(salmo trutta fario) como marcadores del - CICCP

NIVELES SÉRICOS DE HORMONAS ESTEROIDEAS EN POBLACIONES DE
TRUCHA COMÚN (SALMO TRUTTA FARIO) COMO MARCADORES DEL GRADO
DE CONTAMINACIÓN ESTROGÉNICA DE LAS AGUAS
MARIANA VAL GAUDO, ADRIANA CORREA GUIMARAES, JESÚS MARTÍN GIL y FRANCISCO J.
MARTÍN GIL
Departamento de Ingeniería Agrícola y Forestal, E.T.S.II.AA., Universidad de Valladolid,
Campus de la Yutera, Avenida de Madrid, 44, 34004, Palencia. mgil@iaf.uva.es
ISABEL DEL CASTILLO, J. ANTONIO CORTACANS y AURELIO HERNÁNDEZ-LEHMANN
Departamento de Ordenación del Territorio, Urbanismo y Medio Ambiente. E.T.S. de Ingenieros de Caminos,
anales y Puertos. Universidad Politécnica de Madrid. Madrid. icastillo@caminos.upm.es
RESUMEN
En este estudio se muestra como el grado de masculinización y feminización de las truchas puede ser establecido a
través de los niveles plasmáticos de 17-α-hidroxiprogesterona, testosterona y 17-β-estradiol. Asimismo, también se
muestra que los niveles plasmáticos de estas hormonas en truchas pueden ser considerados un marcador útil para
estimar el grado de contaminación estrogénica de las aguas. El análisis de nuestros resultados para poblaciones de
trucha común del norte de Castilla y León permite concluir que las aguas de los ríos de esta zona geográfica se
encuentran estrogénicamente más contaminadas que las de las piscifactorías. Las mejores evidencias de
feminización de truchas macho se han observado en ejemplares capturados en el río Órbigo, que ha resultado estar
más contaminado que el Carrión, Arlanzón, Arlanza y Porma. La determinación adicional de niveles de cortisol para
todas las poblaciones estudiadas y el hallazgo de valores bajos para la mayor parte de las sometidas a cautividad ha
permitido evidenciar que éstas sufren un bajo nivel de estrés, lo que resulta altamente deseable en acuicultura.
Palabras clave: acuicultura, ordenación pesquera, inmunoensayo, calidad del agua, estrés.
INTRODUCCIÓN
La reproducción es una función clave para la perpetuación de las especies en la naturaleza. En
peces, el control de esta función biológica es indispensable para asegurar la producción de
cualquier industria acuícola (3). Sin embargo, un control eficaz de este y otros procesos
(ordenación
pesquera,
estaciones
depuradoras
de
aguas
residuales)
requiere
conocimientosprofundos de los mecanismos en cuestión, siendo las hormonas esteroideas
parámetros esenciales (1, 2, 4 y 8). En peces existen pocos estudios sobre la caracterización y
función de las hormonas esteroideas (5, 6, 7). El abordaje de este tipo de estudios en peces se ve
dificultado por la falta de equipamiento metodológico para realizarlos, las cuales se encuentran
inevitablemente en contados centros de investigación y, principalmente, en laboratorios
hospitalarios dedicados a la endocrinología humana. En el presente trabajo se hace uso de tales
equipos automatizados para estudios de fertilidad en peces, así como su aplicación para la
ordenación pesquera, la acuicultura y la conservación, tomando como modelo la trucha. Los
objetivos concretos a alcanzar son: l. Disponer de valores medios e intervalos de referencia para
cada una de las hormonas consideradas, tanto para truchas machos como hembras a lo largo del
1
ciclo reproductivo. 2. Conocer el efecto de la calidad del agua sobre los niveles hormonales de la
trucha. 3. Conocer el efecto de la alimentación sobre los niveles hormonales. 4. Conocer el
efecto del estrés sobre esos niveles. 5. Interpretar los acontecimientos fisiológicos que
desencadena la acción de las diversas hormonas en truchas.
MATERIAL Y MÉTODOS
La metodología llevada a cabo en la investigación ha consistido en tomar varios ejemplares de
Salmo trutta fario (trucha común) de cada una de las zonas de estudio: Burgos, León y Palencia.
