UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGIA INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO “ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE” Presentado previo a la obtención del Grado Académico en Odontología Autor: Oñate Negrete Henry Santiago Tutor de Tesis: Dr. García Merino Iván Ricardo D.M. DE QUITO 2014 i DEDICATORIA Este trabajo está dedicado a mi familia, por su infinita ayuda y su gran paciencia. A mis padres por su comprensión, apoyo, amor, consejos, ayuda en los momentos difíciles que se presentaron a lo largo de mi carrera y por ayudarme con los recursos necesarios para estudiar y poder llevar mi profesión como el más grande legado y herencia. ii AGRADECIMIENTO A la Universidad Central del Ecuador Al trabajo mancomunado de Maestros y amigos que pude conocer a lo largo de este proyecto por su tiempo y dedicación, pero sobre manera quiero expresar mi sentido agradecimiento a mis padres Cecilia y Carlos y a mi querida hermana Carlita quienes gracias a su apoyo incondicional y consejos me han permitido llegar a este momento tan especial e importante en mi vida; por los triunfos y momentos difíciles que me han enseñado a valorar cada día más mi vida. Finalmente y no por ello menos importantes agradezco a mis maestros, tanto dentro como fuera de nuestra prestigiosa Universidad, por la sabiduría que me han transmitido en el desarrollo de mi formación profesional. iii AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL Yo, Oñate Negrete Henry Santiago, en calidad de autor del trabajo de investigación o tesis realizada sobre "ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE”. Por la presente autorizo a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, hacer uso de todos los contenidos que me pertenecen o de parte de los que contienen esta obra, con fines estrictamente académicos o de investigación. Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5, 6, 8, 19 y además pertinentes de la Ley de Prioridad Intelectual y su Reglamento. Quito, 17 de diciembre de 2014. Oñate Negrete Henry Santiago C.I. 171646259-1 hson19877@gmail.com iv DECLARACIÓN Yo, Oñate Negrete Henry Santiago, declaro bajo juramento que el trabajo aquí escrito, es de mi autoría; que no ha sido previamente presentado para ningún grado o calificación profesional; y que he consultado las referencias bibliográficas que se incluyen en este documento. A través de la presente declaración, sedo mis derechos de propiedad intelectual correspondientes a este trabajo, a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, según lo establecido por la ley de propiedad intelectual, por su reglamento y normativa institucional vigente. Oñate Negrete Henry Santiago C.I. 171646259-1 hson19877@gmail.com v CERTIFICACIÓN Certifico que el presente trabajo fue desarrollado por el Sr. Oñate Negrete Henry Santiago, bajo mi supervisión. Tutor: Dr. García Merino Iván Ricardo vi UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN APROBACIÓN DEL TUTOR Quito, 2 de Abril de 2014 Doctor Wilfrido Palacios DIRECTOR DEL INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO. COORDINADOR DE LA UNIDAD DE INVESTIGACIÓN GRADUACIÓN Y TITULACIÓN DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR. Presente De mi consideración: Yo, Dr. García Merino Iván Ricardo, APRUEBO como TUTOR la tesis titulada “ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE”. Que se desarrolló en el área del conocimiento de la especialidad de Odontología, cuyo AUTOR es la estudiante Sr. Oñate Negrete Henry Santiago. Tutor: Dr. García Merino Iván Ricardo vii UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN HOJA DE APROBACIÓN DE TESIS "ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE” Quito, 17 de Diciembre de 2014 Doctor Wilfrido Palacios DIRECTOR DEL INSTITUTO SUPERIOR DE INVESTIGACIÓN Y POSGRADO. COORDINADOR DE LA UNIDAD DE INVESTIGACIÓN GRADUACIÓN Y TITULACIÓN DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR. Presente De mi consideración: Los abajo firmantes miembros del Jurado Calificador APROBAMOS la tesis titulada: “ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE”, cuyo AUTOR es el Sr. Oñate Negrete Henry Santiago. viii ÍNDICE DE CONTENIDOS PORTADA………………………………………………………………………… i DEDICATORIA…………………………………………………………………… ii AGRADECIMIENTO…………………………………………………………….. iii AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL………………………… iv DECLARACIÓN……………………..……………………………………………. v CERTIFICACIÒN…………………………………………………………………. vi APROBACIÒN DEL TUTOR…………………………………………………….. vii HOJA DE APROBACIÓN DE TESIS…………………………………………... viii ÍNDICE DE CONTENIDOS……………………………………………………… ix ÏNDICE DE GRÁFICOS…………………………………………………………. xiii ÍNDICE DE TABLAS……………………………………………………………. xiv RESUMEN………………………………………………………………………… xv ABSTRACT……………………………………………………………………….. xvi ix CAPÍTULO I 1. INTRODUCCIÓN……………………………………………………… 1 1.1. OBJETIVOS…………………………………………………………… 2 1.1.1. Objetivo general………………………………………………………… 2 1.1.2. Objetivos específicos…………………………………………………… 2 1.2. JUSTIFICACIÓN……………………………………………………… 3 1.3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA………………………………. 3 1.4. HIPÓTESIS…………………………………………………………….. 4 CAPÍTULO II 2. MARCO TEÓRICO……………………………………………………. 5 2.1. ESMALTE DENTAL………………………………………………….. 5 2.2. EROSIÓN……………………………………………………………… 7 2.2.1. Factores intrínsecos…………………………………………………….. 8 2.2.2. Factores extrínsecos……………………………………………………. 8 2.3. TIEMPO DE CONSUMO……………………………………………… 10 2.4. BEBIDA CARBONATADA…………………………………………… 10 2.5. PLACA DENTAL……………………………………………………… 10 2.6. ANATOMÍA DENTARIA……………………………………………… 10 2.6.1. Estructura pieza dentaria……………………………………………….. 11 2.6.2. Relaciones interoclusales………………………………………………. 13 x CAPÍTULO III 3. MATERIALES Y MÉTODOS………………………………………… 15 3.1. MATERIALES………………………………………………………… 15 3.2. MÉTODOS…………………………………………………………….. 