Freshwater Research, 50: 629-632. Mas, F., A. Márquez, F. Doño, L. Rubio, E. Errico, V. Vidal, M. Prandi, S. Silveira, R. Forselledo & A. Domingo. 2014. Galludos: Squalus (Elasmobranchii, Squalidae), discriminación de especies en la ZCPAU a través de análisis morfométricos y moleculares. Presentación en Congreso. 17° Simposio Científico. Comisión Técnica Mixta del Frente Marítimo. Maldonado, Uruguay. 43 Massa, A.M., L.O. Lucifora & N.M. Hozbor. 2004 Condrictios de la región costera bonaerense y uruguaya. En: El Mar Argentino y sus recursos pesqueros. Los peces marinos de interés pesquero. Caracterización biológica y evaluación del estado de explotación (R.P. Sánchez & S.I. Bezzi, eds.): 85-99. Publicaciones especiales. INIDEP. Mar del Plata, Argentina. 360 pp. Meneses, P. & L. Paesch. 1999. Características de las especies obtenidas como captura incidental en las campañas de evaluación dirigidas a merluza, corvina y pescadilla. En: Estudios realizados sobre los elasmobranquios dentro del Río de la Plata y la Zona Común de Pesca Argentino Uruguaya en el marco del Plan de Investigación Pesquera INAPE-PNUD URU/92/003 (Arena, G. & M. Rey, eds.): 4-12. Montevideo. 79 pp. Meneses, P. & L. Paesch. 2003. Guía de campo para la identificación de peces cartilaginosos en el Río de la Plata y su frente oceánico. Frente Marítimo, 19: 145-194. Menni, R.C., R.A. Ringuelet & R.H. Arámburu. 1984. Peces marinos de la Argentina y Uruguay. Reseña histórica. Clave de familias, géneros y especies. Catálogo crítico. Editorial Hemisferio Sur, Buenos Aires. 359 pp. Menni, R.C., M.B. Cousseau & A.E. Gosztonyi. 1986. Sobre la biología de los tiburones costeros de la Provincia de Buenos Aires. Anales Sociedad Científica Argentina, 213: 3-26. Menni, R.C. & L.O. Lucifora. 2007. Condrictios de la Argentina y Uruguay. Lista de trabajo. ProBiota, FCNyM, UNLP, Serie Técnica-Didáctica, La Plata, Argentina. 11:1-15. Menni, R.C., A.J. Jaureguizar, M.F.W. Stehmann & L.O. Lucifora. 2010. Marine biodiversity at the community level: zoogeography of sharks, skates, rays and chimaeras in the southwestern Atlantic. Biodiversity and Conservation, 19: 775–796. 44 Milessi, A., R. Vögler & G. Bazzino. 2001. Identificación de tres especies del género Squatina (Chondricthyes, Squatinidae) en la Zona Común de Pesca ArgentinoUruguaya (ZCPAU). Gayana, 65: 167-172. Nelson, J.S. 2006. Fishes of the World. John Wiley & Sons, Hoboken, New Jersey. 601pp. Oddone, M.C., L. Paesch & W. Norbis. 2010. Size Structure, Abundance and Preliminary Information on the Reproductive Parameters of the Shortspine Spurdog (Squalus mitsukurii) in the Argentinean-Uruguayan Common Fishing Zone from the mid-1990s. Journal of Northwest Atlantic Fishery Science, 43: 13-26. Piola, A.R. & A.L. Rivas. 1997. Corrientes en la Plataforma Continental. En: El Mar Argentino y sus Recursos Pesqueros. Tomo 1: Antecedentes históricos de las exploraciones en el mar y las características ambientales (E. Boschi, ed.): 119–132. Publicaciones especiales. INIDEP, Mar del Plata, Argentina. Piola, A.R. & R.P. Matano. 2001. The South Atlantic Western Boundary Currents Brazil/Falkland (Malvinas) Currents. En: Encyclopedia of Ocean Sciences, Vol 1 (Steele, J.M., S.A. Thorpe & K.K. Turekian, eds.): 340–349. Elsevier, Nueva York. Sánchez, R.P., G. Navarro & V. Rozycki. 2012. Estadísticas de la Pesca Marina en la Argentina. Evolución de los desembarque 1898-2010. Ministerio de Agricultura, Ganadería y Pesca de la Nación. Buenos Aires, Argentina. 528 pp. Van Der Molen, S., G. Caille & R. González. 1998. By-catch of sharks in Patagonian coastal trawl fisheries. Marine and Freshwater Research, 49(7): 641-644. Viana de Figueirêdo, S.T. 2011. Revisão taxonômica e morfológica do gênero Squalus Linnaeus, 1758 do Oceano Atlântico Sul Ocidental (Chondrichthyes: Squaliformes: Squalidae). Tesis Doctoral. Universidade de São Paulo, Brasil. 