El número de muestras se corresponde con individuos de las piscifactorías de El Soto (Celadilla
del Río, Palencia), Vegas del Condado (León), Quintanar de la Sierra (Burgos) e individuos de
los ríos Carrión, Arlanzón, Órbigo y Porma. El número de ejemplares asciende a un total de 56.
Una vez capturados se les ha extraído el suero sanguíneo. Previamente se les ha anestesiado para
inmovilizarles y así facilitar la toma de sangre. La punción se ha realizado en el pedúnculo
caudal, ventralmente y la sangre se ha obtenido de la vena caudal. Una vez reanimados son
devueltos al agua.
La determinación cuantitativa de Progesterona en suero sanguíneo de truchas se ha llevado a
cabo mediante un enzimoinmunoensayo de micropartículas (MEIA), según el sistema Abbott
Diagnostics, en un autoanalizador AxSYM. La determinación cuantitativa de Cortisol en suero
sanguíneo de truchas se ha realizado mediante un inmunoanálisis de polarización de la
fluorescencia (FPIA) según el sistema Abbott Diagnostics, también en un autoanalizador
AxSYM. Las determinaciones, 17-α-hidroxiprogesterona y 11-desoxicortisol se han realizado
por radioinmunoanálisis (RIA). La determinación cuantitativa de 17-β-estradiol y testosterona en
suero sanguíneo de truchas se ha llevado a cabo mediante un inmunoensayo quimioluminiscente
basado en micropartículas (CMIA), según el sistema Architect de Abbott Diagnostics, en un
autoanalizador Architect i2000. Previo a las determinaciones se ha realizado, tanto para 17-βestradiol como para testosterona, una curva de calibración a seis puntos, con calibradores por
duplicado. Adicionalmente, se han introducido, a lo largo de la serie y en el curso de cada
determinación hormonal en las muestras séricas, 14 controles internos, 6 controles externos y 7
blancos, a efectos de garantía de la calidad.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En las Tablas 1 a 8 aparecen recogidos los análisis de hormonas efectuados en sueros de truchas,
en algunos ríos y piscifactorías del Norte de Castilla y León. Los valores medios y los intervalos
de referencia (calculados con ± 1 desviación estándar) de cada una de las hormonas analizadas
en sueros de truchas, para un periodo de no desove, aparecen distribuidos por procedencias. Los
resultados se informan en las unidades usuales y en las recomendadas por la IUPAC.
Los niveles séricos de cortisol en las truchas del rio Órbigo son normales (valor medio: 9,6
µg/dL; intervalo de referencia: 4,7-14,5 µg/dL). Sin embargo, los valores de cortisol de las
truchas de Soria, Quintanar de la Sierra y Acera de la Vega resultan discretamente altos (entre 16
y 18 µg/dL). Es preciso destacar los bajos valores de cortisolemia (< 6 µg/dL) en las truchas del
rio Arlanzón, tanto en San Medel como en Ibeas de Juarros.
Las concentraciones séricas de progesterona en las truchas del rio Órbigo, Soria y Acera de la
Vega son normales (entre 0,06 y 0,14 ng/mL). Los únicos valores de progesterona elevados los
encontramos en las truchas de la piscifactoría de Quintanar del Rio (0,46 ng/mL). Consideramos
que los valores elevados de progesterona en las truchas de Quintanar no son reales y se deben al
efecto de la hemolisis de los sueros, producido por una extracción traumática. Existe una cierta
2
asociación inversa entre los resultados de 17-β-estradiol y testosterona. Los resultados
combinados de 17-β-estradiol y testosterona permiten diferenciar machos de hembras en la
mayor parte de los casos.