15 3.2.1. Tipo de estudio…………………………………………………………. 16 3.2.2. Población o muestra……………………………………………………. 16 3.3. OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES…………………... 16 3.4. PROCEDIMIENTO……………………………………………………. 17 3.4.1. Medición del pH de la gaseosa carbonatada…………………………… 17 3.4.2. Obtención de los bloques de esmalte…………………………………… 17 3.5. FASE EXPERIMENTAL……………………………………………… 18 3.5.1. Técnicas e instrumentos para la recolección de datos………………….. 18 CAPÍTULO IV 4. 4.1. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS…………… 19 RESULTADOS OBTENIDOS LUEGO DE LAS PRUEBAS DE MICRODUREZA (Microdurómetro Knoop)……………………… 19 4.2. PRUEBAS NO PARAMÉTRICAS: PRUEBA DE NORMALIDAD……. 22 4.3. ANOVA DE UN FACTOR: SUPONEMOS MUESTRAS NO RELACIONADAS………………………………………………… 23 xi 4.3.1. Pruebas post hoc…………………………………………………………… 25 4.3.2. Subconjuntos homogéneos……………………………………………… 26 4.3.3. Prueba de Tukey………………………………………………………… 27 4.4. DISCUSIÓN………………………………………………………….... 27 4.5. CONCLUSIONES……………………………………………………… 29 4.6. RECOMENDACIONES……………………………………………….. 30 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………………………………….. 31 ANEXOS…………………………….……………………………………………. 35 FOTOGRAFÍAS…………………………………………………………………… 38 xii ÍNDICE DE GRÁFICOS Gráfico Nº 1: Esmalte Dental - Distribución Porcentual en Peso…………………. 6 Gráfico Nº 2: Tiempo (Días) por Kg/mm2………………………………………… 27 xiii ÍNDICE DE TABLAS Tabla Nº 1: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 7 días……………… 20 Tabla Nº 2: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 14 días……………. 20 Tabla Nº 3: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 21 días……………. 21 Tabla Nº 4: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 28 días……………. 22 Tabla Nº 5: Resumen de prueba de hipótesis…………………………………… 23 Tabla Nº 6: Resultados descriptivos……………………………………………. 24 Tabla Nº 7: Resultados ANOVA de un factor………………………………….. 24 Tabla Nº 8: Comparaciones múltiples………………………………………….. 25 Tabla Nº 9: Resultados HDS de Tukey………………………………………… 26 xiv UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA “ESTUDIO IN VITRO DEL EFECTO EROSIVO QUE PRODUCE LA FRECUENCIA DE CONSUMO DE BEBIDAS GASEOSAS A NIVEL DEL ESMALTE” RESUMEN Palabras Claves: Efecto Erosivo, Esmalte Dental, pH, Microdureza La presente investigación in-vitro, tuvo por objetivo demostrar el efecto erosivo que produce la frecuencia de consumo de bebidas gaseosas a nivel del esmalte. En este estudio el efecto erosivo se determinó mediante la evaluación de la microdureza superficial del esmalte dentario y se encontró que en todas las muestras, había una disminución significativa en los valores de microdureza del esmalte luego de someterlas a la acción de la bebida carbonatada, ya que al producirse la desmineralización la dureza adamantina decrece. La investigación determinó que la bebida carbonatada con pH 3 en las muestras expuestas por 28 días, produjo el mayor efecto erosivo y este resultado concuerda con estudios previos. Con respecto a las diferencias significativas que encontramos en los efectos erosivos producidos en las cuatro muestras, podríamos deducir que ello se debe a la diferencia de exposición en función del tiempo. xv UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA “IN VITRO STUDY ON HE EROSIVE EFFECT OF FREQUENT INGESTION OF CARBONATED DRINKS ON DENTAL ENAMEL” ABSTRACT Keywords: EROSIVE WEAR, DENTAL ENAMEL, POTENTIAL OF HIDROGEN, MICRO-HARDNESS This in vitro research has the objective of proving the erosive effect of carbonated drinnks of dental anamel. In this study, the erosive effect was determinated by assessing surface micro-hardness of dental anamel, and we found that all samples underwent a significant decrece in enamel microhardness values after being subjected to carbonated drinks; this research also determined that carbonate drinks whit pH 3, apllied to samples for 28 days, produced higher erosive effects, and this result agrees whit previous studies. We can deduce that the significant differences found between the erosive effects produce on our four samples are due to the different exposure times. xvi CAPÍTULO I 1. INTRODUCCIÓN. Se considera a la superficie del esmalte como la parte más importante del diente debido a que es un tejido acelular altamente mineralizado del cuerpo humano y está conformado por un material inorgánico (96 %), orgánico (3 %) y agua (1%). Hay diversos factores que influyen en la integridad de su fase mineral que van a depender de la composición química de los fluidos que la rodean. (Pérez, 2004 - Henostroza, 2005). La erosión dental es la pérdida progresiva e irreversible de la estructura del diente causada por los procesos químicos sin la intervención de las bacterias (Imfeld, 1996; Lussi, 2006). Es el proceso de disolución gradual de la superficie del tejido dental por la acción química de ácidos y/o quelantes, sin la intervención de bacterias, estos ácidos responsables de la erosión dental se rigen por factores intrínsecos (de cada organismo), extrínsecos (ingeridos por el paciente) y por presencia de ácidos de origen desconocido (etiología idiopática). Entre los factores de riesgo se encuentra la presencia de nuevos hábitos y estilos de vida, entre ellos, la ingesta de bebidas carbonatadas (Pérez, 2004; Henostroza, 2005; Larsen, 1998; Dugmore, 2004). Además según (Cuniberti) (2009), entre los factores que causan la pérdida del tejido dentario se destaca el tiempo de exposición a un pH bajo (ácido). Por lo tanto; observando el incremento en el consumo de las bebidas carbonatadas debido al constante marketing, la salud bucal se encuentra en riesgo ya que está demostrado que el pH de las bebidas que se comercializan actualmente es crítico y capaz de producir la desmineralización de los tejidos dentales por las sustancias ácidas que presentan en su composición además de CO2. (Smith, 1996). 