XLV Congreso 2002 - Sociedad Mexicana de Ciencias Fisiológicas
Anuncio
SOCIEDAD MEXICANA DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS Universidad de Colima 8-12 de septiembre de 2002 MEMORIA DEL XLV CONGRESO NACIONAL 8 al 12 de septiembre de 2002 SOCIEDAD MEXICANA DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS, A.C. PROGRAMA GENERAL Y RESÚMENES UNIVERSIDAD DE COLIMA Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas Colima, Col. México, 2002 Diseño de portada y formato D.G. Ignacio Aráoz Martínez El contenido y la redacción de las ponencias así como la ortografía son responsabilidad de cada autor o autores. La impresión consta de 1000 ejemplares y se terminó de imprimir en Imprenta Hernández, Calle 17 No. 74 Colonia Prohogar RECONOCIMIENTOS La Sociedad Mexicana de Ciencias Fisiológicas, A.C. hace patente su agradecimiento a quienes la han apoyado para llevar a cabo el XLV Congreso Nacional Universidad de Colima Coordinación de la Investigación Científica de la Universidad Nacional Autónoma de México Dirección General de Educación Superior de la Secretaría de Educación Pública Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología Alta Tecnología en Laboratorios S.A de C.V. SOCIEDAD MEXICANA DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS, A.C. Mesa directiva Dr. Ubaldo García Hernández Presidente Dra. Luisa Rocha Arrieta Vicepresidenta Dr. Daniel Martínez Fong Secretario Dr. Jorge Quevedo Durán Tesoreso Presidente honorario del congreso Dr. Carlos Salazar Silva Rector de la Universidad de Colima Comité organizador Dr. Jesús Muñiz Murguía Coordinador General de Investigación Científica Dr. Miguel Huerta Vieira Director del Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas Dr. Alejandro Elizalde Lozano Dr. Carlos Onetti Percello Dr. Francisco Fierro Velasco Dr. Humberto Cruzblanca PROGRAMA GENERAL Cursos Precongreso Fundamentos de la terapia génica 7 y 8 de septiembre Facultad de Medicina, Universidad de Colima Coordinador: Dr. José Segovia Participantes: Dra. Mónica Lamas Dr. Fabio Salamanca Dr. Daniel Martínez Fong Dr. Hugo Barrera Tópicos: Ácidos nucleicos, código genético y síntesis de proteínas. Estructura de genes y cromosomas. Tecnología del DNA recombinante. Construcción de vectores no virales. Construcción de vectores virales. Aspectos clínicos de la terapia génica. Empleo de microscopía digital de fluorescencia y confocal en el estudio de fenómenos fisiológicos 6 al 8 de septiembre Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima Coordinador: Dr. Arturo Hernández Participantes: Dr. Dr. Dr. Dr. Dr. George Augustine Donald O'Maley Luis Vaca Alberto Darszon Agustín Guerrero Tópicos: Empleo de microscopía digital de fluorescencia, incluyendo microscopía confocal, para el estudio de fenómenos fisiológicos en tiempo real. Microscopía confocal por barrido laser para el análisis de estructuras biológicas complejas (secciones ópticas y reconstrucción tridimensional). Seguimiento de movimientos de organelos y señales biológicamente relevantes en células vivas (tinción vital de mitocondrias y complejo de Golgi, medición de calcio intracelular con indicadores fluorescentes). Estructura, función y modulación de canales iónicos y receptores 6-8 de septiembre Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima Coordinadores: Dr. José A. Sánchez Chapula y Dr. Humberto Cruzblanca Participantes: Dra. Esperanza García Dra. Elena Castro Dr. Clemente Vázquez Dr. Ricardo Navarro Dr. Igor Pottosin Tópicos: Microinyección intranuclear de DNA recombinante en neuronas. Sistema del doble-híbrido para el estudio de la interacción de proteínas. Estudio de canales de potasio y modulación por subunidades beta. Modulación de canales de potasio cardiacos por fármacos. Determinantes estructurales de la modulación intracelular de canales de potasio neuronales. Análisis unitario de curvascorriente voltaje. Bloqueo dependiente de voltaje de canales. Resumen del programa DOMINGO 8 de septiembre de 2002 Inscripciones de última hora 10:00 – 18:00 CEREMONIA DE INAUGURACIÓN 19:00 – 21:00 Auditorio Auditorio de la Biblioteca de Ciencias Miguel de la Madrid Hurtado Palabras de bienvenida Dr. Ubaldo García Hernández, Presidente de la SMCF Declaratoria inaugural Dr. Carlos Salazar Silva, Rector de la Universidad de Colima Homenaje al Dr. Carlos Méndez Domínguez Dr. Jorge Aceves Ruiz Conferencia "Crónica de la ciudad" Abelardo Ahumada González. Cronista de la Ciudad de Colima Coctel de bienvenida LUNES 9 de septiembre de 2002 Sesiones orales 8:30 – 10:45 Salón 1 Epilepsia y Psicofisiología Moderadora: Dra. María Corsi Cabrera Salón 2 Reproducción y Endocrinología Moderador: Dr. Horacio Merchant-Larios Salón 3 Fisiología I Moderador: Dr. José Antonio Arias Montaño Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Synaptic biophotonics Dr. George Augustine Simposia 12:00 – 14:00 h Salón 1 Fisiología y fisiopatología de la secreción de insulina Coordinadora: Dra. Marcia Hiriart Salón 2 ¿Cuál es el futuro de la fisiología en la era genómica? Coordinador: Dr. Hugo Aréchiga Sesión de carteles 17:00 –20:00 h Canales iónicos y biofísica Músculo Cardiovascular Fisiología renal Metabolismo Psicofisiología y conducta MARTES 10 de septiembre de 2002 Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Fisiología II Moderador: Dr. Francisco Fernández de Miguel Salón 2 Toxicología, Farmacología y Morfometría Moderador: Dr. Hugo Aréchiga Salón 3 Conducta Moderador: Dr. Raúl Aguilar Roblero Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h How do G-Protein couple receptors rule the mind? Dr. Bertil Hille Simposia 12:00 – 14:00 h Salón 1 Aspectos moleculares y celulares del desarrollo neural Coordinadores: Drs. Jorge Hernández y Julio Morán Salón 2 Proteínas con funciones conocidas en el citoplasma y membrana presentan novedosas actividades en el núcleo Coordinadoras: Dras. Dalila Martínez y Lorenza González Mariscal Sesión de carteles 17:00 –20:00 h Endocrinología y neuroendocrinología Neurofisiología Neurortransmisores y receptores Daño y recuperación neuronal Bioingeniería Actividad cultural 20:30 h Ballet Folclórico de la Universidad de Colima Casa de la Cultura de la Ciudad de Colima MIÉRCOLES 11 de septiembre de 2002 Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Sistemas Sensoriales Moderador: Dr. Gabriel Gutiérrez Ospina Salón 2 Ritmos Moderadora: Dra. Carolina Escobar Salón 3 Canales Iónicos Moderador: Dr. José Antonio Sánchez Chapula Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Aminoácidos y edema cerebral: relevancia y mecanismos Dra. Herminia Pasantes Simposia 12:00 – 14:00 h Salón 1 Nuevos aspectos en los mecanismos de tolerancia a morfina Coordinadores: Drs. Vinicio Granados y Francisco J. López Muñoz Salón 2 Visión novedosa de la ultraestructura y citofisiología nuclear Coordinador: Dr. Gerardo Hebert Vázquez Nin Sesión de carteles 17:00 - 20:00 h Dolor Epilepsia Sistemas Sensoriales Fisiología Celular Ritmos Farmacología Conductual Sesión de negocios de la SMCF 20:00 - 21:00 h JUEVES Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Daño y Recuperación Moderadora: Dra. Lourdes Massieu Salón 2 Neurotransmisores y Receptores Moderadora: Dra. Verónica Guarner Lans 12 de septiembre de 2002 SIMPOSIO Salón 3 Neurofarmacología del aprendizaje y memoria Coordinador: Dr. Alfredo Meneses Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Central nervous system plasticity and the neuropathic state Dr. Frank Porreca Sesión de carteles 12:00 - 15:00 h Aprendizaje y Memoria Conducta Social y Maternal Desnutrición y Desarrollo Reproducción Farmacología Toxicología Desarrollo Celular Fiesta de clausura 20:30 h Casino del Sindicato Único de Trabajadores de la Universidad de Colima lunes 9 de septiembre Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Epilepsia y Psicofisiología Moderadora: Dra. María Corsi Cabrera O-01 ANALISIS DE COMPONENTES PRINCIPALES (PCA) DEL EEG DE BANDA ESTRECHA DURANTE TAREAS DE EMOCION.. Marosi Erzsébet , Bazán, O.,* Yañez, G.,* Bernal, J.,* Rodríguez, M.,* y Prieto, B.* FES Iztacala, Proyecto de Neurociencias. O-02 EFECTO DE LA SOBRECARGA EN LA MEMORIA DE TRABAJO SOBRE EL PROCESAMIENTO SEMÁNTICO Y SINTÁCTICO. Avecilla G*., Silva-Pereyra, J*., Harmony T. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus UNAM-UAQ Juriquilla, Querétaro. O-03 ESTUDIO ELECTROFISIOLÓGICO DE LA INHIBICIÓN CONDUCTUAL. GonzálezFrankenberger B.* y Harmony T. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus UNAM-UAQ Juriquilla, Querétaro. O-04 PAPEL DEL CUERPO CALLOSO EN EL GRADO DE ACTIVIDAD ELÉCTRICA COHERENTE ENTRE LOS HEMISFERIOS CEREBRALES EN EL HOMBRE: ESTUDIOS DE CASO. Corsi-Cabrera, M.1, Ondarza, R.2, Martínez-Gutiérrez, V*.1, Trejo, D*2, Guevara, M.A.3, Ramos-Loyo, J3. 1 Laboratorio de Sueño, Facultad de Psicología, UNAM, 2Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía MVS, 3Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara. México O-05 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA DEL NERVIO VAGO SOBRE LA ACTIVIDAD INTERICTAL Y EL EEG EN EL GATO. Martínez, A, Vega-Flores O*, López-Ruiz E*, Arias Caballero A * y Fernández-Guardiola A. Fac. Psicología UNAM e Instituto Nacional de Psiquiatría SSA, México, 14370 D.F. O-06 ACTIVIDADES EEG DEL SUEÑO LENTO II EN EL SUBTÁLAMO Y LA CORTEZA FRONTAL MESIAL EN PACIENTES CON ENFERMEDAD DE PARKINSON Y EPILEPSIA FOCAL. Velasco A.L., Velasco M., Díaz-de-León A.E*., Granados D., Carrillo-Ruiz J.D*., Jiménez F., Velasco F. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México SS. y UIM. Neurofisiología, Centro Médico Nacional IMSS., México D.F. O-07 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA CRÓNICA DEL HIPOCAMPO (EECHC) SOBRE LA MEMORIA RECIENTE EN PACIENTES CON EPILEPSIA DEL LÓBULO TEMPORAL MEDICAMENTE INTRATABLE. Jiménez F., Hernández J.A.*, Velasco A.L., Velasco F., y Velasco M. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de Mexico SS y UIM Neurofisiología, Centro Medico Nacional, IMSS, México D.F. O-08 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN SUBTALÁMICA AGUDA SOBRE LOS CICLOS SUEÑOVIGILIA EN PACIENTES CON ENFERMEDAD DE PARKINSON. Velasco M., Díaz-de-León A.E.*, Velasco A.L., Jiménez F., Carrillo-Ruiz J.D.*, y Velasco F. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México, SS y UIM. Neurofisiología, Centro Médico Nacional IMSS, México D.F. O-09 EFECTO ANALGÉSICO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA CRÓNICA DE LA CORTEZA MOTORA PRIMARIA (MI) EN PACIENTES CON DOLOR POR DEAFERENTACIÓN. Velasco F., Velasco M., Carrillo J.D., Marquez I y Velasco A.L. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México, SS y UIM Neurofisiología, Centro Médico Nacional, IMSS México D.F. Salón 2 Reproducción y Endocrinología Moderador: Dr. Horacio Merchant-Larios O-10 EFECTO DE LA PRIVACIÓN MATERNAL EN EL PERÍODO POSTNATAL TEMPRANO Y EL REEMPLAZAMIENTO DE LAS SEÑALES SOCIALES Y ODORÍFERAS DEL NIDO SOBRE EL DESARROLLO DE LA CONDUCTA MATERNAL EN RATAS JUVENILES. Melo, A.I., Gonzalez, A.*, Lovic, V.* y Fleming, A..S.* Centro de Investigación en Reproducción Animal, CINVESTAV-UAT y Dept. of Psychology, University of Toronto at Mississauga, ON Canadá. O-11 CARACTERÍZACIÓN DE LAS VOCALIZACIONES DEL CORTEJO SEXUAL EN MACHOS CABRIOS. Paredes E. A.*(1)., Poindron Pascal (1), Delgadillo, J. A (2) y Terrazas A.*(1) (1) INB, UNAM, AP 11141, Querétaro 76001. (2) UAAAN, UL. AP 940, Torreón Coahuila. O-12 EFECTO DE LA INGESTIÓN DE LECHE EN LA EXPRESIÓN DE LA PROTEINA FOS EN EL HIPOTALAMO Y TALLO CEREBRAL DE CRÍAS DE CONEJO. Rovirosa M. J.*, Avilés K.*, Caba M. Laboratorio de Biología de la Reproducción, IIB, Universidad Veracruzana. O-13 RESPUESTA METABOLICA Y ACTIVIDAD FUNCIONAL ANTE EL AYUNO Y LA SACIEDAD DE ALGUNOS NÚCLEOS HIPOTALAMICOS EN RATAS DESNUTRIDAS CRONICAMENTE. Parra-Gámez L*, Salazar Juárez A*, Escobar Briones C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina. UNAM. México. O-14 EFECTO DEL REEMPLAZO HORMONAL CON ANDRÓGENOS SOBRE LA EXPRESIÓN DE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULINA EN EL HÁMSTER DORADO. Arteaga, M*., MárquezVillanueva Y*., Retana-Márquez S y Velázquez-Moctezuma J. Depto. Biol. Reproducción. UAM-Iztapalapa. México. D.F. O-15 LA RESPUESTA DE LAS CABRAS AL EFECTO MACHO NO DEPENDE DE UN PERIODO PREVIO DE COMPLETA SEPARACION DE LOS MACHOS. Rodríguez, J.G.*(1) (avalado por Delgadillo, J.A.), Véliz, F.G.*(1,2), Flores, J.A.*(1), Duarte, G.*(1), Vielma, J.*(1), Carrillo, E.*(1), Delgadillo, J.A.(1) (1)UAAAN-UL AP 940, Torreón, Coahuila. (2) FMVZ-UNAM, AP 04510, México, DF. O-16 LA MICROINYECCIÓN DE TIMULINA EN EL HIPOTÁLAMO MEDIO, MODIFICA EL BLOQUEO EN LA OVULACIÓN INDUCIDO POR LA ANESTESIA CON ETER, EN RATONES PREPÚBERES TRATADOS CON GONADOTROPINAS. García, L.1*, Hinojosa L.1*, Olvera, E1*, Chavira, R.2*, Romano, M.C.3, Domínguez, R.1 y Rosas, P.1*. 1UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. 2INCMN "Salvador Zubirán". 3Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, IPN. México, D.F. O-17 LA EXPRESIÓN DEL SOX9 COMO INDICADOR DEL ORIGEN DE LAS CELULAS DE SERTOLI EN LA CRESTA GENITAL. Merchant-Larios, H. y Moreno-Mendoza, N.* Departamento de Biología Celular y Fisiología, Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México D.F. O-18 PAPEL DE LA COLECISTOQUININA EN LA RESPUESTA ELÉCTRICA DEL NÚCLEO DEL TRACTO SOLITARIO EN OVEJAS RECIÉN NACIDAS. Guevara-Guzmán, R., Poindron, P+., Lévy, F*++., Andre, J*+++., y Nowak, R*++. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, +Centro de Neurobiología, UNAM ++ CNRS/INRA URA 1291, Nouzilly, +++ Faculté des Sciences et Techniques Saint Jérôme, F-13397 Marseille Cedex 13, France. Salón 3 Fisiología I Moderador: Dr. José Antonio Arias Montaño O-19 CARACTERÍSTICAS CINETICAS DEL INTERCAMBIADOR K+/H+ DE SINAPTOSOMAS. Sanchez-Armass, S. *Ortega, F. y *Gonzalez J. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de San Luis Potosi,SLP 78230, Mx. Tel:(48) 2623-45 ext 27; Fax:(48)1769-76; armass@uaslp.mx O-20 MEDICIÓN DE LOS CAMBIOS DE LA [Ca2+] DEL RETÍCULO SARCOPLÁSMICO 2+ ([Ca ]RS) EN CÉLULAS AISLADAS DEL MÚSCULO LISO. Gómez-Viquez, L.* González, A.* García, Ubaldo. y Guerrero-Hernández, A.* Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Depto. de Bioquímica del CINVESTAV-IPN, México, D.F. O-21 LA ACTIVACIÓN DE RECEPTORES A HISTAMINA H3 INHIBE LA LIBERACIÓN DE GLUTAMATO EN SINAPTOSOMAS DEL HIPOCAMPO DE LA RATA REGULANDO CANALES DE CALCIO ACTIVADOS POR VOLTAJE TIPO N Y P/Q. Molina-Hernández, A.*, Sierra, J.J.*, y AriasMontaño, J.A. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, D.F. O-22 REGISTRO DE VARIACIONES DE CALCIO INTRACELULAR EN REBANADAS DE HIPÓFISIS DE RATÓN. Sánchez C.*, Fiordelisio T.* y Hernández-Cruz A. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-23 VARIACIONES ESPONTANEAS DE Ca2+ INTRACELULAR EN CELULAS CROMAFINES DE RATA REGISTRADAS MEDIANTE MICROSCOPIA CONFOCAL CON BARRIDO LASER DE MULTIPLES RAYOS. Hernández-Cruz A., Millán-Aldaco D.A.* y Jiménez N.*, Departamentos de Biofísica y Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-24 FROM MESENCHYMAL PROGENITORS TO BRAIN CELLS. Tanja Zigova1,2, Shijie Song3,4, Alison E. Willing1,2, Jennifer E. Hudson1,2, N. Chen1,2, P.R. Sanberg1,2, J. Sanchez-Ramos3,4. Center for Aging and Brain Repair1, Departments of 2Neurosurgery, 3Neurology, USF College of Medicine, and 4James A. Haley VA Hospital, Tampa FL, USA O-25 MECANISMO DE REGULACIÓN DEL PROCESAMIENTO ALTERNATIVO DEL pre-mRNA DE LA PROTEÍNA DE UNIONES ESTRECHAS ZO-1. Martínez Contreras R.D.∗ (avalado por Martínez Fong Daniel) y Valdés J.∗ Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Departamento de Bioquímica. CINVESTAV-IPN. México, D.F. O-26 LA PROTEÍNA DE LA UNIÓN ESTRECHA ZO-2 SE ASOCIA CON LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN: FOS, JUN y C/EBP. Betanzos, A.∗, Huerta, G.M.∗, López-Bayghen, E.∗ y GonzálezMariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV, México, D.F. Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Synaptic biophotonics Dr. George Augustine Department of Neurobiology, Duke University Medical Center. Simposia 12:00 – 14:00 h Salón 1 Fisiología y fisiopatología de la secreción de insulina Coordinadora: Dra. Marcia Hiriart S- 01 FISIOPATOLOGIA DE LA DIABETES TIPO 2. AVANCES Y PERSPECTIVAS. Clicerio González Villalpando FACP. Centro de Estudios en Diabetes. IMSS. México. S-02 FISIOLOGÍA DE LA SECRECIÓN DE INSULINA. Hiriart M, Vidaltamayo R., Sánchez Soto C., González-Martínez T, Navarro V, Aguayo C, Arellanes-Licea E., Sánchez-Durán A. y Rosenbaum T. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM S-03 CANALES DE K+ SENSIBLES AL ATP: ¿QUE PAPEL JUEGAN EN LA REGULACIÓN DE LA SECRECIÓN DE INSULINA? Lydia Aguilar-Bryan†, Alvaro Muñoz‡, Mitsuhiro Nakazaki*, Susanne Ullrich**, Andrey Babenko†, Ana Crane†, Tina Hahn†, Min Hu† y Joseph Bryan†. †Baylor College of Medicine, Houston, TX, EUA; ‡Instituto de Fisiología Celular, UNAM, México; *Universidad de Kagoshima, Japon y **Universidad de Colonia, Alemania S-04 LAS CONEXINAS Y SU PAPEL EN LA REGULACION DE LA SECRECIÓN DE INSULINA. E. Martha Pérez-Armendariz, UNISSER, Departamento de Medicina Experimental, Facultad de Medicina, UNAM. Salón 2 ¿Cuál es el futuro de la fisiología en la era genómica? Coordinador: Dr. Hugo Aréchiga S-05 ¿CUÁL ES EL FUTURO DE LA FISIOLOGÍA EN LA ERA GENÓMICA?. Aréchiga, H. División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM, México, D. F., 04510. S-06 DARWIN, LOS MÉDICOS Y LOS FISIÓLOGOS. Marcelino Cereijido. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV. S-07 EL RESCATE DE LA FISIOLOGÍA INTEGRATIVA. Beyer, Carlos. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. Ixtacuixtla, Tlaxcala. S-08 LA FISIOLOGÍA EN EL FUTURO DE LA MEDICINA. Dr. Gregorio Pérez-Palacios. Unidad de Investigación, Enseñanza y Comunicación en Salud Reproductiva, Facultad de Medicina, UNAM / Hospital General de México. S-09 LA ENSEÑANZA DE LA FISIOLOGÍA EN LA ERA GENÓMICA. Gijón, E. y Farías, J. M. Departamento de Fisiología. Facultad de Medicina. UNAM. Apartado Postal 70-250. México, D.F. 04510. Sesión de carteles 17:00 –20:00 h Canales iónicos y biofísica C-01 CORRIENTES IÓNICAS ACTIVADAS POR LA EXPOSICIÓN A UN GRADIENTE OSMÓTICO CONTINUO EN CÉLULAS DE GLIOMA C6. Ordaz S.B.*, Vaca L. Pasantes-Morales H. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. C-02 VINPOCETINE EFFECTS ON DA AND DOPAC DISTRIBUTION INSIDE AND OUTSIDE STRIATAL NERVE ENDINGS; COMPARISON WITH CLORGYLINE AND RESERPINE EFFECTS. Trejo, F*, Sitges, M*. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México, D.F. C-03 EFECTOS DE DOS TOXINAS DE LA ANÉMONA MARINA BUNODOSOMA GRANULIFERA SOBRE CORRIENTES DE SODIO NEURONALES. Salceda, E.,1* Garateix, A.2* y Soto, E.1 1 Instituto de Fisiología, BUAP., Puebla, México. 2 Instituto de Oceanología, CITMA, La Habana, Cuba. C-04 INHIBICION DE LOS CANALES PRESINAPTICOS DE SODIO POR NIMODIPINA Y NITRENDIPINA. Galindo, C.A.* y Sitges, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México D.F. C-05 CARACTERIZACIÓN DE LAS CORRIENTES DE POTASIO ACTIVADAS POR VOLTAJE EN NEURONAS DE HIPOCAMPO DE RATA. Velasco-Torres, M.* y Onetti Carlos. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, Apdo. Postal 199, 28000 Colima, Col. México C-06 LA CORRIENTE IKM EN NEURONAS AFERENTES VESTIBULARES EN CULTIVO PRIMARIO. Pérez, M.C.*, Limón, A.*, Vega R. y Soto, E. Instituto de Fisiología, BUAP. Puebla, Pue. C-07 MODULACION MUSCARINICA DE CORRIENTES DE K+ EN NEURONAS SIMPATICAS. Cruzblanca H. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. Colima, Col. C-08 EFECTO DEL PROPOFOL SOBRE LA DESACTIVACIÓN DEL COMPONENTE RÁPIDO DE LA CORRIENTE DE RECTIFICACIÓN TARDÍA (IKr) EN MIOCITOS VENTRICULARES DE GATO. 2 Barajas-Martínez H.,* 1Elizalde-Lozano A.,* 2Ramírez-Flores G.* y 1Sánchez-Chapula J. A. 1Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Colima, Colima. 2Departamento de Medicina, Centro Universitario del Sur, Universidad de Guadalajara, Cd. Guzmán, Jalisco México. C-09 LOS RECEPTORES DE RYANODINA ESTAN PRESENTES EN EL COMPLEJO DE GOLGI DE NEURONAS INTACTAS DEL GANGLIO CERVICAL SUPERIOR DE RATA. Toro, S.*, Fiordeliso, T.* y Hernández-Cruz, A. Departamento de Biofísica. Instituto de Fisiología Celular. UNAM. C-10 NON-INVASIVE CALCIUM MEASUREMENTS IN AN INTRACELLULAR * COMPARTMENT. Pottosin, I.I. (avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Martínez-Estévez, M.*, Dobrovinskaya, O.R.* & Muñiz, J.* Centro Universitario de Investigaciones Biomedicas, Universidad de Colima, México. C-11 IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN DE CANALES DE Ca2+ DEL TIPO TRP EN EL ESPERMATOZOIDE HUMANO. Treviño, C.L.1,*, Serrano C.J. 1,*, Vega-Hernández, A.2,*, Pacheco, J.3,*, Tsusumi, V.4,* Félix, R.2, y Darszon, A1,*. 1Depto. de Genética y Fisiología Molecular, Instituto de Biotecnología, UNAM; 2Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, Cinvestav-IPN; 3Fac. de Medicina, Universidad La Salle; 4Depto de Patología Experimental, Cinvestav-IPN. C-12 EL TRATAMIENTO CRÓNICO CON GABAPENTINA REGULA LA EXPRESIÓN DE CANALES DE Ca2+ NEURONALES DEL TIPO N. Vega-Hernández, A.* y Félix, R. Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, Cinvestav-IPN. C-13 LAS PROTEÍNAS RGS3 ATENÚAN LA MODULACIÓN DE LOS CANALES CaV2.3 POR PROTEÍNAS G. Toro-Castillo, C.* (avalado por Rubio Rafael) y Meza, U.* Departamento de Fisiología y Farmacología. Facultad de Medicina. Universidad Autónoma de San Luis Potosí. C-14 INHIBITION OF INTRAMEMBRANE CHARGE MOVEMENT BY G-PROTEIN ACTIVATION IN RAT SYMPATHETIC NEURONS. Hernández-Ochoa, E.O.*1, Hernández, J.M.*1, Mackie, K*2. and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. C-15 OPPOSING ACTIONS BETWEEN G-PROTEINS AND PMA ON N-TYPE Ca2+ CHANNEL FUNCTION IN RAT SYMPATHETIC NEURONS. Arenas, M.I.*1, Díaz, A.F.*1, Mackie, K.*2 and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. C-16 ACTIVATION KINETICS OF N-TYPE Ca2+ CURRENTS IN β2 G-PROTEIN SUBUNIT EXPRESSED SCG NEURONS MIMICS NOREPINEPHRINE RESPONSES. Hernández, J.M.*1, Arenas, M.I.*1, Mackie, K.*2 and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. C-17 LONG-TERM DEPOLARIZATION UP-REGULATES ENDOGENOUS POTASSIUM CURRENTS IN Xenopus laevis OOCYTES. Farías, J.M., Galván, E.*, Zambrano, Y.G.*, Vázquez, M.* and García, D.E. Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. C-18 MECANISMO DE ACCION DE LA PRIMAQUINA SOBRE EL CANAL DE Na+ hH1 y rSkM1 TRANSFECTADOS EN OVOCITOS DE LA RANA Xenopus laevis. Orta-Salazar, G.J.¶*(Avalado por José Ramón Eguibar Cuenca) Salinas-Stefanon, E.* Laboratorio de Biofísica Cardiaca, Instituto de Fisiología, BUAP, Puebla, México. C-19 CORRIENTES DE POTASIO (Ito e IK ) EN CÉLULAS M DEL VENTRÍCULO DE GATO. Anell M.C.* §, (avalado por Onetti Percello, Carlos.) Atonal F.F.* ¶ y Elizalde A*. C.U.I.B. Universidad de Colima. C-20 EFECTO DE LA PRIMAQUINA SOBRE LA CORRIENTE DE CALCIO TIPO L, EN MIOCITOS VENTRICULARES DE CORAZON DE RATA. Mancilla-Simbro, C.* (Avalado por José Ramón Eguibar), Salinas-Stefanon, E.* Instituto de Laboratorio de Biofísica Cardiaca, Fisiología, BUAP, Puebla, México. C-21 CARACTERIZACIÓN DE UNA CORRIENTE CATIÓNICA INDUCIDA POR TAPSIGARGINA EN CÉLULAS ß PANCREÁTICAS Y SU INFLUENCIA EN LA SECRECIÓN DE INSULINA. Cruz-Cruz, R*. Sánchez-Soto, M C*. e Hiriart, M. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. México, D.F. C.P. 04510. C-22 EL NGF MODULA LA CORRIENTE DE CALCIO Y LA EXPRESIÓN DE INSULINA EN CÉLULAS ß DE RATA NEONATA. Navarro, V*. González-Martínez, T*. Sánchez-Soto*, M. C. e Hiriart, M. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM, México. Músculo C-23 MODULACIÓN DE LA ACTIVIDAD CONTRÁCTIL DEL ÚTERO HUMANO GESTANTE POR ANDRÓGENOS. Barrera D.*, Navarrete E.*, Jasso J.*, Bustos H.*, González L.* y Perusquía M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. C-24 CARACTERIZACIÓN DEL EFECTO VASODILATADOR DE DEHIDROEPIANDROSTERONA. Silva, M.*, Navarrete, E.* y Perusquía, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas., UNAM. C-25 EFECTO DE LA TESTOSTERONA SOBRE LA ORGANIZACIÓN ANATÓMICA DEL MÚSCULO PUBOCOCCÍGEO EN LA RATA MACHO. Alvarado M*, Pacheco P, Hernández ME y Manzo J. Inst. de Neuroetología, Univ. Veracruzana, Xalapa, Ver.; Inst. de Inv. Biomédicas, UNAM, México, D.F. C-26 EFECTO DEL ENTRENAMIENTO PARA ADQUIRIR VELOCIDAD SOBRE LAS PROPIEDADES CONTRÁCTILES DE LOS MÚSCULOS ESQUELÉTICOS DE RATA SOMETIDOS A CONTRACCIONES EXCÉNTRICAS. Virgen A.* (Avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Muñiz J.*, Peraza A.* Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. C-27 ASIMETRIA DIMORFICA SEXUAL NEUROMUSCULAR EN LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LA CREATINA CINASA DE LA RATA WISTAR. Jiménez-Barrón, E.* y Ramírez, O. Depto. de Bioquímica, CINVESTAV- I.P.N. México. C-28 EFECTO DE CATIONES DIVALENTES SOBRE LAS CONTRACTURAS POR K+ EN LAS FIBRAS MUSCULARES LENTAS DESNERVADAS DE LA RANA. Hernández, L.∗ (Avalado por González-Burgos, Ignacio), Huerta, M∗, Trujillo, X.∗ y Vásquez, C.∗ Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, México. C-29 PAPEL DEL INTERCAMBIADOR SODIO-CALCIO EN LA RELAJACION DEL MUSCULO LISO TRAQUEAL DE COBAYO. Herrera Mendoza P.*(avalado por Rafael Rubio Garcia.), Espericueta Monsivais V.M.*, Romero A.C.* y Espinosa Tanguma R.* Departamento de Fisiología y Farmacología de la Facultad de Medicina de la UASLP. San Luis Potosí, S.L.P. México, 78210. Tel. 444-826-2345 ext. 552, FAX 444-817-6976, espinosr@uaslp.mx. C-30 LA OUABAÍNA PRODUCE UNA CONTRACCIÓN BIFÁSICA DEL MÚSCULO LISO TRAQUEAL DE COBAYO: PAPEL DE LOS RECEPTORES β. Navarro Huerta M.P.*, Valle Aguilera J.R.*, Sanchez-Armass S. y Espinosa Tanguma R.* Departamento de Fisiología de la Facultad de Medicina de la UASLP. San Luis Potosí, S.L.P. México, 78210. Tel. 444-826-2345 ext. 552, FAX 444-817-6976, espinosr@uaslp.mx. Cardiovascular C-31 INFLUENCIA DE LA HIDRALAZINA Y METILAMINA SOBRE LA CONCENTRACION DE PEROXIDO DE HIDROGENO EN EL PLASMA DE RATAS. Lorenzana-Jiménez M., Vidrio H., Diaz-Arista P.* y Baeza A.* Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina y Departamento de Electroquímica, Facultad de Química, UNAM. México, D.F. 04510 C-32 ATEROTROMBOSIS E INHIBICIÓN DE LA FIBRINOLISIS POR LIPOPROTEINA(a). De la 1* Peña Díaz A ,(avalado por Fernández Guardiola Augusto), Izaguirre Avila R1*, Cardoso Saldaña G1*, Zamora González J1*, Barinagarrementeria F2* y Anglés-Cano E3*. 1 Instituto Nacional de Cardiología "Ignacio Chávez". 2 Instituto Nacional de Neurología, México, D.F. 3 INSERM U 460, Paris, Francia. C-33 BLOQUEO DE LOS CANALES DE POTASIO HERG POR QUINIDINA. Ferrer-Villada T1*, Navarro-Polanco RA1*, Sanguinetti MC2*, Sanchez-Chapula JA1. 1.Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. 2. Department of Medicine, Division of Cardiology, Eccles Institute of Human Genetics, University of Utah. C-34 MODELO DE LESIÓN EXPERIMENTAL POR PUNCIÓN VENTRICULAR TRANSTORÁCICA EN COBAYO Y REGISTRO ELECTROCARDIOGRÁFICO. Valencia, J.* ContrerasBarrios M.A.*, Verdugo L., García X. y Gijón, E. Departamento de Fisiología. Facultad de Medicina. UNAM. Ap. p. 70-250.México, D.F. 04510. México. C-35 EFECTOS DEL TRATAMIENTO CON DITPA DE RATAS DIABETICAS SOBRE LAS CORRIENTES DE POTASIO REPOLARIZANTES EN MIOCITOS VENTRICULARES CARDIACOS. Madrigal-Quiñonez R*, Ferrer-Villada T*, Torres-Jácome J*, Cassis O*, Sánchez-Chapula JA. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Colima. C-36 EFECTOS DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA Spirulina platensis SOBRE LAS RESPUESTAS VASOMOTORAS DE ANILLOS DE AORTA DE RATA. Mascher, D.1, Paredes-Carbajal, M.C.1, Cortés-Julián, G.*1, Juárez-Oropeza, M.A.*2, Torres-Durán, P.V.*2. Depto. de Fisiología (1) y Depto. de Bioquímica (2), Fac. de Medicina, UNAM. A.P. 70-250, México D.F., 04510. C-37 ENZIMAS ANTIOXIDANTES EN UN MODELO DE HIPERTENSIÓN E HIPERTRIGLICERIDEMIA EN RATA. DIFERENCIAS ASOCIADAS AL GÉNERO Y A LA EDAD. Baños G.* (avalado por Guarner Verónica),Medina O.*, Maldonado P.*Zamora J.*, Pavón N.* y Pedraza J.*. Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez” y * Facultad de Química, UNAM. C-38 RESPUESTAS VASOMOTORAS DE ANILLOS DE AORTA PROVENIENTES DE RATAS EXPUESTAS A CAMPOS ELECTROMAGNÉTICOS. Paredes Carbajal M.C. 1, Mascher D. 1, Juárez Oropeza M.A.*2, Gutiérrez N.*1, Verdugo Díaz L. 1 Depto. de Fisiología, 2 Depto. de Bioquímica, Facultad de Medicina, UNAM. C-39 ALTERACIONES DEL MIOCARDIO DE FETOS DE RATÓN EXPUESTOS A FLUNITRAZEPAM. Márquez-Orozco, Amalia, Márquez-Orozco, M.C., Gazca-Ramírez, M.V.* y De la Fuente-Juárez, G.* Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. Fisiología renal C-40 ANALISIS DE LA FUNCION DE CELULAS TUBULARES PROXIMALES EN RATAS CIRROTICAS Y CON SINDROME HEPATORRENAL, INDUCIDO CON TETRACLORURO DE CARBONO. Jaramillo Juárez F., Rodríguez Vázquez M.L.*, Rincón Sánchez A. R.*, Llamas Viramontes J.*, Posadas del Río F.A. y Reyes Sánchez J.L.. Universidad Autónoma de Aguascalientes, Universidad de Guadalajara y CINVESTAV-IPN, México, D.F. C-41 DISTRIBUCIÓN DE LAS PROTEÍNAS INTEGRALES DE LA UNIÓN ESTRECHA: CLAUDINAS 3, 4 Y 5, EN LOS DIFERENTES SEGMENTOS DE LA NEFRONA DEL CONEJO ADULTO Y NEONATO. Martín, D.*, Namorado, M.C. *, Islas, S.*, Luna, J.*, Sierra, G.*, Lamas, M.*, GonzálezMariscal, L.* y Reyes, J.L. Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV. México D.F. 07360. C-42 IDENTIFICACIÓN INMUNOCITOQUÍMICA DEL CANAL Kv 1.3 EN CÉLULAS DE TÚBULO COLECTOR DE MÉDULA INTERNA DEL RIÑÓN DE RATA. Carrisoza-Gaytán, R.* Bolivar, J*. Salas, M.* Tapia, D.* Castilla, S.A.* y Escobar-Pérez, Laura. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina. UNAM, México, D.F. Metabolismo C-43 GASTO DE ENERGÍA Y VARIABLES METABÓLICAS DE LA RATA LACTANTE ALIMENTADA CON UNA DIETA MARGINAL EN ENERGÍA Y SU EFECTO EN EL CRECIMIENTO DE LAS CRÍAS. Ayala-Moreno, R* Racotta-Poulieff R. ♦, Hernández-Montes, H*, Quevedo-Coro-na, L.*♦. Unidad de Investigación Médica en Nutrición, CMN siglo XXI, IMSS y Departamento de Fisiología de la ENCB, IPN. México, D.F. C-44 DESARROLLO DE LA OBESIDAD EN LAS CRÍAS DE RATAS ALIMENTADAS CON UNA DIETA ALTA EN LÍPIDOS DURANTE LA GESTACIÓN Y LACTANCIA. Aranda-Batalla, C.* (avalado por Racotta-Poulieff Radu), Guerrero-Cruz, F.*, Rodríguez-Cruz, M.* y Del Prado-Manríquez M.E.*. Unidad de Investigación Médica en Nutrición, CMN s. XXI, IMSS. México, D.F. C-45 EFFECT OF GLUCOSE AND FATTY ACID AVAILABILITY ON NEONATAL AND ADULT RAT HEARTS CONTRACTILITY AND ON CARDIOMYOCYTE GLUCOSE UPTAKE. Carbó R.*, Contreras K.* y Guarner V. Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez”, S.S.A., México D.F. C-46 EFECTO DE LA RESERPINA SOBRE LAS CONCENTRACIONES DE ADRENALINA Y NORADRENALINA EN ALGUNOS ÓRGANOS ESPLÁCNICOS. Martínez-Olivares, R.,* Villanueva, I.,* Piñón, M. y Racotta, R. Depto. de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México, D.F. C-47 EVALUACIÓN DE ALGUNOS ÓRGANOS Y METABOLITOS BAJO CONDICIONES DE AYUNO Y SACIEDAD EN RATAS REHABILITADAS. Miñana-Solis, M.C.*, Parra-Gámez, L*, EscobarBriones C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina. U.N.A.M. C-48 EFECTO DE LA DIETA EN LA RESPUESTA OSMORREGULATORIA DE POSTLARVAS DE CAMARÓN (Litopenaeus vannamei). Palacios E.* (avalado por Zenteno Tania), Bonilla, M.A.*, Racotta, I.S.* Programa de Acuicultura, Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, México. C-49 EFECTOS METABOLICOS DE LA EXPOSICIÓN A HIPOXIA EN EL CAMARÓN BLANCO Litopenaeus vannamei. Racotta, I.S.* (avalado por Zenteno Tania), Palacios E.*, Méndez, L.*, Programa de Acuicultura, CIBNOR, México. Psicofisiología C-50 ANÁLISIS DE MARCADORES POLIMÓRFICOS EN LA REGIÓN CERCANA AL GEN DEL RECEPTOR 7 NICOTÍNICO (CHRNA7) EN PARES DE HERMANOS ESQUIZOFRÉNICOS. Medellín, M.A.* (avalado por Rocha Arrieta, Luisa), Fresán, A.*, García, M.*, Apiquián, R.*, Nicolini, H.* y Cruz, C.* Subdirección de Investigaciones Clínicas, Instituto Nacional de Psiquiatría, México, D.F. C-51 ESTABILIDAD DE LA POTENCIA ABSOLUTA DE 9 REGISTROS MENSUALES REPETIDOS. Galindo-Vilchis, L.*1 Ramos-Loyo, J2., Arce, C.3*, del Río-Portilla, Y.*1, y Corsi-Cabrera, M.1 1 Laboratorio de Sueño, Facultad de Psicología, UNAM. 2Inst de Neurociencias U de Guadalajara, Jal. 3ENP, UNAM, México. C-52 ALGORITMO PARA CALCULAR LA DENSIDAD DE COHERENCIA DE LA ACTIVIDAD ELÉCTRICA CEREBRAL EN HUMANOS. Gutiérrez, M.*1, Méndez, I. *2, Diez-Martínez, O.1 y Manjarrez, E.*2. 1Departamento de Psicología, UDLA, Cholula, Puebla, México e 2Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Puebla, México. C-53 EFECTO DEL EEG PAROXÍSTICO EN LOS POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) EN NIÑOS. G. Yánez*, J. Bernal*, M. Rodríguez*, , E. Marosi, V. Guerrero*, B. Prieto*, L. Luviano*. FES Iztacala, UNAM.Apoyado por DGAPA UNAM IN304399. C-54 ESTUDIO DE LOS POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) DURANTE UNA TAREA DE EJECUCIÓN CONTINUA (TEC) EN NIÑOS. J. Bernal*, M. Rodríguez*, G. Yánez*, E. Marosi, V. Guerrero*, B. Prieto*, L. Luviano*. Proyecto de Neurociencias, FES Iztacala, UNAM. Apoyado por DGAPA.UNAM: IN304399 C-55 CARACTERIZACIÓN DEL COMPONENTE P600/SPS EN NIÑOS NORMALES Y CON TRASTORNOS DE LA LECTURA (TL) Prieto-Corona, B.*, Rodríguez, M.*, Yáñez, G.*, Bernal, J.*, Marosi, E., Guerrero, V.*, Luviano, L.* Neurociencias. FES-Iztacala. UNAM. México. Apoyado por DGAPA. UNAM. IN304399 C-56 DIFERENCIAS EN LA INTEGRACIÓN LÉXICA ENTRE NIÑOS LECTORES NORMALES (NLN) Y NIÑOS CON TRASTORNOS EN LA LECTURA (NTL): ESTUDIO CON POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) Rodríguez, M.*, Bernal, J.*, Prieto, B.*, Marosi, E., Yánez, G.*, Luviano,L.*, Reyes,A.* Neurociencias.FES-Iztacala. UNAM. México. Apoyado por DGAPA. UNAM. IN304399. Conducta C-57 LA SOLA EXPOSICIÓN A DÍAS LARGOS ESTIMULA Y MANTIENE ELEVADAS LAS CONCENTRACIONES PLASMÁTICAS DE TESTOSTERONA EN LOS MACHOS CABRÍOS. Flores, J.A.(1,2)* (avalado por Delgadillo J.A.), Hernández, H.* (2), Martínez de la Escalera, G. (2), Poindron, P. (2). Delgadillo, J.A.(1) (1) UAAAN AP 940, Torreón, Coahuila. (2) CNB-UNAM AP 1-1141, Querétaro, Qro, 76001. C-58 EFECTO DE LA 5β,3α-PREGNANOLONA (PGL) Y UN ANALOGO DEL GABA (THIP), SOBRE LA EXCITABILIDAD NEURONAL Y LA DIFERENCIACION SEXUAL CEREBRAL EN RATAS NEONATAS. Lima-Hernández, F.J.* y Beyer C. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. C-59 EFECTO DE LAS PROGESTINAS EN LA PREFERENCIA DE LUGAR CONDICIONADA Y LA COPULA REGULADA EN RATAS HEMBRA. Camacho F.J1.*, González O2., Domínguez E1., Ramírez J.M2., Beyer C2. y Paredes R.G1. 1Instituto de Neurobiología UNAM. Querétaro. 2CIRA. CINVESTAV - UAT. Tlaxcala. C-60 ANÁLISIS DE LA ORGANIZACIÓN DE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULINA EN LAS SUBLÍNEAS DE RATAS LY Y HY DE LA CEPA Sprague-Dawley. Romero-Carbente, J.C.*, Moyaho, A.* y Eguibar, J.R. Instituto de Fisiología B.U.A.P. Apdo. Postal 406, Puebla, Pue. México. C-61 UN AMAMANTAMIENTO AL DIA ACTIVA C- FOS EN AREAS ESPECIFICAS DEL CEREBRO ANTERIOR DE LA CONEJA: EFECTO DE REDUCIR EL INTERVALO ENTRE LOS AMAMANTAMIENTOS. Jiménez, A.* , Beyer, C. y González-Mariscal, G. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. Tlaxcala, México. C-62 EFECTO DE LA PRESENCIA TEMPRANA DE LOS HERMANOS EN LAS RESPUESTAS FISIOLÓGICAS Y CONDUCTUALES A RETOS AMBIENTALES DE GAZAPOS AL DESTETE. Amando Bautista∗, Leticia Nicolás∗, Robyn Hudson y Margarita Martínez-Gómez. Posgrado en Neuroetología-UV; Centro de Investigaciones Fisiológicas-UAT; Instituto de Investigaciones Biomédicas-UNAM C-63 LA L-DOPA DISMINUYE LA MEMORIA ESPACIAL E INCREMENTA EL OXIDO NITRICO EN ESTRIADO Y CORTEZA DE RATA CON LESION DOPAMINERGICA. M-Mendieta L*, Félix Morales Luna, Parra C.C.*, Bastida J.C.*, Tirso M.R*. Limón I-D*, Lab. de Neurofarmacología FCQBUAP, Puebla, Pue. C.P. 72570 C-64 LA FRACCION 25-35 DE LA AMILOIDE-β EN NEONATOS DISMINUYE EL APRENDIZAJE Y MEMORIA ESPACIAL. Cuevas M.E.*1, Luna M.F.1, Martínez G.I.*1, Solis J.L.*1, Guevara F.J*2, Flores T.J*3 y Limón I.D.*1., 2Instituto Nacional de Neurología México D.F., 3Instituto de Fisiología-BUAP y 1Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP, Puebla, Pue. C-65 EFECTO DE LA REHABILITACION SOBRE LAS ALTERACIONES CAUSADAS POR LA DEPLECION UNILATERAL DE DOPAMINA EN EL LADO IPSILATERAL "SANO" DE LA RATA. Vergara-Aragón, P.1,2* (avalado por Fernández-Ruiz Juan) y Whishaw, IQ.*1 .1CCBN. University of Lethbridge, AB Canada. 2Dept.Fisiologia, Fac. Medicina UNAM. Mexico, D.F. C-66 EVALUACIÓN DE LAS SECUELAS MOTORAS DESPUÉS DE LA LESIÓN CORTICAL EN LA RATA. Bueno-Nava A.1*, Avila-Luna A.1*, Espinoza-Villanueva J.2* Ayala-Guerrero F.3 y González-Piña R.1* 1Laboratorio de Plasticidad Cerebral y Proliferación Celular, 2Laboratorio de Histomorfología, InCH-CNR, SSA 3Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. C-67 INFLUENCIA DE LA MODIFICACIÓN DE LOS TONOS SEROTONÉRGICO Y OCTOPAMINÉRGICO DE Procambarus clarkii SOBRE SU COMPORTAMIENTO AGONISTA. Guarneros-Bañuelos,E.* (avalado por Radu G. Racotta Poulieff), Arzuffi-Barrera, R.* y Ramírez-San Juan, E.* Departamento de Fisiología de la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN y CEPROBI, IPN, México, D.F. C-68 EFECTOS DE LA LIGADURA TRANSITORIA DE LA ARTERIA CARÓTIDA SOBRE LA VOCALIZACIÓN EN LA CRÍA DEL COBAYO. Avila-Luna A.1*, Bueno-Nava A.1*, Verduzco-Mendoza A.1*, Espinoza-Villanueva J.2* Ayala-Guerrero F.3 y González-Piña R.1* 1Laboratorio de Plasticidad Cerebral y Proliferación Celular, 2Laboratorio de Histomorfología, InCH-CNR, SSA 3Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. C-69 ANALGESIA DURANTE LA INMOVILIDAD INDUCIDA POR PINZAMIENTO DEL CUELLO EN RATÓN. Miranda A.*, Fregoso T.*, De La Cruz F.*+ y Zamudio S.+ Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México, D. F. martes 10 de septiembre Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Fisiología II Moderador: Dr. Francisco Fernández de Miguel 0-27 ACTIVACION DE LA PROTEINA CINASA C POR MELATONINA: PARTICIPACION EN LAFORMACION DE FOCOS DE ADHESION EN LAS CELULAS MDCK. Ramírez-Rodríguez, G.B.* 1,2 Hernández-Gutiérrez, M.E.*1 y Benítez-King, G.1 Departamento de Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente Muñiz”, 2. Departamento de Biología Celular, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados. México,D.F O-28 GLICOPROTEINAS INHIBIDORAS DEL CRECIMIENTO NEURITICO PRODUCEN DISTINTOS PATRONES DE REGENERACIÓN EN NEURONAS IDENTIFICADAS. Flores-Abreu N.*, Fernández de Miguel F. Depto. de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-29 INTERACCIONES DEL AMPc Y DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO (GDNF, BDNF) SOBRE LA SOBREVIVENCIA Y EL CRECIMIENTO DE NEURONAS DOPAMINÉRGICAS MECENSEFÁLICAS IN VITRO. Lara, J.* (avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Kusano, K.*, House, S.* y Gainer, H.* National Institute of Neurogical Disorders and Stroke, National Institute of Health, Bethesda, MD, USA, and Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. México. O-30 EFECTO DEL FRAGMENTO N-TERMINAL DE 16 kDa DE LA PROLACTINA SOBRE LA PRODUCCION DE OXIDO NITRICO POR EL ENDOTELIO VASCULAR. Gonzalez, C.*, Corbacho A.M.*, Martínez de la Escalera, G. y Clapp, C. Instituto de Neurobiología, Campus UNAM-Juriquilla, 76220, Querétaro, Qro. O-31 LOCALIZACIÓN ULTRAESTRUCTURAL Y COEXISTENCIA DE ACETILCOLINA, NEUROTENSINA Y MET-ENCEFALINA EN BOTONES PRESINÁPTICOS DEL GANGLIO ESTELAR DEL GATO. González-Maciel A*£, Zetina M.E.* y Morales M.A. Dep. Biol. Cel. & Fisiol., Inst. Inv. Biomédicas UNAM, £M. Electrónica, INP. México D.F. O-32 INTEGRACIÓN SINÁPTICA EN NEURONAS ACOPLADAS ELÉCTRICAMENTE. GarcíaPérez E.*, Vargas-Caballero M.*, Minzoni A.* y Fernández de-Miguel F. Departamento de Biofísica, instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-33 DISTINTOS MODOS DE INTEGRACION SINAPTICA EN NEURONAS ACOPLADAS ELÉCTRICAMENTE. Vázquez-Zuñiga.Y.* García E.*, Minzoni A.*, y Fernández de Miguel F. Depto. de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. Salón 2 Toxicología, Farmacología y Morfometría Moderador: Dr. Hugo Aréchiga O-34 EFECTO DE LA EXPOSICIÓN PROLONGADA A OZONO EN PÁNCREAS. GutiérrezMoreno I., Rugerio-Vargas C., Vega-García I., Borgonio-Pérez G., Rivas-Arancibia S. Departamentos de Fisiología y Biología Celular y Tisular. Facultad de Medicina, UNAM. O-35 SENSIBILIDAD DE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA ESPERMÁTICA EN RATONES TRATADOS CON TETRAÓXIDO DE VANADIO (IV). Aragón M.A.* (avalado por Ayala Escobar María Elena) Altamirano L.M.* Ortiz M.R*. Cortés B.E.* Unidad de Investigación en Genética y Toxicología Ambiental. FES Zaragoza UNAM. Departamento de Ciencias de la Salud. Univesidad Autónoma Metropolitana Iztapalapa. México. D.F. O-36 POTENCIAL ESTRÉS OXIDATIVO EN FOCAS ANILLADAS. Zenteno-Savín, T. y R. Elsner*. Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C., Acuacultura y Biotecnología Marina, La Paz, Baja California Sur, México, y University of Alaska Fairbanks, Fairbanks, Alaska, U.S.A. O-37 EFECTO VASODILATADOR DEL ÓXIDO NÍTRICO EN ARTERIAS PULMONARES DE LECHÓN: MODULACIÓN POR EL ESTRÉS OXIDATIVO Y EVOLUCIÓN CON LA EDAD. LópezLópez, J.G*. (Avalado por Eguibar-Cuenca J.R.), Pérez-Vizcaíno F*., Cogolludo A.L.*, Zaragozá-Arnáez F.*, Ibarra M.*, Tamargo J*. Facultad de Ciencia Químicas, BUAP-México y Facultad de Medicina, UCMEspaña. O-38 ANÁLISIS ULTRAESTRUCTURAL DEL EFECTO DE LA L-DOPA EN EL NUCLEO CAUDADO DE RATA LESIONADO CON 6 HIDROXIDOPAMINA (6-OHDA). Gutiérrez Valdez A.L*; (avalado por Selva Rivas Arancibia), Ordoñez Librado JL*, Montiel Flores E*, Colín-Barenque L*, Aley Medina P*, Espinosa Villanueva J.*, Fortoul T.I*, Machado-Salas J.* y Avila-Costa. M.R*. UIICSE Neurociencias. Facultad de Medina, UNAM. UCLA. O-39 COMPARACIÓN ULTRAESTRUCTURAL DEL EFECTO DE LA L-DOPA Y BROMOCRIPTINA EN NÚCLEO CAUDADO DE RATA LESIONADA CON 6-HIDROXIDOPAMINA (6-OHDA). Ordóñez-Librado JL*, (avalado por Selva Rivas Arancibia) Gutierrez Valdez A*, Montiel-Flores E*, Colín Barenque L*, Espinosa Villanueva J*, Aley Medina P*, Jesús Machado Salas*, Fortoul T.I.* y Avila-Costa MR. Laboratorio de Neuromorfología, FES Iztacala, Facultad de Medicina UNAM. UCLA. O-40 ANÁLISIS MORFOMÉTRICO DE NEURONAS SEROTONÉRGI-CAS EN EL SEXTO GANGLIO ABDOMINAL DEL ACOCIL Cherax quadricarinatus. Mendoza-Zamora, E.*, Rodríguez-Sosa, L, y Aréchiga, H. .División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. O-41 ALTERACIÓN EN LA CITOARQUITECTURA EN NEURONAS DE LA CORTEZA MEDIA PREFRONTAL Y DEL HIPOCAMPO DE RATAS QUE SUFRIERON HIPOXIA DURANTE EL TRABAJO DE PARTO. Juárez-Díaz, I.*(avalado por Gonzalo Flores Alvarez), Moctezuma-Martiñon, C* y Alquicer-Barrera, P. G* Flores, G. Laboratorio de Neuropsiquiatría, Instituto de fisiología de la BUAP. O-42 ESTUDIO MORFOFUNCIONAL DEL EFECTO QUE LA LACTANCIA TUVO EN EL DESARROLLO MAXILAR DE NIÑOS. Estudillo Flores, H. (1)*(avalado por Benjamín Florán Garduño), Palacios Alcocer, A. (1)* y Silva, I. (2)*. (1) Especialidad en Odontopediatría de la Facultad de Medicina y (2) Laboratorio de Neurofisiología de la Licenciatura en Biología en la Universidad Autónoma de Querétaro. Salón 3 Conducta Moderador: Dr. Raúl Aguilar Roblero O-43 CAMBIOS EN LA ACTIVIDAD LOCOMOTORA Y EXPLORATORIA DURANTE EL DESARROLLO DE LA RATA MUTANTE taiep. Flores-Tochihuitl J.* (avalado por Flores Alvarez Gonzalo), Bermúdez M. Eguíbar J.R.& y Flores G. Laboratorio de Neuropsiquiatría* y Laboratorio de Fisiología de la conducta y control motor,& Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México. O-44 APROXIMACIÓN METODOLÓGICA AL ANALISIS DE LA ACTIVIDAD MOTORA Y VOCAL DE UN MODELO DE DEPRESIÓN. Irma Zarco de Coronado. Dpto. Fisiología. Fac. de Medicina. UNAM. CP 04510 O-45 LESIONES DEL ÁREA PREÓPTICA MEDIA/HIPOTÁLAMO ANTERIOR (APM/HA), AFECTAN LA CONDUCTA SEXUAL, SIN ALTERAR LA COORDINACIÓN MOTORA EN RATAS MACHO. Hurtazo H.A.*, Camacho F.J., Paredes R.G. Instituto de Neurobiología-UNAM. Ap. Post. 1-1141. Querétaro, Qro. 76001. Los efectos más dramáticos sobre la conducta sexual masculina, se han encontrado al lesionar bilateralmente el APM/HA. O-46 PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR RYANODINA EN EL NÚCLEO SUPRAQUIASMÁTICO (NSQ) SOBRE LA EXPRESIÓN DEL RITMO CIRCADIANO EN LA CONDUCTA DE INGESTA DE AGUA DE LA RATA. Mercado-López, C. R.* y Aguilar-Roblero Raúl. Depto. de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-47 ESTUDIO CONDUCTUAL Y NEUROQUÍMICO SOBRE EL EFECTO DEL AISLAMIENTO SOCIAL EN RATAS CON LESIÓN NEONATAL DE HIPOCAMPO VENTRAL. Alquicer, G. P.* (Avalado por Gonzalo Flores Álvarez), Silva–Gómez, A. B.* y Flores-Álvarez, G. Instituto de Fisiología, BUAP, Pue, Mex. O-48 PAPEL DE LOS RECEPTORES CCKA Y CCKB EN LA ANSIEDAD Y SU EFECTO EN LA MODULACIÓN DE LA LIBERACIÓN DE GABA ESTIMULADA POR K+. Hernández Gómez A. M.* y Pérez de la Mora Miguel. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM, México, D.F. O-49 ACTIVIDAD CEREBRAL DURANTE LA CODIFICACIÓN Y LA RECUPERACIÓN DE LA MEMORIA DEL CONTEXTO. Cansino, S. 1, Maquet, P.*2,3, Doland, R.J.*3 y Rugg, M.D.*4 1Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología, Universidad Nacional Autónoma de México, 2 Centre de Recherches de Cyclotron, Université de Liege, 3 Wellcome Department of Cognitive Neurology and 4Institute of Cognitive Neuroscience, University College London. O-50 ESTRATEGIAS CONDUCTUALES Y FISIOLÓGICAS DE RATAS SOMETIDAS A DIFERENTES PROGRAMAS DE ALIMENTACIÓN. Solis T.*, Angeles M.*, Mendoza J.Y.*, Martínez T.* y Escobar C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina UNAM. Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h How do G-Protein couple receptors rule the mind? Dr. Bertil Hille Department of Physiology and Biophysics, University of Washington Simposia 12:00 – 14:00 h Salón1 Aspectos moleculares y celulares del desarrollo neural Coordinadores: Drs. Jorge Hernández y Julio Morán S-10 EL CONTROL DE LA PROLIFERACIÓN, DIFERENCIACIÓN Y MUERTE DE CÉLULAS TRONCALES NEURALES. Luis Covarrubias, Jesús Santa-Olalla, José Manuel Baizabal, Mariana Fregoso, y Ma. Del Carmen Cárdenas. Departamento de Genética y Fisiología Molecular. Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México, Apartado postal 510-3, Cuernavaca Morelos 62250, México. S-11 COMPETENCIA ENTRE NEURITAS HERMANAS. Francisco Fernández de Miguel. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. S-12 SINAPTOGÉNESIS PROGRESIVA EN LA CORTEZA SOMATOSENSORIAL PRIMARIA DE LA RATA EN DESARROLLO. Gutiérrez-Ospina G., Medina-Aguirre I., Sánchez-Avendaño N., Hernández, L., Uribe-Querol, E. Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBM, UNAM, México D.F., 04510. S-13 CONTROL MOLECULAR DE LA PROYECCIÓN DOPAMINÉRGICA NIGROESTRIATAL DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO. Hebert L. Hernández Montiel, Carmen Mejía Viggiano y Alfredo Varela Echavarría. Instituto de Neurobiología, UNAM, Querétaro, Qro. S-14 MUERTE NEURONAL Y FACTORES TROFICOS EN EL DESARROLLO DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. Julio Morán. Instituto de Fisiología Celular, Universidad Nacional Autónoma de México, México, D.F. S-15 SEÑALIZACIÓN SEROTONÉRGICA EN LA FORMACIÓN DE LA CORTEZA CEREBRAL. Jorge Hernández-Rodríguez. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN, México. Salón 2 Proteínas que con funciones conocidas en el citoplasma y membrana presentan novedosas actividades en el núcleo Coordinadoras: Dras. Dalila Martínez Rojas y Lorenza González Mariscal S-16 LA PROTEÍNA DE LA UNIÓN ESTRECHA ZO-2, FUNCIONA TANTO EN LAS UNIONES INTERCELULARES COMO EN EL NÚCLEO. González-Mariscal, L., Betanzos, A., Huerta. G.M., LópezBayghen, E., Jaramillo, B., Ponce, A., Islas S. Departamentos de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV, México, D.F. S-17 TRANSPORTE NUCLEAR DE LA DISTROFINA Dp71. Bulmaro Cisneros. Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV-IPN S-18 LOCALIZACION DE ISOFORMAS Dp71d Y DP71F Y PROTEINAS ASOCIADAS (DAPs) EN SUBESTRUCTURAS NUCLEARES DE NEURONAS. Martínez, R.D. y Alemán, A.V. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias CINVESTAV, IPN. A.P. 14-740, México, D.F. 07000. S-19 LA PROENCEFALINA ADEMAS DE SER UN PRECURSOR DE NEUROPEPTIDOS ES UNA PROTEINA NUCLEOLAR QUE SE UNE AL ADN Y QUE INDUCE LA PROLIFERACIÓN CELULAR. Vindrola, O. Rosete M.*, Terán L.*, Bazan M.L.*, Bautista D.*, Durán S.*, Velázquez I.*, López C.* y Padrós M. R. Laboratorio de Bioquímica Celular. Instituto de Fisiología. Universidad Autónoma de Puebla. S-20 LOS RECEPTORES GLUTAMATERGICOS COMO TRANSDUCTORES DE SEÑALES DE LA MEMBRANA PLASMATICA AL NUCLEO. Ortega, A. Departamento de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN. Apartado Postal 14-740, México DF. Sesión de carteles 17:00 –20:00 h Endocrinología y neuroendocrinología C-70 REORGANIZACIÓN FOLICULAR Y PROLIFERACIÓN CELULAR INVOLUCRADAS EN EL ARREGLO ENDOCRINO DE LA PINEAL DE Ambystoma tigrinum. Rivas-Manzano, P.* (Avalado por Escobar Briones Carolina), Ortiz-Hernández, R.* y Parra-Gámez L.**. *Departamento de Biología Celular, Fac. de Ciencias y **Departamento de Anatomía, Fac. de Medicina, UNAM. C-71 LA EXPRESIÓN DE NEUROFILAMENTOS EN CÉLULAS CROMAFINES DE RATA Y CÉLULAS PC12 EN CULTIVO AUMENTA POR LA EXPOSICION A UN CAMPO MAGNÉTICO ESTACIONARIO. Kuri I.*, Fiordeliso T., Millán-Aldaco D.A. y Hernández-Cruz A. Departamentos de Biofísica y Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. C-72 FLUCTUACIÓN DE LOS NIVELES DE RNAm DEL RECEPTOR HIPOTALÁMICO DE PROLACTINA DURANTE LA CONDUCTA SEXUAL DE LA RATA MACHO. Zepeda, R.C.*; Castelán, F.*; Rojas, F*; Hernández-Kelly, L.C.R.*; Manzo, J; Pacheco, P.; Ortega, A. y Hernández, M.E*. Instituto de Neuroetología. Universidad Veracruzana. Xalapa, Ver. Instituto de Investigaciones Biomédicas. UNAM. México, D.F. Depto. de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN, México, D.F. C-73 PARTICIPACIÓN DE LA ARGININA-VASOPRESINA (AVP) EN LA RETENCIÓN DE GLUCOSA ENCEFÁLICA DESPUÉS DE LA ESTIMULACIÓN SENOCAROTÍDEA. Montero, S.* (avalado por Cruzblanca Humberto), Yarkov, A.*, Lemus, M.*, Mendoza, H., Roces de Alvarez-Buylla, E.* y Alvarez-Buylla, R.† CUIB y Facultad de Medicina, Universidad de Colima; Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Tamaulipas; Dep. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México. C-74 LA LEPTINA ESTIMULA A CORTO PLAZO LA ACTIVIDAD SECRETORA DE GONADOTROPOS Y TIROTROPOS PROVENIENTES DE RATA MACHO ADULTA. Castro-Valdez, I.* ( avalado por Quevedo Durán Jorge), Avelino-Cruz, E*., Ponce-Pérez, L.*, López-Hidalgo M.A.*, BenítezSánchez, A.M*., Ramírez-Alvarado M.T*. y Monjaraz, E*. Laboratorio de Neuroendocrinología, Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. C-75 EL ESTRADIOL Y LA PROGESTERONA REGULAN EL CONTENIDO DE LA PROTEÍNA ASOCIADA A MICROTÚBULOS 2 EN EL HIPOCAMPO DE LA RATA. abReyna-Neyra, A.* aCamachoArroyo I. bFerrera P. * y bArias C.* aFacultad de Química, UNAM. bInstituto de Investigaciones Biomédicas. México D.F., México. C-76 PARTICIPACION DEL PROTEOSOMA 26S EN LA REGULACION DEL RECEPTOR A PROGESTERONA EN EL CEREBRO DE LA RATA., Camacho-Arroyo I, Villamar-Cruz O.*, GonzálesArenas A.* y Guerra-Araiza C.*. Departamento de Biología, Facultad de Química, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F., México. C-77 EFECTO DE LA DENERVACIÓN SENSORIAL SOBRE EL CRECIMIENTO FOLICULAR. Apolonio, J*, Morales L y Domínguez R. Unidad de Investigación en Biología de la Reproducción. Laboratorio de Fisiología Reproductiva. FES Zaragoza. UNAM. México. C-78 LA DENERVACIÓN NORADRENÉRGICA PERIFÉRICA (DNP) PERMITE LA INDUCCIÓN DE LA OVULACIÓN EN RATAS ANDROGENIZADAS AL QUINTO DÍA DE VIDA. Flores A., Cruz, M.E.*, Ayala, M.E. y Domínguez, R. UIBR. Lab. de Diferenciación Sexual. FES Zaragoza, UNAM. C-79 EFECTO DE LA SILIMARINA SOBRE LA ACTIVIDAD RENAL DE LA GLUTATIÓN PEROXIDASA Y LA SUPEROXIDO DISMUTASA EN LA INDUCCIÓN DE LA DIABETES MELLITUS EXPERIMENTAL DE LA RATA. RELACION CON UN ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO. Soto Peredo, C.* (Avalado por Quevedo Durán Jorge), Uría Galicia, E.*, De la Rosa Oropeza, P.*, García Villeda, I.*, Velázquez Aragón, J.* Departamento de Sistemas Biológicos. Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco. C-80 EL INF-α ALTERA LA PRODUCCION Y EL METABOLISMO DE ESTEROIDES EN EL OVARIO DE LA RATA. R. A. Valdez, B. Gallo, Ma. I. Hernandez, I. Girón y M. C. Romano. Dpto. de Fisiología, Biofísica y NC., CINVESTAV-IPN. Apdo. Postal 14-740, 07000, México DF. C-81 INTERACCIÓN ENTRE LAS SEÑALES GASTROINTESTINALES Y EL SISTEMA NERVIOSO SIMPÁTICO EN EL CONTROL DE LA INGESTIÓN DE ALIMENTO. Villanueva, I.*; Ortiz, K.* y Racotta, R. Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México. C-82 LA LOBECTOMIA NEUROINTERMEDIA HIPOFISIARIA (LOBEX) DISMINUYE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE LA ENCEFALOMIELITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL (EAE) EN LA RATA LEWIS. Quintanar Stephano A, Organista Esparza A*, Tinajero Ruelas M*, Moreno Córdoba EV*, Medina Fernández M*, Sánchez Herrera IO*, Covarrubias Castillo YL*. Depto. Fisiología y Farmacología. Centro de Ciencias Básicas. Universidad Autónoma de Aguascalientes. aquinta@correo.uaa.mx C-83 EL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO (EGF) INDUCE LA FORMACIÓN DE FIBRAS DE ESTRÉS SIN ADICIONAR MÁS ACTINA-F AL CITOESQUELETO. Toral, C*; SolanoAgama MC*, Fernández JL*, Sabanero M* y Mendoza Ma. Eugenia. CINVESTAV-IPN. México D.F. C-84 LA EXPRESIÓN DEL ARNm DE LAS ISOFORMAS α y β DEL RECEPTOR A ESTRÓGENOS, PRESENTAN CAMBIOS ASIMÉTRICOS EN LAS AREAS PREÓPTICA A HIPOTALÁMICA ANTERIOR DURANTE EL CICLO ESTRAL. Arteaga-López P.R. 1*(avalado por Domínguez R.), Cruz M.E.1*, Cerbón M.2*, Mendoza-Rodríguez C.A.2* y Domínguez R. 1 1. F.E.S.-Zaragoza, 2. Facultad de Química U.N.A.M. C-85 EFECTO DE LA LESIÓN UNILATERAL DE LA AMÍGDALA MEDIAL SOBRE LA COMPENSACIÓN OVULATORIA. Oviedo Jiménez A.* y Sánchez Ramos Marco Antonio. Lab. de Fisiología e Histología, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Autónoma de Querétaro. C-86 INFLUENCIA DE LOS ESTEROIDES SOBRE LA ACTIVIDAD DE LAS RAICES DORSALES DESPUES DE LA ESTIMULACION DE LOS NERVIOS ESCROTALES EN LA RATA. García, L.I.1*, Manzo, J.1, Hernández, M.E.1*, Camacho, M.A.1* y Pacheco, P.2 1Inst. de Neuroetología. Univ. Veracruzana. 2Inst. Invest. Biomédicas, UNAM, México, D.F. C-87 CONCENTRACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS EN HIPOCAMPO, CORTEZA, TALLO Y SUERO DE RATAS CON SHOCK ENDOTÓXICO INDUCIDO POR LIPOPOLISACARIDO (E. Coli 0111:B4). López-Robles E.E.*†‡, Bitzer-Quintero O.*±, Ruiz-Rizo L.*†, Ortiz Genaro Gabriel†. Laboratorios de †Neuroinmunoendocrinología y ±Neuro-inmunomodulación, División de Neurociencias, Centro de Investigación Biomédica de Occidente IMSS. Guadalajara, Jal. ‡Unidad de Biología Experimental Universidad Autónoma de Zacatecas, Guadalupe, Zac. MÉXICO. C-88 LA TINCIÓN TRICRÓMICA DE MASSON Y LA TINCIÓN DE GALLEGO PARA VALORAR LA HIPERPLASIA DE LAS ARTERIAS UTERO PLACENTARIAS EN PLACENTAS DE MUJERES CON PREECLAMPSIA. Contreras-Barrios, M.A.* Gijón, E., Sánchez D. G*., Benitez R. S.R* y Valencia S.J.A.* Hospital de la Mujer, S.SA y Facultad de Medicina, UNAM. Neurofisiología C-89 ORGANIZACION DE LAS VIAS SEGMENTALES QUE MEDIAN LA PAD DE LAS FIBRAS AFERENTES MUSCULARES Y CUTÁNEAS EN EL RATON JUVENIL. UN ESTUDIO in vitro. García, A* y Quevedo, J. N. Dpto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV. C-90 DEPRESIÓN DE LA RESPUESTA MONOSINÁPTICA Y ALTERACIONES DE LA TRANSMISIÓN SINÁPTICA EN MÉDULA ESPINAL AISLADA DEL MUTANTE taiep. Fuenzalida, M.*; Roncagliolo, M.*; Bonansco C.* y Eguibar J.R. Depto. de Fisiología, Fac. de Ciencias, Universidad de Valparaíso, Chile; Instituto de Fisiología, B.U.A.P. México. C-91 EFECTO DE INHIBIDORES DE RECAPTURA DE AMINAS BIOGÉNICAS EN LOS EPISODIOS DE INMOVILIDAD DE LA RATA taiep. Cortés, M.C.*, Gavito, M.B.*, Ita, M.L.* y Eguibar J.R. Instituto de Fisiología B.U.A.P. Apdo. Postal 406, Puebla, Pue. México. C-92 EFECTO DEL ACIDO L-GLUTAMICO SOBRE EL REFLEJO DEL RASCADO EN GATOS TALAMICOS Y ESPINALES. Castillo, H.L., Hernández, H.C.*, Guerrero, C.H.* y Dueñas, J.S.H. Dpto. de Fisiología y Farmacología, Centro de Ciencias Básicas, UAA y Dpto. de Fisiología y Neurociencias, CUCS, UDG, México. C-93 ELECTROPHYSIOLOGICAL STUDY OF LEG LENGTH DISCREPANCY ADOLESCENTS. Caudillo, C.*, Gamiño, S.M., Sotelo, F.*, Méndez, M.C.* and Cruz, E.* Línea de Invest. en Neurofisiología. IIST-U. de Guanajuato. C-94 ESTRUCTURA DE LOS LÓBULOS ANTENALES Y CONEXIONES EFERENTES HACIA LOS CUERPOS FUNGIFORMES EN LA HORMIGA Camponotus ocreatus. López-Riquelme, G.O.*1, Gronenberg, W.*2 & Fanjul-Moles, M.L.1 1Laboratorio de Neurofisiología Comparada de Invertebrados, Facultad de Ciencias, UNAM. 2Arizona Research Laboratories, Division of Neurobiology, University of Arizona. C-95 POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS CON PALABRAS CONOCIDAS Y DESCONOCIDAS EN NIÑOS MEXICANOS CLASIFICADOS COMO TARDÍOS. Lara Ayala, L.*(avalado por Raúl Paredes Guerrero), Rivera-Gaxiola, M.*, Jackson-Maldonado, D.*, Silva-Pereyra, J* y García Sierra, A. Instituto de Neurobiología, UNAM, Center for Mind, Brain and Learning, Speech and Hearing Sciences Dept., University of Washingon, Seattle y Facultad de Lenguas y Letras, CELL, Universidad Autónoma de Querétaro, Qro. Neurotransmisores y receptores C-96 CORRIENTES SINAPTICAS EN UN CULTIVO ORGANOTIPICO DE LA RETINA, EFECTO DE LA CARENCIA DE LA PROTEINA GEFIRINA. Pérez-León JA*, (avalado por Sánchez Ramos MA), Wässle H* y Backus KH*. Instituto de Neurobiología, UNAM Campus Juriquilla, AP 1-1141 y Max Planck Institut für Hirnforschung, Deutschordenstrasse 46 D-60 528, Frankfurt am Main Deutschland C-97 PAPEL DEL ÓXIDO NÍTRICO EN LA ACTIVIDAD AFERENTE VESTIBULAR DE POLLO. Gómez,G.*,Flores,AIsasmendi,G.S.*¶,Galindo,F.*,Rocha,B.*,Cortés,E.*, Manjarrez, E*. Instituto de Fisiología y Escuela de Biología¶, BUAP. C-98 RECEPTORES A HISTAMINA EN NEURONAS PEPTIDERGICAS DEL ACOCIL AZUL CHERAX CUADRICARINATUS. Cebada, J* y García, U. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. Cinvestav, México. C-99 RETROALIMENTACIÓN DEL NO SOBRE LOS RECEPTORES NMDA EN EL VESTÍBULO DEL AXOLOTL. Ortega, A1*, López, C.1*, Chávez, H1,2* y Soto, E1. 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. C-100 AMPLITUD DEL SEGMENTO N1/P2 DEL POTENCIAL AUDITIVO EVOCADA DE LARGA LATENCIA COMO INDICADOR DE LA NEUROTRANSMISION SEROTONINERGICA . Herrera MR a*, Manjarrez GG a, Hernández ZE a*, Robles OA b*, Hernández-RJ c. a Laboratorio de Neuroquímica. UIM en Enfermedades Neurológicas. Hospital de Especialidades y bIngeniería Biomédica, CMN, IMSS y cCINVESTAV, IPN. C-101 CONTROL DOPAMINÉRGICO DE LA TRANSMISIÓN GLUTAMATÉRGICA SUBTÁLAMO-NIGRAL. Ibáñez, O.* Hernández, A., Sierra, A. Valdiosera, R., Erlij, D. y Aceves, J. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV, México, D.F. C-102 EFECTO DE LA ACTIVACION DE LOS RECEPTORES SEROTONINERGICOS 5HT1A Y 5HT2A SOBRE LA LIBERACIÓN DE ACETILCOLINA PREFRONTOCORTICAL DE LA RATA. PérezVega, M.I.1*, Morales-Villagrán, A.2, Feria-Velasco, A.3 y González-Burgos, Ignacio.1.1Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Morelia Mich.; 2Depto. Biol. Cel. y Molec. CUCBA, U. De G; 3 Coordinación de Actividades Académicas, CIATEJ, Guadalajara, Jal. MEXICO. C-103 EL TRATAMIENTO CRÓNICO CON LEVODOPA INCREMENTA LA SUPERSENSIBILIDAD DE LOS RECEPTORES D1 Y D2 DE LAS TERMINALES ESTRIADOPALIDALES Y ESTRIADO-NIGRALES DESPUÉS DE LA DENERVACIÓN DOPAMINÉRGICA. Rangel, C.*, Silva, I.*, Sierra, A.*, Florán, L.*, Aceves, J., y Florán, B. Lab. Neurofisiología. Lic. en Biología. UAQ. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-104 LA ACTIVACION DE RECEPTORES D2 POR LA LEVODOPA INHIBE LA LIBERACIÓN DE GABA EN EL GLOBO PALIDO DE RATAS HEMIPARKINSONICAS. Silva, I.*, Rangel, C.*, Florán, L.*, Aceves, J., y Florán, B. Lab. Neurofisiología. Lic. en Biología. UAQ. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-105 LA DOPAMINA VIA RECEPTORES D4 REGULA LA LIBERACIÓN DE GABA, EN EL NÚCLEO RETICULAR DEL TALAMO. Floran, L.*, Núñez, A.*, Erlij, D.*, Floran, B., y Aceves, J. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-106 LA MELATONINA ACTIVA A LA PROTEINA CINASA C ASOCIADA A LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS EN AUSENCIA DE RECEPTORES MEMBRANALES. HernándezGutiérrez, M.E.,*1 Ramírez-Rodríguez, G.B., *1 Bellon-Velasco A., *1. Benítez-King, G.,1 Antón-Tay, F.2 1 Depto. Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría, 2Depto. Biología de la Reproducción, CBS, Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México, D.F. C-107 EFECTO DE LA MELATONINA SOBRE LA FOSFORILACION DE LA SINAPSINA I Y LAS MARCKS EN UNA PREPARACION DE SINAPTOSOMAS DE HIPOTALAMO DE LA RATA. Benítez-King, G. 1, Ramírez-Rodríguez, G.B *1. Antón-Tay, F.2 Hernández-Gutiérrez, M.E.*1 1Depto. Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría, 2Depto. Biología de la Reproducción, CBS, Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México, D.F. C-108 EL HIPOTIROIDISMO MODIFICA LA POBLACIÓN DE RECEPTORES CEREBRALES α1ADRENÉRGICOS Y DE AMPC. Ortiz-Butrón R.1+, Hernández-García A.1*, Briones-Velasco M.2* and Rocha L.3. 1Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., 2INP “Ramón de la Fuente”, 3Depto. de Farmacobiología, CINVESTAV-I.P.N. C-109 PARTICIPACION DEL RECEPTOR 5-HT2 EN LA REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LA BOMBA DE SODIO Y POTASIO EN TEJIDO CEREBRAL DE RATA ADULTA. Medina, R.J.P.*, Mercado, C. R*., Boyzo, M. A**. y Hernández-R., J**. * Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Lab. de Neurontogenia, Depto. Fisiología,, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV-I.P.N. Fac. de Medicina. U.A.Q. C-110 EFECTO DE INHIBIDORES Y ACTIVADORES DEL TRANSPORTE DE GLUTAMATO SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA BOMBA DE SODIO Y POTASIO EN CELULAS GLIALES DE BERGAMANN. Guzmán, C.B*., Mercado, C.R*., Gamboa, E.C**., y Ortega, A.** *Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Depto. de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN. C-111 IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION FARMACOLOGICA DEL RECEPTOR 5HT1A EN CONOS DE CRECIMIENTO AXONAL. Mercado, C. R*., Báez, V.E*., Ortíz, A. R*., Boyzo, M. A**. y Hernández-R., J**. * Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Lab. de Neurontogenia, Depto. Fisiología,, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAVI.P.N. Fac. de Medicina. U.A.Q. C-112 THE CB1 CANNABINOID RECEPTOR CAN SEQUESTER G-PROTEINS, MAKING THEM UNAVAILABLE TO COUPLE TO OTHER RECEPTORS. Vásquez, C.* (avalado por García Esperanza) and Lewis, D.* Department of Pharmacology and Toxicology, Medical College of Georgia, Augusta, GA, USA. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, Colima, México. C-113 HIPOCAMPO DE RATAS TRATADAS NEONATALMENTE CON ESPARTEINA. M. E. Flores-Sotoa✽, J. Bañuelos-Pinedab✽ y C. Beas-Záratea,c. aLab. de Neurobiol. Cel. y Molec., Div. Neurociencias, C.I.B.O., IMSS. Guadalajara, Jalisco, Mexico, bLab. De Morfofisiologia., Div. Medicina Veterinaria., CDepto. Biol. Cel. y Mol., C.U.C.B.A., U. de G., Guadalajara, Jalisco, Mexico. C-114 DISTRIBUCIÓN ANATOMICA DE LA NOCICEPTINA/ ORFANINA FQ, EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DEL AMBYSTOMA MEXICANUM. Mucio-Ramírez S.*, Miller-Pérez C.*, Sánchez-Islas E.*, Antón B.*, León-Olea M. Lab. de Histología y Microscopía Electrónica, Lab. de Neurobiología Molecular, Inst. Nal. Psi. México D.F. C-115 EFECTO DEL ABATIMIENTO DE SEROTONINA PREFRONTOCORTICAL SOBRE LA DENSIDAD DEL RECEPTOR 5HT2A DE LA CORTEZA CEREBRAL PREFRONTAL DE LA RATA. Soria-Fregoso,C 1*., Pérez-Vega, M.I.1* Beas-Zarate, C 2, Feria-Velasco, A 3 y González-Burgos, Ignacio.1.1Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Morelia Mich.; 2Centro de Investigación Biomédica de Occidente, IMSS. 3Coordinación de Actividades Académicas, CIATEJ, Guadalajara, Jal. MEXICO. C-116 PAPEL DE LA DOPAMINA EN EL GLOBO PALIDO EN LA HIPERACTIVIDAD LOCOMOTORA PRODUCIDA POR LA METANFETAMINA. Liy S. G.,* Anaya M. V.,* Nuñez D.A.* y Aceves J. Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. Neurociencias, UIICSE, FESIztacala-UNAM. C-117 LOS RECEPTORES PARA CANABINOIDES CB1 DEL GLOBO PALIDO REQUIEREN LA COACTIVACIÓN DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS D1 Y D2 PARA MODULAR LA CONDUCTA MOTORA. Oviedo, A.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Neurociencias. FESIztacala UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-118 LA ACTIVACION DE RECEPTORES NMDA PRODUCE CONDUCTA DE GIRO IPSILATERAL EN EL GLOBO PALIDO Y GIRO CONTRALATERAL EN LA SUSTANCIA NIGRA PARS RETICULATA DE LA RATA. Nava, C.*, González, B.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Ciencias Biológicas. Fac. Ciencias UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-119 EFFECTO MOTOR DE LOS RECEPTORES GABA-B PRESENTES EN EL GLOBO PALIDO. González, B.*, Nava, C.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Ciencias Biológicas. Fac. Ciencias UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. C-120 LOS RECEPTORES DE DOPAMINA TIPO D1 PUEDEN MODULAR LAS CORRIENTES INDUCIDAS POR NMDA INDEPENDIENTEMENTE DE AMPc EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE LA RATA. Alba G. Vera-Castañeda (avalada por José Ramón Eguibar Cuenca), Jorge Flores-Hernández Amaal Islam, Carlos Cepeda, Michael S. Levine. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Instituto de Fisiología, Apartado Postal 406, Puebla, Puebla, México. Universidad de California en Los Angeles, Mental Retardation Research Center, Los Angeles, CA., 90025 USA. Daño y Recuperación neuronal C-121 ISQUEMIA CEREBRAL GLOBAL AGUDA EN LA RATA POR “OCLUSION DE LOS 4 VASOS”. EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA PROGESTERONA. Montes-del Carmen P.*, Hernández-Morales L*, López-Loaeza E.*, Letechipía-Vallejo G.*, Cervantes M. y Moralí G. U. Inv. Médica en Farmacología, CMN Siglo XXI, IMSS, México, DF, Centro de Inv. Biomédica de Michoacán, IMSS y Facultad de Medicina, Univ.Michoacana de Sn. N.H., Morelia, Michoacán. C-122 EVALUACIÓN DE LA MELATONINA Y LAS VITAMINAS C Y E, EN EL ESTRÉS OXIDATIVO CEREBRAL INDUCIDO IN VIVO, POR LA PROTEÍNA β-AMILOIDE. Rosales-Corral, S.A.* (avalado por Gabriel Ortiz Genaro), Valdivia-Velázquez, M*, Martínez-Barboza, S.G,*. Centro de Investigación Biomédica de Occidente del IMSS. C-123 NIVELES DEL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALFA (TNF-α) EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR GLUTAMATO MONOSÓDICO (GMS) EN LA RATA. 1Chaparro-Huerta V.*, 1,2Rivera-Cervantes M.C.* y 1,2Beas-Zárate C. 1Laboratorio de Neurobiología Molecular del Centro de Investigación Biomédica de Occidente, IMSS, y 2Depto. de Biol. Cel. y Mol. , C.U.C.B.A. U. de G. C-124 EFECTO DEL ACETOACETATO SOBRE LA MUERTE NEURONAL EN UN MODELO DE INHIBICIÓN GLICOLÍTICA CRÓNICA Y SU RELACIÓN CON LOS NIVELES DE ATP CEREBRALES. Haces M.L.*, Montiel T.*, Massieu L. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. C-125 MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR GLUTAMATO Y SU RELACIÓN CON EL ESTADO METABOLICO EN EL ESTRIADO DE LA RATA. Del Río P.*, Montiel T.*, Massieu L. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. C-126 SOBRE-EXPRESIÓN DEL FACTOR NEUROTRÓFICO DERIVADO DE CEREBRO (BDNF) EN CÉLULAS GLIALES. Arregui-Mena L.* y Segovia J. Dept. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, 07300, D.F. C-127 MECANISMOS INVOLUCRADOS EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR INHIBICION GLICOLITICA EN NEURONAS DE HIPOCAMPO DE RATA. Hernández-Fonseca, K.* y Massieu, L. Instituto de Fisiológia Celular, UNAM. C-128 INFLUENCIA DE LA OXITOCINA SOBRE EL ARBOL DENDRITICO DE MOTONEURONAS QUE INERVAN AL MUSCULO PUBOCOCCIGEO EN RATAS MACHO ESPINALIZADAS. Pérez CA*, Pacheco P, Hernández ME* y Manzo J. Inst. de Neuroetología, U.V. Xalapa, Ver.; Inst. de Inv. Biomédicas. U.N.A.M., México, D.F. C-129 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SISTÉMICA DE PILOCARPINA SOBRE LA DISMINUCIÓN DE NEURONAS DE LA REGIÓN CA1 HIPOCAMPAL. EN RATAS. Gómez Díaz A.*, Pacheco-Rosado J+., Ortiz-Butrón R.+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México,D.F. C-130 DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES DE CITOCINAS Y FACTORES TRÓFICOS EN EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO DE PACIENTES CON GLIOBLASTOMA MULTIFORME. DueñasJiménez J.M., Meza-Bautista M.A.*, Mendoza-Magaña M.L., Ramírez-Herrera M.A., Nuño López C.*, Dueñas-Jiménez S.H. Laboratorio de Neurofisiología, Departamento de Fisiología y Departamento de Neurociencias, Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara y Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, Guadalajara Jalisco México. Bioingeniería C-131 DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA DE NEURO-ESTIMULACIÓN INALÁMBRICO (VIA RADIO-FRECUENCIA). Bernal-Díaz A*, Martínez-Tenorio A*, Fernández-Mas R*, Almazán-Alvarado S* y Martínez A. UNAM Campus Aragón, Inst. Nal. Psiquiatría SSA. México, 14370, D.F. C-132 IMPLEMENTACION DE UN SISTEMA ELECTRÓNICO PORTÁTIL DE BIORRETROALIMENTACION PARA USO CLINICO. Aguillón Pantaleón, M.A.*, (Avalado por Martínez Cervantes Adrián), Castro García M.*, Almazán Alvarado, S.*. Laboratorio de Bioingeniería, Subdirección de Investigaciones en Neurociencias del Instituto Nacional de Psiquiatría, México, D.F. C-133 DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UN SISTEMA DE REGISTRO CON SENSORES INFRARROJOS, PARA EL ESTUDIO DEL CICLO CIRCADIANO EN ANFIBIOS. Hernández. Pérez A.*, Elías Viñas David, Departamento de Bioelectrónica, CINVESTAV IPN, 07360, México D.F. C-134 EFECTO DE LOS CAMPOS MAGNÉTICOS DE EXTREMA BAJA FRECUENCIA APLICADOS CON UN DISPOSITIVO DISEÑADO PARA CÉLULAS EN CULTIVO. Verdugo Díaz, L. 1 , Hernández Hernández, H. 2*, Elías Viñas, D. 2*. 1Depto. de Fisiología, Fac. de Medicina, UNAM. 2Depto. de Ingeniería Eléctrica, Sección de Bioelectrónica, CINVESTAV, IPN. C-135 CALCULO Y VARIACIONES EN LOS VECTORES DE LA CORRIENTE ELECTRICA EN EL CORAZON, INDUCIDOS POR UN INHIBIDOR DE LA P-GLICOPROTEINA (OC144-093) EN DOSIS MULTIPLES CON VOLUNTARIAS SANAS. Castro García M.*, (Avalado por Martínez Cervantes Adrián), Tera Ponce, S.*, Castañeda Flores, J.L.*, Aguillón Pantaleón, M.A.*, Almazán Alvarado, S.*, Valencia Méndez, G.*, Luján Estrada, M. Lab. de Bioingeniería, Subdirección de Investigaciones en Neurociencias del Instituto Nacional de Psiquiatría. Depto. de Farmacología Clínica. Facultad de Medicina, UNAM-Hospital Español. México, D.F. miércoles 11 de septiembre Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Sistemas Sensoriales Moderador: Dr. Gabriel Gutiérrez Ospína O-51 EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO Y LA LONGITUD DE LAS VIBRISAS EN RATAS CIEGAS. Martínez Martínez, E.*, García-Rivera, L.* y Gutiérrez-Ospina G. Departamento de Biología Celular y Fisiología IIBM, UNAM. México, D. F., 04510 O-52 ONTOGENIA DE LOS PATRONES DE DESCARGA EN NEURONAS AFERENTES DEL GANGLIO VESTIBULAR DEL EMBRIÓN DE POLLO. Isasmendi, S.G.*¶, Gomez, G.*,Manjarrez, E.*,Flores, A. Escuela de Biología¶ e Instituto de Fisiología BUAP. O-53 EFECTOS DE LA ACTIVIDAD ESPONTÁNEA ESPINAL SOBRE EL FLUJO DE INFORMACIÓN SOMATOSENSORIAL EN EL GATO. Rojas-Piloni, G.*, Martínez, L*, Vázquez, D.*, Vélez, D.*, Flores, A. y Manjarrez, E*. Instituto de Fisiología. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. O-54 RESONANCIA ESTOCÁSTICA EN LA ACTIVIDAD ELECTRICA CEREBRAL EN HUMANOS. Méndez, I.*, Diez-Martínez, O., Flores, A., y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla y Depto. de Psicología, UDLA, Puebla, México. O-55 RESONANCIA ESTOCÁSTICA EN LOS POTENCIALES ESPINALES Y CORTICALES PRODUCIDOS POR ESTIMULACIÓN TÁCTIL EN EL GATO. Vélez, D.*, Rojas-Piloni, G.*, Méndez, I.*, Martínez, L.*, Flores, A. y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. México. O-56 LA BETAHISTINA INTERACTÚA SOBRE RECEPTORES A AMINOACIDOS EXCITADORES EN LAS NEURONAS AFERENTES VESTIBULARES DEL AXOLOTL. Chávez, H,1,2*, Vega, R1 y Soto, E1. 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. O-57 INFLUENCIA DEL SISTEMA EFERENTE VESTIBULAR SOBRE LA ACTIVIDAD AFERENTE EN EL AXOLOTL. Soto, E1, Chávez, H1,2*, y Vega, R1 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. O-58 PROLACTINA OCULAR EN PACIENTES CON RETINOPATÍA DEL PREMATURO. Rivera J.C.*, Dueñas Z.*, Macotela Y.*, Morfin P.*1, Guerrero J.L.* 1, Martínez de la Escalera, G., Quiroz H.* 1, y Clapp, C. Instituto de Neurobiología-UNAM, Juriquilla, Qro. Hospital “Luis Sánchez Bulnes”, Asociación para Evitar la Ceguera en México, (APEC) México D.F. Salón 2 Ritmos Moderadora: Dra. Carolina Escobar O-59 DISTRIBUCION NICTEMERAL DE LOS ESTADOS DE VIGILANCIA DEL PAVO. AyalaGuerrero, F., ∗Ramos, J.I y Mexicano, G. Facultad de Psicologia, UNAM, ∗Facultad de Ciencias Biológicas, UAEM. O-60 EXPRESIÓN DE LA PROTEÍNA FOS EN EL NÚCLEO SUPRAQUIASMÁTICO DEL CONEJO EN DIFERENTES CONDICIONES DE LUZ-OSCURIDAD Y EN RESPUESTA A UN PULSO DE LUZ. Toledo, R.*, Aguilar-Roblero, R., Canchola, E.*, Caba, M. Lab. Biología de la Reproducción, IIB, Universidad Veracruzana, UAM, Inst. de Fisiología Celular, UNAM.. O-61 LA EXPRESIÓN DE C-FOS EN EL NUCLEO SUPRAQUIASMATICO (NSQ) DE LA RATA DEPENDE DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ. Guadarrama-Ortiz, P.*, Aguilar-Roblero Raúl. Depto. de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-62 EXPRESIÓN DE c-Fos EN EL HIPOTÁLAMO DE RATAS SINCRONIZADAS POR ALIMENTO. Angeles M1*; Aguilar Roblero R2 y Escobar C1. Depto. 1Anatomía, Fac. Medicina. Depto. 2 Neurociencias, Inst. Fisiología Celular. UNAM. México 04510. O-63 PAPEL DEL NÚCLEO ACCUMBENS VENTROMEDIAL (SHELL) EN EL PARADIGMA DE SINCRONIZACIÓN POR ALIMENTO Mendoza JY*1, Angeles M*1, Aguilar-Roblero R2 y Escobar C1. Depto. Anatomía, Facultad de Medicina 1, Depto. Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular 2, UNAM, México D.F. O-64 LA DESNUTRICIÓN HIPOPROTEINICA ALTERA EL ACOPLAMIENTO DE OSCILADORES EN LA RATA. Salazar Juárez Alberto, Parra Leticia y Escobar Carolina. Facultad de Medicina, Depto Anatomía, UNAM. O-65 AMINOACIDOS ACIDOS EN LA HEMOLINFA Y EFECTO SOBRE LA EXCITABILIDAD DE NEURONAS SECRETORAS DE ACOCIL. García U.1, Cebada J.*1, Rocha L.2, Neri L.*2 y Alvarado R.*3 Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias1 y Farmacobiología2-Cinvestav y DEPI, Medicina-UNAM3. O-66 DIFERENCIAS DE FASE ENTRE EL RITMO CIRCÁDICO DE ACTIVIDAD ESPONTÁNEA Y EL DE RESPUESTA A LA LUZ EN EL FOTORRECEPTOR CAUDAL DEL ACOCIL. Rodríguez-Sosa, L+, Anaya, V.*++ y Aréchiga, H.+. DEPI, Fac. Med., UNAM.+ México y Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias,CINVESTAV++,México. O-67 VARIACIONES DIURNAS POSTURALES Y DE ACTIVIDAD ELECTRICA MULTIUNITARIA EN EL GANGLIO SUPRAESOFÁGICO DEL ACOCIL. Alvarado-Alvarez, R.* y Aréchiga, H. División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. Salón 3 Canales Ionicos Moderador: Dr. José Antonio Sánchez Chapula O-68 LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. I Reyes, A.*, Laville, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Tapia, D.*, Galarraga, E., y Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. O-69 LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. II Tapia, D.*, Laville, A.*, Reyes, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Bargas, J., y Galarraga, E. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. O-70 LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. III Laville, A.*, Reyes, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Tapia, D.*, Galarraga, E., y Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. O-71 LA ACTIVACION DEL RECEPTOR DOPAMINERGICO D2 MODULA CORRIENTES DE 2+ Ca DE TIPO P/Q EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE PROYECCION. Salgado, H.*, Vilchis, C.*, Pérez-Roselló, T.*, Galarraga, E., Bargas, José., Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-72 CONSECUENCIAS FUNCIONALES DE LA MUTACION leaner EN CANALES DE CALCIO TIPO P/Q EXPRESADOS HETEROLOGAMENTE. Esperanza García, McRory, J.*, Hernández-Valdivia C.* y Snutch, T.P.* CUIB, Universidad de Colima y Biotechnology Laboratory, University of British Columbia. O-73 RE-EVALUACION DEL MECANISMO DE ACCION DE LA 4-AMINOPIRIDINA (4-AP) EN LAS TERMINALES NERVIOSAS CEREBRALES. Galván, E.*, y Sitges, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México. O-74 EFECTO DE LA DIABETES MELLITUS SOBRE LAS CORRIENTES DE POTASIO ACTIVADAS POR VOLTAJE EN MIOCITOS AISLADOS DE RATÓN. Torres-Jácome, J.*, Ferrer-Villada T.* y Sánchez-Chapula, J. A. Instituto de Fisiología de la B.U.A.P. y Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas de la U de C. O-75 CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE LOS PROMOTORES DE LOS CANALES DE SODIO Nav1.7 Y Nax, DOS DE LOS GENES DEL CLUSTER DE SUBUNIDADES ALFA DE CANALES DE SODIO. García-Villegas, M.R.* (avalado por Martínez-Fong, Daniel), Arni, S.*, Morales, M.A.* y LópezJuárez, A.*Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. México, D.F. O-76 UN PEPTIDO AISLADO DEL VENENO DE LA TARÁNTULA G. ROSEA. INHIBE SELECTIVAMENTE LA CORRIENTE DE SODIO NEURONAL. Escobedo, Y.* (1), Cifuentes, F.* (2), Fuentes, D.* (3), Alagón, A. (3), Possani, L.(3), Hernández-Cruz, A. (1) Departamento de Biofísica, IFC (1); Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIB (2) y Departamento de Reconocimiento Molecular y Bioestructura, IBT (3) UNAM. Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Aminoácidos y edema cerebral: relevancia y mecanismos Dra. Herminia Pasantes Departamento de Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM Simposia 12:00 – 14:00 h Salón 1 Nuevos aspectos en los mecanismos de tolerancia a morfina Coordinadores: Drs. Vinicio Granados Soto y Francisco J. López Muñoz S-21 COMBINACIÓN DE FÁRMACOS: MODELOS TEÓRICOS. Salazar, L. Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV, México, D.F. S-22 COMBINACION DE FÁRMACOS : RESULTADOS EXPERIMENTALES. Francisco Javier LópezMuñoz. Departamento de Farmacobiología del CINVESTAV, México D.F. S-23 OPIOID-INDUCED PARADOXICAL PAIN AND ANTINOCICEPTIVE TOLERANCE. Vanderah, T.W. Department of Pharmacology, University of Arizona, Health Sciences Center. Tucson Arizona. S-24 DOPAMINA: ANTIALGESIA CENTRAL NO OPIOIDE. Francisco Pellicer, Alberto López-Ávila, Ulises Coffeen. Rosendo del Ángel. Subdirección de Neurociencias, Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente, Facultad Mexicana de Medicina, Universidad La Salle, México. S-25 PARTICIPACIÓN DE LA PKC EN LA TOLERANCIA INDUCIDA POR MORFINA ESPINAL EN LA RATA. Vinicio Granados-Soto1, Iveta Kalcheva2, Xiao-Ying Hua2, Alexandra Newton2, Tony L. Yaksh2. 1 Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN, México, D.F.; 2Department of Anesthesiology, UCSD, CA, USA. Salón 2 Visión novedosa de la ultraestructura y citofisiología nuclear Coordinador: Dr. Gerardo Hebert Vázquez Nin S-26 LA ORGANIZACIÓN DEL GENOMA EN DOMINIOS Y LA RE-LOCALIZACIÓN NUCLEAR. Félix Recillas Targa, Viviana Valadez Graham y Héctor Rincón Arano. Instituto de Fisiología Celular, UNAM, Departamento de Genética Molecular, Apartado Postal 70-242, México D.F. 04510. S-27 UN ALMACÉN INTRANUCLEAR DE mRNA REGULADO POR HORMONAS. Vázquez Nin, G.H., Echeverría O.M. Lab. de Microscopía Electrónica, Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias, UNAM. S-28 ORGANIZACIÓN CELULAR DE FACTORES DE PROCESAMIENTO DEL Pre-mRNA. JiménezGarcía. L.F.*. Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias, UNAM, México D.F. S-29 HACIA LA CARACTERIZACIÓN DEL NUCLEOTIPO: EL CÓDIGO ESTRUCTURAL EN EL NÚCLEO CELULAR. Aranda-Anzaldo, A.*, Maya-Mendoza, A.* y Martínez-Ramos, I.*, Laboratorio de Biología Molecular, Facultad de Medicina, UAEMex. S-30 MONITOREO DINÁMICO DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS EN LOS PROTOZOARIOS PATÓGENOS: E. histolytica, T. vaginalis y G. lamblia. Gómez-Conde E. Departamento de Inmunología / Biología Celular, Facultad de Medicina. BUAP. Laboratorio de Biología Celular, CIBIOR-IMSS. Sesión de carteles 17:00 –20:00 h Dolor C-136 LA AGMATINA PRODUCE ANALGESIA PERIFÉRICA EN LA PRUEBA DE FORMALINA. Rocha-González H.I. * (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Medina-Santillan R.*, Reyes-García G.*, Mejía-González N.*, Chaidez-Ramírez.*, Vidal-Cantú G.* y Granados-Soto V.* Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN, México, D.F. C-137 EFECTO DEL BLOQUEO DE LA SINTASA DE ÓXIDO NÍTRICO Y DE CANALES DE K+ EN EL EFECTO ANALGÉSICO DE DICLOFENACO. Lozano-Cuenca, J* (Avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia) y Granados-Soto, V*. Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN. México, D.F. C-138 LAS VITAMINAS B AUMENTAN EL EFECTO ANTI-HIPERALGÉSICO DEL DICLOFENACO EN LA RATA. Caram Salas N. L.* (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Vidal-Cantú G. C.*, Medina-Santillan R.*, Reyes-García G.* y Granados-Soto V.* Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN, México, DF, Escuela Superior de Medicina-IPN. C-139 LOS BLOQUEADORES DE CANALES DE K+ ANTAGONIZAN EL EFECTO ANTIALODÍNICO DE GABAPENTINA EN LA RATA. Mixcoatl-Zecuatl T.* (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Vidal-Cantú G.*, Medina-Santillan R.**, Reyes-García G.** y Granados-Soto V.* Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN; **Esc. Sup Med-IPN, México, DF. C-140 POSSIBLE ROLE OF POTASSIUM CHANNELS IN ANTINOCICEPTION INDUCED BY METAMIZOL. Ortiz, M.I.*1,2 (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Castañeda-Hernández, G.*1 and Granados-Soto, V.*3. 1Sección Externa de Farmacología, CINVESTAV-IPN, México, D.F. 2Área Académica de Medicina del ICSa, UAEH, Pachuca, Hidalgo, 3Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV, IPN, México, D.F. C-141 EFECTOS DE LA ESPINALIZACIÓN EN RATAS NEONATAS SOBRE LA RESPUESTA AL TAIL FLICK PROVOCADA POR TRES TEMPERATURAS. Fajardo V.*, Muciño-Carmona E.*, Carrillo P.* y Pablo Pacheco, Instituto de Neuroetología, U. V., Xalapa Veracruz. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México D. F. C-142 ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DE Annona reticulata y Porophyllum tagetoides. CasasGarcía, G.*, Martínez-Juárez, M.E.*, Vázquez-Cruz, B. y Segura-Cobos, D.* Farmacología, UIICSE, FES Iztacala, UNAM. México, D.F. C-143 PARTICIPACIÓN DE LA VÍA L-ARG-ON-GMPC EN EL EFECTO ANTINOCICEPTIVO DEL ROFECOXIB. Déciga-Campos, M.* y López-Muñoz, F.J. Departamento de Farmacobiología del CINVESTAV, IPN., México, D.F. C-144 PARTICIPACIÓN PERIFÉRICA DE SEROTONINA Y PROSTAGLANDINAS EN LA NOCICEPCIÓN INFLAMATORIA INDUCIDA EN UN MODELO DE ARTRITIS GOTOSA. Rosa Ventura Martínez* y Francisco J. López-Muñoz. Departamento de Farmacobiología del CINVESTAV-IPN, México D.F. C-145 EFECTO DE LAS CONDUCTAS MATERNALES SOBRE LA SENSIBILIDAD AL DOLOR EN LA RATA LACTANTE. Tlachi, J.L.,* Gómora, P., Beyer, C. Centro de Investigación en Reproducción Animal, CINVESTAV-UAT. Epilepsia C-146 EFECTO DE LA LIDOCAÍNA SOBRE LA EXPRESIÓN DE c-fos EN EL HIPOCAMPO DE RATAS EUTIROIDEAS. Alva-Sánchez* C., Ortiz-Butrón R.+ y Pacheco-Rosado J+. Depto. de Fisiología “Dr. Mauricio-Russek”, ENCB-I.P.N., México, D. F. C-147 EFECTO DE LA LIDOCAÍNA SOBRE LA EXPRESIÓN DE c-Fos EN EL HIPOCAMPO DE RATAS HIPOTIROIDEAS. Cano-Europa E.*, Ortiz-Butrón R.+ y Pacheco-Rosado J+. Depto. de Fisiología “Dr. Mauricio-Russek”, ENCB-I.P.N., México,D.F. C-148 EFECTOS DEL PENTILENTETRAZOL (PTZ) Y LA 4-AMINOPIRIDINA (4-AP) SOBRE LOS POTENCIALES AUDITIVOS EVOCADOS DEL TALLO CEREBRAL (PAETC) Y LA SENSIBILIDAD AUDITIVA. Nekrassov, V.*, y Sitges, M. CNR, Inst. Nacional de la Comunicación Humana, SSA. e Inst. de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México. C-149 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE CICLOSERINA EN GIRO DENTADO SOBRE EL KINDLING QUÍMICO EN RATAS. Záyago-Ortiz M.*, Hernández-García A.* y Pacheco-Rosado J+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México, D.F. C-150 EFECTO DE LA DISMINUCIÓN DE NEURONAS DE LA REGIÓN CA3 HIPOCAMPAL POR ÁCIDO KAÍNICO SOBRE EL DESARROLLO DEL KINDLING QUÍMICO EN RATAS. Perez-Cruz Y.*, Hernández-García A.*, Ortiz-Butrón R.+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México, D.F. C-151 RESISTENCIA A LAS CRISIS CONVULSIVAS PRODUCIDAS POR NMDA DESPUÉS DEL TRATAMIENTO NEONATAL CON GLUTAMATO MONOSÓDICO. 1Ureña-Guerrero, M.E.*, 1LópezPérez, S.J.*, 1Morales-Villagrán, A.* y 1,2Beas-Zárate, C. 1Lab. de Neurobiología, Depto. de Biol. Cel. y Mol., CUCBA, U. de G.; y 2Div. de Neurociencias, CIBO-IMSS, Guadalajara, Jalisco, México. C-152 EVALUACIÓN DEL EFECTO DEL ÁCIDO KAÍNICO EN RATAS PREVIAMENTE TRANSPLANTADAS CON UNA LÍNEA CELULAR GABAÉRGICA. Castillo C.G.*, Mendoza M.S.*, Giordano M. Laboratorio de Plasticidad Cerebral, Centro de Neurobiología, Campus UNAM- UAQ, Km. 13 Carretera Qro. - S.L.P., Juriquilla, Queretaro, Qro., México. C-153 CAMBIOS EN LOS NIVELES DE RECEPTOR DELTA OPIOIDE EN CEREBRO DE RATAS CON EPILEPSIA POR ÁCIDO KAÍNICO. Araiza, I.* y Rocha L. Farmacobiología CINVESTAV-IPN. C-154 EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIEPILÉPTICO DEL ÁCIDO 2-METOXI-4-(2PROPENIL)FENOXIACÉTICO POR EL MÉTODO DE KINDLING ELÉCTRICO AMIGDALINO EN RATA. García-González A1*., Pacheco-Rosado J2+., Hernández-García A2*., Labarrios F3*., Tamariz J3*+., y Chamorro-Cevallos G1*+. 1Laboratorio de Toxicología Preclínica, 2Dpto. de Fisiología, 3Dpto. de Química Orgánica. ENCB-I.P.N. México, D.F. C-155 PALMITONA RETARDA EL ESTABLECIMIENTO DEL “KINDLING” QUÍMICO INDUCIDO CON PENTILENTETRAZOL EN EL RATÓN. González-Trujano, ME*., Briones, VM*., Neri, L*., Navarrete, A*. y Rocha, L. Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente. Depto. De Farmacobiología del CINVESTAV-IPN. Facultad de Química-UNAM. México. C-156 EPILEPSIA FOCAL AMIGDALINA: EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN DEL NERVIO VAGO. López-Ruiz E*, Vega-Flores G*, Arias Caballero A*, Fernández-Guardiola A y Martínez A. Facultad de Psicología UNAM y Instituto Nacional de Psiquiatría SSA. México, 14370 D.F. C-157 ANÁLISIS AUTORRADIOGRÁFICO DEL EFECTO DEL “KINDLING” ELÉCTRICO AMIGDALINO Y DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA TIPO “QUENCHING” EN LA ADENILATO CICLASA EN CEREBROS DE RATA. López-Meraz M.L.*1,2, Neri-Bazán L.*1, Briones M.*2 y Rocha L.1 1 Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN; 2 Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente”. C-158 ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA ANTIEPILEPTICA EN LÓBULO TEMPORAL DE HUMANOS CON EPILEPSIA RESISTENTE A FÁRMACOS MODIFICA LOS NIVELES TISULARES DE AMINOÁCIDOS. Cuéllar, M*1,3. Velasco, M*2.,Velasco, F*2., Velasco, A.L*2., Neri, L*1., Briones, M*3., Rocha, L1. 1Farmacobiología, CINVESTAV-IPN. 2Hospital General de México. 3Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente”. C-159 ALTERACIONES EN LA COMPRENSIÓN DE ORACIONES DE DIFERENTE GRADO DE COMPLEJIDAD SINTACTICA INDUCIDAS CON ESTIMULACIÓN ELECTRICA CORTICAL (EEC). Trejo-Martínez, D.*1, Marcos-Ortega, J. *2, Gadea-Lacasa N. *2, Martínez-Rosas, A. R. 3 y Ondarza-Rovira, Rodolfo3. 1Universidad Nacional Autónoma de México, 2Hospital General de México, 3Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía “MVS” (INNNMVS). Sueño C-160 LA SEROTONINA MODULA LOS EPISODIOS DE INMOVILIDAD INDUCIDOS POR MANIPULACIÓN EN EL MUTANTE MIELINICO taiep. Ita M.L.,* Cortés M.C.* y Eguibar J.R., Instituto de Fisiología, B.U.A.P. Apdo. Postal 406. Puebla, Pue. México C-161 ACTIVIDAD OSCILATORIA DURANTE EL SUEÑO PARADOJICO. ORGANIZACIÓN EN BANDAS ANCHAS. del Río-Portilla Y.*1, Muñoz-Torres, Z.*1, Guevara, M.A.2, Corsi-Cabrera, M.1 1 Laboratorio de sueño, Facultad de Psicología, Posgrado, UNAM, México. D.F. 2Inst de Neurociencias U de Guadalajara, Jal. C-162 VAGUS NERVE CHRONIC STIMULATION IN CATS: EFFECTS ON SLEEP AND EEG POWER SPECTRA ANALYSIS. Martínez-Vargas D*, Valdés-Cruz A*, Magdaleno-Madrigal VM*, Fernández-Mas R*, Almazán-Alvarado S*, Fernández-Guardiola A. Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón De La Fuente Muñiz”. Calzada México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, Tlalpan México, D. F. 14370 C-163 MICROARQUITECTURA DE LA ACTIVIDAD EEG DEL SUEÑO PARADÓJICO FÁSICO Y TÓNICO EN EL HOMBRE. Muñoz-Torres, Z.* del Río-Portilla, Y. * Corsi-Cabrera, M. Laboratorio de sueño, Facultad de Psicología, Posgrado, UNAM. México D.F. C-164 INTERACCION DEL PEPTIDO VASOACTIVO INTESTINAL (VIP) Y DE UN ANTAGONISTA MUSCARINICO M2 EN LA REGULACION DE SUEÑO EN LA REGION PONTINA DEL GATO. Jiménez Anguiano, A*., Manríque Arias, J.C*. y Velázquez Moctezuma, J. Area de Neurociencias. Depto. de Biología de la Reproducción. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. C.P.09340. México D.F. Sistemas Sensoriales C-165 EVALUACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE GAP-43 Y SINAPTOFISINA EN LA CORTEZA SOMATO-SENSORIAL PRIMARIA (S1) DE ANIMALES CIEGOS. Guzmán-López, J.A., GeovanniniAcuña, H., Gutiérrez-Ospina, G. Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBM, UNAM, México D.F., 04510 C-166 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA RESPUESTA AUDITIVA DEL TALLO CEREBRAL DEL REPTIL Sceloporus torquatus. Morales-Martínez J1*., González-Piña R.2*, AlfaroRodríguez A3*, y Ayala-Guerrero F.4 1Laboratorio de Neurofisiología Auditiva, 2Laboratorio de Plasticidad Cerebral, 3Laboratorio de Neuroquímica, InCH-CNR, SSA. 4Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. C-167 GRUPOS DE NEURONAS CORTICALES SON INFLUENCIADAS POR NEURONAS DEL ASTA DORSAL CON ACTIVIDAD ESPONTÁNEA. Vázquez, D.*, Rojas-Piloni, G.*, Martínez, L.*, Méndez, I.*, Flores, A. y Manjarrez, E.* Instituto de Fisiología. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. C-168 DISTRIBUCIÓN DE GRUPOS NEURONALES CON ACTIVIDAD ESPONTÁNEA EN LA MÉDULA ESPINAL CERVICAL DEL GATO. Pérez, H.*, Martínez, L.*, Vélez, D.*, Rojas-Piloni, G.*, Flores, A. y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. México. Fisiología Celular C-169 LA PROTEINA DE LA UNION ESTRECHA ZO-2 POSEE SEÑALES DE IMPORTACION Y EXPORTACION NUCLEAR. Ponce, A.∗ Ortiz-Navarrete, V.,∗ Jaramillo, B.∗, y Gonzalez-Mariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, México, D.F. C-170 EN EL NUCLEO ZO-2 SE ENCUENTRA FOSFORILADA EN SITIOS CONSENSO PARA PKC Y ASOCIADA A LA MATRIZ NUCLEAR. Jaramillo, B.∗, Betanzos, A.,∗ y González-Mariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, México, D.F. C-171 CARACTERIZACIÓN DE CÉLULAS β PANCREÁTICAS DE RATAS EN DESARROLLO. Aguayo C*, Sánchez-Soto C*, Arellanes-Licea E*, Hiriart M. Instituto Fisiología Celular, UNAM. C-172 ANÁLISIS DE LA SECRECIÓN DE INSULINA EN PRESENCIA DE ACIDO RETINOICO Y NGF. Sánchez-Duran A*; Sánchez-Soto C* y Marcia Hiriart*. Instituto de Fisiología Celular, UNAM.México.D.F.CP 4510. C-173 CÉLULAS PRODUCTORAS DE CATECOLAMINAS EN LA PARED DE LA VENA PORTA. Ramos-Hernández, J.M.*, Becerril-Montes, A.*, Piñón, M., Racotta, R. Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, y Departamento de Morfología, Escuela Superior de Medicina, IPN, México. C-174 EFECTO DEL GnRH Y TRH SOBRE SINTAXINA Y SNAP-25 EN LA ADENOHIPOFISIS DE RATA IN VITRO. Quintanar J.L., Salinas E.*, Montoya R.*, Campos R.* y Orozco G.*Depto. de Fisiología y Farmacología y Depto. de Microbiología. Centro de Ciencias Básicas. Universidad Autónoma de Aguascalientes. C-175 RESPUESTA DE CROMATOFOROS DE CRUSTÁCEO A UN NEUROPÉPTIDO DE INSECTOS. Porras, M. G.*+, Anaya, V*++, Loof, A. D.*! y Aréchiga, H.+ División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F.+; Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV++, México, D.F. y Zoological Institute, Katholieke Universiteit Leuven, Belgium! Ritmos C-176 CAMBIOS DIARIOS DE LOS CRIPTOCROMOS EN EL TALLO OCULAR DEL ACOCIL Procambarus clarkii. Escamilla-Chimal, E.G*, Hernández-Herrera G.*, Gloria-Soria A.* y Fanjul-Moles M.L. Laboratorio de Neurofisiología Comparada, Facultad de Ciencias, UNAM, México, D.F. C-177 EFECTO DE LA LUZ Y LA PINEALECTOMIA SOBRE EL RITMO CIRCADIANO DE ACTIVIDAD LOCOMOTORA EN LA LAGARTIJA Scelophorus torquatus. Corona Lagunas JJ* y Miranda Anaya M. Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias UNAM, México DF 04510. C-178 DISOCIACION DE LOS RITMOS CIRCADICOS CONDUCTUALES EN RATAS SOMETIDAS A OSCURIDAD CONSTANTE. Carmona, C. 1,2*, Gómora, P.2, Rodríguez-Sosa, L.3, Beyer, 1 C2. y Aréchiga, H.3 Universidad Autónoma del Edo. de Hidalgo. 2CIRA CINVESTAV-UAT. Tlaxcala. 3 División de Estudios de Postgrado e Investigación, Facultad de Medicina UNAM, México, D.F. C-179 VARIACIONES DIURNAS DE CORTICOSTERONA Y SU RESPUESTA AL ESTRÉS CRÓNICO EN RATAS MACHO CASTRADOS. Retana-Márquez, S., Bonilla Jaime, H.*, Vázquez Palacios, G. * y Velázquez-Moctezuma, J. Departamento de Biología de la Reproducción. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México, D.F. Farmacología Conductual C-180 EFECTO DE LA BUSPIRONA Y DEL DIAZEPAM SOBRE LA AVERSIÓN CONDICIONADA AL SABOR PRODUCIDO POR CLORURO DE LITIO (LiCl). Reyes E, Sánchez-Castillo H, Miranda F, y Velázquez-Martínez DN. Depto. de Psicofisiología. Facultad de Psicología; Facultad de Estudios Superiores, Iztacala. UNAM. México. C-181 UN NUEVO DERIVADO DE LAS XANTINAS: EL A15Bu, MEJORA LAS CONDUCTAS MOTORAS. Parra C.C*1, (avalado por Félix Luna Morales), Alonso V.M*1., Maxil T.R*1, Ávila R.T*1, Muñoz Z.A*1, Sandoval J*1, Florán B*2 y Limón I.D*1. 1Facultad de Ciencias Químicas-B.U.A.P. y 2Depto de Fisiología. CINVESTAV-IPN. C-182 INDUCCIÓN DE VIGILIA INDEPENDIENTE DE ACTIVACIÓN MOTORA POSTERIOR A LA ESTIMULACIÓN ESTRIATAL DOPAMINÉRGICA. Mena-Segovia, J.*, Terrés, M.L.*, Giordano M. Laboratorio de Plasticidad Cerebral, Instituto de Neurobiología, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro 76230. C-183 EFECTO BILATERAL DE METANFETAMINA EN EL GLOBO PALIDO EXTERNO SOBRE LA ACTIVIDAD MOTORA Y LOS NIVELES DE OXIDO NITRICO. Bastida J. C*., (avalado por Félix Luna Morales), Maxil T. R*., M-Mendieta L*., G-Quiroga E*. y Limón I. D*. Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP. C-184 EL TRATAMIENTO CON DOSIS BAJAS DE CAFEÍNA DURANTE UNA SEMANA NO INDUCE TOLERANCIA AL SINERGISMO CON EL TRIHEXIFENIDILO PARA INHIBIR LA CATALEPSIA INDUCIDA CON HALOPERIDOL Moo-Puc, R. E* (Avalada por Góngora-Alfaro, José L.), Villanueva-Toledo, J. *, Góngora–Alfaro, J.L. Centro de Investigaciones Regionales - Universidad Autónoma de Yucatán. C-185 SINERGISMO ENTRE LOS ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES DE ADENOSINA A2A Y EL TRIHEXIFENIDILO PARA INHIBIR LA CATALEPSIA INDUCIDA CON HALOPERIDOL Góngora-Alfaro, José L1, Villanueva-Toledo, J.*1, Moo-Puc, R.E*1, Sandoval-Ramírez, J.*2, Muñoz-Zurita, A.*2, Limón-Pérez de León, D.*2. (1) Centro de Investigaciones Regionales de la Universidad Autónoma de Yucatán y (2) Centro de Investigación de la Facultad de Ciencias Químicas de la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. C-186 EL AGONISTA D1 (SKF-38393) EN EL GLOBO PALIDO EXTERNO REVIERTE LA CATALEPSIA PRODUCIDA POR DROGAS ANTIPSICÓTICAS. Avila-Ruíz Tania*1, Flores Gonzalo*2, Limón Pérez I.D.*1 y Luna Morales F.1 (1) Lab. de Neurofarmacología de la Fac. Cs. Químicas de la BUAP y (2) Instituto de Fisiología BUAP. C-187 PARTICIPACIÓN DE MECANISMOS SEROTONÉRGICOS EN LA MEMORIA DE INTERVALO: EFECTOS DEL AGONISTA 5-HT1B/2C MCPP. Sánchez-Castillo, H.* y Velázquez-Martínez, D. N. Depto. de Psicofisiología. Facultad de Psicología. UNAM. México. C-188 PARTICIPACIÓN DE LOS RECEPTORES 5-HT1A Y 5-HT2C EN LA REGULACIÓN DE LA ESTRUCTURA ALIMENTARIA DE RATAS. Escartín-Pérez, R.E.* (avalado por Benjamín Florán Garduño), Mancilla-Díaz, J.M.*, Villaseñor-Franco, R.M.* y González-Hernández, B.* Laboratorio de Neurobiología de la Alimentación. FES Iztacala, UNAM, México. DGAPA IN304300. C-189 EL ANTAGONISTA DOPAMINERGICO S(+)-RACLO-PRIDE NO BLOQUEA EL CONDICIONAMIENTO DE PREFERENCIA DE LUGAR INDUCIDO POR COPULA REGULADA EN RATAS HEMBRA. García-Horsman P.* y Paredes Guerrero R. INB, UNAM Querétaro. C-190 CONDICIONAMIENTO DE PREFERENCIA DE LUGAR CON ANFETAMINA: INTERACCIÓN CON EL SISTEMA SEROTONÉRGICO. Orozco, G.*, Osorio, A.* Y Velázquez-Martínez, D.N. Laboratorio de Farmacología Conductual, Facultad de Psicología, UNAM. México. C-191 ESTIMACIÓN TEMPORAL: PARTICIPACIÓN DE MECANISMOS SEROTONÉRGICOS EN UNA TAREA DE BISECCIÓN TEMPORAL. Osorio A, González R, y Velázquez-Martínez DN. Depto. de Psicofisiología, Facultad de Psicología, UNAM. México. C-192 CAMBIOS EN EL CONSUMO DE ALCOHOL DEPENDIENTES DE LA DURACIÓN DEL TRATAMIENTO CON ESTRÓGENOS EN LA RATA MACHO. Vázquez-Cortés, C.*, Barrios De Tomasi, E.* y Juárez, J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara., Guadalajara, Jal., Méx. C-193 LOS ESTRÓGENOS POTENCIAN LOS EFECTOS DE LOS NALTREXONA SOBRE EL CONSUMO DEL ALCOHOL EN LA RATA MACHO. Barrios De Tomasi E y Juárez J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara, Gdl, Jal., Méx. C-194 INTAKE OF ETHANOL OF FEMALE RATS TREATED WITH ESTRADIOL VALERATE. Irma Sofia Ledesma de la Teja*, Larry D. Reid,* Meta L. Reid*, Marco A. Sánchez, Arnulfo Díaz-Trujillo*, Adriana Oviedo*, Gina L. Quirarte and Roberto A. Prado-Alcalá. Instituto de Neurobiologia, UNAM; Rensselaer, Troy, NY, USA; and Laboratorio de Fisiologia, U.A.Q., Queretaro, Mexico C-195 EFECTO DE LOS ESTRÓGENOS SOBRE EL CONSUMO DE ALCOHOL EN LA RATA MACHO. Virgen Enciso M*, Barrios De Tomasí E* y Juárez J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara, Guadalajara, Jalisco, México. jueves 12 de septiembre Sesiones orales 8:30 – 10:45 h Salón 1 Daño y Recuperación Moderadora: Dra. Lourdes Massieu O-77 POSIBLES MECANISMOS INVOLUCRADOS EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR LA ACUMULACION DE GLUTAMATO EXTRACELULAR DURANTE LA INHIBICION MITOCONDRIAL. García, O.*,1 y Massieu, L. Depto. de Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-78 ALTERACIÓN EN LA CITOARQUITECTURA EN NEURONAS DE LA CORTEZA MEDIA PREFRONTAL Y DEL HIPOCAMPO DE RATAS QUE SUFRIERON HIPOXIA DURANTE EL TRABAJO DE PARTO. Juárez-Díaz, I.*(avalado por Gonzalo Flores Alvarez), Moctezuma-Martiñon, C* y AlquicerBarrera, P. G* Flores, G. Laboratorio de Neuropsiquiatría, Instituto de fisiología de la BUAP. O-79 EFECTO DEL AISLAMIENTO SOCIAL SOBRE EL DESARROLLO DE NEURONAS PIRAMIDALES DE CORTEZA E HIPOCAMPO. Rojas-Paredes. D.*, Silva-Gómez, A.B.* y Flores, G., Instituto de Fisiología, BUAP, Pue., México O-80 LAS CRISIS CONVULSIVAS INDUCIDAS POR HIPERTERMIA PROVOCAN MUERTE NEURONAL DURANTE EL DESARROLLO DEL CEREBRO DE RATA. Sandra Orozco-Suárez*, Misael González-Ramírez, Sebastián Castillo y Alfredo Feria-VelascoA. Unidad de Investigación en Enfermedades Neurológicas, Unidad de investigación en Enfermedades Oncológicas, CMN SXXI, IMSS, México D.F. y a CIATEJ-SEP-CONACYT, Guadalajara, Jal. O-81 USO DE TRANSPLANTES DE GLÍA ENVOLVENTE DEL BULBO OLFATORIO PARA PROMOVER LA REGENERACIÓN. Gudiño-Cabrera,G.1 Ortuño-Sahagún,D.1 y Nieto-Sampedro, M.*2 1 Dpto. de Biología Celular y Molecular. CUCBA. Universidad de Guadalajara. México. 2Instituto Cajal. CSIC. Madrid, España. O-82 TRANSFERENCIA ADENOVIRAL DE GENES SUPRESORES DE TUMORES, DIRIGIDOS TRANSCRIPCIONALMENTE A GLIOMAS. Benítez-Hernández JA* y Segovia J. Dept. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, 07300, D.F. O-83 POLIPLEX FUSOGÉNICO-CARIOFÍLICO DE NEUROTENSINA: ESTRATEGIA PROMISORIA PARA TRANSFERENCIA GÉNICA AL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. NavarroQuiroga I.1,2*, Barrón-Moreno F.1*, González-Barrios J.A. 1* y Martínez-Fong D1. Departamento de Fisiología Biofísica y Neurociencia CINVESTAV-IPN 1, Doctorado en Ciencias Biomédicas, UNAM 2. O-84 TRANSFERENCIA DEL GEN HUMANO PARA EL FACTOR NEUROTRÓFICO DERIVADO DE LA GLÍA (hGDNF) A NEURONAS DOPAMINÉRGICAS UTILIZANDO EL VECTOR DE NEUROTENSINA. JA González-Barrios1,2, I Navarro-Quiroga1, V Anaya1, J Aceves1 y D Martinez-Fong. 1 Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV-IPN, 2Depto. Urgencias Adultos, 1o De Octubre, ISSSTE, México, D.F., 07300. O-85 EFECTO NEUROPROTECTOR E INHIBIDOR DE LA PLASTICIDAD NEURONAL DE LA METILPREDNISOLONA ADMINISTRADA A DIFERENTES DÓSIS EN LESIÓN TRAUMATICA DE MÉDULA ESPINAL DE DISTINTA INTENSIDAD. Hermelinda Salgado-Ceballos1,4*, Sergio TorresCastillo4,5, Jose Luis Torres-Vera2, Diana Zabaleta3, Alejandro Zavala3, Sandra Orozco-Suárez1, Ruth Capin2, Alfredo Feria-Velasco6 **. 1.U.I.M.E. Neurológicas, 2.U.I.M.E. Oncológicas y 3. Servicio de Neurología, CMN Siglo XXI, IMSS; 4.Proyecto Camina A.C., 5.UAM Iztapalapa, 6.CIATEJ SEP-CONACYT. Salón 2 Neurotransmisores y Receptores Moderadora: Dra. Verónica Guarner Lans O-86 EVIDENCIAS DE RECEPTORES ADRENERGICOS EN EL CORAZÓN DE Ambystoma mexicanum. Cano A2*., Prado E1*., Guarner V2. y Vargas A2*. 1Criadero Tachipa Umbral Maya’Ik Centro. 2 Departamento de Fisiología, Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez”, México D.F. canagu@cardiolgia.org.mx. O-87 PARTICIPACIÓN DE LOS RECEPTORES ADRENÉRGICOS E HISTAMINÉRGICOS EN EL EFECTO DEL QUINPIROLE EN LA AORTA DE RATA. 3Arellano, M.G*. (Avalado por Rocha Luisa); Castillo, C*.; 1,2Valencia, I.* Escuela Superior de Medicina del I.P.N. O-88 MODULACIÓN MUSCARÍNICA DE LAS CORRIENTES DE Ca2+ DE TIPO N Y P/Q EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE PROYECCION. Pérez-Roselló, T. *, Vilchis, C. *, Salgado, H. *, Figueroa, A. *, Galarraga, E., Bargas, José. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. O-89 REGULACIÓN POR RECEPTORES MUSCARÍNICOS M1 DE LA FORMACIÓN DE AMPc INDUCIDA POR RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS D1 EN CULTIVOS PRIMARIOS NEURONALES DEL NEOESTRIADO DE LA RATA. Sánchez-Lemus, E.,* de la Vega, M.T.* y Arias-Montaño, J.A. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, D.F. O-90 DIFERENTE MODULACIÓN PRESINAPTICA EN LAS ENTRADAS INHIBITORIAS A LAS NEURONAS ESPINOSAS NEOESTRIATALES. Guzmán, J. N.*, Hernández, A.*, Galarraga, E., Laville A.*, Vergara, R.*, Tapia, D., Erlij, P.*, Valdiosera, R., Aceves, J., Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular, UNAM; Departamento de Fisiología Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, IPN. O-91 ANTAGONISMO FUNCIONAL ENTRE RECEPTORES H3 A HISTAMINA Y D1 A DOPAMINA SOBRE LA ACTIVIDAD ELÉCTRICA DE LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS DEL NEOESTRIADO DE LA RATA. Bárbara, A.*1,2, Hernández, M.*1, Sierra, A.*2, Aceves, J.2 y Arias-Montaño, J.A.2 1CICS-UMA-IPN y 2Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV. O-92 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN LOCAL DEL IMMEPIP SOBRE LA CONDUCTA DE GIRO PRODUCIDA POR LA APOMORFINA. García-Ramírez, M.*, Aceves, J., Arias-Montaño, J. A. Departamento de Fisiología de la ENCB-IPN, Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV. O-93 EFECTO DEL ANTAGONISTA DOPAMINÉRGICO (+)S14297 SOBRE LA ACTIVIDAD LOCOMOTORA EN LA RATA. Vargas G.*(Avalado Por Flores Alvarez Gonzalo), Flores-Tochihuitl J.* Y Flores G.* Laboratorio De Neuropsiquiatría, Instituto De Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma De Puebla. Puebla, México. O-94 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN NEONATAL DE GMS SOBRE LA EXPRESIÓN DE TIROSINA HIDROXILASA DURANTE EL DESARROLLO DE LA RATA. López-Pérez S.J.*, UreñaGuerrero M.E.*, Beas-Zárate C. Depto. de Biología Celular y Molecular, CUCBA, U. de G. SIMPOSIO 8:30 – 11:00 H Salón 3 Neurofarmacología del aprendizaje y memoria Coordinador: Dr. Alfredo Meneses S-31 ROLE OF THE PATHWAY IN MOTOR SKILLS AND MOTOR PONTO-CEREBELLAR LEARNING IN THE RAT. A.Gasbarri∗1, A. Pompili1, C. Pacitti1, and F. Cicirata2, 1Department of Sciences and Biomedical Technologies, University of L'Aquila; 2Department of Physiological Sciences, University of Catania (Italy). S-32 INTERACCIÓN DE LAS MOLÉCULAS SINÁPTICAS EN LA CONSTRUCCIÓN DE LA MEMORIA. Federico Bermúdez-Rattoni, Maribel Miranda, Leticia Lugo Verdugo. Departamento de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. México. S-33 MEMORIA Y SOBRERREFORZAMIENTO. Roberto A. Prado-Alcalá y Gina L. Quirarte. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus Juriquilla, Querétaro, Qro. S-34 EFECTO DE AGONISTAS Y ANTAGONISTAS ADRENERGICOS EN UN APRENDIZAJE ESPACIAL. Alemán, V. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias CINVESTAV, IPN. A.P. 14740, México, D.F. 07000. S-35 PAPEL DE LOS RECEPTORES SEROTONÉRGICOS EN LA MEMORIA A CORTO Y LARGO PLAZO. A. Meneses1, L. Manuel-Apolinar2, R. Gonzalez1. 1Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV. 2 Escuela Superior de Medicina, IPN. México DF, México. Conferencia magistral 11:00 – 12:00 h Central nervous system plasticity and the neuropathic state Dr. Frank Porreca Department of Pharmacology, University of Arizona Health Sciences Center Sesión de carteles 12:00 – 15:00 h Aprendizaje y Memoria C-196 LAS SUBLINEAS HY Y LY DE RATAS SPRAGUE-DAWLEY MUESTRAN DIFERENTES NIVELES DE APRENDIZAJE. Spíndola, E.* 1, Quiroz, A.* 1, Díaz M.* 2, Cortés M.C.* 2, Roldán G.1 y Eguíbar J.R.2. 1Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, 2 Instituto de Fisiología, BUAP. C-197 DISMINUCIÓN DEL TIEMPO DE RECONOCIMIENTO SOCIAL EN RATAS MACHO POR EL EFECTO DE LA EXPOSICIÓN A CAMPOS MAGNÉTICOS DE EXTREMA BAJA FRECUENCIA. Reyes-Guerrero, G.*1,3, Donatti-Albarrán, O.*1, Elías, D.2, Domínguez-González, A.*1, Vázquez, M.*1, Pérez, J.*2, Verdugo-Díaz, L.1 y Guevara-Guzmán, R.1. 1 Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México. 2Sección de Bioelectrónica, CINVESTAV, IPN, México. 3Departamento de Biología de la Reproducción, UAM- Iztapalapa, México. C-198 PAPEL DE LOS RECEPTORES NMDA EN EL APRENDIZAJE OLFATIVO. Solís-Avila, C.P.*, Quiroz-Saldívar, A.I.* y Roldán-Roldán, G. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México. C-199 DISOCIACIÓN DEL EFECTO ANSIÓLITICO Y AMNÉSICO DEL MIDAZOLAM EN EL LABERINTO ELEVADO EN T. González-López, M.R.*, Gómez-Romero J.G.*, García-Saldívar, N.L.* y Cruz-Morales, S.E. Maestría en Psicología y Laboratorio de Psicofarmacología, FES-Iztacala, UNAM. C-200 EFECTOS DE ESCOPOLAMINA EN EL LABERINTO ELEVADO EN T. Gómez-Romero J.G.*, Castillo, G.* González-López, M. R. A.* y Cruz-Morales, S.E. Maestría en Psicología y Laboratorio de Psicofarmacología, FES-Iztacala, UNAM. C-201 INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD THETA DE ALTA FRECUENCIA DURANTE EL APRENDIZAJE ESPACIAL DEPENDIENTE DEL HIPOCAMPO. +Olvera-Cortés, M. E.*; +GaytánTocavén, L.* y #González-Burgos, I. #Laboratorio de Psicobiología, +Laboratorio de Neurofisiología Experimental. Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Michoacán. C-202 EL KINDLING EN LA AMIGDALA Y CORTEZA INSULAR MODIFICA EL APRENDIZAJE AVERSIVO A LOS SABORES. López L.M.*, Camacho, F.J.* y Paredes R.G.* Instituto de Neurobiología, UNAM, Querétaro. C-203 EFECTO DE LA LESIÓN INTRAESTRIATAL DE TERMINALES SEROTONINÉRGICAS SOBRE EL DESARROLLO DEL APRENDIZAJE ESPACIAL EGOCÉNTRICO EN LA RATA. AnguianoRodríguez, P.* (Avalado por González Burgos Ignacio), Gaytán-Tocavén, L.*, Olvera-Cortés, E.* Laboratorio de Neurofisiología Experimental, Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Michoacán. C-204 INCREMENTO DE SINAPTOFISINA EN CA3 DE RATAS ENTRENADAS EN LA TAREA DE EVITACION INHIBITORIA. Quiroz, C.*, Garín, M.E.* Quirarte, G. L. y Prado-Alcalá R.A. Instituto de Neurobiología, UNAM C-205 LA CORTICOSTERONA EN EL ESTRIADO FACILITA LA CONSOLIDACIÓN DE LA MEMORIA EN FORMA DEPENDIENTE DE LA DOSIS. Medina, C.*, Sánchez-Reséndis, O.*, Galindo, L.*, Prado-Alcalá, R.A. y Quirarte, G. Instituto de Neurobiología, UNAM. C-206 NÚCLEO CAUDADO Y APRENDIZAJE. L. LA APLICACIÓN INTRAESTRIATAL DE TETRODOTOXINA ANTES DEL ENTRENAMIENTO DE EVITACIÓN INHIBITORIA NO PRODUCE DEPENDENCIA DE ESTADO. Luisa E. Galindo*, Gina L. Quirarte, Cristina Medina* y Roberto A. PradoAlcalá. Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma de México, Queretaro, México 76230. C-207 INTELIGENCIA Y PERFIL COGNOSCITIVO EN NIÑAS CON HIPERPLASIA ADRENAL CONGÉNITA. Inozemtseva, O.*1 (avalado por Juárez González Jorge), Matute, E.*1,2 y Aceves, M.A.*3 1 Instituto de Neurociencias, 2 Departamento de Estudios en Educación, U de G; 3 Centro Medico de Occidente, IMSS. Guadalajara. C-208 ACTIVIDAD ELECTROFISIOLÓGICA ASOCIADA AL RECONOCIMIENTO DE INFORMACIÓN AUDITIVA ALMACENADA A LARGO PLAZO. Téllez-Alanís, B.*1,2 Barra, E. F.*1, 1 1 1 Ruiz, A.* y Cansino, S. Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología UNAM y 2 Facultad de Psicología UAEM. C-209 RASGOS NEUROFISIOLÓGICOS DISTINTIVOS DE LA MEMORIA SENSORIAL Y DE LA MEMORIA A CORTO PLAZO VISUAL. Ruiz, A.1*, Téllez-Alanís, B. 1 y 2* y Cansino, S.1. 1Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología, UNAM. 2Facultad de Psicología, UAEM. C-210 APRENDIZAJE SIMULTANEO DE DOS CALIBRACIONES VISUOMOTORAS EN ADAPTACIÓN A PRISMAS. Díaz, R.* Herrera, W.* Murray, VC.* Méndez, M.* Castillo, J.* y FernándezRuiz, J. Depto. Fisiología, Facultad de Medicina. UNAM. México D.F. C-211 PERCEPCIÓN DEL ESTRÉS POR ESTUDIANTES DE LAS MATERIAS BÁSICAS EN LA CARRERA DE MEDICINA Fernández-Garza, N.E.* (avalado por Rocha, Luisa), López-Méndez, M.A. y García Garza, M.S.A. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Nuevo León. fisiologia@ccr.dsi.uanl.mx Conducta Social y Maternal C-212 LA INFUSIÓN DE BENZOATO DE ESTRADIOL (BE) EN EL ÁREA PREÓPTICA MEDIA (aPOm) CAMBIA A LA HEMBRA VIRGEN DE CANÍBAL EN MATERNAL. Porfirio Gómora y Guadalupe Domínguez. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV- UAT, Ixtacuixtla Tlaxcala. C-213 INFLUENCIA DEL ESTRADIOL Y LA PROGESTERONA SOBRE LA ATRACCION DE LA RATA HEMBRA POR EL LIQUIDO AMNIOTICO. Gracia, M.E*., Carmona, C*., Gómora, P y Beyer, C. Centro de Investigación en Reproducción Animal CINVESTAV-UAT. Tlaxcala, México. C-214 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN SENSORIAL TEMPRANA EN EL DESARROLLO DE LA CONDUCTA DE APIÑAMIENTO DE LA RATA. Soriano, O*., Torrero, C., Regalado, M*. y Salas, M. Departamento de Neurobiología del Desarrollo y Neurofisiología. Instituto de Neurobiología. Campus UNAM, Juriquilla. Querétaro, Qro., México. C-215 DESARROLLO DEL JUEGO SOCIAL EN RATAS DESNUTRIDAS Y SENSORIALMENTE ESTIMULADAS. Regalado, M*., Torrero, C., Soriano, O*. y Salas, M. Instituto. de Neurobiología, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro, México. C-216 CONDUCTA MATERNA ESPONTANEA EN HEMBRAS VIRGENES DEL RATON DE LOS VOLCANES (Neotomodon a. alstoni). Luis-Díaz, J.A.* (avalado por Miranda-Anaya Manuel), CarmonaCastro A.*, Delgado-Solís J.*, Cedillo-Ildefonso B.*, Espinosa-Villanueva G* y Cárdenas-Vázquez R.* Laboratorio de Biología de la Reproducción, FES Iztacala y Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias, UNAM. Desnutrición y desarrollo C-217 DESARROLLO DE NEURONAS DEL NÚCLEO MOTOR DEL FACIAL (NMF) EN RATAS DESNUTRIDAS. Torrero, C., Frías, C*., Regalado, M*., Soriano, O*., Alvarado, S*. y Salas, M. Instituto de Neurobiología. Campus Juriquilla. UNAM. Querétaro, Qro., México. C-218 PARTICIPACION SEROTONINERGICA Y DOPAMINERGICA EN LA RATA MADRE BIEN NUTRIDA Y DESNUTRIDA, DURANTE EL AMAMANTAMIENTO DE CRIA DESNUTRIDA IN UTERO. González RM* Manjarrez GGa, Hernández RJb. aLaboratorio de Neuroquímica, *UIM en Enfermedades Neurológicas, CMN, Siglo XXI. Instituto Mexicano del Seguro Social y bCINVESTAV IPN. C-219 CAMBIOS EN LA DISPONIBILIDAD DE SEROTONINA NO EVITA EL RETRASO DE LA FORMACION DE LOS BARRILES EN LA CORTEZA SOMATOSENSORIAL DE RATA DESNUTRIDA IN UTERO. a Manjarrez GG, b Gutiérrez OG, b González C*, a Herrera MR*, b López S*, b Medina I*, c a Hernández RJ. Laboratorio de Neuroquímica. UIM en Enfermedades Neurológicas. CMN, Siglo XXI, IMSS. b Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM y cCINVESTAV IPN. C-220 RASGOS CONDUCTUALES ASOCIADOS A LA DESNUTRICIÓN PRE- Y POSTNATAL EN RATAS. 1Ferreira-Nuño A,* 1Morales-Otal A,* 2Vázquez EF,* 2Herrera MR,* 1Velázquez-Moctezuma J, 2 Manjarrez GG. 1Area de Neurociencias. Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa. 2 Laboratorio de Neuroquímica. UIM en Enfermedades Neurológicas. CMN, Siglo XXI, Instituto Mexicano del Seguro Social. C-221 INMUNOFENOTIPO DE RATONES DEFICIENTES DE BIOTINA. Báez-Saldaña A, Garay, C.*, Delint, I.*, Jorge, E.*, Díaz, G.*, Rosiles, R.* y Ortega, E.*. Departamento de Inmunología. Instituto de Investigaciones Biomédicas. U.N.A.M. México, D.F. C-222 INCIDENCIA DEL SÍNDROME DE DIFICULTAD RESPIRATORIA EN NEONATOS PRETÉRMINO. INFLUENCIA DE LA ADMINISTRACIÓN DE CORTICOESTEROIDES PREPARTO A LA MADRE. Vera, K.*, Gamiño, S.M., Caudillo, C*. y Cruz, E*. Línea Invest. en Neurofisiología. IIST-U. de Guanajuato. Reproducción C-223 COMPETENCIA ESPERMÁTICA EN RATAS Pacheco Pablo1,2, Coria GA1*, Manzo J1. Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana1. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM2 pacheco@neuroetologia.net C-224 DIFERENTE FUNCIONALIDAD DE LA CORTEZA PREFRONTAL MEDIAL Y ORBITAL DURANTE LOCOMOCION SEXUALMENTE REFORZADA EN RATAS HEMBRA. Hernández-González, M., Ramos-Guevara, J.P.*, Prieto-Beracoechea, C.A.* y Guevara, M.A. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara. C-225 EXPRESIÓN DEL GEN DE LA PROLACTINA (PRL) EN CÉLULAS GnRHÉRGICAS GT1-7 INMORTALIZADAS. Ortiz-Cornejo F*, Martínez de la Escalera G, Nava G*, Ochoa A.* Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma de México, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro, Qro, 76230, México. C-226 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE LA p-CLOROANFETAMINA (pCA) EN LA ESPERMATOGÉNESIS EN LA RATA. Marín, M.*, Avilés, A.*, Aragón, A., Ayala, M.E., Domínguez, R. UIBR. Laboratorio de Pubertad. FES-Zaragoza. UNAM. C-227 EFECTO DE ADMINISTRACIÓN DE ESTEROIDES SEXUALES (ES) EN LA ETAPA NEONATAL (EN) SOBRE EL DESARROLLO FOLICULAR Y LA ESTEROIDO-GÈNESIS EN LA RATA ADULTA. Rodríguez, M.S*., Monroy J*., Chavira R*, Ayala, M.E. y Domínguez, R. UIBR. FES-Zaragoza, UNAM. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. C-228 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE SEROTONINA EN EL PROCESO DE APOPTOSIS Y ATRESIA FOLICULAR. Gallegos, E.*, Aragón, A.*, Chavira R*, Ayala, ME., Domínguez R. UIBR. Laboratorio de Pubertad. FES-Zaragoza, UNAM. México. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. C-229 MODIFICACIONES EN EL CRECIMIENTO DEL FOLÍCULO OVÁRICO DE LA RATA PREPÚBER CON LESIÓN QUÍMICA DEL NÚCLEO DORSAL DEL RAFÉ (NDR). Monroy J*, Ayala ME, Chavira R* y Domínguez R. Laboratorio de Pubertad de la UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. C-230 LOS ESTEROIDES SEXUALES MODULAN LOS EFECTOS DE LA TIMULINA EN LA LIBERACIÓN DE LA FSH Y LH POR LAS CÉLULAS DE ADENOHIPÓFISIS DE RATA HEMBRA. Hinojosa, L.1*, García, L.1*, Chavira, R.2*, Cárdenas, M. 2*, Romano, M.C.3, Domínguez, R.1 y Rosas, P.1*. 1 UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. 2INCMN "Salvador Zubirán". 3Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, IPN. México, D.F., México. C-231 AFLUENCIA DE LINFOCITOS EN EL ENDOMETRIO DE LA CONEJA, DURANTE LOS PRIMEROS DIAS DE LA GESTACIÓN TEMPRANA Y PSEUDOGESTACIÓN+ Zamora, H.V*, Villaseñor G.H.*, Anzaldúa, A.S.*, Romano, M. y Pérez-Martínez, M*. Depto. de Morfología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. UNAM y Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV, IPN., México, D.F. C-232 EFECTOS DEL TRATAMIENTO CRÓNICO CON PLOMO SOBRE LA FUNCIÓN OVÁRICA EN LA RATA ADULTA. Ruiz, M.* (avalado por Morán José Luis), Handal, A.*, Morán, C.* & Gómez, E.* Laboratorio de Investigaciones Biológicas, Instituto de Ciencias, BUAP. C-233 ANÁLISIS ANATÓMICO E HISTOLÓGICO DEL ESFÍNTER EXTERNO DE LA URETRA DE LA RATA MACHO. Martínez-Reyes A.(*), Manzo J. y Pacheco Pablo. Lab. de Neurociencias, Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana . Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. Facultad de Medicina-Xalapa Universidad Veracruzana. C-234 MODIFICACIONES TEMPORALES EN LA OVULACIÓN INDUCIDAS POR EL BLOQUEO DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS EN LA SEGUNDA MITAD DEL CICLO ESTRAL. Pastelín, C.*, Morán, C.*, Handal, A. * & Morán, J. L. Laboratorio de Investigaciones Biológicas, ICUAP, Puebla. C-235 LAS GONADOTROPINAS RESTAURAN DISCRETAMENTE LA OVULACIÓN EN RATAS CON BLOQUEO DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS EN LA PRIMERA MITAD DEL CICLO ESTRAL. Vargas, L. A.*, Morán, C. * & Morán, J. L. Laboratorio de Investigaciones Biológicas, ICUAP, Puebla. C-236 EFECTOS DE LA MICROINYECCIÓN DE EEDQ EN EL HIPOTÁLAMO ANTERIOR SOBRE EL CICLO ESTRAL DE LA RATA. Meléndez, E.*, Morán C.* & Morán, J. L. Laboratorio de Investigaciones Biológicas-ICUAP, Puebla. C-237 CARACTERIZACIÓN DEL SISTEMA SEROTONINÉRGICO DEL EPIDÍDIMO DE LA RATA DURANTE LA MADURACIÓN SEXUAL. Tapia-Rodríguez, M.*, Jiménez-Trejo, F.J.*, MartínezCoria H.*, Manjarrez-Gutiérrez G.* y Gutiérrez-Ospina, G. Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBm, UNAM. y Unidad de Enfermedades Neurológicas, CMN s.XXI, IMSS, México D.F. C-238 EFECTO DEL EXTRACTO CRUDO DE Sedum oxypetalum EN EL EPITELIO VAGINAL DURANTE EL CICLO ESTRAL DE RATONES CD-1. Hernández-Cano, T,* (avalado por Racotta Poulieff Radu.), Montellano-Rosales H.* Laboratorio de Embriología. Depto. de Morfología y Farmacía. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, 11340. México D.F. Farmacología y toxicología C-239 LA ADMINISTRACIÓN DE LA FRACCION 25-35 DE LA AMILOIDE- β INCREMENTA LOS NIVELES DE OXIDO NITRICO EN CORTEZA FRONTAL. Romero-Santos R.*1, Guevara F. J.*2, Limón I. D.*1, Félix Luna Morales1. 2Instituto Nacional de Neurología México D.F. y 1Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP, Puebla, Pue. C-240 PERSISTENCIA DE LAS ALTERACIONES HISTOLÓGICAS DE LA CORTEZA CEREBRAL EN RATÓN DE 18 MESES DE EDAD CAUSADAS POR ADMINISTRACIÓN PRENATAL DE DIAZEPAM De la Fuente-Juárez, Graciela,* Márquez-Orozco, M.C., Márquez-Orozco, A, Gazca-Ramírez, M.V.* Enriquez-Nájera M,** y Varela-Mendoza A.** Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. **Alumnas del Programa NUCE. C-241 EFECTOS DEL FLUNITRAZEPAM SOBRE EL HÍGADO FETAL DE RATÓN. MárquezOrozco, Ma. Cristina, Márquez-Orozco, A., Gazca-Ramírez, M.V.* y De la Fuente-Juárez, G.* Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. C-242 DAÑO RENAL PROGRESIVO CAUSADO POR ESTRÉS OXIDATIVO SECUNDARIO A LA EXPOSICIÓN REPETIDA A BAJAS CONCENTRACIONES DE OZONO EN RATA. Canales-Medina M.* Rugerio-Vargas C.* Vega-Garcia M.I..* Borgonio-Perez G.* y Rivas- Aracibia S. Departamento de Fisiología y Departamento de Biología Celular y Tisular, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. C-243 EFECTO DE LA EXPOSICIÓN REPETIDA A BAJAS DOSIS DE OZONO SOBRE EL TIMO. Rodríguez-Martínez, G.*(avalado por Rivas-Arancibia Selva), Rugerio-Vargas, C*. Rodríguez-Mata, V.* Rodríguez-Martínez, E.* Borgonio-Pérez, G.* y Rivas-Arancibia S. Departamento de Fisiología, Laboratorio de Biología Celular y Tisular. Facultad de Medicina, UNAM. México. C-244 EFECTO DE VANADIO SOBRE LA CITOLOGÍA DEL BULBO OLFATORIO DE RATON. Aguirre C.*,. (avalado por Selva Rivas Arancibia), Mondragón A.*, Meza P.*, Fortoul T.*, Ávila-Costa M. R.*, Sánchez I.*, López I.*, Niño-Cabrera G.*, Pasos F., Acevedo S.,Espinosa J.,* Aley P. y Colín-Barenque L.*. Depto. de Neurociencias de FES Iztacala. Depto. de Biología Celular y Tisular. UNAM. México. C-245 VARIACION EN LA CONCENTRACION DE VANADIO EN PULMON. RELACION CON DOSIS Y TIEMPO DE EXPOSICION. Sánchez- Cervantes I*. (Avalado por Selva Rivas Arancibia), Espejel Maya G*., Saldivar Osorio L.*, López Martínez I*, Colín-Barenque L.*, Acevedo Nava S*, Delgado V*., Avila-Casado MC, Gonzalez V.A.*, Avila-Costa MR* Fortoul T.I*.,. Fac. Medicina, Fac. Química, F.E.S. Iztacala, UNAM. C-246 EFECTO DE LA INGESTA PRE- Y POSTNATAL DE ETANOL SOBRE EL NUMERO DE NEURONAS DEL CIRCUITO TRISINAPTICO DEL HIPOCAMPO DE LA PROGENIE DE RATAS. González-Burgos, I. y Velázquez-Becerra, C.* Laboratorio de Psicobiología, Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. / Div. de Est. de Postgrado, Fac. de Med., UMSNH. Morelia, Mich. C-247 TOXICIDAD AGUDA DE Thevetia peruviana EN ROEDORES. Martínez-Enríquez, M.E.∗, Moreno, L.A.∗, Luna, M.∗, Magos, G.A.∗, 1Aguilar, A.∗ y Campos-Sepúlveda, A.E. Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina, UNAM. 1Herbario IMSSM. C-248 CUANTIFICACIÓN DE LOS CAMBIOS DEL POTENCIAL EN MEMBRANAS DE Manduca sexta INDUCIDOS POR LA TOXINA BACTERIANA Cry1Ab MEDIANTE ENSAYOS DE FLUORESCENCIA. Muñoz-Garay, C* (avalado por Félix Ricardo). Gomez, I.* Sánchez, J.* Darszon, A* y Bravo A*. Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México. Cuernavaca Morelos México. Desarrollo Celular C-249 ORGANIZACIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS EN CÉLULAS DE LA CORTEZA CEREBELOSA DEL RATÓN ADULTO. Rivera-Hernández, R.* (avalado por Morán Perales Jose Luis), Handal-Silva, A.*, Muñoz-Ortiz, J.F.*, Hernández-Matlalcoatl, O.*, Enríquez-Silverio, A*, HernándezJáuregui, P* y Gómez-Conde, E.*. Centro de Investigación Biomédica de Oriente IMSS, Puebla, México. C-250 DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES DE CITOCINAS Y FACTORES TRÓFICOS EN EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO DE PACIENTES CON GLIOBLASTOMA MULTIFORME. DueñasJiménez J.M., Meza-Bautista M.A.*, Mendoza-Magaña M.L., Ramírez-Herrera M.A., Nuño López C.*, Dueñas-Jiménez S.H. Laboratorio de Neurofisiología, Departamento de Fisiología y Departamento de Neurociencias, Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara y Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, Guadalajara Jalisco México. CONFERENCIAS MAGISTRALES CM-01 CM-02 SYNAPTIC BIOPHOTONICS. George Augustine. Department of Neurobiology, Duke University Medical Center. HOW DO G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS RULE THE MIND? Bertil Hille, Dept. of Physiology and Biophysics. University of Washington, Seattle, WA, USA. Modulation of ion channels alters the computations made by neurons and our perception of reality. This lecture describes ion channel modulation through G-protein coupled receptors, first as a widely observed phenomenon with several mechanisms, then in our work with sympathetic ganglion cells, and finally its meaning for setting states of the brain. Our laboratory's focus is on M-current K channels and N/P/Q type Ca channels, which we show are modulated by very many agonists and at least two types of mechanism in sympathetic ganglion cells. We seek to understand the molecular mechanisms in terms of specific G proteins and second messengers. At least one fast mechanism accounts for presynaptic inhibition at varicosities and synapses. Beyond our research, I will amplify on roles of GPCRs in the nervous system, arguing that they differ very much from fast ligand-gated receptors in their significance and underlie mood, arousal, psychiatric disorders, effects of drugs of abuse, and other major changes of mental state. CM-03 CM-04 AMINOÁCIDOS Y EDEMA CEREBRAL: RELEVANCIA Y MECANISMOS. Pasantes, H. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. México. CENTRAL NERVOUS SYSTEM PLASTICITY AND THE NEUROPATHIC STATE. Frank Porreca. Department of Pharmacology, University of Arizona Health Sciences Center. El edema celular cerebral es una condición de alto riesgo para la función nerviosa y para el propio individuo. El edema se genera en cualquier situación de hiponatremia, o en condiciones isosmóticas, asociado a patologías como encefalopatía hepática, isquemia, insuficiencia cardíaca o renal y muy comúnmente en los traumatismos craneoencefálicos. En hiponatremia, las células nerviosas tienen la capacidad de contrarrestar el edema mediante la expulsión, seguida de agua, de solutos osmóticamente activos particularmente K+ y Cl-, así como moléculas orgánicas incluyendo los aminoácidos. En el edema hiposmótico nuestra investigación se enfoca en los siguientes aspectos: 1. la identidad molecular de las vías de translocacion de los aminoácidos 2. las señales de transducción del cambio en volumen hacia la activación de estas vías.3. la identificación del sensor del volumen y 4. los riesgos de la movilización de osmolitos que funcionan también como transmisores sinápticos. En el edema isosmótico, que ocurre en general por un cambio en la distribución iónica, particularmente con acumulación de Na+, K+ y la entrada de Cl- y agua, hemos encontrado que la capacidad de la células para corregir el volumen es limitada, seguramente por la imposibilidad de movilizar estos iones como parte de la estrategia de regulación. Nuestro interés en estas condiciones es la caracterización de los mecanismos de entrada de Cl-, lo cuál llevaría a prevenir el edema. SIMPOSIA S-01 S-02 FISIOPATOLOGIA DE LA DIABETES TIPO 2. AVANCES Y PERSPECTIVAS. Clicerio González Villalpando FACP. Director Centro de Estudios en Diabetes. IMSS. México. FISIOLOGÍA DE LA SECRECIÓN DE INSULINA. Hiriart M, Vidaltamayo R.*, Sánchez Soto C.*, González-Martínez T*, Navarro V*, Aguayo C*, Arellanes-Licea E*, Sánchez-Durán A*, Rosenbaum T*. Depto. de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM Los avances que se han logrado en la última década han dejado claro que la diabetes tipo 2 es un síndrome complejo que tiene una patogenia múltiple en donde coexisten elementos que señalan resistencia a la insulina así como otros que apuntan a la deficiencia en la secreción de la misma por la célula beta. Todo parece indicar que al inicio del proceso predominan lo factores de resistencia y hacia el final de la historia natural del síndrome los elementos que resultan del agotamiento pancreático son los que dominan el cuadro clínico. Por otro lado aun no ha sido posible dilucidar el mecanismo por el cual el llamado síndrome metabólico o síndrome de resistencia a la insulina determina la ocurrencia de hipertensión, dislipidemia con aterogénesis acelerada y disminución en la tolerancia a la glucosa con el desarrollo final de diabetes clínica. Se acepta que deben existir factores genéticos, sin embargo a pesar de grandes esfuerzos aun no se ha podido identificar un gen que explique un porcentaje significativo de la varianza de diabetes . Esto no debe de sugerir que no lo hay sino que probablemente estemos ante un síndrome que resulta de la interacción poligénica . Mas aun, se ha demostrado que es muy importante la participación de factores medio ambientales y de estilo de vida en la aparición de la diabetes. Estos conocimientos básicos han podido ser ahora aplicados al cuidado de enfermos con diabetes así como han podido ser puestos al servicio de el medico para que implemente estrategias exitosas de prevención de diabetes , Los estudios ahora clásicos como el United Kingdom Diabetes Study (UKPDS) así como el Diabetes Prevention Program (DPP) son pilares en la practica clínica de la diabetes. El primero demostró la inexorable tendencia al deterioro de la capacidad secretoria del páncreas que al ser eventualmente incapaz de producir la insulina que se requiere para mantener la homeostasis de la glucosa, exige con el tiempo el uso de mas y mas potentes hipoglucemiantes, al punto de requerir finalmente insulina para poder aspirar a mantener niveles razonablemente aceptables de glucemia. Esta investigación reveló cuan difícil es lograr y mantener niveles óptimos de glucosa y al mismo tiempo demostró cuan importante y determinante es el nivel de glucemia prevalente en la aparición y desarrollo de las complicaciones vasculares asociadas al descontrol de la diabetes. La posibilidad de prevenir diabetes fue investigada por otros grupos de científicos en China y en Finlandia quienes concluyeron que en efecto si es posible hacerlo ,la investigación mas ambiciosa y concluyente fue la que resultó del DPP que de manera categórica evidenció que si es posible prevenir y/o retardar la aparición de la diabetes mediante el incremento en la actividad física ,la baja de peso y el uso de metformina. Esto es un argumento que se encuentra ahora en el terreno de la necesidad de implementar esta estrategia en el contexto de la realidad clínica y practicar así medicina basada en evidencia . Las acciones de la insulina son importantes para mantener la homeostasis de la glucosa. El estimulante más potente de la secreción de insulina es la glucosa, que entra a la célula β por difusión facilitada y es metabolizada dentro de la célula, proceso en el que se genera ATP. El cambio en la relación ATP/ADP produce el cierre de un canal de potasio sensible a ATP (KATP), lo cual causa que la membrana se despolarice y que se abran canales de sodio y de calcio. La entrada de calcio a la célula promueve la exocitosis de los gránulos de insulina. La secreción de insulina en respuesta a la glucosa es regulada por hormonas y neurotransmisores. Recientemente la posible regulación auto y paracrina de la secreción de insulina ha adquirido importancia y con ella el papel que juegan algunos factores de crecimiento. Nosotros estamos interesados en la regulación de la secreción de insulina por el factor de crecimiento neuronal (NGF). Las células β tienen en la membrana receptores de alta afinidad a NGF y además producen y secretan NGF en respuesta al aumento en la concentración extracelular de glucosa. Entre las respuestas al NGF de las células β de rata aisladas en cultivo, estudiada en distintas etapas del desarrollo, hemos encontrado que aumenta la secreción de insulina tanto en una concentración extracelular de glucosa basal (5.6 mM), como en una estimuladora (15.6 mM). Este aumento puede ser explicado, al menos parcialmente porque el NGF incrementa la densidad de canales de sodio, así como la corriente a través de canales de calcio tipo L. Lo anterior sugiere que el NGF tiene acciones autocrinas dentro del islote pancreático, y es también posible que el NGF pancreático tenga efectos endocrinos que podrían ser relevantes durante la patogénesis de la diabetes mellitus, en donde los niveles circulantes de NGF se encuentran disminuidos. Este trabajo ha sido apoyado por DGAPA-UNAM 211800 y Conacyt 31740. S-04 S-03 + CANALES DE K SENSIBLES AL ATP: ¿QUE PAPEL JUEGAN EN LA REGULACIÓN DE LA SECRECIÓN DE INSULINA? Lydia AguilarBryan†, Alvaro Muñoz‡, Mitsuhiro Nakazaki*, Susanne Ullrich**, Andrey Babenko†, Ana Crane†, Tina Hahn†, Min Hu† y Joseph Bryan†. †Baylor College of Medicine, Houston, TX, EUA; ‡Inst. de Fisiología Celular, UNAM, México; *Univ. de Kagoshima, Japon y **Univ. de Colonia, Alemania. Los canales de potasio sensibles al ATP (canales KATP), acoplan el metabolismo celular con la actividad eléctrica de la membrana plasmática. Los canales KATP están formados por una combinación única de rectificadores entrantes (KIR6.1 o KIR6.2) y de receptores para sulfonilureas (SUR1 o SUR2). Los últimos son miembros de la familia de proteínas ABC y fungen como reguladores del canal. Las subunidades SUR1 y KIR6.2 forman los canales KATP en las células β del páncreas, donde participan importantemente en la regulación de la secreción de insulina. En estas células, concentraciones bajas de glucosa favorecen la apertura de canales KATP, inhibiendo la secreción hormonal al mantener el potencial de membrana (Vm) por abajo del umbral de activación para canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV). Los resultados actuales indican que el ATP inhibe canales formados con KIR6.1 o KIR6.2 a través de un sitio de unión presente en el rectificador, mientras que el MgADP estimula su actividad a través de los SURs. Cuando la glucosa sube por arriba de 5.5 mM, los niveles de MgADP bajan y reducen la acción estimulatoria del SUR1 sobre el KIR6.2, el Vm supera el umbral de activación para los CCDV, aumenta la [Ca2+]i y se genera así, la primera fase de secreción de insulina. El mecanismo por el que las sulfonilureas estimulan este proceso es básicamente el mismo; mientras que compuestos que inhiben la secreción de insulina, como el diazóxido, aumentan la probabilidad de apertura de los canales KATP a través del SUR. La pérdida de la función de este canal, causada por mutaciones en Sur1 o KIR6.2, produce formas dominantes y recesivas de hipoglucemia secundaria a hiperinsulinemia en el periodo neonatal. Esta enfermedad se caracteriza por la presencia de niveles muy bajos de glucosa en paralelo con niveles elevados de insulina en sangre. Esta plática cubrirá aspectos fisiológicos y moleculares de los canales KATP, así como su papel en la regulación de la secreción de insulina. LAS CONEXINAS Y SU PAPEL EN LA REGULACION DE LA SECRECIÓN DE INSULINA. E. Martha Pérez-Armendariz, UNISSER, Departamento de Medicina Experimental, Facultad de Medicina, UNAM. La secreción de insulina inducida por glucosa de un islote aislado de ratón es pulsátil y ocurren en fase con las oscilaciones en la actividad eléctrica y de [Ca2+]i de todas sus células beta (Cβ) (≈3/min, 11 mM). Ambas propiedades se deprimen cuando las células son disociadas. De ahí que es importante el estudiar los mecanismos de comunicación intercelular involucrados en estos procesos. Uno de éstos mecanismos es la comunicación directa a través de uniones comunicantes (UC). Las UC son placas de conglomerados de canales intercelulares formados por una familia homologa de proteínas denominadas conexinas (Cx). Las propiedades funcionales de los canales intercelulares homo y heteromericos dependen de su identidad molecular. Se sabe que entre las Cβ existen UC diminutas y que los cambios en la secreción de insulina se asocian con cambios en las UC. En la década pasada se propuso que los canales formados con la Cx43 coordinaban la alta sincronía funcional de las Cβ en base a: 1) La identificación del transcrito y la proteína de la Cx43 en preparaciones de Cβ, y 2) La regulación del transcrito del gen de insulina en una línea de Cβ deficientemente acoplada secundaria a su transfección con la Cx43. Nosotros cuestionamos esta hipótesis, ya que las corrientes de unión que registramos entre pares aislados de Cβ recién disociadas sometidas a doble fijación de voltaje no presentaron las propiedades biofísicas características reportadas para canales de unión formados con la Cx43. Por lo anterior, propusimos que las Cβ debían expresar al menos otro tipo de conexina. Estudios posteriores han favorecido nuestro postulado, ya que los islotes de ratones knock-out (KO) para la Cx43 no presentan alteraciones en su desarrollo y contenido de insulina y las UC entre sus Cβ son morfológicamente semejantes a las de los animales silvestres. Además, el transcrito de la Cx45 y la proteína de la Cx36, recientemente clonadas, también han sido identificadas en preparaciones de Cβ. La relevancia de precisar la identidad molecular de los canales que intercomunican a éstas células se ha redoblado, ya que el cambio sostenido en el radio de acoplamiento intercelular en las Cβ, inducido por la expresión dirigida de una conexina exógena (Cx32), se ha encontrado que es capaz de regular los niveles de insulina y glucosa sanguínea. Estudios en curso en nuestro laboratorio utilizando islotes de ratones silvestres y KO para las conexinas identificadas en las Cβ están dirigidos a precisar este aspecto. S-05 S-06 ¿CUÁL ES EL FUTURO DE LA FISIOLOGÍA EN LA ERA GENÓMICA?. Aréchiga, H. División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM, México, D. F., 04510. DARWIN, LOS MÉDICOS Y LOS FISIÓLOGOS. Marcelino Cereijido. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, D.F. Con el espectacular desarrollo de la biología molecular y la biotecnología, se ha fortalecido el paradigma molecular de la biología y de la medicina. Se aspira a explicar a nivel genómico, tanto los fenómenos fundamentales de la vida, como los propios de la salud y la enfermedad, orientando hacia esa perspectiva, las nuevas posibilidades de diagnóstico y terapéutica médicas. Pareciera entonces, que las disciplinas integrativas han perdido vigencia y futuro. Los fondos para realizar la investigación científica, y la demanda de acceso a programas de posgrado gravitan cada vez más hacia las disciplinas moleculares, con grave desaliento en el campo integrativo. El fenómeno no es nuevo. La antigua fisiología, hace medio siglo, pareción también quedar relegada ante los avances imponentes de la bioquímica y la biofísica. Sin embargo, ha logrado incorporar los adelantos en estas disciplinas, en la construcción de modelos explicativos más profundos y de mayor alcance sobre el funcionamiento de los seres vivos. Las preguntas y los conceptos fundamentales de la fisiología, que antaño se planteaban a nivel de órganos y sistemas, ahora se formulan en términos de interacciones celulares y moleculares. La homeostasis, que fue la piedra angular de la fisiología del siglo XX, ahora debe concebirse en términos más precisos de interacciones moleculares. Conforme avance la corriente analítica, de identificación de nuevos componentes en el genoma y el proteoma, habrá de realizarse la incorporación del conocimiento sobre ellos, en nuevos modelos integrativos que permitan avanzar en el conocimiento de la vida y de los rasgos fundamentales de la salud y la enfermedad. Tal es el reto actual a las ciencias fisiológicas. En este simposio se discutirán algunos de estos temas; se presentará una estimación de la potencialidad actual de las disciplinas integrativas, seguida de una exposición de la medicina molecular, enmarcada en el contexto de la teoría de la evolución y de sendos análisis sobre el papel de la fisiología en la práctica clínica en los tiempos por venir, y de la forma en que estos nuevos escenarios afectan a la enseñanza de la fisiología. Esperamos así, traer al seno de la Sociedad Mexicana de Ciencias Fisiológicas, un debate que se está dando en muchos otros países y al que el nuestro no puede ser ajeno. La medicina diagnostica a través de síndromes (conjuntos de signos y síntomas) que caracterizan las diversas enfermedades, y luego los cura. “Esto para la tos, esto para la fiebre, esto para la anemia...”. La Medicina Darwiniana en cambio, advierte que, para que podamos toser, debemos estar equipados con un complejo reflejo tusígeno cuyos nervios, centros y receptores se construyen gracias a genes largamente seleccionados. Análogamente, una tuberculosis no nos causaría anemia ni fiebre, a no ser porque nuestro organismo baja la absorción de Fe3+ en el intestino, retira moléculas de transferrina y pone y enciende genes que nos elevan la temperatura. La MD se pregunta entonces “Este signo o este síntoma ¿es parte del ataque... o de la defensa?”. Luego, claro, las causas de un fenómeno biológico se dividen en próximas (¿cuáles son los mecanismos de la tos, la fiebre y la anemia?) y en remotas (¿por qué tenemos genes “para” toser, tener fiebre y anemizarnos?). Las respuestas a estas preguntas están causando una de las revoluciones médicas más importantes de toda su historia, y abriendo nuevos horizontes a la docencia y a la investigación en Fisiología. S-07 S-08 EL RESCATE DE LA FISIOLOGÍA INTEGRATIVA. Beyer, Carlos. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. Ixtacuixtla, Tlax. LA FISIOLOGÍA EN EL FUTURO DE LA MEDICINA. Dr. Gregorio Pérez-Palacios. Unidad de Investigación, Enseñanza y Comunicación en Salud Reproductiva, Facultad de Medicina, UNAM/Hospital General de México. El desarrollo de instrumentos y métodos científicos con gran capacidad analítica ha permitido estudiar procesos celulares y moleculares inabordables con las metodologías tradicionales de la fisiología. Algunos de los resultados de este enfoque, como el proyecto del genoma humano, han tenido un gran impacto social y son objeto de una intensa mercadotecnia que afecta a la misma comunidad científica. Por otra parte, la aparición de corrientes de opinión que cuestionan el uso de animales vivos en la experimentación ha canalizado la investigación biomédica hacia el estudio de procesos celulares y moleculares, marginando la relevancia de los estudios en animales íntegros ó en órganos “in situ”. Una de las ideas en que se apoya esta tendencia, es que los resultados en animales íntegros, en contraste con los obtenidos a nivel celular o molecular, son difíciles de extender a procesos generales, lo cual restringe sus conclusiones a un rango limitado de procesos. En esta plática revisaré algunos avances tanto en la metodología científica como en el pensamiento biológico que han contribuido a un reconocimiento del enfoque integrativo, que parece ser el más prometedor para entender procesos complejos como la cognición y los estados afectivos. Por otra parte, presentaré algunos ejemplos en los que estudios en el animal íntegro (e.g., la conducta sexual de la rata hembra) han permitido derivar modelos para entender proceso celulares de orden general, incluyendo la regulación del crecimiento de células cancerosas. Finalmente, presentaré lo que considero ventajas relativas de los biólogos mexicanos para abordar exitosamente el estudio de procesos integrativos en un contexto internacional. El análisis de la secuencia completa de nucleótidos de genes humanos, la caracterización de cientos de péptidos y proteínas en tejidos y fluidos biológicos, así como el descubrimiento de millones de variantes en el genoma humano ofrecen una espléndida posibilidad, sin precedentes para elucidar las bases genéticas de enfermedades de naturaleza muy compleja e identificar la respuesta individual a la acción de fármacos. El uso de las células troncales, sobre todo las embrionarias permitirá profundizar en el conocimiento de enfermedades degenerativas y facilitará las técnicas de reemplazo celular y de transplantes de órganos. Sin embargo, el significado e incorporación de la Genómica, Proteómica, Farmacogenómica y las nuevas técnicas de Clonación a la Medicina dependerá de la información que estas nuevas disciplinas aporten y de su evaluación integrativa en organismos vivos, utilizando estrategias experimentales de la fisiología, bioquímica y farmacología contemporáneas. Se revisarán algunos ejemplos que claramente señalan el papel esencial de la Fisiología en el devenir de las Ciencias Médicas. S-09 S-10 LA ENSEÑANZA DE LA FISIOLOGÍA EN LA ERA GENÓMICA. Gijón, E. y Farías, J. M. Departamento de Fisiología. Facultad de Medicina. UNAM. Ap. P. 70-250. México, D.F. 04510. EL CONTROL DE LA PROLIFERACIÓN, DIFERENCIACIÓN Y MUERTE DE CÉLULAS TRONCALES NEURALES. Luis Covarrubias, Jesús Santa-Olalla, José Manuel Baizabal, Mariana Fregoso, y Ma. Del Carmen Cárdenas. Departamento de Genética y Fisiología Molecular. Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México, Apartado postal 510-3, Cuernavaca Morelos 62250, México. La fisiología no puede permanecer aislada de la corriente científica mundial, así el pensamiento fisiológico dirige y orienta la investigación médica y quirúrgica y los progresos en los últimos años derivan de la acción de este pensamiento. Hay que reducir la brecha que divide a la fisiología integrativa u holista de la fisiología molecular o reduccionista. La era genómica es motivo de recelo para la primera y de euforia para la segunda, esto se pone de manifiesto en la orientación de la enseñanza de la fisiología, en la primera se guarda silencio como si no existiera este tema, en cambio para la segunda, el proyecto del proteoma desmedidamente se equipara con la comprensión de casi la totalidad de la función. La fisiología se ocupa del sistema nervioso, endocrino digestivo, cardiovascular, respiratorio y renal, y lleva al estudio de la conducta del ser humano íntegro. Los genes contribuyen a la conducta y los genes codifican las proteínas para el desarrollo, el mantenimiento y la regulación de circuitos neurales que determinan la conducta. La mutación de un gen puede producir defectos motores y cognitivos y otras alteraciones complejas se consideran poligénicas. El estudio en el laboratorio de enseñanza, al navegar por genotecas, permite identificar canales iónicos y su variabilidad normal. Los estudios en animales transgénicos, permiten conocer la ausencia de una función por falta de una proteína que determina una función. Esto es el presente, ¿cuál será el futuro?, empieza a desarrollarse una fisiología molecular como parte de la expresión genómica y proteómica. La función puede estudiarse como expresión genómica inducida que se enciende con un estímulo o se apaga en ausencia del estímulo. Podremos tner fisiología genómica, fisiopatología genómica y terapia génica. Es necesaria la actualización continua del programa de enseñanza de la fisiología y de la planta docente. Recientemente se ha logrado propagar células precursores neurales (CPNs) en cultivo lo que está permitiendo su rápida caracterización in vitro e in vivo. Es muy posible que dentro de ésta población precursora se encuentren las células troncales neurales (CTN) que serían las progenitoras de todas la células del sistema nervioso central (SNC), y las que pudieran permitir la regeneración de este tejido en el organismo adulto. Las CTNs y sus derivados celulares diferenciados (neuronas, astrocitos y oligodendrocitos) pudieran ser útiles en terapias por transplante, pero cualquier intento serio en este sentido requerirá determinar cuales son las señales que regulan su proliferación, diferenciación y muerte. Durante el desarrollo del mesencéfalo hemos identificado en cultivo dos tipos de NPCs, la más temprana responde a FGF-2 e induce la formación de una segunda población de NPCs que prolifera en respuesta a EGF. Estas dos poblaciones se pueden identificar a lo largo de todo el eje antero-posterior y dorso-ventral del SNC, lo que pudiera significar que un tipo de CTN puede formar todos los tipos celulares. Es de esperarse que las CTNs in vivo tenga una identidad específica de acuerdo a su posición en el embrión, sin embargo, esta identidad no se preserva cuando las CTNs son cultivadas in vitro lo que puede tener importantes consecuencias en su potencial diferenciativo. Las CTNs de mesencéfalo pueden diferenciar in vitro al fenotipo dopaminergico pero el proceso ocurre en forma azarosa, enfatizando que otros factores son necesarios para guiar la diferenciación específica. El factor ventralizante Sonic Hedgehog ha mostrado ser un potente inductor del fenotipo dopaminergico, pero las CTNs del mesencéfalo responden débilmente a este factor. FGF-2 y el factor antiapoptótico bcl-2 promueven la sobrevivencia de las CTNs, lo que puede ser relevante para las futuras aplicaciones terapéuticas de estas células. Recientemente hemos logrado la implantación de CPNs en mesencéfalos embrionarios donde se observa una eficiente diferenciación dopaminergica. Este tipo de sistemas experimentales permitirá evaluar el potencial diferenciativo de diferentes poblaciones de CPNs en ambientes naturales de diferenciación. Este trabajo fue apoyado por DGAPA/UNAM (IN210600) y CONACYT (31730-Ny 30717-M). S-11 S-12 COMPETENCIA ENTRE NEURITAS HERMANAS. Francisco Fernández de Miguel. Departamento de Biofísica, instituto de Fisiología Celular, UNAM. SINAPTOGÉNESIS PROGRESIVA EN LA CORTEZA SOMATOSENSORIAL PRIMARIA DE LA RATA EN DESARROLLO. Gutiérrez-Ospina G., Medina-Aguirre I., Sánchez-Avendaño N., Hernández, L., Uribe-Querol, E. Dept. de Biología Celular y Fisiología, IIBM, UNAM, México D.F., 04510. Durante el desarrollo y la regeneración del sistema nervioso, la proliferación inicial excesiva de neuritas es seguida por la retracción de algunas de ellas. En este trabajo estudiamos la dinámica de la competencia en neuronas centrales de sanguijuela en cultivo, ya que a pesar de ser adultas, regeneran neuritas de manera dependiente del sustrato. Las neuronas Pagoda Anterior sembradas en matriz extracelular nativa producen un patrón de crecimiento bipolar con dos neuritas primarias orientadas en direcciones opuestas, y algunas ramificaciones. Este patrón es completamente distinto al que producen en laminina o en concanavalina A, en donde crecen profusamente, pero es muy similar al que forman en el día 9 del desarrollo embrionario, lo que sugiere que la compentencia neurítica depende del sustrato. La formación del patrón de crecimiento bipolar comienza con la emisión de una neurita temprana que se ramifica. La rama más proximal migra retrógradamante hacia el muñón, gira y se independiza de la madre, formando la neurita primaria contralateral. En la tercera etapa, el crecimiento de las neuritas primarias se sincróniza con la retracción de las ramas secundarias, en un claro fenómeno de competencia. La reproduccón cuantitativa del patrón bipolar en homogenados del sistema nervioso central permitió identificar glicoproteinas inhibidoras del crecimiento en la matriz extracelular, que al ser bloqueadas permiten el crecimiento profuso de neuritas. Esta propiedad las hace candidatos para inducir la competencia neurítica mediante la inhibición de la síntesis de precursores estructurales. Financiado por Human Frontiers Science Program, CONACYT y DGAPA. Tradicionalmente se ha considerado que el patrón maduro de conexiones en el cerebro adulto emerge como el resultado de la eliminación de una fracción importante de los contactos que se establecen inicialmente entre las neuronas en desarrollo. En años recientes, sin embargo, esta visión “regresionista” del desarrollo neural ha empezado a ser modificada con base en evidencia experimental que muestra que los axones, en distintas regiones del cerebro, parecen establecer contactos de manera selectiva y progresiva a lo largo del desarrollo postnatal. En nuestra presentación, discutiremos evidencia obtenida en el laboratorio que apoya que en la corteza somatosensorial de la rata en desarrollo, las aferentes tálamo-corticales y las dendritas de las neuronas corticales incrementan su complejidad durante la fase de formación de sinapsis. También mostraremos evidencia histológica que sugiere que el número de terminales, así como de sitios blanco postsinápticos, incrementan con la edad en esta región del cerebro de la rata. Estos hallazgos en conjunto apoyan que el número de sinapsis aumenta progresivamente conforme el cerebro madura. Finalmente, mostraremos datos obtenidos en ratones transgénicos que apoyan que la elaboración progresiva de circuiteria cerebral durante el desarrollo postnatal en parte depende, y puede ser promovida, por la presencia de factores de crecimiento. En resumen, parece que en algunas áreas del cerebro los circuitos neuronales se ensamblan de forma progresiva dependiendo de la disponibilidad de factores neurotróficos. Este trabajo ha sido apoyado por CONACYT 38615N y J28035N. IMA, NSA y EUQ son becarios de CONACyT S-13 S-14 CONTROL MOLECULAR DE LA PROYECCIÓN DOPAMINÉRGICA NIGROESTRIATAL DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO. Hebert L. Hernández Montiel, Carmen Mejía Viggiano y Alfredo Varela Echavarría. Instituto de Neurobiología, UNAM, Querétaro, Qro. MUERTE NEURONAL Y FACTORES TROFICOS EN EL DESARROLLO DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. Julio Morán. Instituto de Fisiología Celular, Universidad Nacional Autónoma de México, México, D.F. Las neuronas dopaminérgicas mesencefálicas (NDMs) se originan en la placa basal de la vesícula mesencefálica como resultado de señales inductoras que involucran a la placa del piso y a la constricción ístmica. Subsecuentemente, los axones de estas neuronas navegan en dirección dorsal manteniéndose en la placa basal y viran rostralmene para proyectar hasta la región rostral del diencéfalo de la que se origina el estriado (prosómera 3, p3). En experimentos con cultivos de explantes de distintas regiones del neuroepitelio embrionario hemos determinado que la región del diencéfalo adyacente y rostral al mesencéfalo (p1) ejerce quimioatracción a distancia de las NDMs mientras que una región más rostral, p3, tiene un effecto inhibitorio de corto alcance. Hibridación in situ y cultivos con agregados de células transfectadas con vectores de expresión para diversas moléculas guía indican que las semaforinas secretadas 3C y 3F están involucradas en la señalización por p1 y sugieren que las slit1 y 2 controlan otros aspectos de la proyección nigroestriatal incluyendo la repulsión a corta distancia. Estos resultados permitirán explicar la proyección nigroestriatal normal durante el desarrollo embrionario y contribuirán al desarrollo de mejores protocolos de transplante de neuronas dopaminérgicas en modelos de enfermedad de Parkinson. La muerte neuronal puede resultar de una variedad de condiciones patológicas, pero también ocurre de manera fisiológica y programada durante ciertos períodos del desarrollo. Durante la maduración del Sistema Nervioso muchas neuronas mueren como resultado de la competencia con otras neuronas por las células blanco y/o un aporte insuficiente de entradas presinápticas y factores tróficos. En el cerebelo, casi la mitad de neuronas granulares mueren durante este proceso en un período de tiempo muy corto. La muerte de estas células parece ser de tipo apoptótico, lo que contribuye fundamentalmente a evitar alteraciones en el entorno de las neuronas destinadas a sobrevivir y conformar el cerebro maduro. Las señales que regulan la muerte y supervivencia neuronal durante el desarrollo se empiezan a conocer. Entre los eventos celulares involucrados en este tipo de muerte se incluye: 1) alteración en la homeostasis de calcio; 2) generación de especies de oxígeno reactivas (EOR); 3) alteración mitocondrial y 4) activación de una cascada de proteasas llamadas caspasas. Las neuronas cerebelares inmaduras requieren niveles relativamente altos de calcio intracelular para sobrevivir en etapas críticas del desarrollo. Cuando estos niveles de calcio se reducen por insuficiencia en la influencia de factores extracelulares, las neuronas sufren un incremento de EOR y la activación de caspasas muriendo apoptóticamente. Por otro lado, en las neuronas maduras los niveles elevados de calcio pueden generar también un incremento de EOR y muerte neuronal de forma necrótica o apoptótica. Así, los programas intracelulares parecen estar controlados por influencias tróficas particulares como factores tróficos clásicos como el BDNF y/o señales presinápticas como ciertos neurotransmisores clásicos. Apoyado por Conacyt (36235-N) y DGAPA-UNAM (IN203400) S-15 S-16 SEÑALIZACIÓN SEROTONÉRGICA EN LA FORMACIÓN DE LA CORTEZA CEREBRAL. Jorge Hernández-Rodríguez. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAVIPN, México. LA PROTEÍNA DE LA UNIÓN ESTRECHA ZO-2, FUNCIONA TANTO EN LAS UNIONES INTERCELULARES COMO EN EL NÚCLEO. González-Mariscal, L., Betanzos, A.∗, Huerta. G.M.∗, LópezBayghen, E.∗, Jaramillo, B.∗, Ponce, A.∗, Islas S∗. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV, México, D.F. El sistema serotonérgico ha sido identificado tempranamente en embriones de rata (E11-12). En nuestro laboratorio hemos reunido evidencias de la importancia del sistema serotonérgico durante el desarrollo cerebral. Por una parte, la presencia de receptores acoplados metabotrópicamente, desde el nacimiento. Así como receptores del tipo 5-HT1A y 5-HT1B, presentes en conos de crecimiento axonal desde E17. Otro sistema de receptores están también presentes desde la etapa fetal. Dado que la 5-HT tiene claramente un papel funcional en el SNC en desarrollo como factor trófico, ha sido importante determinar las estructuras cerebrales bajo su influencia y los sistemas de señalización transcelular involucrados. El abordaje experimental se ha hecho en tres modelos: 1) Fracciones de conos de crecimiento axonal aislados del cerebro fetal (E17) y posnatal (P5); 2) Tejido cerebral cortical proveniente de cerebro fetal (E17 a P10); 3) Cultivos organotípicos heterocrónicos del Raphé fetal (E17) y del neopalio (E13), así como de núcleos talámicos (E13). Los resultados obtenidos con estos modelos experimentales se presentarán como un modelo integral en relación a la formación normal y anormal de la corteza sensorial. La proteína ZO-2 es una molécula de 160 kDa, miembro de la familia MAGUK, que forma parte del complejo submembranal de la Unión Estrecha (UE). Allí se asocia mediante sus repetido PDZ a las proteínas transmembranales claudinas y JAM y a través de su región GK se une a la proteína occludina. ZO-2 también se une en la región de la UE a la actina y a las proteínas 4.1 y ZO-1. Nosotros hemos encontrado que en la condición de subconfluencia las células epiteliales MDCK expresan de manera conspicua a ZO-2 en el núcleo. La secuencia de ZO-2 tiene 3 señales putativas de localización nuclear (NLS) y 2 de exportación (NES) . Hemos observado que solo la NES-2 y no la NES-1 es funcional para exportar proteínas del núcleo. ZO-2 en el núcleo se encuentra fuertemente fosforilada en sitios consensos para la PKC y está asociada a la matriz nuclear. Por estudios de co-inmunoprecipitación, arrastre, co-localización y ensayos de deseplazamiento de bandas encontramos que ZO-2 se asocia tanto en las UEs como en el núcleo con los factores de transcripción Jun, Fos y C/EBP. Cuando las células epiteliales se transfectan con el cDNA de ZO-2 disminuye de manera dosis dependiente la expresión del gen reportero CAT bajo el control del promotor AP-1. Por lo tanto concluimos que ZO-2 es una proteína que se mueve entre la UE y el núcleo, y que en este último es capaz de regular la expresión génica por su asociación a factores de transcripción. S-17 S-18 TRANSPORTE NUCLEAR DE LA DISTROFINA Dp71. Bulmaro Cisneros. Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV-IPN- LOCALIZACION DE ISOFORMAS Dp71d Y DP71F Y PROTEINAS ASOCIADAS (DAPs) EN SUBESTRUCTURAS NUCLEARES DE NEURONAS. Martínez, R.D. y Alemán, A.V. Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias CINVESTAV, IPN. A.P. 14-740, México, D.F. 07000. La Dp71 es el producto del gen de la distrofia muscular de Duchenne (DMD) más abundante en el cerebro por lo que se le ha implicado en el retraso mental que presenta el 30% de los pacientes con DMD, no obstante, su función en células neuronales permanece desconocida. Anteriormente se asumía que la Dp71 se localizaba en la membrana interaccionando con el complejo de proteínas que se asocian a las distrofinas, sin embargo, recientemente demostramos que el “splicing” alternativo de la Dp71 determina su localización subcelular. La variante que carece del dominio codificado por el exon 78 se ubica en la parte interna de la membrana celular, pero, la isoforma que si presenta este dominio se localiza en el núcleo. Estos datos ofrecen una nueva perspectiva en el estudio de la función de la Dp71 por lo que es importante estudiar la regulación de su transporte nuclear. Generalmente, el transporte nuclear de proteínas requiere energía, una señal de localización nuclear (NLS) y las importinas alfa y beta. El transporte inicia cuando la NLS de la proteína cargo es reconocida por la importina alfa, posteriormente, la importina beta se une a este complejo y lo dirige hacia el poro nuclear para que ingrese al interior del núcleo. Con base en lo anterior, hemos llevado a cabo el mapeo de la NLS de la Dp71, mediante la construcción de fusiones entre diferentes dominios de la Dp71 y la proteína reportera GFP. Las fusiones se transfectaron a células HeLa y mediante ensayos de microscopia confocal se analizó la distribución subcelular de las proteínas híbridas. Asimismo, empleando proteínas producidas en bacteria, hemos realizado estudios de interacción in vitro para determinar si la Dp71 se une a las importinas alfa y beta para su transporte al núcleo. En este contexto discutiremos la relevancia de nuestros resultados y la posible función nuclear de la Dp71. Previamente, encontramos dos isoformas de distrofinas cortas (Dp71) en fracciones subcelulares de cerebro, y en neuronas diferenciadas de hipocampo en cultivo, ellas se localizaron en estructuras nucleares como speckles. Por las funciones regulatorias nucleares que las Dp71 pudieran tener, el propósito de este estudio fue precisar su localización intranuclear y caracterizar los complejos de proteinas asociadas a distrofina (DAPC). Con anticuerpos específicos, por Western-blotting se determinaron las Dp71s y las DAPs en fracciones subnucleares, y por microscopía confocal en neuronas en cultivo y en matrices nucleares. Los complejos (DAPC) de ambas Dp71 se encontraron enriquecidos en la matriz nuclear y el complejo correspondiente a Dp71d también se detectó en la cromatina. Por microscopía confocal se comprobó la colocalización de ambos DAPC (distrobrevinas, sintrofinas, βdistroglicano) con las Dp71s y con proteinas marcadoras de matriz nuclear. En conclusión Dp71d y Dp71f forman complejos proteínicos diferentes que se encuentran localizados en la matriz nuclear, en estructuras similares a speckles lo que sugiere que las Dp71s podrían tener una función regulatoria del procesamiento del pre mRNA. S-19 S-20 LA PROENCEFALINA ADEMAS DE SER UN PRECURSOR DE NEUROPEPTIDOS ES UNA PROTEINA NUCLEOLAR QUE SE UNE AL ADN Y QUE INDUCE LA PROLIFERACIÓN CELULAR. Vindrola, O. Rosete M.*, Terán L.*, Bazan M.L.*, Bautista D.*, Durán S.*, Velázquez I.*, López C.* y Padrós M. R. Laboratorio de Bioquímica Celular. Instituto de Fisiología. Universidad Autónoma de Puebla. LOS RECEPTORES GLUTAMATERGICOS COMO TRANSDUCTORES DE SEÑALES DE LA MEMBRANA PLASMATICA AL NUCLEO. Ortega, A. Departamento de Genética y Biología Molecular, Cinvestav-IPN. Apartado Postal 14-740, México DF. La proencefalina es una de las proteínas precursoras de la familia de los péptidos opioides, y en el cerebro de mamíferos adultos se procesa para producir las encefalinas. Sin embargo, en tejidos con capacidad altamente proliferativa, a pesar de existir elevados niveles del ARNm de la proencefalina y del precursor, éste no se procesa a péptidos de bajo peso molecular. Una de las causas de esta aparente paradoja es que la proencefalina en lugar de ingresar a la vía secretoria, viaja al núcleo. En el nucleoplasma aparece en forma de punteados fino y grueso, pero la mayor intensidad se alcanza en el nucleolo, donde co-localiza con la nucleolina. Esto fue corroborado al inhibir la transcripción con bajas y altas dosis de actinomicina D. Estos fenómenos los observamos en líneas celulares de origen mesenquimático, neuronal, hematopoyético, así como en núcleos de cerebro embrionario y tejidos tumorales. Los estudios bioquímicos demuestran que la proencefalina nuclear se encuentra unida a cromatina y/o a la matriz nuclear. Usando la técnica de super-retardamiento en gel la proencefalina nuclear se une específicamente a la región promotora de su propio gen. Al igual que otras proteínas nucleolares, su sobre-expresión induce un aumento en la proliferación de células mesenquimáticas, y más aún es capaz por si sola de desencadenar el ciclo celular. Los niveles más altos de expresión del gen de la proencefalina se alcanzan en la transición entre las fases G0-G1 del ciclo celular. La proencefalina es uno de los ejemplos donde por mecanismos alternativos de transcripción, posttranscripcionales y de traducción se pueden eliminar y/o incluir regiones en una proteína, modificando su localización intracelular y por ende su fisiología celular. Apoyado por proyectos CONACYT 31764-N y 37882-N El glutamato es el principal neurotransmisor excitador en el sistema nervioso central de los vertebrados y ejerce sus acciones al activar receptores membranales específicos. Además de provocar cambios en la permeabilidad membranal y en los niveles de algunos segundos mensajeros, la estimulación de los receptores glutamatérgicos regula la expresión genética tanto a nivel transcripcional como traduccional. Utilizando como modelo el promotor de la proteína que une kainato (KBP), hemos delineado la cascada de señalización empleada por los receptores tipo α-amino 3-hidroxi –5-metil-4-isoaxazolepropionato (AMPA)/KA permeables a Ca2+ que resulta en la regulación transcripcional de este promotor. La KBP pertenece a la superfamilia genética de los receptores AMPA/KA por lo que presenta la arquitectura molecular de los canales iónicos activados por ligando. No obstante, es incapaz de formar un receptor funcional. Experimentos recientes han demostrado que esta proteína, además de su localización membranal se encuentra en el espacio perinuclear. Este hecho, aunado a su capacidad de unir oligonucleótidos apoya la hipótesis de que el núcleo cuenta con sistema de señalización similar al de la membrana plasmática que muy probablemente se encuentra implicado en la fisiología nuclear. S-21 S-22 COMBINACIÓN DE FÁRMACOS: MODELOS TEÓRICOS. Salazar, L. Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV, México, D.F. COMBINACION DE FARMACOS: RESULTADOS EXPERIMENTALES. Francisco Javier López-Muñoz. Dpto. de Farmacobiología del CINVESTAV, México D.F. Las combinaciones de fármacos analgésicos generalmente han sido empleadas como alternativa terapéutica para el tratamiento del dolor. Las combinaciones más comunes de analgésicos son las de un opioide con un AAINE's. Es por esto que el propósito de esta ponencia es comparar los perfiles de antinocicepción y eficacia que produce un inhibidor selectivo de COX-2 como rofecoxib, inhibidores de COX no selectivos como dipirona y aspirina, en combinación cada uno de estos con el prototipo opioide: morfina. La determinación de efectos antinociceptivos se llevó a cabo empleando un modelo de artritis de tipo gota en rata, mientras que la determinación del tipo de sinergismo se hizo empleando un análisis de "Superficie de interacción sinérgica". Todas las combinaciones analizadas presentaron efectos aditivos o de potenciación. De 12 combinaciones diferentes analizadas de rofecoxib+morfina: 3 produjeron importantes efectos de potenciación y 9 efectos de suma. En el caso de metamizol+morfina, de 24 combinaciones diferentes, 11 produjeron efectos de potenciación y 13 de suma; y lo mismo ocurrió con 24 asociaciones de aspirina+morfina: 11 produjeron potenciación y 13 produjeron efectos de suma. Los compuestos AAINE's siempre fueron menos potentes que morfina, pero fueron equieficaces. Las asociaciones de máximo efecto antinociceptivo detectadas de cada par de analgésicos asociado presentaron mayor eficacia que los efectos mostrados por los analgésicos individuales, y la comparación entre estas asociaciones permitió detectar tendencias de mayor eficacia para la asociación del inhibidor selectivo con morfina que las de un inhibidor no selectivo con morfina. Lo que presenta a estas asociaciones como potencialmente útiles para el manejo del dolor y confirma su potencialidad terapéutica. S-23 S-24 OPIOID-INDUCED PARADOXICAL PAIN AND ANTINOCICEPTIVE TOLERANCE. Vanderah, T.W. Department of Pharmacology, University of Arizona, Health Sciences Center. Tucson Arizona. DOPAMINA: ANTIALGESIA CENTRAL NO OPIOIDE. Francisco Pellicer, Alberto López-Ávila, Ulises Coffeen. Rosendo del Ángel. Subdirección de Neurociencias, Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente, Facultad Mexicana de Medicina, Universidad La Salle, México. Pellicer@imp.edu.mx El área tegmental ventral (ATV) forma parte del sistema límbico y es una estructura relacionada con la modulación de la nocicepción. Las neuronas de este núcleo son principalmente dopaminérgicas y proyectan de manera directa a la corteza prefrontal medial por el haz medial del cerebro anterior. La estimulación eléctrica de esta área inhibe cerca del 73% de las neuronas de la corteza anterior del cíngulo que responden a estímulos nocivos. Se ha reportado que agonistas dopaminérgicos producen una disminución en las conductas antialgésicas asociadas a estímulos nocivos en modelos animales de nocicepción supraespinal. Con este marco quisimos investigar si la administración ip.de amantadina agonista dopaminérgico y antagonista NMDA es capaz de reducir el dolor crónico evaluado como la conducta de automutilación (CA). Se utilizaron ratas Wistar machos (250-350g). A todos los animales se les indujo un proceso inflamatorio doloroso mediante la inyección de carragenina intraplantar. Treinta minutos después, bajo anestesia se denervó el ciático ipsilateral. Grupo A (control n=14), inyectado ip. 1ml/kg de solución fisiológica. Los grupos B, C y D (n=10 c/u), se inyectaron con amantadina a dosis de 3, 30 y 90 mg/kg, ip. respectivamente. Grupo E (n=10) inyectado con 30mg/kg, ip. cada 7 días (6 dosis). Todos los grupos se inyectaron después de la denervación. Se registró la CA diariamente por 49 días, de acuerdo a la clasificación propuesta por Wall et al. 1979. Los resultados muestran que la amantadina disminuye significativamente la CA con respecto al control, excepto en el grupo B (3mg/kg). Esto sugiere, dada la naturaleza farmacológica de la amantadina, que los receptores NMDA y la dopamina se encuentran involucrados en la modulación del dolor crónico. Así mismo, la amantadina presenta una alternativa terapéutica para el dolor en pacientes con denervación, como el miembro fantasma doloroso y la avulsión del plexos nerviosos. Parcialmente financiado por CONACyT, FP 2869M.AL-A becario CONACyT, DGEP, UNAM. S-25 S-26 PARTICIPACIÓN DE LA PKC EN LA TOLERANCIA INDUCIDA POR MORFINA ESPINAL EN LA RATA. Vinicio Granados-Soto1, Iveta Kalcheva2, Xiao-Ying Hua2, Alexandra Newton2, Tony L. Yaksh2. 1 Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN, México, D.F.; 2 Department of Anesthesiology, UCSD, CA, USA. LA ORGANIZACIÓN DEL GENOMA EN DOMINIOS Y LA RELOCALIZACIÓN NUCLEAR. Félix Recillas Targa, Viviana Valadez Graham y Héctor Rincón Arano. Instituto de Fisiología Celular, UNAM, Departamento de Genética Molecular, Apartado Postal 70-242, México D.F. 04510. En este trabajo se evaluó la participación de la PKC espinal en el desarrollo de la tolerancia a morfina espinal. Las ratas con catéteres espinales conectados a bombas osmóticas recibieron una infusión continua de salina, celeritrina (3 nmol/h, inhibidor de la PKC), morfina (20 nmol/h), o morfina + celeritrina. Otros grupos recibieron una infusión de morfina espinal por 5 días y celeritrina o GF109203X (inhibidor de la PKC) en el día 5. El efecto agudo de morfina espinal (60 nmol) sobre la latencia al retiro de la pata por estímulo térmico sirvió para evaluar la tolerancia en el día 6. La infusión espinal de morfina, pero no de salina o celeritrina, produjo antinocicepción el día 1 y 3, y desapareció en el día 5. En el día 6, el efecto del bolo de morfina fue mas pequeño en ratas tratadas con morfina crónica que en las tratadas con salina o celeritrina crónica. La infusión de morfina+celeritrina previno la reducción diaria del efecto antinociceptivo de morfina y la pérdida de efecto de morfina espinal en el día 6. Dados en el día 5, el bolo espinal de celeritrina o GF109203X, pero no salina o el isómero inactivo de GF109203X, revirtieron la tolerancia a morfina espinal en el día 6. La infusión espinal crónica de morfina, pero no de salina crónica o de morfina aguda en el día 6, por 5 días aumentó la actividad fosforilante y la expresión de la PKCα y PKCγ en el asta dorsal, pero no en la ventral, de la medula espinal. El aumento de la expresión y de la actividad fosforilante producido por morfina crónica se previno por la administración espinal única de celeritrina en el día 5. Los datos anteriores indican que la PKC participa de manera muy importante en el desarrollo de tolerancia producida por morfina espinal crónica. El conocimiento de los procesos involucrados en el desarrollo de la tolerancia proveerá las bases para el manejo mejorado del dolor con analgésicos opioides. Parcialmente apoyado por CONACYT (VGS) y DA02110 (TLY). Evidencias citológicas y bioquímicas apoyan el hecho que el genoma eucariote se encuentra organizado en dominios. Estas regiones del genoma comprenden a la heterocromatina y la eucromatina, siendo las primeras zonas altamente compactas mientras que las segundas poseen una estructura de la cromatina más relajada que permite la actividad transcripcional. Recientemente se han descubierto secuencia de ADN conocidas como delimitadores o “insulators” a los cuales se les atribuye la función de fomentar la definición, formación y mantenimiento de un dominio al interior del cual pueden, de manera regulada, llevarse a cabo los subsecuentes eventos de regulación transcripcional. Lo anterior representa desde nuestro punto de vista uno de los primeros niveles de regulación dado que es necesaria la remodelación de la estructura de la cromatina en zonas específicas del genoma. Recientemente Corces y colaboradores han demostrado que parte de la formación de los dominios transcripcionalmente activos depende de la relocalización de dichos dominios, de regiones inactivas a regiones activas asociadas a la periferia del núcleo, hecho que depende de la acción de las secuencias tipo “insulator”. En base a lo anterior discutiremos cómo la relocalización de regiones de control al interior del núcleo constituye en si un novedoso nivel de regulación. S-27 S-28 UN ALMACÉN INTRANUCLEAR DE mRNA REGULADO POR HORMONAS. Vázquez Nin, G.H., Echeverría O.M. Lab. de Microscopía Electrónica, Depto. de Biología Celular, Fac. de Ciencias, UNAM. ORGANIZACIÓN CELULAR DE FACTORES DE PROCESAMIENTO DEL Pre-mRNA. Jiménez-García. L.F.* (avalado por González Mariscal Lorenza). Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias, UNAM, México D.F. El descubrimiento de varios tipos de partículas ribonucleoproteicas (RNP) realizado en 1969, mediante el uso de técnicas de citoquímica ultraestructural por Monneron y Bernhard, desencadenó numerosas investigaciones destinadas a esclarecer el papel citofiológico de dichas estructuras. Para determinar las funciones de los gránulos pericromatinianos (GPC) determinamos las variaciones de la frecuencia de los mismos en células epiteliales endometriales de ratas normales y castradas. Inesperadamente se encontró que los GPC aumentan con la castración y disminuyen con la administración de estradiol, lo que nos llevó a postular que dichos gránulos representan un almacén de RNA en equilibrio entre la transcripción y su exportación al citoplasma. Experimentos de autorradiografía ultraestructural cuantitativa empleando uridina tritiada en esquemas de pulso y caza en presencia y ausencia de la hormona demostraron que la hipótesis es correcta: el estradiol produce un aumento de la velocidad de salida del RNA 15 min después de la administración. El estudio de las variaciones de los GPC durante el ciclo estral de ratas normales corroboró que su frecuencia disminuye los días en que el tenor de estradiol en sangre es más alto y aumenta cuando éste baja, lo que demuestra que los efectos de la hormona demostrados en los experimentos son similares a los producidos por variaciones fisiológicas. Resultados similares se obtuvieron en el estudio de los efectos de la supresión de testosterona y la reposición hormonal sobre la próstata ventral. La adrenalectomía y la administración de hidrocortisona producen cambios similares sobre la frecuencia de los GPC en los hepatocitos. Los estudios de los efectos de la supresión y restitución de hormonas polipeptídicas hipofisiarias (FSH, LH, TSH, ACTH) en ratas macho demostraron que no sólo las hormonas esteroides producen las mencionadas variaciones rápidas de la exportación de RNA y del número de GPC. Pruebas inmucitoquímicas ultraestructurales realizadas en núcleos con cromosomas politénicos demostraron que los GPC contienen mRNA sin intrones. El conjunto de datos demuestra que lo GPC constituyen un almacén intranuclear de mRNA maduro listo para ser exportado mediante una señal hormonal. En el núcleo de células de mamífero en cultivo, se reconocen dominios macromoleculares altamente dinámicos involucrados en varios pasos de la expresión génica como la transcripción y el splicing del pre-mRNA. El splicing incluye la eliminación de los intrones y la unión de los exones. De los diferentes territorios o dominios nucleares, el patrón moteado ("speckled") representa un sitio de alta concentración de factores de splicing que incluye una fracción de concentración discreta de factores y una fracción difusa. Se ha postulado que la función de la fracción discreta del patrón moteado es la de almacén y reciclamiento de factores de splicing en un proceso mediado por eventos de fosforilación y desfosforilación tanto del dominio carboxilo terminal de la subunidad mayor de la RNA polimerasa II y del dominio SR de una familia de factores de splicing. En este trabajo se resumen datos que hemos generado recientemente relacionados con la presencia de patrones moteados en diferentes tejidos de mamíferos y en diferentes especies de vertebrados por medio de inmunofluorescencia y análisis de microscopía confocal. Además, durante el ciclo estral de la rata, en el útero esos patrones moteados responden a actividad transcripcional, como sucede en células en cultivo. Los patrones moteados no solamente se presentan en células de varios tejidos de mamíferos, sino en varios tejidos de diferentes especies de vertebrados como reptiles, aves, anfibios y peces. La presencia de patrón moteado incluso en peces primitivos como las lampreas, sugiere que la compartamentalización intranuclear de la maquinaria molecular del splicing se originó hace más de 400 millones de años y que esta función por lo tanto ocurre asociada a dominios. S-29 S-30 HACIA LA CARACTERIZACIÓN DEL NUCLEOTIPO: EL CÓDIGO ESTRUCTURAL EN EL NÚCLEO CELULAR. Aranda-Anzaldo, A.* (avalado por González Mariscal Lorenza), Maya-Mendoza, A.* y Martínez-Ramos, I.*, Laboratorio de Biología Molecular, Facultad de Medicina, UAEMex. MONITOREO DINÁMICO DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS EN LOS PROTOZOARIOS PATÓGENOS: E. histolytica, T. vaginalis y G. lamblia. Gómez-Conde E. Depto. de Inmunología/Biología Celular, Facultad de Medicina. BUAP. Lab. de Biología Celular, CIBIOR-IMSS. El genoma de los eucariótes superiores comprende una cantidad considerable de DNA. Lo anterior plantea un importante problema de empacamiento, el cual es resuelto mediante diversos niveles de organización del DNA nuclear que se correlacionan con un incremento progresivo en el grado de condensación de la hebra de DNA y que permiten lograr un factor de empacamiento del orden de 104. El primer nivel de organización es la propia estructura lineal del DNA. El segundo nivel de organización consiste en el enrollamiento del DNA alrededor de los nucleosomas. Este complejo DNA-proteína constituye a la cromatina. Las fibras de cromatina se condensan, formando un continuo helicoidal conocido como solenoide. Este solenoide se encuentra organizado en forma de asas o bucles, anclados por su base a una subestructura nuclear de naturaleza proteica, conocida como matriz nuclear. La matriz nuclear es una estructura resilente, dotada de propiedades mecánicas, mientras que los bucles superenrollados que están anclados a la matriz, también manifiestan propiedades elásticas. El orden superior de organización de la cromatina, establece relaciones topológicas específicas con la matriz nuclear. Estas relaciones delimitan dominios genómicos y son cruciales para establecer el nivel primario de regulación de la mayoría de las funciones nucleares. El nucleotipo ha sido definido como aquellos caracteres no génicos del DNA o sea, independientes de cualquier contenido informativo en nivel de secuencia, que pueden afectar o controlar el fenotipo. Nosotros hemos propuesto que la posición relativa de las secuencias génicas con respecto a la matriz nuclear es un factor nucleotípico que afecta el control de la expresión génica. Los factores solubles de transcripción pueden regular y modular la expresión de los genes, pero su capacidad regulatoria depende en forma importante del contexto preestablecido por la topología del DNA. Previamente hemos desarrollado un método que nos permite mapear posiciones relativas de secuencias génicas con respecto a la matriz nuclear. Con este método estamos determinando un conjunto de coordenadas nucleotípicas. Así como existe la información contenida en los codones presentes en el DNA, existe la información nucleotípica, definida por el nucleotipo de cada célula, que corresponde al patrón específico de organización topológica del DNA dentro del núcleo celular. Este patrón determina las posibilidades reales de expresión, in vivo, de la información cifrada mediante el código genético. Seguramente, la caracterización del nucleotipo será una de las tareas más importantes de la biología en las próximas décadas. Los estudios clásicos sobre la organización estructural de los ácidos nucleicos en los protozoarios patógenos se han realizado en parásitos fijados y obtenidos de cultivos asincrónicos, lo cual ha permitido describirlos sólo durante la interfase. De ahí que fue necesario realizar un análisis dinámico de estas moléculas durante la interfase y la mitosis. El estudio de los ácidos nucleicos en los trofozoitos de E. histolytica, T. vaginalis y G. lamblia, obtenidos de cultivos sincronizados por los métodos de agotamiento de nutrientes y colchicina, y teñidos vitalmente con naranja de acridina al 0.04% en PBS 0.02 M pH 7.3 a 38.5 °C, mostraron al RNA interfásico organizado en forma de anillo, de ceja y de un cuerpo ovalado. Durante la mitosis, el RNA se dividió y se repartió (T. vaginalis) o bien se fragmentó y se repartió (E. Histolytica y G. lamblia). El DNA se observó condensado (esferas) (E. Histolytica) y descondensado (T. vaginalis y G. lamblia) durante la interfase. En la mitosis, el DNA permaneció condensado (E. Histolytica) y descondensado (T. vaginalis y G. lamblia), formando 6 cromosomas en T. vaginalis y 3 por núcleo en G. lamblia durante la metafase. En la anafase el DNA se descondensó en T vaginalis y se mantuvo condensado en E. Histolytica y G. lamblia. El DNA telofásico se mantuvo condensado en E. Histolytica y empezó a descondensarse en G. lamblia. Aún queda por resolver el significado de la persistencia del RNA durante toda la mitosis y el porqué en algunos protozoarios el DNA se mantiene condensado o se descondensa prematuramente durante la mitosis. S-31 S-32 ROLE OF THE PATHWAY IN MOTOR SKILLS AND MOTOR INTERACCIÓN DE LAS MOLÉCULAS SINÁPTICAS EN LA CONSTRUCCIÓN DE LA MEMORIA. Federico Bermúdez-Rattoni, Maribel Miranda*, Leticia Lugo Verdugo*.* Departamento de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. México. PONTO-CEREBELLAR LEARNING IN THE RAT. A.Gasbarri∗1, A. Pompili1, C. Pacitti1, and F. Cicirata2 1 Department of Sciences and Biomedical Technologies, University of L'Aquila; 2 Department of Physiological Sciences, University of Catania (Italy). Emerging evidence supports the role of the cerebellum in motor learning and previous studies have also shown that olivary projections to the cerebellum are involved in motor learning. Since the pontine nuclei make up the other main relay center in the cerebro-cerebellar pathway, the purpose of the present study was to verify the involvement of the ponto-cerebellar pathway in motor skills and motor learning, by comparing these functions in intact animals and in rats with selective injury of the olivary or pontine neurons. Two groups of rats were used: the first was treated with 3-acetylpyridine to destroy the inferior olivary complex, the second received electrolytic lesions of the middle cerebellar peduncle to interrupt the ponto-cerebellar pathway. Control and lesioned rats were then submitted to three tasks: unrotated rod, rota-rod at 20 r.p.m., and Morris water maze. In the first task both 3-acetylpyridine-treated rats and mcplesioned rats showed static equilibrium deficiencies. Through training, however, they reached the maximal score attained by the controls. The rats submitted to the rota-rod at 20 r.p.m. obtained scores significantly inferior to the controls. The Morris water maze results indicated that both the lesion of inferior olivary complex and middle cerebellar peduncle alter learning of the spatial task. These findings show that both the ponto- and olivo-cerebellar pathways are involved in learning complex motor sequences and spatial tasks. Since both projections converge onto Purkinje cells, our results suggest that motor memory is supported in the cerebellum by anatomical re-arrangement of synaptic interactions of these cells with both climbing and parallel afferent fibres. Nuestro laboratorio se ha enfocado en la búsqueda del papel que diferentes moléculas sinápticas tienen en la huella bioquímica para la memoria de corto- y de largo plazo. Según su duración, hay memoria de corto plazo (MCP) recuerdos que duran minutos u horas, y aquéllas que duran meses o incluso años que son la memoria de largo plazo (MLP. Así, nosotros hemos analizado mediante la técnica de microdialysis in vivo, la liberación de ACh o glutamato durante las presentaciones de los estímulos condicionado e incondicionado, y después de su asociación a las 4 hr. para MCP y a 48 hr. para MLP. Asimismo, hemos estudiado los efectos de que las actividades de ACh y de glutamato tienen en la formación de los dos tipos de memoria. Los resultados obtenidos demuestran que las diferentes antagonistas de receptores colinérgicos y glutamatérgicos tipo NMDA afectan diferencialmente la formación de MCP y MLP. Por último, también hemos encontrado que las moléculas que participan en la formación de memorias de largo plazo también están relacionadas con la formación de nuevas sinapsis durante la consolidación de las mismas. Los resultados sugieren que las fases temporales de la memoria tienen procesos independientes que actúan en paralelo. El presente trabajo nos ayudarán a entender mejor la participación de diferentes moléculas sinápticas en la formación de la memoria. S-33 S-34 MEMORIA Y SOBRERREFORZAMIENTO. Roberto A. Prado-Alcalá y Gina L. Quirarte. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus Juriquilla, Querétaro, Qro. EFECTO DE AGONISTAS Y ANTAGONISTAS ADRENERGICOS EN UN APRENDIZAJE ESPACIAL. Alemán, V. Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias CINVESTAV, IPN. A.P. 14-740, México, D.F. 07000. Se ha demostrado que tratamientos que interfieren con la actividad fisiológica de un gran número de estructuras cerebrales produce la incapacidad para aprender o para memorizar conductas condicionadas, sobre todo, las del tipo instrumental. Estos tratamientos incluyen lesiones electrolíticas o neurotóxicas, fármacos que bloquean la actividad sináptica de la acetilcolina, el GABA y la serotonina. Algunas de las regiones cerebrales estudiadas son: el estriado, la sustancia nigra, la amígdala y el hipocampo. Ejemplos de condicionamiento, que se han afectado por la interrupción de la actividad de las estructuras mencionadas son: la evitación inhibitoria, evitación activa, conducta de presionar palancas, y la alternación espacial. Así pues, parecería que estamos en una etapa en la que conocemos estructuras y mediadores químicos necesarios para los fenómenos del aprendizaje y la memoria. Sin embargo, esta apreciación es bastante inexacta. Hemos demostrado en forma consistente que los tratamientos sistémicos e intracerebrales que comúnmente producen amnesia, se tornan totalmente inocuos cuando los animales de experimentación son sometidos a un nivel alto de entrenamiento. Estos resultados nos han llevado a proponer que prácticamente ninguna estructura cerebral es indispensable para la adquisición y retención (memoria) de conductas instrumentales, cuando el entrenamiento se realiza en condiciones de aprendizaje incrementado. Hemos propuesto que en condiciones de bajo entrenamiento (considerado normal), las estructuras nerviosas que intervienen se encuentran conectadas en serie, mientras que en condiciones de alto grado de aprendizaje, dichas estructuras de reconectan, funcionalmente, en serie. Trabajo apoyado por DGAPA-UNAM. S-35 PAPEL DE LOS RECEPTORES SEROTONÉRGICOS EN LA MEMORIA A CORTO Y LARGO PLAZO. A. Meneses1, L. ManuelApolinar2, R. Gonzalez1. 1Depto. Farmacobiología, CINVESTAV. 2 Escuela Superior de Medicina, IPN. México DF, México. ameneses@msn.com La serotonina (5-hidroxitriptamina, 5-HT) es un neurotransmisor clave en el estudio de los mecanismos de la memoria en invertebrados y mamíferos. En estas especies se han identificado múltiples receptores serotonérgicos, revelando mecanismos moleculares durante la formación de la memoria a corto (MCP) y largo plazo (MLP. En invertebrados la 5HT inicia y mantiene cambios moleculares (e.g., AMPc) asociados a MCP y MLP pero se desconoce que receptores serotonérgicos podrían estar involucrados. En mamíferos, usando criterios operacionales, estructurales y transduccionales se han identificado catorce subtipos de receptores 5-HT, los cuales presentan una distribución heterogénea en áreas asociadas a la memoria. En el laboratorio hemos encontrado que la consolidación de una MLP, pero no MCP, automoldeada depende de la síntesis de proteínas y es facilitada por la disminución del tono serotonérgico vía los receptores 5-HT1B, 5-HT2C, 5-HT3 y 5-HT6. En contraste, la estimulación de los receptores 5-HT1A y/o 5-HT7 facilita la MLP al aumentar el AMPc en corteza, hipocampo y núcleos del rafe. Sin embargo, cabe destacar que la estimulación de los receptores 5-HT4 produce aumentos de AMPc pero la formación de la MCP y MLP no tiene lugar. En conjunto, estos datos son consistentes con la hipótesis que la vía transduccional de señalización del AMPc está asociada con la formación de la MLP pero también indican que no siempre los aumentos del AMPc están relacionado con la formación de la memoria. De hecho, la acumulación vascular en astrocitos de AMPc en la corteza e hipocampo esta implicada en la enfermedad de Alzheimer. Es importante conocer si un neuromodular como la noradrenalina (NA) está o no involucrada en el aprendizaje y si su acción es directa o no. El uso de agonistas y antagonistas del neuromodulador facilita este propósito. Para ello, usamos agonistas y/o antagonistas de NA para determinar si tiene algún efecto en el aprendizaje espacial. Cuales son sus efectos cualitativos y cuantitativos en esta función. Además, se llevó a cabo una disección de cuales son las etapas del aprendizaje y de los parámetros conductuales que se afectaron. Se determinó si el aprendizaje produjo cambios en los receptores noradrenérgicos y cuales de estos receptores están más involucrados; como se modifican estos y en que áreas del cerebro ocurrieron estos cambios. También, se determinó, el efecto de la administración semicrónica de los agonistas y/o antagonistas noradrenérgicos en el aprendizaje y en los niveles de los receptores de NA y si hay una correlación entre ambos efectos. Finalmente, se determinó el efecto del aprendizaje, así como la administración simultanea de agonistas o antagonistas sobre el nivel de los receptores noradrenérgicos, lo que permite conocer una mayor especificidad de respuesta de los mismos en relación con un aprendizaje óptimo. PRESENTACIONES ORALES O-01 O-02 ANALISIS DE COMPONENTES PRINCIPALES (PCA) DEL EEG DE BANDA ESTRECHA DURANTE TAREAS DE EMOCION. Marosi Erzsébet , Bazán, O.,* Yañez, G.,* Bernal, J.,* Rodríguez, M.,* y Prieto, B.* FES Iztacala, Proyecto de Neurociencias EFECTO DE LA SOBRECARGA EN LA MEMORIA DE TRABAJO SOBRE EL PROCESAMIENTO SEMÁNTICO Y SINTÁCTICO. Avecilla G*., Silva-Pereyra, J*., Harmony T. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus UNAM-UAQ Juriquilla, Querétaro. La electrofisiología de las emociones es un tema controversial. Medidas de banda ancha vs banda estrecha, rangos de frecuencia, especificidad hemisférica, valencia positiva y negativa y topografía son los temas principales de debate. La mayoría de los estudios están hechos con medidas de banda ancha e investigan desincronización de la actividad alfa en los lóbulos frontales . El objetivo de este trabajo es hallar componentes principales que explican gran parte de la varianza y muestran las frecuencias dominantes y los lugares cerebrales que juegan un papel importante en la actividad eléctrica del cerebro durante las emociones.. Se calculó el poder absoluto del EEG para bandas estrechas de 1 Hz. Se registró el EEG durante tareas emocionales en 40 hombres jóvenes. Los estímulos fueron 210 frases de emociones positivas (alegría de amor), negativas (frustración) y neutros. Los PCAs fueron calculados para 19 bandas y 20 posiciones de electrodos. Los resultados muestran que 7-8 factores explicaron el 80 % de la varianza total. Los primeros componentes explicaron cerca de 20 % de la varianza. Los primeros factores más poderosos (actividad en el rango de 14.6-20.5 Hz) se observaron en F7 y F8 con más de 30 % de la varianza. Ya que este componente se observó también el estado neutro, suponemos que refleja la concentración interna dedicada a la tarea. Diferencias entre estados emocionales y neutros obtuvimos en las frecuencias de 6 Hz (P3) y 9 Hz (C3) durante frustración y 2 Hz y 6 Hz (en Pz y T3) durante alegría de amor.. Estos resultados revelan un entrejuego complejo de frecuencias en diferentes áreas corticales que interviene en la conducta emocional. También dejan claro que se necesitan estudios diferentes a los tradicionales para poder entender la participación cortical en la regulación de las emociones. En el estudio de la comprensión del lenguaje escrito se han identificado componentes de los Potenciales relacionados a eventos (PREs) asociados con el procesamiento semántico (N400) y sintáctico (ELAN, LAN, P600) de la oración. Se ha observado que el componente N400 varía de manera inversamente proporcional a la congruencia semántica de una palabra, y también se ha propuesto que los componentes ELAN y LAN pueden ser marcadores electrofisiológicos de un análisis sintáctico muy temprano que puede ser automático; mientras que la P600 puede reflejar un reanálisis en el que se conjugue tanto la información sintáctica como la semántica. El objetivo de este trabajo fue estudiar dichos componentes (ELAN, LAN, N400 y P600) durante la lectura de oraciones con y sin violaciones semánticas y sintácticas en presencia de una prueba de sobrecarga de memoria de trabajo. Se obtuvieron los PREs de 10 niños sanos de entre 8 y 11 años durante dos pruebas de lectura que incluyen violaciones semánticas y sintácticas: Prueba de juicio gramaticalsemántico y prueba de sobrecarga de memoria de trabajo. En la primera prueba se observó un efecto N400 en violaciones semánticas sólo en regiones centro-parietales. En la segunda prueba se observó un aumento en la amplitud de la N400 en una distribución central y una disminución en la amplitud de la P600, cuyo efecto se observó sólo en C4 y T6. Los resultados obtenidos en violaciones sintácticas (P600) se atribuyen al hecho de que este componente implica una reactualización de la memoria de trabajo, y al sobrecargar este sistema se interfiere con el proceso subyaciente a la P600. El aumento de la N400 en la prueba de sobrecarga de memoria podría deberse a que la ejecución de la prueba implicaba unam ayor atención de losniños a las palabras semánticamente anómalas. O-03 O-04 ESTUDIO ELECTROFISIOLÓGICO DE LA INHIBICIÓN CONDUCTUAL. González-Frankenberger B.* y Harmony T. Instituto de Neurobiología, UNAM. Campus UNAM-UAQ Juriquilla, Querétaro. PAPEL DEL CUERPO CALLOSO EN EL GRADO DE ACTIVIDAD ELÉCTRICA COHERENTE ENTRE LOS HEMISFERIOS CEREBRALES EN EL HOMBRE: ESTUDIOS DE 1 2 Corsi-Cabrera, M. , Ondarza, R. , Martínez-Gutiérrez, V*.1, CASO. Trejo, D*2, Guevara, M.A.3, Ramos-Loyo, J3. 1Laboratorio de Sueño, Facultad de Psicología, UNAM, 2Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía MVS, 3Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara. México La importancia que la atención selectiva tiene para el ser humano es inmensa, la relación y el contacto con su entorno se deben a procesos mentales donde la información irrelevante tiene que ser excluida para poder procesar adecuadamente la información relevante y mantener así el equilibrio. El objetivo de este trabajo fue profundizar en el conocimiento de los mecanismos inhibitorios de la atención selectiva a través de métodos electrofisiológicos dado que este proceso ha sido poco estudiado con estas técnicas. Se aplicaron dos pruebas conductuales a 20 jóvenes sanos: Prueba de “Priming” Negativo (Tipper y col.,1985) y prueba de Asociación Numérica (adaptada de Tatia y col., 2001). Ambas pruebas se miden con base en la diferencia del tiempo de respuesta (TR) entre la condición control y la condición inhibitoria. La prueba de “Priming” Negativo arrojó TRs no significativos entre estas dos condiciones aunque la tendencia hacia los TRs esperados existe. En la prueba de Asociación Numérica, tal y como se esperaba, se encontró un TR mayor (12.6%) durante la condición inhibitoria respecto a su control (p<0.05). Esta última prueba se utilizó para el estudio electrofisiológico donde se analizaron algunos componentes de potenciales relacionados a eventos que se sabe son modificados por procesos de atención (Coull y col.,1998). El componente visual N100 ocurrió en regiones posteriores sin diferencia alguna entre una y otra condición mientras que el componente P300 con amplitudes aproximadas de 6 µV durante la condición control se presenta con latencia incrementada durante la condición inhibitoria. Se discute este resultado en relación con una condición inhibitoria o de mayor dificultad. La actividad coherente o acoplamiento temporal entre regiones corticales de la actividad eléctrica es importante para el funcionamiento cognoscitivo. Entre los mecanismos propuestos se han señalado influencias subcorticales especialmente del sistema tálamo-cortical y a las conexiones intra-corticales particularmente el cuerpo calloso (CC) para el acoplamiento entre los dos hemisferios. La sección parcial o total del cuerpo calloso es un procedimiento quirúrgico empleado en el tratamiento de las epilepsias multifocales refractarias farmacológicamente. Esta intervención quirúrgica ofrece la posibilidad de investigar el papel que juega el CC en la actividad coherente entre los dos hemisferios en el hombre. Con este propósito se realizó el análisis cuantitativo del EEG (espectros de potencia y de correlación) de la vigilia y el sueño antes y 3 meses después de la callosotomía. Los resultados mostraron una disminución notoria de la correlación interhemisférica entre regiones homólogas del hemisferio izquierdo y derecho de las regiones corticales con el cuerpo calloso seccionado. Los valores de correlación entre las regiones que continúan conectadas permanecen en cambio prácticamente iguales que antes de la callosotomía. La correlación entre regiones de un mismo hemisferio aumenta en las bandas rápidas. Por lo menos después de tres meses de recuperación, el cuerpo calloso parece jugar un papel importante para el grado de actividad coherente entre los dos hemisferios. O-05 O-06 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA DEL NERVIO VAGO SOBRE LA ACTIVIDAD INTERICTAL Y EL EEG EN EL GATO. Martínez, A, Vega-Flores O*, López-Ruiz E*, Arias Caballero A * y Fernández-Guardiola A. Fac. Psicología UNAM e Instituto Nacional de Psiquiatría SSA, México, 14370 D.F. ACTIVIDADES EEG DEL SUEÑO LENTO II EN EL SUBTÁLAMO Y LA CORTEZA FRONTAL MESIAL EN PACIENTES CON ENFERMEDAD DE PARKINSON Y EPILEPSIA FOCAL. Velasco A.L., Velasco M., Díaz-de-León A.E*., Granados D., Carrillo-Ruiz J.D*., Jiménez F., Velasco F. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México SS. y UIM. Neurofisiología, Centro Médico Nacional IMSS., México D.F. La sincronización observada en la epilepsia como actividad interictal, es una capacidad sincronizante inherente al arreglo neuronal cortical, e influenciada por la actividad tálamocortical; quedando por aclarar los mecanismos por el cual se ejercen estos efectos. El objetivo es estudiar el efecto de la estimulación vagal sobre la actividad paroxística inducida por la penicilina en la amígdala (AM) del lóbulo temporal. Se implantaron 12 gatos machos para registro convencional de sueño, una cánula y un electrodo dirigidos hacia la AM, y el nervio vago izquierdo a nivel laríngeo con un electrodo en forma de espiral. Se microinyectaron 100 VI de penicilina O sódica (Pn) en la AM. Se estimuló el nervio vago (ENV) (1.2- 3.0 mA, pulsos de 0.5 ms, 30 Hz durante un minuto) antes de la Pn y se continuó estimulando al inicio de las cuatro horas siguientes a la Pn. Se registro la actividad eléctrica cerebral durante 8 horas. La Pn produce espigas interictales. La ENV produce: un aumento en la latencia de aparición de espigas en un 77% y reduce la frecuencia de las espigas 40%: en el EEO observamos un aumento del sueño de ondas lentas II (SOL-II) y una disminución de la vigilia, por otro lado observamos una facilitación en SOL-II y una ausencia en el sueño MOR de las espigas interictales. Estos resultados nos muestran una modificación de la actividad interictal, sugiriendo que los mecanismos generadores de cada una son distintos. Se ha demostrado la relación de los sitios y mecanismos entre las espigas interictales y los husos de sueño, sugiriendo que la facilitación es de origen talamocortical. El efecto antiepiléptico de la ENV estaría activando tanto a la región parabraquial que es el blanco principal de las aferentes vagales como al tálamo vía núcleo del tracto solitario. Este trabajo fue apoyado parcialmente por CONACYT 31771-N, DGAPA IN-203396 UNAM y el Instituto Nacional de Psiquiatría SSA 3220. Antecedentes: En trabajos previos hemos reportado que durante la etapa de sueño lento II, (SL II) los elementos EEG “normales” (ondas del vertex y husos de sueño) aparecen significativamente (p<0.01) asociados en el tálamo Centromediano y en la superficie fronto -parietal, por lo que postulamos que las actividades SL II son mediadas por un mecanismo común tálamo cortical. Objetivo: en este trabajo se investiga la asociación o disociación de las actividades SL II en otras estructuras Subtalámicas y corticales frontales mesiales (corteza frontal y área motora suplementaria) en pacientes con enfermedad de Parkinson y Epilepsia focal, respectivamente; y a través de electrodos profundos y subdurales utilizados para una Neuromodulación terapéutica. Métodos: Se implantaron electrodos Medtronic-Itrel de contactos múltiples en las radiaciones Subtalámicas prelemniscales (Raprl) y en la corteza frontal mesial (CFM). Diez días después de la implantación, se realizaron estudios de sueño nocturno (8 hs) siguiendo los procedimientos internacionales y registrando simultáneamente el EEG superficial y cerebral profundo, así como otros indicadores periféricos del sueño (EMG., O.G., EKG y respiración). Resultados: Se encontró que actividades similares a las del SL II superficial se registraron tanto de las Raprl como de la CFM. Sin embargo, al principio del SL II las actividades cerebrales profundas se anticiparon de 3 a 16 min., a las superficiales (disociadas) apareciendo muchas veces durante la vigilia (ritmo alpha parietal) así como durante el sueño paradójico. (Ritmo beta frontal, atonía muscular y movimientos oculares rápidos) previos al SL II. Una vez instalado el SL II las actividades superficiales y profundas aparecieron asociadas. Conclusiones: Estos datos sugieren que el SL II resulta de una actividad tálamo-cortical que se inicia en el subtálamo o mas caudalmente y que se proyecta a la convexidad cortical vía corteza frontal mesial O-07 O-08 EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA CRÓNICA DEL HIPOCAMPO (EECHC) SOBRE LA MEMORIA RECIENTE EN PACIENTES CON EPILEPSIA DEL LÓBULO TEMPORAL MEDICAMENTE INTRATABLE. Jiménez F., Hernández J.A.*, Velasco A.L., Velasco F., y Velasco M. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de Mexico SS y UIM Neurofisiología, Centro Medico Nacional, IMSS, México D.F. EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN SUBTALÁMICA AGUDA SOBRE LOS CICLOS SUEÑO-VIGILIA EN PACIENTES CON ENFERMEDAD DE PARKINSON. Velasco M., Díaz-de-León A.E.*, Velasco A.L., Jiménez F., Carrillo-Ruiz J.D.*, y Velasco F. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México, SS y UIM. Neurofisiología, Centro Médico Nacional IMSS, México D.F. Antecedentes: En trabajos previos, hemos demostrado que la EECHC bloquea la Epileptogenesis clínica y EEG, sin producir alteraciones histopatológicas adicionales en pacientes con epilepsia del lóbulo temporal médicamente intratable. Objetivo: Investigar si este efecto antiepileptógeno se acompaña de efectos colaterales indeseables en la memoria reciente discursiva y no discursiva. Métodos: Este trabajo se realizó en 6 pacientes con focos unilaterales (4 derechos y 2 izquierdos) y con electrodos implantados en el hipocampo como un procedimiento diagnóstico topográfico y candidatos a una lobectomía temporal anterior (LTA). En ellos se practicaron pruebas de memoria reciente discursiva (prueba de palabras de Rey) y no discursivas (molino de Besares) en cuatro condiciones consecutivas; 1) intacto, 2)después de la implantación de electrodos, 3) después de 2-4 semanas de EECHC continua (frecuencia: 130/s, duración: 450us y amplitud 200400ua) y 4) después de la LTA. La significancia de los cambios entre estas condiciones fue estadísticamente comparada en los mismos pacientes (pruebas dependientes de Wilcoxon) y con otros pacientes normales apareados en sexo, edad, nivel socioeconómico, e intervalos entre las pruebas (pruebas independientes de Mann-Whitney). Resultados: Se encontró primero, que el rendimiento Neuropsicológico en las pruebas discursivas y no discursivas fue significativamente menor en los pacientes epilépticos que en los controles normales y segundo, que el rendimiento psicológico no fue significativamente diferente en ambas pruebas ni en los pacientes epilépticos ni en los controles normales . Conclusiones: Estos datos sugieren que la EECHC puede ser un procedimiento alternativo en el control de la epileptogenesis en pacientes con focos bilaterales o unilaterales del hemisferio dominante en las cuales la LTA no es recomendable en vista de sus efectos colaterales indeseables sobre la memoria. Antecedentes: En trabajos previos hemos demostrado que la lesión de las radiaciones subtalámicas prelemniscales (Raprl) que forman parte de un sistema reticular activador ascendente (SRAA) eliminan total o parcialmente el temblor y la rigidez de los pacientes con enfermedad de Parkinson. Recientemente reportamos que la estimulación eléctrica crónica de las Raprl produce los mismos efectos terapéuticos que su lesión. Objetivo: Determinar el efecto de la estimulación aguda de las Raprl sobre los ciclos sueño-vigilia, particularmente sobre el SL II. Métodos: Se implantaron bilateralmente electrodos Medtronic-Itrel en pacientes con enfermedad de Parkinson bilateral, utilizando procedimientos estereotáxicos por ventriculografía para una Neuromodulación Terapéutica del temblor y la rigidez. Diez días después de la implantación, se realizaron estudios de sueño nocturno (8 hs) siguiendo las Normas Internacionales en dos condiciones consecutivas doble-ciego y aleatorias: 1) En ausencia de estimulación de las Raprl y en presencia de temblor y rigidez y 2) En presencia de estimulación y en ausencia de temblor y rigidez. Resultados: La estimulación aguda supraumbral unilateral de las Raprl no produjo cambios significativos en la latencia, número y duración de los episodios de sueño-vigilia. En cambio, la estimulación equivalente bilateral de las Raprl, y en contra de lo esperado, produjo un aumento de la desincronización electrocortical durante el sueño y como consecuencia un aumento en la latencia (de 5.20 a 20.20 min) y una reducción en la duración de 52.10 a 44.20 %) del SL II; así como un aumento en las fases (de 4 a 8), ciclos (de 3 a 7) y duración (de 14 a 32 %) del sueño paradójico. Conclusiones: El hecho de que la estimulación Raprl bilateral produzca una disminución del SL II y un aumento del sueño paradójico sugiere que el efecto terapéutico supresor del temblor y la rigidez por la estimulación de las Raprl se debe más a una activación de los sistemas bulbo-pontinos del sueño paradójico que a una deactivación del SRAA mesencefálico. O-09 O-10 EFECTO ANALGÉSICO DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA CRÓNICA DE LA CORTEZA MOTORA PRIMARIA (MI) EN PACIENTES CON DOLOR POR DEAFERENTACIÓN. Velasco F., Velasco M., Carrillo J.D., Marquez I y Velasco A.L. Unidades de Neurocirugía Funcional y Estereotaxia, Hospitales General e Infantil de México, SS y UIM Neurofisiología, Centro Médico Nacional, IMSS México D.F. EFECTO DE LA PRIVACIÓN MATERNAL EN EL PERÍODO POSTNATAL TEMPRANO Y EL REEMPLAZAMIENTO DE LAS SEÑALES SOCIALES Y ODORÍFERAS DEL NIDO SOBRE EL DESARROLLO DE LA CONDUCTA MATERNAL EN RATAS JUVENILES. Melo, A.I., Gonzalez, A.*, Lovic, V.* y Fleming, A..S.* Centro de Investigación en Reproducción Animal, CINVESTAV-UAT y Dept. of Psychology, University of Toronto at Mississauga, ON Canadá. Antecedentes: En trabajos previos, Tsubokawa et al han demostrado que la estimulación eléctrica crónica epidural de la MI produce un efecto analgésico evidente sobre el dolor por deaferentación, refractario a distintos regímenes analgésicos medicamentosos, incluyendo a los compuestos opioides. Objetivos: 1) replicar el efecto analgésico de la estimulación crónica de la MI, 2) precisar el sitio crítico de la MI por métodos radiológicos, electrofiológicos y de imagen, y 3) investigar su efecto sobre los signos de la distrofia simpática refleja que habitualmente acompañan al dolor por deaferentación. Métodos: El éxito o fracaso del efecto analgésico de la estimulación de la MI depende del sitio preciso de la estimulación. Con este propósito investigamos la utilidad relativa de distintos métodos, radiológicos, (referencias óseas), electrofisiológicas (respuestas sensoriales y motoras, potenciales somatosensoriales N20-P20, respuestas cortico-corticales de las cortezas Mi y SI y estimulación terapéutica subaguda) y de imagen (imágenes de resonancia magnética coronales oblicuas). El resultado analgésico fue evaluado tanto por pruebas subjetivas de percepción del dolor como por pruebas electrofisiológicas de los fenómenos vegetativos la distrofa simpática refleja. Resultados: Se encontró que la prueba mas útil para localizar el sitio de la MI para una respuesta analgésica optima fueron las respuestas córtico-corticales superficiales: estimulación de MI = respuestas electronegativas localizadas en la región prefrontal (F3, F4) y frontopolar (FP1, FP2): y las de la estimulación de SI (región primaria somatosensorial) = respuestas electrofisiológicas positivas localizadas a la región parietal (P3, P4) ipsilaterales al sitio de estimulación. La respuesta analgésica incluyó tanto la apreciación subjetiva del dolor como la reducción en las áreas de alodinia y analgesia, así como un aumento en el flujo circulatorio determinado por Doppler, SPECT y respuesta galvánica de la piel. Conclusiones: Estos datos confirman el efecto analgésico de la estimulación de la MI y sugieren un mecanismo espinal y periférico en esta acción. La separación maternal total en el período postnatal temprano a través de la “crianza artificial”(CA) altera el desarrollo de la conducta maternal (CM) en ratas hembras juveniles y adultas. La adición de estímulos sensoriales que simulan el lamido de la madre (con una brocha) durante el período de privación revierte algunos de los efectos negativos sobre la CM. Teniendo en cuenta que el olor del nido y el contacto social con la camada son importantes para el desarrollo de los animales, nosotros intentamos revertir todos los efectos negativos de la separación al proveer olor del nido y un conespecífico de la misma edad dentro del sistema de aislamiento. Desde el día 4 al 18 postnatal, críos hembras se criaron dentro de un sistema de CA (se mantuvieron dentro de un ambiente cálido y se les infundió leche a través de un catéter en el estómago) o se criaron con su madre (M). Se formaron 5 grupos: 1)CA-MIN recibió 2 estimulaciones anogenitales (AG) diarias, 2)CA-MAX, recibió 8 estimulaciones A-G y corporales diarias, 3)CA-MAX-SOC-OLOR, recibió 8 estimulaciones A-G y corporales, un compañero y, material del nido (cambio c/12 hrs), 4)M-Cirugía/Control, 5)M-Control. A partir del día 22 postnatal, las hembras juveniles fueron expuestas continuamente a críos extraños (cambio c/24 hrs) y se registró diariamente la CM durante 10 minutos por 8 días. Los resultados mostraron que el aislamiento (grupo CA-MIN) incrementó la latencia para acarrear a los críos al nido en comparación con el grupo control. Además, en comparación con los grupos control y el grupo CA-MAX-SOC-OLOR, el grupo CA-MIN gastó significativamente menos tiempo adoptando la postura de amamantamiento y lamiendo el cuerpo y los genitales de los críos. Cuando se compararon las conductas anteriores entre los grupos CAMAX, CA-MAX-SOC-OLOR y control, no se encontraron diferencias significativas. Interesantemente, la frecuencia y duración de la conductas no-maternales como; jugar, comer, estar sentado lejos de los críos, fue mayor en todas las hembras CA que en las hembras criadas por su madre. En conclusión, la adición del olor del nido y el contacto con un compañero de la misma edad durante la CA (grupo 3), previno totalmente los efectos negativos del aislamiento sobre la CM en hembras juveniles. Este trabajo fue apoyado por NSERC, Canadá a Alison S. Fleming. O-11 O-12 CARACTERÍZACIÓN DE LAS VOCALIZACIONES DEL CORTEJO SEXUAL EN MACHOS CABRIOS. Paredes E. A.*(1)., Poindron Pascal (1), Delgadillo, J. A (2) y Terrazas A.*(1) (1) INB, UNAM, AP 1-1141, Querétaro 76001. (2) UAAAN, UL. AP 940, Torreón Coahuila. EFECTO DE LA INGESTIÓN DE LECHE EN LA EXPRESIÓN DE LA PROTEINA FOS EN EL HIPOTALAMO Y TALLO CEREBRAL DE CRÍAS DE CONEJO. Rovirosa M. J.*, Avilés K.*, Caba M. Laboratorio de Biología de la Reproducción, IIB, Universidad Veracruzana. En Ungulados (por ejemplo el ciervo rojo y el cerdo) los machos vocalizan fuerte y repetidamente durante el cortejo, lo cual puede influir sobre la conducta de celo en la hembra. En algunos casos se ha reportado que existen diferencias inter-individuales entre estas vocalizaciones, así como variaciones en su frecuencia de emisión a lo largo del día. En caprinos, los machos vocalizan al momento del cortejo, sin embargo no existen estudios detallados al respecto. El presente trabajo tuvo por objetivo caracterizar las vocalizaciones en machos cabríos, interactuando con cabras en celo, durante la estación reproductiva; investigando si existen diferencias entre individuos y variaciones en la frecuencia de emisión entre el día y la noche. Se utilizaron dos machos cabríos adultos (>2 años) que fueron grabados durante un periodo de 24 horas continuas en el mes de Septiembre. Ambos chivos emitieron tres tipos de vocalizaciones, las cuales hemos nombrado como lengüeteos, gemidos y estornudos, cuyas características promedio (n= 10 para cada tipo de vocalización) de duración (D), frecuencia fundamental (FF), frecuencia pico (FP), frecuencia máxima (FM) y número de segmentos (NS), fueron las siguientes para cada macho: D (sec) FF (Hz) FP (Hz) FM (Hz) NS Lengüeteos 0.9/0.9 148/182* 137/158 2960/3314 4/5 Gemidos 1.8/4.6* 158/146 136/78 2008/2269* 3/5* Estornudos 0.2/0.3* 198/261 212/264 3060/3734* 2/2 * p < 0.05 entre los dos machos (Mann-Whitney) Respecto al análisis de 24 horas, se encontró, que ambos machos tuvieron un patrón muy similar, con un mayor porcentaje de vocalizaciones durante las horas de luz ( 80% entre 8 a.m. y 7 p.m., versus 20% entre 7 p.m. y 8 a.m., p < 0.001). Sin embargo, existieron diferencias entre ellos con respecto al tipo de vocalización emitida: así por ejemplo, el chivo 611 emitió significativamente más gemidos que el 801 (38% vs 8%, p < 0.001), mientras que el chivo 801 emitió más lengüeteos (47% vs. 23%, p < 0.001). En conclusión, los resultados sugieren la posible existencia de un patrón nictímero en las vocalizaciones de machos cabríos durante la estación reproductiva. Por otro lado, las diferencias inter-individuales en los parámetros espectrales y entre los tipos de vocalizaciones emitidas, son indicios de que cada animal cuenta con una firma acústica individual. Queda por determinar el papel de cada tipo de vocalización en el cortejo sexual. La interacción madre-cría en los conejos ocurre una sola vez al día durante 3-5 minutos. Durante este breve período ingieren hasta un 30% de su peso corporal en leche. En el presente trabajo decidimos explorar con técnicas de inmunocitoquímica la expresión de la proteína Fos en el hipotálamo y tallo cerebral de críos de conejo Nueva Zelanda blanco, antes y después de su período diario de succión establecido a las 10:00 h. Los grupos fueron: 1) Antes de la succión (10:00 h); 2) Después de la succión (11:30 h) y 3) Manipulación (sin succión, 11:30 h). Los sujetos fueron prefundidos transcardialmente y se obtuvieron secciones coronales (50µm) que fueron tratadas con un anticuerpo monoclonal (Santa Cruz) contra la proteína Fos y analizadas bajo el microscopio óptico. La ingestión de leche indujo aumentos significativos (p<0.01) de la proteína Fos en el núcleo supraóptico (NSO) y paraventricular (NPV) del hipotálamo, así como en el núcleo del tracto solitario (NTS) en el tallo cerebral, con relación a sujetos antes de la succión. Adicionalmente realizamos una doble inmunocitoquímica para identificar el fenotipo neuroquímico de los núcleos de Fos en el hipotálamo. Encontramos que la ingesta de leche incrementa más de 90% el número de neuronas activas de oxitocina tanto en el NPV como en el NSO, y la manipulación incrementa más de un 40% solo en el NPV en relación con críos antes de la succión, sin embargo el número de neuronas activas de vasopresina en el NPV sólo expresan un 12% después de la succión y manipulación en relación con antes de la succión. En conclusión pensamos que la distensión gástrica activa neuronas en el NSO y NPV, a través del NTS, siendo éstas principalmente neuronas de oxitocina. Apoyado por el CONACYT, Refe 34652-N (M.C.) O-13 O-14 RESPUESTA METABOLICA Y ACTIVIDAD FUNCIONAL ANTE EL AYUNO Y LA SACIEDAD DE ALGUNOS NÚCLEOS HIPOTALAMICOS EN RATAS DESNUTRIDAS CRONICAMENTE. Parra-Gámez L*, Salazar Juárez A*, Escobar Briones C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina. UNAM. México. EFECTO DEL REEMPLAZO HORMONAL CON ANDRÓGENOS SOBRE LA EXPRESIÓN DE LA CONDUCTA SEXUAL Arteaga, M*., MASCULINA EN EL HÁMSTER DORADO. Márquez-Villanueva Y*., Retana-Márquez S y Velázquez-Moctezuma J. Depto. Biol. Reproducción. UAM-Iztapalapa. México. D.F. La desnutrición pre y postnatal provoca retraso en el crecimiento y maduración de muchos tejidos y órganos. El hipotálamo participa en la regulación de la actividad autónoma y en el balance energético y sus valores de regulación pueden ser modificados por la desnutrición crónica. Es propósito de este estudio determinar cuales son las modificaciones en el metabolismo y la respuesta de algunos núcleos del hipotálamo ante dos situaciones extremas de ayuno y saciedad en ratas adultas desnutridas crónicamente y sus controles bien nutridos. Se desnutrieron ratas pre y postnatalmente con una dieta deficiente en caseína (6%) para formar el grupo desnutrido (M). Otro grupo de ratas bien nutridas (23% de caseína) formo el control (C). A los 90 días de edad fueron divididos en los grupos uno de ayuno de 48 horas (AY) y de saciedad (SA). Se cuantificó la concentración de glucosa y ácidos grasos en sangre además del número de neuronas inmunoreactivas a la proteína c-FOS (IRc-FOS) en los núcleos hipotalámicos paraventricular (PVN), dorsomedial (DMN), ventromedial (VMN), arqueado (ARC) y el área hipotalámica lateral (LH). La concentración de ácidos grasos en el ayuno y en la saciedad de los M se mantiene por arriba del C, en tanto la concentración de glucosa se conserva similar en ambos. Para el C el número de células IRc-FOS en la condición de ayuno es superior en el VMN y en el ARC del M. Después de comer el número de células IRc-FOS es inferior a C. Estos datos sugieren que los animales desnutridos crónicamente pueden desarrollar estrategias funcionales particulares que les permiten enfrentar retos metabólicos como los expuestos en este trabajo. DGAPA- IN- 204800; CONACYT 33033-N. La testosterona (T) es el principal andrógeno secretado por los testículos adultos de la mayoría de los mamíferos y ha sido usado para restaurar la conducta sexual masculina (CSM) en machos castrados. Sin embargo, otros andrógenos testiculares, como la androstenediona (A), poseen también la capacidad para inducir CSM. En este estudio se evaluó el efecto del reemplazo hormonal con T y A sobre los parámetros de la CSM en el hámster. Hamsters de 4 meses de edad, sexualmente expertos, fueron gonadectomizados. Posteriormente, la CSM se registró semanalmente hasta su desaparición. Los sujetos (Ss) fueron asignados a los siguientes grupos: (1) tratados con A 1000 µg/día; (2) tratados con propionato de T 1000 µg/Kg; (3) tratados con aceite (V) 100 µl; (4) Ss con cirugía falsa tratados con V. El registro de la CSM continuo semanalmente. A los 21 días los Ss fueron decapitados, y se obtuvo el plasma para valorar A y T por HPLC. La administración de A restituyó totalmente el patrón copulatorio incluyendo la presencia intromisiones largas, que acompañan a la extenuación sexual. Por otro lado, la administración de PT restituye la conducta de manera menos robusta, presentándose la intromisión larga sólo en un 25 % de los Ss. La determinación de niveles hormonales por HPLC reveló que una proporción de A puede estarse convirtiendo en T. Estos datos sugieren que, en el hámster, la A puede ser de mayor relevancia que T en la regulación de la CSM. O-15 O-16 LA RESPUESTA DE LAS CABRAS AL EFECTO MACHO NO DEPENDE DE UN PERIODO PREVIO DE COMPLETA SEPARACION DE LOS MACHOS. Rodríguez, J.G.*(1) (avalado por Delgadillo, J.A.), Véliz, F.G.*(1,2), Flores, J.A.*(1), Duarte, G.*(1), Vielma, J.*(1), Carrillo, E.*(1), Delgadillo, J.A.(1) (1) UAAAN-UL AP 940, Torreón, Coahuila. (2) FMVZ-UNAM, AP 04510, México, DF. LA MICROINYECCIÓN DE TIMULINA EN EL HIPOTÁLAMO MEDIO, MODIFICA EL BLOQUEO EN LA OVULACIÓN INDUCIDO POR LA ANESTESIA CON ETER, EN RATONES PREPÚBERES TRATADOS CON GONADOTROPINAS. García, Chavira, R.2*, Romano, M.C.3, L.1*, Hinojosa L.1*, Olvera, E1*, Domínguez, R.1 y Rosas, P.1*. 1UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. 2INCMN "Salvador Zubirán". 3Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, IPN. México, D.F. Este estudio se realizó para determinar si es necesario un periodo de completa separación entre machos y cabras anovulatorias antes del “efecto macho”. Dos machos (sexualmente inactivos: SI) recibieron las variaciones naturales del fotoperiodo (26°N). Otros dos machos (sexualmente activos: SA) fueron sometidos a 2.5 meses de días largos (16 h luz/día) a partir del 1 de noviembre. Este tratamiento induce la actividad sexual de los machos en el periodo de reposo sexual. Dos grupos (G1 y G2), estuvieron en contacto con machos (1 por grupo) desde el 15 de diciembre, y otros 2 grupos (G3 y G4) no tuvieron contacto con machos. El 3 de abril, los machos de los grupos G1 y G2 fueron retirados. En el G1 se introdujo un macho SA, y en el G2 un macho SI. De igual forma, en el G3 se introdujo un macho SA y en el G4 un macho SI. El comportamiento sexual de los machos fue registrado durante 5 días por 2 h diarias desde el momento de la introducción de los machos, y el comportamiento estral de las hembras durante 23 días (AM y PM) posterior a la introducción de los machos. El comportamiento sexual de los machos SA fue superior al de los machos SI (P<0.05). La mayoría de las hembras en contacto con los machos SA fueron detectadas en estro (G1: 72 %; G3: 81 %), independientemente si tuvieron o no contacto previo con machos. En cambio, ningún comportamiento de estro fue detectado en las hembras en contacto con los machos SI (G2 y G4). Estos resultados demuestran que no es necesario un periodo de separación entre machos y hembras antes del “efecto macho,” y que la respuesta de las hembras depende de la actividad sexual de los machos. Agradecemos la asistencia técnica de los miembros del CIRCA y el apoyo secretarial de Dolores López. En ratones prepúberes, la administración subcutánea de timulina, previa a la de PMSG (gonadotropina del suero de la yegua preñada) estimula la ovulación, probablemente al ejercer sus efectos en el eje hipotálamo-hipofisario. Para analizar esta posibilidad se inyectó timulina (1pg/0.3µl) o solución salina (SS) en el hipotálamo medio (HM) de ratones de 19 días de edad anestesiados con éter. A los 20 días de edad se les administraron 2.5 u.i. de PMSG ó 3 u.i. de hCG (gonadotropina coriónica humana) 54 h después de la PMSG. Se contó con hembras anestesiadas o no con éter tratadas con PMSG. Los animales se sacrificaron 72 h después de administrar la PMSG y se evaluó la respuesta ovula- toria (tasa de animales ovulantes y número de ovocitos liberados). de N° de Grupos n Tasa animales ovocitos ovulantes (media ± e.e.m.) 12 2/12 11.9 ± 0.7 PMSG Éter+PMSG 11 2 /11a 10 ± 0.0 Éter+SS+PMSG 9 0/9 0 Éter+Timulina+PMSG 9 6/9 b 7.2 ± 1.0 Éter+SS+PMSG+hCG 5 5/5 b 8.6 ± 0.7 Éter+Timulina+PMSG+hCG 6 6/6 6.5 ± 1.3 a, p<0.05 vs. PMSG b, p<0.05 vs. Éter+SS+PMSG La anestesia con éter bloquea la ovulación en el 82% de los animales estimulados con PMSG. La inyección de timulina en el HM recupera la tasa de animales ovulantes comparada con la de los animales del grupo SS. Estos resultados indican que la timulina facilitó la secreción preovulatoria de la hormona luteinizante, probablemente al incidir sobre la secreción de la hormona liberadora de las gonadotropinas en el HM. El hecho que no haya diferencias en la respuesta ovulatoria entre las hembras con timulina en el HM y tratadas con PMSG ó con PMSG+hCG, apoya esta interpretación. Apoyado por DGAPA-PAPIIT IN217301, DGEP y CONACyT. O-17 0-18 LA EXPRESIÓN DEL SOX9 COMO INDICADOR DEL ORIGEN DE LAS CELULAS DE SERTOLI EN LA CRESTA GENITAL. MerchantLarios, H. y Moreno-Mendoza, N.* Departamento de Biología Celular y Fisiología, Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México D.F. PAPEL DE LA COLECISTOQUININA EN LA RESPUESTA ELÉCTRICA DEL NÚCLEO DEL TRACTO SOLITARIO EN OVEJAS RECIÉN NACIDAS. Guevara-Guzmán, R., Poindron, P+., Lévy, F*++., Andre, J*+++., y Nowak, R*++. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, +Centro de Neurobiología, UNAM ++ CNRS/INRA URA 1291, Nouzilly, +++ Faculté des Sciences et Techniques Saint Jérôme, F-13397 Marseille Cedex 13, France. Aunque el factor determinante del testículo (el gen Sry) se caracterizó a principio de los años noventa, la cascada de expresión de genes que regula y su correlación con los cambios morfogenéticos responsables de la diferenciación testicular están todavía por elucidarse. En contraste con el Sry característico de los mamíferos, el gen Sox9 se ha conservado en todos los vertebrados siendo necesario para la diferenciación de las células de Sertoli. En nuestro laboratorio realizamos un estudio para detectar la expresión de la proteína SOX9 en la cresta genital indiferenciada inmediatamente antes de la diferenciación morfológica del testículo del ratón. El estudio se realizó en cortes seriados de embriones transgénicos que expresan la GFP los días 10.5-11.5 post coitum. Anticuerpos contra laminina y conexina 43 se usaron para ubicar el componente epitelial en el contexto mesenquimático de la cresta genital. Se compararon las crestas genitales de machos y hembras genéticas con respecto al establecimiento del componente epitelial y se detectó la ubicación en el tiempo y espacio de las células SOX9 positivas. Nuestros resultados mostraron que el componente epitelial se establece en machos y hembras de manera similar con respecto al depósito de laminina y de uniones comunicantes que incluyen a la proteína conexina 43. La expresión de SOX9 fue evidente en células mesenquimáticas ubicadas en la base del mesenterio intestinal y en el mesonefros. El componente epitelial inicial en cambio, no mostró células SOX9 positivas en ninguno de los dos sexos. En los machos genéticos SOX9 inició su expresión en algunas células en el interior del componente epitelial a una o dos células de distancia del epitelio celómico de la cresta. Con respecto a la distribución cefalo-caudal, las células que expresan SOX9 se localizaron inicialmente en el centro, después en la región cranial y finalmente en el extremo caudal. Los resultados demuestran que la gónada indiferenciada tiene un patrón similar en machos y hembras. Sugieren que dicho patrón establece un contexto celular de tipo epitelial que “permite” la expresión del Sox9. Comparando con el patrón de expresión del Sry reportado por otros autores, nuestros resultado indican que el Sox9 es un blanco directo del factor determinante del testículo. Nuestro grupo ha demostrado que las ovejas recién nacidas que ingieren calostro, se incrementan los niveles plasmáticos de colecistoquinina (CCK) y la oveja desarrolla una preferencia por la madre.. En este trabajo estudiamos la vía por la cual la CCK puede activar estructuras relacionadas con el desarrollo de ésta preferencia. Utilizando técnicas electrofisiológicas, registramos la actividad de 120 neuronas en el núcleo del tracto solitario (NTS) desde anterior 3.0 mm rostral al óbex hasta 3 mm caudal al mismo. Se estimuló el nervio vago (NV) a nivel cervical, se hizo distension gástrica (DG) con un balón y se administró CCK i.v. Solamente analizamos las neuronas que hubieran estado localizadas en el NTS y que hubieran respondido a los tres estímulos. Los resultados mostraron que de 60 neuronas que respondieron con incremento en la frecuencia de descarga a la estimulación del NV y a la DG sólo 54 respondían con incremento a la estimulación del NV. De las 40 neuronas de 60 que disminuían su frecuencia de descarga a DG y administración de CCK, solo 32 eran inhibidas por la estimulación de NV. 11 neuronas de 19 que respondieron a la DG y a la administración i.v. de CCK no respondían a la estimulación del nervio vago. La administración de 2-NAP (bloqueador de receptores CCK-A) abolió las respuestas a la administración de CCK y DG y atenuó la respuesta de la estimulación vagal. Los resultados son consistentes con la idea que la CCK actúa directamente sobre los mecanoreceptores vagales localizados en el estómago y el NTS está actuando como una vía de paso de las proyecciones a estructuras como la amígdala probablemente responsables de la preferencia materna por la cría recién nacida. Apoyado por ECOS-M98-SO4 y DGAPA-209999. O-20 O-19 + + CARACTERÍSTICAS CINETICAS DEL INTERCAMBIADOR K /H DE SINAPTOSOMAS. Sanchez-Armass, S. *Ortega, F. y *Gonzalez J. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de San Luis Potosi,SLP 78230, Mx. Tel:(48) 2623-45 ext 27;Fax:(48)1769-76; armass@uaslp.mx MEDICIÓN DE LOS CAMBIOS DE LA [Ca2+] DEL RETÍCULO SARCOPLÁSMICO ([Ca2+]RS) EN CÉLULAS AISLADAS DEL MÚSCULO LISO. Gómez-Viquez, L.* González, A.* García, Ubaldo. y Guerrero-Hernández, A.* Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Depto. de Bioquímica del CINVESTAV-IPN, México, D.F. Previamente hemos propuesto que en la membrana plasmática de las terminales nerviosas presinápticas se encuentra un intercabiador K+/H+ que tendría una función relevante en la regulación del pH citosólico durante condiciones de actividad sináptica incrementada, en las que se acumula K+ en la hendidura sináptica. En sinaptosomas cargados con piranina (indicador fluorescente de pH) se evaluó la recuperación del pH citosólico en respuesta a cargas ácidas variables, en medios con varias [K+]o. Aumentos en la magnitud en la carga ácida (150 nM H+) reducen en forma significativa el Km para el K+o (38.7 ±12.4 vs 62.3 ± 15.3 mM), sin modificar la Vmax (0.145± 0.074 upH/min). Resultado que sugiere en el intercambiador K+/H+, la presencia de un sitio alostérico intracelular para H +, que aumenta la afinidad del transportador por el K +o. Reversibilidad. Los sinaptosomas pre-equilibrados en una solución 0Na+0K+ (pH basal 0.15 upH mas ácido que el control), sometidos a una carga ácida y transferidos a 140 mM de KCl, duplicaron la velocidad y magnitud de la recuperación respecto al control. Lo anterior como resultado del aumento en el gradiente entrante de K+. En los sinaptosomas pre-equilibrados en K+ 140 mM (pH basal mas alcalino que el control ca~0.1 upH) y resuspendidos en la solución 0Na+ -0K+ después de la carga ácida, se inhibió la recuperación en 0Na+-0K+ por ~ 45%, lo que sugiere la inversión del intercambiador K+/H+, aunque la capacidad de mover H + en cualquier dirección no parece ser simétrica. En conclusión, la recuperación de una carga ácida en K +o elevado, refleja la interacción de dos sistemas de transporte modulados por la [H+]i, el intercambiador K+/H+ y un mecanismo alcalinizante, aún no identificado, que es independiente de Na+ y K+ externos. Apoyado por CONACyT 29212N y C02FAI-04-5.10 a SSA. El retículo sarcoplásmico (RS) participa en el ciclo contracción-relajación de las células musculares al liberar Ca2+, vía la activación de los receptors de IP3 (RIP3) o de rianodina (RyR), y también por recapturar el Ca2+ citoplásmico mediante las ATPasas de Ca2+ (SERCAs). Aunque la importancia de la liberación y recaptura de Ca2+ por el RS está ampliamente documentada en trabajos en que se ha medido la [Ca2+] citoplásmica ([Ca2+]i), para complementar estos datos es necesario determinar también la [Ca2+] dentro del RS ([Ca2+]RS). Nosotros medimos la [Ca2+]RS en células aisladas de músculo liso de la vejiga urinaria del cobayo con el indicador de Ca2+ de baja afinidad, Mag-Fura-2 (MF). Nuestros resultados fueron los siguientes: la cafeína, un agonista de los RyRs, indujo una caída transitoria de la señal del MF, cuya recuperación requirió la actividad de las SERCAs. Lo cual sugiere que la señal del MF proviene principalmente del RS. Además, se observó que dicha caída fue aproximadamente 2 veces mayor cuando las SERCAs se inhibieron previamente con tapsigargina. Esto sugiere que las SERCAs limitarian la disminución de la [Ca2+]RS, al recapturar Ca2+ durante el proceso de liberación. Sin embargo, ésta no pareciese ser la explicación por tres razones: 1) La densidad de SERCAs en músculo liso no es suficientemente grande, como para contrarrestar los flujos de Ca2+ a través de los RyRs. 2) La recuperación de la señal del MF debería ser más rápida que la caída, lo cual no se observó. 