Concurso Nacional de Proyectos FONDECYT 2005

*** Concurso Nacional de Proyectos FONDECYT 2005
COMPROBANTE DE RECEPCION DE INFORME FINAL
NUMERO
RESPONSABLE :ISOLDE GINA ROJAS RUDOLPH
RUT
:10184608-3
TIPO
:FONDECYTREG.
ETAPA :2007
: 1050581
DURACION : 3 A-no(s)
TITULO : PARTICIPACION DEL MASTOCITO EN LA PATOGENESIS DE LA QUEILITI
S ACTINICA.
DISCIPLINA :Gl MEDICINA INTERNA, PATO (MEDICINA Gi)
FECHA RECEPCION :18/03/2008
TIMBRE RECEPCION
*** Concurso Nacional de Proyectos FONDECYT 2005
kk
COMPROBANTE DE RECEPCION DE INFORME FINAL
NUMERO
RESPONSABLE :ISOLDE CINA ROJAS RUDOLPH
RUT
:10184608-3
:PONDECYTREG.
ETAPA :2007
TIPO
: 1050581
DURACION : 3 Ano(s)
TITULO : PARTICIPACION DEL MASTOCITO EN LA PATOGENESIS DE LA QUEILITI
S ACTINICA.
DISCIPLINA :01 MEDICINA INTERNA, PATO (MEDICINA G1)
FECHA RECEPCION :18/03/2008
TIMBRE RECEPCION
-rrflC!3IDo
(
ARTES
11 jv]
4
1
?
r-
INFORME FINAL
GOBIERNO DE CHILE
CONICVT
FONDECVT
PROYECTO FONDECYT REGULAR
2007
3 años
10581
AÑO DE EJECUCIÓN
DURACIÓN
NÚMERO PROYECTO
10184608-3
Isolde Gina Rojas Rudolph
RUT
INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE
81494400-k
Departamento de Estomatología Quirúrgica, Facultad de
Odontología, Universidad de Concepción
FONO
DIRECCION
41-220712218204385
Roosevelt 1550
E-mail
grojas@udec.cl
PERÍODO QUE INFORMA
15 /
03
103 / 2008
14
/2005
HASTA
DESDE
CONTENIDO
(MARQUE CON UNA X EL CASILLERO QUE CORRESPONDA)
NO INCLUYE
INCLUYE
Formulario de Informe Final
Publicaciones
Resumen de Tesis Título/Grado
X
X
X
X
Información acerca de inventos y patentes
Otros (especificar)
Informe Incentivo Coop. Internacional (Si corresponde)
Firma Investigador(a) Responsable
Fecha:
LLJ
(>3y
CONTENIDO DEL INFORME FINAL 1. CUMPLIMIENTO DE LOS OB)ETIVOS PLANTEADOS EN EL PROYECTO.
Marque con una X el casillero correspondiente.
Cumplimiento
Objetivos
Total
Objetivo 1. Obtención de muestras x
de quellitis actínica, labio normal y
mucosa normal
de X
caracterización
1.
Objetivo
lesiones de QA de acuerdo a contenido
de MCs, alteraciones epiteliales y
conectivas
Implementación, X
2.
Objetivo
de
ejecución
Estandarización
y
estudios inmunohistoquímicos para
la medición de la expresión de PAR-2
y COX-2 a nivel de proteína
Implementación, X
2.
Objetivo
Estandarización y ejecución de RTPCR para la medición de la expresión
de PAR-2 y COX-2 a nivel de RNA
mensajero
Objetivos 2 y 3. Implementación,
estandarización y ejecución de la
por
PGE2
de
medición
radioinmunoensayo (RIE)
Implementación, X
3.
Objetivo
de
ejecución
estandarización
y
técnicas de irradiación de cultivos
celulares
Implementación, X
3.
Objetivo
de
ejecución
y
estandarización
técnicas de RIE para la medición de
histamina y triptasa
Implementación
3.
Objetivo
de
desarrollo
estandarización
y
celulares
cultivos
en
estudios
(fibroblastos y queratinocitos) para la
determinación del efecto de UVB
sobre
triptasa
mastocitos
y
proliferación y expresión de PAR-2 y
COX-2 a nivel de RNAm y proteína
de X
Análisis
Obtención
y
de
redacción
y
resultados,
manuscritos
Parcial
No
el cumplimiento
Fundamentar
parcial o incumplimiento
Actualmente se cuenta con un banco de
tejidos de 44 QA, 21 LN y 11 mucosas
normales
se ha realizado aun la medición de
PGE2 por RIE en cultivos celulares o en
tejidos (explicado en punto 1 de otros
aspectos)
X
No
x
Los estudios están completos para
fibroblastos, pero no se han realizado para
queratinocitos ya que no hubo éxito en el
cultivo de la línea celular de queratinocitos
adquirida (se intentó 2 veces) (explicado
en
extensión en punto 2 de otros
Otro(s) aspecto(s) que Ud. considere importante(s) en la evaluación del cumplimiento de los
objetivos planteados en la propuesta original o en las modificaciones autorizadas por los
Consejos.
A continuación procedo a explicar las razones del cumplimiento parcial de dos de las actividades propuestas
para los objetivos del proyecto, una correspondiente a objetivos 2 y 3, y la otra a objetivo 3.
1. Implementación, estandarización y ejecución de la medición de PGE2 por radioinmunoensayo (RIE) en
tejidos y sobrenadantes de cultivos celulares: durante el tercer año se intentó realizar la extraccion de PGs
de dos biopsias humanas, sin embargo, resultó muy difícil pulverizar los tejidos mucosos ya que son
altamente fibrosos. Además no se pudo proseguir con la técnica ya que fue difícil coordinar la utilización de
un equipo esencial para esta técnica de extracción de tejidos que es el speed Vac. Cabe destacar que este
equipo se solicitó a Fondecyt pero no fue otorgado.
b) En cultivos celulares: se espera desarrollar durante el primer semestre del año 2008, por el alumno tesista
Sr. Roger Yefi, se cuenta con los sobrenadantes almacenados a -80 0 C de cada experimento.
2. Si bien se adquirió una línea celular de cultivos primarios de queratinocitos humanos no tuvimos éxito en
su cultivo, se intentó una segunda vez sin éxito. Además no pudimos proseguir con la obtención de cultivos
primarios de queratinocitos de explantes de mucosa bucal, ya que se detectó una incompatibilidad en el
crecimiento de las células LAD2 en presencia de explantes, por lo que se necesita otra estufa de cultivo. Por
esto se dio prioridad a desarrollar los experimentos con los cultivos primarios de fibroblastos que ya se
habían obtenido.
Además cabe destacar que este proyecto estaba planificado para 4 años, de los que sólo se aprobaron tres,
se ha trabajado intensamente cada año del proyecto, y se espera completar durante el primer semestre las
actividades antes mencionadas.
3
II. RESULTADOS OBTENIDOS
Describa brevemente los resultados obtenidos en el proyecto en un máximo de cinco páginas, tamaño
carta, espacio seguido. Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados.
Relacione las publicaciones y/o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. Incluya en
anexos, la información de apoyo que estime pertinente y necesaria para la evaluación.