349 pp. 45 Vooren, C.M. & K.G. da Silva. 1991. On the taxonomy of the angel sharks from southern Brazil, with the description of Squatina occulta sp. N. Revista Brasileira de Biologia, 51: 589-602.Ward, R.D., B.H. Homes, T.S. Zemlak & P.J. Smith. 2007. DNA barcoding discriminates spurdogs of the genus Squalus. En: Descriptions of new dogfishes of the genus Squalus (Squaloidea: Squalidae) (Last, P.R., W.T. White & J.J. Pogonoski, eds.): 117-130. CSIRO Marine and Atmospheric Research, Australia. 136 pp. Zar, J.H. 2010. Biostatistical Analysis. 5th ed. Prentice Hall. Inc., New Jersey. 944 pp. 46 Diversidad de tiburones espinosos del género Squalus (Chondrichthyes: Squalidae) en el océano Atlántico Sudoccidental, entre 34° y 42°S TABLAS Y FIGURAS 47 Tabla 1. Información de las campañas de investigación donde se obtuvieron ejemplares de tiburones espinosos Squalus spp. Se indica la codificación de las campañas utilizada por el INIDEP. Código EH0411 EH0412 EH0612 EH0313 Año 2011 2012 2012 2013 Fecha 19/10 - 12/11 16/05 - 02/06 06/11 - 02/12 15/06 - 04/07 Latitud 34,79 - 40,98 °S 34,59 - 39,47 °S 34,75 - 40,97 °S 34,58 - 39,96 °S Longitud Profundidad 52,38 - 60,53 °W 44 - 313 m 52,12 - 57,24 °W 51 - 300 m 52,36 - 60,53 °W 45 - 319 m 52,14 - 58,29 °W 52 - 315 m Tabla 2. Número de ejemplares de Squalus acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis analizados en el laboratorio. Se indica la codificación de las campañas utilizada por el INIDEP. Código EH0411 EH0412 EH0612 EH0313 Total Squalus acanthias Machos 163 56 36 31 286 Hembras 322 139 79 10 550 Squalus mitsukurii Machos 0 180 65 162 407 Hembras 0 74 30 71 175 Squalus cubensis Machos Hembras 0 0 0 0 0 0 107 17 107 17 Tabla 3. Número de ejemplares de Squalus acanthias, S. mitsukurii y S. cubensis, corregidos con un Análisis Discriminante elaborado a partir del crecimiento alométrico de los órganos reproductivos. Se indica la codificación de las campañas utilizada por el INIDEP. 48 Código EH0411 EH0412 EH0612 EH0313 Total Squalus acanthias Machos 163 56 36 31 286 Hembras 322 139 79 10 550 Squalus mitsukurii Machos 0 91 59 162 312 Hembras 0 58 29 71 158 Squalus cubensis Machos Hembras 0 0 89 16 6 1 107 17 202 34 Tabla 4. Nombre y descripción de las medidas morfométricas registradas en los ejemplares de las tres especies de Squalus, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Nombre LT LPCa LPD2 LPD1 LPCl LPPl LPPc LC LPB LPE LPOb LPNE LPOa LPNI ENL AnB LSL EIN EIO LO AlO LE AlPB1 AlPB5 EID EDC EPP EPC LD1 MAD1 LBD1 AlD1 MID1 MPD1 LED1 Descripción Medidas morfométricas Nombre Longitud Total Longitud Pre Caudal Longitud Pre Dorsal 2 Longitud Pre Dorsal 1 Longitud Pre Cloaca Longitud Pre Pélvica Longitud Pre Pectoral Longitud de la Cabeza Longitud Pre Branquial Longitud Pre Espiráculo Longitud Pre Orbita Longitud Pre Narina Externa Longitud Pre Oral Longitud Pre Narina Interna Espacio Narina Labio Ancho de la Boca Longitud del Surco Labial Espacio Inter Narina Espacio Inter Orbita Longitud del Ojo Altura del Ojo Longitud del Espiráculo Altura del Pliegue Branquial 1 Altura del Pliegue Branquial 5 Espacio Inter Dorsal Espacio Dorsal Caudal Espacio Pectoral Pélvico Espacio Pélvico Caudal Longitud de la Dorsal 1 Margen Anterior de la Dorsal 1 Longitud de la Base de la Dorsal 1 Altura de la Dorsal 1 Margen Interior de la Dorsal 1 Margen Posterior de la Dorsal 1 Longitud de la Espina Dorsal 1 AnED1 D1SFL LD2 MAD2 LBD2 AlD2 MID2 MPD2 AlDD2 AnHD2 MPSD2 MPID2 LED2 AnED2 D2SFL MAAPc MIAPc LBAPc MPAPc LAPl AlAPl MCD MCV MCSPoD MCIPoV AnHC LHC AnCN AnCB AnCa AnCo AnPC AlCo AlPC Descripción Ancho de la Espina Dorsal 1 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 1 Longitud Dorsal 2 Margen Anterior de la Dorsal 2 Longitud de la Base de