1 La saliva es el factor bilógico más importante en el proceso de des-remineralización, y por ello el protector principal de la estructura dental gracias a sus componentes minerales: bicarbonato, fosfato, calcio y flúor; que se encuentran relacionados con el proceso de erosión. (Garone y Valquiria 2010). La finalidad que tiene este proyecto de investigación a través de la medición de la microdureza del esmalte, es demostrar el nivel de agresión que sufre el esmalte dental por el consumo de bebidas carbonatada como bebida complementaria después de las comidas o para satisfacer la sed, y la influencia que la saliva tiene dentro de este proceso fisiológico, además de hacer un llamado de atención para quienes consumen con frecuencia esta bebida y poder así prevenir lesiones dentales futuras. 1.1. OBJETIVOS. 1.1.1. Objetivo general. Mediante un estudio “in vitro” determinar el nivel de erosión dental que se produce por el consumo frecuente de bebidas carbonatadas. 1.1.2. Objetivos específicos. Fundamentar la pérdida de dureza que sufre el esmalte por el proceso de erosión dental que se generan por el consumo de bebidas carbonatadas. Determinar el nivel de erosión que produce el pH ácido de la bebida carbonatada por medio del microdurómetro. Establecer la relación existente entre la erosión y la frecuencia de consumo de la bebida gaseosa carbonatada. 2 1.2. JUSTIFICACIÓN. En nuestro medio la comercialización de las bebidas gaseosas es un gran negocio que se incrementa día a día por el consumo masivo de este tipo de productos, ya sea por la premura de tiempo en que nos desenvolvemos, economía o facilismo. Las grandes campañas publicitarias donde se muestra y garantiza una vida social exitosa e inclusive una fama deportiva fruto del consumo de estos productos, han llegado al punto de ser éste, un modelo a seguir en detrimento del verdadero sentido de la vida, de la salud y de la sociedad. Sin embargo, desconocemos el daño que producen estos productos a nuestra salud oral, especialmente a nuestros dientes; es por ello que este estudio está enfocado en cuantificar y exponer la agresión que producen las bebidas carbonatadas a nivel del esmalte dental y con ello incentivar una cultura moderada en el consumo de este tipo de bebidas, además de contribuir a la prevención y control de lesiones dentales. 1.3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. El término “erosión” ha sido aceptado en odontología como el que describe el mecanismo responsable de la pérdida de estructura dental, como consecuencia de un proceso químico de disolución de la porción mineralizada de los dientes. Este proceso lo desencadenan principalmente ácidos de origen no bacteriano y sustancias con propiedades quelantes (Garone y Valquiria 2010). 3 Según (Liñan) (2007), un pH menor a 5.5 provoca una variación del mismo en la cavidad bucal, lo que puede provocar daño en el tejido del esmalte; esto puede estar dado por factores intrínsecos y extrínsecos. Dentro de los extrínsecos se encuentra la ingesta de bebidas carbonatas (gaseosas), pues poseen características endulzantes y acidófilas debido al gran contenido de azúcares, saborizantes, ácidos y dióxido de carbono. Por lo expuesto anteriormente y el desconocimiento del daño erosivo que causan este tipo de bebidas industrializadas, se desea con este estudio proporcionar valores reales del daño erosivo y con ello poder obtener datos científicos que nos servirán, para poder como profesionales odontólogos, informar y concientizar a nuestros paciente y personas en general sobre el problema erosivo, y de esta manera hacer que el consumo de estas bebidas sea mesurado y consciente. Se considera además, que el proceso de erosión continua, fruto de varios factores y costumbre de la sociedad moderna, podrá ser información genética transmitida a las futuras generaciones con consecuencias insospechadas aún. 1.4. HIPÓTESIS. Hi: (Hipótesis de la investigación): La ingesta de bebidas carbonatadas produce erosión a nivel del esmalte, así como también una perdida irreversible de su dureza que está en relación a la frecuencia de consumo del producto; ya que a mayor exposición de las muestras en bebidas carbonatas, mayor pérdida de la dureza del esmalte presentan las mismas. 4 CAPÍTULO II 2. MARCO TEÓRICO. 2.1. ESMALTE DENTAL. Cada organismo presenta características particulares y únicas y por lo tanto el contenido mineral de los dientes varía sin duda, por lo que, cada organismo responde de manera diferente a cualquier proceso que ocurra en la cavidad oral, y más aún cuando entran en contacto con sustancias ácidas (Garone - Valquiria 2010). El esmalte dental es un tejido acelular, duro e inerte; caracterizado por ser el más mineralizado del organismo y que se encuentra cubriendo a manera de casquete la dentina un su porción coronaria (Henostroza, 2005; Pérez, 2004). El análisis de los componentes minerales del esmalte revela que predomina en ellos el calcio en forma de fosfatos, de los cuales el más abundante es el del calcio hidratado, denominado por sus características químicas hidroxiapatita. Pueden aislarse proteínas en varias fracciones diferentes, y éstas en general contienen un alto porcentaje de serina, ácido glutámico y glicina. En suma, la proteína del esmalte es de tipo estructural, muy especial por sus aminoácidos constituyentes y a la cual se le ha denominado amelina o enamelina. Dentro de las sustancias no proteicas del esmalte se citan asimismo al ácido cítrico o citratos, carbohidratos como galactosa, lípidos, etc. Las células encargadas de la formación de esmalte son los ameloblastos. Mosby en 2008 afirma que el esmalte dental se encuentra constituido por más del 96 % de material inorgánico presente en forma de cristales de hidroxiapatita altamente mineralizados, proteínas en forma de multi-agregados polipeptídicos (1-2 %) y agua (3-5 %). 