Objetivo 1: Caracterizar las lesiones de Queilitis actínica (QA) de acuerdo a su contenido de
mastocitos (MCs), y alteraciones morfofuncionales a nivel epitelial y conectivo
1. Determinar la densidad y distribución de MCs de acuerdo a su contenido de proteasas, triptasa y
quimasa, en lesiones de QA y compararlos con tejidos normales
2. Determinar el daño epitelial a través de la expresión de proteínas reguladoras del ciclo celular en QA
y compararlos con tejidos normales
3. Determinar el daño en el tejido conectivo a través de la cuantificación de la elastosis en lesiones de
QA mediante técnicas histoquímicas
1. Aumento de la densidad de MCs triptasa-positivos a nivel papilar o subepiteilal, y a nivel
reticular en QA (anexo resultados 1 figuras 6 y 8 y anexo de resultados II, figuras 2 y 3):
similar a lo publicado por nuestro grupo previamente usando un tamaño muestra¡ menor (QA n=15;
labio normal n=8) (Rojas et al. 2004, 3 Oral Pathol & Med), se observó en las nuevas biopsias un
aumento significativo de mastocitos triptasa -positivos y quimasa -positivos en lesiones de QA
comparados con tejidos normales (QA n=45; labio normal n=24). En QA los MCs triptasa-positivos se
encontraban también aumentados a nivel subepitelial o papilar, en comparación con la mayor
densidad a nivel reticular en tejidos normales, lo que sugería una interacción de triptasa con
receptores a nivel epitelial, y una contribución del MC a inflamación y daño conectivo.
2. Aumento del número de fibroblastos y de elastosis en lesiones de QA en comparación con
labio normal, y su asociación con mastocitos tri ptasa -positivos (Anexo resultados 1,
figuras 1-10): Estos estudios fueron realizados por la alumna de tesis de Magíster, la Dra. Yadira
Boza, cuya defensa de tesis fue rendida en Agosto de 2007 (anexo 4.1). Utilizando 33 muestras de
QA y 16 muestras de LN, se detectó la densidad de fibras colágenas y elásticas mediante el método
histoquímico de Verhoeff Van Gieson y análisis morfométrico y mediante RT-PCR para detectar
expresión a nivel RNA mensajero de colágeno 1 y III, y elastina. Los resultados mostraron un
aumento significativo de las fibras elásticas en papilar y reticular de las muestras de QA en
comparación con LN, con un aumento de la proporción de fibras elásticas/fibras colágenas en QA
(cercano a 1:1 en comparación con la proporción de 1:2 en labio normal). No se detectaron
diferencias significativas a nivel de RNAm en la expresión de colágeno y elastina. Además se realizó
tinción inmunohistoquímica doble de fibroblastos y MCs triptasa-positivos, encontrándose que ambos
tipos celulares estaban significativamente aumentados en las lesiones de QA en comparación con
labio normal, con una proporción fibroblasto-MC de 2:1. Análisis de correlación de Pearson
mostraron una asociación significativa entre la densidad de fibras elásticas y la densidad de
fibroblastos y mastocitos. Estos resultados sugieren un rol preponderante de la interacción
mastocito-fibroblasto en la patogénesis de la etastosis en la QA, el que se analizó en el objetivo III de
este proyecto.
3. Alteración de la expresión de proteínas reguladoras del ciclo celular a nivel epitelial en QA
(anexo de resultados 1, figuras 11-13): En estudios preliminares de este proyecto, en que se
utilizó un tamaño muestra( menor (QA n=13; LN n=7), nuestro grupo encontró que en QA había un
aumento de la expresión de la proteína pro-apotótica p53 y una disminución de la proteína antiapoptótica bcl-2 en comparación con labios normales, sugiriendo mayor actividad pro-apoptótica en
QA (Martínez et al 2005, J Oral Pathol & Med). Los resultados del presente proyecto, utilizaron un
tamaño muestra¡ mayor (QA n=26; LN n=16), y se analizó la expresión de genes regulados por p53,
como el anti-apoptótico mdm-2 (que a su vez es inhibidor de p53) y el pro-apoptótico o inductor de
arresto celular p21, por inmunohistoquímica. Se utilizaron secciones seriadas y colocalizadas de QA y
LN, encontrándose una co-expresión aumentada de p53 y mdm-2 a nivel epitelial en QA, y ausencia
de diferencias en la expresión de p21 entre QA y LN. Análisis de correlación de Spearmann mostraron
4
que en LN la expresión de p21 y mdm-2 estaban asociadas entre sí y a la expresión de p53, sin
embargo, en QA sólo había una asociación entre la expresión de p53 y mdm-2, y falta de asociación
entre p53 y p21, así como entre mdm-2 y p21. La importancia de estos resultados radica en que
sugieren una alteración de la función de p53 en QA, ya que un aumento de p53 no llevaría a un
aumento de p21, proteína necesaria para inducir arresto celular y reparación del daño genómico.
Realizando análisis de regresión logística se encontró que un aumento de la expresión de p53 es un
indicador de la presencia de esta lesión premaligna en el labio. Estos resultados fueron aceptados
para publicación en la revista Oral Oncology (se adjunta manuscrito en anexo 1.1).
Objetivo II: Caracterizar la expresión de PAR-2, COX-2 y la producción de PGE2, en QA y
compararlas con tejidos normales
1. Determinar y cuantificar la expresión de PAR-2 y COX-2 a nivel de RNA mensajero en lesiones de QA
y tejidos normales por RT-PCR.
2. Determinar y cuantificar la expresión de COX-2 a nivel de RNA mensajero en lesiones de QA y
tejidos normales por inmunohistoquímica.
3. Cuantificar la expresión de PGE2 en QA y tejidos normales por radioinmunoensayo.
4. Correlacionar la expresión de PAR-2, COX-2 y la producción de PGE2 con la densidad de mastocitos,
expresión de marcadores apoptóticos a nivel epitelial y elastosis en lesiones de QA
Análisis de los resultados del Objetivo II mostraron:
Aumento de la expresión de PAR-2 en QA (anexo resultados II, figuras 1 y 2). Un total de 45
muestras de QA y 24 muestras de labio normal fueron analizadas por inmunohistoquímica, y de éstas
un total de 13 muestras de QA y 12 de labio normal fueron analizadas por RT-PCR. Un aumento
significativo en la expresión de PAR-2, tanto a nivel de proteína como de RNA mensajero
(normalizado con GAPDH) se encontró en QA en comparación con labio normal. PAR-2 se observó en
el estrato basa¡ epitelial en muestras de labio normal, y en casi todo el espesor del epitelio en QA
(manuscrito en preparación, anexo 1.3).
Aumento de la expresión de COX-2 en QA (anexo resultados II, figuras 1 y 2). Un total de 45
muestras de QA y 24 muestras de labio normal fueron analizadas por inrnunohistoquímica, y de éstas
un total de 13 muestras de QA y 12 de labio normal fueron analizadas por RT-PCR. A nivel de RNA
mensajero se encontró un incremento de 1,6 veces en la expresión de COX-2 en QA en relación al
labio normal, sin alcanzar significancia. A nivel de proteína se observó un aumento significativo en la
expresión de COX-2 en QA en comparación con labio normal. COX-2 se observó en el estrato basa¡
epitelial en muestras de labio normal, y en casi todo el espesor del epitelio en QA (manuscrito en
preparación, anexo 1.3).