la Dorsal 2 Altura de la Dorsal 2 Margen Interior de la Dorsal 2 Margen Posterior de la Dorsal 2 Altura Diagonal de la Dorsal 2 Ancho de la Hendidura de la Dorsal 2 Margen Posterior Superior de la Dorsal 2 Margen Posterior Inferior de la Dorsal 2 Longitud de la Espina Dorsal 2 Ancho de la Espina Dorsal 2 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 2 Margen Anterior de la Aleta Pectoral Margen Interior de la Aleta Pectoral Longitud de la Base de la Aleta Pectoral Margen Posterior de la Aleta Pectoral Longitud de la Aleta Pélvica Altura de la Aleta Pélvica Margen Caudal Dorsal Margen Caudal Ventral Margen Caudal Superior Post Dorsal Margen Caudal Inferior Post Ventral Ancho de la Hendidura Caudal Longitud de la Hendidura Caudal Ancho de la Cabeza a la Altura de las Narinas Ancho de la Cabeza a la Altura de la Boca Ancho de la Cabeza Ancho de la Cola Ancho del Pedúnculo Caudal Altura de la Cola Altura del Pedúnculo Caudal 49 Tabla 5. Nombre y descripción de las variables morfométricas incluidas en el protocolo “cabeza-tronco-aletas”, aplicado a los ejemplares de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Nombre LPCa LPD2 LPCl LPOb LPNE LPOa AnB AlPB1 AlPB5 EPC MAD1 LD2 Medidas morfométricas Descripción Nombre Longitud Pre Caudal Longitud Pre Dorsal 2 Longitud Pre Cloaca Longitud Pre Orbita Longitud Pre Narina Externa Longitud Pre Oral Ancho de la Boca Altura del Pliegue Branquial 1 Altura del Pliegue Branquial 5 Espacio Pélvico Caudal Margen Anterior de la Dorsal 1 Longitud Dorsal 2 MAD2 AlD2 MID2 MPD2 MAAPc LBAPc MCD LHC AnCa AnCo AnPC AlCo Descripción Margen Anterior de la Dorsal 2 Altura de la Dorsal 2 Margen Interior de la Dorsal 2 Margen Posterior de la Dorsal 2 Margen Anterior de la Aleta Pectoral Longitud de la Base de la Aleta Pectoral Margen Caudal Dorsal Longitud de la Hendidura Caudal Ancho de la Cabeza Ancho de la Cola Ancho del Pedúnculo Caudal Altura de la Cola Tabla 6. Nombre y descripción de las variables morfométricas incluidas en el protocolo “segunda aleta dorsal”, aplicado a los ejemplares de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Nombre LD2 MAD2 LBD2 AlD2 MID2 Descripción Medidas morfométricas Nombre Longitud Dorsal 2 Margen Anterior de la Dorsal 2 Longitud de la Base de la Dorsal 2 Altura de la Dorsal 2 Margen Interior de la Dorsal 2 MPD2 AlDD2 AnHD2 MPSD2 MPID2 Descripción Margen Posterior de la Dorsal 2 Altura Diagonal de la Dorsal 2 Ancho de la Hendidura de la Dorsal 2 Margen Posterior Superior de la Dorsal 2 Margen Posterior Inferior de la Dorsal 2 Tabla 7. Nombre y descripción de las variables morfométricas incluidas en el protocolo “espinas”, aplicado a los ejemplares de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Nombre LED1 AnED1 D1SFL Medidas morfométricas Descripción Nombre Longitud de la Espina Dorsal 1 Ancho de la Espina Dorsal 1 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 1 LED2 AnED2 D2SFL Descripción Longitud de la Espina Dorsal 2 Ancho de la Espina Dorsal 2 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 2 50 Tabla 8. Número de ejemplares de Squalus mitsukurii y S. cubensis por sexo y estadio de madurez sexual, provenientes de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Squalus mitsukurii Campaña: EH0313 Juveniles Adultos Machos 28 134 Hembras 38 33 Total 66 167 Squalus cubensis Juveniles 0 1 1 Adultos 107 16 123 Tabla 9. Nombre y descripción de las medidas morfométricas registradas en los ejemplares de las tres especies de Squalus obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013, seleccionadas a partir del análisis de varianza. Nombre LPCa LPD2 LPCl LPOb LPNE LPOa AnB AlPB1 AlPB5 EPC MAD1 LED1 AnED1 D1SFL LD2 MAD2 LBD2 AlD2 Descripción Medidas morfométricas Nombre Longitud Pre Caudal Longitud Pre Dorsal 2 Longitud Pre Cloaca Longitud Pre Orbita Longitud