en RED ando 2010-2011 La red celular/1 - - - - - INTRODUCCIÓN A LA CÉLULA Damos un paso adelante en nuestro viaje desde el átomo al universo. Dejamos atrás el nivel atómico y molecular y nos detenemos en el nivel celular. Pese a la gran diversidad de seres vivos que existe en la biosfera, todos ellos se caracterizan por estar formados por unas pequeñas unidades llamadas células. La célula es la base de la vida, tanto a nivel estructural como a nivel funcional, ya que es la unidad mínima de un organismo capaz de actuar de manera autónoma. Las células son de pequeño tamaño, por lo que se precisarán instrumentos específicos para poder observarlas; de igual forma para poder medirlas se utilizarán unas unidades de medidas adaptadas a su tamaño: el micrómetro. Distinguiremos entre: Seres unicelulares: formados por una única célula Seres pluricelulares: formados por más de una célula Existe gran diversidad en cuanto a la forma y el tamaño de las células, pero todas tienen en común: Membrana plasmática, es una estructura fina y elástica que envuelve a la célula, la delimita, la aísla del exterior pero permite el intercambio de sustancias entre el medio interno y externo. Citoplasma, es el espacio interior delimitado por la membrana plasmática en el que se encuentran los orgánulos celulares. ADN, todas las células poseen una molécula llamada ADN (ácido desoxirribonucleico). Esta molécula contiene toda la información genética del organismo y regula todos los procesos que tienen lugar en el interior de la célula. Cuando el ADN está libre en el citoplasma hablamos de células procariotas Cuando el ADN está incluido dentro de otra membrana o envoltura llamada núcleo, hablamos de células eucariotas. Existen dos tipos de células eucariotas, que se diferencian en: Célula vegetal: se caracterizan por tener una pared celular rígida de celulosa que rodea la membrana plasmática y le confiere resistencia a la célula; poseen unas estructuras pigmentadas llamadas cloroplastos donde se encuentran las clorofilas y poseen unas vacuolas de gran tamaño donde almacenan sustancias de reserva. Célula animal: carecen de pared celular, por lo que no tienen una forma definida; también carecen de cloroplastos. Pueden tener vacuolas pero de tamaño mucho menor que las de las células vegetales. Sin embargo tienen centriolos, una estructura implicada en la división celular de la que carecen las células vegetales. En las dos muestras que se prepararán en esta sesión podremos apreciar algunas de estas diferencias: Epidermis de cebolla Célula epitelial de mucosa bucal Citoplasma Pared Núcleo en RED ando 2010-2011 La red celular/2 PREPARACIÓN DE MUESTRAS Preparación de muestra de tejido epidérmico de cebolla - Cortar la cebolla y separar una de las capas de la cebolla. De la parte interior cóncava, con la ayuda de las pinzas desprender la membrana transparente que está adherida. Con la ayuda de un palillo, se extiende sobre un portaobjetos en el que previamente se han puesto algunas gotas de agua. Es importante que la muestra no se seque en ningún momento. - Escurrir el agua y añadir unas gotas de azul de metileno sobre la muestra. Esto se puede hacer sobre el fregadero o encima de varias capas de papel absorbente de forma que el reactivo sobrante no manche la mesa. - Dejar actuar la tinción durante 5 minutos. - Transcurrido ese tiempo, sobre el fregadero y con el frasco lavador, se deja caer un hilito de agua para ir eliminando el reactivo sobrante, hasta que deje de salir colorante. - Añadir una gota de agua y colocar encima el cubreobjetos Preparación de muestra de células epiteliales de mucosa bucal humana - Con un palillo se raspa suavemente el interior del carrillo y se extiende sobre un portaobjetos lo que se ha recogido con el palillo. - De igual forma que antes, bien sobre el fregadero o encima de varias capas de papel absorbente, añadir una gota de azul de metileno. Dejar actuar al colorante durante 5 minutos. - Sobre el fregadero, lavar la muestra con un hilo de agua hasta que se vea clara. Añadir una gota de agua, y colocar el cubreobjetos. EL MICROSCOPIO El microscopio es un instrumento de trabajo imprescindible en el en el estudio de la célula. Con él se pueden distinguir estructuras y detalles de menos de 0,1 mm. El microscopio se compone de dos partes: en RED ando 2010-2011 La red celular/3 - Parte óptica: está formada por un conjunto de lentes que permiten aumentar la imagen e iluminar la muestra adecuadamente. La forman: El ocular que es la lente que aumenta la imagen que procede el objetivo. Normalmente tiene 10 aumentos (10X). El objetivo que es la lente que forma una imagen aumentada de la muestra y la proyecta sobre el ocular. Un microscopio puede llevar varios objetivos, generalmente de 4, 10 ó 40 aumentos (4X, 10X ó 40X). El condensador es un conjunto de lentes que concentran la luz sobre la muestra. Lleva un dispositivo llamado diafragma que se abre más o menor para regular la cantidad de luz que recibe la muestra. La fuente de luz consiste en una bombilla o un espejo que orientan la luz hacia el interior del microscopio. - Parte mecánica: está compuesta por los elementos que sujetan la parte óptica y permiten enfocar y analizar la imagen. La platina es la pieza donde se coloca la muestra, Presenta un orificio que permite el paso de la luz y puede desplazarse para observar diferentes partes de la muestra. El revólver es una pieza giratoria que sostiene los diferentes objetivos y los hace intercambiables. El tornillo macrométrico es un dispositivo que sube o baja la platina para lograr enfocar la imagen. El tornillo micrométrico permite acabar de afinar el enfoque de la imagen que se ha realizado en con tornillo macrométrico. El pie es el soporte sobre el que descansa el microscopio. Normalmente lleva incorporada la fuente de luz. OBSERVACIÓN DE MUESTRAS Número de aumentos La imagen que se observa por el microscopio aparece aumentada por la acción de las lentes del objetivo y del ocular. Para saber el aumento con el que se está realizando una observación, debemos multiplicar los aumentos del ocular por los del objetivo que se está utilizando. Por lo tanto: Nº aumentos totales = Nº aumentos ocular x Nº aumentos objetivo - Si se utiliza el objetivo 4X, la imagen se verá 40 veces mayor que la imagen real ya que Nº aumentos totales = 10X x 4X = 40X - Si se utiliza el objetivo 10X, la imagen se verá 100 veces mayor que la imagen real ya que Nº aumentos totales = 10X x 10X = 100X - Si se utiliza el objetivo 40X, la imagen se verá 400 veces mayor que la imagen real ya que Nº aumentos totales = 10X x 40X = 400X El uso del microscopio - Para observar una muestra al microscopio, se baja la platina completamente, se coloca la muestra sobre la platina encima del foco de luz y seleccionamos el objetivo de menor aumento. - Para enfocar la muestra, primero se gira el tornillo macrométrico hasta que la preparación esté cerca del objetivo. Esto se hace mirando directamente a la platina y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de romper la lente del objetivo o la preparación. - Ya mirando por el ocular se mueve despacio el macrométrico alejando la platina del objetivo hasta que la imagen se observe nítida. Seguidamente se gira el micrométrico para obtener un enfoque más fino. en RED ando 2010-2011 La red celular/4 - Abriendo y cerrando el diafragma se observa cómo varía el contraste de la imagen. - Para observar la muestra con más detalle, se gira el revólver para seleccionar un objetivo de mayor aumento y se vuelve a ajustar el enfoque con el tornillo micrométrico. Muestra de tejido epidérmico de cebolla El tinte se fija sobre todo a la pared celular y a los núcleos que son fácilmente identificables. Son células de tamaño relativamente grande, que aparecen muy juntas las unas de las otras. Se ve claramente la forma de las células, bien definidas debido a la existencia de una pared celular rígida alrededor de cada célula. Muestra de células epiteliales de mucosa bucal humana El tinte se fija en los núcleos celulares que aparecen como puntos más oscuros en la preparación. Son células de tamaño mucho menor que las vegetales, que aparecen diseminadas por la preparación y no tienen forma definida. SUBMÚLTIPLOS DE LAS UNIDADES DE LONGITUD A la hora de medir estructuras de tamaño microscópico, incluso el milímetro es una unidad de medida que se queda grande, por lo que hay que recurrir a otros submúltiplos más adecuados. Algunos de ellos son: Milímetro 1 mm = 0,001 m = 10-3 m Micrómetro 1 m = 0,000001 m = 10-6 m Nanómetro 1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m Picómetro 1 pm = 0,000000000001 m = 10-12 m En el trabajo de microscopía las unidades más habituales son: - el micrómetro (m) milésima parte de un milímetro 1 mm = 1000 m 1 m = 0,001 mm - el nanómetro (nm) millonésima parte de un milímetro 1 mm = 1000000 nm 1 nm = 0,000001 mm De forma que utilizando estos submúltiplos evitamos tener que manejar números con muchas cifras. Por ejemplo: Una célula epitelial humana mide 40 m: Esto equivale a 0,04 mm y a 40000 nm La bacteria Escherichia coli mide 1 m: Esto equivale a 0,001 mm y a 1000 nm El virus VIH mide 0,1 m: Esto equivale a 0,0001 mm y a 100 nm NOTACIÓN CIENTÍFICA Otra forma de representar de forma abreviada números muy pequeños es con la notación científica; se trata de una cifra decimal, formada por una parte entera de un solo dígito distinto de 0 y una parte decimal multiplicada por una potencia de 10. Por ejemplo: 5,2 · 10-4 mm 0,00052 mm 0,000000043 mm 4,3 · 10-8 mm