Características comunes de todas las células II •Todas tienen una membrana celular que separa el caos fuera de la célula con el alto grado de organización interno celular. Una célula sin membrana no es una célula. Núcleo y división celular. •Toda vida celular contiene DNA como material genético. Todas las células contienen variedades de moléculas de RNA y Proteínas (la mayoría enzimas). Objetivo: Reconocer la ubicación del material genético dentro de la célula y entender el proceso de división celular. •Todas las células están compuestas de los mismos químicos básicos: carbohidratos, proteínas, ácidos nucleicos, grasas y vitaminas. •Todas las células regulan el flujo de nutrientes y desechos que entran y salen. •Todas las células se reproducen y son el resultado de la reproducción. a. Núcleo y Envoltura nuclear. •Todas las células requieren una fuente de energía. •Todas las células están altamente reguladas mediante sistemas elaborados de detección que les permite estar alertas de cualquier reacción que ocurre a su interior y de las condiciones del ambiente que las rodea. Esta información es continuamente procesada para tomar decisiones metabólicas. Células PROCARIOTAS, células primitivas Son menos complejas Anabaena azolla Cianobacteria, 2.8 billones de años Bacterias Células EUCARIOTAS son mas complejas estructural y bioquímicamente Formas libres Representan un estadio mas avanzado de la evolución al fusionar en una sola célula diversas células procariotas interdependientes Tienen un nivel de organización mas elevado ya que contienen organelos o estructuras separadas por membranas de otros componentes citoplasmáticos Rickettsia infectando una célula hemolinfatica Células eucariotas Formas intracelulares 1 Virus: - No célula! - Infectan toda clase de organismos vivos. - Contienen sus propios elementos genéticos (DNA o RNA) - Utiliza sistema de traducción del hospedero para sintetizar sus proteínas. Tejido de la cebolla T4 Infecta E. coli Prion "proteinaceous infectious particle" La idea central de la evolución biológica es que todos los seres vivientes sobre la Tierra comparten un ancestro común Son variantes patogénicos de proteínas producidas en el sistema nervioso. Los seres humanos no evolucionaron de los chimpancés. Humanos y chimpancés son primos evolutivos y comparten un ancestro común reciente que no fue ni chimpancé ni humano. Es una proteína anormal sintetizada en exceso (PrPSc) Y produce un cambio conformacional en proteínas similares (PrPc) (Science 3 March 2006.311(5765):1283 – 1287) Dos tipos de células: Núcleo (membrana nuclear) Nucleoide (sin membrana) Organelos abundantes y con membrana Organelos escasos y sin membrana DNA linear, sin DNA extracromosomal DNA circular, con DNA extracromosomal Ribosomas grandes (80 S) Ribosomas pequeños (70 S) 2 Principales organelos (célula Eucariota) MITOCONDRIAS, En la célula animal son estructuras productoras de ATP = Energía. Funciones: – Respiración – Biosíntesis de esteroides y algunos ac. Grasos – Síntesis de ATP Contienen DNA y maquinaria para la síntesis de proteínas similar a la de procariotas (Ribosomas 70S). Tienen doble membrana como gram División por fisión binaria. El humano las hereda completamente de la madre de modo que mutaciones en el DNA mitocondrial dan indicios únicamente del linaje materno. Genoma pequeño sin intrones. Diversas copias del genoma por mitocondria. No tiene histonas asociadas. Una célula con muchas mitocondrias. CLOROPLASTOS, En la célula vegetal convierte la luz solar en energía y permite la fotosíntesis fijando dióxido de carbono en forma de azúcar. APARATO DE GOLGI, secreta substancias (glycosilación de proteínas, selección, destinación, glycosilación de lípidos, almacenamiento y distribución de lisosomas y síntesis de polisacáridos de la matriz extracelular). Aparato de golgi, Regula el trafico vehicular División por fisión binaria. mediante vesículas, modificaciones posttraduccionales (O-Glycosilacion, Sulfatación y Fosforilación). REG Tienen su propio DNA, circular, enrollado, sin histonas y con múltiples copias (similar al de cianobacterias). Golgi Poseen sus propios RNA´s (t y r) Genomas y pliegues membranales similar al de eubacterias. REL RE Retículo endoplasmatico, no es organelo REG (3), sitio de la traducción y transporte de proteínas. REL (4), síntesis de lípidos, metabolismo de glucidos (N-Glycosilacion) o almacén de calcio. 1 Núcleo (envoltura nuclear). 2 Poro nuclear. 5 Ribosoma sobre el REG. 6 Proteínas transportadas. 7 Vesícula golgiana. 8 Aparato de Golgi. 9 Cara cis del aparato de Golgi. 10 Cara trans del aparato de Golgi. 