Pre Narina Externa Longitud Pre Oral Ancho de la Boca Altura del Pliegue Branquial 1 Altura del Pliegue Branquial 5 Espacio Pélvico Caudal Margen Anterior de la Dorsal 1 Longitud de la Espina Dorsal 1 Ancho de la Espina Dorsal 1 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 1 Longitud Dorsal 2 Margen Anterior de la Dorsal 2 Longitud de la Base de la Dorsal 2 Altura de la Dorsal 2 MID2 MPD2 AlDD2 AnHD2 MPSD2 MPID2 LED2 AnED2 D2SFL MAAPc LBAPc MCD LHC AnCa AnCo AnPC AlCo Descripción Margen Interior de la Dorsal 2 Margen Posterior de la Dorsal 2 Altura Diagonal de la Dorsal 2 Ancho de la Hendidura de la Dorsal 2 Margen Posterior Superior de la Dorsal 2 Margen Posterior Inferior de la Dorsal 2 Longitud de la Espina Dorsal 2 Ancho de la Espina Dorsal 2 Distancia Espina a la Punta de la Dorsal 2 Margen Anterior de la Aleta Pectoral Longitud de la Base de la Aleta Pectoral Margen Caudal Dorsal Longitud de la Hendidura Caudal Ancho de la Cabeza Ancho de la Cola Ancho del Pedúnculo Caudal Altura de la Cola 51 Tabla 10. Resultados del Análisis de Componentes Principales de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “cabeza-tronco-aletas” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Se indican los autovalores, el porcentaje de varianza total y el porcentaje de varianza acumulada de las cinco primeras Componentes Principales (CP). CP1 CP2 CP3 CP4 CP5 Autovalor 11,815 2,344 1,975 1,435 1,119 Varianza acumulada (%) 49,23 58,99 67,22 73,20 77,86 Varianza total (%) 49,23 9,77 8,23 5,98 4,66 52 Tabla 11. Resultados del Análisis de Componentes Principales de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “cabeza-tronco-aletas” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Se indica la correlación entre las variables morfométricas y las cinco primeras Componentes Principales (CP), en negrita se distinguen los valores de correlación mayor o igual a 0,49 en valor absoluto. Variable CP1 CP2 CP3 LPCa -0,690 -0,405 LPCl 0,386 -0,486 0,891 -0,293 -0,032 0,105 -0,392 LPD2 LPOb LPNE -0,808 0,802 -0,431 -0,487 0,006 0,145 0,638 CP4 0,404 0,071 0,162 -0,296 -0,050 0,098 0,053 -0,028 0,100 -0,329 -0,394 0,296 -0,379 -0,572 AlPB5 -0,706 -0,157 -0,327 0,700 -0,378 -0,296 -0,033 0,714 0,169 -0,439 0,216 AlPB1 EPC MAD1 LD2 MAD2 AlD2 MID2 MPD2 MAAPc LBAPc MCD LHC -0,586 -0,657 0,817 0,247 0,258 0,021 -0,273 0,186 -0,356 -0,379 -0,267 -0,118 0,012 -0,286 0,605 0,107 -0,498 AnPC -0,725 0,824 LPOa -0,027 -0,229 0,405 -0,766 -0,823 -0,046 0,071 0,049 -0,168 -0,071 -0,550 0,037 -0,414 -0,265 -0,174 -0,143 -0,462 -0,371 0,049 0,031 0,112 -0,256 0,376 -0,127 0,682 0,635 0,304 -0,580 -0,234 -0,275 0,260 -0,132 -0,127 -0,081 0,629 -0,116 0,142 0,287 0,759 0,212 -0,497 AlCo -0,269 -0,399 AnCa AnCo -0,405 0,525 0,796 0,099 0,035 AnB -0,301 CP5 -0,116 -0,258 -0,066 -0,006 -0,112 0,184 -0,038 -0,103 0,196 -0,088 0,203 53 Tabla 12. Resultados del Análisis de Componentes Principales de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “segunda aleta dorsal” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Se indican los autovalores, el porcentaje de varianza total y el porcentaje de varianza acumulada de las tres primeras Componentes Principales (CP). CP1 CP2 61,59 18 Autovalor 6,159 Varianza acumulada (%) 61,59 Varianza total (%) CP3 1,8 1,118 79,6 90,77 11,18 Tabla 13. Resultados del Análisis de Componentes Principales de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “segunda aleta dorsal” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Se indica la correlación entre las variables morfométricas y las tres primeras Componentes Principales (CP), en negrita se distinguen los valores de correlación mayor o igual a 0,49 en valor absoluto. Variable CP1 CP2 CP3 LD2 -0,886 -0,441 -0,052 LBD2 -0,681 -0,607 0,307 -0,817 -0,050 -0,635 0,755 MAD2 AlD2 MID2 MPD2 