XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico DETERMINACION DE COMPONENTES COLINERGICOS EN LINFOCITOS DE TILAPIA NILOTICA (Oreochromis nilóticus) EXPUESTA A PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS. Ma. Ángeles López Jara, Ing. Bioquímica Instituto Tecnológico de Tepic, lopez_jara@hotmail.com. Asesor Dr. Manuel Iván Girón Pérez. Laboratorio de inmunotoxicología, Universidad Autónoma de Nayarit, ivan_giron@hotmail.com. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Los plaguicidas organofosforados (POF) son ampliamente utilizados como insecticidas y son relativamente solubles en agua, su mecanismo de acción es a través de la inhibición de la enzima acetilcolinesterasa (AChE). Se ha reportado que las células del sistema inmune tales como linfocitos, tienen componentes colinérgicos como acetilcolina (ACh), receptores muscarínicos y nicotínicos, colina-acetiltransferasa y AChE. El mecanismo de toxicidad de los POF conlleva la inhibición de la AChE, interaccionando con el grupo OH de la serina del centro activo de la enzima, provocando así la acumulación excesiva de ACh. Los POF contaminan ambientes acuáticos especialmente en zonas donde las corrientes de agua, como lluvia y riego, pueden llevar los POF a ecosistemas acuáticos; por lo tanto los organismos acuáticos como los peces, pueden verse afectados por estas sustancias. La tilapia nilótica (Oreochromis nilóticus) es un pez dulce acuícola ampliamente distribuido en el mundo, por lo que representa un modelo adecuado para estudiar los mecanismos de inmunotoxicidad de los POF en organismos vertebrados. Por lo que el objetivo del presente trabajo fue determinar la actividad AChE y concentración ACh, en linfocitos de bazo de tilapia nilótica expuesta de manera aguda a diazinón. METODOLOGIA Se expusieron in vivo, peces de 190 - 250g a concentraciones 0.97, 1.95 y 3.9 ppm de diazinón (POF) durante 12 horas. Transcurrido el tiempo de exposición, se extrajo el bazo y se disgregó mecánicamente en buffer salino de fosfato (PBS), posteriormente las células mononucleares se separararon a través de un gradiente de densidad con histopaque-1077, éstas se resuspendierón y homogenizaron mecánicamente en Buffer (Tris-HCl) y PBS, para medir proteínas mediante método Bradford, posteriormente se determinó la concentración de ACh con el kit comercial Amplex Red mediante fluorometría; la actividad de AChE se determinó mediante el Método Ellman. CONCLUSIONES GENERALES Los niveles de ACh en los linfocitos de peces expuestos a diazinón fueron superiores en comparación con los linfocitos de peces control, mientras que la actividad de AChE se mostró disminuida. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014