3. Co-expresión epitelial de PAR-2 y COX-2, y su correlación entre sí y con la densidad de MCs
triptasa-positivos en labio normal y QA ( anexo de resultados II figuras 2-4). Tanto PAR-2,
COX-2 y triptasa fueron detectados en cortes seriados co-localizados de labio normal y QA, lo que
permitió detectar una co-expresión de COX-2 y PAR-2 a nivel epitelial, y subyacente a nivel
subepitelial se observó una alta densidad de MCs triptasa -positivos en QA. Los niveles de PAR-2 y
COX-2 detectados por inmunohistoqu¡mica eran no detectables o bajos en labio normal, y moderados
a elevados en QA. Análisis de correlación de Spearmann mostraron una asociación significativa en la
expresión de PAR-2 y COX-2, y entre COX-2 y la densidad de mastocitos triptasa-positivos. Análisis
de regresión logística (método forward stepwise de Wald) mostró que COX-2 es un marcador
predictor de QA. Estos resultados sugieren una interacción de triptasa con el receptor PAR-2 en
queratinocitos del labio, lo que podría estar contribuyendo a un aumento en la expresión de COX-2
en QA, como se ha demostrado en diversos estudios de cánceres gastrointestinales, alteraciones
fibroproliferativas y de las vías respiratorias. Con estos resultados se redactó una publicación que
está lista para ser enviada a la revista Oral Oncology (anexo 1.3). La hipótesis de activación de PAR2 por triptasa la cual llevaría a un aumento de la expresión de COX-2 está siendo probada en el
objetivo III, por el tesista Roger Yefl.
4. No se han obtenido los resultados de medición de PGE2. Tuvimos la limitante de falta de
acceso a un speed y ac que era necesario para la técnica de extracción de PGs desde tejidos, lo que
no nos permitió realizar en el plazo del proyecto esta técnica.
Otros análisis de correlación: analizando otras posibles correlaciones entre COX-2, PAR-2 y MCs
triptasa-positivos con densidad de fibroblastos, expresión de p53 y elastosis, sólo se encontró una
asociación estadísticamente significativa entre la expresión de p53 y la densidad de fibroblastos en
tejidos de labio normal, la cual no se observó en QA. Además, utilizando todos estos marcadores en
un modelo de regresión logística (forward stepwise de Wald) se encontró que COX-2 es el marcador
significativo de predicción de QA, lo que resalta la importancia de detectar por inmunohistoquímica
este marcador al momento del diagnóstico. La detección de COX-2 se ha incorporado como parte del
diagnóstico de las lesiones de QA en la clínica de medicina oral de la Facultad de Odontología de la
Universidad de Concepción.
Objetivo III: Determinar el efecto de la interacción MC-fibroblasto y MC-queratinocito en
presencia de luz UVB sobre la expresión de PAR-2, COX-2 y la producción de PGE2 in Vitro
1. Determinar los efectos de la luz UVB sobre la expresión de PAR-2 y COX-2 y producción de PGE2 en
queratinocitos y fibroblastos humanos
2. Determinar los efectos de la luz UVB sobre la liberación por parte del MC de triptasa y otros
mediadores del daño actínico (ej. Histamina, beta-hexosaminidasa)
3. Determinar el efecto de triptasa y medio condicionado de MCs irradiados con luz UVB sobre
queratinocitos y fibroblastos con respecto a su expresión de OAR-2, COX-2 y su producción de PGE2
4. Realizar co-cultivos de MCs con fibroblastos o con queratinocitos en presencia de luz UVB, y
determinar los efectos de esta interacción sobre la expresión de PAR-2, COX-2 y la producción de
PGE2 en presencia de inhibidores de triptasa
Este objetivo se está llevando a cabo por el alumno tesista de la carrera de Bioquímica, Sr. Roger Vefi, el cual
terminaría su tesis a mediados de este año. Cabe destacar que este proyecto Fondecyt originalmente fue
planificado para 4 años, de los cuales sólo se financiaron tres. Durante el desarrollo del proyecto se debieron
implementar y estandarizar gran parte de las técnicas y métodos que se están utilizando en este objetivo.
Esto incluye, obtención de cultivos primarios de fibroblastos a partir de explantes, cultivo y expansión de
líneas celulares de mastocitos y queratinocitos, implementación y caracterización de la técnica de irradiación
de cultivos celulares. Además en respuesta a los resultados obtenidos en los primeros 2 objetivos (aumento
de la densidad de fibroblastos en QA y su asociación con MCs), se consideró importante incluir estudios de
proliferación celular para los cuales se están utilizando 2 técnicas, incorporación de timidina tritiada y ensayo
MU.
Como se mencionó anteriormente, no se tuvo éxito en el desarrollo de cultivos primarios y líneas celulares de
queratinocitos, por lo que no se incluyen resultados con este tipo celular. Por esta razón debió modificarse la
hipótesis y objetivos de la tesis del alumno Roger Yefi, la cual se concentra en la interacción mastocitofibroblasto in vitro (se adjunta resumen actualizado de la tesis) lo que cuenta con la aprobación de los
miembros de la comisión. Además la medición de PGs está pendiente, pero se cuenta con los sobrenadantes
respectivos, por lo que se espera poder realizar las mediciones en el transcurso de este semestre.
Por lo tanto los resultados que se discuten a continuación fueron obtenidos con cultivos primarios de
fibroblastos y con la línea celular de mastocitos LAD2.
1. La Irradiación con luz UVB de fibroblastos de mucosa oral inhibe su proliferación en las
primeras 48 horas post-irradiación (anexo de resultados III, figs 1-3). Se utilizaron
fibroblastos sincronizados y no sincronizados, cuya proliferación fue medida por incorporación de
timidita tritiada y ensayo MU, observándose una disminución significativa de la proliferación postirradiación con dosis de 300 y 600 J/m2 de luz UVB. No se observaron efectos con dosis menores de
irradiación UVB (data no mostrada), por lo que se eligió seguir trabajando con dosis de 600 3/m2.
2. La irradiación con luz UVB de fibroblastos de mucosa oral altera la expresión de genes proInflamatorios y de la matriz extracelular (MEC) (anexo de resultados III, figuras 4-8).
Análisis de los niveles de expresión a nivel de RNA mensajero de genes pro-inflamatorios como PAR2 y COX-2, y genes de la MEC como colágeno (tipo 1 y 111) y elastina, mostró que fibroblastos de
mucosa oral normales expresan estos genes. Además se pudo detectar por inmunocitoquímica la
expresión de COX-2, vimentina y pro¡ il-4-hidroxilasa, y se está trabajando en detectar PAR-2. La
rei
irradiación con luz UVB induce un aumento significativo de la expresión de RNA mensajero para PAR2 a las 9 horas post-irradiación (en fibroblastos no sincronizados), de COX-2 a las 12 horas postirradiación (fibroblastos sincronizados) y de elastina a las 36 horas post irradiación (fibroblastos no
sincronizados). No se encontraron diferencias en la expresión de colágeno entre fíbroblastos
irradiados y no irradiados.
3. La activación de mastocitos LAD2 resulta en la liberación de beta-hexosamiflidasa y
triptasa (anexo de resultados III figuras 9-12). Para medir activación de mastocitos se están
utilizando dos técnicas, una colorimétrica de liberación de beta-hexosaminidasa, y la otra de
liberación de triptasa por RIE. Los estudios preliminares se están realizando con betahexosaminidasa, un mediador almacenado en los gránulos del MC y que se libera junto a histamina y
triptasa, cuya medición es de bajo costo. Se han realizado estudios preliminares de liberación de
beta-hexosaminidaSa por MCs irradiados por UVB y se ha encontrado un aumento de la liberación de
beta-hexosarninidasa con 3003/m2. Además se ha medido la liberación de beta-hexosaminidaSa en
respuesta a la estimulación de células LAD2 con compuesto 48/80. Se encontró que UVB más 48/80
aumenta la liberación de beta-hexosamiflidasa. Además se encontró que el compuesto 48/80 en
concentraciones del rango de 0.16-1 xg/mi induce liberación de triptasa por mastocitos LAD-2.