AlDD2 AnHD2 MPSD2 MPID2 -0,858 -0,759 -0,912 -0,296 0,565 0,300 0,170 -0,501 0,052 -0,276 -0,705 -0,268 0,309 -0,746 -0,016 -0,593 -0,802 0,429 0,095 0,344 54 Tabla 14. Resultados del Análisis de Componentes Principales de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “espinas” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Se indican los autovalores, el porcentaje de varianza total y el porcentaje de varianza acumulada de las dos primeras Componentes Principales (CP). CP1 CP2 Autovalor 3,987 0,892 Varianza acumulada (%) 66,46 81,32 Varianza total (%) 66,46 14,86 Tabla 15. Resultados del Análisis de Componentes Principales de las variables morfométricas utilizadas en el protocolo “espinas” de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Se indica la correlación entre las variables morfométricas y las dos primeras Componentes Principales (CP), en negrita se distinguen los valores de correlación mayor o igual a 0,49 en valor absoluto. Variable CP1 CP2 LED1 -0,910 -0,287 D1SFL 0,596 -0,742 -0,717 -0,067 AnED1 -0,929 LED2 -0,912 D2SFL 0,773 AnED2 -0,188 -0,275 -0,378 55 Tabla 16. Resultados del Análisis Discriminante de Squalus mitsukurii y S. cubensis, obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Se indican los coeficientes de estructura ó de correlación entre las variables morfométricas utilizadas y la Función Discriminante (FD1) (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). En negrita se distinguen los valores de correlación más altos, relacionados con las variables: longitud pre oral (LPOa) y longitud pre narina externa (LPNE). Variable FD1 LPCl 0,050 EPC -0,001 LPNE 0,502 AnPC -0,456 LD2 0,057 MCD LPOa 0,134 0,505 Tabla 17. Rangos de las medidas morfométricas expresadas como proporción de la longitud total, de los ejemplares analizados de Squalus mitsukurii y S. cubensis obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). S. mitsukurii S. cubensis LPNE 4,42 - 5,15 3,85 - 4,19 LPOa 9,29 - 11,39 8,52 - 9,26 MCD 19,73 - 22,72 19,75 - 21,16 LD2 11,31 - 14,54 10,30 - 12,72 AnPC 2,23 - 3,02 2,41 - 3,27 EPC 25,82 - 29,37 27,06 - 31,59 LPCl 47,16 - 51,05 46,32 - 50,09 56 Tabla 18. Resultados del Análisis de Varianza realizado para comparar las medidas morfométricas expresadas como proporción de la longitud total, entre los ejemplares analizados de Squalus mitsukurii y S. cubensis obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Se incluye el estadístico F de Fischer (F), el valor p y los grados de libertad (g.l.). F Valor p g.l. LPNE 140,2 < 0,0001 34 LPOa 140,9 < 0,0001 34 MCD 12,2 0,0014 34 LD2 31,4 < 0,0001 34 AnPC 35,5 < 0,0001 34 EPC 20,6 < 0,0001 34 LPCl 9,5 0,0041 34 57 Figura 1. Mapa del área de estudio. Se observa la posición de los lances de pesca (círculos naranja) realizados en campañas de investigación donde se capturaron ejemplares de Squalus. Se muestran las isobatas de 50 y 200 m. En el recuadro se presenta un esquema de las Provincias Biogeográficas del Atlántico Sudoccidental de acuerdo a Balech & Erhlich (2008). 58 Figura 2. Distribución espacial de los lances de pesca de las campañas analizadas, realizadas por el INIDEP en los años 2012 (EH0412 y EH0612) y 2013 (EH0313). En los mapas de la derecha se indican los lances de pesca con registros de captura de S. mitsukurii que fueron reclasificados como S. cubensis. 59 A) B) C) Figura 3. Ejemplares de Squalus provenientes de campañas de investigación realizadas por el INIDEP. A) Squalus acanthias, macho adulto en estadio 3 y 598 mm de longitud total. B) Squalus mitsukurii, macho juvenil en estadio 1 y 480 mm de longitud total. C) Squalus cubensis, macho adulto en estadio 3 y 462 mm de longitud total. 