A la vista de los datos hormonales obtenidos en los sueros de las truchas de Piscifactoría del
Condado, puede establecerse una asociación inversa entre los correspondientes a 17-β-estradiol y
17-α-hidroxiprogesterona (r = -0,938). Los resultados combinados de 17-β-estradiol y 17-αhidroxiprogesterona tambien permiten diferenciar machos de hembras en la mayor parte de los
casos.La insuficiencia de resultados de 11-desoxicortisol ha impedido establecer comparaciones
con niveles de otras hormonas. En el caso de los sueros de las truchas de la Piscifactoría del
Condado, cuatro muestras han proporcionado valores de 11-desoxicortisol muy correlacionados
con los de 17-α-hidroxiprogesterona (r = 0,983) pero los resultados obtenidos para la muestra
restante descartan la generalización de esta asociación. A la vista de los datos obtenidos para 17α-hidroxiprogesterona, testosterona y cortisol en los sueros de las truchas de San Medel,
podemos afirmar que existe una asociación directa significativa entre los niveles de 17-αhidroxiprogesterona y testosterona (r = 0,9), pero no entre los niveles de 17-αhidroxiprogesterona y cortisol (r = 0,53).
El hecho de que la toma de muestras ha sido realizada en un periodo de no desove, ha
determinado que los niveles de progesterona aparezcan bajos en todos los casos (el valor más
alto ha resultado ser 1 ng/mL). La utilidad de los análisis de progesterona realizados radica en la
consecución de niveles basales a los cuales podremos referir los resultados que obtengamos en
periodos de desove.
No hemos observado asociaciones significativas entre los niveles séricos de progesterona,
cortisol, testosterona y 17-β-estradiol cuando hemos comparado los pares: progesterona-cortisol,
progesterona-estradiol, progesterona-testosterona y 17-β-estradiol-cortisol. En el caso de las
asociaciones en las que interviene la progesterona ha de tenerse en cuenta que, aunque
fidedignos, los bajos valores obtenidos para esta hormona limitan el valor de las comparaciones
realizadas. Tampoco se ha encontrado, en contra de lo que cabía esperar, relación significativa
alguna, entre los niveles de cortisol y testosterona (r = -0,23) estudiados en las poblaciones más
“estresadas” correspondientes a los ríos Porma, Carrión (Acera de la Vega) y piscifactoría de
Quintanar de la Sierra.
El exámen de resultados de niveles de 17-β-estradiol sérico en las poblaciones de truchas
estudiadas pone de manifiesto su diferente grado de contaminación estrogénica. Las truchas del
río Órbigo (valor medio: 1098 pmol/L) están más estrogenizadas que las del Carrión (valor
medio: 655 pmol/L) o el río Arlanza (valor medio: 528,5 pmol/L) y las de éstos, más
estrogeneizadas que las de las restantes procedencias.
Los niveles de estradiol en truchas macho de la Piscifactoría de Celadilla criados en aguas de
diferentes procedencias muestras niveles de estradiol ligeramente diferentes. Los procedentes del
Carrión están menos estrogenizados (valor medio: 127,2 pmol/L) que los del Pisuerga (media:
128,15 pmol/L) y ambos, menos que los cultivados en aguas reutilizadas (media: 181,25
pmol/L). Sin embargo, la baja significatividad de las diferencias, y la escasez de datos no
permite mantener esta observación como definitiva.
La similitud encontrada entre los niveles de testosterona de las truchas provenientes de las
piscifactorías (valor medio de 2,04 ng/ml) y los niveles observados en las de los ríos (media:
1,97 ng/ml), así como la diferencia del grado de estrogeneización, que es ligeramente mayor en
los ríos (valor medio de 17-beta-estradiol de 0,14 ng/ml), que en las piscifactorías (media de 173
beta-estradiol de 0,081ng/ml) sugiere la falta de técnicas de manipulación genética y alimenticias
empleadas en la mejora de la acuicultura.
Conclusiones
1. Dada la asociación directa de los resultados de 17-α-hidroxiprogesterona con los de
testosterona (r = 0,9) y la asociación inversa de los resultados de cada uno de estas ensayos con
los de 17-β-estradiol, podemos concluir que la información de las tres hormonas es redundante y
que bastaría determinar una de ellas para estimar el grado de masculinización/ feminización de
las truchas. Así mismo, podemos afirmar que nuestros resultados de 17-β-estradiol y testosterona
son elucidativos para establecer el sexotipado en truchas.