5 Gráfico Nº 1: Esmalte Dental - Distribución Porcentual en Peso. Fuente: Mosby 2008. (Gómez de Ferraris) (2002) y (Mosby) (2008), concuerdan que los cristales de hidroxiapatita de acuerdo a su disposición ordenada forman prismas, los mismos que en sus espacios interprismáticos contienen agua y material orgánico y es por ello que el esmalte posee la propiedad de ser permeable y así permitir el intercambio iónico con el medio oral, especialmente con la saliva. Por lo enunciado anteriormente (Garone, Valquiria) (2010) dicen que el principal constituyente mineral de las estructuras dentales es la hidroxiapatita. La hidroxiapatita se encuentra constituida de Ca12 (PO4)6(OH)2, de aquí el 37% de su peso es calcio, el 52% fosfato (18% es fósforo) y el 3% es hidroxilo, y gracias a esta composición el esmalte puede efectuar importantes reacciones físico químicas con el medio salival. (Chávez - Henostroza 2005; Pérez 2004; Larsen 1998). 6 2.2. EROSIÓN. El término erosión, se deriva del verbo latino erodere, erosi, erosum (roer, corroer), el mismo que describe el proceso de destrucción gradual de la superficie de un cuerpo, causada por lo general por procesos electrolíticos o químicos (Pindborg, 1970). Clínicamente la erosión dental o erosio dentium puede ser definida como el resultado físico de una pérdida patológica crónica localizada de la superficie de tejido duro dental causada por ácidos y/o quelantes sin implicación bacteriana (Imfeld, 1996; Eccles, 1982; Pindborg, 1970; Zipkin-McClure, 1949). La erosión dental en cuanto a su etiología según Nahás en 2006 se clasifica o divide en: erosión extrínseca, intrínseca o idiopática tomando en cuenta el origen de los ácidos que producen dicha erosión, y que pueden ser: exógenos, endógenos y desconocidos. Inicialmente el esmalte brillante y liso se ve afectado por la erosión dental, que a medida que avanza hacia la dentina da como resultado defectos más graves que desencadenan en cambios tanto de la forma como de la función de la dentición (Zeron, 2009). Clínicamente la característica más común de la erosión es la pérdida del brillo del esmalte, posteriormente se forma una lesión amplia en forma de “plato tendido” con bordes nítidos; y cuando compromete la dentina, provoca sensibilidad al frío, calor y presión osmótica (Chávez - Henostroza 2005). Según (Cuniberti) (2009) la erosión posee una superficie defectuosa, suave, rugosa, opaca y de superficie aplanada. Así mismo, refiere que a nivel de cúspides estas pueden presentar erosiones en forma de copa. 7 Cuando la erosión se presenta a nivel de dientes restaurados, estas restauraciones se tornan prominentes, proyectándose sobre de la superficie dental, según (Lussi) (2006). (Nunn) (1996), concluye y afirma que la erosión dental tiene desenlaces terribles para la salud oral, ya que a medida que se perdió tejido dental se incrementará la sensibilidad y el dolor, además que el paciente estéticamente también se ve afectado; y en cuanto a su tratamiento de restauración tanto de esmalte y/o dentina dependiendo de la severidad de la erosión será difícil, costoso y continuo en cuanto al control. 2.2.1. Factores intrínsecos. El ácido gástrico causante de la erosión dental llega a la cavidad oral como consecuencia de vómitos crónicos o reflujos gastroesofágicos persistentes por un período prolongado, es decir varios años. Tales condiciones incluyen desórdenes del tracto digestivo superior, específicamente desórdenes endocrinos y metabólicos, efectos secundarios de algunos medicamentos, abusos de drogas y desórdenes psicosomáticos (estrés, anorexia, bulimia nerviosa) (Grippo et al., 2004). 2.2.2. Factores extrínsecos. Según (Liñan) (2007); (Dugmore) (2004), los factores extrínsecos se los puede agrupar en factores: ambientales, dieta, medicamentos y estilo de vida. 8 Los factores ambientales tienen que ver principalmente con exposiciones a vapores ácidos o aerosoles en lugares de trabajo, que pueden ser fábricas o piscinas cloradas con bajo pH por un mantenimiento defectuoso (Zero, 1996). De acuerdo a (Milosevic) (1997), (Lussi et al.) (2004), el proceso erosivo se eleva con la ingesta de alimentos y bebidas ácidas cuando se los ingiere de manera frecuente, e incluso son recomendadas en dietas dadas por nutricionistas. Según (Baggio - Aguia et al.) (2006), la exposición a ácidos inorgánicos exógenos provocan un daño erosivo principalmente en los bordes incisales de los dientes anteriores. Estudios revelan que medicamentos y productos de salud oral como colutorios se relacionan con erosión debido a su bajo pH incrementado la agresión con su uso frecuente. Así mismo, hay que tomar muy en cuentan a los sustitutos salivales, pues a más de su bajo pH son erosivos en pacientes que necesitan inducir la producción salival por tiempos prolongados (Grippo et al., 2004 & Dugmore, 2004). (Sirimaharaj) (Messer) (Morgan) (2002), sugieren que hay un mayor interés en llevar una vida saludable, lo que implica ejercitarse y alimentarse con una dieta rica en vegetales y frutas ácidas, produciendo una agresión erosiva sobre el tejido dentario. Consecuentemente, un estilo de vida saludable tiene relación directa con la presencia de erosión dental, ya que estas personas realizan ejercicio regularmente, cumplen una dieta sana y tienen una higiene apropiada y estos factores son importantes para que se produzca una erosión dental (Castillo, Castillo y Galárraga-2012). 9 2.3. TIEMPO DE CONSUMO. La frecuencia de consumo de bebidas carbonatadas causa una reducción significativa en la dureza de la dentina y el esmalte. Esto demuestra que el aumento del efecto erosivo, está en función de la frecuencia de la ingesta de estas bebidas, o por los cambios superficiales. (Fushida - Cury, 1999). 