Además se caracterizó el contenido de histamina de esta línea celular; publicado en Rudolph et al
2008, anexo 1.2).
4. El medio condicionado de mastocitos LAD2 activados por compuesto 48180 estimula la
proliferación de fibroblastos irradiados con luz UVB a niveles similares al control (anexo de
resultados III, figuras 13 y 14). Medio condicionado de mastocitos activados por compuesto
48/80 fue agreagado a fibroblastos en cultivos con o sin irradiación UVB. Se utilizaron distintas
concentraciones de mastocitos, desde la relación fibroblasto-mastocito de 2:1, que es lo que se
observa in vivo, a relaciones de 10.000:1. Se observó que en las relaciones de 2:1, 100:1, 1000:1 y
10.000:1, el medio condicionado de MCs estimulaba un aumento significativo de la proliferación de
fibroblastos irradiados con UVB en relación a fibroblastos irradiados sin medio condicionado.
S. Triptasa recombinante estimula la proliferación de fibroblastos irradiados con luz UVB a
niveles similares o superiores al control (anexo de resultados III, figuras 15 y 16).
Utilizando fibroblastos sincronizados y no sincronizados se midió proliferación por el ensayo MU y de
incorporación de timidita tritiada, encontrándose un aumento significativo de la proliferación de
fibroblastos irradiados a las 24 horas post-irradiación.
6. Efecto del medio condicionado de mastocitos y triptasa sobre la expresión de genes
proinflamatorios y de la MEC por fibroblastos irradiados con UVB (anexo de resultados III,
figura 17-19). Utilizando la técnica de RT-PCR se midió la expresión de PAR-2, COX-2, colágeno (1 y
III) y elastina en fibrobiastos incubados con triptasa o medio condicionado de MCs. De los
experimentos realizados, sólo se encontró un aumento significativo en la expresión de elastina a las
24 horas post-irradiación de fibroblastos incubados con medio condicionado de MCs en relación a los
controles no irradiados y a los fibroblastos irradiados. Hasta el momento no se han encontrado
diferencias significativas en la expresión de los otros mediadores, por lo que se está realizando un
número mayor de experimentos.
7. Estudios a realizar durante el primer semestre del 2008: se medirá la liberación de PGE2 por
parte de fibroblastos irradiados en presencia o ausencia de medio condicionado de MCs y triptasa. Se
utilizarán inhibidores de triptasa y PAR-2 para analizar el posible rol de la vía triptasa/PAR-2/COX2/PGE2 en la proliferación de fibroblastos de mucosa oral.
* ------------
7
III. PRODUCTOS GENERADOS POR EL PROYECTO
En esta sección debe incluir todo documento o material cuyo contenido corresponda substancialmente a los
objetivos del proyecto que se informa y en los que se indique el NO del proyecto FONDECYT. Aténgase a los
formatos que se incluyen para cada tipo de producto generado. Adjunte copia de los documentos no
enviados previamente a FONDECYT. Utilice las hojas adicionales que sean necesarias.
Si Ud. tiene un proyecto de Incentivo a la Cooperación Internacional, destaque con (c) las
publicaciones generadas como producto del mismo a continuación de las que corresponden al
Regular
1. Artículos en revistas científicas nacionales o extranjeras con Comité Editorial.
Marque con una 'EX" lo que corresponda. Para trabajos En Prensa! Aceptados/ Enviados adjunte copia
de carta de aceptación o de envío.
Autor(a)(es/as)
Título (Idioma Original)
A Martínez, U Brethauer, J Borlando, ML Spencer, IG Rojas* (anexo 1.1)
Epithelial expression of p53, mdm-2 and p21 in normal hp and actinic cheihitis
Nombre Completo de la
Revista.
Oral Oncology
Ref. bibliográfica
Pág. _______ (publicado online en
NO
Año: 2008 Vol.
http://intl.elsevierhealth.com/journals/oron/)
LI En preparación
Enviada
X Publicada ¡En LI Aceptada
Prensa
Proyecto DIUC 204.103.015-1.0
Estado de la publicación a
la fecha.*
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
Autor(a)(es/as)
Título (Idioma Original)
E
MI Rudolph, Y Boza, R Yefl, S Luza, E Andrews, AB Penissi, P Garrido, IG
Rojas (anexo 1.2)
The influence of mast cell mediators on migration of SW756 on
Cervical carcinoma celis
Nombre Completo de la
Revista.
Journal of Pharmacological Science
Ref. bibliográfica
Año:2008 Vol. 106
Estado de la publicación a
la fecha.*
O Enviada
x Publicada ¡En LI Aceptada
Prensa
Fondecyt 1020458 y DIUC 205.32.13-1
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
Autor(a)(es/as)
Título (Idioma Original)
Pág. 208-218
O En preparación
Rojas IG*, Martínez A, Brethauer U, Grez P, Yefi R, Luza S, Marchesani E,
Rudolph MI (anexo 1.3)
COX-2 expression In Actinic Cheilitis and its association with PAR-2 and
tryptase-positive mast cells
Nombre Completo de la
Revista.
Oral Oncology
Ref. bibliográfica
Año:
Estado de la publicación a
la fecha.*
LI
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
NO 2
N°
Publicada
LI Aceptada
¡En Prensa
DIUC 203103011-1.0.
8
Pág.
O Enviada
X En
preparación
Autor(a)(es/as)
IG Rojas & MI Rudolph.
Título (Idioma Original)
El Mastocito y sus proteasas en inflamación Oral
Nombre Completo de la
Revista.
Ref. bibliográfica
Estado de la publicación a
la fecha.*
Revista Chilena de Periodoncia y Oseointegración
Año:2005 Vol. 2 N° 2 Pág. 18-23
O Aceptada
X Publicada
¡En Prensa
O Enviada
,X En
préparación
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
Autor(es)
Spencer ML, Retamal 1, Edwards R, Ortega J, Martínez MA, Rojas IG.
Título del Artículo
Increased microvascular density is associated with tryptase during hp
carcinogenesis
Journal of Oral Pathology and Medicine
Nombre Completo de la
Revista.
Ref. bibliográfica
Año:
Estado de la publicación a
la fecha.*
LI
Publicada
¡En Prensa
/
Pág.
N°
O Enviada
O Aceptada
En
preparación
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
Autor(es)
Boza Y, Rudolph MI, Luza S, Rojas IG.
Título del Artículo
Elastosis is associated with increased f'ibroblast and mast cell density in
actinic cheilitis
i Oral Pathology and Medicine
Nombre Completo de la
Revista.
Ref. bibliográfica
Estado de la publicación a O Publicada /En
la fecha.*
Prensa
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
Pág.
Año:
O Enviada
O Aceptada
I En
preparación
Título del Artículo
Characterization of mast cell subpoputations in oral hichen planus
Autor(es)
U Brethauer, A Martínez, MI Rudolph, F Marchesarii, IG Rojas
Nombre Completo de la
Revista.
J Oral Pathology and Medicine
Ref. bibliográfica
Año:
Estado de la publicación a
la fecha.*
O Publicada /En
Prensa
Otras fuentes de
financiamiento, si las hay
O Aceptada
Pág.