11 Sacos membranales de un dictiosoma. 12 Vesícula secretora 13 Membrana celular Polyribosomas y Retículo Endoplasmatico 3 La aparición de la envoltura nuclear permitió que los eucariontes aislaran los procesos genéticos principales, como la autoduplicación del ADN o la síntesis de ARN. Además esto posibilitó que el ARNm se modifique dentro del núcleo antes de ser traducido en los ribosomas. Estas modificaciones no ocurren en los procariontes, ya que a medida que la ARN polimerasa sintetiza el ARN, simultáneamente el extremo 5’ se une al ribosoma y comienza la traducción. • Proteína es una cadena de aminoácidos (aa). • Hay 20 aa, cada uno con diferente comportamiento químico. • Esta cadena no permanece linear sino que se pliega según las propiedades de cada aa. • La conformación de una proteína determina su función. • La secuencia de los diferentes aa produce proteínas con diferentes conformaciones y funciones. • Los genes determinan la secuencia de aa en una proteína. • Cambios en el gen (mutaciones) pueden cambiar la secuencia de aa de la proteína y alterar su conformación y su función. Ribosomas y proteínas Rutas de secreción proteica NUCLEO Es el organelo más grande de la célula eucariota. Contiene los cromosomas, DNA y enzimas necesarias para sintetizarlo y transcribirlo. Dirige el desarrollo y funcionamiento de la célula controlando las reacciones químicas del citoplasma y almacena la información necesaria para la división celular. Los eritrocitos (glóbulos rojos) maduros de casi todos los mamíferos carecen de núcleo. Existen algunas células eucariotas con 2 o mas núcleos (hongos y ciliados). 4 NUCLEO… Rodeado por una envoltura nuclear (6) de doble membrana que se fusiona a intervalos regulares y forma los poros nucleares (3) que permiten intercambios nucelo-citoplasmaticos como la salida de mRNA. Separa las reacciones químicas de aquellas del citoplasma. La membrana externa es continua con el Retículo Endoplasmatico Granuloso (REG, 7) y presenta ribosomas sobre su lado citoplasmático (2). El espacio perinuclear entre las dos membranas (1) es continuo al REG. La membrana interna esta cubierta por una red de proteínas (lamina o nucleoesqueleto) que participan en la organización de los movimientos de la cromatina durante las diferentes fases del ciclo celular. NUCLEO… En su interior se encuentran uno o varios nucleolos (4) cubiertos por una matriz fibrosa llamada nuceloplasma (liquido de consistencia gelatinosa donde se disuelven sustancias como nucleótidos trifosfatos, enzimas, proteínas y factores de trascripción) y sitentiza el rRNA. El ADN (5) se encuentra en forma de cromatina (complejo ADN-proteínas o cromosomas). Eucromatina es la forma menos compacta, genes que son frecuentemente exprimidos. Heterocromatina facultativa es la forma compacta, genes que no son exprimidos. Heterocromatina constitutiva es la forma que fabrica los telomeros, centromeros de los cromosomas. Es la sede de la replicación (duplicación del ADN) y la transcripción (síntesis de ARN), mientras que la traducción ocurre en el citoplasma. En las células procariotas todos esos procesos coinciden en el mismo compartimento celular. Plasmidos: DNA extracomosomal de pequeño tamaño en forma circular Nucleoide (n) Cromosoma bacteriano altamente condensado y ordenado ("supercoiled" o superenrrollado), y que se encuentra anclado parcialmente a la membrana bacteriana empaquetado con ciertas proteínas, poliaminas y iones de magnesio (Cromosoma de E. coli extendido por shock osmótico) ADN girasa provoca enrollamientos negativos. Topoisomerasa I es capaz de desenrollarlo y relajarlo para permitir la replicación. (Neisseria gonorrhoeae ) Núcleo Almacena de forma organizada los genes en los cromosomas. Trasporta factores de regulación y productos génicos a través de los poros nucleares. Produce los mensajes que se traducirán en proteínas Produce los ribosomas en la región nucleolar o nucleolo Organiza el desenrollamiento del DNA durante la replicación y la transcripción 5 DNA Empaquetamiento de la cromatina de 1400 nm Nucleosoide Solenoide Bucles o asas superenrolladas o Bucle de 700 nm Cuentas de collar o Solenoide: Nucleosoma y las histonas H1 * Dominio funcional o unidad de replicación. Nucleosoma (10nm): DNA y complejo de histonas (H2A, H2B, H3 y H4) con dos copias c/u. (4nm) Cromosoma totalmente condensado (metafase) Macroestructura del DNA *Cada bucle de cromatina representa un dominio funcional o unidad de replicación. Estos dominios contienen alrededor de 100,000 pares de bases, extensión de ADN suficiente para acomodar varios genes de