2.4. BEBIDA CARBONATADA. Tipo de bebida combinada o impregnada con CO2. Bebida gasificada que se obtiene por la disolución de agua potable, jugo o extracto vegetal adicionado con azúcares (Bireme, 2010). 2.5. PLACA DENTAL. (Cheung et al.) (2005), refiere que la placa dental proporciona una protección adicional ya que realiza el papel de una barrera mecánica que puede estar presente en el tejido dentario en el instante en que la sustancia ácida actúa sobre el esmalte. 2.6. ANATOMÍA DENTARIA. Es el estudio de las piezas dentarias como unidades estructurales e insertas en el sistema estomatognático, entendiéndose por este todas las estructuras que intervienen en la oclusión dentaria y proceso de masticación: ambos maxilares, ATM, músculos faciales y masticadores, piezas dentarias, paredes de la cavidad bucal, paladar, lengua, vasos y nervios. (Arriagada E., 2011) 10 El diente es una estructura blanquecina, dura, incrustada en los rebordes alveolares de ambos maxilares. Son instrumentos de la masticación, ya que dividen el alimento en partículas más pequeñas y, por tanto, más accesibles a los jugos digestivos. (Larsen M. et al 1998) 2.6.1. Estructura pieza dentaria. Formada por 3 tipos de tejidos duros y un tejido blando en el centro: esmalte, dentina, cemento y pulpa dentaria. Los dientes se disponen en forma de arco y se mantienen en posición gracias al periodonto, el que está protegido por la encía. Consta el diente de 2 porciones: corona y raíz. La dentina está presente tanto en la raíz como en la corona y lleva en su espesor la pulpa dentaria, que se ubica en una cavidad central, que a nivel coronario se llama cámara pulpar, y a nivel de la raíz, se conoce como conducto radicular. A nivel coronario la dentina está protegido por un tejido más duro que es el esmalte. A nivel radicular, la dentina está protegida por otro tejido duro menos resistente que el esmalte, llamado cemento. El cemento recibe la inserción dentaria del ligamento alveolodentario. (Arriagada E., 2011) La pulpa es un tejido blando constituido por elementos vasculares y nerviosos, necesarios para la función de la pieza dentaria. El vértice de la raíz constituye el ápice radicular, y a ese nivel se abre el conducto radicular en un orificio que se denomina foramen apical. Entre la corona y la raíz, que constituyen la raíz anatómica y la corona anatómica, está la unión entre el esmalte y el cemento, que determina la línea cervical, denominado cuello anatómico. (Larsen M. et al 1998) 11 Existe una corona y raíz clínica, siendo la corona clínica la parte visible del diente; la raíz clínica es la parte oculta. Entre ambos está el cuello clínico, representado por la línea gingival, que corresponde a la inserción de la encía a la pieza dentaria. (Larsen M. et al 1998) Esta línea puede estar a distinto nivel en la pieza dentaria, según la edad, estado de erupción o calidad y estado de la encía. El espesor del esmalte varía en las diferentes zonas de las piezas dentarias, se va adelgazando a medida que se acerca a la línea cervical. Lo mismo sucede con el cemento. (Arriagada E., 2011) En algunos casos, a nivel de la línea cervical, el espesor del esmalte y del cemento produce líneas de exposición dentinaria, quedando protegida solamente por la encía, haciendo que sea un punto débil que facilita la formación de caries cervicales. Las superficies dentarias son todas redondeadas, convexas o cóncavas; pero se les puede encuadrar en un cuerpo de 6 caras, orientadas en 6 direcciones. Así tenemos, tanto en la corona como en la raíz: (Arriagada E., 2011) CARA VESTIBULAR: Mira hacia el vestíbulo bucal, por lo que es una cara libre. CARA PALATINA: Presente en las piezas dentarias superiores, miran hacia el paladar; es una cara libre. CARA LINGUAL: Corresponde a la palatina, pero ahora referida a los inferiores; cara libre. CARAS PROXIMALES: Son aquellas que están en relación o mirando hacia las piezas vecinas. Son 2: CARA MESIAL: Si se acercan a la línea media. 12 CARA DISTAL: Si se aleja de la línea media. Estas caras no son libres. CARA CERVICAL: Es la que está orientada hacia el cuello de la pieza dentaria. Así, la cara cervical de la corona corresponde a la cervical de la raíz (es la que separa a ambas). CARA INCISAL: Presente solo en las piezas dentarias anteriores, tanto superiores como inferiores, a nivel coronario; más bien son bordes continuos. CARA OCLUSAL: Es la superficie triturante de premolares y molares. Tanto la cara incisal como la oclusal toman contacto con el diente antagonista. ZONA APICAL: Corresponde al vértice de la raíz. Al estar articuladas las piezas dentarias entre sí forman un arco llamado arco dentario, fuertemente convexo hacia vestibular. Para que esto sea posible, las caras vestibulares deben ser más amplias que las linguales o palatinas, siempre conservando un contacto entre las piezas. Los arcos disminuyen su altura de mesial, que es más alto, a distal. El arco dentario debe disminuir su altura a medida que se acerca a la ATM, donde se ejerce la mayor potencia masticadora de los molares. (Arriagada E., 2011) 2.6.2. Relaciones interoclusales. Contacto entre 2 piezas dentarias de distintos arcos, lo que se efectúa a través de sus caras oclusales. Para que se efectúe un contacto, las superficies dentarias cuentan con elevaciones o cúspides de apoyo que se ponen en contacto con depresiones o facetas del antagonista. 