O Enviada
I1 En
preparación
-
2. Otras publicaciones/ productos.
Autor(a)(es/as)
Dictante
Título (Idioma Original)
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X" lo que
corresponda
Gina Rojas Rudolph
Conferencia "inflamación y carcinogénesis de labio inducida por luz
ultravioleta" (anexo 2.1)
Monografía
Libro
Capítulo de Libro
Mapa
Exposición de Arte
Otro. Especificar: Conferencia
E
fl
E
E
E
E
E
E
Seminario ¡Taller ¡Curso
Informe Técnico
Software
Patente
Editor(es) (Libros o Capítulos
Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
leras Jornadas de Investigación de la Facultad de Odontología de la
Universidad de Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
de
Ciudad: Concepción
Fecha: 4 de Enero de 2008
Autor(a)(es/as)
Dictante
Título (Idioma Original)
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X- lo que
corresponda
Gina Rojas Rudolph
Conferencia "inflamación y carcinogénesis de labio inducida por luz
ultravioleta: estudios in vivo e in vitro " (anexo 2,2)
E Seminario ¡Taller /Curso
E Monografía
Libro
E Informe Técnico
E
E Software
E Capítulo de Libro
E Patente
E Mapa
Exposición
de
Arte
E
Otro. Especificar: Conferencia
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial/
Organización
Simposio Medicina y Patología Oral, XX Reunión Anual IADR División Chile
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Santiago
Fecha: 9 de Noviembre de 2007
10
Autor(a)(es/as)
Dictante
Título (Idioma Original)
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X" lo que
corresponda
Pamela Davis
Conferencia "Caracterización de la expresión de Triptasa, COX-2 y PAR-2
en tejidos con inflamación periodontal" (anexo 2.3)
Monografía
fl Seminario /Taller /Curso
E] Informe Técnico
LI Libro
LI Software
LI Capítulo de Libro
E] Mapa
LI Patente
Arte
Exposición
de
LI
Otro, Especificar: Conferencia
E
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial/
Organización
II Curso de Metodología de Investigación en Periodoncia
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Santiago
Fecha: 7 de Diciembre de 2007
Autor(a)(es/as)
Dictante
Título (Idioma Original)
Gina Rojas Rudolph
Tipo de publicación o
producto
LI
E]
E]
LI
Marque con una X" lo que
corresponda
Charla 1000 Científicos, 1000 Aulas de EXPLORA CONICYT: 'Cáncer
bucal, sus causas y cómo prevenirlo" (anexo 2.4)
Monografía
Libro
Capítulo de Libro
Mapa
[1] Exposición de Arte
Otro. Especificar: Charla
E] Seminario ¡Taller /Curso
E] Informe Técnico
LI Software
E] Patente
Editor(es) (Libros o Capítulos
Libros)
de
Nombre de la Editorial!
Organización
Colegio San Pedro Nolasco, Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Concepción
Fecha: 10 de Octubre 2007
Áir(a)(es/as)
Dictante
Título (Idioma Original)
1
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X - lo que
corresponda
Yadira Boza Orea muno
Conferencia "Caracterización de la elastosis y su asociación con la
interacción mastocito-fibroblasto en quellitis actínica" (Anexo 2.5)
E Seminario ¡Taller /Curso
Monografía
E Informe Técnico
E Libro
E Software
Capitulo
de
Libro
E
E Patente
Mapa
E
E Exposición de Arte
Otro. Especificar: Conferencia
E
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Facultad de Odontología, Universidad de Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Concepción
Fecha: 27 de Julio de 2007
Autor(a)(es/as)
Dictante
Gina Rojas Rudolph
Título (Idioma Original)
"Curso de Actualización en inmunología Oral: Acercando la ciencia Básica
a la Clínica" (anexo 2.6)
Tipo de publicación o
producto
E Monografía
E Libro
E Capítulo de Libro
E Mapa
E Exposición de Arte
Marque con una 'X" lo que
corresponda
x Seminario ¡Taller /Curso
E Informe Técnico
E Software
E Patente
Otro. Especificar: Conferencia
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Colegio de Cirujano Dentistas de Chile, filial Concepción.
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
L
Ciudad: Concepción
Fecha: 5 y 12 de Mayo de 2007 (21 horas)
12
Autor(a)(es/aS)
Dictante
Alejandra Martínez
Título (Idioma Original)
La realidad del cáncer bucal en América latina(Anexo 2.7)
Tipo de publicación o
producto
E Monografía
E Libro
E Capítulo de Libro
E Mapa
E Exposición de Arte
Marque con una -X- lo que
corresponda
x Seminario ¡Taller ¡Curso
E Informe Técnico
E Software
E Patente
Otro. Especificar: Conferencia
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Facultad de Odontología, Universidad de Concepcón y Laboratorio Johnson
&Johnson
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Concepción
Fecha: 4 de Mayo de 2007
Autor(es)
Dra. Isolde Gina Rojas Rudolph
Título
'Inflammation and hp carcinogenesiS"
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X" lo que
corresponda
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Lugar y Fecha de Publicación
X Seminario ¡Taller! Curso
Monografía
Informe Técnico
Libro
Software
Capítulo de Libro
Patente
Mapa
Exposición de Arte
Otro. Especificar: Presentación en Inglés
fl
E
E
n
E
E
Presentacion de Líneas de Investigacion de la Universidad de Concepción
al Dr. Douglas E. Vaughan, Chairman de la División Cardiovascular de
Vanderbilt University (Programa de Biomedicina)
Ciudad: Concepción
País: Chile
Fecha: 27 de Noviembre de 2006
13
Autor(es)
Dra. IG Rojas
Título
Conferencia: "Bases celulares y moleculares del desarrollo del cáncer oral"
Tipo de publicación o
producto
E
E
fl
Marque con una "X"Io que
corresponda
Monografía
Libro
Capítulo de Libro
Mapa
Exposición de Arte
Otro. Especificar: Conferencia
E
E
E
E
E
E
Seminario /Taller /Curso
Informe Técnico
Software
Patente
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial/
Organización
Salón Dental Chile
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Concepción
Fecha: 9 Noviembre 2006
Dra, Isolde Gina Rojas Rudolph
Título
Conferencia: "Rol del mastocito en la patogénesis de la enfermedad
periodontal"
Tipo de publicación o
producto
E
E
D
E
E
Marque con una "X- lo que
corresponda
Monografía
Libro
Capítulo de Libro
Mapa
Exposición de Arte
Otro. Especificar: Conferencia
E
E
LI
O
Seminario ¡Taller! Curso
Informe Técnico
Software
Patente
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Reunión de la Sociedad de Periodoncia de Chile filial Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Concepción
Fecha: 30 Septiembre 2006
14
---------------------------Dra. Isolde Gina Rojas Rudolph
Autor(es)
Título
Tipo de publicación o
producto
Marque con una "X" lo que
corresponda
Conferencia: "Inflamación y Carcinogénesis de labio inducida por luz
ultravioleta"
LI Seminario /Taller/ Curso
O Monografía
¡j Informe Técnico
LI Libro
LI Software
Capítulo
de
Libro
o
LI Patente
LI Mapa
- LI Exposición de Arte
Otro. Especificar: Conferencia
Editor(es) (Libros o Capítulos
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Primera jornada de investigación en Biomedicina de la Universidad de
Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Fecha: 10
de
Ciudad: Concepción
Junio 2006
1
Autor(es)
IG Rojas
Título
"Estudiando la carcinogéneSiS oral en la Facultad de Odontología de la
Universidad de Concepción"
Tipo de publicación o
producto
Marque con una 'X" lo que
corresponda
Monografía
LI Libro
E Capítulo de Libro
LI Mapa
Ex posición de Arte
Otro. Especificar:
x Seminario /Taller /Curso
[] Informe Técnico
E Software
LI Patente
Semana Nacional de la Ciencia y la Tecnología del programa EXPLORA.