60 A) B) Figura 4. Análisis morfométrico de las tres especies de Squalus, obtenidas de la campaña de investigación realizada en el año 2013, con las variables morfométricas seleccionadas por el Análisis de Varianza (41 ejemplares, 24 variables morfométricas, ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). A) Biplot: Componente Principal 1 (CP1) vs. Componente Principal 2 (CP2). Los vectores rojos corresponden a las variables morfométricas. B) Representación gráfica de la Función Discriminante 1 (FD1) vs. la Función Discriminante 2 (FD2) obtenidas en el Análisis Discriminante. A, ● Squalus acanthias; M, ● Squalus mitsukurii; C, ● Squalus cubensis. 61 A) Figura 5. Análisis de Componentes Principales de las variables morfométricas utilizadas en el protocolo “cabeza-tronco-aletas” de Squalus mitsukurii (M) y S. cubensis (C), obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). A) Biplot: Componente Principal 1 (CP1) vs. Componente Principal 2 (CP2). B) Biplot: Componente Principal 1 (CP1) vs. Componente Principal 3 (CP3). Los vectores rojos corresponden a las variables morfométricas. 62 B) Figura 5 (continuación). 63 A) AlCo LPD2 LPCa B) EPC MAD1 MAD2 LBAPc LPCl MAAPc MCD AlD2 MPD2 LD2 MID2 LHC Figura 6. Medidas morfométricas que resultaron mayores para cada especie, de acuerdo al Análisis de Componentes Principales aplicado al protocolo “cabeza-tronco-aletas” (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). A), C) y E) Squalus cubensis. B), D) y F) Squalus mitsukurii. 64 C) AnCa AnCo AnPC D) Figura 6 (continuación). 65 E) AnBo F) LPB1 LPB5 LPOb LPNE LPOa Figura 6 (continuación). 66 Figura 7. Análisis de Componentes Principales (CP) de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “segunda aleta dorsal” de Squalus mitsukurii (M) y S. cubensis (C), obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Los vectores rojos corresponden a las variables morfométricas. 67 A) B) MAD2 AlD2 AlDD2 MPSD2 MPD2 AnHD2 MPID2 LBD2 MID2 LD2 Figura 8. Medidas morfométricas que resultaron mayores para cada especie, de acuerdo al Análisis de Componentes Principales aplicado al protocolo “segunda aleta dorsal” (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Segunda aleta dorsal de A) Squalus cubensis, B) Squalus mitsukurii. 68 Figura 9. Análisis de Componentes Principales (CP) de la variables morfométricas utilizadas en el protocolo “espinas” de Squalus mitsukurii (M) y S. cubensis (C), obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Los vectores rojos corresponden a las variables morfométricas. 69 LED1 A) B) AnED1 D1SFL LED2 AnED2 D) C) D2SFL Figura 10. Medidas morfométricas que resultaron mayores para cada especie, de acuerdo al Análisis de Componentes Principales aplicado al protocolo “espinas” (ver Tabla 9 para la descripción de las abreviaturas). Primera aleta dorsal de A) Squalus cubensis, B) Squalus mitsukurii. Segunda aleta dorsal de C) Squalus cubensis, D) Squalus mitsukurii. 70 Figura 11. Representación gráfica de la Función Discriminante (FD1) obtenida en el Análisis Discriminante, de Squalus mitsukurii (●) y S. cubensis (●) obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. Medidas morfométricas utilizadas: longitud pre narina externa, longitud pre oral, longitud pre cloaca, espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal, ancho del pedúnculo caudal, longitud de la segunda aleta dorsal y margen anterior dorsal de la aleta caudal. 71 A) B) Longitud total (mm) Figura 12. Relación entre la longitud total y A) la longitud pre oral y B) la longitud pre narina externa, en ejemplares de Squalus mitsukurii (○) y S. cubensis (●) obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. 72 Longitud pre oral Longitud pre narina externa Longitud pre cloaca Margen anterior dorsal de la aleta caudal Longitud de la segunda aleta dorsal Ancho del pedúnculo caudal Espacio entre la aleta pélvica y la aleta caudal Figura 13. Representación de las medidas morfométricas, utilizadas en el Análisis Discriminante, expresadas como proporción de la longitud total. Se utilizaron ejemplares de Squalus mitsukurii (M) y S. cubensis (C) obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. 