13 En las piezas superiores las cúspides de apoyo son las palatinas y en las inferiores, las vestibulares. Esta posición de contacto determina la dimensión vertical de la cara. (Arriagada E., 2011) A partir de la dimensión vertical de la cara se generan los movimientos de deslizamiento entre las caras oclusales de las piezas inferiores sobre las superiores gracias a la ATM. La ausencia de una pieza dentaria altera la relación interproximal (el espacio que queda por ausencia de la pieza tiende a ser ocupado por la pieza dentaria que queda por distal, produciéndose una mesialización de la pieza distal, movimiento que no es enteramente paralelo a la pieza dentaria, sino que generalmente la migración produce una inclinación de la pieza que se moviliza; rara vez en el adulto se ocupa totalmente el espacio en forma normal; la mala posición de la pieza que ha emigrado trae alteración de la relación interoclusal, y con ello alteración de la mordida). (Arriagada E., 2011) La ausencia de una pieza dentaria afecta también la relación interoclusal, pues el antagonista tiende a ocupar ese espacio mediante la llamada elongación de la pieza, es decir aumenta la erupción de la pieza, lo que trae alteraciones del deslizamiento de la mandíbula durante el proceso masticatorio. (La arcada superior sobrepasa por fuera por todo el contorno a la arcada inferior). (Arriagada E., 2011) 14 CAPÍTULO III 3. MATERIALES Y MÉTODOS. 3.1. MATERIALES. Dientes bovinos Agua ionizada Aislante de acrílico Acrílico rápido (monómero y polímero) Bebida carbonatada. Tiras para medir pH. 3.2. MÉTODOS. Método científico: Es un proceso destinado a explicar que la erosión, tiene relación con el consumo de bebidas carbonatadas y poder así, enunciar leyes que explique este fenómeno físico que afecta a la salud bucal. Método sintético: Mediante este método, se pretende resumir y explicar, que el consumo excesivo de bebidas carbonatadas, es la causa principal de la erosión en el esmalte dental de las muestras; es decir, esto se presentó en la hipótesis y se concluirá en los resultados. Método analítico: Es un método analítico, pues se revisó y analizó por separado cada muestra que presentó erosión en el esmalte. 15 3.2.1. Tipo de estudio. El presente trabajo es de tipo experimental, explicativo, transversal y de laboratorio; ya que el esmalte de los dientes bovinos, que son la muestra del estudio, fueron sometidos al pH ácido de la bebida carbonatada para de esta manera evaluar la erosión que sufre la superficie del esmalte dentario en diferentes períodos de tiempo. 3.2.2. Población o muestra. La muestra de la investigación son 40 piezas preparadas (in-vitro). 3.3. OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES. VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIÓN INDICADOR ESCALA Pérdida progresiva e Identificador de Diferencia entre irreversible a nivel da la dureza del el valor inicial y Nominal la estructura dental a esmalte que se final de la medido en causa de procesos presenta microdureza kg/mm2 químicos sin normalmente en superficial del intervención de la superficie esmalte dentario bacterias dental CONCEPTUAL Dependiente Erosión 16 VARIABLE DEFINICIÓN CONCEPTUAL Independiente Consumo de bebida gaseosa 3.4. Investigación in-vitro que simula la ingesta de bebidas carbonatadas, en relación al tiempo DIMENSIÓN INDICADOR ESCALA Aporta valores reales de erosión directamente proporcional al tiempo de consumo Demuestra la agresión dental producida por el consumo de la bebida después de las comidas Nominal medido en potencial de hidrógeno (pH) PROCEDIMIENTO. 3.4.1. Medición del pH de la gaseosa carbonatada. Se medirá el pH de la gaseosa carbonatada. pH gaseosa carbonatada 1ra. Tira 2da. Tira 3ra. Tira Valor 2 3 3 3.4.2. Obtención de los bloques de esmalte. Para este estudio se utilizaron 40 dientes bovinos sanos, que luego de su extracción fueron limpiados y desprovistos de su ligamento periodontal, para ser colocados en agua ionizada por 30 días y de esta manera ser esterilizados. El diente bovino fue elegido no sólo por la facilidad de obtenerlo, sino sobre todo por el hecho de tener un comportamiento similar a los dientes humanos en estudios de erosión, según (Meurman) (1991). 17 La corona fue separada de la raíz por medio de un disco a nivel de la unión amelocementaria, posteriormente ya con las coronas seccionadas se cortaron las mismas en cubos de 4x4x2 mm aproximadamente. Este procedimiento fue realizado con refrigeración para evitar fracturas del esmalte y de manera manual, por lo que los cubos obtenidos no fueron exactos pero si aproximados a la medida estipulada. Cabe mencionar que hasta que inició la fase experimental los bloques de dientes bovinos se mantuvieron en agua ionizada. 3.5. FASE EXPERIMENTAL. 3.5.1. Técnicas e instrumentos para la recolección de datos. La investigación in-vitro, se diseñó para 4 grupos de control con un total de 10 piezas cada uno. Las 40 piezas, fueron sumergidas en la bebida carbonatada en cuatro períodos de tiempo (frecuencia), la cual es, la variable independiente de la investigación a saber: 7 días, 14 días, 21 días y 28 días. Previo al análisis del microdurómetro, las muestras fueron incrustadas en acrílico transparente a manera de troquel, para luego ser cortadas individualmente en pequeños bloques y así realizar la lectura bajo el microdurómetro, aplicando una carga de 500 gr. La recolección de la información y de los resultados observados mediante el microdurómetro, cómo también los registros de la investigación, se hicieron mediante una hoja de control. 18 CAPÍTULO IV 4. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. 