Editor(es) (Libros o Capítulos XI
de Libros)
Nombre de la Editorial!
Organización
Liceo La Asunción
Lugar y Fecha de Publicación
País: Chile
Ciudad: Talcahuano
Fecha: Oct. 2005
15
IG Rojas
[Autor(es)
iiiio
Rol del mastocito en la carcinogénesiS oral.
Tipo de publicación o
producto
fl
LI
EJ
EJ
Marque con una "X" lo que
corresponda
Seminario ¡Tallen Curso
fl Informe Técnico
EJ Software
LI Patente
Monografía
Libro
Capitulo de Libro
Mapa
LI Exposición de Arte
Otro. Especificar:
X
Editor(es) (Libros o Capítulos Dictada a los alumnos del Programa de Doctorado en Ciencias Biológicas
de Libros)
Nombre de la Editorial/
Organización
Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad de Concepción
Lugar y Fecha de Publicación
Ciudad: Concepción
País: Chile
Fecha: Marzo-2005
Adjunte copia del resumen o
3. p resentaciones a Congresos Nacionales e Internacionales.
no la ha enviado previamente.
texto de la ponencia y de la tapa de/libro de Resúmenes, si
Autor(a)(es/aS)
MARTÍNEZ A*, BRETHAUER U, BORLANDO
3,
SPENCER ML, ROJAS IG.
Expresión Epitelial de p53, mdm-2 y p21 en Labio Normal y Queilitis Actínica
(anexo 3.1)
Nombre del Congreso XX Reunión Anual de la International Association for Dental Research (IADR)
División Chile
Fecha: 8-10 Diciembre
Ciudad: Santiago
País: Chile
Lugar y Fecha
2007
Título (Idioma
Original)
Autor(a)(es/aS)
SALAZAR P, WENDLER M*, MARTINEZ A, GREZ P, ROJAS IG.
Título (Idioma
Original)
Aumento De La Densidad De Plasmocitos En Queilitis Actínica. (anexo 3.2)
Nombre del Congreso XX Reunión Anual de la International Association for Dental Research (IADR)
División Chile
Fecha: 8-10 Diciembre
Ciudad: Santiago
País: Chile
Lugar y Fecha
2007
[Ár(a)(es/as)
RETAMAL IN*, AZOCAR F, DURÁN C, SPENCER M, ROJAS IG.
Caracterización De Angiogénesis En Lesiones Premalignas Y Malignas De Labio.
(anexo 3.3)
Nombre del Congreso XX Reunión Anual de la International Associatiofl for Dental Research (IADR)
División Chile
Fecha: 8-10 Diciembre
Ciudad: Santiago
País: Chile
Lugar y Fecha
/
2007
Título (Idioma
Original)
11,1
Autor(a)(es/aS)
MAURELIA MA*, LOBO O, RICKE CB, ARAYA C, MARTÍNEZ A, ROJAS IG.
Frecuencia De Quellitis Actínica En Pescadores De Arauco, VIII Región. (anexo1
3.4)
Nombre del Congreso XX Reunión Anual de la International AssociatiOn for Dental Research (IADR)
j
División Chile
Diciembre
Fecha: 8-10
Ciudad: Santiago
País: Chile
Lugar y Fecha
2007
Título (Idio ma
Original)
Autor(a)(es/aS)
R Yefl, Y Boza, MI Rudolph, IG Rojas.
Título (Idioma
Original)
Efecto de triptasa sobre la proliferación de fibroblastos de la mucosa bucal
irradiados con luz UVB (anexo 3.5)
Nombre del Congreso XXI Reunión Anual de la Sociedad de Biología Celular de Chile
Lugar y Fecha
Autor(a)(es/as)
Título (Idioma
Original)
País: Chile
Fecha: 7-10 de Octubre
M 2007
Ciudad: Pucón
'IG Rojas*, Y Boza, S Luza, TM Oberyszyn, KL Tober, MI Rudolph.
Effects of Ultraviolet B light on fibroblast proliferation and extracellular miix
synthesis during hp carcinogeneSis (anexo 3.6)
Nombre del Congreso 98th Annual Meeting of the American Cancer Association (AACR)
Ciudad: Los
California
Angeles, Fecha: 14-18 de Abril de
2007
Lugar y Fecha
País:
EEUU
Autor(es)
ML Spencer, IN Retamal, RA Edwards, A Martínez, MI Rudolph & IG Rojas
de
Título
Ponencia
Nombre del
Congreso
Lugar y Fecha
Autor(es)
de
Título
Ponencia
Nombre del
Cong reso
Lugar y Fecha
la Increased tryptase-positive mast cells and angiogenesis during Hp carcinogenes
(anexo 3.7)
96 Annual Meeting United States and Canadian Academy of Pathology (USCAP)
País:
EEUU
Ciudad: San Diego, CA
Fecha: Marzo 24-30, 2007
IG Rojas, Martínez A, Grez P, Luza S, Boza Y, Brethauer U, Marchesani F, Rudolph
J
MI.
Aumento
de
la
expresión
de
triptasa,
PAR-2,
y
COX-2
en
queilitis
actínica
la
XIX Reunión anual de la IADR-Chile
País:
Chile
Ciudad: Valparaíso
17
Fecha: 5-7 Octubre de
Boza Y, Rudolph MI, Luza S, Gamonal J, Rojas IG.
Autor(es)
de
Título
Ponencia
Nombre del
Congreso
la Caracterización de la elastosis en lesiones de quellitis actínica
XIX Reunión anual de la IADR-Chile
País:
Lugar y Fecha
Fecha:
2006.
Ciudad: Valparaíso
Chile
la
Variaciones en la expresión de Sindecán-1 durante la carcinogénesis de labio
XIX Reunión anual de la IADR-Chile
País: Chile
Lugar y Fecha
Fecha:
2006
Ciudad: Valparaíso
de
la Caracterización de angiogénesis y su asociación con mastocitos triptasa-positivos
en el cáncer de labio
y Congreso de Odontología
Nombre del
Congreso
Fecha:
Ciudad: Temuco
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
IG Rojas, A Martínez, U Brethauer, F Marchesani, MI Rudolph
de
Título
Ponencia
5-7 Octubre
RA Edwards, M Spencer, A Martínez, IG Rojas.
Autor(es)
de
Título
Ponencia
Octubre de
Martínez A, Spencer M, Grez P, Rojas IG.
Autor(es)
de
Título
Ponencia
Nombre del
Congreso
5-7
la Characterization of tryptase, COX-2 and
premalignant lesions of the lip
16-17 de Junio,
PAR-2 expression in
UV-induced
Nombre del
Congreso
97th Annual Meeting of American Association for Cancer Research (AACR),
Lugar y Fecha
País: EEUU
Autor(es)
Spencer ML, IG Rojas, U Brethauer, 3 Borlando, A Martínez
Título de la Ponencia
Mdm-2 and p21 Expression in Actinic Cheilitis
Ciudad: Washington DC
Fecha: 31 Marzo a 5 Abril
2006
Nombre del Congreso United States and Canadian Academy of Pathology
Lugar y Fecha
País: EEUU
Ciudad: Atlanta, GA
18
Fecha: Feb 11-17, 2006
Autor(es)
IG Rojas, A Martínez, U Brethauer, F Marchesani, P Grez, MI Rudolph.
Título de la Ponencia
Caracterización de la expresión epitelial de COX-2 y PAR-2 en queilitis actínica.
Nombre del Congreso XVIII Reunión anual de la IADR sección Chile
Fecha: 2-3 de Diciembre,
2005.