2. A falta de determinaciones de hormonas libres en el agua de los ríos y de las piscifactorías,
los niveles plasmáticos de hormonas en truchas resultan ser un marcador útil para estimar el
grado de contaminación estrogénica de las aguas. De nuestros resultados se puede concluir que
las aguas de los ríos están más contaminadas por estrógenos que las de las piscifactorías. El
cumplimiento de la normativa sobre aguas por parte de los piscicultores y la disponibilidad de
agua de manantial en la mayor parte de las instalaciones ha llevado a un grado de calidad del
agua deseable.
3. Los resultados muestran un 42% de 17-beta-estradiol más, en los ejemplares de los ríos que en
las truchas de las piscifactorías. Puesto que este estrógeno es muy lábil en el agua, y existen
mecanismos naturales de eliminación de este contaminante: almacenamiento en el tejido adiposo
de los animales, excreción en forma conjugada no dañina, disminución por acción hormonal en
momentos de estrés, se aprecia la necesidad de una fuerte presión estrogénica y un aporte
continuo de 17- betaestradiol en los ríos para alcanzar las cifras obtenidas.
4. Las mejores evidencias de feminización de truchas macho se han observado en los ejemplares
capturados en el río Órbigo, que ha resultado estar más contaminado que el Carrión, Arlanzón,
Arlanza y Porma.
5. El perfil de determinaciones hormonales en suero de truchas siempre ha de incluir la petición
de cortisol. Esta hormona es un marcador del estrés y la existencia de bajos valores en
poblaciones en cautividad es de alto interés en acuicultura.
6. La determinación sérica de niveles de progesterona solo tiene interés como marcador de
ovulación. Toda vez que el presente estudio ha sido realizado en periodo de no desove, ningún
ejemplar de los estudiados ha exhibido los valores altos que son de esperar tras la ovulación.
7. A la vista de la similitud encontrada entre los niveles de testosterona de los ejemplares
rovenientes de los ríos y de las piscifactorías, así como el diferente grado de estrogeneización
que muestran los resultados de ambos, podemos concluir que no existe ninguna técnica de
manipulación genética ni alimenticia (fitoestrógenos como la soja o estrógenos de las harinas de
pescado suministrados en forma de pienso en las piscifactorías) en las instalaciones estudiadas.
4
BIBLIOGRAFÍA
(1) ANDERSEN, H., SIEGRIST, H., HALLING-SORENSEN, B., TERNES, T.A. 2003. Fate of Estrogens in a Municipal
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(3) BLANCO CHAFEIRO, M. C. 1995. La Trucha: Cría Industrial. 2ª edición, Mundi- Prensa.
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(7) THORPE, K.,CUMMINGS, R.J., HUTCHINSON, T.H., SCHOLZE, M., SUMPTER, J.P., TYLER, CH. 2003. Relative
Potencies and Combination Effects of Steroidal Estrogens in Fish. Environmental Science and Technology, vol.37, 1142-1149.
(8) YUAN, T. 2003 Comment on Estrogen Receptor Agonist Fate during Wastewater and Biosolids Treatment Processes: A
Mass Balance Analysis. Environmental Science and Technology, vol. 37, nº 20, 4819.
Agradecimientos:
Al Profesor Miguel Aller de la Universidad de León y al Servicio de Pesca de la Junta de Castilla de Castilla y
León.