73 Figura 14. Relación entre la distancia desde la punta del hocico hasta la narina escurrente y desde esta hasta el surco labial superior (LPNE/ENL) observada en ejemplares de Squalus mitsukurii (M) y S. cubensis (C) obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013. 74 A) B) C) D) Figura 15. Fotografías de las aletas caudales de A) Squalus mitsukurii, B) Squalus cubensis; y de las aletas pectorales de C) Squalus mitsukurii, D) Squalus cubensis. 75 A) B) Figura 16. Función discriminante (FD1) obtenida en el Análisis Discriminante de A) hembras adultas de Squalus mitsukurii (●) y S. cubensis (●) obtenidas de la campaña de investigación realizada en el año 2013 y B) incorporando las hembras adultas obtenidas de las campañas de investigación realizadas en el año 2012 que fueron identificadas erróneamente como S. mitsukurii. Variables utilizadas: longitud total, peso total y ancho de las glándulas oviductales. 76 A) B) Figura 17. Función discriminante (FD1) obtenida en el Análisis Discriminante de A) machos adultos de Squalus mitsukurii (●) y S. cubensis (●) obtenidos de la campaña de investigación realizada en el año 2013 y B) incorporando los machos adultos obtenidos de las campañas de investigación realizadas en el año 2012 que fueron identificados erróneamente como S. mitsukurii. Variables utilizadas: longitud total, peso total y longitud de los claspers. 77 Figura 18. Distribución de frecuencia de tallas de hembras (barras blancas, N=550) y machos (barras negras, N=284) de los ejemplares de Squalus acanthias analizados. Figura 19. Distribución de frecuencia de tallas de hembras (barras blancas, N=158) y machos (barras negras, N=312) de los ejemplares de Squalus mitsukurii analizados. 78 Figura 20. Distribución de frecuencia de tallas de hembras (barras blancas, N=34) y machos (barras negras, N=202) de los ejemplares de Squalus cubensis analizados. 79 Figura 21. Relación entre la longitud total y el peso total de hembras (círculos blancos y línea negra) y machos (círculos negros y línea roja) de los ejemplares de Squalus acanthias analizados. Se incluye la ecuación potencial (PT) y el ajuste (R2), para hembras y machos. 80 Figura 22. Relación entre la longitud total y el peso total de hembras (círculos blancos y línea negra) y machos (círculos negros y línea roja) de los ejemplares de Squalus mitsukurii analizados. Se incluye la ecuación potencial (PT) y el ajuste (R2), para hembras y machos. 81 A) B) C) Longitud Total (mm) Figura 23. Relación entre la longitud total y A) el ancho de las glándulas oviductales, B) el ancho de los úteros y C) el índice gonadosomático (peso de ovarios / peso total x 100), en hembras analizadas de Squalus 82 acanthias. ○ juveniles, estadio 1; ● juveniles, estadio 2; ● adultas, estadio 3; Δ adultas estadio 4; X adultas estadio 5. A) B) Longitud Total (mm) Figura 24. Relación entre la longitud total y A) la longitud interna de los claspers y B) el índice gonadosomático (peso de testículos / peso total x 100) 100),, en machos analizados de Squalus acanthias. Δ juveniles, estadio 1; ● juveniles, estadio 2; ○ adultos, estadio 3. 83 A) B) Longitud Total (mm) Figura 25. Relación entre la longitud total y A) la longitud interna de los claspers y B) el índice gonadosomático (peso de testículos / peso total x 100) 100),, en machos analizados de Squalus mitsukurii. Δ juveniles, estadio 1; ● juveniles, estadio 2; ○ adultos, estadio 3. 84 A) B) Longitud Total (mm) Figura 26. Relación entre la longitud total y A) la longitud interna de los claspers y B) el índice gonadosomático (peso de testículos / peso total x 100) 100),, en machos analizados de Squalus cubensis. ○ adultos, estadio 3. 