Ciudad: Santiago
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
A Martínez, U Brethauer, M Spencer, 3 Borlando, F Marchesani, IG Rojas.
Título de la Ponencia
Expresión de p53, p21 y mdrn-2 en queilitis actínica.
Nombre del Congreso XVIII Reunión anual de la IADR sección Chile.
Fecha: 2-3 de Diciembre,
2005.
Ciudad: Santiago
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
RA Edwards, IN Retamal, 3D Ortega, M Spencer, A Martínez, IG Rojas
Título de la Ponencia
Aumento de la angiogénesis y de mastocitos triptasa -positivos en cáncer de labio
Nombre del Congreso XVIII Reunión anual de la IADR sección Chile
Fecha: 2-3 de Diciembre,
2005.
Ciudad: Santiago
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
IN Retamal, 3D Ortega, RA Edwards, M Spencer, A Martínez, IG Rojas
Cuantificación de densidad microvascular y triptasa en queilitis actínica y labio
normal
Nombre del Congreso XVIII Reunión anual de la IADR sección Chile
Título de la Ponencia
Fecha: 2-3 Dic, 2005.
Ciudad: Santiago
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
A Martínez, U Brethauer, M Spencer, P Grez, F Marchesani, AM Vergara, IG Rojas.
Título de la Ponencia
Expresión de Sindecán-1 en queilitis actínica por inmunohistoquímica.
Nombre del Congreso XVIII Reunión anual de la IADR sección Chile
Lugar y Fecha
País: Chile
Ciudad: Santiago
19
-
Fecha: 2-3 Dic, 2005.
Autor(es)
U Brethauer, A Martínez, MI Rudolph, F Marchesani, IG Rojas.
Caracterización de subpoblaciones de mastocitos en liquen plano oral reticular y
atrófico/erosivo
Nombre del Congreso VI Reunión de la Academia Iberoamericana de Patología y Medicina Bucal,
Título de la Ponencia
Ciudad: Guadalajara
Fecha:26-28 Sept 2005
Lugar y Fecha
País: México
Autor(es)
A Martínez, U Brethauer, F Marchesani, ML Spencer, J Borlando, IG Rojas
Título de la Ponencia
Expresión de p53, p21 y mdm-2 en queilitis actínica
Nombre del Congreso VI Reunión de la Academia Iberoamericana de Patología y Medicina Bucal.
Ciudad: Guadalajara
Lugar y Fecha
País: México
Autor(es)
Davis P, Escobar X, Vergara AM, Rojas IG
Fecha: Sept 26-28, 2005
Caracterización de la Expresión de Triptasa, COX-2 y PAR-2 en Inflamación
Periodontal
Nombre del Congreso Primer curso de Metodología de Investigación en Periodoncia
Título de la Ponencia
Ciudad: Santiago
Fecha: Nov. 10-11, 2005
Lugar y Fecha
País: Chile
Autor(es)
A Martínez, U Brethauer, ML Spencer, J Borlando, IG Rojas
Título de la Ponencia
Expresión de p53, p21 y mdm-2 en queilitis actínica
Nombre del Congreso XIV Congreso Chileno de Anatomía Patológica
Lugar y Fecha
País: Chile
Ciudad: Concepción
miel
Fecha: Nov. 10-12, 2005
4. Tesis y /0 Memorias en ejecución y /0 terminadas en el marco del proyecto. Adjunte
copia del resumen no informado anteriormente y certificación de aprobación, si corresponde.
Título de la Tesis
"Caracterización de la elastosis y su asociación con la interacción mastocitofibroblasto en quellitis actínica". (anexo 4.1)
Nombre y Apellidos
del(de la)/de los(las)
Alumno(a)(os/as)
y Tutor(a)
Título! Grado
Alumna: Yadira Boza Oreamuno
Tutor: Isolde Gina Rojas Rudolph
Institución, Facultad,
Departamento
Universidad de Chile, Facultad de Odontología, Departamento de Patología y
Universidad de Concepción.
Tesis desarrollada en la Facultad de Odontología, Depto. Estomatología
Quirúrgica
Lugar
País: Chile
Estado de Tesis
En Ejecución:
Magíster en Ciencias Odontológicas mención Patología y Medicina Oral
Ciudad: Concepción
Terminada: 2 de Agosto de 2007
Fecha de Término: Agosto 2007
Fecha de Inicio: Marzo 2006 Título de la Tesis
"Estudio del efecto de la luz UV sobre la interacción Mastocito-Fibroblasto a
través de la vía Triptasa/PAR-2/COX-2" (anexo 4.2)
Nombre y Apellidos
del(de la)/de los(las)
Alu mno(a )(os/as)
y Tutor(a)
Título! Grado
Alumno: Roger Yefi
Tutor: Isolde Gina Rojas Rudolph
Institución, Facultad,
Departamento
Facultad de Farmacia, Universidad de Concepción
Tesis para _obtener _el_título _profesional _de_Bioquímico
Tesis desarrollada en Facultad de Odontología, Universidad de Concepción
Lugar
País: Chile
Estado de Tesis
En Ejecución:
Ciudad: Concepción
Terminada:
X
Fecha de Inicio: Marzo 2007 21
Fecha de Término:
Título de la Tesis
de
final
(Trabajo
especialización)
Nombre y Apellidos
M /de los Alumno(s)
Y Tutor
ESTUDIO DE LA EXPRESIÓN DE COX-2 Y PAR-2
INFLAMACION GINGIVAL Y PERIODONTAL (anexo 4.3)
EN
TEJIDOS
Alumnas: Pamela Davis y Ximena Escobar
Tutor: Dra. Isolde Gina Rojas Rudolph
Título! Grado
alcanzado
Institución, Facultad,
Departamento
Especialista en Periodoncia e Implantología
Lu gar y Fecha
País: Chile
Estado de Tesis
En Ejecución:
Facultad de Odontología, Universidad de Concepción
Ciudad: Concepción
Terminada: x
Fecha de Inicio: 15 Marzo 2007 22
Fecha de Término: Diciembre 2007
CON
IV. DESTAQUE OTROS LOGROS DEL PROYECTO TALES COMO:
• Estadías de investigación.
• Formación de recursos humanos exceptuando tesistas ya informados.
• Actividades de difusión y/o extensión en la temática del proyecto.
• Cualquier otro logro no contemplado en los ítem anteriores y que Ud. quiera destacar.
Estadías y visitas de Investigación:
• Visita del alumno Mariano Vera, del Programa de Doctorado en Biología Celular, Universidad de
Cuyo, Mendoza (Febrero 2008)
• Estadía de Investigación de la alumna de la Carrera de Ciencias Biomédicas de la Facultad de
Medicina de la Universidad Estatal de Ohio, a concretarse en Julio de 2008
• Estadía del Alumno de 6to año de Medicina de la Universidad Austral de Chile Christian Siegel
(duración de 1 mes)
• Estadía de Investigación de la Dra. Sandra Luza (Bioquímico, PhD) en el laboratorio de Biología
y Patología Oral (duración 1 año).
• Visita de la Dra. Iris Espinoza (Departamento de Patología, Universidad de Chile) al Laboratorio
de Biología y Patología Oral (duración de 2 días).