3) Aún cuando la disminución de la señal de MF es mayor con las SERCAs inhibidas, el impacto que tiene la cafeína en la [Ca2+]i es menor. Lo anterior implica que la inhibición de las SERCAs resulta en una menor liberación de Ca2+ inducida por la cafeína. En conjunto, nuestros datos sugieren que la actividad de las bombas SERCA es importante para aumentar la disponibilidad de Ca2+ en el RS durante el proceso de la liberación de Ca2+, pero este efecto no depende directamente del transporte de Ca2+. O-21 O-22 LA ACTIVACIÓN DE RECEPTORES A HISTAMINA H3 INHIBELA LIBERACIÓN DE GLUTAMATO EN SINAPTOSOMAS DEL HIPOCAMPO DE LA RATA REGULANDO CANALES DE CALCIO ACTIVADOS POR VOLTAJE TIPO N Y P/Q. MolinaHernández, A.*, Sierra, J.J.*, y Arias-Montaño, J.A. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, D.F. REGISTRO DE VARIACIONES DE CALCIO INTRACELULAR EN REBANADAS DE HIPÓFISIS DE RATÓN. Sánchez C.*, Fiordelisio T.* y Hernández-Cruz A. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. Recientemente hemos mostrado que la activación de receptores a histamina H3 inhibe la entrada de calcio y la liberación de glutamato inducidas por despolarización. El objetivo del presente trabajo fue determinar cuáles canales de calcio activados por voltaje son regulados por la activación de dichos receptores. En sinaptosomas del hipocampo de la rata la liberación de glutamato inducida con 4-aminopiridina (4-AP; 4 mM) fue inhibida por immepip (300 nM), un agonista selectivo H3 y este efecto fue revertido por el antagonista H3 tioperamida (100 nM). La liberación del neurotransmisor fue también inhibida por ω-conotoxina MVIIA y por ω-agatoxina TK; sin embargo, el efecto del immepip no fue aditivo con el de las toxinas. Nuestros resultados indican que los receptores H3 regulan la liberación de glutamato controlando la apertura de canales de calcio activados por voltaje pertenecientes a los tipos N y control Liberación de glutamato ( fluorescencia relativa ) 16 nimodipina 5 µM 12 AgaTK 10 nM immepip 1 µM 8 4-AP CTX 1 µM AgaTK 300 nM 4 Las células adenohipofisiarias presentan regulación autócrina y parácrina de secreción hormonal, la cual depende de elevaciones periódicas en la concentración intracelular de calcio [Ca2+]i. Sin embargo, la dinámica de [Ca2+]i se ha estudiado casi exclusivamente en células adenohipofisiarias en cultivo primario, condición en la que se altera la comunicación intercelular del tejido. Estre trabajo intenta estudiar las interacciones autócrina, parácrina y eléctrica entre células adenohipofisiarias mediante el registro de [Ca2+]i. Para ello, desarrollamos una técnica que permite la obtención de rebanadas de adenohipófisis de ratón árabe y el registro simultáneo en tiempo real de [Ca2+]i en células individuales. La adenohipófisis es extraída por disección quirúrgica y embebida en un gel de agarosa al 2%. para ser cortada en rebanadas de 100 µm con un vibrátomo. Las rebanadas fueron mantenidas a 22 OC en una solución Tyrode burbujeada con 95% O2 y 5% de CO2 e incubadas con el indicador fluorescente para calcio fluo-4 AM (20 µM) y 5% de ácido plurónico durante 40 minutos. El registro de variaciones espontáneas de [Ca2+]i en células individuales de la rebanada se realizó empleando luz de excitación de 488 nm. La emisión se colectó a 510 nm. Se utilizaron dos sistemas de registro. El primero emplea una iluminación con lámpara de Hg, y captura y análisis de imágenes con una cámara CCD gobernada con el programa Axon Imaging 2.2. El segundo es un sistema confocal ultra rápido (Nipkow, Yokogawa) con iluminación láser y una cámara digital enfriada de alta sensibilidad (Hamamatsu 4880-80). Nuestros resultados muestran diferentes tipos de oscilaciones espontáneas de [Ca2+]i, tanto en la forma de ondas lentas como de espigas más rápidas atribuibles a actividad eléctrica. En algunos casos estas fluctuaciones se presentaron sincronizadas en varias células contiguas. Subsidiado por donativos de DGAPA IN 210401 y CONACYT 34329-N. 0 0 100 200 300 400 500 600 Tiempo ( segundos ) O-23 O-24 VARIACIONES ESPONTANEAS DE Ca2+ INTRACELULAR EN CELULAS CROMAFINES DE RATA REGISTRADAS MEDIANTE MICROSCOPIA CONFOCAL CON BARRIDO LASER DE MULTIPLES RAYOS. Hernández-Cruz A., Millán-Aldaco D.A.* y Jiménez N.*, Departamentos de Biofísica y Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. FROM MESENCHYMAL PROGENITORS TO BRAIN CELLS. Tanja Zigova1,2, Shijie Song3,4, Alison E. Willing1,2, Jennifer E. Hudson1,2, N. Chen1,2, P.R. Sanberg1,2, J. Sanchez-Ramos3,4. Center for Aging and Brain Repair1, Departments of 2Neurosurgery, 3Neurology, USF College of Medicine, and 4James A. Haley VA Hospital, Tampa FL, USA Las células cromafines de rata en cultivo muestran elevaciones espontáneas de la concentración intracelular de Ca2+ [Ca2+]i que resultan de la actividad de canales de Ca2+ dependientes del voltaje y de canales de liberación intracelular de Ca2+. Previamente (Jiménez y Hernández-Cruz, EJN 13:1487-1500; 2001), mostramos que la exposición crónica al factor de crecimiento neuronal (NGF) se acompaña de la desaparición paulatina de estas oscilaciones. Por otro lado, Verdugo y cols. demostraron que la exposición discontínua a un campo magnético (CM) oscilatorio de baja frecuencia produce cambios funcionales y morfológicos similares a los provocados por NGF. En este trabajo, examinamos el efecto de la exposición continua (1 a 15 días) a un CM estacionario sobre las oscilaciones de Ca2+ en células cromafines en cultivo. También se examinaron células control y expuestas a NGF (100 ng/ml). El CM se produjo mediante un imán permanente (5 mm diam., densidad de flujo magnético = 10800 Gauss) colocado en el fondo del pozo de cultivo. Las células fueron cargadas con el indicador fluorescente para Ca2+ fluo-4 AM (2 µM), y el registro del [Ca2+]i en células individuales se obtuvo mediante un sistema confocal ultra rápido (Yokogawa) con iluminación láser de múltiples rayos generados por un disco giratorio Nipkow y una cámara digital rápida de alta sensibilidad (Hamamatsu 4880-80). Nuestros resultados muestran oscilaciones espontáneas de [Ca2+]i, tanto en la forma de ondas lentas como de espigas más rápidas atribuíbles a actividad eléctrica. En > 50% de células contiguas en los cultivos de 1 a 3 días, las oscilaciones se presentaron sincronizadas. Las oscilaciones desaparecieron gradualmente en las celulas expuestas a CM, de manera similar a las tratadas con NGF. Subsidiado por donativos de DGAPA (UNAM) IN 210401 y CONACYT 34329-N. Proliferation and differentiation of neural stem cells (NSC) derived from embryonic or adult central nervous system are highly dependent on the interplay between intrinsic and extrinsic factors that drive NSCs to differentiate into cell of a specific neural lineage. Recent studies, however, have demonstrated that cells outside the brain can be challenged through instructive environmental signals and may adopt neural fates. Our laboratory is focused on transdifferentiation potential of two cell sources: bone marrow (BM)- and human umbilical cord blood (HUCB)derived cells. In a series of in vitro studies we demonstrated that both cell types respond to exogenous soluble factors by acquiring new morphological and antigenic characteristics (Sanchez-Ramos et al., 2000, 2001). Grafting experiments (Zigova et al., 2002) utilizing predifferentiated human umbilical cord blood cells revealed that a small population of these cells survived in the microenvironment of the developing (non-immunosuppressed) rodent brain. Confocal microscopy confirmed that few glial and neuron-like cells within the subventricular zone originated from HUCB. Our current studies employing similar transplantation paradigm but utilizing murine GFP-tagged BM cells showed that these cells survived well within the neonatal rat brain and we found some of green-labeled, presumably BM-derived cells in relatively distant areas from the injection site. As controls we utilized GFP-labeled subventricular zone-derived precursors with well-described migratory behavior and phenotypic properties attributable to this transplantation paradigm. Immunocytochemical analyses to identify phenotype of BM-derived cells within various brain regions are in progress. In addition, our efforts are aimed at identifying the most primitive population of cells from both sources (BM and HUCB) that would rapidly expand in vitro and respond to instructive signals from the developing rodent brain. O-25 O-26 MECANISMO DE REGULACIÓN DEL PROCESAMIENTO ALTERNATIVO DEL pre-mRNA DE LA PROTEÍNA DE UNIONES ESTRECHAS ZO-1. Martínez Contreras R.D.∗ (avalado por Martínez Fong Daniel) y Valdés J.∗ Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Departamento de Bioquímica. CINVESTAV-IPN. México, D.F. LA PROTEÍNA DE LA UNIÓN ESTRECHA ZO-2 SE ASOCIA CON LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN: FOS, JUN y C/EBP. Betanzos, A.∗, Huerta, G.M.∗, López-Bayghen, E.∗ y González-Mariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias y Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV, México, D.F. La unión estrecha (UE) regula la difusión a través de la ruta paracelular y mantiene la polaridad celular en epitelios. La proteína citoplásmica ZO-1 es el eslabón entre el citoesqueleto de actina y las proteínas membranales de la UE. El grado de sellado de la UE correlaciona con la expresión de las isoformas ZO-1α+ y ZO-1α-, generadas por procesamiento alternativo del dominio α (de 240 pb). El procesamiento alternativo está regulado tanto por elementos en cis (presentes en el pre-mRNA) y por factores celulares (en trans). La regulación del splicing alternativo del pre-mRNA de ZO-1 se estudió mediante ensayos de splicing in vivo (trasfección y RT-PCR) de un minigen de ZO-1 (exon α, exones adyacentes y los intrones entre ellos) y de formas deletadas del mismo. Además de sitios putativos para enhancers y silenciadores del procesamiento, y sitios de unión a factores de splicing, el minigen contiene los elementos necesarios para el procesamiento (aunque aquellos contiguos al exon α son más débiles). El minigen generó ambas isoformas en células epiteliales, pero en células de orígen neuronal sólo se generó la isoforma α-, sugiriendo la participación de factores epiteliales. El análisis delecional puso en evidencia que el exon α se incluye por la participación antagónica de un elemento potenciador del procesamiento (ESE) en el exon 2 y de un elemento silenciador (ESS) en el exon 1 en conjunto con factores celulares. Por medio de ensayos de entrecruzamiento y de competencia se identificaron proteínas de 35 y 65 kDa que reconocen de manera específica al ESS, y otras de 20 y 50 kDa que se unen al elemento ESE cuando se utiliza extracto nuclear (EN) de células HeLa. Dicho patrón cambia a medida que se agrega EN de células MDCK, corroborando la participación de factores epiteliales tejidoespecíficos. ZO-2 es una proteína subcortical de la unión estrecha (UE) que pertenece a la familia MAGUK. Recientemente hemos encontrado que en cultivos subconfluentes de células epiteliales MDCK, ZO-2 se distribuye tanto en la UE como en el núcleo. ZO-1, otra MAGUK de la UE, también se expresa en el núcleo y se asocia al factor de transcripción ZONAB. Con estos antecedentes y considerando que los miembros de la familia MAGUK poseen dominios de interacción proteína-proteína, investigamos si ZO-2 se asocia a factores de transcripción. Mediante la generación de 2 proteínas de fusión de ZO-2: GST-3PSG (región media) y GST-AP (porción carboxilo terminal), demostramos por ensayos de arrastre y en geles de retardamiento, que ambas regiones de ZO-2 interactúan con los factores Fos, Jun y C/EBP. También encontramos que Fos, Jun y C/EBP co-inmunoprecipitan con ZO-2 derivada tanto del núcleo como de la UE. Este hallazgo se comprobó por inmunofluorescencia, al observarse que los factores de transcripción co-localizan con ZO-2 en ambos sitios. Con el fin de determinar si la interacción de ZO-2 regula la expresión génica, células MDCK se co-transfectaron con el cDNA de ZO-2 y una construcción en la que el gen reportero CAT está bajo el control de AP-1. Se encontró que la expresión de CAT es inversamente proporcional a la cantidad de ZO-2 transfectado. Por tanto concluimos que la proteína de la UE ZO-2, tiene la capacidad de asociarse a factores de transcripción y modular la expresión génica. 0-27 O-28 ACTIVACION DE LA PROTEINA CINASA C POR MELATONINA: PARTICIPACION EN LAFORMACION DE FOCOS DE ADHESION EN LAS CELULAS MDCK. RamírezRodríguez, G.B.* 1,2 Hernández-Gutiérrez, M.E.*1 y Benítez-King, G.1 Departamento de Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente Muñiz”, 2. Departamento de Biología Celular, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados. México,D.F GLICOPROTEINAS INHIBIDORAS DEL CRECIMIENTO NEURITICO PRODUCEN DISTINTOS PATRONES DE REGENERACIÓN EN NEURONAS IDENTIFICADAS. FloresAbreu N.*, Fernández de-Miguel F. Depto. de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. La melatonina (MEL) es una hormona que causa la reorganización del citoesqueleto. En las células de neuroblastoma N1E-115 induce el rearreglo de los filamentos intermedios de vimentina a través de la activación de la proteína cinasa C (PKC). En las células de origen renal MDCK, la MEL modifica la organización de los microfilamentos (MFs), efecto que se previene en presencia de inhibidores específicos de la PKC, de ahí que se ha sugerido que la hormona al estimular a la PKC modifica la organización de los MFs. Otro sustrato de la PKC asociado a la actina y que actúa como organizador de los MFs, es la vinculina, proteína que al ser fosforilada por la PKC se ensambla con los MFs para formar los focos de adhesión (FA). En este trabajo estudiamos en las células MDCK los efectos de la MEL sobre la codistribución de los MFs y vinculina, y sobre la fosforilación de la vinculina, como un índice de la formación de los FA. También, en una preparación de MFs in situ se estudiaron los cambios en la organización de éstos en presencia de un anticuerpo contra la isoforma alfa de la PKC. Los resultados mostraron que la MEL aumentó la formación de fibras de tensión, la fosforilación de la vinculina (40%), y la cantidad de esta proteína distribuida en los FA. El anticuerpo anti-PKC alfa bloqueó la formación de fibras de tensión inducidas por la MEL. Estos resultados confirman que la MEL actúa a través de la activación directa de la PKC alfa y que es a través de este mecanismo que la hormona causa el aumento en la fosforilación de la vinculina, la acumulación de esta proteína en los FA y el aumento en la formación de los contactos de adhesión. Apoyado por CONACYT donativo No 31782-N. Durante el desarrollo y la regeneración del sistema nervioso, las moléculas de matriz extracelular y la identidad neuronal interaccionan en la regulan el crecimiento neurítico. En este trabajo exploramos el papel de glicoproteínas inhibidoras en la ECM en la regeneración neurítica. Nuestro estudio se realizó en neuronas adultas identificadas de sanguijuela en cultivo, sembradas en la matriz extracelular nativa del interior de las cápsulas ganglionares. Hicimos experimentos de perturbación bloqueando el efecto de glicoproteinas inhibidoras de crecimiento preidentificadas mediante la lectina de cacahuate (PNA). Analizamos la longitud neurítica total, el número de neuritas principales, los puntos de ramificación. Las neuronas de Retzius, que en este substrato crecen profusamente, las AP que producen un patrón bipolar similar al del día 9 del desarrollo embrionario y las motoneuronas AE de crecimiento restringido. Las AP y AE crecen profusamente en concanavalina A y en laminina como substratos crecieron profusamente. Las neuronas de Retzius, no se afectaron por la presencia de PNA en el medio de cultivo; sin embargo las neuronas AP y las motoneuronas AE incrementaron sus neuritas principales en 150 y 217%, los puntos de ramificación en 200 y 0 %, y su longitud neurítica total en un 203 y 293.6 % respectivamente. La lectina PNA como substrato no tuvo efecto en los patrones de crecimiento de ningún tipo celular. Estos resultados sugieren que las diferencias en los de patrones de ramificación de distintos tipos neuronales están influenciados por el balance entre glicoproteinas promotoras e inhibidoras del crecimiento. Trabajo financiado por donativo de Human Frontiers Science Program a F.F.M. F.A.N. recibe beca de fundación UNAM (Probetel) O-29 O-30 INTERACCIONES DEL AMPc Y DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO (GDNF, BDNF) SOBRE LA SOBREVIVENCIA Y EL CRECIMIENTO DE NEURONAS DOPAMINÉRGICAS MECENSEFÁLICAS IN VITRO. Lara, J.* (avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Kusano, K.*, House, S.* y Gainer, H.* National Institute of Neurogical Disorders and Stroke, National Institute of Health, Bethesda, MD, USA, and Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. México. EFECTO DEL FRAGMENTO N-TERMINAL DE 16 kDa DE LA PROLACTINA SOBRE LA PRODUCCION DE OXIDO NITRICO POR EL ENDOTELIO VASCULAR. Gonzalez, C.*, Corbacho A.M.*, Martínez de la Escalera, G. y Clapp, C. Instituto de Neurobiología, Campus UNAM-Juriquilla, 76220, Querétaro, Qro. Neuronas dopaminérgicas (DA) mesencefálicas de rata de 2 días de nacidas fueron disociadas y cultivadas por 14 días, en la ausencia y presencia de dibutiril adenosin monofosfato cíclico (dbAMPc), factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF), y/o el factor neurotrófico derivado de la glia (GDNF) solos y en varias combinaciones. Las neuronas DA fueron identificadas por inmunocitoquímica, utilizando anticuerpos contra la tiroxina hidrolasa (TH-IR). Cuando el medio de incubación contenía ya sea 100 µM de db-AMPc, 10 ng/ml de GDNF o 50 ng/ml de BDNF por 14 días no hubo un incremento significativo en la sobrevivencia de células TH-IR. El área del soma neuronal TH-IR no cambió con la aplicación de BDNF, pero fue significantemente disminuido con GDNF y más importantemente con dbAMPc después de 14 días de tratamiento. Después de 14 días el crecimiento de las neuritas fue ligeramente incrementado por BDNF, no hubo cambios significativos con GDNF, pero fue significantemente reducido por dbAMPc. En contraste, la aplicación inicial por tres días de dbAMPc causó importante incremento en la sobrevivencia y en el crecimiento neuronal. El tratamiento combinado de GDNF y BDNF incrementó la sobrevivencia de células TH-IR y la adición de dbAMPc por 3 o 14 días aumentó aún más la sobrevivencia y el crecimiento. Estos resultados muestran que los efectos tróficos y de sobrevivencia de GDNF y BDNF en neuronas DA mesencefálicas in vitro son importantemente incrementadas por un tratamiento inicial (3 días) de dbAMPc. La formación de nuevos vasos sanguíneos o angiogénesis determina la reparación de los tejidos en lesiones y procesos inflamatorios. Isoformas moleculares de la prolactina (PRL) pueden regular la angiogénesis y la inflamación a través de efectos directos sobre el endotelio vascular. El fragmento N-terminal de 16 kDa de la PRL (PRL 16K) inhibe la proliferación de células endoteliales inducida por el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), un mitógeno y factor de permeabilidad cuyas acciones involucran la producción de óxido nítrico (NO) por parte de las células endoteliales. En este trabajo investigamos si la PRL 16K inhibe el efecto del VEGF sobre la producción de NO por cutivos de células endoteliales de cordón umbilical bovino (BUVEC) y humano (HUVEC). El NO se determinó mediante la conversión de 3H-arginina a 3H-citrulina. En ambos tipos celulares el VEGF, en concentraciones crecientes (1-40 ng/ml) y por periodos variables (1-48 h), estimuló la producción de NO. La PRL 16K (5-100 nM) inhibió la producción de NO inducida por 1 h de tratamiento con VEGF y esta inhibición fue dos veces mayor en las HUVEC, que en las BUVEC. Estos resultados apoyan la hipótesis de que la prolactina 16K puede inhibir la angiogénesis a través de interferir con la síntesis de NO endotelial. Las acciones de la PRL 16K pueden involucrar mecanismos autócrinos. A través de marcar metabólicamente la síntesis protéica, encontramos que las HUVEC sintetizan y secretan una PRL 16K inmunorreactiva, y que anticuerpos anti-PRL capaces de inmunosecuestrarla estimulan la proliferación celular. (Auspiciado por PAPIIT-UNAM). O-31 O-32 LOCALIZACIÓN ULTRAESTRUCTURAL Y COEXISTENCIA DE ACETILCOLINA, NEUROTENSINA Y MET-ENCEFALINA EN BOTONES PRESINÁPTICOS DEL GANGLIO ESTELAR DEL GATO. González-Maciel A*£, Zetina M.E.* y Morales M.A. Dep. Biol. Cel. & Fisiol., Inst. Inv. Biomédicas UNAM, £M. Electrónica, INP. México D.F. INTEGRACIÓN SINÁPTICA EN NEURONAS ACOPLADAS ELÉCTRICAMENTE. García-Pérez E.*, Vargas-Caballero M.*, Minzoni A.* y Fernández de-Miguel F. Departamento de Biofísica, instituto de Fisiología Celular, UNAM. En los botones presinápticos de las neuronas preganglionares, localizados en los ganglios simpáticos, además del mediador principal acetilcolina (ACh), almacenado en las vesículas pequeñas claras (scv), se han encontrado, almacenados en las vesículas grandes de núcleo denso (LDCV), péptidos como la neurotensina (NT) y la metionina encefalina (m-ENK). Nosotros hemos presentado sin embargo, evidencia reciente de escasa coexistencia de ACh con estos péptidos en los botones presinápticos del ganglio estelar del gato (Jiménez et al, 2002), lo que sugiere la existencia de diferentes tipos de terminales colinérgicas, según sea el contenido y combinación de sus mediadores. En este trabajo revisamos por inmunocitoquímica y microscopía electrónica la localización ultraestructural y posible coexistencia de estos tres mediadores. Con simple y doble marcaje simultáneo de inmunoperoxidasa e inmunooro se encontró inmunorreactividad (IR) a la transferasa de acetil colina (ChAT), enzima de la síntesis de ACh, en abundantes botones presinápticos de sinapsis asimétricas, presente en su mayoría en las scv; asimismo se confirmó IRNT restringida a las LDCV e IRm-ENK restringida a LDCV en algunos botones y en ambas vesículas en otros. Los datos de doble marca confirmaron la escasa coexistencia de estos mensajeros, con una mayoría de botones IRChAT negativos a los péptidos; así como IR a los péptidos y negativos a ChAT. En los casos de coexistencia, ChAT se encontró en scv, NT en LDCV, y m-ENK preferentemente en scv. Estos hallazgos apoyan la tesis de subpoblaciones de botones presináticos ganglionares de acuerdo a los mediadores que almacenan, con la posibilidad incluso, de que algunos no IRChAT almacenen, posiblemente en scv, péptidos como la m-ENK. Analizamos la integración sináptica neuronas acopladas eléctricamente, en las que la corriente sináptica fluye de una neurona a la otra, contribuyendo a la producción de potenciales de acción. Nuestros experimentos fueron hechos en neuronas de Retzius de la sanguijuela. La frecuencia de disparo de las neuronas y la amplitud unitaria de los potenciales sinápticos excitadores (EPSPs) fueron inversamente proporcionales a la tasa de acople eléctrico. El acople eléctrico y los EPSPs se produjeron en 30-40 dendritas de 35-55 micras de longitud que surgieron del axón primario. Esto aunado a las variaciones cuánticas en las amplitudes de los EPSPs sugirió que cada dendrita produce únicamente eventos unitarios que se propagan a los axones primarios de ambas neuronas, donde ocurre la integración. La comparación entre la propagación de EPSPs naturales y artificiales producidos en el soma neuronal, mostró que la propagación de EPSPs de una neurona a otra depende de la constante de espacio (λ) y de la resistencia de acoplamiento (rc). Los valores de rc , estimados de la respuesta en frecuencia de las neuronas acopladas, variaron de 30 a 342 MΩ. Con altos valores de rc, se redujo el flujo de corriente a la neurona acoplada y se incrementó la impedancia dendrítica, con lo que la amplitud de los EPSPs locales aumentó. En la neurona acoplada, la reducción en la cantidad de corriente a valores altos de rc fue compensada con el incremento en la impedancia, por lo que la amplitud de los EPSPs se mantuvo constante. Estos resultados muestran que la resistencia de acoplamiento regula la frecuencia de disparo neuronal mediante la amplitud de los EPSPs y que con cualquier valor de rc, ambas neuronas integran los EPSPs producidos en la otra. Financiado por Human Frontiers Science Program. O-33 O-34 DISTINTOS MODOS DE INTEGRACION SINAPTICA EN NEURONAS ACOPLADAS ELÉCTRICAMENTE. VázquezZuñiga.Y.* García E.*, Minzoni A.*, y Fernández de Miguel F. Depto. de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. EFECTO DE LA EXPOSICIÓN PROLONGADA A OZONO EN PÁNCREAS. Gutiérrez-Moreno I., Rugerio-Vargas C., Vega-García I., Borgonio-Pérez G., Rivas-Arancibia S. Departamentos de Fisiología y Biología Celular y Tisular. Facultad de Medicina, UNAM. En este trabajo analizamos la integración de potenciales sinápticos producidos en diferentes sitios de neuronas acopladas eléctricamente. Nuestro trabajo fue hecho en células de Retzius de sanguijuela que están acopladas eléctricamente y reciben entradas sinápticas en distintas regiones de su árbol dendrítico. Combinando métodos electrofisiológicos y modelaje matemático encontramos que la distribución de EPSPs que regulan la frecuencia basal de disparo de estas neuronas es cuántica y probabilística y las entradas sinápticas estaban localizadas en las dendritas acopladas, a 4.5 micras de la sinapsis eléctrica. En contraste, las entradas sinápticas provenientes de neuronas mecanosensoriales y responsables del disparo a altas frecuencias se localizaron en dendritas no acopladas y en sitios distantes. Las maneras de integración de los EPSPs producidos por las diferentes entradas fueron analizadas generando potenciales sinápticos artificiales sincrónicos, asincrónicos, simétricos y asimétricos en ambas células y comparando sus efectos con las predicciones del modelo. Encontramos que: 1) cuando los sinápticos fueron simétricos y sincrónicos la amplitud de los sinápticos resultantes se incrementó, debido a que la corriente se propagó en una sola dirección. 2) cuando los sinápticos fueron asincrónicos (simétricos o asimétricos), la amplitud y la fase de caída se afectaron produciéndose una joroba cuya amplitud depende del intervalo entre EPSPs, mejorando la eficiencia de su propagación. Nuestros resultados muestran que una misma neurona acoplada eléctricamente puede tener varios modos de integración. Este trabajo fue financiado por un donativo de Human Frontiers Science Program a F.F.M. V.Z.Y. recibe beca de fundación UNAM (Probetel) El aumento en la producción de radicales libres que no pueden ser compensados por las defensas antioxidantes del organismo conlleva a un estado generalizado de estrés oxidativo. En nuestro laboratorio se han estudiado alteraciones ultraestructurales, fisiológicas y bioquímicas que causa la exposición aguda a ozono en el páncreas. Con el objetivo de estudiar los efectos de la exposición repetida a bajas dosis de ozono durante un tiempo prolongada llevamos a cabo el siguiente experimento: 56 ratas macho de la cepa Wistar de 250-300 g. alojadas individualmente en cajas de acrílico, con libre acceso al agua y comida. Los animales fueron divididos al azar en cuatro bloques experimentales cada bloque recibió uno de los siguientes tratamientos 1) control, expuestas a aire corriente; 2) expuestas a 0.25 ppm de ozono durante 1 semana; 3) expuestas a 0.25 ppm de ozono durante 15 días; 4) expuestas a 0.25 ppm de ozono durante un mes. El tiempo de exposición fue de 4 horas en cada grupo. 2 horas después de finalizada la última exposición a ozono, 4 animales fueron sacrificados por decapitación y se extrajeron sus páncreas para técnicas histológicas (Hematoxilina-eosina y Masson) e inmunohistoquímica (enolasa, sinaftofisina y S100) a los 10 animales restantes se les realizó una curva de tolerancia a la glucosa y se obtuvieron muestras de tejido pancreático para cuantificación de lípidos peroxidados. Las tinciones muestran células exócrinas lesionadas en relación con el tratamiento, algunos de los cambios observados son: aparición de vesículas intracitoplasmáticas que coalescen, halos perinucleares, y nucleolos prominentes. Se encuentra un aumento en la inmunorreactividad con S100, enolasa y sinaftofisina Los resultados muestran un aumento en los lípidos peroxidados y alteración de las curvas de tolerancia a la glucosa en relación con el tiempo de exposición. O-35 O-36 SENSIBILIDAD DE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA ESPERMÁTICA EN RATONES TRATADOS CON TETRAÓXIDO DE VANADIO (IV). Aragón M.A.* (avalado por Ayala Escobar María Elena) Altamirano L.M.* Ortiz M.R*. Cortés B.E.* Unidad de Investigación en Genética y Toxicología Ambiental. FES Zaragoza UNAM. Departamento de Ciencias de la Salud. Univesidad Autónoma Metropolitana Iztapalapa. México. D.F. POTENCIAL ESTRÉS OXIDATIVO EN FOCAS ANILLADAS. Zenteno-Savín, T. y R. Elsner*. Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C., Acuacultura y Biotecnología Marina, La Paz, Baja California Sur, México, y University of Alaska Fairbanks, Fairbanks, Alaska, U.S.A. La exposición de machos a substancias químicas entre las que se encuentran compuestos metálicos puede ocasionar alteraciones en la cantidad y en la calidad de los gametos producidos durante la espermatogénesis. Además de las evaluaciones de rutina como movilidad, conteo y morfología realizados rutinariamente en las muestras de semen, otro componente sensible del espermatozoide es el ácido desoxiribonucleico (ADN) contenido en su cabeza. En el ensayo de la estructura de la cromatina espermática (EECE) se mide por citometría de flujo la sensibilidad del complejo ADN/protaminas a la desnaturalización en un medio ácido. En el EECE el ADN se marca con el fluorocromo naranja de acridina, y la extensión de la desnaturalización del ADN se cuantifica para cada célula mediante un índice obtenido a partir de las fluorescencias asociadas al ADN. El objetivo del presente trabajo es evaluar por citometría de flujo la estabilidad de la cromatina espermática en ratones tratados con tetraóxido de vanadio, un compuesto que induce toxicidad en el sistema reproductor. El análisis de los resultados no mostró diferencias significativas en los índices de los animales tratados durante 10 ó 60 días con tetraóxido de vanadio, aunque sí entre las distintas fluorescencias evaluadas. Las diferencias obtenidas entre las intensidades de fluorescencia derivadas del ensayo posiblemente tengan su origen en los procesos de compactación y estabilización de la cromatina espermática. Trabajo apoyado por: CONACYT 25417-M, DGAPA IN 212701, FOMES 98-35-28. Para bucear las focas dependen de ajustes cardiovasculares que resultan en vasoconstricción frecuente de numerosos órganos (isquemia). Con la primera respiración al término del buceo, la reperfusión permite la eliminación del bióxido de carbono (CO2) acumulado y la recarga de las reservas de oxígeno (O2). La reintroducción de sangre oxigenada aumenta el potencial para la producción de especies reactivas de O2 (ROS) y la posibilidad de sobrepasar las defensas antioxidantes. Este estudio se enfoca en las posibles respuestas adaptativas que permiten a los tejidos de foca anillada (Phoca hispida) tolerar ciclos repetitivos de isquemia y reperfusión y así protejerlos del insulto oxidativo. Se obtuvieron muestras de corazón, riñón y músculo de foca anillada mediante la cooperación de los cazadores de subsistencia en Barrow, Alaska. Para efectos comparativos, se obtuvieron tejidos de cerdo común (Sus scrofa). La producción de radical superóxido (O2.-), peroxidación de lípidos (determinada como la presencia de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico, TBARS) y la capacidad antioxidante (AOX) se cuantificaron por métodos espectrofotométricos. En contra de lo esperado, los tejidos de cerdo tuvieron menor O2.- en comparación con los tejidos de foca anillada. Sin embargo, los niveles de TBARS no fueron proporcionalmente mayores en tejidos de foca anillada, quizá porque éstos presentan mayor AOX. Los resultados sugieren que en focas los mecanismos de defensa contra isquemia/reperfusión asociada al buceo pueden depender de la producción de O2.-, de forma similar al efecto protector del preacondicionamiento experimental, o bien de una mayor capacidad para neutralizar ROS, como lo sugiere la mayor AOX en tejidos de foca anillada. O-37 O-38 EFECTO VASODILATADOR DEL ÓXIDO NÍTRICO EN ARTERIAS PULMONARES DE LECHÓN: MODULACIÓN POR EL ESTRÉS OXIDATIVO Y EVOLUCIÓN CON LA EDAD. LópezLópez, J.G*. (avalado por Eguibar-Cuenca J.R.), Pérez-Vizcaíno F*., Cogolludo A.L.*, Zaragozá-Arnáez F.*, Ibarra M.*, Tamargo J*. Facultad de Ciencia Químicas, BUAP-México y Facultad de Medicina, UCM-España. ANÁLISIS ULTRAESTRUCTURAL DEL EFECTO DE LA L-DOPA EN EL NUCLEO CAUDADO DE RATA LESIONADO CON 6 HIDROXIDOPAMINA (6-OHDA). Gutiérrez Valdez A.L*; (avalado por Selva Rivas Arancibia), Ordoñez Librado JL*, Montiel Flores E*, Colín-Barenque L*, Aley Medina P*, Espinosa Villanueva J.*, Fortoul T.I*, Machado-Salas J.* y Avila-Costa. M.R*. UIICSE Neurociencias. Facultad de Medina, UNAM. UCLA. En la hipertensión pulmonar persistente neonatal, la terapia con óxido nítrico inhalado (NOi) en muchos casos puede ser inefectiva, debido a la interacción de este gas con especies reactivas de oxígeno como el O2-. En el presente estudio analizamos la influencia de la edad postnatal y los cambios en el nivel de estrés oxidativo sobre la vasodilatación pulmonar in vitro inducida por el NO y los donadores de NO, nitroprusiato de sodio (SNP) y SNitrosol N-acetil-D, L-penicilamina (SNAP). Se utilizaron arterias pulmonares de lechones de 1 día y de 2 semanas de edad. Los anillos arteriales se contrajeron con el análogo de Tromboxano A2 (U46619, 10-7 M) y se realizaron las correspondientes curvas dosis-respuesta. La relajación inducida por el NO aumentó con superóxido dismutasa (SOD, 100 U/mL), mientras que se inhibió con el ácido dietil-ditiocarbcámico (1mM). Sin embargo, ninguno de estos agentes modificó la vasodilatación inducida por el SNP. La respuesta a NO fue mayor en arterias de animales de 2 semanas de edad (pIC30=7.5 ± 0.2, p<0.05) con respecto con las de 1 día de edad (pIC30= 6.4±0.2 ). La aspirina (10-5 M) y el meclofenamato (10-5 M) potenciaron específicamente la respuesta a NO en preparaciones de 1 día (pIC30= 7.5±0.8 y pIC30= 7.4±0.9 respectivamente p<0.05). Estos datos sugieren el NO y los donadores de NO, SNAP y SNP, difieren en su distribución regional de la liberación del NO, influyendo en la susceptibilidad para la inactivación por el anión superóxido. Por otra parte, la reducción del efecto de vasodilatador del NO durante los primeras horas de vida extrauterina esta relacionada con la actividad de la ciclooxigenasa. Financiado por CICYT (SAF99/0069) y CAM (08.4/0019/1998) La L-Dopa es el principal fármaco que se utiliza en el tratamiento la enfermedad de Parkinson. Nuestro objetivo fue analizar el efecto de la LDOPA en el núcleo caudado y en la substancia nigra de rata expuesta a un modelo de enfermedad de Parkinson con 6-OHDA. Se utilizaron 18 ratas macho, 12 se lesionaron con 8 µg de 6-OHDA. El grupo control (n=6) fue inyectado con 4 µl de solución vehículo. Se evaluaron con apomorfina (0.25 mg/Kg i.p.). 6 ratas fueron tratadas 15 mg/Kg de LDOPA durante 30 días, 6 ratas lesionadas sin tratamiento fueron mantenidas durante el mismo tiempo. Las ratas fueron sacrificadas y se tomaron fragmentos del núcleo caudado ipsi y contralateral a la lesión para el análisis ultraestructural: Medición y características de 50 botones presinápticos. Y la substancia nigra para la técnica de inmunocitoquímica para TH donde se determinó el número de neuronas dopaminérgicas. Nuestros resultados mostraron que el grupo lesionado sin tratamiento presentó alteraciones ultraestructurales significativas en comparación con el grupo control; lo mismo se observó en las ratas tratadas con L-DOPA. Con respecto al número de células se observó una disminución significativa tanto del grupo lesionado sin tratamiento como del grupo tratado con L-DOPA en comparación con el grupo control. Por lo que consideramos que el tratamiento con L-Dopa no modifica las alteraciones ultraestructurales e inmunocitoquímicas observadas con este modelo experimental. Apoyado por P.O.S. Institute. O-39 O-40 COMPARACIÓN ULTRAESTRUCTURAL DEL EFECTO DE LA L-DOPA Y BROMOCRIPTINA EN NÚCLEO CAUDADO DE RATA LESIONADA CON 6-HIDROXIDOPAMINA (6-OHDA). Ordóñez-Librado JL*, (avalado por Selva Rivas Arancibia) Gutierrez Valdez A*, Montiel-Flores E*, Colín Barenque L*, Espinosa Villanueva J*, Aley Medina P*, Jesús Machado Salas*, Fortoul T.I.* y Avila-Costa MR. Laboratorio de Neuromorfología, FES Iztacala, Facultad de Medicina UNAM. UCLA ANÁLISIS MORFOMÉTRICO DE NEURONAS SEROTONÉRGICAS EN EL SEXTO GANGLIO ABDOMINAL DEL ACOCIL Cherax quadricarinatus. Mendoza-Zamora, E. *, Rodríguez-Sosa, L, y Aréchiga, H. .División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. El modelo de 6-OHDA produce la depleción selectiva de las neuronas dopaminérgicas de la vía nigroestriatal, células que mueren en la enfermedad de Parkinson Objetivo: comparar los efectos de la L-DOPA y la Bromocriptina, sobre la ultraestructura del núcleo caudado, y determinar el número de neuronas dopaminérgicas de la substancia nigra de ratas lesionadas con 6-OHDA. 24 ratas macho de la cepa Wistar, 18 se lesionaron con 8 µg de 6-OHDA. El grupo control (n=6) fue inyectado en el mismo sitio con 4 µl de solución vehículo. Las ratas se evaluaron con apomorfina (0.25 mg/Kg i.p.). 6 ratas lesionadas fueron tratadas con 0.3 mg/Kg de bromocriptina, 6 con 15 mg/Kg de L-DOPA por vía oral durante 30 días y 6 que no recibieron tratamiento fueron mantenidas durante el mismo tiempo. Después del sacrificio se tomaron fragmentos del núcleo caudado para el análisis ultraestructural (50 botones presinápticos) y de la substancia nigra para el análisis inmunocitoquímico. Tanto el grupo lesionado sin tratamiento como el grupo tratado con L-DOPA presentaron un menor número de neuronas dopaminérgicas en la substancia nigra y un mayor número de terminales con edema, disminución de contactos con espinas dendríticas y aumento en las sinapsis perforadas en el núcleo caudado, en comparación con el grupo control. En contraste, como ya se había reportado, con bromocriptina se observó notable mejoría. Apoyado por P.O.S. Institute. La 5-Hidroxitriptamina (5-HT) se encuentra ampliamente distribuida en el sistema nervioso de los crustáceos, participando en diversos procesos fisiológicos, en algunos de los cuales ha sido documentada la intervención del 6º ganglio abdominal. En el presente trabajo se describen las neuronas serotonérgicas en esa estructura. Se utilizaron acociles Cherax quadricarinatus machos adultos. Se hicieron cortes por congelamiento, transversales, horizontales y longitudinales de 16µm de espesor. El estudio inmunocitoquímico se realizó con un anticuerpo anti-5-HT (Chemicon), diluido 1:400; y un anticuerpo secundario biotinilado. Las imágenes microscópicas fueron digitalizadas y capturadas con el software MetaMorph; ulteriormente para el análisis de los datos se utilizó el software Origin. La marca inmunopositiva se observó en somas, axones y neuropila, a diferencia de las preparaciones testigo, en donde sólo se observó una débil tonalidad difusa y no hubo marca de neuronas. Los somas inmunopositivos fueron observados en dos grupos principales: A) En la región postero-ventral, con proyecciones axónicas principalmente hacia las raíces ganglionares. B) La región antero-ventral, con proyecciones axónicas intraganglionares. En algunas preparaciones se observaron axones en el conectivo entre el 6º y el 5º ganglio. El diámetro promedio de las neuronas fue de 25µm en una gama de 11-61µm. Encontramos una correlación positiva entre el diámetro de la neurona y su núcleo (Coeficiente de Pearson r= 0.7). Los resultados anteriores sugieren a la 5-HT como un posible neurotransmisor y/o neuromodulador en las funciones de integración en el sexto ganglio abdominal. Trabajo parcialmente apoyado por PAPIIT/UNAM Proyecto No: IN200701 y CONACYT 38645N. O-41 O-42 ALTERACIÓN EN LA CITOARQUITECTURA EN NEURONAS DE LA CORTEZA MEDIA PREFRONTAL Y DEL HIPOCAMPO DE RATAS QUE SUFRIERON HIPOXIA DURANTE EL TRABAJO DE PARTO. Juárez-Díaz, I.*(avalado por Gonzalo Flores Alvarez), Moctezuma-Martiñon, C* y Alquicer-Barrera, P. G* Flores, G. Laboratorio de Neuropsiquiatría, Instituto de fisiología de la BUAP. ESTUDIO MORFOFUNCIONAL DEL EFECTO QUE LA LACTANCIA TUVO EN EL DESARROLLO MAXILAR DE NIÑOS. Estudillo Flores, H. (1)*(avalado por Benjamín Florán Garduño), Palacios Alcocer, A. (1)* y Silva, I. (2)*. (1) Especialidad en Odontopediatría de la Facultad de Medicina y (2) Laboratorio de Neurofisiología de la Licenciatura en Biología en la Universidad Autónoma de Querétaro. Aproximadamente 1 millón de niños en todo el mundo desarrollan secuelas cerebrales por complicaciones durante el proceso de parto, dentro de los cuales la hipoxia es la más frecuente y el grado de daño depende de varios factores. Existe la hipótesis de que al haber una disfunción mínima del cerebro en etapas tempranas del desarrollo de un individuo, aumenta la probabilidad de que éste sufra esquizofrenia en la etapa adulta. Se utilizó el modelo animal (rata) propuesto por Bjelke para el estudio de los efectos de la hipoxia. Siguiendo éste modelo, se extrajo el útero de ratas preñadas para inducir hipoxia en las crías, éstas se dejaron crecer a diferentes edades (2, 7, 14, 21 y 35 días) y posteriormente fueron sacrificadas. Se les extrajo y tiñó el cerebro mediante la técnica de Cox-Golgi para evaluar los cambios morfológicos de las neuronas de la región CA1(cuerno de Ammon) del Hipocampo y de la Corteza Media Prefrontal. Mediante el método de Sholl se obtuvo la longitud dendrítica y número de espinas por unidad de longitud. Nuestros resultados muestran que las neuronas de ambas regiones son afectadas por la disminución de oxigeno generando que éstas células presenten, a los 2 días de edad de la rata, un árbol dendrítico más pequeño comparado con los controles; esta situación se mantiene en las siguientes edades pero interesantemente a los 14 días de edad, las neuronas del Hipocampo recuperan su longitud dendrítica y a los 21 y 35 días los animales que sufrieron hipoxia presentan un árbol dendrítico más grande comparado con los controles. La hipoxia al nacimiento indujo cambios morfológicos en las dos regiones evaluadas del cerebro. (Aprobado por el proyecto CONACYT-Viep No 11-89101). La estimulación proporcionada por la succión-deglución durante la lactancia, parece propiciar la formación de espacios relacionados con la correcta adecuación, tanto de los dientes como de su alineamiento en los arcos dentarios (Planas, P. 1972). En los últimos años, los problemas de maloclusión y de tipo ortodóncico se han incrementado notablemente, siendo ahora más frecuente encontrar niños con apiñamiento dental o falta de espacio durante el recambio de sus piezas dentales (Finn, S. B. 1990). Basándonos en estos antecedentes, resulta importante determinar el grado de participación de la forma de alimentación en el desarrollo morfofuncional maxilar, tanto en niños que lactaron del seno materno (grupo A) como en los que no lo hicieron (grupo B), siendo este el objetivo del presente trabajo. Ambos grupos fueron de 20 niños, cuyas edades oscilaron entre 2 y 4 años. La morfología se obtuvo mediante el uso de diversas mediciones y radiografías, mientras que el grado de tonicidad muscular se obtuvo indirectamente mediante la utilización de electrodos de contacto. Los datos obtenidos indican claras diferencias, tanto morfológicas (espacios dentarios bien definidos, sin apiñamiento, diferente perímetro de arco) como fisiológicas (registros de mayor amplitud y mayor continuidad temporal), entre los niños del grupo A con respecto a los del grupo B. Estas evidencias, sugieren fuertemente que la actividad de succión-deglución que realizan los niños que lactaron del seno materno, parece estimular y favorece una mejor alineación dentaria al disponer de un espacio basal mayor, lo cual se refleja en una mayor tonicidad muscular. También nos sugieren, ampliar la clasificación propuesta por Baume (1975) para diastemas. O-43 O-44 CAMBIOS EN LA ACTIVIDAD LOCOMOTORA Y EXPLORATORIA DURANTE EL DESARROLLO DE LA RATA MUTANTE taiep. Flores-Tochihuitl J.* (avalado por Flores Alvarez Gonzalo), Bermúdez M. Eguíbar J.R.& y Flores G. Laboratorio de Neuropsiquiatría* y Laboratorio de Fisiología de la conducta y control motor,& Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México. APROXIMACIÓN METODOLÓGICA AL ANALISIS DE LA ACTIVIDAD MOTORA Y VOCAL DE UN MODELO DE DEPRESIÓN. Irma Zarco de Coronado. Dpto. Fisiología. Fac. de Medicina. UNAM. CP 04510 Reportes previos han mostrado que la mutante taiep a desarrollado un síndrome neurológico progresivo caracterizado por temblor, ataxia, inmovilidad, epilepsia y parálisis. Debido a que no se conoce como son los cambios conductuales que sugieren la alteración de algunos neurotransmisores como lo es la dopamina a lo largo del desarrollo de la mutante taiep, realizamos estudios conductuales de actividad locomotora y exploratoria paralelos al deterioro neurológico en ratas macho taiep de 1, 2 y 6 meses de edad, utilizando como controles ratas de la cepa Sprague-Dawley. Los resultados muestran que la distancia recorrida en el campo abierto es mayor en el grupo taiep de 1 mes en comparación con el control. En los grupos de 2 y 6 meses de edad existe un decremento en comparación con sus controles. Paralelamente hay decremento de la actividad locomotora en campo cerrado de los grupos taiep de 1, 2 y 6 meses en comparación con su correspondiente control, estos resultados se podrían explicar con estudios previos que han determinado aumento en el contenido de dopamina en el cuerpo estriado y globo pálido, así como el GABA en el núcleo estriado y accumbens de la mutante de 7 meses de edad, y si sumamos a estos el incremento significativo del receptor D1 en el caudado-putamen de la rata de 9 meses, resulta posible sugerir un severo deterioro en la transmisión dopaminérgica nigroestriatal y consecuentemente de la actividad locomotora. En los grupos taiep de 2 y 6 meses encontramos disminuida la actividad exploratoria quizá debido a la disfunción motora. Por la desmielinización que afecta el funcionamiento de ganglios basales. El uso de un paradigma de cobayos juveniles que vocalizan intensamente cuando se les retira la madre ha servido como un modelo animal de uno de los padecimientos psiquiátricos frecuentes como lo es la depresión. La conducta de los cobayos infantes durante el aislamiento no se explica por cambios térmicos, ni falta de señales visuales o auditivas pues son animales precoces que nacen con pelo y los ojos abiertos y su cerebro bien desarrollado ( Cravioto J-), por lo cual se atribuye al estrés ocasionado por la ausencia de señales procedentes de la madre. Como no se han caracterizado ampliamente sus componentes críticos para obtener una aproximación más completa a los mecanismos subyacentes, este estudio tiene como propósito el describir y correlacionar el curso temporal de las vocalizaciones y la actividad motora de los animales durante el aislamiento. Se usaron cobayos pigmentados de 1 semana de nacidos (126-146 g) que se mantenían con la madre. El día de la prueba se les separaba de la madre y se les introducía en una caja de Plexiglas de 36x26x15.5 cm. La conducta fue registrada con una videocámara Sony CCD TR305 durante 5 min. Los registros fueron analizados por períodos de 15 segundos en los que se evaluaba la presencia de vocalizaciones (5 grados de intensidad), así como los movimientos mayores de 1 cm realizados en esos períodos a partir de la postura de base. Los datos obtenidos fueron analizados con una prueba de correlación entre los valores de las vocalizaciones y el número correspondiente a la suma de los diferentes tipos de movimientos. El valor de correlación de Pearson fue positivo y menor de 0.05 lo que indica que ambas actividades tienen un curso temporal en el mismo sentido. Estos datos sugieren que las neuronas determinantes de estas actividades están conectadas directamente o bien a través de un generador común. O-45 O-46 LESIONES DEL ÁREA PREÓPTICA MEDIA/HIPOTÁLAMO ANTERIOR (APM/HA), AFECTAN LA CONDUCTA SEXUAL, SIN ALTERAR LA COORDINACIÓN MOTORA EN RATAS MACHO. Hurtazo H.A.*, Camacho F.J., Paredes R.G. Instituto de Neurobiología-UNAM. Ap. Post. 1-1141. Querétaro, Qro. 76001. Los efectos más dramáticos sobre la conducta sexual masculina, se han encontrado al lesionar bilateralmente el APM/HA. PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR RYANODINA EN EL NÚCLEO SUPRAQUIASMÁTICO (NSQ) SOBRE LA EXPRESIÓN DEL RITMO CIRCADIANO EN LA CONDUCTA DE INGESTA DE AGUA DE LA RATA. Mercado-López, C. R.* y Aguilar-Roblero Raúl. Depto. de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. El objetivo del presente trabajo fue determinar la influencia de la lesión del APM/HA, que provoca pérdida de la conducta sexual masculina, en la coordinación motora de las ratas. Y por otra parte, determinar, si la ejecución sexual se recuperaba con pruebas en donde se exponía a los machos lesionados con animales copulando, ya que se ha demostrado que en machos intactos estas pruebas aumentan la ejecución sexual. Se utilizaron ratas macho con tres pruebas de experiencia sexual, que fueron separados en dos grupos, uno que recibió una lesión falsa o sham y otro que recibió una lesión electrolítica del APM/HA (55 mA por 30 seg.). Al final de las pruebas conductuales los sujetos fueron perfundidos, el cerebro removido, cortado coronalmente en rebanadas de 35µm y procesados para una tinción de Nilss, con la finalidad de determinar el lugar y extensión de la lesión. Los resultados muestran que la lesión del APM/HA no afecta la coordinación motora de los animales, lo que demuestra que la falta de copulación en los animales no se debe a una alteración en la coordinación motora de la rata. Por último, las ratas lesionadas sometidas a una prueba motivacional no recuperaron la conducta, lo que concuerda con trabajos previos en los que el efecto de las lesiones no puede ser revertido por ningún tipo de tratamiento, como son las inyecciones con testosterona, cambio constante de la hembra estímulo, manipulación del macho o choques eléctricos a los flancos del mismo. Apoyado por CONACYT 28039N y DGAPA IN228199 y por beca de DGEP-UNAM (91047540) y CONACYT (144938). Diversos trabajos han involucrado los canales intracelulares de Ca2+ (receptor de ryanodina), en la vía de señalización de los cambios de fase del NSQ. Se ha reportado que el receptor de ryanodina tipo 2 (RyR2), presenta un ritmo circadiano de expresión en el NSQ, teniendo mayor expresión durante el día comparado con la noche, y que la ryanodina administrada en ZT 5.5-6.5, a rebanadas que contienen el NSQ de hamsters, induce el avance en la actividad de la tasa de disparo neuronal. No se ha demostrado el significado funcional in vivo del ritmo endógeno de estos receptores, por lo que el objetivo de este trabajo, es estudiar la participación del receptor de ryanodina del NSQ en la expresión del ritmo circadiano de la conducta de ingesta de agua, mediante la manipulación farmacológica de los RyR. Se utilizaron ratas macho de la cepa Wistar, mantenidas en luz roja continua (20 lux), con libre acceso al agua y al alimento. Se les insertó una cánula al NSQ y se les dejó en registro de la conducta durante 15 días (basal), después se les implantó una bomba miniosmótica, que conectada a la cánula, administró la solución de ryanodina (100 nM) o tetrodotoxina (1 µM) de forma continua durante 14 días. Se continuó el registro de la conducta durante el tratamiento y hasta 15 días después (recuperación) de la administración de los fármacos. El tratamiento con tetrodotoxina permitió determinar la eficacia de la técnica, y como se había reportado anteriormente, los animales mostraron la conducta arrítmica. La administración de ryanodina a 100nM incrementó el periodo del ritmo en libre curso (analizado por Periodograma de X2), en relación al registro basal y de recuperación. Este resultado sugiere que la dinámica del Ca2+ intracelular, regulada por los RyR, participa en la expresión del ritmo circadiano endógeno. Apoyado por CONACyT (33034), DGAPA (IN-204800), OMNILIFE a RAR y beca CONACyT (167221) a CML. O-47 O-48 ESTUDIO CONDUCTUAL Y NEUROQUÍMICO SOBRE EL EFECTO DEL AISLAMIENTO SOCIAL EN RATAS CON LESIÓN NEONATAL DE HIPOCAMPO VENTRAL. Alquicer, G. P.* (Avalado por Gonzalo Flores Álvarez), Silva–Gómez, A. B.* y Flores-Álvarez, G. Instituto de Fisiología, BUAP, Pue, Mex. PAPEL DE LOS RECEPTORES CCKA Y CCKB EN LA ANSIEDAD Y SU EFECTO EN LA MODULACIÓN DE LA LIBERACIÓN DE GABA ESTIMULADA POR K+. Hernández Gómez A. M.* y Pérez de la Mora Miguel. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM, México, D.F. La lesión neonatal de hipocampo ventral (LnHV) ha funcionado como modelo animal en la fisiopatología de la esquizofrenia. Los estudios sobre la lesión y el aislamiento social (AS), signo característico de al enfermedad, muestran cierta coincidencia en cuanto a las estructuras y funciones neuronales afectadas, particularmente estructuras límbicas relacionadas con la transmisión dopaminérgica. Esto permitió proponer que la acción conjunta del aislamiento social y la LnHV podría estar potenciando los cambios conductuales y neuroquímicos en la rata adulta. Se utilizaron ratas Sprague-Dawley con LnHV y 8 semanas de AS después de la ablactación. En las pruebas conductuales se encontró que el grupo LHVa (lesión-aislamiento) reducen el tiempo dedicado al contacto físico respecto a su control LnHV sin aislamiento (LHVc) y a sus controles con y sin aislamiento (SHVa y SHVc respectivamente); además la conducta de apoyos está disminuida solamente en ratas con lesión más AS. La actividad locomotora espontánea de los dos grupos con lesión y de los dos con aislamiento muestra hiperactividad respecto a sus controles correspondientes, sin embargo la diferencia entre LHVa – SHVa y LHVc – SHVc, es mayor para el primer grupo. El contenido de dopamina medido por cromato grafía líquida muestra que la corteza media prefrontal tiene mayor cantidad de DA en el grupo aislado, mientras que en aquellos con lesión el contenido de Dopac fue indetectable; en hipocampo ventral se registró mayor contenido de DA y su meta bolito en los grupos aislados y principalmente en el grupo LHVa; en el caudo-putamen el AS produjo una disminución del contenido de DA, lo que fue acentuado en LHVa ; finalmente en el núcleo accumbens el contenido de DA únicamente fue disminuido con la LnHV más AS. Los resultados conductuales y neuroquímicos señalan que los efectos de la LNHV pueden verse potenciados ante el aislamiento social. Apoyado por CONACYT-México 30675-M. La colecistoquinina (CCK) es una familia de neuropéptidos que se han involucrado en la ansiedad. Evidencias de algunos laboratorios indican que el efecto ansiogénico de CCK está mediado a través de los receptores CCKB. Sin embargo, se ha reportado la localización de receptores CCKA en el cerebro y que antagonistas para este tipo de receptor poseen propiedades ansiolíticas. Así mismo, se han encontrado interacciones recíprocas entre los sistemas GABAérgico y CCKérgico en diversas regiones del cerebro de la rata. El objetivo de este trabajo es estudiar el tipo de receptor para CCK involucrado en la ansiedad y el efecto de la CCK-8S en la liberación de GABA estimulada por K+ en áreas cerebrales relacionadas con la ansiedad. Al inyectar i.c.v. 9 fmoles de CCK-4 y CCK-8NS (agonistas específicos para CCKB) o la misma concentración de CCK-8S (agonista mixto CCKA y CCKB) se observaron efectos ansiogénicos medidos en la prueba del laberinto elevado en forma de “+”. En contraste, CCK-33 (agonista específico para CCKA), CCK 1-21 o CCK 26-29 no tuvieron efecto alguno. Los efectos ansiogénicos de CCK8S fueron bloqueados por la administración previa del L-365,260 (antagonista CCKB) pero no por el L-364,718 (antagonista CCKA). En ningún caso se observaron efectos sobre la actividad locomotora de los animales. Estos resultados indican que los receptores CCKA no están involucrados en la ansiedad bajo estas condiciones experimentales. Por otra parte, resultados aún preliminares indican que CCK-8S in vitro es incapaz de modular la liberación de GABA estimulada por K+ en rebanadas de amígdala y sustancia gris periacueductal. Este trabajo fue parcialmente apoyado con fondos de DGAPA (proyecto IN216001) y de CONACYT (proyecto 26370N). O-49 O-50 ACTIVIDAD CEREBRAL DURANTE LA CODIFICACIÓN Y LA RECUPERACIÓN DE LA MEMORIA DEL CONTEXTO. Cansino, S. 1, Maquet, P.*2,3, Doland, R.J.*3 y Rugg, M.D.*4 1Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología, Universidad Nacional Autónoma de México, 2 Centre de Recherches de Cyclotron, Université de Liege, 3 Wellcome Department of Cognitive Neurology and 4Institute of Cognitive Neuroscience, University College London. ESTRATEGIAS CONDUCTUALES Y FISIOLÓGICAS DE RATAS SOMETIDAS A DIFERENTES PROGRAMAS DE ALIMENTACIÓN. Solis T.*, Angeles M.*, Mendoza J.Y.*, Martínez T.* y Escobar C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina UNAM. El objetivo del estudio consistió en identificar la actividad neuronal en el momento en que se codifica información contextual de un evento, y en el momento en que ésta es recupera de manera exitosa o no. La actividad neuronal de 17 sujetos se registró mediante la técnica de Imaginería por Resonancia Magnética funcional relacionada a eventos (IRMfe) durante la codificación y la recuperación de información contextual. Durante la codificación los sujetos juzgaron si imágenes de objetos comunes presentadas al azar en cuatro diferentes cuadrantes de la pantalla representaban algo artificial o natural. En la fase de recuperación, las imágenes viejas se mezclaron con nuevas y los sujetos juzgaron si éstas eran viejas o nuevas, y si eran viejas indicaron en que cuadrante de la pantalla se presentaron durante la fase de codificación. Durante la fase de codificación, se observó actividad en la región occipital derecha y prefrontal izquierda ante las imágenes cuyo contexto espacial fue subsecuentemente recordado en comparación con las imágenes cuyo contexto fue olvidado. Mientras que en la fase de recuperación, los ensayos en que los sujetos recordaron correctamente el contexto generaron mayor actividad en la región hipocampal derecha y prefrontal izquierda en comparación con los ensayos incorrectos. Estas regiones cerebrales participan en la codificación y recuperación de la memoria episódica más allá del reconocimiento. Apoyado por la DGAPA, UNAM (IN300700) y por el Wellcome Trust. La búsqueda y consumo de energía (forrajeo) genera una situación de elección conductual de manera que los organismos obtengan el mayor beneficio sin gastar más energía. Para ello integran información sobre las condiciones ambientales, de las características específicas del alimento y la ingestión propia. El presente estudio fue diseñado para explorar las estrategias de forrajeo de la rata cuando es sometida a diferentes condiciones de acceso al alimento. Las condiciones alimenticias fueron: 1. grupo en horarios restringidos de alimento (pulso fijo) con acceso al alimento durante dos horas diarias (de 12-14 hrs), 2. grupo de horarios de alimento variable (pulsos variables), en donde el alimento les era suministrado durante dos horas diarias a diferente horario, y 3. un grupo control o ad libitum con acceso libre al alimento. De estos grupos se evaluaron las conductas de ingestión y manipuleo de alimento. A otra serie de ratas bajo las mismas condiciones les fue medido el peso corporal y del estómago. Los datos mostraron que las ratas de pulso fijo desarrollan estrategias conductuales y fisiológicas de alimentación para optimizar el tiempo de acceso al alimento, incrementando el tiempo de ingestión con respecto a la manipulación, disminuyendo la latencia de inicio de alimentación y aumentando la capacidad de distensión estomacal. En contraste ratas sometidas a pulsos variables no logran desarrollar estas estrategias. Los datos indican que la capacidad de poder predecir la hora de acceso al alimento permite generar estrategias adaptativas conductuales y fisiológicas. DGAPA IN-204800, CONACyT 33033-N, OMNILIFE 2000, PROMEP-UABJO O-51 O-52 EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO Y LA LONGITUD DE LAS VIBRISAS EN RATAS CIEGAS. Martínez Martínez, E.*, GarcíaRivera, L.* y Gutiérrez-Ospina G. Departamento de Biología Celular y Fisiología IIBM, UNAM. México, D. F., 04510 ONTOGENIA DE LOS PATRONES DE DESCARGA EN NEURONAS AFERENTES DEL GANGLIO VESTIBULAR DEL EMBRIÓN DE POLLO. Isasmendi, S.G.*¶, Gomez,G.*,Manjarrez,E.*,Flores,A. Escuela de Biología¶ e Instituto de Fisiología BUAP. La enucleación binocular al nacimiento conlleva a una expansión de los barriles en la capa IV de la corteza somatosensorial primaria (S1) de roedores. Por otro lado, se ha reportado que los roedores adultos ciegos tienen vibrisas más largas. Así, se ha sugerido que la expansión de S1 se debe a que los roedores ciegos usan más las vibrisas. Sin embargo, la expansión de los barriles ocurre durante la primera semana de vida, tiempo en el que no hay movimiento voluntario de las vibrisas. Además, se desconoce si el aumento en la longitud de las vibrisas ocurre antes o después de la expansión cortical, por lo que no se puede establecer una liga causal entre los cambios centrales y periféricos. Por esta razón, se midió la longitud de las vibrisas α, β, γ y δ en ratas enucleadas al nacimiento a los 10, 30 y 60 días de edad. Si bien, las vibrisas de las ratas ciegas tienden a ser más largos, la diferencia no es significativa, independientemente del sexo. Para descartar si el aumento en longitud reportado, se debe a un cambio en la taza de crecimiento de las vibrisas en las ratas ciegas, se registró semanalmente el ritmo de crecimiento. El crecimiento es ligeramente más lento y la duración del ciclo es mayor en las ratas ciegas. Esto pudiera explicarse por un aumento de la muerte celular apoptótica folicular, como lo indican las observaciones preliminares obtenidas con el colorante vital rojo neutro. Con base en estas observaciones, proponemos que los cambios corticales pudieran ocurrir independientemente de lo que sucede en la periferia. Este proyecto ha sido apoyado por CONACyT 38615N y J28035N El objetivo de este trabajo fue identificar y caracterizar los patrones de descarga espontáneos de las neuronas aferentes del ganglio vestibular durante el desarrollo embrionario. En este trabajo estudiamos en una preparación in vitro el desarrollo de las propiedades electrofisiológicas y patrones de descarga espontánea en aferentes vestibulares del pollo. Se analizaron 215 células entre los periodos E14 y P1, mediante las técnicas de registro intracelular y extracelular unitario.Se observó un incremento en la frecuencia de disparo desde 8.8±4 ( X ± σ n ) en E14 a 34.8±6.6Hz en P1. El CV presentó valores de 1.3±0.15 y de 0.7±0.1 respectivamente. El potencial de membrana (Vm) y la resistencia de entrada (Ri) cambiaron entre los días E14-E17 y adquirieron valores estables a partir de E18 (Vm: -31.5 mV±2.2 en E14 a -59.6 mV±0.68 en P1; Ri: 169±46 MΩ en E14 a 80±16 MΩ en P1). Encontramos dos tipos de morfología del potencial de acción, con y sin post hiperpolarización. En ambos se observó un decremento significativo en la duración, desde 1.984±0.9 ms en E16 hasta 1.105±0.16 y 1.4325±0.33 ms en E18 y P1 respectivamente (n=24, F=4.481, p=0.02). La pendiente de repolarización se incrementó entre E16 y E18-P1 (n=24, F=4.17, p=0.04). En E18 se establecieron dos propiedades características del estado adulto: la bimodalidad respecto a la regularidad de la descarga y la relación inversa entre el CV y la Ri, relacionada al tamaño de los somas neuronales y por tanto a la morfología de la terminal aferente.Entre E18 y P1 encontramos actividad en ráfagas en una proporción del 7% y en los días anteriores del 50%. Los resultados sugieren que la maduración del órgano vestibular en el pollo ocurre de manera temprana durante el periodo de vida embrionaria, a diferencia de otras especies en que ocurre postnatalmente. Financiado por Conacyt proyecto J28904-N y Fondo de Estudios Ricardo J. Zevada (Flores A). O-53 O-54 EFECTOS DE LA ACTIVIDAD ESPONTÁNEA ESPINAL SOBRE EL FLUJO DE INFORMACIÓN SOMATOSENSORIAL EN EL GATO. Rojas-Piloni, G.*, Martínez, L*, Vázquez, D.*, Vélez, D.*, Flores, A. y Manjarrez, E*. Instituto de Fisiología. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. RESONANCIA ESTOCÁSTICA EN LA ACTIVIDAD ELECTRICA CEREBRAL EN HUMANOS. Méndez, I.*, Diez-Martínez, O., Flores, A., y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla y Depto. de Psicología, UDLA, Puebla, México. El grupo de neuronas que genera los potenciales negativos espontáneos del dorso de la médula espinal lumbar (PNDM) se localiza en las láminas III-VI del asta dorsal. Este grupo de neuronas modula la transmisión sináptica de aferentes segmentales. En este trabajo evaluamos los efectos de la actividad eléctrica espontánea de las neuronas que generan los PNDM sobre la transmisión de información táctil a la corteza somatosensorial. Se hicieron registros simultáneos de los PNDM en el segmento L6 y de los potenciales de campo en la corteza somatosensorial primaria. También se obtuvieron registros unitarios en axones pertenecientes a las columnas dorsales y al tracto espinocervical de gatos anestesiados. Encontramos que la amplitud de los potenciales de campo en la corteza somatosensorial primaria, producidos por estimulación de mecanoreceptores de la piel, se facilitan cuando se encuentran precedidos por PNDM espontáneos. La amplitud de los potenciales de campo en la corteza somatosensorial primaria provocados se encuentra correlacionada con la amplitud de los PNDM espontáneos (r=0.87). Este efecto facilitatorio se lleva a cabo a nivel segmental, pues la actividad unitaria registrada en axones de neuronas de segundo orden pertenecientes a la vía de las columnas dorsales y del tracto espinocervical se facilita durante la ocurrencia de PNDM espontáneos. Concluimos que la transmisión espino-cortical de la información táctil es modulada por las neuronas de la médula espinal con actividad espontánea que generan los PNDM. Apoyado por CONACyT proyecto J36062-N (M.E.); beca CONACyT 124127 (R.P.G.). O-55 RESONANCIA ESTOCÁSTICA EN LOS POTENCIALES ESPINALES Y CORTICALES PRODUCIDOS POR ESTIMULACIÓN TÁCTIL EN EL GATO. Vélez, D.*, RojasPiloni, G.*, Méndez, I.*, Martínez, L.*, Flores, A. y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. México. Recientemente se ha dado la primera evidencia del fenómeno de la resonancia estocástica en la actividad eléctrica del cerebro en humanos (Manjarrez y cols., 2002). Sin embargo, no se conoce si dicho fenómeno es el resultado de la simple ocurrencia de resonancia estocástica a un nivel periférico, o si también las neuronas espinales y corticales, por sí mismas, pueden exhibirlo. El propósito del presente estudio fue demostrar la ocurrencia de resonancia estocástica en los potenciales espinales y corticales producidos por estimulación táctil, en gatos anestesiados, paralizados y ventilados artificialmente. Se emplearon dos estimuladores mecánicos. Uno de ellos se empleó para aplicar estímulos periódicos (la señal) en la piel de la almohadilla central de la extremidad inferior. El otro estimulador se usó para aplicar estímulos ruidosos en la piel del tercer dígito de la misma extremidad. Este protocolo permitió que el ruido y la señal no se mezclaran en la piel, sino que en el sistema nervioso central. En todos los animales se encontró un comportamiento del tipo de la resonancia estocástica en los potenciales espinales y corticales. Nuestros resultados muestran que la relación señal ruido y la capacidad de información de la actividad espinal y cortical provocada por un estímulo táctil mecánico, incrementó cuando se adicionó una magnitud apropiada de ruido. Estos hallazgos son consistentes con resultados recientes de nuestro laboratorio (Neurosci. Lett. 326 (2002): 93-96), en los que mostramos que la coherencia entre la actividad eléctrica espinal y cortical en el gato exhibe el fenómeno de resonancia estocástica interna. Apoyado por CONACyT J36062-N (M.E.); beca CONACyT 182103 (V.D.). La resonancia estocástica es un fenómeno en el cual la respuesta de un sistema no lineal a una señal débil, se optimiza por la presencia de ruido. Experimentos psicofísicos en humanos han mostrado que la presencia de ruido puede mejorar la capacidad de un individuo para detectar estímulos táctiles subumbrales (Collins y cols., 1996). La interpretación de estos experimentos sugiere que el incremento en la capacidad de detección es una forma de resonancia estocástica. Sin embargo, no es claro de estos experimentos si las neuronas corticales que participan en el proceso también exhiben el fenómeno de resonancia estocástica. El objetivo de este trabajo fue demostrar la ocurrencia del fenómeno de resonancia estocástica en la actividad electroencefalográfica (EEG) producida por estímulos táctiles. Los experimentos se llevaron a cabo en 15 sujetos sanos. El protocolo de estimulación mecánica consistió en aplicar un estímulo subumbral (señal a 2.5 Hz) superpuesto con ruido, así como un estímulo ruidoso sin señal, en uno de los dígitos de la mano izquierda. Se aplicaron diez diferentes intensidades de ruido. Se registró el EEG en el sitio C4´ localizado entre Cz y C4. La magnitud del ruido de entrada se cuantificó por la desviación estándar de la fuerza de estimulación (σn). Se construyeron gráficas de la relación señal ruido como función de σn para cada sujeto. Todos los sujetos mostraron un comportamiento del tipo de resonancia estocástica. Concluimos que la presencia de ruido puede optimizar la relación señal ruido de la actividad cortical somatosensorial producida por estímulos táctiles (Manjarrez y cols., 2002). Parcialmente apoyado por: CONACyT J36062-N (M.E.) y Fondo R. J. Zevada (F.A.); beca CONACyT 112760 (M.I.). O-56 LA BETAHISTINA INTERACTÚA SOBRE RECEPTORES A AMINOACIDOS EXCITADORES EN LAS NEURONAS AFERENTES VESTIBULARES DEL AXOLOTL. Chávez, H,1,2*, Vega, R1 y Soto, E1. 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. La betahistina (BH) se ha reportado como agonista parcial del receptor H1 y como antagonista del receptor H3, y reportes de la literatura indican que disminuye la frecuencia de descarga basal y provocada por estímulos mecánicos de las aferentes vestibulares de la rana y el axolotl. Nosotros estudiamos el mecanismo a través del cual ejerce sus efectos en la periferia; encontramos que la BH no activa el sistema eferente, ya que la aplicación de antagonistas colinérgicos muscarínicos y nicotínicos (atropina y d-tubocurarina, respectivamente) no modifican el efecto de la BH; tampoco el efecto de la BH es debido a la generación de óxido nítirico (NO), ya que la aplicación de L-NOARG, inhibidor de la sintasa de NO, no modifica el efecto de la BH. La BH reduce el efecto excitador de los agonistas de los aminoácidos excitadores (AAE): ácido quiscuálico (QA; 1µM, n=18), ácido kaínico (KA; 1µM, n=8), y (AMPA, 1 µM 100 µM; n=11) de manera dependiente de la dosis, lo que indica que la BH actúa postsinápticamente. Este efecto persiste al perfundir la preparación con bajo Ca2+ y alto Mg2+ (maniobra que bloquea la liberación del neurotransmisor aferente). Para definir si el efecto inhibidor de la BH es a través de los receptores H3, o directamente sobre los receptores a AAE, hicimos experimentos con registro extracelular multinitario en el oído aislado del axolotl (Ambystoma tigrinum), estudiamos la interacción de un agonista H3, la R- α metilhistamina (100µM, n=5) con el QA (1µM, n=5); encontramos que el efecto excitador del QA no se modifica con la perfusión del agonista H3. Nuestros datos en conjunto parecen favorecer la hipótesis de que la BH interactúa directamente con los receptores de los AAE postsinápticos, por el hecho de que disminuye el efecto excitador del QA, KA y AMPA, sin que el agonista H3 tenga ningún efecto significativo. O-57 INFLUENCIA DEL SISTEMA EFERENTE VESTIBULAR SOBRE LA ACTIVIDAD AFERENTE EN EL AXOLOTL. Soto, E1, Chávez, H1,2*, y Vega, R1 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. Hasta hoy no se conoce con precisión el papel funcional del sistema eferente vestibular, existen reportes de que la estimulación del sistema eferente produce aumento, disminución y respuestas mixtas sobre la actividad eléctrica aferente, por lo que realizamos una serie de experimentos destinados a aclarar el papel funcional del sistema eferente vestibular, y definir la participación de la acetilcolina (Ach) y óxido nítrico (NO) en la modulación de las respuestas vestibulares. Realizamos registros extracelulares multiunitarios en el oído aislado del axolotl, en dos preparaciones, una en la que registramos la actividad eléctrica aferente sin separar el oído interno del resto del SNC, con lo cual el sistema eferente permanece activo, ya que en estas condiciones la perfusión de la preparación con antagonistas colinérgicos d-tubocurarina y atropina (ambos 10 y 100 µM; n = 4) produce una reducción de la actividad aferente en un 46 ± 3.5 %. Si se secciona el nervio vestibular en la parte proximal al cerebro se produce una caída sistemática de la actividad eléctrica multiunitaria aferente vestibular, la cual disminuye en un 40%. Si luego de 15 min de seccionar el nervio vestibular se aplican la d-tubocurarina o la atropina en concentración de 10 µM y hasta 100 µM (n= 4), estas ya no ejercen influencia sobre la actividad aferente vestibular. En relación con el NO, pensamos que su producción en las células ciliadas es controlada por la entrada eferente colinérgica. Estudiamos las interacciones entre inhibidores de la NOS y agonistas colinérgicos; nuestros resultados indican que la perfusión previa de LNOARG (3µM, n=3) reduce la respuesta excitadora debida a la aplicación de carbacol (200 µM, n=3), en un 52.2 ± 12.1% en la descarga basal con respecto al control, sin modificar significativamente la respuesta a estímulos mecánicos, indicando que parte de la respuesta excitadora inducida por el carbacol es debida a la producción de NO. O-58 PROLACTINA OCULAR EN PACIENTES CON RETINOPATÍA DEL PREMATURO. Rivera J.C.*, Dueñas Z.*, Macotela Y.*, Morfin P.*1, Guerrero J.L.* 1, Martínez de la Escalera, G., Quiroz H.* 1, y Clapp, C. Instituto de Neurobiología-UNAM, Juriquilla, Qro. Hospital “Luis Sánchez Bulnes”, Asociación para Evitar la Ceguera en México, (APEC) México D.F. Las retinopatías vasoproliferativas son consideradas las principales causas de ceguera en el mundo. En la retina, la formación de vasos capilares sanguíneos (angiogénesis) se debe a un desequilibrio que favorece la acción de factores angiogénicos oculares. El fragmento Nterminal de 16 kDa de la prolactina (PRL 16K) es un potente inhibidor de la angiogénesis y parece estar involucrado en la regulación de la neovascularización ocular. El tratamiento local con anticuerpos antiPRL induce angiogénesis en la córnea, y células endoteliales aisladas de retina producen y secretan PRL. En este trabajo determinamos PRL inmunorreactiva en el humor acuoso, líquido subretiniano y suero de pacientes con retinopatía del prematuro (RP). Los niveles de PRL en el suero y en el humor acuoso fueron significativamente más altos (P< 0.05) que en pacientes control sin vasoproliferación en la retina. En los pacientes con RP detectamos, mediante inmunoprecipitaciónWestern-blot, una PRL de 16 kDa que fue más abundante en el líquido subretiniano que en el suero. Además, encontramos que el líquido subretiniano contiene las proteasas capaces de generar PRL 16K a partir de PRL. El aumento en la PRL y en la PRL 16K ocular podría representar un mecanismo compensatorio involucrado en el eventual frenado de la neovascularización ocular de los pacientes con retinopatía del prematuro. (Auspiciado por PUIS-UNAM). O-59 O-60 DISTRIBUCION NICTEMERAL DE LOS ESTADOS DE VIGILANCIA DEL PAVO. Ayala-Guerrero, F., ∗Ramos, J.I y Mexicano, G. Facultad de Psicologia, UNAM, ∗Facultad de Ciencias Biológicas, UAEM. EXPRESIÓN DE LA PROTEÍNA FOS EN EL NÚCLEO SUPRAQUIASMÁTICO DEL CONEJO EN DIFERENTES CONDICIONES DE LUZ-OSCURIDAD Y EN RESPUESTA A UN PULSO DE LUZ. Toledo, R.*, Aguilar-Roblero, R., Canchola, E.