TABLAS:
Los resultados obtenidos durante el año 2004 se muestran en las siguientes tablas:
5
Tabla 1. Río Porma (León)
Tabla 1. Río Porma León
Identificación/Referencia
19/05/04
Longitud
Peso
cm
g
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
17-B-estradiol
Progesterona
ng/mL
pmol/L
ng/mL
Trucha
965751
28
277
H
H
0,184
675,30
0
Trucha
965751
25
167
M
M
0,041
150,00
0,08
Trucha
965751
26,5
220
H
H
0,131
480,80
0,15
Trucha
965751
23
138
M
M
0,027
99,10
0,03
Trucha
965751
26
209
H
H
0,083
304,60
0,14
Trucha
965751
28
302
M
H
0,043
157,80
0,07
Trucha
965751
28
235
M
H
0,03
110,10
0,05
Trucha
965751
24
159
M
M
0,023
84,40
0,24
Trucha
965751
23
133
M
M
0,022
80,70
0,1
Trucha
965751
22
139
M
M
6
<0,018
<66
0,08
x = 0,06
x = 220,9
x = 0,094
DS = 0,056
DS = 205,3
SD = 0,069
VN = 0,004-0,116
VN = 15-426
VN = 0,025-0,16
x(M) = 0,024
x(M) = 94,8
x(H) = 0,094
x(H) = 345,7
Tabla 1.1. Río Porma (León). Continuación
Tabla 1.1 León
19/05/04
Río Porma
Identificación/Referencia
progesterona
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
nmol/L
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
Trucha
965751
0
17,8
511
1,69
5,97
Trucha
965751
0,26
1,6
45,9
4,15
14,66
Trucha
965751
0,48
19
545
1,09
3,85
Trucha
965751
0,096
25
717
2,17
7,67
Trucha
965751
0,45
18,3
525
1,85
6,54
Trucha
965751
0,22
14,5
416
1,91
6,75
Trucha
965751
0,16
15,2
436
1,8
6,36
Trucha
965751
0,77
18,4
528
2,9
10,25
Trucha
965751
0,32
22
631
2,46
8,7
Trucha
965751
0,26
13
373
2,16
7,63
x = 0,30
x = 16,5
x = 472,8
x = 2,22
x = 7,84
DS = 0,22
DS = 6,3
DS = 180,7
DS = 0,83
DS = 2,94
VN = 0,08 - 0,52
VN = 13-23
VN = 292-653
VN = 1,4-3,0
VN = 4,9-10,8
x(M) = 2,77
x(M) = 9,8
x(H) = 1,67
x(H) = 5,9
7
Tabla 2. Piscifactoría El Condado (Vegas del Condado)
Tabla 2.Piscifactoría del Condado
17/05/04
León
Identificación/Referencia
Longitud
Peso
cm
g
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
ng/mL
Trucha
965761
24,5
370
H
H
0,074
Trucha
965761
28,5
430
H
M
0,062
Trucha
965761
30
460
H
H
0,066
Trucha
965761
28,5
430
M
M
0,062
Trucha
965761
27,5
420
H
M
0,047
x = 27,8
x = 0,06
DS = 2
DS=0,009
VN = 25 - 30
VN=0,051-0,069
Tabla 2.2. Piscifactoría El Condado (Vegas del Condado). Continuación
Tabla 2.2. Piscifactoría del Condado
Identificación/Referencia
17/05/04
León
17-B-estradiol
11-desoxicortisol
11-desoxicortisol
17-a-hidroxiprogesterona
pmol/L
nmol/L
ng/mL
nmol/L
ng/mL
Trucha
965761
271,00
0,02
0,07
0
0,07
Trucha
965761
229,00
0,56
1,94
2,54
0,84
Trucha
965761
241,00
0,14
0,48
0,64
0,21
Trucha
965761
227,00
0,66
2,28
2,38
0,79
Trucha
965761
173,00
0,06
0,21
12,7
4,19
x = 228,2
x = 0.3
x=1
x = 3.7
x = 1.2
DS=35,51
DS=0,29
DS=1,03
DS = 5,2
DS = 1,7
VN=192,69-263,71
VN=0,01-0,59
VN=0-2,03
VN = 0 - 8,9
VN = 0 - 2,9
8
Tabla 3. Río Arlanzón (San Medel)
Tabla 3. Rio Arlanzón
07/06/04
San Medel
Identificación/referencia
Longitud
Peso
cm
G
Sexo determinado
Trucha
965766
23
480
M
Trucha
965766
29
600
M
Trucha
965766
28
580
M
Trucha
965766
25
520
M
Trucha
965766
29
610
H
Trucha
965766
23,5
450
H
Trucha
965766
32
667
H
9
17-B-estradiol
17-B-estradiol
progesterona
Progesterona
ng/mL
pmol/L
ng/mL
nmol/L
0,041
150,00
0,08
0,26
0,059
215,00