Formación de recursos humanos:
Dirección de alumnos ayudantes de pregrado:
• Dirección de 3 alumnos ayudantes de la Carrera de Odontología por año de proyecto (total 9),
los cuales presentaron resúmenes en la Reunión anual de la internacional Association for Dental
Research (IADR), Chile (ver anexo 3). Uno de ellos, Rodrigo Edwards, obtuvo mención honrosa
por la presentación en modalidad oral del trabajo "Caracterización de angiogénesis y su
asociación con mastocitos triptasa -positivos en el cáncer de labio" en el Congreso de
Odontología de la Universidad de la Frontera (Junio 2006)
Unidades de Investigación:
Preg ra do
• Dirección de cinco alumnos de la Carrera de Tecnología Médica, Universidad de Concepción
(Marzo 2007-presente).
• Dirección de dos alumnos de la Carrera de Biología, Universidad de Concepción (Dic. 2007-pte.)
Post-grado
• Dirección de la alumna del programa de Magíster en Ciencias Odontológicas de la Universidad
de Chile, Dra. Yadira Boza (Dic. 2005-Feb. 2006)
• Dirección de dos alumnas del programa de Especialización en Periodoncia e Implantología de la
Facultad de Odontología de la Universidad de Concepción (2005). Por su trabajo obtuvieron el
premio de laboratorios DENTAID a los mejores trabajos de investigación presentados en el
"Primer Curso de Metodología de la Investigación en Periodoncia".
Actividades de Difusión a la comunidad
Publicaciones en diarios y revistas de circulación regional y nacional:
• Revista I+D (Universidad de Concepción): Proyecto Fondecyt "Rol del Mastocito en la
patogénesis de la quellitis actínica". N°17, Julio 2007.
• Diario El Sur de Concepción (Portada y pág. 7, Cuerpo 1): Entrevistada para el Artículo "Efectos
del Sol causan estragos en los labios". Viernes 3 Marzo, 2006.
• Revista NOS, entrevistada para el artículo "Investigación Avanzada en la Facultad de
Odontología de la Universidad de Concepción", página 31. Octubre 2005.
• Revista Panorama (Universidad de Concepción) Artículo "Especialistas insisten en prevención
frente a rayos ultravioleta del sol", Concepción, 16 Marzo 2006.
Programas de difusión en radio y televisión
• TVU (Canal de Televisión de la Universidad de Concepción), Programa Conversando la
odontología, capítulo "Estudio multidisciplinario de la quellitis actínica en la Facultad de
Odontología de la Universidad de Concepción", junio 2005.
• Invitada al programa "por tu Salud" de la Radio Universidad de Concepción para hablar de
la queilitis actínica y el cáncer de labio (enero 2007)
• Página Web de CONICYT Sección Noticias: "Efectos del sol causan estragos en los labios"
publicado marzo 2006-pte.
23
V. RESUMEN
Describa en forma precisa y breve el tópico general del proyecto, sus metas y objetivos y los resultados
alcanzados. Utilice un lenguaje apropiado para la comprensión del público no especialista en el tema.
Esta información podrá ser difundida. (No debe exceder este espacio en fuente Verdana 9)
La queilitis actínica (QA) es una lesión premaligna del bermellón del labio que afecta a
Introducción:
personas sobreexpuestas a la radiación ultravioleta (UV) solar, la cual puede progresar a un cáncer de
labio. En las últimas décadas, en Chile ha aumentado la incidencia de cáncer de piel y labios debido al
debilitamiento de la capa de Ozono a nivel Antártico. La QA puede presentarse clínicamente como
resecamiento, ulceración, induración y/o pérdida del límite piel-bermellón. Histológicamente la QA se
caracteriza por cambios epiteliales y de tejido conectivo similares a lesiones actínicas de piel. Los
cambios del conectivo incluyen presencia de elastosis solar y de un infiltrado inflamatorio. Este infiltrado
se caracteriza por la presencia de MCs, que son células del sistema inmune residentes en piel y mucosas.
En piel se ha demostrado que los mastocitoS (MC5) son importantes efectores del daño actínico. En el
labio se ha encontrado un aumento progresivo de la densidad de MCs durante el proceso de
carcinogéneSiS. Estos MCs son ricos en una proteasa denominada triptasa, y se ubican principalmente
alrededor de las zonas de elastosis solar y en el área subepitelial. También es característico de las
lesiones actínicas el aumento de la expresión de la forma inducible de la enzima que cataliza la
conversión de ácido araquidónicO en prostaglandinaS (PGs), ciclooxigeflaSa-2 (COX-2). Esto lleva a un
aumento de la producción de PGs y de inflamación, resultando en daño genómico a nivel epitelial y
alteraciones a nivel del estroma que rodea a las lesiones premalignas y malignas. Recientemente se ha
demostrado que triptasa estimula un aumento de la expresión de COX-2 a través de la activación del
receptor activado por proteasas PAR-2. Este mecanismo tendría un rol preponderante en carcinogéflesis
gastrointestinal y pulmonar, así como en la patogénesis de lesiones f9bro pro¡ iferatiVas, sin embargo, su
contribución a la carcinogénesis inducida por luz UV es desconocida. Hipótesis, objetivos y métodos:
hipótesis de que los MCs tienen un rol fundamental en la
Este proyecto se concentró en probar la
patogénesis de la QA, a través de la liberación de triptasa que activaría al receptor PAR-2 en
queratinocitos y fibroblastoS del labio, resultando en un aumento de la expresión de COX-2. Se
analizaron biopsias de labio normal (n=24) y QA (n=45) por métodos inmunohistoqUímiCOs,
histoquímicoS y de RT-PCR, para determinar cambios en la expresión de COX-2, PAR-2, colágeno,
elastina y proteínas reguladoras del ciclo celular. También se determinó la densidad de fibroblastos y
mastocitoS triptasa-positivOs, así como la densidad de fibras colágenas y elásticas. Además se realizaron
utilizando cultivos primarios de fibroblastos de mucosa oral y la línea celular de MCs
estudios in vitro
LAD2, para estudiar el efecto de la luz UVB y de mediadores del MC sobre proliferación y expresión
A nivel epitelial, los resultados mostraron que en QA había
gériica por fibroblastos orales. Resultados:
un aumento de la expresión de p53, mdm-2, PAR-2 y COX-2, así como de la densidad de MCs triptasapositivos subepitelialeS en relación al labio normal, encontrándose una asociación positiva entre la
expresión de COX-2 y PAR-2, y entre la expresión de COX-2 y la densidad de MCs. Análisis de regresión
logística mostraron que COX-2 es un marcador predictor de QA. A nivel conectivo se encontró un
aumento de la densidad de fibras elásticas en QA, así como un aumento de la densidad de fibroblastos,
ambos, la densidad de fibras elásticas y de fibroblastos estaban asociadas positivamente al aumento de
mostraron que si bien la radiación UVB disminuye la proliferación de
los MCs. Los estudios in vitro
fibroblaStos, la presencia de medio condicionado de MCs o triptasa revertían este efecto aumentando su
proliferación. A nivel de expresión génica la irradiación UVB de fibroblastos resultó en un aumento de la
COX-2, PAR-2 y elastina, y el medio condicionado de mastocitos resultó en un aumento aún
expresión de
Los resultados sugieren que
mayor de la expresión de elastina en fibroblastoS irradiados. Conclusiones;
los MCs estarían contribuyendo al aumento de la expresión de COX-2 en el epitelio, y al aumento de la
proliferación de fibroblastos y formación de elastosis en el conectivo de las lesiones de QA a través de la
liberación de triptasa. Futuros estudios se concentrarán en seguir caracterizando la participación de la vía
triptasa/PAR-2/COX2 en la carcinogénesiS de labio, y su posible intervención terapéutica para prevenir
la malignización de las lesiones de QA.
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