*, Caba, M. Lab. Biología de la Reproducción, IIB, Universidad Veracruzana, UAM, Inst. de Fisiología Celular, UNAM.. El ritmo diario de la distribución de los niveles de vigilancia mostrado por los animales es el resultado de la modulación endogena en la que participa un sistema circadiano regulador del tiempo y de componentes exógenos del medio ambiente y de la voluntad del animal. Los cambios de intensidad luminosa que se suceden para originar el día y la noche son factores importantes en la regulación de los ritmos circadianos que se observan en diferentes variables fisiológicas como por ejemplo la vigilia y el sueño. Cuando se analiza la distribución de los estados de vigilancia bajo condiciones de luz constante se pone en evidencia la distribución originada por mecanismos endogenos. El objetivo del presente trabajo fue analizar la distribución de los estados de vigilancia del pavo sometido a un medio ambiente de luz constante. Los experimentos se llevaron a cabo en ejemplares adultos implantados crónicamente para registrar la actividad cerebral, ocular y muscular durante diferentes estados de vigilancia en el transcurso de las 24 horas del día. A pesar de que los animales se estudiaron bajo condiciones de luz constante, el sueño mostró cantidades significativamente mayores en el periodo comprendido entre las 21:00 y las 09:00 horas, mientras que la vigilia mostró una tendencia inversa.. Estos datos reflejan la distribución de los estados de vigilancia generada por un mecanismo endogeno interno. El conejo es utilizado para diversos estudios cronobiológicos, sin embargo el núcleo supraquiasmático (NSQ), el principal reloj biológico de los mamíferos, no se ha estudiado en esta especie. En el presente trabajo decidimos estudiar por técnicas de inmunocitoquímica la expresión de la proteína Fos en tres condiciones, en ciclo de luzoscuridad (LD, 12:12, encendido de la luz a las 07:00 a.m.), en oscuridad constante (DD, 7 días en LD y 3 días en DD) y en respuesta a un pulso de luz (850 lux/30 min). Se utilizaron conejas Nueva Zelanda blancas y se perfundieron transcardialmente cada 4 horas analizándose 6 grupos en cada condición (n=4 cada grupo). Los cerebros se cortaron coronalmente y las secciones (50 µm) se trataron con un anticuerpo policlonal (Santa Cruz) contra la proteína Fos. La inmunorreactividad se analizó bajo el microscopio de luz y con la cámara lúcida. La delimitación del NSQ se realizó en secciones alternas teñidas con Nissl. En LD hubo un incremento significativo en el número de neuronas inmunorreactivas a Fos a las 08:00 y 12:00 h (p<0.01), mientras que en DD se observó un aumento significativo solamente a las 16:00 h (p<0.01). En base a estos datos se decidió aplicar un pulso de luz a las 24:00 y 04:00 h, bajo condición de DD. El pulso indujo un intenso marcaje en la región ventrolateral del NSQ. En conclusión encontramos un ritmo diario asociado a la luz en LD, un ritmo circádico en DD y una foto-inducción de Fos en la noche subjetiva. Trabajo apoyado por Beca (# 160300) y Proyecto CONACYT (34652-N; M.C.) O-61 O-62 LA EXPRESIÓN DE C-FOS EN EL NUCLEO SUPRAQUIASMATICO (NSQ) DE LA RATA DEPENDE DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ. Guadarrama-Ortiz, P.*, Aguilar-Roblero Raúl. Depto. de Neurociencias. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. EXPRESIÓN DE c-Fos EN EL HIPOTÁLAMO DE RATAS SINCRONIZADAS POR ALIMENTO. Angeles M1*; Aguilar Roblero R2 y Escobar C1. Depto. 1Anatomía, Fac. Medicina. Depto. 2 Neurociencias, Inst. Fisiología Celular. UNAM. México 04510. El núcleo supraquiasmatico (NSQ) es un reloj circadiano en mamíferos sincronizado principalmente por la alternancia luz- oscuridad (L:O). La trascripción de c-Fos es una de las respuestas del NSQ a la luz. La fotoinducción de c-Fos depende de la hora circadica (CT) en que se da un pulso de luz. Sin embargo a la fecha se ignora si la fotoinducción de cFos en el NSQ depende también de la intensidad de la luz. Para estudiar lo anterior se cuantificó la expresión de c- Fos en el NSQ, estimulando al inicio de la noche subjetiva con diferentes intensidades de luz. Se usaron ratas macho Wistar de 150 g, mantenidas en un ciclo L:O (12:12), después se llevaron a oscuridad continua por 3 días, donde 3 grupos de ratas (n = 3) recibieron pulsos de luz de 0, 200 y 400 lux, durante una hora iniciando en CT12. Treinta minutos después del pulso los sujetos fueron prefundidos por vía transcardiaca con solución salina, seguida por paraformaldehído al 4%. Se realizaron cortes coronales de 40 µM y se colectaron cada 160 µ. Los cortes se procesaron para inmunohistoquímica con un anticuerpo policlonal contra c-Fos (Santa Cruz). Se contó el número de células que expresaban c-Fos en cortes representativos del NSQ. En relación al numero de células en sujetos control, nuestros resultados indican que con estimulación de 200 lux la expresión de Fos aumenta en un 287.5% y con 400 lux en un 512.5%. Esto sugiere que la fotoinducción de c-Fos en CT12 es dependiente de la intensidad de la luz. Cuando el acceso al alimento es restringido durante algunas horas al día los animales muestran un incremento en la actividad locomotora 1-2 hrs previa al acceso a la comida, denominada actividad de anticipación al alimento (AA) y muestran una persistencia de esta conducta en ayuno, lo cual indica que la AA depende de un reloj. Estudios con lesiones electrolíticas de núcleos hipotálamicos, demostraron que el ventromedial hipotálamico (VMH), y lateral hipotálamico (LH), están involucrados pero no constituyen las únicas estructuras capaces de generar la AA. En este estudio se pretende determinar la participación de los núcleos hipotálamicos en respuesta a la sincronización al alimento y en la persistencia a esta sincronización, utilizando inmunohistoquímica para proteína c-Fos. Se sincronizaron ratas Wistar (250-300g) con un pulso de alimento diario de 1200-1400h por tres semanas. Los animales se perfundieron 10, 11, 12, 14, 18 y 2000 h, se removió el cerebro y se crioprotegió en solución de sacarosa. Los cerebros fueron cortados a 40 µm y procesados para inmunohistoquímica para c-Fos (1:2500) y avidinabiotina (Vectastatin). En el grupo sincronizado se observó una actividad neuronal aumentada desde 1h antes a la llegada del alimento en el dorsomedial (DMH), perifornical (PeF), tuberomamilar (TM) y LH , que persiste bajo condiciones de ayuno. Esto sugiere la participación del DMH, LM y PeF en la conducta de anticipación y probablemente como parte del oscilador sincronizado por alimento. Apoyado por CONACYT (33034) y DGAPA (IN 204800) Y OMNILIFE. DGAPA-UNAM IN-204800, Omnilife 2000, CONACYT 33033-N y PROMEP-UABJO O-63 O-64 PAPEL DEL NÚCLEO ACCUMBENS VENTROMEDIAL (SHELL) EN EL PARADIGMA DE SINCRONIZACIÓN POR ALIMENTO Mendoza JY*1, Angeles M*1, Aguilar-Roblero R2 y Escobar C1. Depto. Anatomía, Facultad de Medicina 1, Depto. Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular 2, UNAM, México D.F. LA DESNUTRICIÓN HIPOPROTEINICA ALTERA EL ACOPLAMIENTO DE OSCILADORES EN LA RATA. Salazar Juárez Alberto, Parra Leticia y Escobar Carolina. Facultad de Medicina, Depto Anatomía, UNAM. Los horarios restringidos de alimento sincronizan parámetros fisiológicos y conductuales en los organismos y desarrollan actividad anticipatoria (AA) a la llegada del alimento. La AA tiene propiedades que indican la existencia de un oscilador circadiano que depende del alimento. Hasta el momento se desconoce el sustrato anatómico que subyace a este oscilador. El núcleo Accumbens es una estructura determinante en la expresión de las conductas motivadas, en donde su porción ventromedial (AccShell) tiene una relación importante con la fase consumatoria de la ingestión de alimento. Para evaluar el papel del núcleo AccShell en el paradigma de sincronización por alimento, ratas macho Wistar de 180-200g fueron sometidas a lesiones químicas (NMDA) y lesiones sham del AccShell, posteriormente se sincronizaron a horarios de alimentación y se evaluó la sincronización de ácidos grasos y el ritmo de ingestión de agua. Otro grupo de animales se utilizó para evaluar la expresión de la proteína c-Fos en AccShell bajo el mismo paradigma. Los resultados mostraron sincronización de ácidos grasos en ambos grupos, aunque el grupo lesionado mostró una disminución en la intensidad. Los registros conductuales también mostraron sincronización al alimento caracterizada por AA en ambos grupos. Por otro lado la expresión de c-Fos aumentó en AccShell en animales sincronizados con respecto al grupo control (ad lib) antes y durante la llegada del alimento. Aunque la lesión de AccShell no eliminó la AA, el aumento de c-Fos indica que es una de varias estructuras que participan en la expresión del oscilador sincronizado por alimento. DGAPA IN-204800, CONACYT 33033-N La desnutrición perinatal, como resultado de una deficiente ingestión en calidad y/o cantidad de alimento, es el factor ambiental que de manera más frecuente afecta el desarrollo cerebral. Reportes previos sugieren que la desnutrición altera la fuerza de acoplamiento entre osciladores, esto evidenciado por la presencia de partición espontánea del ritmo de ingesta de agua. Por otro lado también se ha reportado que la actividad de anticipación al alimento (AA) es un buen modelo para estudiar la expresión de dos osciladores. Por lo que el objetivo de este trabajo es determinar el efecto de la desnutrición sobre el acoplamiento de osciladores mediante el uso del paradigma de AA. Se usaron ratas machos (Wistar), las cuales se alimentaron con dos dietas isocalóricas que diferían exclusivamente en el porcentaje de caseina que contenían, 25% en la dieta normal (C) y 6% en la dieta hipoproteíca (D). Se uso un diseño contrabalanceado, conformado por dos grupos (C y D), los cuales después de varios días de registro, se dividieron dependiendo del tipo de dieta utilizada como sincronizador, de tal manera que había un grupo sincronizado con dieta chow (n=6 para C y para D) y un grupo con dieta baja en caseína (n=6 para el C y para D), la cual se suministraba sólo por tres horas diarias durante 20 días. La desnutrición pre y postnatal no impide la expresión de la AA; afecta al periodo endógeno del reloj biológico, la fracción de actividad se presenta principalmente en relación a la disponibilidad al alimento, también presenta constantes saltos de fase y partición espontánea del ritmo. Se puede concluir que la desnutrición afecta el acoplamiento de osciladores, modificando la jerarquía de estos, siendo en estos sujetos el oscilador dependiente al alimento el predominante. Apoyado por DGAPA IN 204800, ONMILIFE 2000 CONACyT 33033. O-65 O-66 AMINOACIDOS ACIDOS EN LA HEMOLINFA Y EFECTO SOBRE LA EXCITABILIDAD DE NEURONAS SECRETORAS DE ACOCIL. García U.1, Cebada J.*1, Rocha L2., Neri L.*2 y Alvarado R.*3 Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias1 y Farmacobiología2Cinvestav y DEPI, Medicina-UNAM3. DIFERENCIAS DE FASE ENTRE EL RITMO CIRCÁDICO DE ACTIVIDAD ESPONTÁNEA Y EL DE RESPUESTA A LA LUZ EN EL FOTORRECEPTOR CAUDAL DEL ACOCIL. RodríguezSosa, L+, Anaya, V.*++ y Aréchiga, H.+. DEPI, Fac. Med., UNAM.+ México y Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV++, México. Fluctuaciones en los niveles plasmáticos de amino-ácidos podrían asociarse con cambios en la actividad secretora del sistema órgano Xglándula sinusal (OX-GS). Por cromatografía líquida de alta presión determinamos las concentraciones horarias de ácido aspártico y glutámico, glutamina, glicina, taurina, alanina y GABA a partir de muestras de hemolinfa obtenidas por microdiálisis, mediante cánulas implantadas en el lecho venoso torácico de acociles en libre movimiento, durante cuatro ciclos regulares luz-obscuridad. Por otra parte, exploramos el efecto de los a.a. sobre la excitabilidad de neuronas del OX con 24 horas en cultivo. Alanina y glutamina no alteraron el potencial de membrana, en tanto que, aspártico, taurina y glicina provocaron depolarización asociada al disparo de potenciales de acción. Glutámico hiperpolarizó e inhibió el disparo de potenciales de acción en tanto que GABA provocó depolarización inicial transitoria asociada al disparo de potenciales de acción, seguida de hiperpolarización capaz de suprimir el disparo neuronal. Finalmente, la perfusión de muestras de hemolinfa obtenidas a las 6:00 y 12:00 horas provocaron depolarización sostenida asociada al disparo de potenciales de acción, en tanto que las muestras obtenidas a las 18:00 y 24:00 horas provocaron un efecto bifásico similar al descrito para GABA. Las diferencias horarias en el contenido hemolinfático podrían relacionarse con los cambios en el patrón de disparo de neuronas del OX observado en preparaciones de tallo ocular aislado. Un posible marcapaso circádico en el acocil es el sexto ganglio abdominal, en cuyo fotorreceptor (FRC) se han descrito variaciones circádicas (Rodríguez-Sosa y cols. Soc. for Neurosci. 511.31, 2001; Prieto-Sagredo, J y Fanjul-Moles M.L Chronobiol. Int. 2001, 18:75965). En el presente trabajo se exploraron las relaciones de fase entre dos ritmos en la misma neurona fotorreceptora, uno de la actividad espontánea y otro de la magnitud de la respuesta a la luz. Se usaron acociles Cherax quaricarinatus adultos, jóvenes, sin distinción de sexo. Se aisló el 6º ganglio abdominal, se mantuvo en medio de cultivo a 16ºC y se registró mediante electrodo de aspiración, la actividad en el axón del FRC, con métodos convencionales, durante ciclos de 24 h. El análisis estadístico de los potenciales de acción se hizo mediante software Spike2 y Origin. En algunos experimentos, se marcó la neurona en registro mediante tinción retrógrada con amarillo lucifer y se observó con microscopio confocal. Se tomaron muestras de 3 minutos cada hora, fuese en obscuridad continua, o interrumpida por pulsos de prueba de 44 lux y 1 s., cada hora. Tanto la actividad espontánea en obscuridad continua, como la amplitud de la respuesta a la luz, variaron a lo largo del ciclo de 24 h, pero los ritmos de ambas funciones se encontraron desfasados; en tanto que el ritmo de actividad espontánea mostró acrofase diurna, con 5.5 Hz, el de respuesta a la luz la tuvo nocturna, con 20 Hz. La duración de los períodos circádicos fue 27 h. Estos datos sugieren una compleja interacción funcional en la expresión circádica del FRC. Trabajo parcialmente apoyado por PAPIIT/UNAM Proyecto No: IN200701 y CONACYT 38645N. O-67 O-68 VARIACIONES DIURNAS POSTURALES Y DE ACTIVIDAD ELECTRICA MULTIUNITARIA EN EL GANGLIO SUPRAESOFÁGICO DEL ACOCIL. Alvarado-Alvarez, R.* y Aréchiga, H. División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. I Reyes, A.*, Laville, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Tapia, D.*, Galarraga, E., y Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. Los antecedentes filogenéticos del sueño han sido rastreados hasta los vertebrados inferiores, y más recientemente, empiezan a darse contribuciones sugerentes de la existencia de estados similares al sueño en invertebrados. En algunos crustáceos, se ha descrito desde antiguo, la existencia de actitudes posturales caracterizadas por la flotación en decúbito lateral, postura sugerente de un estado de sueño. En el presente trabajo se exploró la distribución de esta actitud postural a lo largo del nictámero, y la correlación entre su presentación y cambios en la actividad eléctrica de neuronas en el ganglio supraesofágico del acocil Procambarus clarkii. Los experimentos se realizaron en animales adultos, sin distinción de sexo y en intermuda, mantenidos en ciclos normales de luz y obscuridad. Se implantaron crónicamente electrodos de 100µm, en la región rostral del ganglio supraesofágico, en la emergencia de los nervios ópticos. Se registró actividad eléctrica de manera continua de las mismas unidades neuronales durante dos meses, mediante técnicas convencionales de registro extracelular y se analizó mediante un programa Spike2. La postura fue continuamente registrada mediante una cámara digital. Se encontró que en la fase diurna los acociles, hasta en un 70% del tiempo mantuvieron el cuerpo flotando en el agua, en posición lateral. La actividad eléctrica registrada consistió en trenes multiunitarios, con participación de hasta 8 familias de neuronas. La actividad espontánea fluctuó entre 0.6 y 3Hz. El 60% de las neuronas exploradas tenían entrada visual y el 10% eran mecanosensibles. En el 90% de las unidades, tanto la actividad espontánea como la respuesta a estímulos sensoriales se redujeron durante la flotación lateral. Trabajo parcialmente apoyado por PAPIIT/UNAM Proyecto No: IN200701 y CONACYT 38645N. Las propiedades pasivas de las neuronas del neoestriado de la rata, indican que la resistencia de membrana es heterogénea. Esto podría explicarse por una “lesión” provocada por el electrodo intracelular o bien porque la resistencia de membrana somática sea realmente menor con respecto a la resistencia de membrana en las dendritas. En este trabajo reconstruimos una neurona adulta de neoestriado y con el programa GENESIS diseñamos el modelo compartamental. Nuestro propósito fue encontrar los valores de resistencia de membrana somática y dendrítica que ajusten el modelo a los registros obtenidos con microelectrodo intracelular en condiciones control y en presencia de Ba2+ (5 mM). Nuestros resultados muestran que los trazos control pueden ajustarse a dos exponenciales con una ? ?de 16 ms y una ? ? de 1.5 ms. La resistencia de entrada (RN) fue de 40 M? . Sin embargo, en presencia de bario el ajuste se logró con una sola exponencial de 33 ms y RN de 200 M? . Para ajustar el modelo compartamental a las condiciones control fue necesario disminuir drásticamente la resistencia somática con respecto de la resistencia de membrana dendrítica. Sin embargo, para ajustar el modelo compartamental a los trazos en presencia de bario no fue necesario tener una resistencia de membrana hetereogénea, lo que sugiere la presencia de un corto circuito somático, y fue necesario aumentar la resistencia de membrana en toda la neurona, lo que sugiere bloqueo de canales de potasio en toda la membrana somato-dendrítica. Financiado por: DGAPA-UNAM (IN202100; 202300), CONACyT (31839-N), The Millenium Research Initiative (W-8072), y FINCA-NIH (TWO1214-01). O-69 O-70 LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. II Tapia, D.*, Laville, A.*, Reyes, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Bargas, J., y Galarraga, E. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. LAS PROPIEDADES DE CABLE EN LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS: REGISTRO INTRACELULAR vs REGISTRO EN CÉLULA ENTERA. III Laville, A.*, Reyes, A.*, Guzmán J.N.*, Vergara, R.*, Tapia, D.*, Galarraga, E., y Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular UNAM, México, D.F. Para establecer las propiedades de cable, ya sea usando un modelo de cilindro equivalente o un modelo compartamental, es necesario conocer la anatomía de las neuronas. En este trabajo se muestra el marcado intracelular con biocitina, de las neuronas espinosas medianas, tanto de neuronas registradas intracelularmente en rebanadas de rata adulta, como de célula entera en postnatales (12-13 días de nacida). Las neuronas así marcadas se hicieron visibles reaccionando la biocitina con el Kit de Vector + diaminobencidina y mediante la cámara lúcida se reconstruyeron tridimensionalmente. A partir de las reconstrucciones se calculó la superficie membranal en los dos tipos de neuronas, para su comparación directa y como dato para el modelo de cilindro equivalente. Los resultados muestran que las neuronas jovenes tuvieron un 18% menos de superficie membranal que las neuronas adultas. También se usaron las reconstrucciones para establecer dendrogramas y con ellos se construyeron modelos compartamentales en ambos tipos de neuronas. Adicionalmente se observó que en algunos marcados las neuronas espinosas medianas mostraban acoplamiento entre ellas y más esporádicamente con interneuronas. Con relación a la naturaleza peptidérgica de dichas neuronas, se aplicaron técnicas inmunológicas en donde se utilizaron anticuerpos contra Substancia P y Encefalinas. Financiado por: DGAPA-UNAM (IN202100; 202300), CONACyT (31839-N), The Millenium Research Initiative (W-8072), y FINCA-NIH (TWO121401). Es común usar bloqueadores de canales de potasio para “acercar” electrotónicamente eventos lejanos al soma (i.e. sinápticos distales). Esto está sustentado en el hecho de que las dendritas son modeladas como cables a través de los cuales se fuga la carga. En este trabajo medimos las propiedades del cable de las neuronas espinosas medianas en el neoestriado de rata en ausencia y presencia de bloqueadores de potasio con la técnica de célula entera. Para obtener los parámetros del cable se usó el modelo del cilindro equivalente. Las neuronas registradas fueron marcadas con biocitina y reconstruidas. Con la reconstrucción se elaboró un dendrograma y con este se construyó un modelo compartamental. Las neuronas bloqueadas muestran una constante de tiempo de la membrana notablemente mayor, una reducción en la longitud electrotónica, pero un cambio poco substancial en la constante de tiempo ecualizadora indicando que está es una medida de la distribución de carga en el árbol dendrítico. El modelo compartamental logró simular los trazos experimentales sólo cuando el soma y las ramas principales del árbol dendrítico tenían una resistencia de membrana diferente a la de las dendritas más distales, y sólo cuando los parámetros introducidos al modelo eran similares a los de la versión modificada del cilindro equivalente. Considerando el esfuerzo que implica el modelo compartamental, la equivalencia mostrada con la del cilindro equivalente modificado, hace que este último sea una buena alternativa para medir las propiedades de cable. Financiado por: DGAPA-UNAM (IN202100; 202300), CONACyT (31839-N), The Millenium Research Initiative (W-8072), y FINCA-NIH (TWO1214-01). O-71 O-72 LA ACTIVACION DEL RECEPTOR DOPAMINERGICO D2 MODULA CORRIENTES DE Ca2+ DE TIPO P/Q EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE PROYECCION. Salgado, H.*, Vilchis, C.*, Pérez-Roselló, T.*, Galarraga, E., Bargas, José., Instituto de Fisiología Celular, UNAM. CONSECUENCIAS FUNCIONALES DE LA MUTACION leaner EN CANALES DE CALCIO TIPO P/Q EXPRESADOS HETEROLOGAMENTE. Esperanza García, McRory, J.*, HernándezValdivia C.* y Snutch, T.P.* CUIB, Universidad de Colima y Biotechnology Laboratory, University of British Columbia. El presente trabajo describe las acciones de los agonistas del receptor dopaminérgico D2, quinelorane y quinpirole, sobre las corrientes de calcio (ICa2+) de las neuronas espinosas de proyección agudamente disociadas. Se utilizó la técnica de fijación de voltaje en la configuración de célula entera. El quinelorane (10 µM) redujo la ICa2+ total en un 35 ± 4 %. Efectos similares se observaron con quinpirole. Como nuestro laboratorio ya ha reportado que la activación de los receptores D2 inhibe la ICa2+ de tipo L mediante la cadena de señalización PLC/IP3/calcineurina (J. Neuroscience 20:8987), en el presente trabajo los canales de tipo L fueron bloqueados con nitrendipina (10 µM). Así, la pregunta a responder era si la activación del receptor D2 modula las ICa2+ de tipo no-L (N, P/Q, R). En estas condiciones, el agonista D2 quinelorane produjo una reducción en la corriente de 17 ± 2 % de la corriente total; sugiriendo que el receptor D2 si modula las ICa2+ de tipo no-L. Utilizando las toxinas antagonistas de los diversos tipos de canal de calcio observamos que solo la ω-AgTx TK (400 nM) fue capaz de ocluir el efecto de los agonistas del receptor D2. El tratamiento con ω-CgTx GVIA (1µM) no fue capaz de ocluir el efecto de los agonistas D2 sobre las ICa2+. Los resultados demuestran que: a) la activación del receptor dopaminérgico D2 modula las ICa2+ de tipo no-L, y b) los canales de tipo no-L modulados parecen ser exclusivamente del tipo P/Q. En el ratón leaner (tgla) se ha identificado una mutación puntual que modifica el marco de lectura del gen que codifica la subunidad α1 del canal de calcio tipo P/Q, dando como resultado la expresión de dos isoformas de proteínas con una alteración en la secuencia de aminoácidos del extremo carboxilo (tgla corto y tgla largo). En esta región intracelular se localizan dominios de interacción con calmodulina, que regula tanto la inactivación como la facilitación del canal. Con el propósito de estudiar las propiedades biofísicas de cada una de las isoformas generadas por la mutación tgla, se realizó mutagénesis dirigida en el cDNA del canal de calcio P/Q y se expresaron los canales mutantes en la línea celular HEK tsa-201. Se registraron las corrientes macroscópicas en las células HEK utilizando la configuración de célula completa. La mutación no altera la dependencia de voltaje de la activación de los canales de calcio. La cinética de inactivación es más lenta en la isoforma truncada tgla corto, mientras que en la isoforma tgla largo el curso temporal de la inactivación es similar al canal silvestre. La inactivación en estado estable no presenta cambios significativos en ninguna de las isoformas. Los resultados sugieren que la mutación tgla altera el mecanismo de modulación de la inactivación mediado por calcio-calmodulina. Financiado por: DGAPA: IN202300; IN202100; CONACyT: 31839-N; The Millenium Research Initiative: W-8072 No. 35806-N y FIRCA-NIH grant # TWO1214. Financiado parcialmente por el Fondo “Ramón Alvarez-Buylla de Aldana” de la Universidad de Colima. O-73 O-74 RE-EVALUACION DEL MECANISMO DE ACCION DE LA 4AMINOPIRIDINA (4-AP) EN LAS TERMINALES NERVIOSAS CEREBRALES. Galván, E.*, y Sitges, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México. EFECTO DE LA DIABETES MELLITUS SOBRE LAS CORRIENTES DE POTASIO ACTIVADAS POR VOLTAJE EN MIOCITOS AISLADOS DE RATÓN. Torres-Jácome, J.*, FerrerVillada T.* y Sánchez-Chapula, J. A. Instituto de Fisiología de la B.U.A.P. y Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas de la U de C. La 4-AP es un agente convulsivante que aumenta la liberación de neurotransmisores en el SNC y es ampliamente utilizada para inducir epilepsia experimental. Sin embargo el mecanismo de acción de la 4-AP aún no está bien comprendido. En el presente estudio se investigó el efecto de la 4-AP a dos dosis (0.1 y 1 mM) sobre la concentración interna de los iones, Na+ (Nai) , K+ (Ki) y Ca2+ (Cai) en terminales nerviosas aisladas de estriado de rata precargadas con los indicadores fluorescentes, SBFI, PBFI y fura-2, respectivamente. Así como su efecto sobre la liberación de los neurotransmisores DA, Glu y GABA (detectados por HPLC). La 4-AP aumentó la Nai de forma dependiente de dosis. El bloqueador de los canales de Na+ sensibles a voltaje, TTX, abolió el aumento en el Nai inducido por 4-AP 0.1 mM y por veratridina 10 µM, pero solamente inhibió un tercio del aumento en el Nai inducido por 4-AP a la dosis alta (1 mM) y no inhibió el aumento en el Nai inducido por ouabaina. La Ki se disminuyó al inhibir a la ATPasa de Na/K, con ouabaina e interesantemente también con la dosis alta (1 mM) de 4-AP. Mientras que la 4-AP a la dosis baja (0.1 mM) no modificó la Ki. El aumento en la Cai inducido por la 4-AP a ambas dosis fue similar y altamente sensible a TTX, así como al bloqueo de los canales de Ca2+ con ω-Aga-IVA en combinación con ω-CnTx-GVIA. Estos hallazgos indican: (1) que el bloqueo de los canales de K+ causado por dosis altas de 4-AP inhibe indirectamente a la ATPasa de Na/K propiciando el aumento adicional en la Nai no sensible a TTX, y (2) que solo la fracción del aumento en la Nai sensible a TTX que induce la 4-AP aumenta la Cai por activación de los canales de Ca2+. Consistentemente, la TTX solo inhibió parte de la liberación mediada por reversión de los transportadores de neurotransmisores que induce la 4-AP 1 mM. Los pacientes con Diabetes Mellitus (DM) presentan arritmias cardíacas que están asociadas con aumento en la duración del potencial de acción (PA). En el presente trabajo se indujo diabetes experimental a ratones, similar a la Diabetes Mellitus tipo I, administrando una sola dosis de Streptozotocina (100mg/Kg). Se estudiaron las alteraciones que produce la DM a la duración del potencial de acción ventricular y a las corrientes de potasio involucradas en la repolarización de la membrana en miocitos aislados del septum, del epicardio y de la pared libre del ventrículo derecho. La DM, produjo un aumento en la duración al 90% de la repolarización del PA (DPA90) con respecto al control. En la región septum la DPA90 aumento 2.03 veces, en la pared libre del ventrículo derecho aumento 1.9 veces y en epicardio aumento 2.6 veces. Los aumentos en la duración del potencial de acción estuvieron asociados a la disminución de las corrientes de potasio activadas por voltaje Itof, Itos e Ikslow. La DM, no produjo cambios significativos en la corriente Iss. La DM, no produjo cambios en la cinética de activación, recuperación de la inactivación ni en la inactivación en el estado estable, de las corrientes que disminuyeron. Al incubar los miocitos aislados de ratones diabéticos con ácido pirúvico o con insulina los valores de las densidades de corrientes registradas en estas células fueros semejantes a los valores registrados en células aisladas de animales controles. Sugerimos que la DM disminuye las corrientes debido a la disminución de la densidad de canales funcionales en la membrana, también sugerimos que esta disminución es debida a la falta de insulina en sangre y a los cambios metabólicos asociados a la disminución en la oxidación de la glucosa. O-75 O-76 CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE LOS PROMOTORES DE LOS CANALES DE SODIO Nav1.7 Y Nax, DOS DE LOS GENES DEL CLUSTER DE SUBUNIDADES ALFA DE CANALES DE SODIO. García-Villegas, M.R.* (avalado por Martínez-Fong, Daniel), Arni, S.*, Morales, M.A.* y López-Juárez, A.*Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. México, D.F. UN PEPTIDO AISLADO DEL VENENO DE LA TARÁNTULA G. ROSEA. INHIBE SELECTIVAMENTE LA CORRIENTE DE SODIO NEURONAL. Escobedo, Y.* (1), Cifuentes, F.* (2), Fuentes, D.* (3) , Alagón, A. (3), Possani, L.(3), Hernández-Cruz, A. (1) Departamento de Biofísica, IFC (1); Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIB (2) y Departamento de Reconocimiento Molecular y Bioestructura, IBT (3) UNAM. Nuestro interés es estudiar las secuencias de ADN involucradas en la regulación de la expresión de genes neuronales, como una estrategia para identificar algunas de las proteínas (factores de transcripción) y mecanismos moleculares que participan en la diferenciación neuronal terminal. Decidimos centrar nuestra atención en el estudio de los genes Scn9A que codifica para la subunidad alfa del canal de sodio Nav1.7 y Scn7A que codifica para el canal de sodio Nax, ambos genes se expresan preferencialmente en neuronas del sistema nervioso periférico. El hecho de que ambos genes tengan un patrón similar de expresión tejidoespecífica constituye un modelo interesante de estudio de la regulación genética de cada gene por separado y de la posibilidad de que compartan elementos de regulación o se expresen coordinadamente. Hemos clonado y caracterizado al promotor transcripcional del canal Nav1.7 de ratón, sin embargo, no encontramos ningún elemento de regulación tejido-específica cercano al promotor. Actualmente, estamos siguiendo una estrategia de genética funcional para buscar elementos regulatorios a larga distancia. Encontramos que el gene Scn7A se localiza entre 14 y 40 Kb hacía el 5’ del gene Scn9A. También hemos clonado y mapeado al promotor del canal Nax. Por otro lado, analizamos la expresión del mensajero de Nax en 2 líneas celulares de neuroblastoma de ratón: Neuro2A que lo expresa y NG108-15 que no lo expresa a menos que se diferencíe con dibutiril-AMPc. Estamos utilizando estas líneas celulares para disecar los elementos del promotor que participan en la expresión tejido específica de Nax. Los venenos de araña son una fuente invaluable de compuestos con actividad sobre el sistema nervioso. De especial interés son las toxinas proteícas capaces de interactuar sobre diversos canales iónicos de forma selectiva y específica. El veneno de la araña G. rosea se fraccionó por HPLC y la actividad de 15 fracciones individuales se probó sobre la corriente de sodio (INa) de neuronas del ganglio cervical superior registrada con la técnica de patch clamp en configuración de célula completa. Encontramos que un péptido (GrTx1) de la fracción III del cromatograma inhibe reversiblemente la INa generada por pulsos despolarizantes entre -60 y +44 mV (porcentaje de inhibición 44.5% ± 2.7 a -10 mV). No se observaron efectos sobre la magnitud de la corriente de calcio en las mismas células. En 45 mM de [Na]ext, la INa máxima fue de 1.9 ± 0.7 nA (control) y de -0.9 ± 0.3 nA (~1 min en GrTx1, 500 nM). El pico de la curva corriente-voltaje sufrió un corrimiento de –10 mV en presencia de GrTx1. Los parámetros de la función de Boltzman ajustada a la relación gNa/gNamax vs Vm fueron: V½ =-27.4± 2.7 mV; k = 4.7± 0.4 (control) y V½ =-35.5±1.6 mV; k = 5.16 ± 0.6 (GrTx1): GrTx1 también aceleró la velocidad de inactivación de INa a todos los voltajes. No obstante, a los voltajes que generaron la INa máxima, la constante de tiempo de la inactivación fue muy similar (1.66 ± 0.4 y 1.65 ± 0.6 ms; control y GrTx1, respectivamente). Estos datos sugieren que la toxina inhibe el flujo de corriente por un mecanismo que incluye efectos sobre el sensor de votaje de los canales de sodio neuronales. Financiado por CONACyT (proyectos Z-005 y 34329-N) y DGAPA IN210401. O-77 POSIBLES MECANISMOS INVOLUCRADOS EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR LA ACUMULACION DE GLUTAMATO EXTRACELULAR DURANTE LA INHIBICION MITOCONDRIAL. García, O.*,1 y Massieu, L. Depto. de Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. El incremento en la concentración de glutamato extracelular producido por la inhibición de sus sistemas de captura con el L-trans-pirrolidin-2,4dicarboxilato (PDC), no es suficiente para producir daño en las neuronas granulares de cerebelo (NGC), a menos que su metabolismo energético se encuentre disminuído por venenos mitocondriales como el ácido 3nitropropiónico (3-NP) (J.Neurosci. Res, 2001 64: 418). Con el fin de dilucidar algunos de los eventos involucrados en la muerte celular producida por el 3-NP+PDC, cultivos de NGC fueron expuestos durante 0.5, 2, y 4 hrs a 3-NP+PDC y se analizaron los niveles de ATP, la actividad mitocondrial, la morfología y la viabilidad celular; obteniéndose los siguientes resultados: 1) los niveles de ATP se reducen un 50% después de la exposición a 3-NP+PDC a todos los tiempos estudiados, 2) se presenta una disminución progresiva de la actividad mitocondrial, 3) después de 4 hrs de exposición a 3-NP+PDC las células pierden el 50% de la actividad mitocondrial, la integridad de su membrana plasmática y muestran el núcleo condensado. La presencia del MK801, un antagonista de los receptores NMDA, del atrapador de radicales libres (PBN) y de los sustratos energéticos el piruvato y acetoacetato, previenen los efectos producidos por el 3-NP+PDC. Estos datos siguieren que la estimulación de los receptores NMDA, la producción de radicales libres, y una disminución en la actividad mitocondrial y en los niveles de ATP, son eventos que se encuentran involucrados en la muerte producida en nuestras condiciones experimentales. Este trabajo fue financiado por PAPIIT proyecto IN203400 1 Recibe beca CONACYT 163330 y DGEP-UNAM. O-78 ALTERACIÓN EN LA CITOARQUITECTURA EN NEURONAS DE LA CORTEZA MEDIA PREFRONTAL Y DEL HIPOCAMPO DE RATAS QUE SUFRIERON HIPOXIA DURANTE EL TRABAJO DE PARTO. Juárez-Díaz, I.*(avalado por Gonzalo Flores Alvarez), Moctezuma-Martiñon, C* y Alquicer-Barrera, P. G* Flores, G. Laboratorio de Neuropsiquiatría, Instituto de fisiología de la BUAP. Aproximadamente 1 millón de niños en todo el mundo desarrollan secuelas cerebrales por complicaciones durante el proceso de parto, dentro de los cuales la hipoxia es la más frecuente y el grado de daño depende de varios factores. Existe la hipótesis de que al haber una disfunción mínima del cerebro en etapas tempranas del desarrollo de un individuo, aumenta la probabilidad de que éste sufra esquizofrenia en la etapa adulta. Se utilizó el modelo animal (rata) propuesto por Bjelke para el estudio de los efectos de la hipoxia. Siguiendo éste modelo, se extrajo el útero de ratas preñadas para inducir hipoxia en las crías, éstas se dejaron crecer a diferentes edades (2, 7, 14, 21 y 35 días) y posteriormente fueron sacrificadas. Se les extrajo y tiñó el cerebro mediante la técnica de Cox-Golgi para evaluar los cambios morfológicos de las neuronas de la región CA1(cuerno de Ammon) del Hipocampo y de la Corteza Media Prefrontal. Mediante el método de Sholl se obtuvo la longitud dendrítica y número de espinas por unidad de longitud. Nuestros resultados muestran que las neuronas de ambas regiones son afectadas por la disminución de oxigeno generando que éstas células presenten, a los 2 días de edad de la rata, un árbol dendrítico más pequeño comparado con los controles; esta situación se mantiene en las siguientes edades pero interesantemente a los 14 días de edad, las neuronas del Hipocampo recuperan su longitud dendrítica y a los 21 y 35 días los animales que sufrieron hipoxia presentan un árbol dendrítico más grande comparado con los controles. La hipoxia al nacimiento indujo cambios morfológicos en las dos regiones evaluadas del cerebro. (Aprobado por el proyecto CONACYT-Viep No 11-89101). O-79 O-80 EFECTO DEL AISLAMIENTO SOCIAL SOBRE EL DESARROLLO DE NEURONAS PIRAMIDALES DE CORTEZA E HIPOCAMPO. Rojas-Paredes. D.*, Silva-Gómez, A.B.* y Flores, G., Instituto de Fisiología, BUAP, Pue., México LAS CRISIS CONVULSIVAS INDUCIDAS POR HIPERTERMIA PROVOCAN MUERTE NEURONAL DURANTE EL DESARROLLO DEL CEREBRO DE RATA. Sandra Orozco-Suárez*, Misael González-Ramírez, Sebastián Castillo y Alfredo Feria-VelascoA. Unidad de Investigación en Enfermedades Neurológicas, Unidad de investigación en Enfermedades Oncológicas, CMN SXXI, IMSS, México D.F. y aCIATEJ-SEP-CONACYT, Guadalajara, Jal. El síndrome de aislamiento social esta caracterizado por hiperactividad y cambios en la respuesta a agonistas dopaminérgicos. La corteza media prefrontal (CMPF) y el hipocampo (Hc) están interconectados con la corteza limbíca a través de interconexiones intracorticales. Aunque los estudios sobre el aislamiento social (AS) inducido en ratas adultas sugiere cambios en la CMPF, aun no se sabe las consecuencias sobre el desarrollo de las neuronas piramidales de la capa 3 de esta estructura y de CA1 del Hc cuando el AS se presenta en etapas tempranas del desarrollo. El presente trabajo fue diseñado para estudiar los efectos de un periodo largo de AS en etapas tempranas de la vida de la rata sobre la morfología de las neuronas piramidales de CMPF e Hc. 8 ratas Sprague-Dawley de 21 días de edad fueron aisladas por 8 semanas. El AS consistió en poner una rata por caja y manipularlas solo una vez por semana. Posterior a este periodo, se midió la actividad locomotora por 60 minutos e inmediatamente después se extrajo el cerebro el cual se proceso con la técnica de GolgiCox. El desarrollo del árbol dendrítico fue analizado mediante el método de Sholl (1953) y también se analizó el desarrollo de las espinas dendríticas. La actividad locomotora de las ratas aisladas fue significativamente mayor respecto al grupo control. Las neuronas de CA1 mostraron una clara disminución de la longitud del árbol dendrítico. No se observaron cambios las neuronas de CMPF. Hubo una disminución en el número de espinas dendríticas en las neuronas de las dos regiones cerebrales analizadas. Estos resultados sugieren que el AS temprano puede en parte afectar la morfología de las neuronas de CMPF e Hc y los cambios de algún modo explican las alteraciones conductuales presentes en estos animales. Apoyado por CONACYT-México 30675-M. Objetivo. Determinar si las crisis convulsivas inducidas por hipertermia producen muerte neuronal durante el desarrollo del cerebro de rata. Metodología. Ratas de 10 días de edad, se dividieron en tres grupos; Un control normotérmico (C), otro, control de temperatura (CT) al cual se le inyecto pentobarbital para inhibir las crisis y el grupo experimental (Hyp) al que se le indujeron crisis convulsivas por hipertermia (40° ± 1.5), durante 30 minutos. Los animales se sacrificaron inmediatamente de producidas las crisis, a las 24 h y a los; 5, 20, 30 y 50 días después de la ultima crisis . Los cerebros de los animales fueron procesados para: inmunocitoquímica, GABA y Neuronas (ENE), microscopia electrónica y Túnel. Resultados. Nuestros resultados muestran que las crisis inducidas por hipertermia desencadenan muerte neuronal por apoptosis a las 24 h, 5 y 20 días. A las edades de 30 y 50 días se observó células con apariencia de necrosis. La mayoría de las células muertas corresponden a neuronas y algunas células gliales. Conclusiones. Estos datos nos confirman que las crisis febriles pueden afectar el desarrollo temprano del cerebro por perdida celular, lo que puede predisponer el desarrollo de epilepsia en etapa adulta. Este trabajo fue financiado por la Coordinación de Investigación en Salud del IMSS, numero FP 2001/329 O-81 O-82 USO DE TRANSPLANTES DE GLÍA ENVOLVENTE DEL BULBO OLFATORIO PARA PROMOVER LA REGENERACIÓN. GudiñoCabrera,G.1 Ortuño-Sahagún,D.1 y Nieto-Sampedro, M.*2 1Dpto. de Biología Celular y Molecular. CUCBA. Universidad de Guadalajara. México. 2Instituto Cajal. CSIC. Madrid, España. TRANSFERENCIA ADENOVIRAL DE GENES SUPRESORES DE TUMORES, DIRIGIDOS TRANSCRIPCIONALMENTE A GLIOMAS. Benítez-Hernández JA* y Segovia J. Dept. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, 07300, D.F. A diferencia del sistema nervioso periférico (SNP), en el sistema nervioso central (SNC) de mamíferos, una vez que el sistema se daña no regenera. Una característica muy particular e inherente del SNP son sus células gliales o células de Schwann. Las células de Schwann confieren al SNP la capacidad de autoregeneración, a diferencia de los astrocitos y oligodendrocitos en el SNC. Sin embargo, existen en el SNC células gliales que lejos de inhibir el crecimiento neuronal, lo favorecen. Estas células gliales están situadas en zonas muy específicas del SNC, como lo es la glía envolvente (GE) en el bulbo olfatorio. La GE presenta un fenotipo similar al de la célula de Schwann, expresa NGFr (p75), PSA-NCAM, GFAP, vimentina y sulfátido O4, y en contacto con neuronas sensoriales llega a mielinizarlas. Utilizamos células de GE para promover la regeneración en el SNC en diferentes modelos experimentales de lesión de médula espinal. Transplantamos GE de rata adulta, cultivada in vitro marcada y purificada, tras rizotomías unilaterales. En un modelo, seccionamos las raíces de L1 a L6, y en otro de L6 a S2, que inervan el nervio ciático y la vejiga respectivamente. En ambos casos, la GE favorece la regeneración de axones sensoriales seccionados, así como su crecimiento hacia la médula y dentro de ella. Además, la GE reduce considerablemente la gliosis que se produce después de una lesión en la médula espinal. Los axones regenerados forman sinapsis con sus dianas y consiguen la recuperación funcional. Estos resultados abren un amplio campo de investigación, encaminado al abordaje de los problemas de degeneración y la recuperación funcional de lesiones de fibras nerviosas en el SNC. Los tumores de origen glial (gliomas) son el tipo más común de tumor primario del Sistema Nervioso Central en adultos. El Glioblastoma Multiforme (GBM) es el tipo más grave de gliomas. Varias alteraciones genéticas, han sido asociadas con la transformación de los astrocitos y la progresión de los gliomas, alteraciones de genes involucrados en el ciclo celular, de genes supresores de tumores y la sobreexpresión de factores de crecimiento y sus receptores. Los glioblastomas han mostrado ser altamente resistentes a la mayoría de los tratamientos convencionales. La terapia génica específica del Sistema Nervioso Central, es una nueva estrategia terapéutica para el tratamiento de estas neoplasias. La idea de la terapia génica a gliomas empleando vectores adenovirales como sistemas de liberación, es extremadamente atractiva, particularmente con respecto a la restauración de genes supresores de tumores, y la expresión de genes proapoptóticos y suicidas. En este trabajo se propone el diseño experimental de una nueva estrategia adenoviral de terapia génica múltiple especifica de gliomas, combinando el efecto terapéutico de diferentes genes: apoptóticos como p53; proapotóticos como gas-1 (growth arrest specific-1) y suicidas como HSV-TK (Human Simplex Virus-Timidine Kinase). Para el direccionamiento de genes se empleó el promotor específico de glia gfa2, el cual regula a nivel transcripcional la expresión de estos genes y es modulado por daño al sistema nervioso central. O-83 O-84 POLIPLEX FUSOGÉNICO-CARIOFÍLICO DE NEUROTENSINA: ESTRATEGIA PROMISORIA PARA TRANSFERENCIA GÉNICA AL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. Navarro-Quiroga I.1,2*, Barrón-Moreno F.1*, González-Barrios J.A. 1* y Martínez-Fong D1. Departamento de Fisiología Biofísica y Neurociencia CINVESTAV-IPN 1 , Doctorado en Ciencias Biomédicas, UNAM 2. TRANSFERENCIA DEL GEN HUMANO PARA EL FACTOR NEUROTRÓFICO DERIVADO DE LA GLÍA (hGDNF) A NEURONAS DOPAMINÉRGICAS UTILIZANDO EL VECTOR DE NEUROTENSINA. JA González-Barrios1,2, I Navarro-Quiroga1, V Anaya1, J Aceves1 y D Martinez-Fong. 1Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV-IPN, 2Depto. Urgencias Adultos, 1o De Octubre, ISSSTE, México, D.F., 07300. Recientemente hemos reportado que la neurotensina (NT)-SPDPpoli-L-lisina es capaz de unir DNA plasmídico (NT-poliplex) y transferir genes exógenos (polifectar) a células que expresan el receptor de alta afinidad para NT (NTRH), aunque con baja eficiencia de transfección: in vitro, 6.5 ± 1.5%, e in vivo, 5 ± 4%. En este trabajo logramos incrementar la eficiencia de polifección mediante la integración al NT-poliplex del péptido fusogénico HA2 de la hemaglutinina y la señal de localización nuclear Vp1del SV40 (NT-poliplex-fusogénico-cariofílico). Se utilizó microscopia confocal y citometría de flujo para observar la localización del transgén y su expresión. El NT-poliplex-fusogénico-cariofílico produjo internalización y expresión del gen reportero en el 50% de las células N1E-115. Aunque en menor medida, la adición de cada péptido viral por separado al NT-poliplex (NT-poliplex-fusogénico o NT-poliplex-cariofílico) mejoró la polifección. El NT-poliplexfusogénico produjo un 22.41 ± 5.96% de internalización y 20.35 ± 0.82% de expresión en células N1E-115, mientras el NT-poliplexcariofílico produjo 13.75 ± 3.88% y 10.94 ± 2.04%, respectivamente. El NT-poliplex-fusogénico-cariofílico fue microinyectado en la substantia nigra para probar su capacidad de transferir genes in vivo. El NT-poliplex-fusogénico-cariofilico fue observado dentro de las neuronas dopaminérgicas y produjo una alta proporción de polifección en ellas. La internalización y la expresión fueron prevenidas por el SR-48692. Debido a que el NTpoliplex-fusogénico-cariofílico es un vector génico altamente eficiente y específico, puede utilizarse para transferir genes de interés fisiológico a neuronas que expresan NTRH. Donativo CONACYT #34398-N. Se ha demostrado que el GDNF promueve el mantenimiento y la sobrevivencia de neuronas dopaminérgicas en el cerebro adulto. Recientemente hemos reportado la versión mejorada del vector de neurotensina capaz de transferir genes (polifectar) a neuronas dopaminérgicas in vivo. Nuestra hipótesis fue que la polifección de las neuronas dopaminérgicas de la substancia nigra (SNc) con el gen que codifica para hGDNF evitará el progreso de la neurodegeneración inducida por 6OH-dopamina (6-HO-DA). La estrategia experimental consistió en inducir lesión parcial del sistema nigro-estriatal inyectando 6HO-DA (45 µg/3µl) en el estriado. A los 8 días, el grupo experimental se polifectó con el gen que codifica para el hGDNF, y el grupo control se polifectó con el gen que codifica para la proteína verde fluorescente (PVF). El efecto de la expresión de ambos genes se evaluó a través de la conducta de giro y de parámetros neuroquímicos y moleculares. En ratas polifectadas con hGDNF, se observó que la conducta de giro inducida por anfetamina disminuyó 50 ± 10% a la semana posterior a la polifección y 80 ± 5% a las dos semanas. Sin embargo, la polifección del gen que codifica para PVF no modificó la conducta de giro. El contenido de DA se incrementó 300 ± 50% en la SNc y 250 ± 50% en el estriado a la semana postpolifección. Así mismo la polifección con hGDNF, pero no la PVF, incrementó 80% el nivel de ARNm para GDNF en la SNc con respecto al control lesionado. Nuestros resultados muestran el efecto protector de la polifección del gen hGDNF sobre la neurodegeneración parcial y progresiva del sistema dopaminérgico nigro-estriatal, inducida por 6HO-DA. Donativo CONACYT #34398-N. O-85 O-86 EFECTO NEUROPROTECTOR E INHIBIDOR DE LA PLASTICIDAD NEURONAL DE LA METILPREDNISOLONA ADMINISTRADA A DIFERENTES DÓSIS EN LESIÓN TRAUMATICA DE MÉDULA ESPINAL DE DISTINTA INTENSIDAD. Hermelinda Salgado-Ceballos1,4*, Sergio TorresCastillo4,5, Jose Luis Torres-Vera2, Diana Zabaleta3, Alejandro Zavala3, Sandra Orozco-Suárez1, Ruth Capin2, Alfredo Feria-Velasco6 **. 1.U.I.M.E. Neurológicas, 2.U.I.M.E. Oncológicas y 3. Servicio de Neurología, CMN Siglo XXI, IMSS; 4.Proyecto Camina A.C., 5.UAM Iztapalapa, 6.CIATEJ SEP-CONACYT. EVIDENCIAS DE RECEPTORES ADRENERGICOS EN EL CORAZÓN DE Ambystoma mexicanum. Cano A2*., Prado E1*., Guarner V2. y Vargas A2*. 1Criadero Tachipa Umbral Maya’Ik Centro. 2Departamento de Fisiología, Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez”, México D.F. canagu@cardiolgia.org.mx. La metilprednisolona (MP) es el tratamiento de elección en la fase aguda de la lesión traumática de médula espinal (LTME). Sin embargo, se desconoce el efecto que sobre la función motora puede tener la MP cuando la lesión se encuentra en diferentes segmentos medulares y se produce con distinta intensidad. Se estudiaron 180 ratas hembras, LongEvans, adultas (250-280g) con LTME leve (30g/cm), moderada (75g/cm) o severa (150g/cm) a nivel cervical, torácico o lumbar. Cada grupo se dividió en 4 subgrupos de 5 ratas cada uno y se les administró diferentes dosis de MP (15, 30 ó 45 mg/kg de peso corporal) o se dejarón sin tratamiento (control). Las ratas se evaluaron diariamente la primera semana con la escala BBB, cada 8 días durante 4 meses y mensualmente hasta completar un año. A los 4 meses, la médula espinal de 3 ratas de cada subgrupo y la del resto al año, fue analizada. Se evaluó el número de axones, colaterales axónicas, fibras mielínicas, fibras amielínicas y espesor relativo de la vaina de mielina. En LTME toracica, leve solo se obtuvieron efectos benéficos con MP a 15 mg/kg (p<0.04). En LTME cervical y torácica, moderada no se encontró ningún efecto benéfico y en cervical con dosis de 30 y 45 mg/kg la mortalidad se incrementó (p<0.05), mientras que en la lumbar y con 15 mg/kg se obtuvieron efectos benéficos (p<0.05) y con dosis mayores efectos deletéreos (p<0.05). En LTME cervical y lumbar severa los efectos fueron negativos, excepto en lumbar con 15 mg/kg de MP. En LTME toracica severa todas las dosis administradas fueron benéficas, especialmente 30 mg/kg (p<0.03). En los grupos en los que la MP protegió a los axones y a sus vainas de mielina del daño, paralelamente inhibió la formación de colaterales axónicas. Se observó cierta correlación entre la severidad y el nivel de la lesión y la dosis de MP requerida para obtener efectos positivos después de una LTME. Los agonistas adrenérgicos se utilizan en modelos animales de lesión miocárdica. En los mamíferos se postula que los adrenérgicos ejercen su acción vía los receptores en las arterias coronarias. El isoproterenol (ISO) produce daño miocárdico en anfibios anuros y recientemente nosotros encontramos que también lo hace en el urodelo A. mexicanum. Sin embargo en los anfibios no se han identificado coronarias y la presencia de receptores adrenérgicos en el corazón de urodelos se desconoce. En el presente estudio, en ensayos de órgano aislado, con el corazón de A. mexicanum*, se evaluó el efecto de concentraciones crecientes de un agonista α (fenilefrina) y uno β (ISO) así como de sus antagonistas prazosina (α) y propranolol (β). Se registró la actividad espontánea con un transductor de tensión conectado a un polígrafo Grass. La fenilefrina incrementó la frecuencia de contracción entre 40 y 200% y la fuerza entre 30 y 50%, con concentraciones entre 1 y 1000 µM. Mientras que el ISO incrementó la frecuencia entre 60 y 120% y la fuerza entre 50 y 250% con concentraciones entre 1 y 1000 µM respectivamente. En ambos casos el efecto fue revertido por los antagonistas de manera dosis dependiente, con un bloqueo mayor con el antagonista β. Nuestros resultados indican la existencia de receptores α y β adrenérgicos en el corazón de A. mexicanum. Por lo tanto el daño que el ISO produce en el corazón de este anfibio podría estar mediado por la activación inicial de los receptores β en el miocardio. Será necesario investigar cuáles son los subtipos tanto de receptores α como β, así como cuantificar su concentración en aurícula y ventrículo. *Permiso SEMARNAP:INES-CITES-DGVS-CR-IN-0249DF./97. O-87 O-88 PARTICIPACIÓN DE LOS RECEPTORES ADRENÉRGICOS E HISTAMINÉRGICOS EN EL EFECTO DEL QUINPIROLE EN LA AORTA DE RATA. 3Arellano, M.G*. (Avalado por Rocha Luisa); Castillo, C*.; 1,2Valencia, I.* Escuela Superior de Medicina del I.P.N. MODULACIÓN MUSCARÍNICA DE LAS CORRIENTES DE Ca2+ DE TIPO N Y P/Q EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE PROYECCION. Pérez-Roselló, T. *, Vilchis, C. *, Salgado, H. *, Figueroa, A. *, Galarraga, E., Bargas, José. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. El quinpirole es un agonista de los receptores dopaminérgicos D2/D3 al cual se le han descrito acciones centrales y periféricas. A nivel del sistema cardiovascular, las acciones periféricas se relacionan con una acción depresora por inhibir principalmente la liberación de catecolaminas. Sin embargo existe información insuficiente en la literatura acerca de los efectos directos del quinpirole sobre los vasos sanguíneos, por lo que el propósito del presente trabajo fue aportar información para determinar las acciones directas del quinpirole en vasos sanguíneos. Con este fin se emplearon anillos aórticos de rata con y sin endotelio y se construyeron curvas concentración respuesta de relajación al quinpirole, histamina o clonidina en ausencia o presencia de raclopride (antagonista D2/D32), prazosina (antagonista α1), bromofeniramina (antagonista H1), L-NAME (inhibidor de la sintasa de NO) o yohimbina (antagonista α2). El quinpirole provocó una relajación dependiente de endotelio (Emax = 32.5 ± 7.1) que no se bloqueo con raclopride (Emax = 34.4 ± 6.5) ni prazosina (Emax = 33 ± 3.5), pero si con bromofeniramina (Emax = 62.2 ± 1.72, p<0.05), yohimbina (Emax = 65.01 ± 3.41, p<0.05) o L-NAME (Emax = 65 ± 7.8, p<0.05), a concentraciones que inhiben la respuesta relajante inducida por agentes histaminérgicos o adrenérgicos. Los resultados indican que el quinpirole provocan un efecto vasodilatador por estimular receptores α2 adrenérgicos y H1 histaminérgicos, los cuales están asociados a la formación y liberación de NO por el endotelio. Proyecto apoyado por COFAA y CGEPI Becario COFAA, 2becario EDI, 3Becario PIFI 1 Los receptores muscarínicos M1 y M4 son abundantes en las neuronas neoestriatales de proyección y la activación de receptores muscarínicos reduce la corriente de calcio (ICa) (Howe & Surmeier, 1995). Sin embargo, no se ha identificado el tipo de receptor muscarínico que media este efecto. En este trabajo utilizamos 2 antagonistas específicos (MT-7 = antagonista del receptor M1 y MT-3 = antagonista del receptor M4) y un agonista selectivo (MT- 1 = agonista preferente del receptor M1), para determinar el tipo de receptor muscarínico involucrado en la inhibición de la ICa de tipo no- L. Con el uso de bloqueadores específicos de los canales de calcio, también identificamos los tipos de canal de calcio modulados. Muscarina (1µM) y MT-1(48 nM) redujeron significativamente la ICa (no-L) en presencia de MT-3 (10 nM). MT- 7 bloqueó la mayor parte del efecto de la muscarina indicando que la mayor parte de la modulación se debe a la activación de receptores de tipo M1. La ω-conotoxina GVIA (1 µM), bloqueador del canal de calcio de tipo N ocluyó parte del efecto de muscarina. Al bloquear los canales de tipo P/Q con ω-conotoxina MVIIC (1 µM) también se ocluyó parte del efecto de la muscarina. Esto sugiere que ambos tipos de canal N y P/Q, son blanco de la modulación muscarínica M1. Financiado por: DGAPA: IN202100; IN202300; CONACYT: 31839-N; The Millenium Research Initiative: W-8072 No. 35806-N y FIRCA-NIH grant # TWO1214 . O-89 O-90 REGULACIÓN POR RECEPTORES MUSCARÍNICOS M1 DE LA FORMACIÓN DE AMPc INDUCIDA POR RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS D1 EN CULTIVOS PRIMARIOS NEURONALES DEL NEOESTRIADO DE LA RATA. Sánchez-Lemus, E.,* de la Vega, M.T.* y Arias-Montaño, J.A. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, D.F. DIFERENTE MODULACIÓN PRESINAPTICA EN LAS ENTRADAS INHIBITORIAS A LAS NEURONAS ESPINOSAS NEOESTRIATALES. Guzmán, J. N.*, Hernández, A.*, Galarraga, E., Laville A.*, Vergara, R.*, Tapia, D., Erlij, P.*, Valdiosera, R., Aceves, J., Bargas, J. Instituto de Fisiología Celular, UNAM; Departamento de Fisiología Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, IPN. En las células espinosas medianas del neoestriado que proyectan a la substancia negra pars reticulada, coexisten receptores D1 para dopamina y M1/M4 para acetilcolina (ACh). Los receptores D1 aumentan los niveles intracelulares de AMPc mediante su acople a proteínas Gαs y en cultivos primarios neuronales del neoestriado el agonista D1 SKF-81297 aumentó la formación de AMPc (Emax= 516 %, EC50 = 22 ± 5 nM, nH = 1.1 ± 0.3). Este efecto fue revertido por el antagonista D1 SCH-23390. Los receptores muscarínicos M1 y M4 activan proteínas Gαq y Gαi, respectivamente. La activación de ambos receptores con el agonista no selectivo carbacol (CCh) podría regular la formación de AMPc en las neuronas estriatales, posibilidad que fue abordada en este trabajo. La acumulación de AMPc inducida por SKF-81297 (200 nM) no fue diferente de la observada en presencia de CCh (100 µM) y SKF-81297 (99 ± 4%). Sin embargo, la adición de 500 nM de pirenzepina (un antagonista selectivo M1) incrementó significativamente el efecto del SKF-81297 sobre la formación de AMPc (136 ± 8% del control con SKF-81297), mientras que la himbacina (antagonista M4, 30 nM) no tuvo efecto (95 ± 6%). La formación basal de AMPc no fue modificada por pirenzepina o por himbacina. Estos resultados sugieren que en los cultivos primarios del neoestriado existe liberación de ACh inducida por la activación del receptor D1, y que la ACh endógena regula la formación de AMPc a través de los receptores M1, presumiblemente por aumento en la [Ca2+]i e inhibición de la enzima adenilil ciclasa V (predominante en las neuronas espinosas). Las neuronas espinosas medianas (NEM) reciben entradas GABAérgicas de otras NEM (colaterales recurrentes) y de interneuronas. Las NEM proyectan al globo pálido (GP), núcleo entopeduncular (EP) o sustancia nigra (SN), pero todos los axones de proyección pasan a través del GP. Los agonistas de receptores a dopamina D1 incrementan la liberación de GABA de las terminales de las NEM en SN. En contraparte, agonistas de receptores D2 disminuyen la secreción de GABA en las terminales de las NEM en el GP. Esta modulación puede deberse a terminales de axones colaterales, pero no de terminales de axones de interneuronas. Corrientes post-sinápticas inhibitorias (IPSC) en célula entera en presencia de CNQX y AP5 fueron registradas en NEM por estimulación antidrómica, en el GP lesionado con ácido ibotenico. Los potenciales de acción antidrómicos fueron bloqueados con QX314. Estas corrientes fueron disminuidas por quinelorane (100 nM), agonista dopaminérgico D2, acompañada de facilitación por pulso pareado. Sin embargo, SKF 81297 (100nM), agonista dopaminérgico D1, las incrementó y provocó depresión por pulso pareado. Cada efecto fue bloqueado por su respectivo antagonista: sulpiride y SCH 23390, respectivamente. En contraste. las IPSC provocadas por estimulación intraestriatal no fueron consistentemente o significativamente modificadas por el agonista D1 o D2. Por lo tanto, las diferentes entradas GABAérgicas sobre las NEM son moduladas diferencialmente por dopamina. Financiado por: DGAPA- UNAM: IN202300, CONACYT: 31839N, 35806-N, FIRCA: TWO1214. O-91 O-92 ANTAGONISMO FUNCIONAL ENTRE RECEPTORES H3 A HISTAMINA Y D1 A DOPAMINA SOBRE LA ACTIVIDAD ELÉCTRICA DE LAS NEURONAS ESPINOSAS MEDIANAS DEL NEOESTRIADO DE LA RATA. Bárbara, A.*1,2, Hernández, M.*1, Sierra, A.*2, Aceves, J.2 y Arias-Montaño, J.A.2 1 CICS-UMA-IPN y 2Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN LOCAL DEL IMMEPIP SOBRE LA CONDUCTA DE GIRO PRODUCIDA POR LA APOMORFINA. García-Ramírez, M.*, Aceves, J., Arias-Montaño, J. A. Departamento de Fisiología de la ENCB-IPN, Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV. Las neuronas estriado-nigrales (espinosas medianas) expresan en sus somata y terminales receptores H3 a histamina y D1 a dopamina, entre otros. En rebanadas del neoestriado y de la substancia nigra pars reticulata de la rata la activación de los receptores H3 inhibe al componente de la liberación de [3H]GABA modulado por receptores D1. En este estudio determinamos el efecto de la activación de los receptores H3 sobre las propiedades eléctricas de las neuronas estriado-nigrales antes y durante la activación de los receptores D1. Se realizaron registros intracelulares estándar en rebanadas (350 µm de grosor) del neoestriado de ratas macho Wistar. El agonista selectivo H3 immepip (100 nM) revirtió el efecto inducido por el agonista selectivo D1, SKF-38393 (5 µM), sobre la resistencia de membrana (95 ± 9% vs. 84 ± 4% del control) y sobre la frecuencia de disparo inducida por inyección de corriente (94 ± 0.3% vs. 142 ± 0.8% del control). El immepip no tuvo, por sí mismo, efecto sobre estos parámetros. Estos resultados indican que los receptores H3 inhibe el efecto modulador que los receptores D1 ejercen sobre la actividad eléctrica de las neuronas estriado-nigrales. En rebanadas del neoestriado y de la sustancia negra reticulada (SNr) de la rata, la estimulación de los receptores histaminérgicos H3 inhibe la liberación de GABA dependiente de la activación de receptores dopaminérgicos D1 (García et. al., 1997; Arias-Montaño et. al., 2001). La SNr es un núcleo importante en el control motor; sin embargo, no existen estudios que aborden la participación de los receptores H3 nigrales en la actividad motora. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de un agonista histaminérgico H3 (immepip), administrado localmente en la SNr, sobre la conducta de giro producida por apomorfina en ratas con lesión unilateral de la vía dopaminérgica nigroestriatal (hemiparkinsonianas) y en ratas sin lesión. En ambos grupos se implantó una cánula guía por encima de la SNr y mediante una cánula inyectora se administraron diferentes concentraciones del immepip (3-30 ng), 10 min después se midió durante 90 min el giro producido por apomorfina (0.5 mg/kg, s.c.). En las ratas lesionadas el immepip disminuyó significativamente el giro producido por la apomorfina, el efecto dependió de la dosis y fue revertido por tioperamida, un antagonista H3. En las ratas sin lesión el immepip produjo giro ipsilateral en respuesta a la apomorfina. Estos resultados sugieren que la histamina está involucrada en el control motor, ejerciendo su acción a través de receptores H3 localizados en las neuronas de proyección estriado-nigral. O-93 O-94 EFECTO DEL ANTAGONISTA DOPAMINÉRGICO (+)S14297 SOBRE LA ACTIVIDAD LOCOMOTORA EN LA RATA. Vargas G.*(Avalado Por Flores Alvarez Gonzalo), FloresTochihuitl J.* Y Flores G.* Laboratorio De Neuropsiquiatría, Instituto De Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma De Puebla. Puebla, México. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN NEONATAL DE GMS SOBRE LA EXPRESIÓN DE TIROSINA HIDROXILASA DURANTE EL DESARROLLO DE LA RATA. López-Pérez S.J.*, Ureña-Guerrero M.E.*, Beas-Zárate C. Depto. de Biología Celular y Molecular, CUCBA, U. de G. Un antagonista dopaminérgico D3 de reciente creación es el (+) S14297, estudios previos con este antagonista sugieren que el autorreceptor D3 modula la liberación de dopamina de neuronas dopaminérgicas mesolímbicas y poco se conoce sobre el papel específico de los receptores D3 sobre la actividad locomotora en el neurodesarrollo postnatal de la rata. El objetivo del presente trabajo fue realizar el bloqueo del receptor D3 durante la etapa crítica del neurodesarrollo postnatal (día 1 a 12 de edad), administrando el antagonista (+)S14297 (0.75 mg/Kg peso) a ratas macho neonatas de la cepa Sprague-Dawley por vía subcutánea, al grupo control se le administró el vehículo (PBS). Posteriormente se midió la actividad locomotora en dos etapas del desarrollo: prepúber (30 días de edad) y postpúber (56 días) registrando la actividad del animal durante 2 horas. Se evaluó la transmisión dopaminérgica utilizando agonistas dopaminérgicos presinápticos y postsinápticos no selectivos como la anfetamina y apomorfina registrando la actividad locomotora del mismo modo anterior durante 2 y 3 horas, respectivamente. Los resultados indican que la administración neonatal del (+)S14297 produce incremento de la actividad locomotora basal del grupo prepúber en comparación con el control, debido quizá a una función inhibitoria deficiente del receptor D3. La inducción de la actividad locomotora mediante el agonista apomorfina sobre el grupo tratado con (+)S14297, provoca un incremento de la actividad locomotora en el grupo prepúber. Estos resultados sugieren que el bloqueo neonatal del receptor dopaminérgico D3 produce cambios del tono dopaminérgico a la edad prepúber y que son principalmente a nivel postsináptico (Apoyado con el donativo de CONACyT No. 30675M). Diferentes evidencias indican la presencia de receptores a glutamato en el sistema nigro-estriatal, por lo que una sobreestimulación glutamatérgica temprana por administración excesiva de glutamato como sal monosódica (GMS), podría modificar la síntesis de Tirosina Hidroxilasa (TH) durante el desarrollo postnatal de la rata en estas regiones. Por lo que en el presente trabajo se evaluó el perfil ontogénico de la expresión de la TH en el cuerpo estriado y la sustancia negra de ratas expuestas neonatalmente a GMS (vía subcutánea) durante los 1, 3, 5 y 7 días de edad postnatal. La expresión de TH se realizó por western blott a las edades de 10, 14, 21, 30, 60 y 120 días de edad posnatal. Los resultados muestran que el GMS produjo una reducción significativa en la expresión de TH a los 10, 30 y 120 días de edad en la sustancia negra y en el cuerpo estriado, excepto a la edad posnatal de 21 días, donde se observó un incremento en la expresión de TH en el cuerpo estriado. Los resultados en general sugieren una pérdida parcial en las neuronas y/o en la neurotransmisión dopaminérgica, así como la aparición de mecanismos endógenos compensatorios, pues los animales no muestran signos evidentes de degeneración motora, tales como akinesia, rigidez o temblor, al menos hasta los 120 días de edad. Los resultados sugieren que el efecto discreto del GMS sobre la expresión de TH podría deberse a la habilidad de estas neuronas de transportar y metabolizar glutamato vía transaminación durante el desarrollo. Trabajo parcialmente financiado por CONACyT 30901-M, otorgado a C. Beas-Zárate y Beca No. 158734 a Silvia J. LópezPérez. PRESENTACIONES EN CARTEL C-01 C-02 CORRIENTES IÓNICAS ACTIVADAS POR LA EXPOSICIÓN A UN GRADIENTE OSMÓTICO CONTINUO EN CÉLULAS DE GLIOMA C6. Ordaz S.B.*, Vaca L. PasantesMorales H. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. VINPOCETINE EFFECTS ON DA AND DOPAC DISTRIBUTION INSIDE AND OUTSIDE STRIATAL NERVE ENDINGS; COMPARISON WITH CLORGYLINE AND RESERPINE EFFECTS. Trejo, F*, Sitges, M*. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México, D.F. Las células nerviosas tienen la capacidad de regular su volumen cuando se exponen a una reducción drástica y súbita en la osmolaridad externa mediante la movilización de Cl- y K+ intracelular. En este trabajo en células de glioma C6 se registraron y caracterizaron las corrientes iónicas evocadas por cambios graduales y continuos en la osmolaridad externa (-1.8 mOsm/min), un paradigma experimental que simula mas adecuadamente la condición de hiponatremia crónica. Se registraron las corrientes bajo condiciones de fijación de voltaje en célula entera. En condiciones isosmóticas las células registraron un potencial reverso de -79 mV con corrientes rectificadoras salientes (560± 20 mV). Al ser expuestas al gradiente osmótico no se observan cambios en la cinética de las corrientes iónicas en los primeros 15 minutos. A partir del minuto 20 se activan e incrementan las corrientes iónicas salientes y entrantes de manera gradual (4000 ± 200 pA) y (600 ± 200 pA) respectivamente. El potencial reverso muestra un desplazamiento gradual con un valor final de -54 mV. Se hicieron experimentos de sustitución iónica con cesio 140 mM y aspartato de K+ 125 mM para caracterizar las vías de K+ y Cl-, respectivamente. En medios con cesioi se activa una corriente de cloro con un máximo de amplitud de 2000 ± 220 pA, que muestra un umbral de activación temprano (5 min.) y un potencial reverso de -5 mV. En condiciones de aspartato de K+i la corriente de potasio muestra un umbral de activación mas lento (35 a 40 min.) y un potencial reverso de -65 mV. Es importante señalar que esta corriente de K+ requiere la presencia de un nivel Cl- intracelular igual o mayor a 10 mM, lo que sugiere una probable modulación de Cl- sobre la corriente de K+. A massive release of dopamine (DA) accompanied by a decrease in its metabolites has been repeatedly found in several models of experimental ischemia. Since vinpocetine (Vinp), is a drug with anti-ischemic potential, its effect on the release of DA and its main metabolite, DOPAC, in striatum isolated nerve endings under resting and depolarized conditions was investigated. Vinp does not modify the baseline release of DA or the exocytotic release of DA evoked by high K+, but inhibits the release of DA evoked by veratridine reversal of the DA transporter. In addition to these results, that are consistent with the selective blockade of voltagesensitive presynaptic Na+ channels (VSSC) by Vinp that we have previously reported, Vinp increased DOPAC release either under resting or depolarized conditions, indicating that this latter effect does not involve VSCC. A method designed to simultaneously test drug effects on catecholamines distribution inside and outside nerve endings, revealed that Vinp increases DOPAC release at the expense of internal DA in a dose-dependent manner. In contrast to Vinp, the MAO-A inhibitor, clorgyline, increases DA and decreases DOPAC formation. The combined action of Vinp and clorgyline does not indicate, however, that the activation of MAO is the mechanism responsible for the increase in DOPAC caused by Vinp. Reserpine, although more potent and efficient than Vinp, qualitatively exerts the same pattern of changes on DA and DOPAC concentrations. It is concluded that, in addition to its inhibitory effect on presynaptic VSCC, Vinp increases DOPAC by impairing the vesicular storage of DA. The present method, also revealed that the pool of DA metabolized by MAO to DOPAC is the cytoplasm extravesicular DA, and that most (75%) of the DOPAC formed inside nerve endings is exported to the extracellular medium. C-03 C-04 EFECTOS DE DOS TOXINAS DE LA ANÉMONA MARINA BUNODOSOMA GRANULIFERA SOBRE CORRIENTES DE SODIO NEURONALES. Salceda, E.,1* Garateix, A.2* y Soto, E.1 1 Instituto de Fisiología, BUAP., Puebla, México. 2 Instituto de Oceanología, CITMA, La Habana, Cuba. INHIBICION DE LOS CANALES PRESINAPTICOS DE SODIO POR NIMODIPINA Y NITRENDIPINA. Galindo, C.A.* y Sitges, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México D.F. En este trabajo hemos caracterizado los efectos de BgII y BgIII, dos toxinas de anémona con secuencias casi idénticas (sólo difieren en un aminoácido), sobre corrientes de sodio neuronales utilizando la técnica de fijación de voltaje (célula completa). Se registraron neuronas (n=122) de los ganglios de raíz dorsal de rata (P5-9) en cultivo primario (medio L-15, 37 ºC, 95% aire, 5% CO2). Estas células expresan dos subtipos de canales de sodio: sensibles (TTX-S, KI = 0.3 nM) y resistentes (TTX-R, Ki = 100 µM) a tetrodotoxina. Ni BgII ni BgIII tuvieron efectos significativos sobre las corrientes TTXR. En contraste, ambas toxinas produjeron un efecto dependiente de la concentración sobre el curso temporal de la inactivación en corrientes TTX-S (EC50 = 3.63 µM y 9.48 µM, respectivamente), sin efectos significativos sobre el curso temporal de la activación ni sobre la amplitud máxima de las corrientes. En presencia de BgIII 10 µM, la corriente TTX-S activó a potenciales más negativos (-60 mV contra 50 mV para experimentos control). Ambas toxinas (10 µM) produjeron un desplazamiento en sentido hiperpolarizante del V1/2 de la inactivación: de -61 ± 0.8 mV (control) a -73 ± 0.9 mV (BgII) y 69 ± 1.4 mV (BgIII). La inactivación de estado estable resultó menos dependiente de voltaje luego de la aplicación de BgII o BgIII: las pendientes calculadas fueron 7.7 ± 0.6 (control), 8.8 ± 0.8 (BgII) y 10 ± 1.6 (BgIII). Nuestros resultados sugieren que ambas toxinas afectan a los canales de sodio dependientes de voltaje de una forma similar a como lo hacen otras toxinas de anémona (ATX-II) y de escorpión (toxinas α), probablemente uniéndose al sitio receptor 3, ubicado en en las asas extracelulares IS5-S6, IVS3-S4 y IVS5-S6 del canal de sodio. La nimodipina, nitrendipina y nifedipina son dihidropiridinas (DHPs) utilizadas como bloqueadores de los canales de Ca2+ tipo L. Sin embargo algunas evidencias sugieren que el blanco de dichas DHPs pudiera ser el canal presináptico de Na+. La capacidad neuroprotectora, particularmente de la nimodipina y la nitrendipina, en modelos de isquemia cerebral, así como su potencial en el tratamiento de ciertas disfunciones neuropsiquiátricas y sus efectos anticonvulsivantes en modelos de epilepsia experimental indican su acción a nivel cerebral. Para investigar la acción de dichas DHPs sobre los canales presinápticos de Ca2+ y Na+, en este trabajo comparamos sus efectos sobre los aumentos en la concentración interna de Ca2+ (Cai), en la de Na+ (Nai), y en la liberación de varios neurotransmisores inducidos por veratridina o por K+ alto en terminales nerviosas aisladas de estriado de rata. La Nai y la Cai se detectaron mediante los indicadores fluorescentes, SBFI y fura-2, respectivamente, y los neurotransmisores liberados se detectaron por HPLC. Encontramos que, como el bloqueador de los canales de Na+, TTX, la nimodipina y la nitrendipina inhiben los aumentos en la Nai, la Cai y la liberación de dopamina, GABA, Glu y Asp debidos a la activación de los canales de Na+ por veratridina, mientras que no inhiben el aumento de la liberación de neurotransmisores o el de la Cai (sensible a w-Aga-IVA) inducido por activación de los canales de Ca2+ con K+ alto. La nifedipina, interesantemente, no inhibe ninguno de los cambios iónicos inducidos ni por veratridina ni por K+ alto. Los presentes resultados demuestran que los efectos de la nimodipina y la nitrendipina sobre las terminales nerviosas cerebrales no se deben al bloqueo de los canales de Ca2+ sino al de los canales de Na+, acción que debe contribuir a sus efectos neuroprotectores. C-05 C-06 CARACTERIZACIÓN DE LAS CORRIENTES DE POTASIO ACTIVADAS POR VOLTAJE EN NEURONAS DE HIPOCAMPO DE RATA. Velasco-Torres, M.* y Onetti Carlos. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, Apdo. Postal 199, 28000 Colima, Col. México. LA CORRIENTE IKM EN NEURONAS AFERENTES VESTIBULARES EN CULTIVO PRIMARIO. Pérez, M.C.*, Limón, A.