x = 0,05
x = 182,5
DS=0,01
DS=45,96
VN=0,04-0,06
VN=136,54-228,46
Tabla 3.3. Río Arlanzón (San Medel). Continuación
Tabla 3.3. Rio Arlanzón
07/06/04
San Medel
Identificación/referencia
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
testosterona
17-a-hidroxiprogesterona
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
nmol/L
nmol/L
ng/mL
Trucha
965766
1,7
48,9
1,97
6,97
6,97
1,64
0,55
Trucha
965766
1,37
39,2
2,44
8,65
8,65
1,69
0,56
Trucha
965766
2,92
84
5,61
1,87
Trucha
965766
5,7
162,8
3,25
1,08
Trucha
965766
<1
<30
1,5
5,3
5,3
0,2
0,07
Trucha
965766
<1
<30
1,47
5,2
5,2
0,2
0,07
Trucha
965766
1,27
36,5
1,67
5,92
5,92
0,21
0,07
x = 2,6
x = 74,3
x = 1,8
x = 6,4
x = 6,4
x = 1,83
x = 0.61
DS = 1,9
DS = 53
DS = 0,4
DS = 1,4
DS = 1,4
DS = 2,0
DS = 0,67
VN = 0,7-4,5
VN = 21 -127
VN = 1,4 - 2,2
VN = 5-8
VN = 5-8
VN = 0 - 3,8
VN = 0 - 1,3
x(M) = 2,21
x(M) = 7,8
x(M) = 7,8
x(H) = 1,54
x(H) = 5,5
x(H) = 5,5
10
Tabla 4. Río Carrión (Acera de la Vega)
Tabla 4. Rio Carrión
10/05/04
Acera de la Vega
Identificación/Referencia
Longitud
Peso
cm
g
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
17-B-estradiol
ng/mL
pmol/L
Barbo
965778
47,5
1173
H
H
>5000
Barbo
965779
45,5
1080
H
H
>5000
Barbo
965780
43
900
H
H
>5000
Boga
965781
30
294,5
M
H
>5000
Trucha
965783
44
0
M
M
0,038
139,20
Trucha
965784
25
171,2
M
M
0,051
186,70
Trucha
965785
24
152
H
H
0,445
1629,60
Trucha
965786
31
332
H
H
0,402
1472,10
Trucha
965787
26
195,5
H
H
0,045
164,80
Trucha
965788
27
217,5
H
M
0,099
362,50
Trucha
965789
24
152
M
M
0,2
732,40
Trucha
965790
26
195,5
M?
H
0,252
922,80
Trucha
965791
22,5
125
M
M
0,065
238,00
x = 27,7
x = 278,7
x = 0,18
x = 655
Trucha
965782
DS = 6,6
DS = 0,16
DS=578,79
VN = 21 - 34
VN = 0,02 - 0,34
VN=76,21-1233,79
61
3100
M
11
muestra insuficien
m. insuf
Tabla 4.4. Río Carrión (Acera de la Vega). Continuación
Tabla 4.4. Rio Carrión
10/05/04
Acera de la Vega
Identificación/Referencia
Progesterona
progesterona
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
ng/mL
nmol/L
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
Barbo
965778
0,03
0,1
2,5
71.7
3,12
11
Barbo
965779
0,03
0,1
13,5
387,4
3,63
12,8
Barbo
965780
0,01
0,03
11,4
327,2
2,67
9,5
Boga
965781
0,03
0,1
11,2
321,4
1,92
6,8
Trucha
965783
0,14
0,45
7,3
209,5
2,79
9,9
Trucha
965784
0,14
0,45
13,4
384,6
2,43
8,6
Trucha
965785
0,19
0,61
13,3
381,7
2,03
7,2
Trucha
965786
0,27
0,86
32
918,4
2,27
8
Trucha
965787
0,14
0,45
29,6
849,5
1,6
5,7
Trucha
965788
0,09
0,29
14,7
421,9
2,01
7,1
Trucha
965789
0,09
0,29
11,4
327,2
2,01
7,1
Trucha
965790
0,17
0,54
35,6
1021,7
1,76
6,2
Trucha
965791
0,05
0,16
5
143,5
2,08
7,4
x = 0,14
x = 0,455
x = 18
x = 517
x = 2,11
x = 7,5
Trucha
965782
DS = 0,06
DS = 0,2
DS = 11
DS = 324
DS = 0,35
DS = 1,25
VN = 0,08 - 0,2
VN = 0,25-0,65
VN = 7-29
VN = 193-841
VN = 1,76-2,46
VN = 6,2-8,7
m. ins
m. ins
m. insu
12
m. insuficiente
Tabla 5. Piscifactoría El Soto (Celadilla del Río)
Piscifactoría El Soto
10/05/04
Celadilla del Río
Identificación/Referencia
Longitud
Peso
cm
g
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
17-B-estradiol
Progesterona
ng/mL
pmol/L
ng/mL
Trucha P2
965792
33
400
M
M
m. insuf
m. insuf.