tamaño promedio. Algunos genes, sin embargo, pueden abarcar varios dominios adyacentes de un cromosoma. Cada cromosoma puede tener cien o más dominios. SAR o MAR (scaffold associated regions/ matrix attachment regions) son zonas altamente conservadas. SAR son regiones de varios cientos de pares de bases ricas en residuos de adenina y timina, abundantes en la heterocromatina. Las perlas son los nucleosomas (Empaquetamiento de la fibra de 30 nm) Lamina nuclear Provee soporte interno espacio o cisterna perinuclear (REG) (MET Hepatocito. A, Eucromatina; b, RER; c, Mitoncndria). Heterocromatina: Condensada y transcripcionalmente inactiva (constitutiva y facultativa). Localización nuclear periférica. Representa ~10%. Membrana nuclear Eucromatina: No condensada y trascripcionalmente activa o en replicación. Localización nuclear central. 6 Complejos de poro nuclear (CPN) En el núcleo, los genes transcripcionalmente activos tienden a estar separados de los inactivos. Los activos se encuentran ubicados centralmente, mientras que los silentes están confinados próximos a la envoltura nuclear. La fosforilación de las laminas provoca el desensamble de la lámina nuclear causando la ruptura de la envoltura al inicio de la división celular. El número de CPN es variable, incrementándose a medida que aumenta la actividad celular. En una célula de mamífero hay entre 3000 a 4000 complejos de poro. CPN constituido por un gran número de proteínas de disposición octamérica. Está formado por: · Ocho columnas proteicas, que forman las paredes laterales del poro. · Un anillo externo, formado por ocho unidades proteicas. · Un anillo interno, también con estructura octamérica. · Proteínas de anclaje que fijan cada columna al espacio perinuclear. · Proteínas radiales que se proyectan desde las columnas hacia la luz del poro, a manera de diafragma · Proteínas fibrilares fijas al anillo interno y externo. En la cara nuclear convergen para formar una canastilla o cesta. A lo largo de estas fibrillas se ubican nucleoporinas que intervienen en el transporte de sustancias a través del poro. 15 – 20 nm · Un poro central o abertura. Poro nuclear Complejos de poro nuclear (CPN) (Nup) La luz de los CPN suele presentarse obturada por las proteínas que circulan a través del poro, como por las carioportinas (Kap) que actúan como eficientes transportadores en el tráfico núcleo/citoplasma. Los CPN presentan uno o varios canales acuosos a través de los cuales las pequeñas moléculas solubles en agua difunden (transporte no regulado). Las moléculas de mayor peso molecular son transportadas en forma activa, por lo que requieren energía y moléculas transportadoras. Se importan dentro del núcleo: • Las proteínas sintetizadas en el citoplasma necesarias para ensamblar los ribosomas. • Los factores de transcripción requeridos en la activación o inactivación de los genes. • Los factores de empalme necesarios en el proceso de maduración de los ribosomas. L Para poder ingresar en el nucleo, las proteínas sintetizadas en el citoplasma deben contener la señal de localización nuclear (nuclear signal localization, NSL). Las moléculas y macromoléculas ensambladas y exportadas desde el núcleo al citoplasma incluyen: • Las subunidades ribosomales • ARNm. Ellos salen a través del complejo de poro con una proteína especial que posee una señal nuclear de exportación (nuclear export signal, NES). Las moléculas de mayor tamaño requieren de una proteína “transbordadora” o carioportina. La superfamilia de carioportinas esta integrada por: -importinas (proteínas) -exportinas (proteínas) -transportinas (ARN maduros) (Nup) Las importinas son heterodímeros, formados por dos subunidades (α y ß) El poro se dilata y la proteína es traslocada activamente ARN de transferencia • Factores de transcripción que son devueltos al citoplasma para ser reutilizados. 7 Exportación de ARN Los ARN maduros se asocian a proteínas llamadas transportinas, las cuales actúan como transbordadores permitiendo el pasaje de ARN al citoplasma. Actividad en el poro nuclear (CRBP) El ARNm es llevado fuera del núcleo. Los ARNm maduros que presentan la poli A se asocian con varias proteínas, formando una partícula de ribonucleoproteína (RNP). Estas partículas se mueven linealmente a través de la canasta nuclear. Al igual que las importinas, las RNP son recicladas hacia el núcleo. En el citoplasma, las CRBP (cytoplasmic RNA-binding proteins) reemplazan a las RNP para guiar a los ARNs a sus destinos citosólicos correctos. FIN Discutir artículo: “Stumbling Upon Active Transport” (The Na+/K+ ATPase discovery) Jens Skou 1950s 8