*, Vega R. y Soto, E. Instituto de Fisiología, BUAP. Puebla, Pue. Se ha sugerido que las corrientes de potasio activadas por voltaje participan en el precondicionamiento isquémico. Para caracterizar esas corrientes realizamos experimentos en neuronas dispersas de hipocampo de ratas de 16 a 20 días de edad. El registro de las corrientes de K+ se hizo con la técnica de patch-clamp, utilizando 2 protocolos de pulsos despolarizantes partiendo de potenciales de mantenimiento de –50 y –90 mV. En esas condiciones se obtuvieron 3 corrientes de K+ con diferentes cinéticas de activación e inactivación. De 42 neuronas registradas, en 21 se observó una corriente de K+ que se activa rápidamente pero que inactiva lentamente (IK1), en 16 células las corrientes de K+ se activaron e inactivaron rápidamente (IK2), y en las otras 5 neuronas las corrientes de K+ se activaron lentamente y no se inactivaron (IK3). Los valores para V1/2 y para k que se obtuvieron al estudiar la cinética de activación e inactivación en estado estable de las corrientes IK1 y IK2 se muestran en la tabla. Las curvas de activación se obtuvieron a partir de un potencial de mantenimiento de –90 mV. De acuerdo con los resultados encontramos tres tipos de corrientes, con cinéticas de activación e inactivación diferentes. Esto sugiere la participación de diferentes canales de potasio activados por voltaje que pueden estar actuando de manera conjunta durante el precondicionamiento isquémico. La presencia de diferentes tipos de canales parece ser independiente de la edad, pero podría estar relacionado al tipo celular. IK1 V1/2 (mV) k (mV) n IK2 Activación Inactivación Activación Inactivación -10.6 -41.6 -5.5 -46.6 25.5 16.7 27.9 11.6 5 5 6 6 La corriente M (IKM), generada por canales KCNQ1-4, regula el umbral y la excitabilidad de varios tipos de neuronas, determinando en parte sus propiedades de disparo y su respuesta a la entrada sináptica. En la membrana basolateral de las células ciliadas tipo I y en su terminal nerviosa se han localizado canales KCNQ4 mediante técnicas inmunohistoquímicas, en tanto que las células tipo II aparentemente no expresan estos canales. Proponemos que la expresión de IKM en las neuronas aferentes indicaría el tipo de célula ciliada que éstas inervan. En este trabajo aislamos la IKM de neuronas aferentes vestibulares en cultivo primario (t< 24 hrs) obtenidas de ratas neonatas, y estudiamos su participación en el patrón de descarga de las neuronas ante estimulación eléctrica con técnicas de fijación de voltaje y de corriente. La IKM se aisló mediante la aplicación de linopirdina (bloqueador específico de canales KCNQ) usando soluciones normales y modificadas (sin Na+ y con fluoruros). La linopirdina 100 µM disminuyó 19.92 % ± 11.48 la corriente saliente total en el 82.35 % de las neuronas, en el resto de las células el efecto no fue significativo (n=17). La disminución de la corriente causado por linopirdina fue dependiente de la dosis y se aproximó con una función sigmoidea con CE50= 4.1 ± 0.8 y p=2.4 ± 1.1. La IKM aislada se caracterizó por una rápida activación e inactivación parcial. La aplicación de linopirdina en condiciones de fijación de corriente, produjo la disminución de la amplitud del potencial de acción y de la posthiperpolarización generando oscilaciones en el potencial de membrana. Nuestros resultados indican que IKM se expresa diferencialmente en las neuronas aferentes vestibulares en cultivo, participando en la determinación de su patrón de respuesta eléctrica. Pensamos que la expresión de esta corriente es un parámetro para determinar el tipo de célula ciliada que estas neuronas inervan. C-07 C-08 MODULACION MUSCARINICA DE CORRIENTES DE K+ EN NEURONAS SIMPATICAS. Cruzblanca H. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. Colima, Col. EFECTO DEL PROPOFOL SOBRE LA DESACTIVACIÓN DEL COMPONENTE RÁPIDO DE LA CORRIENTE DE EN MIOCITOS RECTIFICACIÓN TARDÍA (IKr) VENTRICULARES DE GATO. 2Barajas-Martínez H.,* 1 Elizalde-Lozano A.,* 2Ramírez-Flores G.* y 1Sánchez-Chapula J. A. 1Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Colima, Colima. 2Departamento de Medicina, Centro Universitario del Sur, Universidad de Guadalajara, Cd. Guzmán, Jalisco México. En las neuronas del ganglio superior cervical (GSC) de la rata, la corriente de K+ tipo M (IKM) es inhibida por el receptor muscarínico M1 vía la proteína Gq y un mensajero distinto a los producidos por la fosfolipasa Cβ u otros conocidos. El objetivo del trabajo fue determinar si otras corrientes de K+ son moduladas por el receptor M1 o por los receptores M2 y M4, que también expresan las neuronas GSC. Se estudió el efecto del agonista muscarínico OxoM sobre la corriente de K+ de activación e inactivación rápida (IAf) y la de activación rápida e inactivación lenta (IAs). La Oxo-M (10 µM) aumentó la IAs en 16.1 ± 1.4 pA/pF (promedio ± E.E., n=8) y disminuyó la IAf en un 25 ± 5%. Estos efectos no son secundarios a la inhibición de IKM ya que la Oxo-M tuvo efectos similares sobre IAs e IAf en presencia del bloqueador de IKM linopirdina (aumento de IAs = 12.5 ± 1.6 pA/pF; inhibición de IAf = 33.7 ± 4.8%, n=5). El efecto de la Oxo-M (200 nM) sobre IAf e IKM fue antagonizado en similar proporción por 100 nM de pirenzepina (Pz) (inhibición control de IAf = 21 ± 2.7%, inhibición con Pz de IAf = 10.3 ± 2.7%; inhibición control de IKM = 39 ± 2.4%, inhibición con Pz de IKM = 18 ± 3.4%). El efecto sobre la IAs no fue bloqueado por la Pz (aumento control = 9.1 ± 2 pA/pF, aumento con Pz = 12.5 ± 2 pA/pF), pero si fue reducido por la himbacina (50 nM), un antagonista de receptores tipo M2. Ninguno de los efectos de la Oxo-M sobre IKM, IAf e IAs fue bloqueado por la toxina pertussis. Los resultados sugieren que el receptor M1 además de inhibir a IKM, modula a IAf, mientras que un receptor del subtipo M2 (M2 o M4?) y una proteína G distinta a Go/i participan en la modulación de IAs. Trabajo apoyado por el CONACYT (34542-N) y el Fondo Dr. Ramón Alvarez-Buylla (U. de Colima). La corriente de potasio dependiente de voltaje (IK) en el miocardio de gato posee 2 componentes: IKr e IKs que contribuyen a la duración del potencial de acción (BarajasMartínez, H y cols. 2001). El componente IKr a diferencia de IKs, se activa rápidamente, rectifica hacia adentro y su desactivación es más lenta. El propofol es un anestésico general usado en la práctica médica por su rápida inducción, corta duración y rápida eliminación. Hasta ahora no se conocen los mecanismos por los cuales disminuye la presión arterial y la frecuencia cardiaca. Este es utilizado como bloqueador selectivo de IKs en miocitos ventriculares de cobayo (Heath BM y Terrar DA, 1996). En este trabajo estudiamos los efectos del propofol (300 µM) sobre la desactivación del componente IKr en miocitos ventriculares de gato usando la técnica de fijación de voltaje en célula completa. Los resultados preliminares muestran que la constante de tiempo rápida (τr) y lenta(τs) de la desactivación del componente resistente a propofol (IKr) presenta una disminución a diferentes voltajes con respecto al control (IK total). Sin embargo, cuando se utiliza dofetilida (5µM) para bloquear a IKr, τr y τs fueron más lentas. Con estos resultados podemos concluir que el propofol acelera el proceso de desactivación de la corriente IKr de los miocitos ventriculares de gato adulto. C-09 C-10 LOS RECEPTORES DE RYANODINA ESTAN PRESENTES EN EL COMPLEJO DE GOLGI DE NEURONAS INTACTAS DEL GANGLIO CERVICAL SUPERIOR DE RATA. Toro, S.*, Fiordeliso, T.* y Hernández-Cruz, A. Departamento de Biofísica. Instituto de Fisiología Celular. UNAM. NON-INVASIVE CALCIUM MEASUREMENTS IN AN INTRACELLULAR COMPARTMENT. Pottosin, I.I.* (avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Martínez-Estévez, M.*, Dobrovinskaya, O.R.* & Muñiz, J.* Centro Universitario de Investigaciones Biomedicas, Universidad de Colima, México. Las células eucariontes poseen dos familias de canales que liberan Ca2+ intracelularmente: el receptor de IP3 (IP3R) y el receptor de ryanodina (RyR), los que se localizan en regiones del retículo endoplásmico que sirven como depósitos de Ca2+. Recientemente, nuestro grupo reportó la presencia de sitios de unión para ryanodina y RyRs en el aparato de Golgi de neuronas cultivadas del ganglio cervical superior (GCS) de rata. No obstante, este hallazgo podría representar una distribución anómala de RyRs, ya que el cultivo implica un cambio drástico en las condiciones habituales de la célula, incluyendo la pérdida de su axón y de sus conexiones sinápticas. El objetivo de este trabajo fue confirmar la presencia de estos receptores en el AG de neuronas del GCS intacto. Los GCS de ratas Wistar de 10 días de edad, fueron extraídos bajo anestesia, fijados por 24 h en paraformalhdehído al 4% a 4 °C, lavados por 24 h en sacarosa al 30% y cortados con un crióstato en rebanadas de 20 µm de grosor. Inmediatamente después de obtenidas, las rebanadas fueron incubadas por 1 h con un derivado fluorescente de brefeldina A, que se utiliza como marcador del AG. La localización de los RyRs se hizo con un derivado fluorescente de ryanodina o mediante inmunofluorescencia con un anticuerpo primario contra los RyR y un anticuerpo secundario conjugado con Cy3 . Los cortes doblemente teñidos se analizaron con microscopia confocal de barrido laser. Aunque la organización anatómica del AG es diferente en las células intactas respecto de las cultivadas, encontramos una importante colocalización del marcador del AG y de los RyRs. Estos resultado abren la posibilidad de que el AG desempeñe un papel importante en la homeostasis y dinámica de Ca2+ en estas neuronas. Subsidiado por donativos DGAPA IN 210401 (UNAM) y CONACYT 34329-N. The goal of this study was to evaluate the level of free Ca2+ in plant vacuoles. Previously, few ion-selective microelectrode studies reported vacuolar Ca2+ activity in submillimolar to millimolar range. In this range, vacuolar Ca2+ induces a severe outward rectification of major vacuolar ion currents, mediated by so called FV and SV (Fast and Slow- activating Vacuolar) channels. Voltageand time- dependent activation of SV current sensed the increase of vacuolar Ca2+: the activation was slowed down and shifted to more positive potentials. Both Ca2+ effects were specific: although increase of Mg2+ produced a qualitatively similar outcome, the required concentration was ~100-times higher. Ca2+-induced shift of the activation threshold on isolated inside-out patches was between –100 to +60 mV, which could be fairly calibrated against vacuolar Ca2+ change between 10-6 and 10-2 M. Therefore, monitoring the voltage-dependent activation of the SV channel, now in vacuole-attached patches, one may deduce the actual level of free Ca2+ inside the vacuole. An unexpected result was revealed: in some vacuoles Ca2+ was clearly <10 µM, thus, free vacuolar Ca2+ experiences much larger variations than it was thought before, with important consequences to the control of vacuolar currents rectification by Ca2+. The advantage of the technique proposed, besides its relative simplicity, is a correlation between the expression of main vacuolar currents and the level of vacuolar Ca2+ accumulation. In contrast to SV, vacuolar Ca2+ and Mg2+ inhibit FV with a comparative potency. Future studies are focused on a possibility of a parallel evaluation of vacuolar Ca2+ and Mg2+ using simultaneous recording of FV and SV currents. Supported by CONACyT grants 29473-N and 38181-N to IIP. C-11 C-12 IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN DE CANALES DE Ca2+ DEL TIPO TRP EN EL ESPERMATOZOIDE HUMANO. Treviño, C.L.1,*, Serrano C.J. 1,*, Vega-Hernández, A.2,*, Pacheco, J.3,*, Tsusumi, V.4,* Félix, R.2, y Darszon, A1,*. 1 Depto. de Genética y Fisiología Molecular, Instituto de Biotecnología, UNAM; 2Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, Cinvestav-IPN; 3Fac. de Medicina, Universidad La Salle; 4Depto de Patología Experimental, Cinvestav-IPN. EL TRATAMIENTO CRÓNICO CON GABAPENTINA REGULA LA EXPRESIÓN DE CANALES DE Ca2+ NEURONALES DEL TIPO N. Vega-Hernández, A.* y Félix, R. Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, Cinvestav-IPN. La unión del espermatozoide con la zona pelúcida del óvulo (ZP) desencadena la reacción acrosomal (RA), un proceso de exocitosis que facilita la fecundación. Se sabe que el Ca2+ intracelular (Ca2+i) es uno de los mediadores esenciales de la RA. El uso de colorantes fluorescentes sensibles a Ca2+ ha permitido registrar un incremento bifásico en el Ca2+i durante la RA. Así, en respuesta a la ZP inicialmente se desarrolla un aumento transitorio del Ca2+i asociado a la activación de los canales sensibles al voltaje en la membrana del espermatozoide. Esta respuesta es seguida de una segunda fase de aumento sostenido en el Ca2+i. Estudios farmacológicos indican que la fase sostenida es mediada por la apertura de canales en la membrana activados por el vaciamiento de los reservorios intracelulares para el ión (SOCs, por sus siglas en inglés). En el presente trabajo se muestran evidencias de la expresión en el espermatozoide de al menos tres proteínas homólogas a canales TRP (transient receptor potential) de Drosophila, que posiblemente codifican a los SOCs en las células de los mamíferos. Mediante inmunocito-química y microscopía confocal, encontramos evidencias para la expresión de TRP1, TRP3 y TRP4 en el espermatozoide humano. La expresión de TRP1 se encuentra confinada a la pieza principal del flagelo (excluyendo la pieza media), aunque algunas células mostraron tinción en el segmento ecuatorial de la cabeza. TRP3 se encontró tanto en el flagelo como en la cabeza sobre la región acrosomal. TRP4 mostró un patrón de expresión muy intenso en la pieza media del flagelo y muy tenue en la cabeza. En contraste con los datos para los otros TRPs, el uso de un anticuerpo contra TRP6 no permitió distinguir señal específica. Resultados cualitativamente similares se obtuvieron con microscopía electrónica usando un anticuerpo secundario acoplado a esferas de oro. Finalmente, resultados preliminares de RT-PCR han mostrado la expresión de múltiples transcritos para canales TRP en RNA obtenido de semen humano. El análisis inicial ha mostrado que los transcritos amplificados podrían corresponder a los genes para los canales TRP. La gabapentina (GBP; ácido 1-(aminometil) ciclohexanoacético) es un análogo sintético del ácido γ-aminobutírico (GABA) que ha mostrado tener actividad anticonvulsivante en modelos animales de epilepsia y ser útil en el tratamiento de crisis convulsivas en el humano. Pese a su demostrada eficacia terapéutica, poco se sabe acerca del mecanismo de acción de la GBP. No obstante su similitud estructural con el GABA, la GBP no se une de manera específica a los receptores al GABA y no afecta la recaptura ni la degradación de este neurotransmisor. Por otro lado, estudios moleculares han mostrado que el receptor a la GBP es en realidad la subunidad auxiliar α2δ de los canales de Ca2+ sensibles al voltaje. Evidencia experimental previa sugiere que esta subunidad participa en la expresión membranal de los canales gobernando su tránsito intracelular y su estabilización en la superficie celular. Estudios más recientes han mostrado que el tratamiento agudo con GBP puede regular directamente la actividad funcional de canales de Ca2+ del tipo L. En este reporte, hemos analizado los efectos del tratamiento crónico con GBP sobre la expresión de los canales de Ca2+ neuronales usando a la línea celular PC12 como sistema modelo. Nuestros resultados indican que la GBP no afecta la actividad de los canales Ca2+ después del tratamiento agudo. Sin embargo, el fármaco promueve una reducción significativa y consistente en la expresión funcional de dichos canales después de la exposición prolongada (>48 hs). En consistencia con los datos funcionales, nuestros experimentos de unión específica a radioligandos indican que la GBP induce una reducción comparable en el número total de sitios de unión en la membrana de las células PC12 a la ω-Conotoxina GVIA, un antagonista selectivo de los canales de Ca2+ neuronales del tipo N. Tomados en su conjunto, estos datos sugieren que la regulación a largo plazo en la expresión de los canales de Ca2+ del tipo N, además de su conocido efecto sobre los canales de Ca2+ del tipo L, puede ser un mecanismo molecular importante para el efecto antiepiléptico de la GBP. C-13 C-14 LAS PROTEÍNAS RGS3 ATENÚAN LA MODULACIÓN DE LOS CANALES CaV2.3 POR PROTEÍNAS G. Toro-Castillo, C.* (avalado por Rubio Rafael) y Meza, U.* Departamento de Fisiología y Farmacología. Facultad de Medicina. Universidad Autónoma de San Luis Potosí. INHIBITION OF INTRAMEMBRANE CHARGE MOVEMENT BY G-PROTEIN ACTIVATION IN RAT SYMPATHETIC NEURONS. Hernández-Ochoa, E.O.*1, Hernández, J.M.*1, Mackie, K*2. and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. En las células nerviosas los canales CaV2.3 participan en los procesos de neurosecreción y excitabilidad membranal. Previamente, nosotros hemos reportado que la actividad de estos canales puede ser fuertemente modulada mediante la activación de receptores muscarínicos acoplados a proteínas G. Por otra parte, se sabe que las proteínas RGS (Reguladoras del Señalamiento por proteínas G) funcionan como Proteínas Aceleradoras de la actividad GTP-ásica (GAPs) y/o como antagonistas de efectores de las subunidades Gα. Εn el presente trabajo, investigamos el efecto de las proteínas RGS3 sobre la inhibición de los canales CaV2.3 inducida por la activación de receptores muscarínicos M2. Para ello, coexpresamos el canal CaV2.3 (α1E) y el receptor muscarínico M2 de manera heteróloga en células HEK293 (Human Embryonic Kidney), en presencia o ausencia de la proteína RGS3. Posteriormente, sometimos estas células a experimentos de fijación de voltaje, utilizando la técnica de patch-clamp en su modalidad de célula completa, con el fin de evaluar el grado de inhibición de las corrientes macroscópicas de Ca2+ en respuesta a la aplicación de carbacol (50 µM). Nuestros resultados señalan que: a) las corrientes generadas a través de los canales CaV2.3 son inhibidas (~35%) por la activación de los receptores muscarínicos M2; b) la coexpresión de RGS3 atenúa (~30%) la inhibición muscarínica de los canales CaV2.3; y c) la coexpresión de RGS3 no modifica la expresión funcional de los canales CaV2.3, ni altera la dependencia al voltaje de su activación. Nuestras observaciones apoyan la hipótesis de que las proteínas RGS podrían desempeñar un papel importante en los procesos de excitabilidad y secreción neuronal, al afectar la modulación de los canales de calcio por proteínas G. It is widely accepted that intramembrane charge movement and gating currents precede opening of voltage-dependent ion channels in all excitable cells. It is also well known that G-protein coupled receptors control a variety of functions by modulating ion channels. Here we asked whether G-protein modulation might occur at initial kinetic stages that naturally lead to an ion current-conducting state of the channel. Hence a feasible explanation that a channel could be opened in at least two modal functional states, modulated and unmodulated. We studied the total charge movement under conditions that activate G-proteins using wholecell recordings in rat sympathetic (SCG) neurons. As expected, we found that Norepinephrine (NE) induces a voltage-dependent decrease in the amplitude of the non-linear capacitive currents (ICnl). By contrast, that Angiotensin II (angioII) does produce a voltage-independent decrease in the amplitude of ICnl. Accordingly, we observed dramatic mixed responses by applying the general G-protein activator GTPγS. These findings match the well-established knowledge in literature of two prominent modulatory pathways converging on N-type Ca2+ channels (ICaN) but also likely accounting for effects on K+ and Na+ channels. Therefore, building up a multi-targeting background modulatory system of ion channels controlled by neurotransmitters, hormones and modulators. In order to address the specificity of the voltage-dependent effects observed on charge movement we heterologously expressed the β1γ4 G-protein subunits. Accordingly, we found that these subunits mimicked and occluded responses by NE. As expected, the nonhydrolyzable antagonist GDPβS prevented all NE and angioII-induced responses. Furthermore, we found a positive correlation between the voltage dependence of activation of charge movement and activation of ICaN under modulated conditions. Therefore we propose that charge movement modulation is a key step in controlling a variety of effectors linked to G protein-coupled receptors. Supported by DGAPA-UNAM and CONACyT. C-15 C-16 OPPOSING ACTIONS BETWEEN G-PROTEINS AND PMA ON N-TYPE Ca2+ CHANNEL FUNCTION IN RAT SYMPATHETIC NEURONS. Arenas, M.I.*1, Díaz, A.F.*1, Mackie, K.*2 and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. ACTIVATION KINETICS OF N-TYPE Ca2+ CURRENTS IN β 2 G-PROTEIN SUBUNIT EXPRESSED SCG NEURONS MIMICS NOREPINEPHRINE RESPONSES. Hernández, J.M.*1, Arenas, M.I.*1, Mackie, K.*2 and García, D.E.1 1Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. 2Dept. of Anesthesiology, University of Washington, Seattle, WA 98195. G-protein coupled receptors and protein kinase C (PKC) exert antagonistic modulatory actions on N-type voltage-gated Ca2+ channels. G-protein activation inhibits whereas phosphorylation by PKC enhances Ca2+ current (ICa). At present, it is commonly accepted that the effects of G-protein-mediated inhibition and phosphorylation by PKC are mutually exclusive. It is assumed that these two distinct pathways converge on the channel’s poreforming α1B subunit, such that the actions of one pathway can preclude those of the other. Therefore, this model is consistent with a common binding site whose occupancy can be accessed by either G-protein or PKC at a time. Hence phosphorylation would occur only after dissociation of the G-protein from the channel. Conversely, once inhibition is relieved, PKC activation would prevent reinhibition of ICa by G-proteins. Furthermore, it has been accepted that phosphorylation by PKC has no effect on whole-cell N-type currents, other than preventing inhibition by G proteins. By using whole-cell recordings of N-type ICa in SCG neurons, under conditions of G-protein activation and PKC-induced phosphorylation by phorbol esters (PMA) we show here data that are inconsistent with the model exposed above. We found that Gprotein inhibition is partially relieved by PMA, whereas PMAinduced responses challenged with G-protein activators produces mixed responses in the ICa phenotype. In order to address the specificity of these responses we heterologoulsly expressed βγ Gprotein subunits and induced phoshorylation producing similar mixed responses in ICa. Furthermore, we found that PMA induces kinetic alterations in ICa that cannot be explained by the removal of G-protein inhibition solely. Taking together we propose that at least to distinct binding sites are necessary to explain the G-protein and PMA independent responses. Supported by DGAPA-UNAM and CONACyT. Kinetic slowing is the most striking voltage-dependent response in the activation of N-type Ca2+ current (ICa) induced by putative neurotransmitters as Norepinephrine (NE). It is well established that a membrane-delimited, voltage-dependent, PTX-sensitive G-protein pathway is responsible for this kind of modulation. Interestingly, the G-protein β subunits (Gβ1-5) seem to physically interact with the channel-protein inducing ICa kinetic slowing. Therefore, Gβ subunits have been proposed as powerful effectors controlling a variety of cellular functions through ion channels and enzymes. However, up to day neurotransmitter-dependent specific actions for Gβ subunits remain poorly understood. Therefore, we wanted to explore whether specific Gβ subunits might account for reproducible patterns in kinetic slowing. We looked for a correlation with kinetic responses naturally induced by NE. We hypothesised that neurotransmitters keep specificity in their signalling pathway by means of a particular interaction with the channel-protein. This interaction can be reflected in kinetic slowing changes of the ion current. Whole-cell N-type Ca2+ currents were recorded from rat sympathetic neurons (SCG) under heterologous expression of Gβ subunits. As expected, we found that Gβ subunits mimicked and occluded amplitude of NE effects. However, fitting ICa activation to a two exponential function revealed that just Gβ2 is able to occlude NE responses. Specific changes are observed in τ2 while τ1 remain unchanged according to the region in which the interaction between the Gβ subunit and the channel is expected. Our results indicate that the modulated state of the channel describes a particular kinetic slowing depending on the Gβ subtype being activated. Furthermore it strongly supports that amongst different Gβ’s, Gβ2 is the natural mediator for NE responses. Therefore, kinetic slowing could account for the specificity in the interaction Gβ subunit-ion channel protein. Thus, for the specificity in the G-protein signalling cascade. Supported by DGAPA-UNAM and CONACyT. C-17 C-18 LONG-TERM DEPOLARIZATION UP-REGULATES ENDOGENOUS POTASSIUM CURRENTS IN Xenopus laevis OOCYTES. Farías, J.M., Galván, E.*, Zambrano, Y.G.*, Vázquez, M.* and García, D.E. Depto. de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México, D.F. 04510. MECANISMO DE ACCION DE LA PRIMAQUINA SOBRE EL CANAL DE Na+ hH1 y rSkM1 TRANSFECTADOS EN OVOCITOS DE LA RANA Xenopus laevis. Orta-Salazar, G.J.¶ *(Avalado por José Ramón Eguibar Cuenca) Salinas-Stefanon, E.* Laboratorio de Biofísica Cardiaca, Instituto de Fisiología, BUAP, Puebla, México. K+ and Cl- channels play a key role in establishing resting potential in all living cells. On the other hand, Xenopus laevis oocytes have been extensively used as a reliable heterologous expression system for a variety of ion channels and other molecules. Nevertheless, regulation of native K+ currents (IK) in oocytes remains poorly studied. Here we tested whether sustained changes in the resting potential might be able to regulate endogenous IK involved in the resting potential establishment. For this purpose we used the twomicroelectrodes voltage-clamp method in Xenopus laevis oocytes. Oocytes were chemically voltage-clamped by using high K+ external solutions under long-term conditions. Interestingly, we found that amplitude of inwardly endogenous IK consistently increases up to 200% in 24 h, and 300% in 48 h related to the control, whereas tends to decrease at 72 h. No changes in current kinetics are observed nor in membrane capacitance, indicating that just a number of functional K+ channels are being incorporated during sustained depolarizations. Accordingly, Ba2+ sensitivity remains unchanged. These results suggest that specific voltagedependent mechanisms might be involved in triggering down stream cascades that regulate native IK in Xenopus laevis oocytes. Furthermore, they potentially explain concomitant changes on ion currents evoked by heterologous expression manoeuvres that are still partially understood. Supported by DGAPA-UNAM and CONACyT. Los efectos electrofisiológicos de la primaquina (PQ), un antimalárico de uso frecuente en la clínica, fueron estudiados en canales de sodio activados por voltaje clonados del corazón de humano (hH1) y en el canal de músculo esquelético de rata (rSkM1) expresados en ovocitos de la rana Xenopus laevis. El efecto de la primaquina sobre los canales iónicos hH1 expresados en ovocitos, es muy similar al observado en los canales nativos de rata (Orta y cols., 2002). El bloqueo de la INa+ fue dependiente del uso y de la frecuencia, así como de la concentración (kd=6.02µM). Sin afectar de manera significativa la inactivación de estado estable (control: V½= 70.51±0.2 mV, k= -4.0±0.2; PQ [10µM]: V½= -73.22±0.1 mV, k= 3.99±0.1). En tanto que la recuperación de la inactivación fue enlentecida de manera significativa (control: τ1= 3.2±0.03 ms, τ2= 17.47±2.9 ms; PQ [10µM]: τ1= 7.58±0.1 ms, τ2= 112.2±6 ms). En rSkM1 se encontró que la PQ (10 y 100 µM) no tiene efecto sobre la INa+ de este canal. Este estudio muestra que la primaquina es un potente inhibidor de la corriente de sodio tanto en los canales nativos (rata) como en los canales hH1 expresados en ovocitos. Estos resultados sugieren que el efecto cardiotóxico observado en pacientes que están sujetos a terapia antimalárica pudiera ser debido al bloqueo de los canales de sodio, con severas consecuencias en la conducción del impulso eléctrico y en la contractilidad cardiaca. Esto nos sugiere que la PQ puede ejercer sus efectos electrofisiológicos de manera especifica sobre diferentes isoformas del canal de Na+, lo que implica un mecanismo de acción especifico mediado por un sitio receptor o sitio blanco presente en la isoforma cardiaca pero no en la de músculo esquelético. ¶ Apoyo CONACYT Beca No 122184 Orta –Salazar, G., Bouchard, R., Morales-Salgado, F. , and Salinas-Stefanon, E. (2002). Inhibition of cardiac Na+ current by primaquine. Br. J. Pharmacol., 135, 751-763 C-19 C-20 CORRIENTES DE POTASIO (Ito e IK ) EN CÉLULAS M DEL VENTRÍCULO DE GATO. Anell M.C.* §, (avalado por Onetti Percello, Carlos.) Atonal F.F.* ¶ y Elizalde A*. C.U.I.B. Universidad de Colima. EFECTO DE LA PRIMAQUINA SOBRE LA CORRIENTE DE CALCIO TIPO L, EN MIOCITOS VENTRICULARES DE CORAZON DE RATA. Mancilla-Simbro, C.* (Avalado por José Ramón Eguibar), Salinas-Stefanon, E.* Instituto de Laboratorio de Biofísica Cardiaca, Fisiología, BUAP, Puebla, México. En un trabajo previo (1), reportamos que en el ventrículo de gato también existen células con potenciales de acción característicos de las células M; en esta especie solo habían sido descritas las diferencias entre los potenciales de acción y las corrientes Ito e IK de las células de epicardio (EPI) y endocardio (ENDO) (2). En este trabajo estudiamos comparativamente las corrientes Ito e IK de células M, EPI y ENDO del ventrículo de gato para determinar si las propiedades que presentan las células M se relacionan con diferencias en la densidad de corriente Ito e IK . Para obtener los registros de las corrientes se empleó la técnica de fijación de voltaje en su modalidad de célula completa. Se encontró que la densidad de la corriente IK es menor en las células M (3.58 ± 0.41; n =7) que en las células de EPI (6.98 ±0.85 n =4) y ENDO (4.85 ± 1.03 n= 4); y que la densidad de corriente Ito (pA/pF, a + 50 mV) en ENDO (10.68 ± 3.69) es menor que en EPI (19.92 ± 2.15) y M (17.93 ±1.45). Los resultados indican que la mayor duración de los potenciales de acción de las células M en el gato con respecto a la de los potenciales de EPI y ENDO se debe probablemente a que las células M tienen una menor densidad de corriente IK y que las diferencias de densidad de corriente encontradas pueden explicar la dispersión de la repolarización a través de la pared del ventrículo en esta especie. (1) Anell, M.C., Atonal, F.F. y Elizalde A. (2001) Memorias del XLIV Congreso Nacional de Ciencias Fisiológicas, C212. (2) Furukawa T. et al. (1992), Circ. Res 70:91-103 § Becario del CONACyT (No. 138504). ¶ Actualmente en la Facultad de Medicina de la BUAP. La primaquina (PQ) es un fármaco de elección en el tratamiento de la malaria, pero su uso se ha visto restringido a causa de efectos colaterales indeseables, como la insuficiencia cardiaca y alteraciones del ritmo. Estudios previos de nuestro laboratorio, han mostrado que la PQ 10µM produce un marcado efecto inotrópico negativo cuando se utiliza la técnica de corazón perfundido de Langendorff. Este efecto pudiera ser debido a un bloqueo de la corriente lenta de entrada de calcio tipo L (ICa++-L) o alguno de los flujos de calcio asociados al proceso de excitación-contracción. Para corroborar esta hipótesis decidimos estudiar la corriente ICa++-L de miocitos ventriculares del corazón de rata, usando la técnica de fijación de voltaje de célula completa. La solución externa (mM): TEA-Cl 110; NaCl 30; CaCl2 5.4; MgCl2 2; Dextrosa 10; Hepes 10. pH=7.4. La solución interna (mM): TEA-Cl 20; CsCl 100; EGTA 10; Hepes 10; GTP-Na 0.4; ATP-Na 5; Anfotericina B 150 µM. pH= 7.3. La PQ 10µM, disminuye la amplitud total del potencial de acción (30%) y la duración al 50% en 19%. El efecto de la PQ sobre la corriente ICa++-L fue de 23% y fue dependiente de la concentración, con una Kd de 7.02 µM y un coeficiente de Hill de 2.1. El curso temporal de instalación del efecto fué de 8 minutos. A diferencia de resultados previos sobre la INa+ (Orta-Salazar y cols, 2002), no se observó ningún efecto dependiente de la frecuencia (0.1, 1, y 2Hz), ni sobre la reactivación del canal. En conclusión, los experimentos realizados sugieren que la PQ bloquea la corriente de calcio tipo L de manera dependiente de la dosis y que este bloqueo probablemente reduce la cantidad de calcio disponible para el acople excitación-contracción. *Apoyado por Fundación BUAP Orta-Salazar,Bouchard,R,Morales-Salgado,F,&Salinas-Stefanon,E. (2002):Inhibition of cardiac INa+ current by primaquine. Br.J.Pharmacol 135:751-763 C-21 C-22 CARACTERIZACIÓN DE UNA CORRIENTE CATIÓNICA INDUCIDA POR TAPSIGARGINA EN CÉLULAS ß PANCREÁTICAS Y SU INFLUENCIA EN LA SECRECIÓN DE INSULINA. Cruz-Cruz, R*. Sánchez-Soto, M C*. e Hiriart, M. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. México, D.F. C.P. 04510. EL NGF MODULA LA CORRIENTE DE CALCIO Y LA EXPRESIÓN DE INSULINA EN CÉLULAS ß DE RATA NEONATA. Navarro, V*. González-Martínez, T*. Sánchez-Soto*, M. C. e Hiriart, M. Departamento de Biofísica, Instituto de Fisiología Celular, UNAM, México La principal vía de secreción de insulina en la célula ß del páncreas es mediada por el metabolismo de la glucosa. Esta facilita la despolarización de la membrana plasmática y la activación de canales de Ca2+ dependientes de voltaje (CCDV), generando un aumento en la concentración de Ca2+ intracelular necesario para la fusión de los gránulos de secreción. Sin embargo, es probable que la liberación de Ca2+ desde los depósitos intracelulares favorezca la activación de una corriente de Ca2+ que influya en la secreción de insulina. Para estudiar esto, caracterizamos una corriente catiónica inducida por tapsigargina (Tg) y su efecto en la secreción de insulina. Para ello cultivamos, por 24 h, células ß pancreáticas de rata. Las corrientes catiónicas totales fueron registradas con la técnica de patch-clamp en la configuración de célula entera en presencia y ausencia de 200 nM de Tg. Así mismo, medimos la secreción de insulina inducida por 200 nM de Tg con un ensayo hemolítico inverso en dos concentraciones de glucosa (5.6 y 15.6 mM). Encontramos que en presencia de Tg hubo un incremento del 135 % en las corrientes catiónicas entrantes con respecto a sus registros controles. El tratamiento durante 1 h con Tg aumentó la secreción de insulina, con respecto a sus controles, 3.8 veces en 5.6 mM de glucosa y 1.8 veces en 15.6 mM. Esta elevación no se debe a la activación de los CCDV, ya que la aplicación de nifedipina (10 µM) no bloqueó el efecto de la Tg. El aumento en la secreción de insulina producido por Tg podría estar asociado con la liberación de calcio de los depósitos intracelulares, ya que la secreción no fue bloqueada al sustituir el Ca2+ extracelular por Ba2+. Nuestros resultados nos permiten sugerir que la secreción de insulina no es totalmente mediada por los CCDV, y que los depósitos intracelulares así como las corrientes de Ca2+ activadas por la liberación de Ca2+ intracelular, pueden jugar un papel importante en la secreción de insulina. Apoyado por DGAPA-UNAM 211800. Las células ß pancreáticas de rata adulta sintetizan y secretan factor de crecimiento neuronal (NGF) el cual puede modular de manera autocrina la fisiología de estas células. En estas células, el NGF aumenta la secreción de insulina, así como la actividad eléctrica, incrementando la densidad de las corrientes de sodio y calcio. Por otro lado, las células β fetales carecen de sensibilidad a la glucosa. Previamente hemos demostrado que las células neonatas tampoco responden a la glucosa. Sin embargo, el tratamiento en cultivo con NGF aumenta la secreción de insulina en un 40 %, tanto en glucosa 5.6 mM como en 15.6 mM. Este efecto podría estar mediado por un aumento en la densidad de corriente de calcio, así como por un aumento en la biosíntesis de insulina, entre otros. El objetivo de este trabajo fue el de caracterizar las corrientes de calcio de células β neonatas y analizar si la presencia de NGF en el cultivo las modifica. Así mismo estudiamos la expresión del RNAm para insulina en las diferentes condiciones. Métodos: las células insulares se obtuvieron de ratas 24 h de vida, se cultivaron por 24 y 48 h en condiciones control o en presencia de 50 ng/ml de NGF. Los registros se realizaron con la técnica de “patch clamp” de célula completa, utilizando bario como portador de la corriente (IBa). La expresión del mRNA de insulina se evaluó por medio de RT-PCR. Resultados: La IBa de las células neonatas expuestas a NGF por 48 h aumenta en un 57 % con respecto a sus controles. Esta respuesta es un 48 % mayor a la que presentan las células ß de rata adulta en las mismas condiciones. En estas últimas, el efecto del NGF sobre la densidad de la IBa se manifiesta hasta los cuatro días en cultivo con el factor. En las células neonatas tratadas con NGF por 48 h, la expresión de mRNA de insulina aumenta 1.5 veces con respecto a las células control. Conclusiones: las células β de ratas neonatas no presentan sensibilidad a la glucosa. El NGF tiene efectos tróficos sobre los canales de calcio, la expresión y la secreción de insulina. Por la anterior, el NGF contribuye a la maduración funcional de las células β de ratas neonatas. Este trabajo fue apoyado por CONACyT 13740-N y DGAPA 211800. C-23 C-24 MODULACIÓN DE LA ACTIVIDAD CONTRÁCTIL DEL ÚTERO HUMANO GESTANTE POR ANDRÓGENOS. Barrera D.*, Navarrete E.*, Jasso J.*, Bustos H.*, González L.* y Perusquía M. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. CARACTERIZACIÓN DEL EFECTO VASODILATADOR DE DEHIDROEPIANDROSTERONA. Silva, M.*, Navarrete, E.* y Perusquía, M. Instituto de Investigaciones Biomédicas., UNAM. Una de las funciones de la progesterona durante el embarazo es la disminución de la contractilidad uterina para evitar abortos y partos prematuros. También se ha reportado que algunas progestinas 5reducidas son más potentes que progesterona para relajar el útero humano y de animales experimentales. Debido a la presencia y metabolismo de andrógenos durante el embarazo, el propósito de este estudio fue determinar el efecto de testosterona (T) y sus dihidroderivados, 5α- y 5β-dihidrotestosterona, sobre la actividad contráctil espontánea del útero aislado de humano gestante a término. Las muestras fueron obtenidas de pacientes con 38 a 40 semanas de gestación sometidas a operación cesárea. La actividad contráctil espontánea fue registrada por la técnica isométrica convencional para tejido aislado, probando en forma independiente: T, 5α-dihidrotestosterona (5α-DHT) y su isómero 5βdihidrotestosterona (5β-DHT), a diferentes concentraciones (3, 10, 30 y 100 µΜ) de manera no acumulativa. El efecto de los andrógenos también fue evaluado sobre contracciones inducidas por KCl 40 mM, tanto en presencia como ausencia de 100 µΜ de cicloheximida (inhibidor de la síntesis de proteínas). Los resultados mostraron que los andrógenos inducen relajación rápida y reversible en contracciones espontáneas e inducidas por KCl en forma dependiente de la concentración, con una relación de potencia: 5β-DHT >>> T > 5α-DHT, el efecto relajante no fue modificado por cicloheximida. Los resultados muestran que la 5βreducción en el anillo A de la molécula es muy importante para la eficacia relajante del andrógeno. Además, dado que la relajación uterina inducida por los andrógenos fue inmediata y que la síntesis de proteínas no está involucrada en el efecto, se sugiere una acción de tipo nogénomico. Se concluye que los andrógenos tienen una importante participación en la regulación de la contractilidad uterina durante la gestación. Los estrógenos ejercen un importante efecto "protector" en el sistema cardiovascular, principalmente por inducir vasodilatación. También se ha reportado que algunas progestinas y andrógenos producen un marcado efecto vasodilatador no genómico endotelio independiente. Por otro lado, el esteroide adrenal, dehidroepiandrosterona (DHEA) ha sido asociado con aumento de la longevidad y uno de sus principales atributos es disminuir el riesgo de enfermedades cardiovasculares. El objetivo de este estudio fue determinar la potencia vasodilatadora de DHEA en relación a la ejercida por sus metabolitos (andrógenos y estrógenos) y caracterizar su tipo de acción. Se utilizaron anillos aórticos de ratas macho adultas y la actividad se registró mediante la técnica de registro isométrico. El efecto de DHEA fue observado en preparaciones con y sin endotelio sobre la contracción inducida por noradrenalina (NA 0.3 µM), a diferentes concentraciones (3300 µM), probadas independientemente y de manera no acumulativa. En forma colateral, se evaluó el efecto de DHEA en presencia del inhibidor de la óxido nítrico sintetasa (L-NAME 10 µM y de inhibidores de la síntesis de proteínas (cicloheximida 40 µM) y de la transcripción (Actinomicina D 10 µM). Los resultados obtenidos muestran que DHEA ejerce un efecto vasodilatador rápido (~1 min) y reversible dependiente de la concentración, que no fue diferente en ausencia del endotelio y no modificado por LNAME, cicloheximida o actinomicina D. La relación de la potencia relajante fue: 5β-DHT > DHEA > 5α-DHT > 17β-E2 = T4. Los datos sugieren que la vasodilatación de DHEA es una acción no genómica e independiente del endotelio vascular no mediada por óxido nítrico. Se concluye que el efecto benéfico de los estrógenos, al inducir vasodilatación, podría ser ejercido por su precursor (DHEA) y/o por los productos de otras vías de su metabolismo (andrógenos 5-reducidos). C-25 C-26 EFECTO DE LA TESTOSTERONA SOBRE LA ORGANIZACIÓN ANATÓMICA DEL MÚSCULO PUBOCOCCÍGEO EN LA RATA MACHO. Alvarado M*, Pacheco P, Hernández ME y Manzo J. Inst. de Neuroetología, Univ. Veracruzana, Xalapa, Ver.; Inst. de Inv. Biomédicas, UNAM, México, D.F. EFECTO DEL ENTRENAMIENTO PARA ADQUIRIR VELOCIDAD SOBRE LAS PROPIEDADES CONTRÁCTILES DE LOS MÚSCULOS ESQUELÉTICOS DE RATA SOMETIDOS A CONTRACCIONES EXCÉNTRICAS. Virgen A.* (Avalado por Sánchez Chapula José Antonio), Muñiz J.*, Peraza A.* Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. El músculo pubococcígeo (Pc) participa en procesos relacionados con la micción y la reproducción. Este músculo se encuentra inervado por motoneuronas de los segmentos espinales L6 y S1 que envían sus axones por la rama somatomotora del nervio pélvico. En nuestro laboratorio se ha observado que las motoneuronas son sensibles a la fluctuación de hormonas esteroides. La castración reduce algunas de sus características morfométricas, y el tratamiento con testosterona produce la recuperación de esas características. En base a esto, proponemos que el Pc también es sensible a la testosterona. Para la realización de este trabajo se utilizaron ratas macho adultas de la cepa Wistar (250-350 g). Se formaron cuatro grupos de animales: intactos, castrados, castrado más tratamiento con vehículo, y castrado más tratamiento con propionato de testosterona. Dos semanas después de cada manipulación, se obtuvo el Pc y se trabajó para teñirlo con Hematoxilina-Eosina. Posteriormente se realizó el análisis morfométrico del área de las fibras con un analizador de imágenes La disminución de los niveles sistémicos de testosterona provocó una reducción del área de las fibras, y la restitución de testosterona en animales castrados resultó en un aumento del área. Los datos que se tienen indican que, al igual que sus motoneuronas, las fibras de éste músculo también son sensibles a la fluctuación de testosterona. Este resultado es propio de los músculos involucrados en funciones reproductivas. Su organización y disposición anatómica lo hace un modelo más adecuado, que el clásico levator ani, para el estudio del efecto de esteroides sobre la musculatura estriada. CONACYT Proyecto 33124-N (JM); CONACYT Beca 164002 (MA). C-27 ASIMETRIA DIMORFICA SEXUAL NEUROMUSCULAR EN LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LA CREATINA CINASA DE LA RATA WISTAR. Jiménez-Barrón, E.* y Ramírez, O. Depto. de Bioquímica, CINVESTAV- I.P.N. México. Hay asimetría funcional en estructuras del sistema límbico,1 y participación de genes2 en patrones específicos en el desarrollo embrionario cerebral de regiones izquierda y derecha3. Se creía que las asimetrías existían sólo en el humano; ahora se aceptan como un principio de organización en los vertebrados.4 Hay dimorfismo sexual (DS) en algunas diferencias en la lateralización cerebral humana.5,6 Distribuidos asimétricamente y con DS están los metabolitos del sistema dopamino nigrostriatal, la glucosa,4 las benzodiazepinas5 y la norepinefrina, lateralizada en el bulbo olfatorio del ratón macho.6 El sistema creatina cinasa/fosfocreatina (CK/PC) es abundante sólo en tejidos neuromusculares y es un regulador energético clave de procesos metabólicos fundamentales. La CK regenera ATP a partir de PC. Para conocer si también existen patrones asimétricos y con DS en la actividad específica (AE) de la CK del cerebro y de los músculos extensor digitorum longus (EDL) y soleo de la rata Wistar adulta, se homogeneizaron los tejidos en KCl O.1M. Se determinó la actividad de CK en el sobrenadante postmitocondrial, mediante un sistema acoplado con dos enzimas. Se registró espectrofotométricamente el decremento de NADH a 340 nm. Se observó lateralización hemisférica en espejo de la AE de la CK entre sexos. En el EDL la hembra mostró una mayor AE, sin lateralización y en el soleo, ambos sexos mostraron mayor AE muscular derecha. La CK parece participar de una manera específica de sexo y de simetría en requerimientos energéticos de las distintas funciones neuromusculares no completamente cubiertos por la glicólisis anaeróbica y aeróbica. Los músculos esqueléticos son más susceptibles al daño por contracciones excéntricas (ECC) que por concéntricas o isométricas. Las ECC ocurren cuando los músculos son estirados mientras están generando tensión activamente. El daño muscular causado por ECC se caracteriza por una disminución en la fuerza específica isométrica máxima. En este trabajo estudiamos si el entrenamiento para adquirir velocidad protege contra el daño por ECC. Se utilizaron dos grupos de ratas: no entrenadas (C) y entrenadas (T). Después de 10 semanas de entrenamiento se realizaron experimentos de contractilidad in vivo con los músculos soleo y plantaris derechos de ambos grupos de ratas. Las propiedades contráctiles usadas como marcadores de daño muscular fueron: Tensión máxima de la sacudida, tensión tetánica máxima, trabajo desarrollado, velocidad máxima de contracción y de relajación. Estos parámetros fueron medidos antes y después de 20 ECC con estiramientos del 10 y 20% de Lo. Los resultados obtenidos sugieren que el entrenamiento para adquirir velocidad protege al músculo soleo contra el daño causado por ECC. En contraste, los músculos plantaris fueron susceptibles al daño en la misma magnitud en ambos grupos. Además, no se observó recuperación del daño en los músculos soleo y plantaris después 10 minutos de reposo. C-28 EFECTO DE CATIONES DIVALENTES SOBRE LAS CONTRACTURAS POR K+ EN LAS FIBRAS MUSCULARES LENTAS DESNERVADAS DE LA RANA. Hernández, L.∗ (Avalado por González-Burgos, Ignacio), Huerta, M∗, Trujillo, X.∗ y Vásquez, C.∗ Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, México. En este trabajo se exploró la influencia del Ca2+ y de otros cationes divalentes sobre las respuestas contráctiles de fascículos lentos del músculo cruralis de la rana (R. pipiens) bajo condiciones de desnervación crónica. Se registró la tensión isométrica desarrollada por soluciones con alto K+ en fascículos provenientes de músculos normales y desnervados. En la 2ª semana, las diferencias en los promedios de la tensión registrada en fibras normales fueron estadísticamente significativas (p<0.05), tanto en ausencia de Ca2+ como cuando fue sustituido por otros cationes, excepto para el Mn2+ (p>0.05). Así, en ausencia de Ca2+, en la 2ª semana, los fascículos desnervados alcanzaron hasta un 36.3 ± 10.2% (n = 6) de la tensión total (TT) vs. 82.5 ± 5.5% (n = 4) de los fascículos normales. Después de la 3ª semana, la tensión fue recuperándose con respecto al control. Con Co2+, la TT en las fibras desnervadas fue de 76 ± 9.5% y la tensión al pico (TP) de 76.3 ± 8.4% (n = 4) vs. 44.8 ± 3.5% y 50.5 ± 3.11% (n = 4) de la TT y la TP de fibras normales. En la 3ª y 4ª semana, la tensión desarrollada tendió a recuperarse a los niveles normales. Con Ni2+, la TT en las fibras desnervadas fue de 75 ± 8.7 y la TP fue de 73.3 ± 8.4% (n = 4) vs. 20.1 ± 9.8% y 26.4 ± 9.2% (n = 4) de la TT y de la TP de fibras normales. Después de esta semana, la reducción en la tensión fue menor. Con Sr2+, la TT desarrollada por las fibras desnervadas fue de 85.3 ± 6.6% (n = 4) vs. 20.2 ± 20.3% (n = 4) de las fibras normales. Estos resultados sugieren que la desnervación afecta el acople E-C en estas fibras musculares lentas. C-29 C-30 PAPEL DEL INTERCAMBIADOR SODIO-CALCIO EN LA RELAJACION DEL MUSCULO LISO TRAQUEAL DE COBAYO. Herrera Mendoza P.*(avalado por Rafael Rubio Garcia.), Espericueta Monsivais V.M.*, Romero A.C.* y Espinosa Tanguma R.* Departamento de Fisiología y Farmacología de la Facultad de Medicina de la UASLP. San Luis Potosí, S.L.P. México, 78210. Tel. 444-826-2345 ext. 552, FAX 444-817-6976, espinosr@uaslp.mx. LA OUABAÍNA PRODUCE UNA CONTRACCIÓN BIFÁSICA DEL MÚSCULO LISO TRAQUEAL DE COBAYO: PAPEL DE LOS RECEPTORES β . Navarro Huerta M.P.*, Valle Aguilera J.R.*, Sanchez-Armass S. y Espinosa Tanguma R.* Departamento de Fisiología de la Facultad de Medicina de la UASLP. San Luis Potosí, S.L.P. México, 78210. Tel. 444-826-2345 ext. 552, FAX 444-817-6976, espinosr@uaslp.mx. La participación funcional del intercambiador sodio-calcio (NCX) del plasmalema durante la relajación del músculo liso de las vias aéreas es controversial. En fecha reciente encontramos que la velocidad de relajación (medida como el tiempo necesario para alcanzar el 50% del total de la relajación, o T50%) de anillos de traquea de cobayo, previamente contraidos con Histamina, se incrementa significativamente cuando los anillos son lavados con soluciones libres de sodio (∅?Na)?. Tambien encontramos que las soluciones ∅?Na potencian transitoriamente la tensión producida por la Histamina. Lo anterior sugiere que el NCX participa en la regulación de la concentración de calcio intracelular en este músculo. En el presente trabajo estudiamos con mas detalle los efectos de las soluciones libres de sodio en anillos de traquea de cobayo previamente contraidos con Histamina. Probamos el efecto de Nifedipina (un bloqueador de los canales de calcio dependientes de voltaje), Thapsigargina y Acido Ciclopiazonico (dos inhibidores de la Ca-ATPasa del retículo sarcoplasmico), Diclorobenzamil (un inhibidor no especifico del NCX) y de soluciones libres de calcio. Los resultados obtenidos hasta este momento muestran que las respuestas inducidas por soluciones ∅?Na son dependientes de calcio extracelular y bloqueadas por el Acido Ciclopiazónico . Apoyado por CONACYT 33401-N a RET. La ouabaína es un digitálico cardíaco con efectos inotrópicos positivos. En el músculo liso traqueal de cobayo la ouabaína (10-4 M) produce una contracción bifásica en los primeros 60 min después de su administración. La contracción bifásica está formada por dos contracciones transitorias: la primera siempre es de mayor magnitud pero de menor duración que la segunda. Ambas contracciones son dependientes de calcio extracelular y de la activación de canales de calcio dependientes de voltaje, parcialmente dependientes de la liberación de acetilcolina por las terminales nerviosas colinérgicas y del intercambiador sodio-calcio. Sin embargo, no se conoce el o los mecanismos involucrados en el proceso de relajación. En el presente trabajo estudiamos el efecto del propranolol (10-5 M, antagonista de los receptores β) y de la nωnitro-l-arginina metil ester (10-3 M) durante la contracción bifásica inducida por la ouabaína en anillos de tráquea de cobayo. Los resultados indican que la nω-nitro-l-arginina metil ester no modifica la respuesta contráctil de la ouabaína. Sin embargo, propranolol inhibió en un 77 % la relajación observada en la contracción inducida por ouabaína. De tal manera que se fusionan las dos contracciones referidas. Concluimos que la ouabaína además de estimular la liberación de acetilcolina también induce la liberación de noradrenalina la cual, al actuar sobre receptores β, favorece la relajación del músculo liso traqueal de cobayo. Apoyado por CONACYT 33401-N a RET. C-31 C-32 INFLUENCIA DE LA HIDRALAZINA Y METILAMINA SOBRE LA CONCENTRACION DE PEROXIDO DE HIDROGENO EN EL PLASMA DE RATAS. LorenzanaJiménez M., Vidrio H., Diaz-Arista P.* y Baeza A.* Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina y Departamento de Electroquímica, Facultad de Química, UNAM. México, D.F. 04510 ATEROTROMBOSIS E INHIBICIÓN DE LA FIBRINOLISIS POR LIPOPROTEINA(a). De la Peña Díaz A1*,(avalado por Fernández Guardiola Augusto), Izaguirre Avila R1*, Cardoso Saldaña G1*, Zamora González J1*, Barinagarrementeria F2* y Anglés-Cano E3*. 1 Instituto Nacional de Cardiología "Ignacio Chávez". 2 Instituto Nacional de Neurología, México, D.F. 3 INSERM U 460, Paris, Francia. La hidralazina es un vasodilatador con mecanismo de acción desconocido. Inhibe varias enzimas, entre ellas a la amino oxidasa sensible a la semicarbazida (SSAO), cuyo papel fisiológico se desconoce, aunque se sabe que utiliza aminas primarias como sustrato para generar peróxido de hidrógeno (H2O2) entre otros productos y que abunda en el músculo liso vascular. Puesto que el H2O2 libera al prostanoide vasoconstrictor tomboxano A2, es posible que por esta vía la SSAO esté involucrada en la regulación del tono vascular. Por otro lado, la hidralazina también se concentra en el músculo liso vascular, por lo que hemos postulado que al inhibir a la SSAO en ese tejido, se disminuye la producción de H2O2 y por lo tanto el tono vascular. El presente estudio pretende confirmar parcialmente esta hipótesis , determinando la concentración de H2O2 en ratas pretratadas con metilamina, un sustrato de la SSAO, y con hidralazina como inhibidor de esta enzima. El H2O2 se determinó directa e indirectamente en muestras de plasma por polarografía diferencial de pulsos, utilizando un polarógrafo Metrohm 622 con un sistema de tres electrodos: uno de trabajo goteante de Hgº, uno de alambre de Auº como auxiliar y otro de calomel de referencia, todos acoplados a un graficador. La metilamina aumentó significativamente los niveles de H2O2 y la hidralazina los disminuyó, comprobándose así la hipótesis planteada. Los resultados también sugieren que la medición de H2O2 puede constituir un método sencillo para determinar la actividad de la SSAO. La enfermedad aterotrombótica, es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en los países occidentales. Factores tanto genéticos como ambientales dan origen a la aterosclerosis y a ellos debe sumarse la liporpoteína (a). La presencia de una LDL en su estructura, se asocia al desarrollo de aterosclerosis y la presencia de la apolipoproteía (a) con una inhibición competitiva del plasminógeno para generar plasmina, favoreciendo la trombosis. Por estos motivos se considera a la Lp(a) el punto común entre la aterosclerosis y la trombosis. La gran heterogeneidad estructural de la molécula de apo(a), se traduce en una heterogeneidad funcional como inhibidor competitivo del plasminógeno por lo que es importante resaltar que existen diferencias en la concentración y en la presencia de distintas isoformas en poblaciones genéticamente diferentes y las diferencias se encuentran no sólo entre individuos sino entre poblaciones. Este trabajo propone una nueva estrategia para explorar la capacidad trombogénica de la Lp(a) a través del estudio funcional de la unión de la apo(a) a la fibrina como indicador de la asociación de la Lp(a) al proceso aterotrombótico. Con esta finalidad se estudiaron un grupo de enfermos con manifestaciones aterotrombóticas: 105 con enfermedad arterial coronaria (unión a la fibrina=0.155±0.12 nM apo(a)) y 52 con enfermedad vascular cerebral (unión a la fibrina=0.268±0.15 nM apo(a)). Los resultados se compararon con los de 91 controles y confirman que existe una asociación entre la unión de Lp(a) a la fibrina y la enfermedad aterotrombótica. C-33 C-34 BLOQUEO DE LOS CANALES DE POTASIO HERG POR QUINIDINA. Ferrer-Villada T1*, Navarro-Polanco RA1*, Sanguinetti MC2*, Sanchez-Chapula JA1. 1.Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. 2. Department of Medicine, Division of Cardiology, Eccles Institute of Human Genetics, University of Utah. MODELO DE LESIÓN EXPERIMENTAL POR PUNCIÓN VENTRICULAR TRANSTORÁCICA EN COBAYO Y REGISTRO ELECTROCARDIOGRÁFICO. Valencia, J.* Contreras-Barrios M.A.*, Verdugo L., García X. y Gijón, E. Departamento de Fisiología. Facultad de Medicina. UNAM. Ap. p. 70-250.México, D.F. 04510. México. Quinidina bloquea el canal de potasio rectificador retardado HERG y prolonga el potencial de acción cardíaco. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el mecanismo de bloqueo del canal HERG y el probable sitio de unión de la quinidina. En este trabajo estudiamos el bloqueo dependiente de voltaje de quinidina sobre el canal de potasio HERG nativo y sobre mutantes del mismo, expresados en oocitos de Xenopus . El bloqueo del canal nativo por quinidina es dependiente de voltaje, se incrementa a medida que el potencial de membrana se hace más positivo y fue acompañado por un corrimiento de la curva de activación hacia potenciales más negativos. La concentración de fármaco que bloquea el 50% de la corriente (IC50) es 4.6 µM. Sin embargo, con el mutante F656A se redujo drásticamente la potencia de bloqueo (IC50 = 650µM). Así mismo, la mutación de otro residuo aromático (Y652A) igualmente localizado en el segmento S6 del canal, también reduce la potencia de bloqueo de quinidina (IC50 = 16µM), aunque en menor grado. Interesantemente, la mutación Y652A hace que el bloqueo del canal por quinidina manifieste una dependencia de voltaje contraria a la observada en el canal nativo. A su vez, la substitución de la tirosina 652 por otro residuo aromático (Y652F) elimina totalmente la dependencia de voltaje del bloqueo. Estos resultados indican un papel crítico del residuo Y652 en el bloqueo voltaje dependiente del canal HERG. El uso de un modelo molecular del canal junto con nuestros resultados experimentales sugieren que quinidina bloquea preferentemente el estado abierto del canal interaccionando con los residuos Y652 y F656 de varias subunidades. Después de una lesión por isquemia el miocardio del adulto es incapaz de auto repararse y conduce a insuficiencia cardiaca. Los estudios de reparación del miocardio en modelos experimentales de lesión por frío, ligadura coronaria o doxorrubicina en perros, ratas y conejos, con trasplante celular de mioblastos esqueléticos autólogos o células satélite, células precursoras de músculo esquelético señalan una mejoría del miocardio lesionado. En el cobayo, el conejo y el perro la circulación colateral, conexiones anastomóticas intercoronarias sin capilares intermedios, es muy amplia y no es posible producir infarto del miocardio por ligadura de una arteria coronaria. Nuestro laboratorio estudia el modelo experimental de lesión por punción ventricular en cobayo y su repercusión en el registro electrocardiográfico en las derivaciones estandar DI, DII, DIII, AVR, AVL y AVF. En cobayos anestesiados con pentobarbital sódico, en decúbito dorsal, se colocaron electrodos en las extremidades para el registro de las derivaciones electrocardiográficas, en un Fisiografo Cuatro E y M Instrument. Se hicieron registros testigo, punción transtorácica del corazón y registros inmediatos a la punción y a los 20 minutos de la punción. Los registros muestran desnivel del espacio ST, cambios en la onda T, inversión de la onda T. Estos cambios se mantienen a los 20 minutos de la punción. La punción ventricular es un modelo experimental de lesión y muestra alteraciones electrofisiológicas, que se mantienen, esto lo hace un modelo útil de lesión experimental del miocardio para el estudio de alternativas de reparación del miocardio, por medio de transplante de células musculares cultivadas1. 1. Proc. West. Pharmacol. Soc. 41:158-160, 1998. C-35 C-36 EFECTOS DEL TRATAMIENTO CON DITPA DE RATAS DIABETICAS SOBRE LAS CORRIENTES DE POTASIO REPOLARIZANTES EN MIOCITOS VENTRICULARES CARDIACOS. Madrigal-Quiñonez R*, Ferrer-Villada T*, TorresJácome J*, Cassis O*, Sánchez-Chapula JA. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Colima. EFECTOS DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA Spirulina platensis SOBRE LAS RESPUESTAS VASOMOTORAS DE ANILLOS DE AORTA DE RATA. Mascher, D.1, ParedesCarbajal, M.C.1, Cortés-Julián, G.*1, Juárez-Oropeza, M.A.*2, Torres-Durán, P.V.*2. Depto. de Fisiología (1) y Depto. de Bioquímica (2), Fac. de Medicina, UNAM. A.P. 70-250, México D.F., 04510. La Diabetes Mellitus (DM) esta asociada con daños a largo plazo, disfunción e insuficiencia en varios órganos, como el corazón,. Esta patología produce un incremento en la duración del potencial de acción (DPA) ventricular de miocitos cardíacos aislados de ratas diabéticas, lo cual esta relacionado con una disminución las corrientes de potasio repolarizantes. Es conocido que la DM va acompañada de hipotiroidismo, al cual se le han adjudicado varios de los cambios metabólicos, hemodinámicos y cardiovasculares producidos por la diabetes. En este trabajo se indujo diabetes experimental a ratas, administrando una sola dosis de Streptozotocina (100mg/Kg de peso) y se trataron las mismas con DITPA (3,5-diiodothyropropionic acid), análogo de la hormona tiroidea T3, durante 21 días (1mg/Kg de peso). Se estudiaron los efectos que produce el tratamiento con DITPA sobre las corrientes de potasio involucradas en la repolarización de la membrana en miocitos aislados del epicardio del ventrículo izquierdo (EPI) y de la pared libre del ventrículo derecho (PLVD). El tratamiento de las ratas diabéticas con DITPA recupera completamente la corriente Itof, disminuida por la DM, tanto en miocitos cardíacos aislados de la PLVD como del EPI , no encontrándose diferencias significativas entre los valores de esta corriente en las ratas control y en las ratas diabéticas tratadas con DITPA. La corriente Iss, que también es disminuida por la DM, igualmente se recupera después de tratar a las ratas diabéticas con DITPA en los miocitos cardíacos estudiados. Estos resultados evidencian que al mejorar el estado tiroideo de los animales diabéticos se recuperan las corrientes repolarizantes cardíacas, lo cual también sucede en corazones infartados. Estudios previos de este laboratorio demostraron que la Spirulina maxima produce una disminución de las respuestas vasoconstrictoras y un incremento de las respuestas vasodilatadoras dependientes del endotelio en anillos de aorta de rata. El cultivo de la Spirulina maxima en nuestro país fue suspendido, por este motivo consideramos de interés investigar los posibles efectos de la Spirulina platensis sobre la reactividad vascular. En el presente trabajo, se analizaron los efectos del extracto etanólico crudo de la Spirulina platensis sobre las respuestas vasomotoras inducidas por la fenilefrina y el carbacol. Los experimentos se realizaron en anillos de aorta provenientes de ratas macho adultas. La adición del extracto en dosis crecientes (0.7 – 200 µg/ml) produjo dos tipos de respuesta en los anillos precontraídos con fenilefrina (10-6 M): 1.- a concentraciones bajas (0.7 – 6 µg/ml) se observó un efecto bifásico, consistente en un incremento inicial de la respuesta contráctil inducida por la fenilefrina, seguida de una relajación; esta respuesta bifásica fue dependiente del endotelio y de la concentración del extracto; 2.- a concentraciones mayores (12 – 200 µg/ml) se observó sólo un efecto relajante, predominantemente dependiente del endotelio. Esta relajación fue revertida por la adición de LNAME (300 µM); 3.- el extracto (200 µg/ml), no tuvo efecto alguno sobre la relajación inducida por el carbacol en los anillos precontraídos con fenilefrina. Los resultados sugieren que el extracto etanólico de la Spirulina platensis, a diferencia del de la Spirulina maxima, contiene algún(os) componente(s) activo(s) vasoconstrictor(es), y que, al igual que la Spirulina maxima, contiene algún componente que induce la síntesis/liberación de óxido nítrico. Apoyado parcialmente por donativo DGAPA-UNAM IN218999. C-37 C-38 ENZIMAS ANTIOXIDANTES EN UN MODELO DE HIPERTENSIÓN E HIPERTRIGLICERIDEMIA EN RATA. DIFERENCIAS ASOCIADAS AL GÉNERO Y A LA EDAD. Baños G.* (avalado por Guarner Verónica),Medina O.*, Maldonado P.*Zamora J.*, Pavón N.* y Pedraza J.*. Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez” y * Facultad de Química, UNAM. RESPUESTAS VASOMOTORAS DE ANILLOS DE AORTA PROVENIENTES DE RATAS EXPUESTAS A CAMPOS ELECTROMAGNÉTICOS. Paredes Carbajal M.C. 1, Mascher D. 1 , Juárez Oropeza M.A.*2, Gutiérrez N.*1, Verdugo Díaz L. 1 Depto. de Fisiología, 2 Depto. de Bioquímica, Facultad de Medicina, UNAM. La administración crónica de azúcar al 30% en el agua de beber induce hipertensión e hipertrigliceridemia (HTG) en ratas. La vasoreactividad del modelo sugiere daño endotelial, mas evidente en las ratas macho, cuya causa podría ser el estrés oxidativo, lo cual justificó medir la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD) y glutatión peroxidasa (GPx) en suero, hígado, riñón y corazón de ratas hembra y macho HTG y control (C) a los 3, 5 y 8 meses de tratamiento. Se encontraron los siguientes cambios: CAT: Por tratamiento en corazón de machos y hembras y riñón de hembras; por género en hígado, riñón y corazón; por edad en corazón e hígado de machos, y corazón, hígado y riñón en hembras. SOD: Por género en corazón y riñón de machos y riñón de hembras. GPx: Por tratamiento en riñón e hígado de machos, y riñón, hígado y plasma de hembras; por género en hígado, plasma y riñón de machos, y riñón, corazón y plasma de hembras; por edad en plasma, riñón e hígado en machos y hembras y en éstas también en corazón. La menor actividad enzimática encontrada en algunos casos podría ser intrínseca y, en las hembras, se compensaría por la acción antioxidante de los estrógenos. En los animales HTG se sugiere una depleción debida al aumento en el estrés oxidativo generado por el exceso de triglicéridos, que favorece el incremento de la lipoperoxidación. C-39 ALTERACIONES DEL MIOCARDIO DE FETOS DE RATÓN EXPUESTOS A FLUNITRAZEPAM. Márquez-Orozco, Amalia, Márquez-Orozco, M.C., Gazca-Ramírez, M.V.* y De la FuenteJuárez, G.* Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. Se sabe que dosis únicas diarias de diazepam (DZ) administradas durante la gestación altera el desarrollo de miocardio fetal de ratón. El propósito de este trabajo fue investigar si la administración de flunitrazepam (FNZ) a ratones, el día 6 de la gestación, produce en el miocardio fetal alteraciones histológicas, semejantes a las observadas en los fetos tratado "in útero" con DZ. Dos grupos de hembras de ratón de la cepa ICR recibieron por vía oral, el día 6 de la gestación, el primero (FNZ), una sola dosis de FNZ de 2.5 mg/kg, y el segundo(S), solución salina. Un tercer grupo (NT), no fue tratado. Las hembras gestantes de los tres grupos se sacrificaron el día 18 en una atmósfera de CO2 y se obtuvo el corazón fetal, se fijó en glutaraldehido al 2.5%, se posfijaron en OsO4 al 1% y se incluyó en resina epóxica. Los cortes semifinos se tiñeron con azul de toluidina con un microscopio óptico de comparación. Se encontró en el grupo, FNZ que la pared ventricular estaba engrosada, las fibras musculares presentaron una distribución irregular. Las miofibrillas, con frecuencia estaban desorganizadas. Los discos intercalares eran más gruesos. Los núcleos, eran voluminosos y tenían contorno lobulado, abundante heterocromatina en grumos gruesos. Se podían observar nucléolos grandes. Entre los grupos S y NT, no se observaron diferencias histológicas. Los cambios podrían deberse a que el FNZ, al igual que el DZ altera la síntesis de actina y miosina, en especial la pesada, el metabolismo del calcio; básico así como los organelos citoplásmicos como se ha demostrado en el miocardio de los fetos tratados con DZ. Los resultados comprueban que el FNZ al igual que el DZ administrado durante la gestación alteran el miocardio del ventrículo de fetos de ratón. Es probable que las modificaciones observadas, persistan en el adulto y tenga repercusiones fisiológicas. Desde que se generalizó el uso de la energía eléctrica se han realizado múltiples estudios, tanto en humanos como en otras especies, sobre los posibles efectos nocivos de la exposición a campos electromagnéticos de extrema baja frecuencia (CEM EBF). Los reportes de estos efectos sobre el sistema cardiovascular han sido contradictorios. En el presente trabajo, se compararon las respuestas vasomotoras, inducidas por la fenilefrina y el carbacol en anillos de aorta provenientes de dos grupos de ratas macho adultas. El grupo experimental fue expuesto diariamente (2 horas durante una semana) a CEM EBF. Las características de los CEM EBF utilizados fueron similares a los generados por aparatos electrodomésticos (estímulos sinusoidales, de 1 mT a 60 Hz). El grupo control fue tratado igual que el experimental, exceptuando que el generador de CEM EBF permanecía apagado. En cada experimento se utilizó un par de anillos (con y sin endotelio) de la misma aorta. Se obtuvieron los siguientes resultados: 1.-No se observaron diferencias significativas entre las curvas dosisrespuesta a la fenilefrina (10-9 M - 10-5 M) de los anillos, con o sin endotelio, de los dos grupos de ratas. 2.- La inhibición de la síntesis de óxido nítrico produjo efectos muy similares en las respuestas a la fenilefrina de los anillos provenientes de ambos grupos. 3.- No se observaron diferencias en las curvas dosis-respuesta al carbacol (109 M - 10-5 M) de los anillos con endotelio de ambos grupos. Estos resultados muestran que los CEM EBF, con los parámetros utilizados, no tienen efecto alguno sobre la reactividad vascular en estos animales. Esta conclusión, obtenida en un modelo experimental bien estandarizado, refuerza los resultados de otros estudios que han descartado que los CEM EBF tengan efectos nocivos. C-40 ANALISIS DE LA FUNCION DE CELULAS TUBULARES PROXIMALES EN RATAS CIRROTICAS Y CON SINDROME HEPATORRENAL, INDUCIDO CON TETRACLORURO DE CARBONO. Jaramillo Juárez F., Rodríguez Vázquez M.L.*, Rincón Sánchez A. R.*, Llamas Viramontes J.*, Posadas del Río F.A. y Reyes Sánchez J.L.. Universidad Autónoma de Aguascalientes, Universidad de Guadalajara y CINVESTAV-IPN, México, D.F. El síndrome hepatorrenal (SHR) es una falla renal funcional asociada con enfermedad hepática severa que se acompaña de ascitis. La patogénesis del SHR aún no está bien definida, situación que dificulta el diagnóstico y que, en muchos casos, permite que se agudice el daño renal y el paciente muera. El tetracloruro de carbono (CCl4) se ha utilizado en uno de los modelos experimentales para producir cirrosis hepática y SHR. En este trabajo se analizó la función de células tubulares proximales de ratas cirróticas y con SHR. Para ello, ratas Wistar machos fueron dividos en dos grupos: testigos y tratados. Los animales tratados recibieron CCl4, por vía i.p. (0.2 ml/3 veces semana/8 semanas), para inducir cirrosis hepática y SHR. En todos los animales se valoraron: las velocidades de excreción urinaria de glucosa y fosfatos, las actividades de ATPasas y las concentraciones de ATP en corteza renal. Los resultados obtenidos fueron analizados mediante las pruebas de ANOVA y de Turkey-Kramer. Las velocidades de excreción de glucosa y fosfatos aumentaron significativamente (p<0.001) en las ratas con SHR, comparadas con los controles y las ratas cirróticas. Los valores medios de las actividades de las ATPasas (Total y Na+-K+ dep.) presentaron valores muy semejantes en los tres grupos estudiados. Sin embargo, en las ratas cirróticas y con SHR disminuyó significativamente la concentración de ATP (p<0.001) en la corteza renal, con relación a los controles. Estos resultados nos permiten concluir la existencia de daño funcional en las células tubulares proximales de los animales con SHR. C-41 C-42 DISTRIBUCIÓN DE LAS PROTEÍNAS INTEGRALES DE LA UNIÓN ESTRECHA: CLAUDINAS 3, 4 Y 5, EN LOS DIFERENTES SEGMENTOS DE LA NEFRONA DEL CONEJO ADULTO Y NEONATO. Martín, D.*, Namorado, M.C. *, Islas, S.*, Luna, J.*, Sierra, G.*, Lamas, M.*, GonzálezMariscal, L.* y Reyes, J.L. Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV. México D.F. 07360. IDENTIFICACIÓN INMUNOCITOQUÍMICA DEL CANAL Kv 1.3 EN CÉLULAS DE TÚBULO COLECTOR DE MÉDULA INTERNA DEL RIÑÓN DE RATA. Carrisoza-Gaytán, R.* Bolivar, J*. Salas, M.* Tapia, D.* Castilla, S.A.* y Escobar-Pérez, Laura. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina. UNAM, México, D.F. La unión estrecha constituye la principal barrera de solutos y de agua a través del espacio paracelular de epitelios y endotelios. Las CLAUDINAS constituyen una familia de proteínas integrales de la unión estrecha. Hasta ahora se han caracterizado a veinte de ellas y se cree que pueden existir aún más. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio han mostrado que la claudina 1 se localiza en los segmentos de alta resistencia eléctrica transepitelial, que corresponden a los túbulos distal y colector de la nefrona; mientras que la claudina 2, se expresa claramente en los segmentos de la nefrona de alta permeabilidad correspondientes al túbulo próximal y Henle. Ahora nosotros nos concentramos en estudiar por inmunofluorescencia la localización a lo largo de la nefrona de las claudinas 3, 4 y 5. Encontramos que la expresión de las claudina 3 y 4 es negativa en la porción próximal, mientras que la distribución de estas claudinas en los bordes celulares se vuelve más precisa y fuerte conforme se avanza de Henle a colector. Este patrón está presente tanto en el riñón del animal recién nacido como en el adulto. La claudina 5 no está presente en los túbulos renales y en cambio claramente se localiza en los bordes celulares de los endotelios renales. Por otro lado, procedimos a estudiar mediante RT-PCR la expresión de las claudinas 1 a 8 en los segmentos renales microdisecados tanto de recién nacido como de adulto. Los resultados muestran una expresión diferencial de claudinas que varía con el desarrollo. El potasio (K+) es el catión más abundante en el fluído intracelular y es requerido para muchas funciones normales de la célula. El riñón, a través de las nefronas, es el órgano encargado de ajustar la excreción de K+ en la orina para establecer un balance con el K+ ingerido en la dieta y el K+ circulante en el plasma. Los mecanismos celulares de transporte de K+ a lo largo de la nefrona son: filtración glomerular, reabsorción a lo largo del túbulo proximal y el asa de Henle y secreción y reabsorción en el túbulo colector (TC). El TC se divide en dos regiones principales: cortical y medular; la región medular se subdivide a su vez en externa e interna. Los mecanismos de transporte del K+ en la médula externa son bien conocidos, pero en la región de la médula interna han sido poco estudiados. Recientemente se registraron corrientes salientes de K+ en cultivos celulares primarios del TC de la médula interna (TCMI) mediante la técnica de fijación de voltaje (patch clamp). A partir del RNAm del cultivo celular amplificamos por la técnica de RT-PCR un fragmento de DNAc cuya secuencia permitió identificar a un canal Kv1.3. El objetivo de este trabajo es confirmar mediante técnicas inmunocitoquímicas, la expresión del canal Kv1.3 en los cultivos célulares del TCMI del riñón de rata. Se aplicó la técnica de la inmunoperoxidasa indirecta y se llevó a cabo la inmunofluorescencia indirecta con fluoresceína. Las células fueron contrateñidas con hematoxilina para la inmunoperoxidasa y con yoduro de propidio en el caso de la inmunofluorescencia, con el fin de evidenciar los núcleos. Se apreciaron placas confluentes de las células crecidas en los cubreobjetos, sometidas a la inmunorreacción ( inmunoperoxidasa indirecta ) las cuales presentaron la coloración característica (diaminobenzidina reducida por la peroxidasa). Un 90 % de las células en cultivo reaccionaron positivamente. Resultados similares se obtuvieron por la técnica de inmunofluorescencia indirecta. En conclusión, se demostró por primera vez la presencia del canal Kv 1.3 en el TCMI del riñón de rata. Los Kv1.3 pueden participar en el mantenimiento del potencial de membrana y/o en la recirculación del K+. C-43 C-44 GASTO DE ENERGÍA Y VARIABLES METABÓLICAS DE LA RATA LACTANTE ALIMENTADA CON UNA DIETA MARGINAL EN ENERGÍA Y SU EFECTO EN EL CRECIMIENTO DE LAS CRÍAS. Ayala-Moreno, R* RacottaPoulieff R. ♦, Hernández-Montes, H*, Quevedo-Coro-na, L.*♦. Unidad de Investigación Médica en Nutrición, CMN siglo XXI, IMSS y Departamento de Fisiología de la ENCB, IPN. México, D.F. DESARROLLO DE LA OBESIDAD EN LAS CRÍAS DE RATAS ALIMENTADAS CON UNA DIETA ALTA EN LÍPIDOS DURANTE LA GESTACIÓN Y LACTANCIA. Aranda-Batalla, C.* (avalado por Racotta-Poulieff Radu), Guerrero-Cruz, F.*, RodríguezCruz, M.* y Del Prado-Manríquez M.E.