0,05
Trucha P3
965793
36
522
M
M
0,045
164,80
0,2
Trucha P4
965794
33
522
M
M
0,043
157,50
0,04
Trucha P5
965795
39
667,5
M
M
0,025
91,55
0,11
Trucha P1P
965796
37
570
M
M
0,026
95,20
0,01
Trucha P3P
965798
M
H
m. insuf
Trucha P4P
965799
41
769
M
M
0,044
161,10
0,16
Trucha P1R
965797
47
1173
M
M
0,06
219,70
0,45
Trucha P2R?
965800
55
1830
M
M
0,039
142,80
0,28
x = 39,3
x = 749,8
x = 0,04
x = 147
x = 0,15
DS = 6,9
DS=0,01
DS=44,13
DS=0,14
VN = 32 - 46
VN=0,03-0,05
VN=102,87-191,13
VN=0,01-0,29
13
0,08
Tabla 5.5. Piscifactoría El Soto (Celadilla del Río). Continuación
Tabla 5.5. Piscifactoría El Soto
Identificación/Referencia
10/05/04
Celadilla del Río
progesterona
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
nmol/L
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
procedencia del agua
Trucha P2
965792
0,16
8,8
252,5
m. insuf.
m. insuf
Agua Carrión
Trucha P3
965793
0,64
8,2
235,3
2,21
7,9
Agua Carrión
Trucha P4
965794
0,13
7,2
206,6
2,11
7,5
Agua Carrión
Trucha P5
965795
0,35
11,2
321,4
1,91
6,8
Agua Carrión
Trucha P1P
965796
0,03
2,26
8
Agua Pisuerga
Trucha P3P
965798
0,26
2,4
68,9
1,41
5
Agua Pisuerga
Trucha P4P
965799
0,51
10,3
295,6
2,15
7,7
Agua Pisuerga
Trucha P1R
965797
1,44
11,9
341,5
m. insuf
Trucha P2R?
965800
0,9
14,8
424,8
2,23
7,9
x = 0,49
x = 9,35
x = 268
x = 2,04
x = 7,3
DS = 0,45
DS=3,68
DS=105,77
DS=0,30
DS=1,07
VN = 0,04-0,94
VN=5,67-13,03
VN=162,23-373,77
VN=1,74-2,34
VN=6,23-8,37
<0,2
14
Agua reutilizada
Agua reutilizada
Tabla 6. Río Arlanzón (Ibeas de Juarros)
Tabla 6. Rio Arlanzón Ibeas de
Identificación/Referencia
Trucha
(Hemoliz) 965773
Identificación/Referencia
19/05/04
Juarros
Longitud
Peso
Sexo
cm
g
26,5
550
M
progesterona
Procedencia agua
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
2,95
10,44
ng/mL
Trucha
(Hemoliz) 965773
0
muy sacrificado
17-B-estradiol
ng/mL
pmol/L
<0,018
<1
15
17-B-estradiol
<30
<66
Tabla 7. Río Órbigo (León)
24/05/04
Tabla 7. Rio Órbigo
Identificación/Referencia
Longitud
Peso
cm
G
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
17-B-estradiol
ng/mL
pmol/L
Trucha
965744
59
1240
H
H
0,793
2904,00
Trucha
965745
36
770
M
M
0,035
128,20
Trucha
965746
42
885
M
H
0,357
1307,30
Trucha
965747
41
860
M
M?