85 Figura 27. Distribución de frecuencia de tallas de los folículos ováricos observados macroscópicamente en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus acanthias. Figura 28. Relación entre la longitud total y el número de folículos ováricos (FO) mayores o iguales a 10 mm, en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus acanthias. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 86 Figura 29. Relación entre la longitud total y el número de embriones encontrados en hembras analizadas de Squalus acanthias. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 87 Figura 30. Distribución de frecuencia de tallas de los folículos ováricos observados macroscópicamente en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus mitsukurii. Figura 31. Relación entre la longitud total y el número de folículos ováricos (FO) mayores o iguales a 10 mm, en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus mitsukurii. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 88 Figura 32. Relación entre la longitud total y el número de embriones encontrados en hembras analizadas de Squalus mitsukurii. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 89 Figura 33. Distribución de frecuencia de tallas de los folículos ováricos observados macroscópicamente en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus cubensis. Figura 34. Relación entre la longitud total y el número de folículos ováricos (FO) mayores o iguales a 10 mm, en hembras adultas (no recientemente ovuladas) analizadas de Squalus cubensis. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 90 Figura 35. Relación entre la longitud total y el número de embriones encontrados en hembras analizadas de Squalus cubensis. Se incluye la ecuación lineal (y) con su correspondiente ajuste (R2). 91 AGRADECIMIENTOS Agradezco a mis Jurados Marcelo Acha, Claudio Burati y Marcelo Pérez, por su comentarios para mejorar el manuscrito y especialmente porque lo corrigieron en tiempo récord. A mis Directores Jorge Colonello y Daniel Figueroa, por sus correcciones y sus consejos. A Ana Massa por confiar en mí y permitirme realizar mi Tesis en el Laboratorio de Condrictios. A mis compañeros del Laboratorio por ayudarme y por la buena onda. Al INIDEP por dejarme disponer de sus instalaciones con total libertad para realizar mi Tesis. A Leoncio Espoz Espoz y Carlos Lasta por abrirme las puertas del Instituto, el lugar en donde soñé que iba a trabajar… desde pequeña. A Raúl Reta, mi Profesor Asesor y mi “padre académico” como yo lo nombro y lo siento… gracias por todo Raúl! A Marcelo Kittlein, que me ayudó con el análisis estadístico como un Director más y sin ningún interés. A Nacho, mi amor. Gracias por ser mi compañero de la vida, por haber compartido estos diez años conmigo, por aguantarme, por enseñarme, por crecer junto a mí… SIEMPRE JUNTOS A LA PAR! A mis papás, supongo que parte de este amor a la Biología se lo debo a ellos. Gracias porque a su manera siempre me apoyaron. A mis hermanos, por ser los mejores hermanos! A la familia de Nacho, porque me adoptaron como parte de ella. Especialmente a Cosme, por tratarme como a una hija más. A mi amigo incondicional Javier Rojo, gracias por todo Javi! A Juan Farina, por dejarme conocerlo y por enseñarme a ser una persona humilde. A TODOS mis amigos de la facu… los del principio y los del final. Siempre digo que lo mejor de haber tardado en recibirme fue conocer tanta gente linda en el camino. A mis amigas de siempre, las que me quedan de la infancia y a las chicas de la guardia, gracias por tenerme siempre en cuenta a pesar de que les fallé el 75% de las veces… porque tenía que estudiar… En fin, gracias a todos los que me acompañaron en este largo camino… espero que me sigan acompañando! Diame =) 92