*. Unidad de Investigación Médica en Nutrición, CMN s. XXI, IMSS. México, D.F. La rata madre alimentada con una dieta marginal en energía produce una leche baja en proteínas, pero rica en lípidos, asegurando así un buen aporte de energía a la cría. Para explicar el efecto de esta dieta sobre las adaptaciones metabólicas de la madre y el crecimiento de las crías, se alimentó a ratas vírgenes y lactantes (desde 5 semanas antes del parto), con una de dos dietas: dieta marginal en energía (DM), (3.1 Cal/g) o dieta testigo (DT), (3.8 Cal/g) y se observaron los cambios en tres tiempos del periodo de lactancia (días 2, 14 y 21), así como la ganancia de peso de las crías. Durante la lactancia las ratas DM consumieron más alimento que el grupo DT, pero sin llegar a compensar el aporte calórico por lo que tuvieron un peso promedio menor. La lactancia produjo en las ratas DT un aumento en el gasto de energía en reposo (GER), medido en ayuno desde el día 14 hasta el final del estudio. Las ratas DM mostraron un ahorro de energía, debido a que su GER sólo estuvo elevado el día 14. El cociente respiratorio (CR), en ayuno de las ratas DM en los días 2 y 14 de lactancia sugiere una alta producción de cuerpos cetónicos (CC) que no son oxidados (CR<0.7 y presencia de CC en orina), mientras que las ratas DT muestran este comportamiento sólo al inicio de la lactancia (día 2). Los cambios en el CR de estos animales sugieren una modificación importante en el metabolismo de lípidos que favorece la participación de los CC como sustrato energético durante la lactancia. El ahorro de energía y los cambios en el CR de las ratas lactantes DM favorecieron la producción de una leche rica en lípidos, sin embargo, el peso de sus crías disminuyó a partir del día 9 de la lactancia y se acentuó para el día 14, probablemente por el bajo aporte de proteínas de la leche. ♦ R.R. Y Q-C L son miembros de DEDICT-COFAA, IPN. Durante el período prenatal y postnatal, las modificaciones en la dieta pueden favorecer el desarrollo de obesidad en la edad adulta, por lo que nos propusimos evaluar el efecto del consumo de una dieta alta en lípidos por la madre durante el embarazo y la lactancia sobre el desarrollo de obesidad en la cría. Utilizamos ratas Sprague-Dawley embarazadas que recibieron una dieta con 4% (NL) o con 20% de lípidos (AL) hasta el día 21 de lactancia (destete). Las crías recibieron al destete la misma dieta que su madre (NL/NL o AL/AL), o la del otro grupo de alimentación (NL/AL o AL/NL) hasta los 80 días de edad. Al día 14 de edad se cuantificó la composición de leche. En los días 21 y 80 de edad se cuantificó la composición corporal de las crías, la lipogénesis en el hígado y tejido adiposo y la oxidación e incorporación de 14C-trioleina en los tejidos de las ratas. No encontramos diferencias en la composición de la leche, en el crecimiento de las crías, composición corporal, incorporación y oxidación de 14C-trioleina a los 21 días de edad entre los dos grupos. La lipogénesis fue menor en hígado y tejido adiposo en las ratas que recibieron la dieta AL, al día 21 y 80 de edad. La oxidación de 14 C-trioleina fue mayor en las ratas AL/AL y NL/AL. En base a estos resultados concluimos que las crías de las ratas con una dieta con el 20% de lípidos no desarrollaron obesidad durante las dos primeras semanas de vida. La síntesis de lípidos en hígado y tejido adiposo disminuye al aumentar el contenido de lípidos en la dieta. La oxidación de trioleina 14C es mayor en las ratas que consumen la dieta alta en lípidos en el período posterior al destete lo que podría contribuir a que estos animales no desarrollaran obesidad. C-45 C-46 EFFECT OF GLUCOSE AND FATTY ACID AVAILABILITY ON NEONATAL AND ADULT RAT HEARTS CONTRACTILITY AND ON CARDIOMYOCYTE GLUCOSE UPTAKE. Carbó R.*, Contreras K.* y Guarner V. Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez”, S.S.A., México D.F. EFECTO DE LA RESERPINA SOBRE LAS CONCENTRACIONES DE ADRENALINA Y NORADRENALINA EN ALGUNOS ÓRGANOS ESPLÁCNICOS. Martínez-Olivares, R.,* Villanueva, I.,* Piñón, M. y Racotta, R. Depto. de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México, D.F. Substrate availability is of fundamental biological importance and both increased and reduced calorie intakes have profound effects on cellular homeostasis. Adult heart metabolism switches from fatty acid to glucose-dependent during ischaemia and changes in the presence of substrates might be associated with variations in the mechanical activity of the heart. In contrast, fetal hearts are anaerobic to a certain extent and glucose dependent. Changes in heart contractility and glucose uptake in cardiomyocytes of newborn and adult rats, with different substrates during oxygenation and hypoxia were studied. Under oxygenation, insulin (50 mU/l) and a low dose of fatty acid (sodium palmitate 0.12 mM) increased the differential ventricular pressure (DVP), while higher doses of fatty acids (from 0.3 to 1.5 mM) decreased it. When the low dose of fatty acid and insulin were added simultaneously, tension development decreased. Hypoxia reduced DVP and low dose of fatty acid restored cardiac force. The contractile response to extracellular glucose concentrations changed during development and sensitivity to high doses of fatty acids increased with age. In adult cardiomyocytes, glucose uptake was also inhibited by sodium palmitate during oxygenation when cardiac metabolism is fatty acid dependent, but not during hypoxia, when it consumed carbohydrates. Newborn cardiomyocytes consumed more glucose than adult cells, they did not respond to insulin, and palmitate did not completely inhibited glucose uptake in oxygenation and hypoxia. Substrate availability modifies glucose uptake and contractility by independent mechanisms. La administración de catecolaminas (CA) produce hipofagia sólo por vía intraperitoneal (ip), lo que sugiere la participación de las CA endógenas y la región porto-hepática en el control de la ingestión de alimento. Son muchas las posibles fuentes de CA esplácnicas para el hígado. La Reserpina (R) es capaz de disminuir las concentraciones de CA en cualquier tipo de célula que las contenga. En este sentido decidimos probar dos protocolos de administración para lograr un mejor efecto depletor de CA esplácnicas. Ratas machos Wistar (peso promedio 372 ±8 g) se separaron en tres lotes, a los que se les administró, vehículo (Dimetilsulfoxido), R (4 mg/kg en dos dosis, una cada 24 h) ip o subcutáneo (sc). Concluido el tratamiento se midieron las concentraciones de ADR y NADR en glándula suprarrenal (SR), hígado y vena porta (VP), al día 1, 4 y 10 después de la última dosis. La R ip o sc tuvo el mismo efecto depletor al día posterior al tratamiento (P<0.05). Al cuarto día las concentraciones de NADR y ADR en la glándula suprarrenal regresaron a los valores controles. Cuatro días después del tratamiento, los niveles de NADR en hígado y VP se mantuvieron significativamente por debajo de los controles. La administración sc tuvo mayor efecto (sc vs. ip, P<0.05) aún al décimo día (P<0.05). Los resultados muestran que: 1) la simpatectomía con R es más efectiva por vía sc, 2) la vena porta podría ser una fuente específica de CA para el hígado. C-47 C-48 EVALUACIÓN DE ALGUNOS ÓRGANOS Y METABOLITOS BAJO CONDICIONES DE AYUNO Y SACIEDAD EN RATAS REHABILITADAS. Miñana-Solis, M.C.*, Parra-Gámez, L*, Escobar-Briones C. Departamento de Anatomía, Facultad de Medicina. U.N.A.M. EFECTO DE LA DIETA EN LA RESPUESTA OSMORREGULATORIA DE POSTLARVAS DE CAMARÓN (Litopenaeus vannamei). Palacios E.* (avalado por Zenteno Tania), Bonilla, M.A.*, Racotta, I.S.* Programa de Acuicultura, Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, México. La desnutrición prenatal y/o postnatal, modifica el desarrollo morfológico, la funcionalidad y el metabolismo del individuo y puede repercutir en disfunciones en la vida adulta tales como la resistencia a la insulina, intolerancia a la glucosa y obesidad. La rehabilitación nutricional al destete puede revertir los efectos de la desnutrición permitiendo al individuo reajustar sus límites de respuesta metabólica. Nuestro objetivo es determinar si la rehabilitación nutricional al destete promueve un reajuste en los valores de regulación metabólica establecidos durante la desnutrición. Se desnutrieron ratas Wistar con una dieta hipoproteínica (6% caseína) pre y postnatalmente y rehabilitadas al destete (25 días) con una dieta chow (23% de caseína). El grupo control fue alimentado con una dieta chow. A los 90 dìas de edad las ratas (n=72) se dividieron en tres grupos: uno de libre acceso al alimento, otro de ayuno 48 horas previas al sacrificio y otro de saciedad posterior al ayuno. Se sacrificaron por decapitación; se obtuvo el suero y se pesaron los siguientes órganos: hígado, estómago, grasa retroperitoneal y grasa gonádica. Se determinó la concentración de glucosa, glucógeno y ácidos grasos. El grupo rehabilitado presentó valores similares al control tanto en los órganos como en las concentraciones de los metabolitos. La rehabilitación a edades tempranas del desarrollo ofrece la posibilidad al individuo de modificar los parámetros metabólicos y funcionales establecidos en una desnutrición temprana. DGAPA-UNAM IN-204800; CONACYT 33033-N. El desarrollo de los mecanismos de osmorregulación en las postlarvas (PL) de camarones peneidos permiten su migración desde altamar a los esteros costeros. La supervivencia a salinidades bajas constituye un indicador de calidad de PL para determinar cuáles serán utilizadas en la engorda comercial. En organismos hiperreguladores la captación de iones depende del transporte activo de iones por la bomba de Na/K localizada en las branquias. La dieta tiene influencia en la supervivencia a baja salinidad, pero se desconoce si esta influencia tiene que ver con los mecanismos de osmorregulación. El presente trabajo analiza dos modelos de condiciones alimentación (suplementación con ácidos grasos poliinstaurados, PUFA, y ayuno) sobre la actividad de la bomba Na/K y de la anhidrasa carbónica en branquias anteriores y posteriores a una salinidad de 10 ppm, la supervivencia a una salinidad de 0 ppm, y la composición bioquímica. La actividad de la bomba Na/K fue 5 veces mayor en branquias posteriores que en anteriores e incremento 63% en respuesta a la exposición a 10 ppm tanto en branquias anteriores como en posteriores. Se observó también un ligero aumento en la actividad de anhidrasa carbónica de organismos sometidos a baja salinidad. La condición de ayuno no modificó estas respuestas, aunque las PL ayunadas tuvieron una menor supervivencia que las alimentadas al ser expuestas a una salinidad de 0 ppm. Esto indica que la menor supervivencia de organismos ayunados no puede ser explicada únicamente por una baja capacidad osmorreguladora. En un segundo experimento, se comparó la influencia de tres niveles de PUFA (0, 30 y 50%) en el alimento de las PL. Se observó una mayor supervivencia a baja salinidad con la emulsión de 50% en PL de 10 días y con la de 30% en PL de 20 días. Sin embargo, en este caso tampoco se encontró una relación directa entre la influencia de la dieta sobre supervivencia y capacidad osmorreguladora. Trabajo parcialmente financiado por el Programa CGPI 32.13, R. Racotta y M. Piñón son becarios de DEDICT-COFAA, IPN; R. Martinez Olivares es becario CONACyT 165272. C-49 C-50 EFECTOS METABOLICOS DE LA EXPOSICIÓN A HIPOXIA EN EL CAMARÓN BLANCO Litopenaeus vannamei. Racotta, I.S.* (avalado por Zenteno Tania), Palacios E.*, Méndez, L.*, Programa de Acuicultura, CIBNOR, México. ANÁLISIS DE MARCADORES POLIMÓRFICOS EN LA REGIÓN CERCANA AL GEN DEL RECEPTOR α7 NICOTÍNICO (CHRNA7) EN PARES DE HERMANOS ESQUIZOFRÉNICOS. Medellín, M.A.* (avalado por Rocha Arrieta, Luisa), Fresán, A.*, García, M.*, Apiquián, R.*, Nicolini, H.* y Cruz, C.* Subdirección de Investigaciones Clínicas, Instituto Nacional de Psiquiatría, México, D.F. La disponibilidad de oxígeno en el agua tiene un efecto directo sobre el metabolismo de animales acuáticos. A partir de cierto nivel de oxígeno disuelto (punto crítico) existe una disminución en el consumo de oxígeno de los organismos que es compensada en mayor o menor medida por un incremento en el metabolismo anaerobio. Los camarones peneidos se consideran organismos poco adaptados a condiciones de hipoxia aunque el oxígeno disuelto disminuye frecuentemente en condiciones de cultivo. Por lo anterior, en el presente trabajo se analizó la respuesta fisiológica del camarón a condiciones de hipoxia en términos de metabolismo anaerobio y capacidad acarreadora de oxígeno. Se trabajó con tres grupos de camarones: grupo control (6 mg/Lt), condiciones de hipoxia por tres días (2 mg/Lt) y condiciones de hipoxia por dos semanas (2.6 mg/Lt). Los niveles de glucosa y lactato en hemolinfa fueron mayores en ambas condiciones de hipoxia, indicando una activación de rutas metabólicas anaerobias aun durante la exposición a largo plazo. En el músculo no se observaron diferencia en los niveles de glucosa y lactato entre el grupo control y los dos grupos expuestos a hipoxia. Los niveles de hemocianina y cobre en hemolinfa fueron mayores en el grupo sometido a largo plazo a condiciones de hipoxia, indicando que el incremento en la capacidad acarreadora de oxígeno es observada sólo bajo condiciones de hipoxia sostenida. Los niveles de cobre en el hepatopancreas fueron menores en ambas condiciones de hipoxia sugiriendo una movilización de las reservas de cobre para la síntesis de hemocianina. Se concluye que el camarón blanco es capaz de tolerar condiciones de hipoxia moderada, frecuentes en condiciones de cultivo, gracias a un incremento en el metabolismo anaerobio y en la capacidad acarreadora de oxígeno en la hemolinfa. Estas adaptaciones implican que se requiere un aporte dietético adecuado de proteínas y cobre para la síntesis de hemocianina y de carbohidratos para sostener el metabolismo anaerobio. Se ha sugerido que las alucinaciones, delirios, disminución en la eficiencia del aprendizaje y sobreestimulación de la me moria asociativa características de la esquizofrenia, pueden ser resultado de una disminución en la capacidad del paciente para filtrar estímulos ambientales poco relevantes. Recientemente, mediante un estudio de enlace génico (linkage), se identificó a la región cercana al gen CHRNA7 (cromosoma 15q14) como la posible responsable de la alteración del potencial evocado P50 auditivo en pacientes esquizofrénicos. Se propone que dicha alteración representa un marcador EEG de deficiencias en el filtrado sensorial. Sin embargo, también se reportaron importantes diferencias en los valores de enlace génico con respecto al grupo étnico. El objetivo de este reporte fue establecer si los marcadores genéticos en esta región son informativos en la población mexicana. Se incluyeron 16 familias con al menos dos hermanos con diagnóstico de esquizofrenia y dos familiares sanos dispuestos a participar (n=64 sujetos). Se extrajo el DNA genómico a partir de sangre periférica y se tipificaron tres marcadores cercanos al gen CHRNA7: D15S165, D15S1360 y D15S144. Los tres resultaron altamente polimórficos (sistemas de 12, 5 y 9 alelos respectivamente), con una distribución normal y altos índices de heterocigocidad (75%, 71% y 66% respectivamente). Por lo tanto, dichos marcadores son informativos en la población mexicana y pueden ser utilizados en el análisis de enlace génico entre el potencial evocado P50, la esquizofrenia y el locus del gen CHRNA7. C-51 C-52 ESTABILIDAD DE LA POTENCIA ABSOLUTA DE 9 REGISTROS MENSUALES REPETIDOS. Galindo-Vilchis, L.*1 Ramos-Loyo, J2., Arce, C.3*, del Río-Portilla, Y.*1, y Corsi-Cabrera, M.1 1Laboratorio de Sueño, Facultad de Psicología, UNAM. 2Inst de Neurociencias U de Guadalajara, Jal. 3ENP, UNAM, México. ALGORITMO PARA CALCULAR LA DENSIDAD DE COHERENCIA DE LA ACTIVIDAD ELÉCTRICA CEREBRAL EN HUMANOS. Gutiérrez, M.*1, Méndez, I. *2, Diez-Martínez, O.1 y Manjarrez, E.*2. 1Departamento de Psicología, UDLA, Cholula, Puebla, México e 2Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Puebla, México. La investigación de procesos cognoscitivos, la evaluación de terapias o la evolución de procesos normales y anormales utilizan frecuentemente el análisis cuantitativo del EEG de medidas repetidas de un mismo individuo. La demostración objetiva de la estabilidad de estos parámetros en individuos sanos es, por lo tanto, muy importante tanto para la clínica como para la investigación. El propósito de este trabajo es demostrar la estabilidad/confiabilidad individual y de grupo de la potencia absoluta (PA) del EEG. Se registraron 9 sesiones, una por mes, de EEG (F3, F4, C3, C4, T3, T4, P3, P4, O1, O2) en reposo con ojos abiertos (OA) y cerrados (OC) de 6 mujeres diestras voluntarias entre 18 y 29 años de edad con ciclos menstruales regulares. La estabilidad para cada sujeto se evaluó con la correlación múltiple de todos los parámetros EEG entre las 9 sesiones. Los coeficientes de correlación variaron entre .95 y .97 indicando un alto grado de estabilidad para cada sujeto. No hubo diferencias significativas entre sesiones (ANOVAs) como sería esperarse si las variaciones se deben al azar, excepto por algunas diferencias aisladas. La estabilidad fue mayor con OC que con OA y para delta, alfa1 y alfa2 que para theta, beta1 y beta2. La dispersión (coeficiente de variación DS/media) mostró menor variabilidad para delta y theta en central y parietal (CV < .10) y para beta1 y beta2 en central, parietal y occipital con OC. La mayor variabilidad se observó en alfa 1 y alfa2 con un gradiente anteroposterior (CV de .20 a .40). La potencia absoluta es estable y confiable en adultos jóvenes por lo menos durante 9 meses. La función de coherencia, es comúnmente usada para cuantificar el acoplamiento funcional entre áreas corticales. Esta función depende de la frecuencia f, y se define como el cociente del cuadrado de la potencia espectral cruzada de dos señales, entre el producto de los espectros de potencia de cada señal. La función de coherencia es una medida acotada entre 0 y 1, donde un valor de 1 a la frecuencia f, indica una perfecta relación lineal entre las dos señales a dicha frecuencia. Sin embargo, hay una gran limitación práctica en el uso de esta función en el análisis de la coherencia entre registros electroencefalográficos (EEG). La limitación consiste en que sólo se puede obtener una función de coherencia para cada par de regiones registradas. Esto implica que, para cuantificar las coherencias entre 20 señales del EEG (por ejemplo, en el sistema 10-20), se necesitarían al menos 190 gráficas de la coherencia en función de la frecuencia. Por esta razón, presentamos un algoritmo sencillo que permite cuantificar, para cada área de registro del EEG, una “densidad de coherencia”. Definimos la densidad de coherencia como la integral de la suma de las funciones de coherencia obtenidas para cada par de señales del EEG, dividida entre el número de áreas de registro. La integral puede ser calculada para todas las frecuencias del EEG o, selectivamente, para cada una de las bandas de frecuencias (δ, θ, α, β, γ, etc.). Nuestros resultados preliminares indican que este algoritmo puede ser usado para determinar la coherencia entre regiones cerebrales durante la realización de diversas tareas cognoscitivas. C-53 EFECTO DEL EEG PAROXÍSTICO EN LOS POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) EN NIÑOS. G. Yánez*, J. Bernal*, M. Rodríguez*, , E. Marosi, V. Guerrero*, B. Prieto*, L. Luviano*. FES Iztacala, UNAM.Apoyado por DGAPA UNAM IN304399. Los niños con trastornos de aprendizaje (TA) presentan frecuentemente actividad paroxística en el EEG de base y aunque en menor proporción, también se observan paroxismos en el EEG de los niños con rendimiento escolar normal. Asimismo, se ha reportado que respecto a los niños normales, los niños con TA presentan diferencias marcadas en la amplitud y latencia de los componentes de los PRE tales como N100, P200, P300, y N400. Sin embargo, aún no se conocen las posibles relaciones existentes entre el EEG registrado en reposo y los PRE. Se estudió la N400 fonológica en niños con y sin actividad paroxística en el EEG de base, con el objetivo de establecer si los componentes de los PRE se modifican en función de la existencia de estos paroxismos en el EEG registrado en reposo. De un grupo de 69 niños (39 TA y 30 normales) se seleccionaron 3 niños con TA y 3 normales con EEG con actividad paroxística así como 3 TA y 3 normales con EEG normal. En sesiones separadas, a ambos grupos se les registró el EEG en reposo y posteriormente la N400 fonológica durante una tarea de rima en 19 derivaciones del sistema internacional 10/20. Se observó que los niños con paroxismos presentaron una amplitud significativamente mayor en los componentes N100, P200, y N400, en las derivaciones centrales y en menor grado en la regiones frontales y parietales, en coincidencia con las regiones en donde se presentaron los paroxismos. Estos resultados muestran que la actividad paroxística de base parece afectar la amplitud de los componentes de los PRE, por lo que es recomendable tomar en consideración este factor, al comparar estos componentes entre grupos de niños provenientes de distintas poblaciones. C-54 ESTUDIO DE LOS POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) DURANTE UNA TAREA DE EJECUCIÓN CONTINUA (TEC) EN NIÑOS. J. Bernal*, M. Rodríguez*, G. Yánez*, E. Marosi, V. Guerrero*, B. Prieto*, L. Luviano*. Proyecto de Neurociencias, FES Iztacala, UNAM. Apoyado por DGAPA.UNAM: IN304399 La TEC comprende secuencias de diferentes clases de estímulos, por ejemplo, estímulo blanco, no blanco y señal, cada uno de los cuales esta involucrado con procesos cognoscitivos particulares (detección de estímulos, inhibición de la respuesta, alerta miento, etc.) Por lo tanto, el registro de los PRE durante la ejecución de una TEC proporciona una metodología útil para el estudio de dichos procesos cognoscitivos (Tekok-Kilic et al. 2001). Se estudiaron los PRE durante una TEC visual en un grupo de 17 niños normales de 8-12 años de edad. Se registraron 19 derivaciones (S.I. 10/20). Los estímulos fueron 600 flechas apuntando a 8 direcciones. La probabilidad del estímulo blanco fue de 10%. La tarea del niño fue presionar el botón izquierdo del ratón ante la presencia del estímulo blanco. Los resultados mostraron que la amplitud de P300 a los estímulos blanco fue más grande que en cualquier otro tipo de estímulo, seguida por la obtenida a los no blanco. La distribución topográfica de P300 al estímulo blanco y al estímulo no blanco fue parieto-central. Con relación a la amplitud de P300, los resultados son similares a los obtenidos en sujetos adultos. Sin embargo, en el caso de la topografía de P300 se ha reportado que en los adultos los PRE a los estímulos blanco tienen una distribución parieto-central mientras que para los no blanco la distribución es centro-frontal, lo cual difiere notablemente de lo obtenido en el caso de los niños, en quienes se observó una distribución topográfica parieto-central en ambos tipos de estímulo. Lo anterior permite suponer que en los niños el sistema neuronal responsable de la generación de P300, en ambas condiciones de estímulo, aún no se ha diferenciado. C-55 C-56 CARACTERIZACIÓN DEL COMPONENTE P600/SPS EN NIÑOS NORMALES Y CON TRASTORNOS DE LA LECTURA (TL) Prieto-Corona, B.*, Rodríguez, M.*, Yáñez, G.*, Bernal, J.*, Marosi, E., Guerrero, V.*, Luviano, L.* Neurociencias. FES-Iztacala. UNAM. México. Apoyado por DGAPA. UNAM. IN304399 DIFERENCIAS EN LA INTEGRACIÓN LÉXICA ENTRE NIÑOS LECTORES NORMALES (NLN) Y NIÑOS CON TRASTORNOS EN LA LECTURA (NTL): ESTUDIO CON POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS (PRE) Rodríguez, M.*, Bernal, J.*, Prieto, B.*, Marosi, E., Yánez, G.*, Luviano,L.*, Reyes,A.* Neurociencias.FES-Iztacala. UNAM. México. Apoyado por DGAPA. UNAM. IN304399. Diferentes estudios han reportado un componente de los PRE relacionado con la lectura de anomalías sintácticas encontradas en oraciones. Este componente llamado P600/SPS parece reflejar un reanálisis sintáctico que intenta rescatar el significado de la oración, una vez que se ha encontrado una violación sintáctica. El objetivo de este estudio fue caracterizar la P600/SPS en dos grupos de niños: TL en los que se ha reportado en medidas conductuales, déficits sintácticos, y en lectores normales (LN). Se estudiaron 40 niños de 8 a 12 años (CI>85) clasificados en dos grupos de acuerdo a las puntuaciones obtenidas en dos baterías en español (TALE y BNTAL). Los niños leyeron 100 oraciones (la mitad contenían una anomalía sintáctica -violación de concordancia sujeto-verbo- y la otra mitad no) e hicieron juicios de gramaticalidad. Los PRE se registraron en 19 derivaciones del S.I.10-20. En los niños LN, se observó un cambio positivo con inicio de latencia aproximada de 590ms con distribución centro-parietal para ambos tipos de oraciones; para las oraciones no gramaticales esta positividad fue un poco mayor en amplitud en el rango de latencia de 700 a 1000ms. En contraste, los niños con TL mostraron respuestas similares para ambos tipos de oraciones. En la comparación entre grupos, se observó una P600/SPS de mayor amplitud para los niños LN comparados con los niños con TL. Se concluye que la P600/SPS en los niños, muestra algunas características diferentes a las reportadas para los adultos, principalmente en la latencia en la cual se hace el reanálisis sintáctico, lo que puede deberse a la menor experiencia lectora de los niños. Sin embargo, los niños con TL no mostraron diferencias en el reanálisis sintáctico entre ambos tipos de oraciones, lo que puede reflejar un pobre análisis sintáctico en este grupo. Aunque hay evidencia conductual que muestra deficiencias en la comprensión de la lectura en NTL, los estudios que muestran alteraciones electrofisiológicas de éstos déficits son escasos. Este estudio explora las diferencias entre los NLN y los NTL en el proceso de integración léxica usando el componente N400 como un índice electrofisiológico de este proceso, en tres tipos de oraciones con diferente grado de expectancia semántica: congruentes, incongruentes directas (ID) e incongruentes circunstanciales (IC). Se estudiaron 21 niños de 9 a 12 años (CI>85), clasificados como NLN (N=10) y NTL (N=11), de acuerdo a dos baterías en español: una de lectura (TALE) y otra neuropsicológica (BNTAL). Se registraron los PRE en 19 derivaciones. Los niños leyeron un total de 280 oraciones divididas en: 140 congruentes y 140 incongruentes (70 fueron ID –p.e. “Yo como escuelas”- y las otras 70 IC –p.e. “Yo como pan con escuelas”). En los NLN se observó un claro efecto N400 para ambos tipos de incongruencias, mientras que en los NTL se observó sólo un discreto efecto N400, mayor para las oraciones ID que para las IC. En la comparación entre grupos, los NLN mostraron una N400 de mayor amplitud que los NTL principalmente para las oraciones ID y en un menor grado para las IC, con mínimas diferencias para las oraciones congruentes. En relación con los NLN, los NTL presentaron un efecto N400 atenuado que sugiere una falla para utilizar el contexto. A diferencia de los NLN, los NTL muestran una integración léxica diferente para los dos tipos de incongruencias, que contrariamente a lo esperado fue mayor para las IC que para las ID, lo que podría indicar sutiles fallas de integración léxica y con ello de comprensión en la lectura. C-57 C-58 LA SOLA EXPOSICIÓN A DÍAS LARGOS ESTIMULA Y MANTIENE ELEVADAS LAS CONCENTRACIONES PLASMÁTICAS DE TESTOSTERONA EN LOS MACHOS CABRÍOS. Flores, J.A.(1,2)* (avalado por Delgadillo J.A.), Hernández, H.* (2), Martínez de la Escalera, G. (2), Poindron, P. (2). Delgadillo, J.A.(1) (1) UAAAN AP 940, Torreón, Coahuila. (2) CNB-UNAM AP 1-1141, Querétaro, Qro, 76001. EFECTO DE LA 5β,3α-PREGNANOLONA (PGL) Y UN ANALOGO DEL GABA (THIP), SOBRE LA EXCITABILIDAD NEURONAL Y LA DIFERENCIACION SEXUAL CEREBRAL EN RATAS NEONATAS. Lima-Hernández, F.J.* y Beyer C. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. En este estudio se investigó si la sola exposición a días largos estimula la secreción de testosterona durante la primavera en los machos cabríos criollos. Un grupo de machos (control; n=8) percibió las variaciones naturales del fotoperiodo (20oN). Otro grupo (DL+M; n=8) fue sometido a días largos artificiales (16 horas de luz/día) durante 2.5 meses a partir del 1º de noviembre, seguidos de la aplicación subcutánea de 2 implantes de melatonina (36 mg). El tercer grupo (DL; n=8) fue sometido a días largos artificiales del 1 de noviembre al 10 de junio. Se evaluaron las concentraciones plasmáticas de testosterona mediante un muestreo sanguíneo semanal. En los tres grupos, la secreción de testosterona fue afectada por el tiempo del experimento (P<0.001) y se registró una interacción grupo*tiempo (P<0.001). En el grupo control, los niveles de testosterona fueron bajos de noviembre a marzo (3.1 ± 0.5 ng/ml; promedio ± SEM), incrementándose ligeramente entre abril y mayo (7.4 ± 0.9 ng/ml), época que inicia el periodo natural de actividad sexual. En el grupo DL+M, las concentraciones de testosterona fueron bajas de noviembre a febrero (2.7 ± 1.4 ng/ml). En marzo se incrementaron las concentraciones de esta hormona alcanzando los valores más altos el 3 de este mes (28.2 ± 2.7 ng/ml). Posteriormente, la testosterona disminuyó paulatinamente durante abril y se mantuvo durante el resto del estudio en concentraciones promedio de 4.0 ± 0.6 ng/ml. En el grupo DL, los niveles de testosterona fueron bajos de noviembre a febrero (4.1 ± 1.9 ng/ml). Posteriormente esta hormona se incrementó a partir de marzo alcanzando la concentración más alta el 20 de abril (19.1 ± 4.0 ng/ml) y a diferencia del grupo DL+M, estas concentraciones se mantuvieron elevadas (12.7 ± 1.5 ng/ml) hasta el final del estudio (junio). Se concluye que la exposición a días largos estimula y mantiene elevadas las concentraciones plasmáticas de testosterona en los machos cabríos criollos durante la primavera. El GABA es un neurotransmisor inhibitorio en el cerebro adulto, mientras que en el animal neonato su efecto es excitatorio. Estos efectos son mediados por el receptor GABA-A. Se ha propuesto que la virilización (defeminización) resulta de un aumento en la actividad neuronal de algunas regiones cerebrales mediada por el GABA. Nos interesó conocer si el THIP y la PGL provocan cambios en la excitabilidad neuronal en ratas neonatas, que tuvieran impacto en la diferenciación sexual. A ratas neonatas de 4,10 ó 19 días, se les administró PGL en 10µl de propilenglicol por vía intracardiaca (ic), con las siguientes dosis: en el día 4; 10 hasta 2000 ng/gr ; día 10; 4.1 hasta 833 ng/gr; día 19, 1.4 hasta 285 ng/gr . En el día 4 para el THIP [10µl de sol. salina (ic)], se emplearon las dosis: 200 hasta 4000 ng/gr ; día 10, 333 hasta 2000 ng/gr; día 19; 142 hasta1771 ng/gr, y se evaluaron las dosis anestésicas en ambos compuestos. Se registraron las variables: sacudida del cuerpo (SC), movimiento lateral (ML), arrastrar y caminar. Se evaluó la apertura vaginal (AV), la distancia ano-genital (DAG) y el ciclo estral (CE). Los resultados indican que en el día 4, la PGL incrementó la frecuencia de la SC con las dosis de 200, 1000 y 2000 ng/gr (9.3±3.6; 9.8±2.9; 10±2.4 respectivamente), comparada contra el grupo control (2.9±0.7; P<0.05). Lo mismo sucedió a los 10 días con 833 ng/gr (8.0±0.3 vs control 0.6±0.3; P<0.05). El THIP tuvo resultados similares a la PGL, ya que a los 4 días aumentó la frecuencia de la SC, con la dosis de 1000 ng/gr (15.1±2.5 vs. el control 0.7±0.4; P<0.001), y a los 10 días con dosis de 1666, 2083 y 2500 ng/gr (5.5±1.5; 15.9±2.67; 9.2±.9 respectivamente vs. el control 0.20±0.13; P<0.007). Las dosis anestésicas de PGL para los días 4, 10 ó 19 fueron de 4000, 3333 ó 1142 ng/gr, y para THIP de 16000, 6666 ó 6857 ng/gr. Los resultados muestran un efecto activador cerebral de la PGL y del THIP en los días 4 y 10, que podría estar relacionado con un aumento en la excitabilidad neuronal mediado por el receptor GABA-A, el cual no se presenta en el día 19, debido a que en esta edad es inhibitorio. Sin presentar cambios conductuales en la edad adulta, probablemente por las dosis bajas empleadas. La depresión y anestesia inducidas en animales en etapa excitatoria al GABA, indican una acción por otros mecanismos independientes al GABA. C-59 C-60 EFECTO DE LAS PROGESTINAS EN LA PREFERENCIA DE LUGAR CONDICIONADA Y LA COPULA REGULADA EN RATAS HEMBRA. Camacho F.J1.*, González O2., Domínguez E1. , Ramírez J.M2. , Beyer C2. y Paredes R.G1. 1Instituto de Neurobiología - UNAM. Querétaro. 2CIRA. CINVESTAV - UAT. Tlaxcala. ANÁLISIS DE LA ORGANIZACIÓN DE LA CONDUCTA SEXUAL MASCULINA EN LAS SUBLÍNEAS DE RATAS LY Y HY DE LA CEPA Sprague-Dawley. Romero-Carbente, J.C.*, Moyaho, A.* y Eguibar, J.R. Instituto de Fisiología B.U.A.P. Apdo. Postal 406, Puebla, Pue. México. La administración secuencial de estradiol (E) y progesterona (P) incrementan los niveles de receptividad (definida por la postura estereotípica de lordosis) y proceptividad (carreras, saltos, movimiento de orejas, aproximación y alejamiento del macho). Además, el tratamiento de E y P en hembras ovariectomizadas (OVX) induce preferencia de lugar condicionada cuando las hembras tienen la oportunidad de regular la cópula. En el presente estudio se evaluó el uso de la P y sus metabolitos reducidos; 5α–pregnandiona ( α-DHP), 3α–pregnanolona (5β ,3α –Pgl) y una progestina sintética; el acetato de megestrol (AM) en la participación del estado reforzante inducido en la hembra por la cópula regulada. Las hembras fueron OVX y canuladas en la vena yugular izquierda. Se les suministró 5µg de benzoato de estradiol (0.1 ml, s.c.), 40 horas antes de la administración de las progestinas (120 µl, i.v.), que fueron inyectadas 4 horas antes de la prueba de apareamiento. Los resultados muestran que todas las progestinas inducen los mismos niveles e intensidad de lordosis y tienen efectos similares en los parámetros de cópula regulada. La administración endógena de P, AM y progestinas reducidas inducen condicionamiento de preferencia de lugar después de la cópula regulada, sugiriendo que las progestinas poseen efectos positivos en el estado reforzante inducido por la hembra en la regulación y control de sus contactos sexuales. Apoyado por CONACYT 28039N y DGAPA IN228199. En el Instituto contamos con dos sublíneas de ratas de la cepa Sprague-Dawley que difieren en su frecuencia de bostezo espontáneo. Las ratas de alto bostezo o High Yawning (HY) tienen una frecuencia de 20 bostezos/hora (b/h); mientras que la denominada de bajo bostezo o Low Yawning (LY) tiene una frecuencia promedio de 2 b/h. La conducta de aseo es una pauta conductual organizada en una progresión céfalo-caudal. Las ratas HY muestran una organización del aseo con preferencias por los componentes caudales. Se ha mostrado que el aseo es coordinado por el núcleo estriado, éste también organiza la pauta motora característica de la conducta sexual masculina (CSM). Tomando en consideración que el aseo en las ratas HY está organizada de manera distinta a la mostrada por las LY, en éste estudio planteamos analizar la organización de la CSM en las ratas HY. Consideramos que las ratas HY organizan de manera distinta la CSM en comparación con las ratas LY. Con el fin de probar esta hipótesis analizamos la organización de la CSM de las 2 sublíneas mediante los intervalos entre intromisiones (IEI) y el número de ráfagas (NR) de montas con o sin intromisión. Los animales empleados variaron entre 2.5 y 3.5 meses de edad al inicio del experimento. Analizamos una serie eyaculatoria en 4 sesiones con intervalos de 72 hrs. En las ratas HY la duración del IEI fue en promedio de 71±13 y de 47±6 seg para las LY, lo cual fue estadísticamente diferente (F(1,17)=5.72; p<0.05). Las HY muestran en promedio 22±2 NR, mientras que en las LY fue de 13±1; tal diferencia fue estadísticamente significativa F(1,17)=4.80; p<0.05). Otras conductas como el aseo genital, el cuerpo y la exploración de los genitales de la hembra, no presentaron diferencias significativas entre las sublíneas. Estos resultados confirman que la conducta copulatoria de las ratas HY difiere de la mostrada por las ratas LY. Parcialmente financiado por CONACyT 31758-N. VPPII-BUAP 2002. VIEPII76G01 a JRE. JCRC ex becario del CONACyT No. 153836 y VD-BUAP. C-61 C-62 UN AMAMANTAMIENTO AL DIA ACTIVA C- FOS EN AREAS ESPECIFICAS DEL CEREBRO ANTERIOR DE LA CONEJA: EFECTO DE REDUCIR EL INTERVALO ENTRE LOS AMAMANTAMIENTOS. Jiménez, A.* , Beyer, C. y GonzálezMariscal, G. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV-UAT. Tlaxcala, México. EFECTO DE LA PRESENCIA TEMPRANA DE LOS HERMANOS EN LAS RESPUESTAS FISIOLÓGICAS Y CONDUCTUALES A RETOS AMBIENTALES DE GAZAPOS AL DESTETE. Amando Bautista∗, Leticia Nicolás∗, Robyn Hudson y Margarita Martínez-Gómez. Posgrado en Neuroetología-UV; Centro de Investigaciones Fisiológicas-UAT; Instituto de Investigaciones Biomédicas-UNAM La coneja amamanta una vez al día durante 3 minutos, con una periodicidad circádica. Para investigar las áreas cerebrales que pueden regular la conducta maternal y el reflejo de eyección de la leche, cuantificamos en el día 7 de lactancia el número de células inmunorreactivas (IR) a C-FOS en (a) conejas a las que se les coloca su camada a la hora usual de amamantamiento y (b) conejas a las que no se les coloca su camada ese día. Ambos grupos fueron perfundidos una hora después y los cerebros preparados para inmunocitoquímica. Se encontraron significativamente más células IR a C-FOS en el grupo (a) que en el (b) en: el septum lateral (316±78 vs 82±22 media ±se), el núcleo paraventricular (398±36 vs 141±40), el núcleo supraóptico (208±42 vs 57±17), y el núcleo del lecho de la estria terminalis (BNST; 344±58 vs 151±51). No se observaron diferencias entre ambos grupos en el núcleo hipotalámico ventromedial, el área preóptica, la habénula lateral o el núcleo supraquiasmático. Cuando se redujo el intervalo entre amamantamientos de 24 a 18 hrs, llevando a la camada con su madre 6 horas antes de lo usual, grupo (c), no se modificó la conducta maternal, la producción de leche ó el número de células IR a C-FOS en ninguna región del cerebro estudiada. Al reducir el intervalo entre amamantamientos a 6 hrs , grupo (d), sólo el 66% de las madres amamantó y la producción de leche se redujo en más del 50 %. Los resultados indican: 1. El amamantamiento activa las áreas cerebrales involucradas en el reflejo de eyección de la leche (núcleo magnocelular) y otras (e.g., septum, BNST) que pueden controlar diferentes aspectos de la conducta maternal; 2. aunque el amamantamiento se expresa normalmente con una periodicidad circádica, puede también ocurrir tan tempranamente como 6 hrs después de un amamantamiento previo. Poca atención se ha dado a la influencia de los hermanos en el desarrollo temprano de las crías de mamíferos. La interacción limitada entre la coneja doméstica (Oryctolagus cuniculus) y su camada hace posible estudiar las interacciones entre hermanos. Hemos descrito evidencias en gazapos de las desventajas y ventajas de tener hermanos. El presente trabajo indaga en conejos al destete los posibles efectos de la interacción temprana entre hermanos sobre las respuestas fisiológicas (crecimiento y niveles hormonales) y conductuales a retos ambientales. Se utilizan camadas de raza chinchilla. Al día 1 de edad, la camada se divide en dos grupos (una cría y cinco crías). Del día 2 al 10 de edad se registra su temperatura corporal y su peso pre- y post-amamantamiento. Del día 10 al 25 solo se sigue registrando el peso. En el día 25 de edad, las crías se destetan y son colocadas en jaulas individuales. En los días 26 y 29 se someten a pruebas conductuales individuales (ante un estresor) y por parejas (competencia por agua y alimento). El día 31 los gazapos se canulan en la vena yugular. Entre los días 33 a 39 se someten a las mismas pruebas. Antes y después de cada prueba, se toman muestras de sangre por medio de la cánula. Las muestras se almacenan para el análisis hormonal por el método de RIA. Los datos muestran que en la primera semana de vida, las crías aisladas ingirieron significativamente menos leche e incrementaron menos su peso que aquellas que crecieron con sus hermanos. En el período del día 8 al 25 no hubo diferencias en crecimiento. El análisis de las pruebas conductuales y de las hormonas (testosterona y corticosterona) está en proceso. 2(Papiit IN217100 a RH y MMG) C-63 C-64 LA L-DOPA DISMINUYE LA MEMORIA ESPACIAL E INCREMENTA EL OXIDO NITRICO EN ESTRIADO Y CORTEZA DE RATA CON LESION DOPAMINERGICA. MMendieta L*, Félix Morales Luna, Parra C.C.*, Bastida J.C.*, Tirso M.R*. Limón I-D*, Lab. de Neurofarmacología FCQ-BUAP, Puebla, Pue. C.P. 72570 LA FRACCION 25-35 DE LA AMILOIDE-β EN NEONATOS DISMINUYE EL APRENDIZAJE Y MEMORIA ESPACIAL. Cuevas M.E.*1, Luna M.F.1, Martínez G.I.*1, Solis J.L.*1, Guevara F.J*2, Flores T.J*3 y Limón I.D.*1., 2Instituto Nacional de Neurología México D.F., 3Instituto de Fisiología-BUAP y 1 Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP, Puebla, Pue. La l-dopa es administrada por largos periodos a pacientes parkinsonianos lo que produce mejorías motoras y posteriormente daños motores. Incluso se ha relacionado el tratamiento de l-dopa con deficits cognitivos como la demencia (Itokazu et al. 2001). En cultivos de neuronas dopaminérgicas la l-dopa es tóxica (Maeda et al. 1997), esta toxicidad es atribuida a que genera radicales libres como el oxido nítrico (NO). En el presente trabajo se evaluó el efecto de la administración crónica de l-dopa sobre la memoria espacial y los niveles de NO en estriado y corteza. Se utilizaron ratas de la cepa Wistar (n=12), machos adultos a los cuales se lesionó con 6-OHDA 2µl (8µg/µl) en la SNc (AP:-4.9, L:+2.1, P:-6.5). Después de 8 días de la cirugía se les administró crónicamente al grupo experimental l-dopa (150mg/kg v.o.) y al control S.S.I. por 20 días, después se evaluó el aprendizaje y la memoria espacial en el laberinto radial de ocho brazos. Al termino fueron decapitadas para obtener estriado la corteza frontal y temporoparietal, y se cuantificaron los niveles de NO por el método de Griess. La administración crónica de l-dopa no cambio el aprendizaje espacial, sin embargo produjo un decremento significativo de 15% en la memoria espacial. Encontramos un aumento de los niveles de NO del 80%, 70%, 65% en estriado corteza frontal y corteza temporoparietal respectivamente con sus controles. Estos resultados sugieren que tratamientos crónicos de ldopa dañan la memoria espacial probablemente por un incremento del NO. Se han realizado diversos estudios conductuales e histológicos, para estudiar el efecto neurotóxico de las fracciones de la proteína amiloide-β (Aβ). Estas fracciones son constituyentes de las placas neuríticas en la enfermedad de Alzheimer. Sin embargo se desconoce en que etapa de desarrollo la fracción 25-35 de la Aβ estuviese generando daño. El objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de la administración de la fracción 25-35 de la Aβ en el hipocampo neonatal sobre pruebas de aprendizaje y memoria espacial en la etapa adulta. Se utilizaron ratas macho y hembra de la cepa Wistar al séptimo día de edad (n=8/grupo). Al grupo experimental se le aplicó, por cirugía estereotáxica y con un adaptador para neonatos 1µl de la fracción 25-35 de la Aβ (100µM) en hipocampo izquierdo (AP=-1.5; L=2.3 y P=-2.0). A las 8 semanas de la administración se les evaluó el aprendizaje en el laberinto radial de ocho brazos con el siguiente programa (No. de ensayos/No. de oportunidades) aprendizaje: 1er. día 3/8, 3/7 y 3/6, 2º. día 1/6, 3/5, 3/4 y 2/3 y 3er. día 3/5, 3/4 y 3/3, y a las 12 semanas se les evaluó la memoria con 3 ensayos de 8 oportunidades. La fracción 25-35 de la Aβ produjo una disminución del 5% y 7% en la prueba de aprendizaje y un 8% y 6% en la prueba de memoria para el grupo de ratas machos y hembras respectivamente. Estos datos nos sugieren que la fracción 25-35 de la Aβ retarda los procesos cognoscitivos. Lo cual sería un indicativo para el estudio de la toxicidad de esta fracción en el hipocampo en etapas tempranas. C-65 C-66 EFECTO DE LA REHABILITACION SOBRE LAS ALTERACIONES CAUSADAS POR LA DEPLECION UNILATERAL DE DOPAMINA EN EL LADO IPSILATERAL "SANO" DE LA RATA. Vergara-Aragón, P.1,2* (avalado por Fernández-Ruiz Juan) y Whishaw, IQ.*1 .1CCBN. University of Lethbridge, AB Canada. 2Dept.Fisiologia, Fac. Medicina UNAM. Mexico, D.F. EVALUACIÓN DE LAS SECUELAS MOTORAS DESPUÉS DE LA LESIÓN CORTICAL EN LA RATA. Bueno-Nava A.1*, Avila-Luna A.1*, Espinoza-Villanueva J.2* Ayala-Guerrero F.3 y González-Piña R.1* 1Laboratorio de Plasticidad Cerebral y Proliferación Celular, 2Laboratorio de Histomorfología, InCH-CNR, SSA 3Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. Alteraciones en los movimientos voluntarios y ajustes posturales después de la depleción de dopamina (hemiparkinsonismo) han sido tradicionalmente valorados en el sitio contralateral a la lesión (lado enfermo). Sin embargo, el lado ipsilateral excepcionalmente ha sido estudiado. En un estudio preliminar encontramos que los animales depletados de dopamina también presentan deterioro en el uso de sus miembros ipsilaterales (lado sano) para desempeñar tareas relacionadas con el consumo de alimento, especialmente presentan dificultad para supinar la pata y llevar el alimento a la boca. El presente trabajo fue realizado con el propósito de saber si la terapia de rehabilitación puede mejorar las alteraciones causadas por la lesión con 6-OHDA en el lado sano del cuerpo de la rata. Empleamos ratas Long Evans con peso de 200-250 g las cuales fueron entrenadas para realizar tareas de habilidad motora 3 semanas antes y 3 semanas después de la lesión en la vía nigrostriatal. Cuatro semanas después de la lesión fueron sometidas a la tarea de cilindro bajo el efecto de apomorfina y 12 semanas después de la cirugía los animales fueron colocados en jaulas especiales para "rehabilitación" durante dos semanas por 20 min. cada día. Se realizaron registros detallados de movimiento en cada prueba y el análisis histológico confirmó el sitio de la lesión. Los resultados mostraron que la habilidad para supinar la pata y llevarse el alimento a la boca puede ser significativamente corregido con rehabilitación física. Con estos resultados podemos darnos cuenta de que los impedimentos que la rata presenta en el modelo de hemiParkinson son mas heterogeneos de lo que hasta ahora se había pensado en términos de deficiencias y opciones de tratamiento. DGAPA IN-210300 y CONACyT 34817-M La secuelas de las alteraciones motoras inducidas experimentalmente por medio de la lesión de la corteza motora de la rata, han sido evaluadas mediante mediciones subjetivas, como la barra de equilibrio. Sin embargo, estos cambios pueden ser cuantificados con mayor precisión analizando las características de la zancada, lo que permitiría una evaluación más precisa. Se entrenó a ratas Wistar machos para pasar a través de un corredor de 1 m de largo, en cuyo piso se colocó una tira de papel. Las ratas pasaron sobre éste con las patas entintadas y se tomó un registro basal, después se repartieron al azar en dos grupos: sin cirugía, y lesionados en el área cortical motora representativa del miembro posterior, por el método de succión. Después de un periodo postoperatorio de seis horas, los animales se registraron cada 6 horas durante 18 horas. Finalmente se sacrificaron para extraer el cerebro y realizar el análisis histológico. Se midieron el largo (L), el ancho (A) y el ángulo (An) de la zancada, mientras que los cerebros se procesaron con la técnica de Nissl. Se utilizó un ANOVA simple y una prueba pos hoc de tukey (α≤0.05). Nuestro método de medición mostró que, mientras que el A no se alteró, el L disminuyó y el An se incrementó 6 horas después de la lesión, observándose una recuperación a las 12 horas. Los cortes histológicos mostraron un proceso avanzado de gliosis en las áreas lesionadas. Esto sugiere que la lesión cortical activa algunos mecanismos de plasticidad cerebral que podrían llevarse a cabo en zonas relacionadas con el área lesionada. C-67 C-68 INFLUENCIA DE LA MODIFICACIÓN DE LOS TONOS SEROTONÉRGICO Y OCTOPAMINÉRGICO DE Procambarus clarkii SOBRE SU COMPORTAMIENTO AGONISTA. Guarneros-Bañuelos,E.* (avalado por Radu G. Racotta Poulieff), Arzuffi-Barrera, R.* y Ramírez-San Juan, E.* Departamento de Fisiología de la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN y CEPROBI, IPN, México, D.F. EFECTOS DE LA LIGADURA TRANSITORIA DE LA ARTERIA CARÓTIDA SOBRE LA VOCALIZACIÓN EN LA CRÍA DEL COBAYO. Avila-Luna A.1*, Bueno-Nava A.1*, Verduzco-Mendoza A.1*, Espinoza-Villanueva J.2* Ayala-Guerrero F.3 y González-Piña R.1* 1Laboratorio de Plasticidad Cerebral y Proliferación Celular, 2Laboratorio de Histomorfología, InCH-CNR, SSA 3Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. El propósito del presente trabajo fue identificar, por medio de antagonistas farmacológicos, la(s) familia(s) de receptores que median las acciones de la 5-HT y octopamina (OA) sobre el comportamiento agonista del acocil Procambarus clarkii. Se evalúo el efecto de 5-HT, OA, yohimbina (antagonista de OA) y tropisetrón (antagonistas de 5-HT) sobre los patrones de comportamiento agonista de acociles con y sin tratamiento con las monoaminas. Posteriormente se registraron seis diadas (para cada fármaco) durante cinco días consecutivos y al sexto día se aplicaron los fármacos. En todos los grupos se registraron: amenazas, ataques, luchas y retiros durante 30 minutos. Por último, con la frecuencia de cada uno de los patrones registrados se elaboró un etograma de comportamiento agonista. Al aplicar 5-HT se presentó una disminución en el número de contactos totales en un 28.4 %. La OA provocó un aumento mayor al 50 % en el número total de contactos agonistas. La aplicación de yohimbina provocó una reducción en el número de contactos totales de 38.9 %, en amenazas 37.6 % y en retiros 10%. El tropisetrón provocó un aumento en el número de contactos totales de 20 %, de 10.8 % en amenazas y 23.4 % en ataques. De lo anterior se puede concluir que la 5-HT afecta al comportamiento agonista sólo en los individuos dominantes reduciendo la frecuencia de ataques y retiros. La OA parece aumentar los componentes agresivos del comportamiento agonista, puesto que incrementa estos patrones de comportamiento en los individuos subordinados. El cobayo ha sido empleado como un modelo de comunicación fonética en los mamíferos. Se ha reportado que la privación auditiva en el cobayo da como resultado una alteración en la comunicación fonética semejante a la descrita en humanos, por lo que es posible que provocando un daño cerebral por medio del ligamento de las arterias que llegan al cerebro provocaría la alteración de la comunicación fonética, lo cual es el objetivo de este trabajo. Se emplearon cobayos de 5 días de edad (d.e.) que fueron colocados en una cámara sonoamortiguada y en ausencia de su madre para inducir y grabar la actividad vocalizadora espontánea durante 3 minutos. Al día siguiente (6 d.e.), los cobayos se asignaron azarosamente a uno de tres grupos: sin cirugía (control), cirugía con ligadura de la arteria carótida durante 5 minutos (Ex1) y durante 10 minutos (Ex2). Los registros vocales se continuaron realizando en todos los animales durante 8 días. Se contó el nEV y la cantidad total promedio se comparó entre los grupos mediante un ANOVA simple y una prueba pos hoc de tukey (α ≤ 0.05). Se encontró que la actividad vocal se incrementó en el grupo Ex1, mientras que en el Ex2 ésta desapareció a los 4 días postoperatorios y reapareció parcialmente a los 13 días. Estos datos podrían indicar la puesta en marcha de mecanismos de plasticidad cerebral que participan en la regulación del lenguaje, en el cual podría estar involucrado el glutamato y otros neurotransmisores. C-69 C-70 ANALGESIA DURANTE LA INMOVILIDAD INDUCIDA POR PINZAMIENTO DEL CUELLO EN RATÓN. Miranda A.*, Fregoso T.*, De La Cruz F.*+ y Zamudio S.+ Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México, D. F. REORGANIZACIÓN FOLICULAR Y PROLIFERACIÓN CELULAR INVOLUCRADAS EN EL ARREGLO ENDOCRINO DE LA PINEAL DE Ambystoma tigrinum. RivasManzano, P.* (Avalado por Escobar Briones Carolina), OrtizHernández, R.* y Parra-Gámez L.**. *Departamento de Biología Celular, Fac. de Ciencias y **Departamento de Anatomía, Fac. de Medicina, UNAM. En ratón, el pinzamiento de la piel del dorso del cuello (PC), es capaz de desencadenar una respuesta de inmovilidad (RI). Se ha sugerido que la RI es una conducta adaptativa de defensa pasiva. La analgesia concomitante a la RI sería indispensable en tal estrategia defensiva. Pudiera considerarse, por tanto, que la analgesia durante la RI es una forma de “analgesia por estrés”. Sin embargo, existen pocos reportes donde se estudie la analgesia provocada por las respuestas de inmovilidad. En el presente trabajo se utilizó la aplicación ip de ácido acético (0.4 % v/v) en ratón, la que produjo contorsiones dolorosas características del abdomen y de los miembros posteriores. Para evaluar la capacidad analgésica de la respuesta de inmovilidad, se utilizó el PC con repeticiones cada cinco minutos durante una hora. Se comparó el grado de analgesia desarrollado por el PC estando el animal en posición prona o supina con inhibición del reflejo de enderezamiento (iRE). Además, se valoró la analgesia de la manipulación del ratón (estrés) sin la aplicación de la pinza. Finalmente, se usó el antagonista opioide naloxona (5 mg/kg ip) para ver la participación de los péptidos opioides en estas respuestas. Se encontró que: la inyección del ácido acético produjo manifestaciones dolorosas siendo de máxima intensidad 30 minutos posteriores a la inyección. El mayor efecto analgésico se observó al inducirse periódicamente la respuesta de inmovilidad por pinzamiento del cuello con iRE, un menor efecto se obtuvo cuando la RI se indujo en posición prona. El estrés de la manipulación no produjo una analgesia tan evidente como la presente en las RI’s. La naloxona fue capaz de bloquear los efectos analgésicos observados. Nuestros resultados apoyan la hipótesis de que la RI por pinzamiento es capaz de producir analgesia. El estrés implícito en la inducción de la RI no parece ser el único factor de la analgesia observada. La analgesia inducida durante la RI parece estar mediada por péptidos opioides. + Becarios DEDICT-COFAA, IPN. Apoyo parcial de los proyectos CGPI-IPN: 200423 y 990293. En apoyo de la hipótesis de una evolución en paralelo de tres tipos celulares en el complejo pineal de vertebrados, hemos encontrado células fotorreceptoras, fotoneuroendocrinas y endocrinas en el complejo pineal de Ambystoma tigrinum. Además hemos observado que el órgano pineal adquiere un arreglo endocrino en los individuos adultos reproductores durante la primavera. Este arreglo involucra una reorganización de los folículos que se localizan en la porción ventral del órgano pineal. Para comprobar si el arreglo endocrino se debe sólo a una reorganización folicular o también a reclutamiento de nuevas células, utilizamos un anticuerpo contra el antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) para marcar la presencia y ubicación de células en proliferación en la glándula pineal de organismos adultos neoténicos de A. tigrinum durante la estación de primavera. Encontramos células inmunorreactivas a PCNA en los folículos del compartimiento folicular, y en el compartimiento sacular sólo a nivel de su apertura al tercer ventrículo. Adicionalmente se observaron numerosas células ependimarias PCNA-inmunorreactivas en el tercer ventrículo. Concluimos que el arreglo endocrino en la glándula pineal de A tigrinum se debe tanto a una reorganización de los folículos como a proliferación en la pared de los mismos y probablemente a un reclutamiento de nuevas células a expensas del tercer ventrículo. C-72 C-71 LA EXPRESIÓN DE NEUROFILAMENTOS EN CÉLULAS CROMAFINES DE RATA Y CÉLULAS PC12 EN CULTIVO AUMENTA POR LA EXPOSICION A UN CAMPO MAGNÉTICO ESTACIONARIO. Kuri I.* , Fiordeliso T., MillánAldaco D.A. y Hernández-Cruz A. Departamentos de Biofísica y Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular, UNAM. Después de la exposición in vitro al NGF, las células cromafines adrenales y las PC12, derivadas de un feocromiocitoma de rata, sufren una diferenciación hacia un fenotipo neuronal (neurogenización). Entre otras cosas, ésta se manifiesta por un aumento en la expresión de neurofilamentos, proteínas específicas del citoesqueleto neuronal. En 1994, Verdugo y colaboradores demostraron que la exposición discontínua a un campo magnético oscilatorio de baja frecuencia produce la neurogenización de las células cromafines de rata en foma similar a la inducida por el NGF. El presente trabajo examina la expresión de neurofilamentos en células cromafines y células PC12 en cultivo expuestas contínuamente a un campo magnético estacionario producido por imanes permanentes de 5 mm de diametro (densidad de flujo magnético B1 = 10800 Gauss) adheridos al fondo de pozos de cultivo de 2 cm de diámetro. También se examinaron células control y expuestas a NGF (100 y 50 ng/ml; células cromafines y PC12, respectivamente). La expresión de neurofilamentos de 68 kDa (NF68) se evaluó utilizando inmunofluorescencia cuantitativa con una cámara CCD digital enfriada de alta sensibilidad y el programa Image Pro Express. A tiempos predeterminados, (5 10 y 15 días in vitro) las células fueron fijadas y sometidas a un proceso de inmunotición empleando un anticuerpo monoclonal contra NF68 y un anticuerpo secundario conjugado con TRITC. Los resultados obtenidos demuestran que después del tratamiento con campo magnético la expresión de neurofilamentos aumenta significativamente a partir de los 5 días con respecto al control. No obstante, los efectos no son tan notorios como en el caso del tratamiento con NGF. Subsidiado por donativos de DGAPA UNAM IN 210401 y CONACYT 34392-N. FLUCTUACIÓN DE LOS NIVELES DE RNAm DEL RECEPTOR HIPOTALÁMICO DE PROLACTINA DURANTE LA CONDUCTA SEXUAL DE LA RATA MACHO. Zepeda, R.C.*; Castelán, F.*; Rojas, F*; Hernández-Kelly, L.C.R.*; Manzo, J; Pacheco, P.; Ortega, A. y Hernández, M.E*. Instituto de Neuroetología. Universidad Veracruzana. Xalapa, Ver. Instituto de Investigaciones Biomédicas. UNAM. México, D.F. Depto. de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN, México, D.F. Los efectos biológicos de la prolactina (PRL) en los vertebrados son efectuados a través de su receptor (PRLR). Diversos estudios han relacionado un aumento en el número de PRLR o en los niveles de RNAm PRLR en el cerebro de la rata como respuesta a un aumento en los niveles de PRL sistémica, en condiciones fisiológicas como el ciclo estral, la preñez, la lactancia, el estrés y la conducta maternal. Durante la conducta sexual masculina de la rata los niveles PRL sistémica se elevan inmediatamente después que la rata logra 1, 2 ó 3 eyaculaciones consecutivas, por lo que es posible suponer que esta conducta promueva un aumento en los niveles de expresión del RNAm PRLR dentro del hipotálamo. Ratas macho Wistar, sexualmente expertas, fueron sometidas a una única sesión de registro conductual. En ella se les permitió copular en presencia de una hembra receptiva, hasta alcanzar 1, 2 ó 3 eyaculaciones consecutivas. Acto seguido, los animales fueron sacrificados mediante decapitación 5, 15, 30, 60 y 120 minutos después de la eyaculación respectiva. Finalmente, los hipotálamos fueron removidos del tejido cerebral y congelados inmediatamente para el posterior análisis del RNAm PRLR mediante RT-PCR. En este estudio utilizamos oligonucleótidos que nos permitieron amplificar un fragmento del cDNA común para cualquiera de las isoformas presentes en la rata. Nuestros resultados muestran un incremento en los niveles del RNAm PRLR en el hipotálamo después de la ejecución de la conducta sexual. Este incremento se observa 30, 15 y 5 minutos después de que el macho logra 1, 2 ó 3 eyaculaciones respectivamente. Este incremento es máximo cuando al grupo experimental se le permite lograr 2 eyaculaciones. Los datos sugieren que la PRL regula los niveles de RNAm PRLR en el hipotálamo de la rata macho durante la conducta sexual De esta manera, el PRLR estaría participando en el proceso de regulación de secreción de PRL durante la cópula, secreción que parece ser necesaria para la apropiada ejecución de la conducta sexual. BECA CONACyT : Reg. 153783 (F.C.) C-73 C-74 PARTICIPACIÓN DE LA ARGININA-VASOPRESINA (AVP) EN LA RETENCIÓN DE GLUCOSA ENCEFÁLICA DESPUÉS DE LA ESTIMULACIÓN SENOCAROTÍDEA. Montero, S.* (avalado por Cruzblanca Humberto), Yarkov, A.*, Lemus, M.*, Mendoza, H., Roces de Alvarez-Buylla, E.* y Alvarez-Buylla, R.† CUIB y Facultad de Medicina, Universidad de Colima; Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Tamaulipas; Dep. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México. LA LEPTINA ESTIMULA A CORTO PLAZO LA ACTIVIDAD SECRETORA DE GONADOTROPOS Y TIROTROPOS PROVENIENTES DE RATA MACHO ADULTA. Castro-Valdez, I.* ( avalado por Quevedo Durán Jorge), Avelino-Cruz, E*., PoncePérez, L.*, López-Hidalgo M.A.*, Benítez-Sánchez, A.M*., RamírezAlvarado M.T*. y Monjaraz, E*. Laboratorio de Neuroendocrinología, Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. La AVP, además de regular el balance hídrico y la presión arterial, induce glucogenolisis, y secreción de catecolaminas, glucagón e insulina. En trabajos anteriores iniciamos el estudio de la participación de la AVP en el reflejo hiperglucémico obtenido por la estimulación (con cianuro) de los receptores senocarotídeos aislados de la circulación sistémica (estimulación RCC). En este estudio se analizan las acciones metabólicas y la retención de glucosa encefálica (RGE) de la AVP y su antagonista (VP1-A), inyectados en el núcleo del tracto solitario (NTS) y en el hígado, después de la estimulación RCC, antes y después de la neurohipofisectomía (NHIPOX) o adrenalectomía (ADX). Se utilizaron ratas Wistar (270-300 g) anestesiadas y con respiración artificial de acuerdo con el siguiente protocolo experimental: a)estimulación RCC después de AVP en seno yugular en ratas NHIPOX; b)infusión de AVP en el territorio hepático en ratas normales o ADX; c)estimulación RCC durante la infusión de VP1-A en territorio hepático en ratas normales; d)infusión contínua de AVP en cisterna magna (CM); e)estimulación RCC después de la inyección de AVP o VP1-A en NTS; f)inyección de AVP en NTS precedida de VP1-A o líquido cefalorraquídeo artificial (LCRa) en NTS. Los resultados obtenidos en a, b y c indican que la AVP liberada por neurohipófisis mimetiza los efectos de la estimulación RCC sobre RGE con la participación de adrenales e hígado. En la segunda parte de este estudio (d, e y f) se demuestra que la infusión de AVP central (CM y NTS), elevó, por sí sola, la RGE. La inyección de AVP en NTS potencia los efectos de la estimulación RCC sobre la RGE, en comparación con la inyección de LCRa en NTS. La preadministración de VP1-A en NTS bloquea, tanto los efectos de AVP en NTS, como los efectos de la estimulación RCC sobre la RGE. Los resultados anteriores sugieren que la AVP, a nivel de receptores V1a en hígado y en NTS, participa en la RGE después de la estimulación RCC. La leptina es una señal que informa al sistema nervioso central acerca del estado energético del organismo. Los niveles plasmáticos de leptina en los animales en ayuno están disminuidos, este efecto se ve acompañado por cambios en el mismo sentido de algunas hormonas hipofisiarias (hormona estimuladora de la tiroides, TSH, hormona folículo estimulante, FSH, hormona luteinizante, LH, etc.). El hipotálamo, además de ser el principal blanco de acción de la leptina, también es el primer elemento regulador de la actividad secretora hipofisiaria, proponiéndose como el intermediario del efecto de la leptina sobre los niveles de las hormonas hipofisiarias. Evidencias recientes mostraron que la hipófisis expresa el receptor a leptina, llevándonos a sugerir que la leptina este modificando de manera directa la actividad secretora de las células hipofisiarias. OBJETIVO: Evaluar si la presencia aguda de leptina en cultivos primarios de células hipofisiarias modifica la actividad secretora individual de gonadotropos y tirotropos. METODOS: Empleamos la técnica de ensayo en placa hemolítica inversa (RHPA) con anticuerpos policlonales que reconocen de manera específica la subunidad β de la TSH y de la FSH. Los cultivos se trataron con 10 nM de leptina por 4 horas. RESULTADOS: La leptina estimula la actividad secretora individual de gonadotropos y tirotropos (30%±5 y 40% ±5, respectivamente). Además, el tratamiento con leptina no modificó la proporción de células secretoras de FSH y TSH (8%±2 y 2%±0.3, respectivamente). CONCLUSIONES: La leptina estimula de manera directa la actividad secretora individual de gonadotropos y tirotropos. (Apoyado por la VIEP-BUAP, clave II-90I01). C-75 C-76 EL ESTRADIOL Y LA PROGESTERONA REGULAN EL CONTENIDO DE LA PROTEÍNA ASOCIADA A MICROTÚBULOS 2 EN EL HIPOCAMPO DE LA RATA. ab Reyna-Neyra, A.* aCamacho-Arroyo I. bFerrera P. * y bArias C.* a Facultad de Química, UNAM. bInstituto de Investigaciones Biomédicas. México D.F., México. PARTICIPACION DEL PROTEOSOMA 26S EN LA REGULACION DEL RECEPTOR A PROGESTERONA EN EL CEREBRO DE LA RATA., Camacho-Arroyo I, VillamarCruz O.*, Gonzáles-Arenas A.* y Guerra-Araiza C.*. Departamento de Biología, Facultad de Química, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F., México. El estradiol (E2) y la progesterona (P4) participan en la regulación de diversas funciones en el sistema nervioso central como la memoria y el aprendizaje. Estos eventos involucran modificaciones en el citoesqueleto neuronal que requieren de la participación de proteínas asociadas a microtúbulos como MAP2 (MAP2) y tau. Se desconocen los mecanismos involucrados en los efectos del E2 y la P4 sobre la plasticidad neuronal. En este trabajo se evaluaron los efectos de estas hormonas sobre la expresión de MAP2 y tau en el hipocampo y la corteza cerebral de la rata. Ratas adultas de la cepa Wistar fueron ovariectomizadas y 15 días después fueron aleatoriamente asignadas a los siguientes grupos: (1) vehículo (aceite de maíz) por 2 días; (2) E2 (1.0-10 µg/100 g) por 2 días, (3) P4 (0.1-0.8 mg/100 g) por 2 días, (4) E2 (5.0 µg/100 g) 2 días + P4 (0.4 mg/100 g) en el día 3. De las ratas ovariectomizadas se obtuvieron el hipocampo y la corteza frontal e inmediatamente se procesaron para la extracción de proteínas termoestables y del RNA total. Posteriormente se realizaron un Western blot y un RT-PCR para determinar la expresión de MAP2 y tau. Los resultados obtenidos mostraron un incremento dependiente de la dosis de E2 y P4, sobre el contenido de MAP2 en el hipocampo de la rata. Por otro lado, ni el E2 ni la P4 modificaron el contenido de MAP2 en la corteza frontal. La administración conjunta de E2 y P4 no modificó la expresión a nivel de la proteína de MAP2 respecto a los resultados obtenidos en los animales tratados con E2 y P4 unicamente. De manera interesante los tratamientos hormonales no modificaron el contenido del RNAm de MAP2. La expresión de tau no se modificó por el tratamiento con E2 y la P4 en ninguna región. Estos resultados sugieren que MAP2 puede estar involucrada en los cambios estructurales inducidos por el E2 y la P4 en el hipocampo de la rata y que la expresión es regulada probablemente a nivel postranscripcional. Apoyado por CONACyT (27512M) y PAIP, Facultad. de Química. UNAM. La progesterona (P) participa en la regulación de diversas funciones en el cerebro a través de la interacción con el receptor a progesterona (PR). El proteosoma 26S ha sido involucrado en la degradación del PR en líneas celulares de cancer de mama y en gonadotropos in vitro. Sin embargo, se desconoce el papel de este sistema proteolítico en el recambio del PR en el cerebro de la rata. El objetivo de este trabajo fue estudiar la participación del proteosoma 26S en la regulación del contenido del PR en el cerebro de la rata . Ratas hembras adultas fueron ovariectomizadas y dos semanas después fueron tratadas por vía subcutánea con : 1) vehículo de hormonas (VEH) (aceite de maiz/etanol al 10%) + inhibidor del proteosoma Z-Ile-Glu (OBu1)-Ala-Leu-H, (PSI, 300 microgramos/100 g), 2) VEH + vehículo de PSI (DMSO), 3) estradiol (E2) (10 microgramos/100 g) + PSI, 4) E2 + DMSO, 5) E2 + P (400 microgramos/100g) + PSI al segundo día y 6) el tratamiento como en 5) + DMSO al segundo día en vez de PSI. El área preóptica, el hipocampo y la corteza frontal fueron obtenidos 24 h después de la última dosis. Se extrajeron proteínas de estos tejidos y se procesaron para Western blot. Nuestros resultados indican que el PSI incrementa el contenido del PR en el área preóptica y el hipocampo, mientras que en la corteza no tiene ningún efecto. Este incremento fue significativo en los animales tratados con E2+P+PSI con respecto a los tratados con E2+P+DMSO. El incremento en el contenido de PR después del tratamiento con PSI en el área preóptica y el hipocampo se observó en ambas isoformas (PR-A y PR-B). Nosotros concluimos que el proteosoma 26S participa en el recambio del PR en el área preóptica y el hipocampo de la rata in vivo. Este trabajo fue apoyado por Conacyt (Proyecto No. 35025-N), México. C-77 C-78 EFECTO DE LA DENERVACIÓN SENSORIAL SOBRE EL CRECIMIENTO FOLICULAR. Apolonio, J*, Morales L y Domínguez R. Unidad de Investigación en Biología de la Reproducción. Laboratorio de Fisiología Reproductiva. FES Zaragoza. UNAM. México. LA DENERVACIÓN NORADRENÉRGICA PERIFÉRICA (DNP) PERMITE LA INDUCCIÓN DE LA OVULACIÓN EN RATAS ANDROGENIZADAS AL QUINTO DÍA DE VIDA. Flores A., Cruz, M.E.*, Ayala, M.E. y Domínguez, R. UIBR. Lab. de Diferenciación Sexual. FES Zaragoza, UNAM. Existen fibras sensoriales asociadas al folículo ovárico en crecimiento, sin embargo se desconoce si tienen alguna participación en el desarrollo folicular, por lo que en este trabajo, se propuso estudiar en el modelo del animal intacto y en el hemicastrado, el efecto de la eliminación de las fibras sensoriales sobre los mecanismos que regulan el crecimiento del folículo. Ratas hembra de la cepa CII-ZV fueron inyectadas al nacimiento con 50 mg⋅Kg–1 de capsaicina (CAP) o vehículo (Vh), algunas de ellas fueron hemicastradas del ovario izquierdo (HCIzq) o derecho (HCDer) a los 20 ó 28 días de edad. Todos los animales fueron sacrificados al primer estro vaginal. Los resultados del número de folículos sanos se muestran en la siguiente tabla: La administración de andrógenos a ratas hembras de 5 días de edad disminuye la tasa de animales ovulantes, sin cambios en el número de ovocitos liberados en el día del primer estro vaginal (PEV) y aumento de la concentración de noradrenalina en el ovario. Ya que la DNP provocada por la inyección de guanetidina (GTD) bloquea parcialmente los efectos de la androgenización al nacimiento sobre la ovulación, en el presente estudio se analizan los efectos de la DNP al nacimiento, sobre la ovulación inducida con gonadotropinas en ratas androgenizadas a los 5 días de edad. Grupos de ratas hembras recién nacidas fueron tratadas con GTD (20mg/kg P.C.) o salina durante las primeras dos semanas de vida. En el día 5 de vida un grupo recibió 75µg de propionato de testosterona [PT] o 0.1 de aceite de maíz. A los 21 días de edad los animales fueron inyectados con 8 u.i. de gonadotropina coriónica equina (PMSG) o con PMSG y 48 horas después con 5 u.i. de gonadotropina coriónica humana (hCG). Los animales fueron sacrificados en el día PEV. Diez de 12 animales inyectados con salina ovularon después del tratamiento con PMSGhCG y liberaron 45±7.8 ovocitos. Los animales denervados con el mismo tratamiento ovularon 6/11 y liberaron 20±4 ovocitos (p<0.05 vs. testigo). Las ratas androgenizadas sometidas al mismo tratamiento no ovularon, mientras que en el grupo de denervadas y androgenizados 5/10 ovularon y liberaron 24±5 ovocitos (p<0.05 vs. testigo). Estos resultados indican que la inervación noradrenérgica periférica regula de manera estimulante la respuesta del ovario a las gonadotropinas. A su vez la DNP al disminuir el incremento de NA ovárica provocada por la androgenización, permite la acción de las gonadotropinas. Apoyado por PAPITT No. IN210500. Grupo 20 días 28 días 93.7±3.2 Vh Vh+HCIzq 120.7±18.7 94.0±20.6 Vh+HCDer 117.7±9.4♦ 131.0±13.6♦ CAP 31.7±4.8♦ CAP+HCIzq 71.7±8.3* 87.3±10.2 CAP+HCDer 126.3±15.5* 109.7±22.5* ♦ p< 0.05 vs. Vh, * p< 0.05 vs. CAP, prueba de t-student. En el animal hemicastrado el rescate del folículo de la atresia depende del ovario in situ. En la rata con ambos ovarios, la inervación sensorial modula de manera estimulante la diferenciación del folículo. Investigación apoyada por CONACyT 29006-N y DGAPA IN203799. C-79 C-80 EFECTO DE LA SILIMARINA SOBRE LA ACTIVIDAD RENAL DE LA GLUTATIÓN PEROXIDASA Y LA SUPEROXIDO DISMUTASA EN LA INDUCCIÓN DE LA DIABETES MELLITUS EXPERIMENTAL DE LA RATA. RELACION CON UN ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO. Soto Peredo, C.* (Avalado por Delgado Lezama Rodolfo), Uría Galicia, E.*, De la Rosa Oropeza, P.*, García Villeda, I.*, Velázquez Aragón, J.* Departamento de Sistemas Biológicos. Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco. EL INF-α ALTERA LA PRODUCCION Y EL METABOLISMO DE ESTEROIDES EN EL OVARIO DE LA RATA. R. A. Valdez, B. Gallo, Ma. I. Hernandez, I. Girón y M. C. Romano. Dpto. de Fisiología, Biofísica y NC., CINVESTAV-IPN. Apdo. Postal 14-740, 07000, México DF. Los radicales libres participan importantemente en la patogénesis de las complicaciones que se presentan en la Diabetes Mellitus (DM) como el daño renal. Estos radicales producen lipoperoxidación de la membrana plasmática. Entre los mecanismos de defensa contra los radicales libres se encuentran el glutatión y enzimas antioxidantes como: superóxido dismutasa (SOD), glutatión peroxidasa (GSHPx). La Aloxana (Alox) se ha utilizado ampliamente para producir DM experimental ya que causa necrosis en células ß-pancreáticas. Se ha propuesto que su mecanismo de acción es a través de la generación de radicales libres. Varios modelos de peroxidación oxidativa celular, han demostrado que la Silimarina (Silim) actúa como captador de radicales libres por su capacidad de inducir la síntesis de glutatión. Objetivo: Estudiar el efecto de la Silim. sobre la actividad renal de (SOD), (GSHPx) y su relación con el estudio histopatológico en ratas con DM inducida por aloxana. METODOLOGÍA: Se utilizaron ratas Wistar macho (220g) y se formaron 4 grupos: 1) Control (1 ml de carboximetilcelulosa, CMC al 1%, vía oral. 2) Alox. (una dosis de 150 mg/Kg, i.p.), 3) Silim. (3 dosis de 200 mg/Kg en CMC, una cada 24 horas), 4) Alox.+Silim. (como los grupos 2 y 3). Se sacrificaron a los 0, 3 y 5 días de iniciado el tratamiento. A cada animal se le determinó: glucosa sérica, actividad renal de SOD y GSHPx y el estudio histopatológico en cortes de riñón. RESULTADOS: El tratamiento de Alox. elevó significativemente la concentración de glucosa sérica, la actividad de SOD y GSHPx. Así también, produjo un daño generalizado a nivel del tejido renal. Estas alteraciones disminuyeron significativamente tanto a nivel bioquímico como morfológico en los grupos que se trataron simultáneamente con Alox + Silim. Estos resultados sugieren un efecto benéfico de la Silim contra el daño oxidativo que se presenta en la DM experimental y probablemente en la del humano. Los interferones son una familia de proteínas producidas por células inmunológicas y también por células de otros tejidos en el curso de infecciones virales. Tienen actividad antiviral y antiproliferativa. El INF-α provoca alteraciones en los niveles de progesterona en mujeres. Trabajos previos del laboratorio mostraron que disminuye significativamente la producción de estradiol y testosterona en el ovario de rata prepúber. En el presente trabajo se investigó por un lado el efecto de INF-α en los niveles séricos de progesterona (P4) y estradiol (E2) durante el ciclo estral de la rata adulta. Se determinó por otra parte, en qué pasos de la vía esteroidogénica del ovario actúa la citoquina. Para la primera parte del trabajo se realizaron citologías vaginales a ratas adultas previamente sincronizadas, se trataron con INF-α por diferentes tiempos y se sacrificaron tomando antes muestras de sangre para medir E2 y P4 en el suero por RIA. Para estudiar la esteroidogénesis in vitro, se incubaron las células dispersas del ovario de ratas de 21d con 3H-Pregnenolona (3H-P5) y INF-α y se analizaron los metabolitos producidos por cromatografía en capa delgada (TLC). Los resultados obtenidos in vivo indican que después de 4h de tratamiento el INF-α modifica los niveles séricos de P4 y E2. Estas alteraciones dependen del estadio del ciclo en el que se encuentra el animal. Los experimentos in vitro mostraron que la presencia de IFN-α en el medio de incubación por 5h modifica la transformación de 3H-P5 a sus metabolitos testosterona y estradiol tanto en condiciones basales como en presencia de hCG, lo cual resulta en la acumulación de progesterona. En resumen los experimentos arriba descritos indican 1) INFα altera el patrón hormonal en la rata adulta. 2) INF-α afecta directamente la esteroidogénesis del ovario, inhibiendo probablemente a la 17αhidroxilasa. C-81 C82 INTERACCIÓN ENTRE LAS SEÑALES GASTROINTESTINALES Y EL SISTEMA NERVIOSO SIMPÁTICO EN EL CONTROL DE LA INGESTIÓN DE ALIMENTO. Villanueva, I.*; Ortiz, K.* y Racotta, R. Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, México. LA LOBECTOMIA NEUROINTERMEDIA HIPOFISIARIA (LOBEX) DISMINUYE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE LA ENCEFALOMIELITIS AUTOINMUNE EXPERIMENTAL (EAE) EN LA RATA LEWIS. Quintanar Stephano A, Organista Esparza A*, Tinajero Ruelas M*, Moreno Córdoba EV*, Medina Fernández M*, Sánchez Herrera IO*, Covarrubias Castillo YL*. Depto. Fisiología y Farmacología. Centro de Ciencias Básicas. Universidad Autónoma de Aguascalientes. aquinta@correo.uaa.mx El control fisiológico de la ingesta de alimento es el resultado de la interacción de múltiples mecanismos de diferente naturalezas. Entre estos mecanismos se ha considerado tradicionalmente a la información sensorial generada en el tracto digestivo, y se asume que la vía de señalización está constituida por hormonas (principalmente la CCK) y reflejos nerviosos locales. Por otra parte se reconoce que la actividad del sistema nervioso simpático (SNS) modifica la alimentación de diversas maneras, y podría ser la forma de entrada de información de otros tipos (metabólico, por ejemplo) al control de la ingesta. En este trabajo se evaluó la interacción entre los mecanismos gastrointestinal y de activación simpática en el control de la ingesta. Por una parte, la alimentación ficticia no modificó la descarga simpática (recambio de noradrenalina y adrenalina) hacia el hígado, el bazo, el duodeno, el tejido adiposo café y los paraganglios vagales. Por otro lado, la administración de CCK exógena produjo una hipofagia que no fue suprimida por la simpatectomía previa de los animales por tratamiento crónico con guanetidina. Sin embargo, el bloqueo farmacológico de los receptores beta adrenérgicos produjo una inhibición ligera de este efecto, a diferencia de los receptores alfa. Estos resultados sugieren que los efectos de la estimulación gástrica e intestinal sobre la alimentación son en general independientes de la actividad del SNS, aunque algunos efectos más específicos de la CCK podrían ser mediados por receptores adrenérgicos principalmente de tipo beta. Trabajo financiado parcialmente por CGPI, IPN. R. Racotta es becario de DEDICT-COFAA, IPN. Antecedentes.