4.1. RESULTADOS OBTENIDOS LUEGO DE LAS PRUEBAS DE MICRODUREZA (Microdurómetro Knoop) Fórmula: L K.H.N. = L = Ap l2 C Dónde: Ap: área formada por la indentación en mm2 L: carga en Kg l: longitud en mm lu: longitud de la diagonal en micras fa: factor de amplitud ocular en micras (factor para 10X = 0.8475) C: valor constante (0.07028) 19 Tabla Nº 1: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 7 días. INDENTACIÓN MUESTRA EN MICRAS PROMEDIO INDENTANCIÓN EN MICRAS RESULTADO EN Kg/mm2 200-200-200 200 248 225-200-200 208 229 210-230-200 213 218 230-200-245 225 196 250-250-250 250 158 210-230-250 230 187 200-230-250 227 192 230-230-230 230 187 230-200-230 210 225 230-210-245 228 191 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. Tabla Nº 2: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 14 días. INDENTACIÓN MUESTRA EN MICRAS PROMEDIO INDENTANCIÓN EN MICRAS RESULTADO EN Kg/mm2 300-250-260 270 136 280-250-310 280 126 300-200-330 277 129 300-270-265 278 129 20 280-295-315 297 112 300-280-260 280 126 290-300-320 303 108 300-320-290 303 108 300-280-280 287 120 290-290-270 283 124 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. Tabla Nº 3: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 21 días. INDENTACIÓN MUESTRA EN MICRAS PROMEDIO INDENTANCIÓN EN MICRAS RESULTADO EN Kg/mm2 310-300-350 320 97 300-350-310 320 97 250-360-350 320 97 310-340-300 347 99 300-300-300 300 110 300-350-320 323 95 300-300-340 313 101 360-350-300 337 87 270-350-330 317 99 300-350-300 317 99 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 21 Tabla Nº 4: Exposición in vitro de bebida gaseosa durante 28 días. INDENTACIÓN MUESTRA EN MICRAS PROMEDIO INDENTANCIÓN EN MICRAS RESULTADO EN Kg/mm2 310-350-390 350 81 380-345-315 347 82 350-375-375 367 74 350-345-350 345 83 350-345-380 358 78 350-370-380 367 74 390-360-350 367 74 350-345-340 345 83 365-335-340 347 82 315-345-365 347 82 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 4.2. PRUEBAS NO PARAMÉTRICAS: PRUEBA DE NORMALIDAD. Ho: Es distribución normal. Ha: No es normal. El cuadro establece que todas las muestras provienen de poblaciones con distribución normal, luego se procede a realizar las pruebas ANOVA o la prueba t-student. 22 Tabla Nº 5: Resumen de prueba de hipótesis. Nº 1 2 HIPÓTESIS NULA TEST La distribución de siete días, es Prueba Kolmogorov- normal con la media 203,100 y Smirnov de una muestra SIG. DECISIÓN Retener la hipótesis nula 0,789 la desviación típica 26,38 La distribución de catorce días, Prueba Kolmogorov- es normal con la media 121,800 Smirnov de una muestra 0,860 Retener la y la desviación típica 9,58 hipótesis nula 3 La distribución de veintiún Prueba Kolmogorov- días, es normal con la media Smirnov de una muestra Retener la hipótesis nula 0,629 98,100 y la desviación típica 5,67 4 La distribución de veintiocho Prueba Kolmogorov- días, es normal con la media Smirnov de una muestra 0,470 Retener la 79,300 y la desviación típica hipótesis nula 3,92 Se muestran las significancias asintóticas. El nivel de significancia es 0,05. Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 4.3. ANOVA DE UN FACTOR: SUPONEMOS MUESTRAS NO RELACIONADAS. Ho: Las medias de las muestras son todas similares. Ha: Existe algún media que no es similar a las demás. 23 Tabla Nº 6: Resultados descriptivos. Cant. N Media Desviación Error típica típico Intervalo de confianza para Mínimo Máximo la media al 95 % 7 Límite Límite inferior superior 10 203,100 26,3753 8,3406 184,232 221,968 158,0 248,0 10 121,800 9,5778 3,0288 114,948 128,652 108,0 136,0 10 98,100 5,6657 1,7916 94,047 102,153 87,0 110,0 10 79,300 3,9172 1,2387 76,498 82,102 74,0 83,0 40 125,575 49,7995 7,8740 109,648 141,502 74,0 248,0 días 14 días 21 días 28 días Total Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. Tabla Nº 7: Resultados ANOVA de un factor. Suma de gl cuadrados Inter- Media F Sig. 142,474 0,000 cuadrática 89206,275 3 29735,425 7513,500 36 208,708 96719,775 39 grupos Intragrupos Total Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 24 Resultado ANOVA Sig = 0.00 < 0,05 (nivel de significación; 95 % confiabilidad), luego rechazo Ho, esto si existe alguna o varias medias que no son similares entre sí, la prueba de Tukey post hoc verifica dos a dos, cuales son similares. 4.3.1. Pruebas post hoc. Tabla Nº 8: Comparaciones múltiples. Variable dependiente: Resultados HDS de Tukey (I) Medida (J) Medida Diferencia de medias (I-J) Error típico Sig. Intervalo de confianza al 95 % Límite inferior 7 días 14 días 21 días 28 días Límite superior 14 días 81,3000 6,4608 0,000 63,900 98,700 21 días 105,0000 6,4608 0,000 87,600 122,400 28 días 123,8000 6,4608 0,000 106,400 141,200 7 días -81,3000 6,4608 0,000 -98,700 -63,900 21 días 23,7000 6,4608 0,004 6,300 41,100 28 días 42,5000 6,4608 0,000 25,100 59,900 7 días -105,0000 6,4608 0,000 -122,400 -87,600 14 días -23,7000 6,4608 0,004 -41,100 -6,300 28 días 18,8000 6,4608 0,030 1,400 36,200 7 días -123,8000 6,4608 0,000 -141,200 -106,400 14 días -42,5000 6,4608 0,000 -59,900 -25,100 21 días -18,8000 6,4608 0,030 -36,200 -1,400 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 25 4.3.2. Subconjuntos homogéneos. Tabla Nº 9: Resultados HDS de Tukey. Medida N (Muestras) Subconjunto para alfa = 0.05 1 28 días 10 21 días 10 14 días 10 7 días 10 2 3 4 79,300 Sig. Sub. 98,100 121,800 203,100 1,000 1,000 1,000 1,000 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. 4.3.3. Prueba de Tukey. Resultados Sig < 0,05, luego todas las medias (promedios) son diferentes, existe diferencia entre 7 días, 14 días, 21 días y 28 días. 26 Gráfico Nº 2: Tiempo (Días) por Kg/mm2. Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate Negrete Henry Santiago. Observaciones: En forma general las muestras tienen promedios diferentes (Procesado en SPSS 21). 4.4. DISCUSIÓN. Basándonos en la metodología, la finalidad es resumir las observaciones llevadas a cabo de forma tal que proporcionen respuestas a los objetivos de la investigación, para lo cual es importante considerar dentro del análisis, el establecimiento de categorías, orden y manipulación de los datos para resumirlos y poder sacar las conclusiones en función del objetivo principal. A tal efecto, en este capítulo se manejaron los criterios en los procesos de codificación y tabulación de los resultados e interpretación de los mismos. 