0,054
197,70
Trucha
965748
44
920
M
M?
0,332
1215,80
Trucha
965749
42
895
M
H
0,438
1603,90
Trucha
965750
90
2015
M
M
0,09
329,60
x = 1084
x = 0,3
x = 1098
DS = 436
DS = 0,27
DS = 993
VN= 648-1520
VN=0,03-0,57
VN=105-2091
16
Tabla 7.7. Río Órbigo (León). Continuación
24/05/04
Tabla 7.7 Río Órbigo
Identificación/Referencia
progesterona
progesterona
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
ng/mL
nmol/L
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
Trucha
965744
<0,01
<0,032
18,2
522,3
1,03
3,64
Trucha
965745
<0,01
<0,032
7,7
221
1,32
4,67
Trucha
965746
0,07
0,22
7,5
215,2
1,43
5,06
Trucha
965747
0,06
0,19
9,9
284,1
1,68
5,94
Trucha
965748
0,02
0,06
13,5
387,4
1,84
6,51
Trucha
965749
0,07
0,22
7,4
212,4
1,7
6,02
Trucha
965750
<0,01
3,1
89
3,32
11,75
x = 0,055
x = 0,17
x = 9,6
x = 276
x = 1,76
x = 6,23
DS = 0,024
DS = 0,08
DS = 4,9
DS = 141
DS = 0,74
DS = 2,6
VN = 0,03 - 0,08
VN = 0,09-0,25
VN = 4,7-14,5
VN = 135-417
VN = 1 - 2,5
VN = 3,6 -8,8
17
Tabla 8. Piscifactoría de Quintanar de la Sierra
Tabla 8. Piscifactoría de
Identificación/Referencia
19/05/04
Quintanar
Longitud
Peso
cm
g
Sexo asignado
Sexo determinado
17-B-estradiol
17-B-estradiol
ng/mL
pmol/L
Trucha
(Hemoliz) 965774
33,7
520
M
M
0,099
362,50
Trucha
(Hemoliz) 965775
32
490
M
M
0,078
285,60
Trucha
(Hemoliz) 965742
31,5
480
M
M
0,095
347,90
Trucha
(Hemoliz) 965743
30
460
M
M
0,108
395,50
Trucha
(Hemoliz) 965776
30
460
M
H
0,343
1256,00
Trucha
965777
54
830
M
M
muestra insufic
muestra insufic
x = 35,2
x = 0,144
x = 528,5
DS = 9,3
DS=0,11
DS=408,07
VN = 26 - 44,5
VN=0,03-0,25
VN=120,43-936,57
18
Tabla 8.8. Piscifactoría de Quintanar de la Sierra. Continuación
19/05/04
Tabla 8.8. Piscifactoría de Quintanar
Identificación/Referencia
progesterona
progesterona
cortisol
cortisol
testosterona
testosterona
ng/mL
nmol/L
ug/dL
nmol/L
ng/mL
nmol/L
Trucha
(Hemoliz) 965774
1
3,2
14,5
416,2
no lectura
no lectura
Trucha
(Hemoliz) 965775
0,27
0,86
29,5
846,6
no lectura
no lectura
Trucha
(Hemoliz) 965742
0
0
20,2
579,7
no lectura
no lectura
Trucha
(Hemoliz) 965743
0,8
2,6
14,2
407,5
no lectura
no lectura
Trucha
(Hemoliz) 965776
0,21
0,67
14,5
416,2
no lectura
no lectura
Trucha
965777
muestra insufic
muestra insufic
3,9
111,9
m insufic
m insufic
x = 0,46
x = 1,46
x = 16,1
x = 463
DS = 0,42
DS = 1,36
DS=8,41
DS = 241
VN = 0,04 - 0,88
VN = 0,1-2,8
VN=7,69-24,51
VN = 222-704
19