27 Luego de la observación y análisis de todas las muestras, se han dividido los diferentes porcentajes de erosión, que dan como resultado el desgaste prematuro del esmalte. Estos datos fueron graficados de manera discriminada para una mejor comprensión de la variable dependiente (Erosión) y de la variable independiente (Consumo y/o exposición a las bebidas carbonatadas), según las pruebas ANOVA o la prueba t-student y la Prueba de Turkey. (Garone y Valquiria, 2010) coinciden en que la erosión dental es la pérdida progresiva e irreversible del tejido duro dental por un proceso químico que no involucra la acción de bacterias. Además (Liñan, 2007) y (Dugmore, 2004) afirman que los ácidos presentes en algunas frutas y bebidas desmineralizan la matriz inorgánica de la estructura dental. Así el pH y otros factores determinan la estabilidad de las apatitas en el esmalte. Una disminución en el pH de los líquidos que bañan los elementos dentales puede ser causada directamente por el consumo de frutas y bebidas ácidas, o indirectamente por la ingesta de carbohidratos fermentables que permiten una producción de ácido por las bacterias. (Smith, 1996). (Gómez de Ferraris, 2002) y (Mosby, 2008) han demostrado que cuando el esmalte está expuesto a un pH de 4.5 - 5.0 el cual está hiposaturado con respecto a hidroxiapatita y fluorapatita, la superficie queda grabada dejando una lesión con la misma apariencia macro y microscópica que la erosión dental. El pH de la bebida considerada en este estudio es de 3 para la bebida carbonatada. En este caso, el valor se encuentra por debajo del pH crítico para hidroxiapatita y fluorapatita, por lo tanto es capaz de producir un efecto erosivo sobre el esmalte dentario, lo dice (Liñan, 2007) 28 El objetivo de esta investigación fue determinar mediante un estudio “in vitro” el nivel de erosión dental que se produce por el consumo frecuente de bebidas carbonatadas en el esmalte, por acción de los ácidos. Hay que acotar que esta investigación no permitió cuantificar el grado de remineralización, ya que para hacerlo de manera adecuada sería necesario, realizar otro tipo de investigación “in vivo” o “in situ” en dónde podíamos analizar el efecto amortiguador o buffer de la saliva que según (Ericsson, 1959), es la habilidad de la saliva para contrarrestar los cambios de pH, permitiendo mantener un pH relativamente constante. 4.5. CONCLUSIONES Se pudo comprobar que la característica más evidente de la erosión, fue la pérdida de brillo del esmalte, formando una lesión larga en forma de "/". La microdureza del esmalte dentario de las 10 muestras sometidas durante 28 días, disminuyó en mayor proporción por la acción ácida de la bebida carbonatada el cual fue valorado a través de la microdureza superficial del esmalte dentario soportando solamente 78,300 Kg/mm2. La microdureza del esmalte dentario de las 10 muestras sometidas durante 7 días, disminuyó en menor proporción por la acción ácida de la bebida carbonatada el cual fue valorado a través de la microdureza del esmalte dentario soportando hasta 203,100 Kg/mm2. Esto demuestra la relación que existe entre el consumo diario de la bebida carbonatada y la cantidad consumida. 29 4.6. RECOMENDACIONES Se recomienda hacer estudios en los que se calculen factores referentes a las bebidas tales como: tipo de ácido presente, grado de disociación iónica del ácido, contenido de calcio, fosfatos y flúor; para complementar las investigaciones. En la literatura existen sugerencias para minimizar los efectos de la erosión dental (p.ej.: el cepillado con dentífrico conteniendo flúor antes de la ingesta de sustancias con bajo pH) y que el cepillado inmediato después del consumo de alimentos ácidos, debe ser evitado ya que el esmalte se encuentra perturbado y puede ser removido fácilmente por la abrasión, durante la higiene bucal, se recomienda entonces, un enjuague previo con una solución alcalina. Otra sugerencia encontrada, refiere el uso de sorbetes para la ingesta de bebidas ácidas, de tal manera que se trate de disminuir el contacto entre las superficies dentales y éstas. Se recomienda entonces, realizar estudios para analizar el efecto erosivo de éstos y obtener mayor información a fin de orientar de manera adecuada la dieta de las personas. Debemos alertar a los padres de familia del riesgo que implica el consumo frecuente de estas bebidas, las cuales comúnmente son utilizadas en las loncheras. Así mismo también, instruir a los niños en sus hábitos alimenticios con respecto a estas bebidas. 30 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFÍCAS BAGGIO-AGUIAR, F., MAGDALENA-GIOVANI, E., LOZANO-MONTEIRO, F., VILLALBA H., SALGADO DE SOUSA, R., JAM DE MELO, J., TORTAMANO, N. (2006). Erosão dental – definição, etiologia e classificaçã.Rev InstCiêncSaúde. BIREME. Descriptores en Ciencias de la Salud (DeCS). Sao Paulo: BIREME, 2010. Disponible en: http://decs.bvs.br/E/homepagee.htm CASTILLO, A., CASTILLO, D., GALÁRRAGA M. (2012). Incidencia de lesiones no cariosas y su relación con hábitos que forman parte de su estilo de vida saludable. Revista Científica Odontología a.i.o.i. 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Editorial Médica Panamericana, Madrid - España. 34 ANEXOS FOTOGRAFÍAS DE LA INVESTIGACIÓN. Fotografías con la preparación de las muestras. Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 35 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 36 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 37 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 38 Fotografías que indican el proceso de medición de la erosión con el microdurómetro 39 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 40 Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. Fuente: Investigación propia. Elaborado por: Oñate N. Henry S. 41 CERTIFICADO DE LA ESPE 42 43