- Previamente hemos descrito en la rata que la LOBEX deprime las respuestas inmunes humoral y celular. La EAE es utilizada también en la búsqueda de tratamientos para la esclerosis múltiple humana. Objetivo.- Determinar si la LOBEX modifica la incidencia y la severidad de la EAE. Material y Métodos.- Ratas machos de la cepa Lewis de ≈ 250 g de peso se dividieron en grupos de 18 de la siguiente manera: 1) Falso operados (FO) 2) Hipofisectomizados (HIPOX) y 3) LOBEX. Tres semanas después de las cirugías, los grupos fueron inmunizados por vía sc con homogenizado de cerebro de cuyo en adyuvante completo de Freund. Tres animales de cada grupo fueron inmunizados solo con el vehículo. Clínicamente la EAE inició entre los 9 y 14 días post-inoculación. Las ratas se sacrificaron en el grado más alto de la enfermedad (escala de 0-5) o a los 3 días de permanencia en un mismo estadio. Los animales que no mostraron signos EAE se sacrificaron a los 16 días post-inoculación. Se disecaron el cerebro y la médula espinal y se procesaron para su estudio histopatológico. Resultados.- La incidencia clínica de la EAE fue del 73.3% y 66.6% en los grupos FO e HIPOX respectivamente, mientras que en los LOBEX fue solo del 21.4%. Mientras que el 50% de los animales FO e HIPOX desarrollaron el grado más alto de la EAE, los LOBEX que la desarrollaron, solo la presentaron en el menor grado (grado1). El estudio histopatológico mostró una estrecha correlación entre los signos clínicos y las lesiones encefalomielíticas. Conclusiones.- La LOBEX disminuye significativamente la incidencia y la severidad de la EAE. Apoyado por UAA, PIFF 01-9N y CONACYT, 35443-M C83 C-84 EL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO (EGF) INDUCE LA FORMACIÓN DE FIBRAS DE ESTRÉS SIN ADICIONAR MÁS ACTINA-F AL CITOESQUELETO. Toral, C*; Solano-Agama MC*, Fernández JL*, Sabanero M* y Mendoza Ma. Eugenia. CINVESTAV-IPN. México D.F. LA EXPRESIÓN DEL ARNm DE LAS ISOFORMAS α y β DEL RECEPTOR A ESTRÓGENOS, PRESENTAN CAMBIOS ASIMÉTRICOS EN LAS AREAS PREÓPTICA A HIPOTALÁMICA ANTERIOR DURANTE EL CICLO ESTRAL. Arteaga-López P.R. 1*(avalado por Domínguez R.), Cruz M.E.1*, Cerbón M.2*, Mendoza-Rodríguez C.A.2* y Domínguez R. 1 1. F.E.S.-Zaragoza, 2. Facultad de Química U.N.A.M. En las células anterohipofisiarias, el EGF participa en los procesos de diferenciación de las células lactotropas clásicas así como en procesos de proliferación de las células corticotropas y tirotropas. Nosotros hemos encontrado que el EGF, además, induce un cambio morfológico con rearreglo del citoesqueleto de actina en fibras de estrés. Esta acción se presenta en células de ratas infantiles no así en células de rata adulta. Tomando en cuenta el cambio en la estructuración del citoesqueleto de actina nos preguntamos si este dependía de la incorporación de un mayor número de fibras de actina. Para contestar esta pregunta se utilizó el método de extracción con detergente del citoesqueleto de actina. Se hicieron cultivos de anterohipófisis de rata infantil en medio enriquecido con suero bovino fetal y en medio definido en ausencia ó en presencia de 30 ng/ml de EGF. Las células se sembraron sobre poli-D-lisina ó colágena I. A las 48 hs se extrajo el citoesqueleto de actina y sus proteínas asociadas conTritón X-100 0.1 % y las fracciones solubles e insolubles en Tritón se separaron por SDS-PAGE, se electrotransfirieron y se identificaron por “Western Blot”: actina y receptor a EGF (REGF). Se cuantificaron las proteínas por densitometría óptica. Los resultados muestran que en todos los casos la cantidad de actina-F es igual en las dos fracciones. Concluimos que el EGF modifica la estructura del citoesqueleto sin inducir un incremento en la cantidad de actina-F asociada al mismo y que el REGF se encuentra, en más del 50 % asociado al citoesqueleto de actina lo cual sugiere una interacción directa entre los complejos de adhesión acoplados al citoesqueleto y el REGF sinergizando la regulación del citoesqueleto de actina en las células anterohipofisiarias infantiles. (Proyecto CONACyT 30726-M) Las áreas preóptica e hipotalámica anterior (POA-AHA) regulan de manera asimétrica la secreción de gonadotropinas y por lo tanto, la ovulación. Estas funciones son reguladas por diversos neuromoduladores y hormonas que tienen receptores localizados en estas áreas hipotalámicas. Entre las hormonas, los estrógenos son uno de los reguladores principales. Se ha mostrado que la concentración del receptor a estrógenos (RE) en la corteza cerebral es asimétrica y esta asimetría es diferente según el sexo del animal. Los implantes de estrógenos en el hipotálamo de la rata recién nacida, inducen cambios conductuales diferentes en la edad adulta. Los implantes de estrógenos en el lado izquierdo del núcleo ventromedial disminuye la conducta sexual femenina, mientras que el implante del lado derecho del área preóptica incrementa la conducta sexual masculina. Por tanto, en este trabajo analizamos la posibilidad de que la expresión del ARNm del RE, isoformas α y β, sea diferente entre el lados izquierdo y derecho de POA-AHA de la rata adulta, durante el ciclo estral. Los resultados obtenidos muestran que la expresión de ambas isoformas del RE es asimétrica y varian durante el ciclo estral. C-85 C-86 EFECTO DE LA LESIÓN UNILATERAL DE LA AMÍGDALA MEDIAL SOBRE LA COMPENSACIÓN OVULATORIA. Oviedo Jiménez A.* y Sánchez Ramos Marco Antonio. Lab. de Fisiología e Histología, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Autónoma de Querétaro. INFLUENCIA DE LOS ESTEROIDES SOBRE LA ACTIVIDAD DE LAS RAICES DORSALES DESPUES DE LA ESTIMULACION DE LOS NERVIOS ESCROTALES EN LA RATA. García, L.I.1*, Manzo, J.1, Hernández, M.E.1*, Camacho, M.A.1* y Pacheco, P.2 1Inst. de Neuroetología. Univ. Veracruzana. 2Inst. Invest. Biomédicas, UNAM, México, D.F. En el trabajo realizado por Gerendai y colaboradores (1993) reportaron que la deaferentación del lóbulo temporal derecho altera el mecanismo de compensación ovulatoria en ambos ovarios; mientras que la deaferentación del lado izquierdo no altera el proceso de compensación. Datos en nuestro laboratorio muestran que la lesión de la amígdala medial derecha aumenta la ovulación del ovario ipsilateral y disminuye la ovulación del ovario contralateral, mientras que la lesión izquierda no provoca ninguna alteración sobre la ovulación. Los datos anteriores indican que es el lado derecho el que regula la compensación ovulatoria, sin embargo no se conoce claramente como se da este mecanismo. En este trabajo se evalúo el efecto de la lesión unilateral de amígdala medial sobre la compensación ovulatoria en ratas ovariectomizadas unilateralmente. Se utilizaron ratas hembras de la Cepa Wistar con simulación de lesión unilateral de la amígdala medial con hemiovariectomía ipsilateral o contralateral (grupo control); con lesión unilateral de la amígdala medial con hemiovariectomía ipsilateral o contralateral (grupos experimentales). Se evaluaron los siguientes parámetros: la tasa de animales ovulantes, índice estral, ovulación del ovario in situ. Los resultados muestran que la compensación ovulatoria en el ovario derecho sólo se da como respuesta a la lesión de la amígdala medial derecha, mientras que independientemente del lado de la lesión, el ovario izquierdo compensa la ovulación. Esto permite suponer que hay dos mecanismos de compensación ovulatoria, uno activado por la hemiovariectomía y otro por la lesión unilateral de la amígdala. Apoyado por el proyecto No. 29107N del CONACyT En la rata la piel del escroto esta inervada por dos nervios, el proximal (NPE) y el distal del escroto (NDE). Su manipulación produce secreción de semen con espermatozoides, así estos nervios se encuentran involucrados en los reflejos sexuales. La sección de uno o ambos nervios no interrumpe la copula, pero la calidad del semen decrementa. Estos hallazgos permiten inferir el papel de la piel del escroto en la eyaculación. Como la eyaculación es el primer parámetro sexual eliminado por la castración, suponemos que la electrofisiología de las aferentes del escroto son altamente sensitivas a los esteroides. En consecuencia, dos diseños experimentales fueron realizados en ratas macho adultas Wistar. Inicialmente se analizó la extensión del campo sensorial del NPE y NDE en el escroto de machos intactos (I), castrados (C), y C + tratados con esteroides. La castración reduce significativamente el tamaño del campo sensorial, el cual incrementa a los valores del intacto después del tratamiento con testosterona, estradiol o dihidrotestosterona. En el segundo experimento se probaron varios parámetros de los potenciales evocados en las raíces dorsales L5 a S1 durante la estimulación del NPE o NDE. Los resultados mostraron que el umbral para evocar los potenciales fue el único parámetro alterado. Los datos sugieren que los parámetros electrofisiológicos de los nervios aferentes de la piel del escroto están bajo el control de los esteroides. Es notable la respuesta de las aferentes a algún esteroide. Sin embargo, como diferentes regiones de las neuronas aferentes parecen sensibles a los esteroides (mielina, microtubulos y canales de sodio), la influencia de las hormonas esteroides podría ser en distintos niveles. Proyecto CONACYT: 33124-N (JM) C-87 C88 CONCENTRACIÓN DE CITOCINAS PRO-INFLAMATORIAS EN HIPOCAMPO, CORTEZA, TALLO Y SUERO DE RATAS CON SHOCK ENDOTÓXICO INDUCIDO POR LIPOPOLISACARIDO (E. Coli 0111:B4). López-Robles E.E.*†‡, Bitzer-Quintero O.*±, Ruiz-Rizo L.*†, Ortiz Genaro Gabriel†. † ± Laboratorios de Neuroinmunoendocrinología y Neuroinmunomodulación, División de Neurociencias, Centro de Investigación Biomédica de Occidente IMSS. Guadalajara, Jal. ‡ Unidad de Biología Experimental Universidad Autónoma de Zacatecas, Guadalupe, Zac. MÉXICO. LA TINCIÓN TRICRÓMICA DE MASSON Y LA TINCIÓN DE GALLEGO PARA VALORAR LA HIPERPLASIA DE LAS ARTERIAS UTERO PLACENTARIAS EN PLACENTAS DE MUJERES CON PREECLAMPSIA. Contreras-Barrios, M.A.* Gijón, E., Sánchez D. G*., Benitez R. S.R* y Valencia S.J.A.* Hospital de la Mujer, S.SA y Facultad de Medicina, UNAM. Antecedentes: El shock endotóxico provocado por la acción del lipopolisacarido (LPS) de bacterias gram-negativas, se caracteriza por la producción exagerada de citocinas proinflamatorias periféricas como TNF-α, IL-1β e IL-6, capaces de llegar al sistema nervioso central (SNC) y ejercer diversas funciones; sin embargo poco se conoce acerca de la síntesis y liberación de estas citocinas en el SNC ante un estímulo de LPS. Objetivo: Determinar la concentración en función del tiempo de citocinas pro-inflamatorias en hipocampo, corteza, tallo cerebral y suero, después de inducir shock endotóxico. Material y Métodos: Ratas macho adultas Sprague/Dawley inoculadas con DL100 de LPS fueron decapitadas a los 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 y 270’, se obtuvo hipocampo, corteza, tallo y sangre, las citocinas se determinaron por el método de ELISA en homogenados de tejido cerebral y en suero. Resultados: TNF-α en hipocampo, corteza y tallo alcanza su máxima concentración a los 150’, IL-1β en hipocampo a los 120 y 270’, en corteza y tallo a los 150’e IL-6 en hipocampo y corteza a los 150’ y en tallo a 150 y 270’, en suero TNF-α a los 90’, IL-1β e IL-6 a los 150’. Conclusiones: El presente trabajo permite conocer los tiempos y las concentraciones en que son liberadas citocinas proinflamatorias en algunas áreas del SNC, después de una inyección periférica de LPS. La preeclampsia es una enfermedad que aparece generalmente después de la semana 20 de la gestación, y cursa con hipertensión arterial (más de 90/140mmHG), proteinuria y edema, la presentación de esta enfermedad varía de un 8 a un 20% de las mujeres embarazadas. Los cambios morfológicos asociados se pueden observar a partir de la semana 12 de la gestación, y se caracterizan por hiperplasia de la capa múscular de las arterias uteroplacentarias, seguida por lesión del epitelio endotelial, esta alteración provoca cambios isquémicos en la placenta, que evolucionan desde la proliferación de las células del sinciciotrofoblasto a los infartos iquémicos. Para valorar los cambios asociados con la enfermedad, se propone el uso rutinario de las tinciones tricrómica de Masson y Gallego. Se estudiaron 20 placentas con cambios asociados a la preeclampsia, de cada una se hicieron 5 cortes en promedio, teñidos con hematoxilina y eosina, estos son valorados y el que tiene una mayor alteración es vuelto a cortar en cortes seriados, para teñirse con hematoxilina y eosina, la tricrómica de Masson, la tinción de Gallego y la tinción de PAS (Acido periódico de Schiff), para comparar lo que se observa con la tinción de hematoxilina y eosina, y con la tinción de Masson y Gallego. En los casos estudiados la tinción tricrómica de Masson y la de Gallego permiten observar de una forma mas evidente la hiperplasia de las arterias uteroplacentarias y la magnitud de la fibrosis y necrosis, para hacer mas comprensible la magnitud del daño observado en la placenta de mujeres con preeclampsia. C-89 C-90 ORGANIZACION DE LAS VIAS SEGMENTALES QUE MEDIAN LA PAD DE LAS FIBRAS AFERENTES MUSCULARES Y CUTÁNEAS EN EL RATON JUVENIL. UN ESTUDIO in vitro. García, A* y Quevedo, J. N. Dpto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV. DEPRESIÓN DE LA RESPUESTA MONOSINÁPTICA Y ALTERACIONES DE LA TRANSMISIÓN SINÁPTICA EN MÉDULA ESPINAL AISLADA DEL MUTANTE taiep. Fuenzalida, M.*; Roncagliolo, M.*; Bonansco C.* y Eguibar J.R. Depto. de Fisiología, Fac. de Ciencias, Universidad de Valparaíso, Chile; Instituto de Fisiología, B.U.A.P. México. En un trabajo previo mostramos que la despolarización de aferentes primarios (PAD) en el ratón juvenil se produce principalmente por la activación de fibras aferentes musculares de origen flexor y cutáneas (García y Quevedo, 2001). El objetivo del presente trabajo fue estudiar la organización de las vías que median la PAD de las fibras aferentes musculares y cutáneas utilizando el protocolo de interacciones entre diferentes vías segmentales (Rudomin et al 1983; Brink et al 1984). Los experimentos se realizaron en la preparación aislada del ratón juvenil (tallo cerebral, médula espinal y nervios periféricos). La PAD fue inferida de los potenciales de raíz dorsal (DRPs) o de los reflejos de raíz dorsal (DRRs.) registrados en las raíces dorsales L4-L6. Observamos que la interacción (0 ms de intervalo) de los DRPs producidos por la estimulación de fibras aferentes cutáneas (SP y SU) de bajo umbral (? 2xU), o de fibras aferentes flexoras (DP y PBSt) de bajo umbral (? 4xU), produjo una oclusión. La estimulación condicionante de aferentes cutáneos (SU, 2-4 xT) y mixtos (TIB, CP, 2-4xT) con intervalos mayores a 50 ms produjo una depresión de los DRPs producidos por la estimulación de aferentes musculares flexores (DP, PBSt). Estos resultados preliminares sugieren que de manera similar al gato adulto, en el ratón juvenil existe una convergencia de las vías cutáneas de bajo umbral que median la PAD de las fibras aferentes cutáneas y una convergencia de las vías musculares flexoras que median la PAD de las fibras aferentes musculares de bajo umbral, y que las vías que median la PAD de las fibras aferentes musculares de bajo umbral son inhibidas por la estimulación de aferentes cutáneas. El siguiente objetivo será investigar en esta preparación cómo se modulan las vías que median la PAD durante la locomoción ficticia y los posibles mecanismos involucrados. Agradecemos al Dr. Julio Muñoz por habernos facilitado generosamente un espacio de su laboratorio. A. García es becario del CONACYT. La rata taiep es un mutante neurológico caracterizado por una desmielinización progresiva y astrogliosis reactiva, los componentes centrales del potencial provocado lumboespinal muestran retardos significativos y una elevada fatigabilidad, sugiriendo una severa disfunción de la neurotransmisión en los primeros relevos de la médula espinal. Para evaluar esta hipótesis, hemos estudiado en ratas neonatas (P2-P12): i) las respuestas monosinápticas (RMS) en médula espinal aislada, y ii) los potenciales excitatorios postsinápticos (PEPs) de motoneuronas en rebanadas de médula espinal. Durante el proceso de maduración normal del circuito monosináptico, y asociado a un aumento de la excitabilidad, las RMS muestran: reducción de latencias, disminución de la depresión por pulsos pareados y mayor capacidad de recuperación postetánica. La rata taiep, estas propiedades no cambian significativamente durante las dos primeras semanas de edad. En motoneuronas, la estimulación intralaminar evoca PEPs glutamatérgicos, rápidos, de corta latencia. Sin embargo, en este mutante frecuentemente los PEPs iniciales son seguidos por potenciales sinápticos asincrónicos, cuyas latencias varían de 20 a 270 ms. El número de neuronas con actividad asincrónica, así como la frecuencia de los PEPs retardados aumentan con la edad. Estas tempranas alteraciones de la transmisión sináptica a nivel central revelan trastornos en la maduración de la maquinaria de liberación de las aferentes. Financiado por: ConicytChile, Proyecto Fondecyt 1991004 (MR) y Conacyt-México,31758-N y VPPII -2002 y VIEPII76G01 (JRE). C-91 C-92 EFECTO DE INHIBIDORES DE RECAPTURA DE AMINAS BIOGÉNICAS EN LOS EPISODIOS DE INMOVILIDAD DE LA RATA taiep. Cortés, M.C.*, Gavito, M.B.*, Ita, M.L.* y Eguibar J.R. Instituto de Fisiología B.U.A.P. Apdo. Postal 406, Puebla, Pue. México. EFECTO DEL ACIDO L-GLUTAMICO SOBRE EL REFLEJO DEL RASCADO EN GATOS TALAMICOS Y ESPINALES. Castillo, H.L., Hernández, H.C.*, Guerrero, C.H.* y Dueñas, J.S.H. Dpto. de Fisiología y Farmacología, Centro de Ciencias Básicas, UAA y Dpto. de Fisiología y Neurociencias, CUCS, UDG, México. Las aminas biogénicas han sido objeto de estudio en la fisiología y patología del sueño, debido a que se han involucrado a estructuras del puente y regiones adyacentes las cuales contienen noradrenalina y serotonina. En estas regiones hay neuronas activas durante el sueño paradójico (MOR-on) y neuronas que disminuyen su actividad durante esta fase del sueño (MOR-off). El Instituto de Fisiología de la BUAP cuenta con una sublínea de ratas de la cepa Sprague-Dawley denominada taiep. Esta rata ha sido propuesta como modelo de narcolepsia debido a que durante los episodios de inmovilidad (EI) se presentan signos electroencefalográficos similares a los del sueño de movimientos oculares rápidos (MOR), así como un patrón de sueño desorganizado y una corta latencia al primer sueño MOR. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de los inhibidores de recaptura de noradrenalina y serotonina en los EI inducidos por manipulación. Se utilizaron ratas macho taiep de 8.5 meses de edad, en condiciones estándar de bioterio. Las drogas fueron administradas i.p. a las 8 de la mañana. Los resultados muestran que la administración de imipramina no modificó la frecuencia de los EI (F(8,48)=0.99, p=0.45), sin embargo la desimipramina incrementó en un 100% los EI con las dosis mayores de 100, 300 y 1,000 µg/kg. Por el contrario, la clomipramina tiende a disminuir la frecuencia de los EI, siendo significativo este efecto con 300 µg/kg (χ(7)=21.7; p=0.003+ Dunnett*p<0.05). Estos resultados muestran que algunos subtipos de antidepresivos tricíclicos son efectivos para el tratamiento de este trastorno del sueño. Resultados similares han sido reportados en perros y humanos narcolépticos. Parcialmente financiado por CONACYT 31758-N, VPPII-BUAP 2002, VIEPII76G01 a JRE. MCC y MLI son becarias del CONACYT. Antecedentes. El incremento de las monoaminas serotonina (5HT), norepinefrina y dopamina y del ácido L-glutámico (GT) en los dializados obtenidos de la médula espinal del gato por maniobras que inducen la locomoción, ilustran la importancia de estos neurotransmisores en la activación de generadores centrales de patrones motores. Particularmente, la participación del GT en el reflejo del rascado (RR) en el gato no ha sido bien establecida, por lo que el objetivo de este trabajo fue el de estudiar el papel de este neurotransmisor en esta conducta motora. Metodología. Las observaciones se realizaron en gatos decorticados y espinalizados, paralizados con bromuro de pancuronium; se obtuvieron registros electroneurográficos de 8 nervios motores de la extremidad posterior. El GT fue aplicado en el núcleo intermedio en el ensanchamiento lumbar (1.5-3.5 nM/min), por períodos de 20 minutos. Resultados. El GT tiene un efecto facilitatorio sobre el RR tanto en el gato talámico como en el gato espinal, el cual se traduce en: i) incremento en la probabilidad de inducir el RR; ii) generación espontánea de episodios de rascado (ER); iii) incremento en la duración del ER; iv) favorece la aparición y prolongación del componente tónico inicial del ER que característicamente muestran los nervios flexores, sobre todo en el gato espinal; v) incrementa de manera relativa la duración de la fase de actividad con respecto a la de inactividad de cada ciclo de rascado; vi) cuando el GT se administra simultáneamente con 5HT, el efecto facilitatorio es mucho más importante. Los resultados anteriores muestran la importancia que tiene el GT sobre la activación del generador central del patrón motor del rascado, muy probablemente la 5-HT participa como neuromodulador del efecto excitatorio del GT. Apoyos: CONACYT (31792-N) y UAA (PIFF00-4). C-93 C-94 ELECTROPHYSIOLOGICAL STUDY OF LEG LENGTH DISCREPANCY ADOLESCENTS. Caudillo, C.*, Gamiño, S.M., Sotelo, F.*, Méndez, M.C.* and Cruz, E.* Línea de Invest. en Neurofisiología. IIST-U. de Guanajuato. ESTRUCTURA DE LOS LÓBULOS ANTENALES Y CONEXIONES EFERENTES HACIA LOS CUERPOS FUNGIFORMES EN LA HORMIGA Camponotus ocr eatus. López-Riquelme, G.O.*1, Gronenberg, W.*2 & Fanjul-Moles, M.L.1 1 Laboratorio de Neurofisiología Comparada de Invertebrados, Facultad de Ciencias, UNAM. 2Arizona Research Laboratories, Division of Neurobiology, University of Arizona. Limb length discrepancy (LLD), which affects up to 93% of the general population, has been associated with stress fractures, gait alterations and muscle-joint dysfunctions. Little attention has been focused to muscle and peripheric nerve electrical behavior in LLD. Our aim was to evaluate EMGs activity of paraspinal, pelvic and lower limb muscles and motor nerve conduction velocity (MNCV) in LLD-subjects. Methods: LLD-subjects were clinically and X-ray diagnosed for shortenings > 1 cm. EMGs recordings both in rest and maximal isometric voluntary contraction (MIVC) were obtained. MNCV was assessed during rest in posterior tibial nerve by supramaximal stimulation at 2.3 Hz and 0.3 ms pulses duration. Student’s “t” test, Wilcoxon Matched Pairs Test and Mann-Whitney’s “U” Test (alpha<0.05) statistical methods were used. Results: 19 LLD and 19 nonLLD controls were selected out of an initial sample of 819 high school students. Differences were found in MRV and RMS during MIVC in high lumbar paraspinal muscles, between short side in LLD group and the ipsilateral side in non-LLD group. (365.14 ± 46.31 vs 250.42 ± 86.80; P=0.03 and 503.04 ± 62.49 vs 330.52 ± 26.19; P=0.01 respectively). Similar results were found for PPA in semimembranosus muscles (810.25 ± 108.67 vs 1273.05 ± 143.39; P=0.008). Difference was found in MNCV(m/s) between both sides in non-LLD group (48.78 ± 4.27 vs 46.89 ± 4.40; p = 0.03). Conclusions: 1) selective EMGs differences between short and large sides of LLD subjects, and with corresponding sides of controls were found; 2) No EMGs differences between sides of non-LLD subjects were found; 3) MNCV is different between both legs of normal subjects, and 4) LLD adolescents displayed similar MNCV for both short and large legs. SIHGOCONACyT 19990202027 and 20000202008 Los cuerpos fungiformes (CF) están involucrados en el aprendizaje y memoria y en muchos insectos reciben prominentes aferencias olfativas. El objetivo de este trabajo fue determinar la estructura general de los lóbulos (olfativos) antenales (LA), y de sus conexiones eferentes hacia el cáliz de los CF. La estructura de los lóbulos antenales de obreras, reinas y machos de la hormiga Camponotus ocreatus fue comparada mediante el trazado anterógrado de los axones sensoriales en el nervio antenal. Para revelar las vías eferentes desde los LA hacia los CF, se depositaron trazadores fluorescentes dentro del LA. Después de la fijación, inclusión en plástico y seccionado, las preparaciones fueron observadas mediante microscopía epifluorescente o confocal. Encontramos dimorfismo sexual en los LA de C. ocreatus. Los lóbulos antenales de los machos, pero no de las reinas, contienen de 3-5 macroglomérulos, los cuales podrían estar involucrados en el procesamiento de feromonas sexuales. En las obreras, se encontraron 6 grupos de glomérulos, cada uno se encuentra inervado por una ramificación del nervio antenal y quizá procese diferentes clases de olores. Las eferentes de los LA se conectan con al menos tres capas diferentes en la región del labio del cáliz de los CF. Cada capa labial es inervada por diferentes tractos y recibe axones de diferentes grupos de glomérulos. Estos resultados sugieren que los grupos de glomérulos están representados topográficamente en la región labial de los CF, probable mente estableciendo alguna clase de gruesa odotopía. C-95 C-96 POTENCIALES RELACIONADOS CON EVENTOS CON PALABRAS CONOCIDAS Y DESCONOCIDAS EN NIÑOS MEXICANOS CLASIFICADOS COMO TARDÍOS. Lara Ayala, L.*(avalado por Raúl Paredes Guerrero), Rivera-Gaxiola, M.*, JacksonMaldonado, D.*, Silva-Pereyra, J* y García Sierra, A. Instituto de Neurobiología, UNAM, Center for Mind, Brain and Learning, Speech and Hearing Sciences Dept., University of Washingon, Seattle y Facultad de Lenguas y Letras, CELL, Universidad Autónoma de Querétaro, Qro. CORRIENTES SINAPTICAS EN UN CULTIVO ORGANOTIPICO DE LA RETINA, EFECTO DE LA CARENCIA DE LA PROTEINA GEFIRINA. Pérez-León JA*, (avalado por Sánchez Ramos MA), Wässle H* y Backus KH*. Instituto de Neurobiología, UNAM Campus Juriquilla, AP 1-1141 y Max Planck Institut für Hirnforschung, Deutschordenstrasse 46 D60 528, Frankfurt am Main Deutschland En este trabajo se utilizaron los Potenciales Relacionados con Eventos (PREs) para registrar la actividad cerebral asociada al procesamiento de palabras (sustantivos) conocidas y desconocidas en niños mexicanos monolingües. En este estudio participaron 30 niños de entre 20 y 37 meses de edad, clasificados como tardíos de acuerdo al Inventario del Desarrollo de Habilidades Comunicativas Mac Arthur (Jackson–Maldonado y cols, 1992). Todos los sujetos estaban por debajo del percentil 10 de las normas para hispanos. Durante el registro, cada sujeto escuchaba de manera pasiva una serie de 200 palabras en total: 10 conocidas y 10 desconocidas para él/ella, repetidas 10 veces cada una, las palabras utilizadas fueron seleccionadas de una lista individualizada obtenida a partir de entrevistas con la madre del sujeto. De manera simultanea a la estimulación auditiva se realizaba el registro electroencefalográfico continuo empleando gorras con electrodos pre-insertados con el sistema 10-20. El grupo final analizado fue de 12 sujetos subdivididos en 2 grupos: 20 a 26 y 30 a 36 meses de edad. Para ser aceptado para análisis, el sujeto debia tener al menos 25 segmentos libres de artefactos por tipo de palabra a promediar, un EEG aparentemente normal y no presentar antecedentes de riesgo perinatal. Los resultados de los PREs mostraron variación en la amplitud de distintos componentes de la onda de acuerdo con el tipo de palabra presentada y la edad del sujeto. No se observaron asimetrías hemisféricas en el grupo de participantes de menor edad. Todos los sujetos presentaron una latencia mayor que la reportada en sujetos normales (Mills et al., 1995). El grupo de sujetos de mayor edad mostró polaridades a la inversa con respecto a los de menor edad y a los previamente reportados. El presente estudio refuerza la noción de que los PREs son sensibles a tipos de palabras y que pueden ser utilizados para establecer diferencias de patrones de procesamiento neural y de desarrollo tanto en niños mexicanos normales como en ñiños que presentan una evolución atípica en la adquisición del habla. Donativo Conacyt Dra Maritza Rivera Gaxiola J28246-M Durante el desarrollo de la retina hay gran actividad sináptica espontánea, que es importante para completar la maduración neuronal. Este estudio se enfocó en la actividad sináptica espontánea en cultivos organotípicos de la retina de 2 cepas de ratones: silvestres y carentes de la proteína gefirina (gef -/-).En el cultivo organotípico pudieron distinguirse las capas celulares y sinápticas de la retina y se repitió la localización normal de algunas proteínas. Para los registros electrofisiológicos se escogieron células amacrinas (AC). En las AC de los cultivos de ratones silvestres encontramos 2 tipos de corrientes sinápticas espontáneas (SPCs): uno formado por SPCs inhibidas con kinurenato (SPCs glutamatérgicas) y otro tipo de SPCs que sólo se inhibió con una mezcla de bicuculina y estricnina. Clasificamos a éstas como inhibitorias, mediadas por el receptor tipo A de GABA (GABAAR) o por el receptor postsináptico de glicina (RGly). En las AC gef -/se registraron tanto SPCs glutamatérgicas como las mediadas por el GABAAR, pero no PSCs mediadas por RGly. Las SPCs del GABAAR en los cultivos gef-/- fueron de amplitud menor y decaimiento más rápido que en los silvestres, lo que indica la alteración de algunas sinapsis del GABAAR por la carencia de la gefirina. Este trabajo demuestra que la actividad sináptica espontánea es una característica de la retina en cultivo organotípico, por lo cual se convierte en un modelo para investigar la participación de los diversos receptores durante la ontogenia, y proporciona evidencia de la participación de la gefirina en la formación de algunas sinapsis del GABAAR. Surge la interrogante sobre las particularidades funcionales de las isoformas del GABAAR que se asocian con la gefirina. C-97 C-98 PAPEL DEL ÓXIDO NÍTRICO EN LA ACTIVIDAD AFERENTE VESTIBULAR DEL POLLO. Gómez,G.*,Flores,AIsasmendi,G.S.*¶,Galindo,F.*,Rocha,B.*,Corté s,E.*, Manjarrez, E*. Instituto de Fisiología y Escuela de Biología¶, BUAP. RECEPTORES A HISTAMINA EN NEURONAS PEPTIDERGICAS DEL ACOCIL AZUL CHERAX CUADRICARINATUS. Cebada, J* y García, U. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. Cinvestav, México. El objetivo de este trabajo es dilucidar el papel del óxido nítrico (NO) en la actividad eléctrica espontánea de las aferentes vestibulares durante el desarrollo embrionario, así como determinar si sus acciones son a través de la vía NO/cGMP. Empleamos una preparación in vitro del vestíbulo del embrión de pollo Gallus domesticus desde el día 15 embrionario (E15) hasta un día postnatal (P1). Utilizamos técnicas de registro extracelular unitario y multiunitario de la rama posterior del nervio vestibular. Empleamos por perfusión en el baño, un análogo del cGMP, el 8Br-cGMP (10-30µM; n=33) y encontramos un efecto excitador dependiente de la concentración. Para conocer la participación del receptor NMDA en esta respuesta, microinyectamos el agonista NMDA en concentraciones de 10µM-1mM (n=40) y observamos un incremento de la frecuencia de descarga de las aferentes. Cuando se aplicó simultáneamente con 8-Br-cGMP su efecto se potenció en un 50%. En otros experimentos bloqueamos al receptor NMDA con los antagonistas AP5 (n=7), 7-ClKyn (n=9) y MK-801 (n=5) en concentraciones de 1 a 100µM, observando que el efecto de 8-BrcGMP fue abolido. Al inhibir la síntesis de NO a través de LNOARG (10 µM, n=12) y L-NAME (10-100µM, n=23), se observa que ambos decrementan la frecuencia de descarga aferente de manera reversible y que en presencia de estos inhibidores, el efecto excitador de NMDA disminuye significativamente. Nuestros resultados sugieren que la síntesis de NO en este sistema se debe a la activación de los receptores NMDA por el neurotransmisor aferente (glutamato) y que ésta activación es indispensable para la acción de la vía NO/cGMP. A partir del sistema nervioso de la mosca de la fruta Drosophila melanogaster y mediante expresión funcional en ovocitos se han identificado dos cDNA que codifican para canales de cloro activados por histamina, denominados HisCl1 y HisCl2 que presentan entre sí una homología del 60% y del 45% con los receptores α3 de glicina de humano (Gisselman et. al. 2002 y Zheng et. al, 2002). El año pasado mostramos evidencias electrofisiológicas, farmacológicas y ensayos de unión específica con radioligandos tritiados en membranas aisladas que sugieren la presencia de dos tipos de receptores a histamina acoplados a canales de cloro en el neuronas del órgano X del acocil. Sin embargo, en vista de que dichas neuronas también expresan receptores ionotrópicos activados por glutamato y GABA cuya conductancia asociada es de cloro, en este trabajo exploramos, en condiciones de fijación de voltaje en la modalidad de célula completa la respuesta a histamina durante la perfusión de 1µM de glutamato, 10µM GABA y 10µM de glicina. La desensibilización que glutamato o GABA ejercen sobre sus propios receptores no modificó ni la amplitud, ni el curso temporal de la corriente inducida por histamina, es decir no observamos desensibilización cruzada. En el caso de la perfusión con glicina tampoco observamos modificaciones en la corriente de histamina, pero encontramos una subpoblación neuronal en la que la glicina provocó depolarización no asociada a incremento en la permeabilidad a cloro. Estos datos apoyan la noción de que los receptores a histamina presentes en las células del OX se activan de manera independiente a otras conductancias de cloro. Financiado por CONACYT proyecto J28904-N (Flores A) y beca 163699(Gómez R) y por Fondo de Estudios Ricardo J. Zevada. C-99 C-100 RETROALIMENTACIÓN DEL NO SOBRE LOS RECEPTORES NMDA EN EL VESTÍBULO DEL AXOLOTL. Ortega, A1*, López, C.1*, Chávez, H1,2* y Soto, E1. 1Instituto de Fisiología, 2 Facultad de Estomatología, B.U.A.P. AMPLITUD DEL SEGMENTO N1/P2 DEL POTENCIAL AUDITIVO EVOCADA DE LARGA LATENCIA COMO INDICADOR DE LA NEUROTRANSMISION SEROTONINERGICA . Herrera MR a*, Manjarrez GG a, Hernández ZE a*, Robles OA b*, Hernández-RJ c. aLaboratoriode Neuroquímica. UIM enEnfermedades Neurológicas. HospitaldeEspecialidadesybIngenieríaBiomédica,CMN, IMSSycCINVESTAV,IPN. El óxido nítrico (NO) es sintetizado a través de la sintasa de NO (NOS) y, en presencia de calcio, convierte a la arginina y O2 en citrulina y NO. En el oído interno del axolotl nuestro grupo de investigación ha reportado la presencia de la sintasa NADPH-d positiva, en las células ciliadas de las crestas de los canales semicirculares y la mácula del sáculo, en fibras que inervan los epitelios vestibulares y en los somas de las neuronas aferentes (Flores y cols., 1996). Se ha reportado que la activación de los receptores NMDA a través de los cuales fluye calcio, activa a la NOS y consecuentemente la producción de NO. Para probar esta hipótesis, hicimos experimentos con registro extracelular multiunitario en el oído aislado del axolotl (Ambystoma tigrinum), registramos la actividad eléctrica basal de las aferentes de los canales semicirculares. Encontramos que la microaplicación del Nmetil-D-aspártico (NMDA, 100µM n=14) produce un aumento en la descarga basal de 114.5 ± 12 %. Se perfundió por 10 minutos un inhibidor de la NOS, el L-NOARG (3, 30 y 100 µM). Después de la perfusión de L-NOARG (3 µM, n=4) el efecto excitador del NMDA (100 µM n=4) permanece como en el control. Cuando se perfunde el L-NOARG (30 µM n=5) el efecto excitador del NMDA (100 µM n=5) aumenta en un 11% con respecto al control (de 134 ± 7.2 %, a 145 ± 12.8 %), este aumento no fue estadísticamente significativo; sin embargo la perfusión de L-NOARG (100 µM n=5) produce un aumento en el efecto excitador del NMDA 100 µM de un 18% (229 ± 24.9 %, contra 247 ± 15.5%, esta diferencia es estadísticamente significativa p< 0.05). Nuestros resultados indican que el NO producido en las fibras aferentes por la activación de los receptores NMDA difunde al espacio sináptico e inhibe al receptor NMDA (retroalimentación negativa), como lo demuestra el hecho de que la inhibición de la NOS con el LNOARG, aumenta el efecto excitador del NMDA. Objetivo. Determinar si la amplitud del segmento N1/P2 del potencial auditivo evocado de larga latencia (PAELL) es un indicador periférico de la neurotransmisión serotoninérgica. Material y métodos. Ratas Wistar machos de 250 g de peso corporal adaptadas durante dos semanas a condiciones ambientales estándar. Después se formaron 4 grupos. Al primero se le administró L-triptofano (L-Trp) 100 mg; al segundo spiperona, 1 mg y al tercero quipazina, 3 mg/Kg de peso corporal y el cuarto grupo fue el control. A todas las ratas se les colocó electrodos en el vértex, en la región temporal y en la oreja. En seguida se les indujo el PAELL mediante un estímulo sonoro de 32 decibeles, 2 ms de duración, 1 Khz. de frecuencia y 200 repeticiones al azar, que fueron registrados en una tarjeta PCL812PG. Además se les determinó serotonina en la región auditiva de la corteza cerebral y L-Trp plasmático. Resultados. Las ratas tratadas con L-Trp y quipazina mostraron una disminución progresiva del segmento N1/P2 a partir del minuto 15 (p<0.001). Lo contrario se observó con spiperona, un aumento del segmento (p<0.01) y como era de esperarse la concentración del L-Trp plasmático y el neurotransmisor aumentaron a partir del minuto 30 de la administración del aminoácido (p <0.01). Discusión. La amplitud del segmento N1/P2 del PAELL disminuyó después de la administración del L-Trp y quipazina, secundario a un aumento de la 5HT cerebral. Al contrario, la spiperona aumentó la respuesta neuronal. Por lo tanto, proponemos a la amplitud del segmento N1/P2 del PAELL como un indicador periférico de la transmisión serotoninérgica cerebral. Este trabajo se llevó a cabo gracias a los donativos otorgados por la Coordinación de Investigación del IMSS y CONACYT de México. C-101 C-102 CONTROL DOPAMINÉRGICO DE LA TRANSMISIÓN GLUTAMATÉRGICA SUBTÁLAMO-NIGRAL. Ibáñez, O.* Hernández, A., Sierra, A. Valdiosera, R., Erlij, D. y Aceves, J. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV-IPN., México, D.F. EFECTO DE LA ACTIVACION DE LOS RECEPTORES SEROTONINERGICOS 5HT1A Y 5HT2A SOBRE LA LIBERACIÓN DE ACETILCOLINA PREFRONTOCORTICAL DE LA RATA. Pérez-Vega, M.I.1*, Morales-Villagrán, A.2, Feria-Velasco, A.3 y González-Burgos, Ignacio.1.1Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Morelia Mich.; 2Depto. Biol. Cel. y Molec. CUCBA, U. De G; 3 Coordinación de Actividades Académicas, CIATEJ, Guadalajara, Jal. MEXICO. Las neuronas del subtálamo expresan ARN mensajero que codifica receptores a dopamina del tipo D1, D2 y D3, y tónicamente excitan a las neuronas de la sustancia nigra reticulada (SNr). Hay evidencia (Rosales et al., 1997) de que los receptores del tipo D1 se hallan presentes no sólo en el soma de las neuronas subtalámicas sino también en las terminales presinápticas que envían a la SNr. La activación de estos receptores estimula la liberación de glutamato. Aquí exploramos el papel funcional de los receptores dopaminérgicos D1 y D2 en la transmisión glutamatérgica subtálamo-nigral, usando registros de fijación de voltaje en la configuración de célula completa (Hamill y cols., 1981). Se estimuló eléctricamente el núcleo subtalámico (NSt) y se registraron tanto potenciales (EPSPs) como corrientes (EPSCs) en las neuronas de la SNr. Para eliminar la entrada inhibitoria de tipo GABAérgico se adicionó un antagonista selectivo de los receptores a GABAA (bicuculina) a la solución externa. En estas condiciones los antagonistas selectivos de receptores a glutamato, el CNQX y AP5, eliminaron por completo los EPSPs, indicando que la vía subtálamo-nigral es exclusivamente glutamatérgica . La activación del receptor D1 por su agonista selectivo, el SKF 38393 (1 µM), incrementó marcadamente la amplitud de EPSPs, en tanto que la activación de receptores tipo D2 con su correspondiente agonista, el quinpirole, disminuyó la amplitud de los EPSPs. El bloqueo del receptor D2 con sulpirida incrementó las EPSCs, indicando la presencia de una inhibición tónica de la transmisión glutamatérgica por la dopamina endógena. Los presentes resultados muestran que la dopamina, a través de receptores D1 y D2, regula la entrada sináptica glutamatérgica del NSt hacia la SNr, modulando de esta forma la conducta motora de la rata. Financiado por el donativo CONACyT G34706-N La corteza cerebral prefrontal (CCPF) desempeña un papel importante en la organización la orientación espacial, el aprendizaje y la memoria de corto plazo (MCP). Dichos procesos se encuentran alterados en el curso de diversas psicopatologías neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer. En nuestro laboratorio hemos encontrado que la denervación serotoninérgica a la CCPF provoca una mayor eficiencia en la realización de tareas que requieren de la MCP. Sin Embargo, los mecanismos por los cuales ocurre lo anterior no se conocen aún de manera consistente. OBJETIVO. Debido a que los receptores 5HT1A y 5HT2A se encuentran sobre terminales colinérgicas (neurotransmisor involucrado importantemente en procesos cognoscitivos) en la CCPF, se evalúo el efecto de los agonistas a dichos receptores 8-OH-DPAT y ∝-Me-5HT sobre la liberación de acetilcolina (ACh) en la CCPF de la rata. MATERIAL Y METODOS. Se utilizaron 30 ratas hembra y se conformaron tres grupos, en el grupo experimental (E) se lesiono el núcleo del rafe dorsal por vía estereotáxica con 5,7-dihidroxitriptamina; al grupo control (C) se le sometió a la cirugía y se aplico la solución vehículo y, el grupo testigo intacto (T) no recibió ningún tratamiento, 20 días después se dividieron los grupos en 2 para la realización de microdiálisis en la CCPF. Se determinaron los niveles basales de serotonina (5HT) y ACh mediante HPLC y detección electroquímica. Posteriormente se les aplico a la mitad de los animales de cada grupo uno de los dos agonistas a través de la sonda de diálisis y se cuantifico la liberación de ACh. RESULTADOS. En la liberación de 5HT se observo en el grupo C un aumento respecto al T, en tanto que en el grupo E se registro una disminución respecto al T y al C; en cuanto a la liberación basal de ACh solo en el C hubo una disminución significativa respecto al T y al E, en tanto que después de la aplicación de ambos agonistas en todos los grupos se observo una disminución significativa de ACh excepto en el grupo E después de la aplicación del 8-OH-DPAT. DISCUSION. Los presentes resultados demuestran que la 5HT ejerce un efecto inhibidor sobre la liberación de ACh prefrontocortical y que los receptores 5HT1A y 5HT2A se encuentran involucrados de manera importante en el mecanismo mediante el cual la 5HT ejerce su efecto a nivel corticofrontal. C-104 C-103 EL TRATAMIENTO CRÓNICO CON LEVODOPA INCREMENTA LA SUPERSENSIBILIDAD DE LOS RECEPTORES D1 Y D2 DE LAS TERMINALES ESTRIADOPALIDALES Y ESTRIADO-NIGRALES DESPUÉS DE LA DENERVACIÓN DOPAMINÉRGICA. Rangel, C.*, Silva, I.*, Sierra, A.*, Florán, L.*, Aceves, J., y Florán, B. Lab. Neurofisiología. Lic. en Biología. UAQ. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. La denervación dopaminérgica produce supersensibilidad de los receptores dopaminérgicos D1 y D2 de los ganglios basales tanto presinápticos como somato-dendríticos, independiente de los cambios de expresión de mRNA. Así la denervación dopaminérgica potencia la estimulación o inhibición de la liberación de GABA mediada por los receptores D1 y D2. En esta ocasión decidimos explorar si el tratamiento crónico con l-dopa, principal fármaco empleado en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, revierte la supersensibilidad de los receptores D1 Y D2 observada en la denervación dopaminérgica. Se estudio la liberación de GABA radioactivo en rebanadas de sustancia nigra pars reticulada y globo pálido, provenientes de ratas lesionadas de manera unilateral con 6hidroxidopamina (8 µgrs.), en el haz del cerebro medio dos semanas antes del experimento y tratadas con L-dopa metil-ester (10 mgrs/kg peso i.p.) durante 20 días. Las rebanadas se incubaron por 30 minutos en 3H-GABA (10-8 M) y se perfundieron con una solución de Krebs alto K+ (15 mM). El tratamiento crónico con levodopa potenció aún mas la liberación de GABA estimulada por la activación de receptores D1 (389 ± 9 vs 290 ± 8 % ) sin modificar significativamente el valor de la EC50 (186 ± 167 vs 110 ± 58 nM), por el contrario para los receptores D2 palidales el tratamiento incremento aún más la sensibilidad de los receptores ( IC50= 520 ± 24 vs 6 ± 7 nM) sin modificar la inhibición máxima (43 ± 6 vs 42 ± 1 %). Estos datos sugieren que el tratamiento crónico con levodopa potencia la supersensibilidad de los receptores dopaminérgicos que produce la sola denervación y pueden ser importantes para entender la producción de discinesias durante el tratamiento del Parkinson con levodopa Patrocinado por el CONACyT donativo 38518-N. LA ACTIVACION DE RECEPTORES D2 POR LA LEVODOPA INHIBE LA LIBERACIÓN DE GABA EN EL GLOBO PALIDO DE RATAS HEMIPARKINSONICAS. Silva, I.*, Rangel, C.*, Florán, L.*, Aceves, J., y Florán, B. Lab. Neurofisiología. Lic. en Biología. UAQ. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. La levodopa estimula la liberación de GABA en los ganglios basales de ratas con lesión unilateral del sistema dopaminérgico a través de los receptores D1. Este efecto no requiere la descarboxilación de la l-dopa para formar dopamina (Florán et al 1991). En este trabajo estudiamos si la levodopa es capaz de activar per se los receptores presinápticos D2 del globo pálido que inhiben la liberación de GABA (Florán et al 1998). Se estudió la liberación de GABA radioactivo en rebanadas de globo pálido de ratas lesionadas de manera unilateral con 6hidroxidopamina (8 µgrs.), en el haz del cerebro medio, dos semanas antes del experimento. Las rebanadas se incubaron por 30 minutos en [3H]GABA (10-8 M) y presencia de β -alanina, se perfundieron con una solución de Krebs con alto K+ (15 mM), que contenía ácido nipecótico 10 µM y en presencia de SCH 23390 (100 nM) para prevenir la activación de los receptores D1. Los experimentos se realizaron en rebanadas provenientes del lado denervado. La levodopa (100 µM) inhibió significativamente la liberación de GABA (42±2%). La inhibición fue bloqueada completamente por la adición conjunta del antagonista selectivo de los receptores D2, el l-sulpiride (10 µM), indicando que el efecto se debe a la activación de receptores D2. La presencia del inhibidor de la descarboxilasa de los aminoácidos aromáticos NSD 1015 (500 µM) no modificó la acción de la levodopa sobre la liberación de GABA (inhibición 39±3 %). El efecto de la levodopa fue dependiente de la dosis (IC50=0.480 µM). Estos resultados sugieren que no se requiere la transformación de la levodopa en dopamina para que ejerza sus efectos, es decir que no se requiere la descarboxilación de la levodopa para la activación de los receptores dopaminérgicos. Esto puede ser importante para entender el mecanismo por el cual la levodopa promueve la actividad locomotora en pacientes de Parkinson. Patrocinado por el CONACyT donativo 38518-N. C-105 C-106 LA DOPAMINA VIA RECEPTORES D4 REGULA LA LIBERACIÓN DE GABA, EN EL NÚCLEO RETICULAR DEL TALAMO. Floran, L.*, Núñez, A.*, Erlij, D.*, Floran, B., y Aceves, J. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. LA MELATONINA ACTIVA A LA PROTEINA CINASA C ASOCIADA A LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS EN AUSENCIA DE RECEPTORES MEMBRANALES. HernándezGutiérrez, M.E.,*1 Ramírez-Rodríguez, G.B., *1 Bellon-Velasco A., *1. Benítez-King, G.,1 Antón-Tay, F.2 1Depto. Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría, 2Depto. Biología de la Reproducción, CBS, Universidad Autónoma MetropolitanaIztapalapa. México, D.F. El papel de los receptores dopaminérgicos presentes en el núcleo reticular del tálamo (NRT) en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson y la esquizofrenia aún no se entiende. El NRT recibe aferentes dopaminérgicas procedentes de la sustancia nigra pars compacta y GABAérgicas del globo pálido. Los efectos de la dopamina estarían mediados por receptores D1 y D4 que han sido demostrados en el núcleo. Sin embargo, hasta la fecha no se conoce cual es el efecto de la dopamina que median estos receptores. Se ha sugerido que pudieran regular la transmisión glutamatérgica.. En este trabajo estudiamos el efecto de los agonistas de los receptores D1 y D2 sobre la liberación de GABA en el NRT y aquí presentamos los resultados obtenidos. Se obtuvieron rebanadas de NRT de ratas normales, las cuales se incubaron por 30 minutos en 3 H-GABA (10-8 M). Las rebanadas se perfundieron con una solución de Krebs alto K+ (20 mM), que contenía ácido nipecótico. Se estudio la consecuencia de la activación de receptores D1 con SKF 38393 y D2 con quinpirole. El quinpirole produjo inhibición de la liberación de GABA, dependiente de la concentración (IC50=108 nM), mientras que el SKF 38393 no afectó la liberación del aminoácido. La inhibición de la liberación producida por el quinpirole fue antagonizada de manera dosis dependiente por el raclopride (EC50= 390 nM) y la clozapina (EC50= 1.3 nM). Dado que los receptores dopaminérgicos del tipo D4 se caracterizan por su alta afinidad a la clozapina, estos datos sugieren que el subtipo de receptor dopaminérgico activado por el quinpirole corresponde al D4 y que su función es la de regular la transmisión GABAérgica. Estos resultados ayudan a entender el efecto de la clozapina en el tratamiento de la esquizofrenia y a entender en rol de la dopamina en el núcleo reticular del tálamo. Patrocinado por el CONACyT donativo G34706-N. C-107 EFECTO DE LA MELATONINA SOBRE LA FOSFORILACION DE LA SINAPSINA I Y LAS MARCKS EN UNA PREPARACION DE SINAPTOSOMAS DE HIPOTALAMO DE LA RATA. Benítez-King, G. 1, RamírezRodríguez, G.B *1. Antón-Tay, F.2 Hernández-Gutiérrez, M.E.*1 1 Depto. Neurofarmacología, SIC, Instituto Nacional de Psiquiatría, 2 Depto. Biología de la Reproducción, CBS, Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México, D.F. Se ha demostrado que la melatonina (MEL) inhibe la actividad de la proteína cinasa II dependiente de Ca+2-calmodulina (CaM-Cinasa II) y de la fosfodiesterasa del AMPc. La MEL, además, activa a la proteína cinasa C?(PKC) en células de neuroblastoma N1E-115. En el Sistema Nervioso Central la hormona modifica la síntesis y liberación de neurotransmisores. En particular, en el hipotálamo de la rata la MEL (1 nM) estimula la liberación de 3H- dopamina (DA). En la neurosecreción de la DA participa la fosforilación de la sinapsina I mediada por la CaM-Cinasa II y la proteína cinasa A (PKA) y las proteínas ricas en residuos de alanina miristolada (MARCKS) mediada por la PKC.. En el presente trabajo se estudió el efecto de la MEL sobre la fosforilación de la sinapsina I y de las MARCKS, en una preparación de sinaptosomas obtenida de hipotálamo de la rata. Los sinaptosomas se incubaron con 32Portofosfato en presencia de MEL o del vehículo y se cuantificó la fosforilación de la sinapsina I y de las MARCKS por densitometría, previa inmunoprecipitación e identificación de estas proteínas por Western Blot. En todos los casos, la funcionalidad de la preparación sinaptosomal se probó determinando la liberación de DA evocada por KCl. Los resultados mostraron que en los sinaptosomas despolarizados con KCl, la MEL a una concentración de 1 nM aumentó la fosforilación de la sinapsina-I y la de las MARCKS de manera significativa. Los resultados sugieren que la MEL inhibe la actividad de la fosfodiesterasa del AMPc y por este mecanismo aumenta la fosforilación de la sinapsina-I mediada por la PKA. También, que la fosforilación de las MARCKS se debe a la activación de la PKC por la MEL. Apoyado CONACYT 31782-N. La MEL activa selectivamente a la PKC alfa en las células de neuroblastoma N1E-115 y causa un incremento en la fosforilación de vimentina y la reorganización de los filamentos intermedios (FI) de vimentina. En preparaciónes de citoesqueletos in situ, la hormona induce una redistribución de los FIs alrededor del núcleo. Se ha descrito que la formación de neuritas en las células N1E-115 se debe a la estimulación del receptor membranal mt1 a melatonina. Con el objeto de valorar la participación de estos mecanismos en la organización del citoesqueleto, en este trabajo estudiamos la actividad de MEL en una preparación de FIs, desprovista de membrana plasmática (los FI se caracterizaron por microscopía electrónica.) y en las células N1E-115. Los parámetros de valoración fueron: la unión de 125I-MEL a FIs, la actividad de la PKC en los FI aislados así como su distribución. La actividad de MEL se evaluó en presencia del agonista de la PKC, el PMA y de los antagonistas a PKC alfa (anticuerpo anti-PKC alfa) y al receptor mt1 (luzindol). Los resultados mostraron que la 125I-MEL se une a los FIs con una Kd = 57 nM y una Bmax = 2100 ftm/mg de proteína.. La MEL (1 nM) y el agonista de la PKC, el PMA, estimularon la actividad de la cinasa en un 15%. El anticuerpo anti-PKC alfa bloqueó la reorganización de los FIs inducida por MEL. En cambio, las IgGs inespecíficas y el péptido inhibidor del anticuerpo anti-PKC alfa no tuvieron este efecto. El luzindol (1nM10uM) no bloqueó la reorganización de los FI causada por MEL en las células N1E-115. Los resultados indican que la interacción de la MEL con la PKC es selectiva, directa y no es mediada por la estimulación del receptor membranal mt1. Apoyado por CONACYT donativo No 31782-N. C-108 EL HIPOTIROIDISMO MODIFICA LA POBLACIÓN DE RECEPTORES CEREBRALES α1-ADRENÉRGICOS Y DE AMPC. Ortiz-Butrón R.1+, Hernández-García A.1*, Briones-Velasco M.2* and Rocha L.3. 1Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., 2INP “Ramón de la Fuente”, 3Depto. de Farmacobiología, CINVESTAVI.P.N. México, D.F. Se ha demostrado que un estado hipotiroideo en ratas, provoca una mayor susceptibilidad a convulsiones inducidas con PTZ. Igualmente se ha encontrado, que agentes que disminuyen la concentración de AMPc, como la reserpina, favorecen la inducción de convulsiones con PTZ. De tal forma que se ha sugerido, que la inhibición de las crisis convulsivas producidas al administrar forskolina, potente activador de la adenilato ciclasa, se debe al aumento de la concentración de AMPc. Por otro lado, existen evidencias de que la T3 sirve como co-transmisor con la noradrenalina en el SNC. El objetivo del trabajo es el de evaluar la población de receptores α1-adrenérgicos y de AMPc en ratas macho adultas en dos condiciones: eutiroideas (n=8) e hipotiroideas (n=8). Estas últimas recibieron metimazol disuelto en el agua de beber (60 mg/Kg/4 semanas). Los cerebros se congelaron a –70ºC hasta realizar la técnica de autorradiografía in vitro. Las hipotiroideas presentaron una disminución en la población de receptores α1adrenérgicos en diferentes regiones entre ellas las cortezas frontal (67.6%), temporal (56.5%) y piriforme (58.2%), amígdala medial (42.8%), basolateral (67.2%) y central (68.5%). Mientras que la unión de AMPc aumentó en corteza parietal (5.2%), temporal (49.8%) y entorrinal (19.6%), amígdala medial (34.8%), basolateral (27.4%), central (13.9%), giro dentado (30% y región CA1-3 hipocampales (7.0%). Estos resultados sugieren que la T3 tiene un papel modulador en el SNC y su deficiencia es uno de los factores que modifica la excitabilidad cerebral, afectando el proceso convulsivo. + Becaria DEDICT-COFAA-IPN. Este proyecto es apoyado por CONACyT 31702-M y DEPI-IPN 970509. C-109 C-110 PARTICIPACION DEL RECEPTOR 5-HT2 EN LA REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LA BOMBA DE SODIO Y POTASIO EN TEJIDO CEREBRAL DE RATA ADULTA. Medina, R.J.P.*, Mercado, C. R*., Boyzo, M. A**. y Hernández-R., J**. * Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Lab. de Neurontogenia, Depto. Fisiología,, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV-I.P.N. Fac. de Medicina. U.A.Q. EFECTO DE INHIBIDORES Y ACTIVADORES DEL TRANSPORTE DE GLUTAMATO SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA BOMBA DE SODIO Y POTASIO EN CELULAS GLIALES DE BERGAMANN. Guzmán, C.B*., Mercado, C.R*., Gamboa, E.C**., y Ortega, A.** *Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Depto. de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN. Trabajos previos de nuestro laboratorio han mostrado que la actividad de la bomba de sodio y potasio glial es regulada por el neurotransmisor serotonina (5-HT) principalmente en áreas que tienen una importante innervación serotoninérgica como la corteza cerebral, el hipocampo y el cerebelo y en esta regulación se ha identificado la participación de los receptores 5-HT1A en la corteza cerebral e hipocampo y 5-HT6 en el cerebelo. Resultados de la estimulación de la bomba de sodio con 8-OH-DPAT, sugieren la presencia de otro tipo de receptor que participa en la regulación de la bomba y muy probablemente sea el 5-HT2,por lo que el objetivo del presente trabajo fue determinar si este receptor participa también en la regulación de la bomba. Se emplearon homogeneizados de corteza cerebral, cerebelo y glía aislada por bulto de la corteza cerebral de ratas macho adultas. Se midió la actividad de la bomba de sodio y potasio en ausencia y presencia de 120 µM de α-metil-5-OH-Triptamina (me-5-HT) y 120 µM de espiperona. Los resultados muestran un aumento de un 50% en la actividad de la bomba de sodio y potasio en corteza cerebral y en células glíales con la me-5-HT, en cerebelo no hubo aumento en la actividad. Con espiperona no observamos estimulación de la actividad de la bomba de sodio y potasio. La participación de este receptor en la activación de la enzima puede tener relevancia en la fisiopatología del fenómeno convulsivo. El glutamato (Glu) es el principal neurotransmisor excitador del Sistema Nervioso Central de los vertebrados. El exceso de Glu es retirado por el transportador Glu/Aspartato (GLAST) dependiente de sodio por las células glíales de Bergmann (CGB), este transportador utiliza gradientes electroquímicos de protones y de iones sodio y potasio como fuerza motriz para transportar al Glu. Por otro lado la bomba de sodio y potasio participa en forma activa en diversas funciones celulares, se ha propuesto que este sistema enzimático es regulado por el neurotransmisor serotonina y siendo el transporte de Glu dependiente de sodio nos propusimos en el presente estudio explorar la posibilidad de que al inhibir y estimular el transporte de Glu se modifique la actividad de la enzima. Se obtuvieron cultivos de CGB a partir del cerebelo de embriones de pollo de 14 días, los cuales fueron tratados con TPA y con Glu y se midió la captura del Aspartato, también se midió la actividad de la bomba de sodio y potasio en estos grupos. Los resultados del tratamiento con TPA y con Glu muestran una drástica reducción en la captura de [3H]-D-aspartato, mientras que la actividad basal de la bomba de sodio y potasio se incrementó significativamente en un 30% en el grupo tratado con Glu y disminuyó en un 20% en el grupo tratado con TPA comparados con el grupo control. Los presentes resultados sugieren una interrelación entre los mecanismos de regulación del transportador GLAST y la bomba de sodio y potasio en Células Gliales de Bergmann. C-111 C-112 IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION FARMACOLOGICA DEL RECEPTOR 5-HT1A EN CONOS DE CRECIMIENTO AXONAL. Mercado, C. R*., Báez, V.E*., Ortíz, A. R*., Boyzo, M. A**. y Hernández-R., J**. * Lab. de Neurobiología de la Escuela de Químico Farmacobiología de la U.M.S.N.H. ** Lab. de Neurontogenia, Depto. Fisiología,, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV-I.P.N. Fac. de Medicina. U.A.Q. THE CB1 CANNABINOID RECEPTOR CAN SEQUESTER GPROTEINS, MAKING THEM UNAVAILABLE TO COUPLE TO OTHER RECEPTORS. Vásquez, C.* (avalado por García Esperanza) and Lewis, D.* Department of Pharmacology and Toxicology, Medical College of Georgia, Augusta, GA, USA. Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima, Colima, México. El cono de crecimiento axonal (CCA) participa en forma importante durante el desarrollo del Sistema Nervioso Central, particularmente en los fenómenos de axogénesis y sinaptogénesis. La serotonina (5HT) es un neurotransmisor clásico que participa en diversas funciones del cerebro adulto, existen evidencias de que participa también en la regulación de la neurogénesis posiblemente como un factor trófico. Trabajos previos de nuestro laboratorio han mostrado que el CCA tiene un sistema molecular de reconocimiento para la 5-HT en el que se observaron sitios de unión de alta afinidad. El objetivo del presente trabajo fue identificar el o los tipos de receptores serotoninérgicos presentes en el CCA. Se aislaron CCA a partir de tejido cerebral fetal de rata de 17 días de gestación mediante procedimientos de centrifugación diferencial, se realizaron curvas de unión con (3H)5-HT, (3H) 8-OH-DPAT, así como curvas de desplazamiento con 5-HT, espiperona y 8-OHDPAT. Los resultados mostraron que la (3H)5-HT fue desplazada con una alta afinidad por la espiperona y la 8-OH-DPAT, el desplazamiento con 5-HT fría mostro una curva bimodal, se obtuvo una curva de unión de (3H) 8-OH-DPAT de alta afinidad con una Kd= 1.7 nM y una Bmax de 27 pmolas de 8-OH-DPAT/mg. Prot. Con estos resultados y los obtenidos previamente podemos concluir que en estructuras representativas de la diferenciación neuronal activa (CCA) esta presente el receptor 5-HT1A, lo que complementa y apoya el papel funcional de la 5-HT en el cerebro fetal. We tested the hypothesis that human CB1 cannabinoid receptors (hCB1) can sequester Gi/o-proteins from a common pool and prevent other receptors from signaling. Human CB1 cannabinoid receptors were expressed in superior cervical ganglion (SCG) neurons by microinjection of hCB1 cDNA. Expression of hCB1 cannabinoid receptor abolished the Ca2+ current inhibition by endogenous pertussis toxin-sensitive Gi/o-coupled receptors for norepinephrine (NE) and somatostatin (SOM) but not by endogenous pertussis toxin-insensitive Gs-coupled receptors for vasoactive intestinal polypeptide. Signaling by NE was rescued by expression of GαoB, Gβ1 and Gγ3. Expression of mGluR2 metabotropic glutamate receptors, another pertussis toxin-sensitive G-protein-coupled receptor, had no effect on the signaling by NE or SOM. hCB1 receptors were constitutively active because the cannabinoid receptor inverse agonist SR141716A enhanced the Ca2+ current. Some hCB1 receptors also appear to be precoupled to Gi/o-proteins because the cannabinoid agonist WIN 55,212-2 decreased the Ca2+ current at a time when no G-proteins were available to couple to α2-adrenergic and somatostatin receptors. In SCG neurons microinjected with a lower concentration of hCB1 cDNA, the effect of SR 141716A was reduced, and the response to NE and SOM was partially restored. Subsequent to the application of SR 141716A, the Ca2+ current inhibition by NE and SOM was abolished. These results suggest that both the active and inactive states of the hCB1 receptor can sequester Gi/o-proteins from a common pool. Cannabinoid receptors thus have the potential to prevent other Gi/o-coupled receptors from transducing their biological signals. C-113 HIPOCAMPO DE RATAS TRATADAS NEONATALMENTE CON ESPARTEINA. M. E. Flores-Soto a], J. Bañuelos-Pineda b] y C. Beas-Zárate a,c a . Lab. de Neurobiol. Cel. y Molec., Div. Neurociencias, C.I.B.O., IMSS. Guadalajara, Jalisco, Mexico, bLab. De Morfofisiologia., Div. Medicina Veterinaria., CDepto. Biol. Cel. y Mol., C.U.C.B.A., U. de G., Guadalajara, Jalisco, Mexico. El género Lupinus pertenece a las Fabácea, poseen una alta concentración de alcaloides quinolizidinicos (AQ). Los AQ más importante es la esparteína, que actúan como agonista de los receptores colinérgicos, principalmente de tipo muscarínico. Posee propiedades medicinales y produce efectos neurotóxicos en el SNC cuyo mecanismo se desconoce. Por lo que en el presente trabajo se estudió la dosis-respuesta de la esparteína a través de cambios morfológicos característicos de neurotoxicidad y los niveles de expresión de los receptores a acetilcolina de tipo muscarínico en la corteza cerebral motora y el hipocampo, después del tratamiento neonatal con esparteína. Se utilizaron ratas recién nacidas de la cepa Wistar, las cuales fueron se dividieron en: Grupo testigo: animales intactos. Grupo experimental: animales que recibieron 25 mg por kilogramo de peso corporal de esparteína, por inyección subcutánea, los días 1 y 3 días de edad postnatal. Después del tratamiento, algunos animales se utilizaron para estudios de microscopía óptica. Otros animales fueron para evaluar los niveles de expresión de las subunidades m1, m2 y m3 del receptor para acetilcolina a los 7, 14, 21 y 60 días de edad. Los resultados de microscopia óptica muestran que la administración neonatal de esparteina produjo acidofilia y gliosis, en la corteza cerebral frontoparietal y somatosensorial y en la región CA1, CA2 y CA3 del hipocampo a los de 7 y 14 días de edad posnatal y a los 21 días de edad se observó vacuolizaciòn neuronal, indicativo de muerte neuronal. La administración neonatal de esparteína disminuyó los niveles de expresión del RNAm de las subunidades m1, m2 y m3 en la corteza cerebral a los 7, 14, y 21 días de edad postnatal. Pero a los 60 días de edad no se modificó la expresión de éstas subunidades estudiadas. En el hipocampo de ratas de 7, 14 y 21 días de edad se observa que dicho tratamiento también disminuye los niveles de expresión del RNAm de las subunidades m1, m2 y m3. A los 60 días de edad se observó sólo disminución en la subunidad m3. Estos resultados indican que después del daño neuronal existe una disminución en los niveles de expresión del RNAm de las subunidades del receptor a acetilcolina de tipo muscarinico. Lo que sugiere que estas subunidades podría tener un papel importante en los mecanismos que llevan a la muerte neuronal. Trabajo financiado parcialmente por CONACyT, 30901-M a C.B.Z. y Beca No. 158691 C-114 DISTRIBUCIÓN ANATOMICA DE LA NOCICEPTINA/ ORFANINA FQ, EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DEL AMBYSTOMA MEXICANUM. Mucio-Ramírez S.*, Miller-Pérez C.*, Sánchez-Islas E.*, Antón B.*, León-Olea M. Lab. de Histología y Microscopía Electrónica, Lab. de Neurobiología Molecular, Inst. Nal. Psi. México D.F. El receptor ORL-1(Opioid Receptor Like 1) y su ligando endógeno, la Nociceptina/Orphanina FQ (N/OFQ) son nuevos miembros de la familia de los opioides. Se expresan ampliamente en el Sistema Nervioso Central (CNS). Participan en la modulación de diversas funciones cerebrales como: la nocicepción, funciones motoras, sensoriales, procesos cognoscitivos y neuroendocrinos, así como en la memoria y aprendizaje. Está documentado que los péptidos opioides endógenos están conservados a través de la filogenia. Por lo que, es relevante investigar la existencia y la distribución de la N/OFQ en el cerebro de los anfibios. En este estudio se llevó a cabo la distribución anatómica de la N/OFQ en el CNS del Ambystoma mexicanum por medio de técnicas inmuno-histoquímicas. Nuestros resultados mostraron que la inmunorreactividad (IR) a N/OFQ en el cerebro del axolotl, se distribuye principalmente en células y fibras del núcleo estrio-amigdalino, comisura anterior, habénula, quiasma óptico, eminencia media, lóbulo intermedio de la hipófisis y la adenohipófisis. En el hipotálamo, adenohipófisis, tectum, formación hipocampal, tálamo dorsal y el núcleo olfatorio se encontraron grupos de entre 20 y 30 neuronas con moderada IR. Existen neuronas IR en la periferia de los vasos sanguíneos del hipotálamo y del núcleo estriado. La N/OFQ tiene una distribución amplia en el SNC del A. mexicanum, con una localización similar a la reportada en los mamíferos. Esta distribución sugiere que la N/OFQ participa en diferentes funciones cerebrales, hormonales y neurosecretorias en el A. mexicanum como las reportadas para la rata y el ratón. Agradecimientos: asistencia técnica de F. Camacho parcialmente financiado por CONACYT-MLO-29150-N C-115 C-116 EFECTO DEL ABATIMIENTO DE SEROTONINA PREFRONTOCORTICAL SOBRE LA DENSIDAD DEL RECEPTOR 5HT2A DE LA CORTEZA CEREBRAL PREFRONTAL DE LA RATA. Soria-Fregoso,C 1*., Pérez-Vega, M.I.1* Beas-Zarate, C 2, Feria-Velasco, A 3 y González-Burgos, Ignacio.1.1Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Morelia Mich.; 2Centro de Investigación Biomédica de Occidente, IMSS. 3Coordinación de Actividades Académicas, CIATEJ, Guadalajara, Jal. MEXICO. PAPEL DE LA DOPAMINA EN EL GLOBO PALIDO EN LA HIPERACTIVIDAD LOCOMOTORA PRODUCIDA POR LA METANFETAMINA. Liy S. G.,* Anaya M. V.,* Nuñez D.A.* y Aceves J. Depto. Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. Neurociencias, UIICSE, FES-Iztacala-UNAM. La innervación serotoninérgica a la corteza cerebral prefrontal (CCPF) esta involucrada en la organización de la memoria de corto plazo (MCP) mediante la activación de sus receptores en esta región cerebral, misma que se ve deteriorada en diversos tipos de demencias como la de tipo Alzheimer en la que existe una disfunción de la actividad serotoninérgica conjuntamente con alteraciones en la densidad de sus receptores. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio han mostrado que la denervación de aferencias serotoninérgicas a la CCPF provoca una disminución en la liberación de serotonina frontocortical; así como, una mayor eficiencia en la realización de pruebas en las que se evalúa la MCP y modificaciones en la citoarquitectura de neuronas piramidales de dicha región cortical. Se sabe que el receptor 5HT2A se localiza en la CCPF tanto sobre interneuronas como en neuronas piramidales y que mediante la activación de elementos sinápticos inhibitorios y excitatorios resulta esencial para la organización de la MCP. Por lo que en el presente trabajo se determino la densidad de este receptor mediante la unión de [3H]ketanserina (4nM) en la CCPF. MATERIAL Y METODOS. Se utilizaron 30 ratas hembra y se conformaron tres grupos, en el grupo experimental (E) se lesiono el núcleo del rafe dorsal por vía estereotáxica con 5,7dihidroxitriptamina; al grupo control (C) se le sometió a la cirugía y se aplico la solución vehículo y, el grupo testigo intacto (T) no recibió ningún tratamiento, 20 días después de la cirugía se determino la unión de [3H]-ketanserina en todos los grupos. Los resultados muestran un incremento en la unión de [3H]ketanserina en el grupo E con respecto al grupo C y T. Los presentes resultados conjuntamente con los obtenidos previamente demuestran que existe un efecto plástico posináptico aparentemente de tipo compensatorio posiblemente para captar los bajos niveles de serotonina existente en el grupo E, que pudiesen estar mediando las posibles alteraciones en la transmisión de información cortical que subyace a la expresión conductual de la MCP. Hasta hace poco no se daba importancia a la inervación dopaminérgica que va de la sustancia nigra compacta al globo pálido externo (GP), sin embargo ésta parece jugar un papel medular en el control que ejercen los ganglios básales sobre la actividad motora. Por la información que se tiene acerca de la acción de agonistas dopaminérgicos sobre la liberación de dopamina en el cuerpo estriado, se ha sugerido una relación similar en el GP. Por ello exploraremos el efecto de agonistas y antagonistas dopaminérgicos sobre liberación de dopamina (DA) en el GP de rata, correlacionando los efectos con la actividad motora. Con este fin se emplearon ratas macho de la cepa Wistar albino (250+10 gr.) a las que se implantó unilateralmente una guía para cánula de microdiálisis (MDS) en el GP; dos días después se colocó la cánula (CMA 1mm de membrana) y se perfundió ringer a un flujo de 2.5 µl/min. El sistema se estabilizó durante dos horas y se colectaron muestras cada 15 min., una vez obtenidas 3 muestras consecutivas con variación menor al 10% se inicia la administración de los fármacos. Se formaron 3 grupos experimentales: en el primero se inyectó metanfetamina (5 mg/Kg s.c.), en el segundo grupo se adicionó al ringer el agonista D2 quinpirole (200 µM por MDS), y en el ultimo grupo se adicionó el antagonista D2 sulpiride (200 µM por MDS). Los resultados muestran que la aplicación de metanfetamina disminuye (60%) los niveles extracelulares de dopamina. El quinpirole también disminuye (alrededor del 60%) los niveles extracelulares de DA, en tanto que el sulpiride aumenta los niveles (200%). La disminución de la DA inducida por la metanfetamina coincide con el aumento de la actividad motora que este fármaco produce, en tanto que el incremento producido por el sulpiride esta asociado a una disminución marcada de la actividad motora. Los resultados indican que contrariamente a lo esperado, la actividad motora de la rata esta asociada a un decremento de los niveles de dopamina en el globo pálido externo, debido a una posible inhibición de la activación de los receptores D1 presentes en las colaterales estriado-nigrales en el GP facilitando así la liberación de GABA. Proyecto financiado por el donativo G34706-N de CONACyT. C-117 C-118 LOS RECEPTORES PARA CANABINOIDES CB1 DEL GLOBO PALIDO REQUIEREN LA COACTIVACIÓN DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS D1 Y D2 PARA MODULAR LA CONDUCTA MOTORA. Oviedo, A.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Neurociencias. FESIztacala UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. LA ACTIVACION DE RECEPTORES NMDA PRODUCE CONDUCTA DE GIRO IPSILATERAL EN EL GLOBO PALIDO Y GIRO CONTRALATERAL EN LA SUSTANCIA NIGRA PARS RETICULATA DE LA RATA. Nava, C.*, González, B.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Ciencias Biológicas. Fac. Ciencias UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. El globo pálido tiene la densidad mas alta de receptores para canabinoides del tipo CB1 en el sistema nervioso central. Estos se encuentran localizados en las terminales de la vía GABAérgica estriado-pálidal y la glutamatérgica subtálamo-pálidal. En estas terminales colocalizan con receptores dopaminérgicos del tipo D2 y D1 respectivamente. Los efectos motores de la administración de canabinoides parecen estar mediados por la dopamina, por ello en este trabajo estudiamos la interacción de los receptores a dopamina y CB1 en el globo pálido sobre la actividad locomotora. Se realizaron microinyecciones intrapalidales unilaterales de el agonista de los receptores a canabinoides CB1 el ACEA (10 µgrs), en ratas inyectadas 10 minutos antes ya sea con SKF 38393 (10 mgrs/kg s.c.), quinpirole (1 mgr/kg s.c.), metanfetamina (10 mgrs/kg s.c.) o bien con una mezcla de SKF y quinpirole., y se determinó el efecto motor a través del estudio de la conducta de giro que se producía. El ACEA produjo conducta de giro en ratas pretratadas con metanfetamina y la mezcla de los agonistas de los receptores D1 y D2 ( 6.86 ± 0.57 y 6.00 ± .98 giros/minuto respectivamente). El ACEA no produjo conducta de giro por sí solo; tampoco la produjo en ratas pretratadas con SKF 38393 o quinpirole. Estos datos sugieren que el efecto motor de la activación de los receptores a canabinoides, presentes en el globo pálido requiere la coactivación de los receptores para dopamina. Es decir, los canabinoides aparentemente modulan la acción dopaminérgica mediada por receptores tanto D1 como D2 en el globo pálido de la rata. Se ha sugerido que los receptores NMDA estimulan la liberación de dopamina proveniente de las proyecciones de la sustancia nigra pars compacta a el globo pálido y la sustancia nigra pars reticulata. En este trabajo se estudió el papel de los receptores NMDA palidales y nigrales en el control motor y su interacción con los receptores para dopamina. Se realizaron microinyecciones unilaterales de NMDA en la sustancia nigra y el globo pálido de ratas macho adultas y se estudió el efecto motor a través de la cuantificación de la conducta de giro. El NMDA intrapalidal (20 µgrs), produce conducta de giro ipsilateral al sitio de la inyección (118 ± 23 giros en 2 horas; velocidad máxima 6.38 ± 1.68; n=13) mientras que la inyección intranigral de NMDA (10 µgrs), produce giro contralateral al sitio de la inyección ( 220 ± 64; velocidad máxima 5.38 ± 2.44; n=8). El antagonista selectivo de los receptores dopaminérgicos del tipo D1, el SCH 23390 ( 10 mgrs/kg s.c.), bloqueó por completo los giros inducidos por el NMDA en ambos núcleos. Estos resultados confirman que los efectos motores de la activación de los receptores NMDA estimulan la liberación de dopamina en la sustancia nigra reticulata y el globo pálido y que sus efectos motores están mediados por la activación de receptores dopaminérgicos activados por la dopamina liberada. Patrocinado por el CONACyT donativo G34706-N. Patrocinado por el CONACyT donativo 38518-N. C119 C-120 EFFECTO MOTOR DE LOS RECEPTORES GABA-B PRESENTES EN EL GLOBO PALIDO. González, B.*, Nava, C.*, Erlij, D.*, Aceves, J. y Florán, B. Posgrado en Ciencias Biológicas. Fac. Ciencias UNAM. Depto de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV-IPN. LOS RECEPTORES DE DOPAMINA TIPO D1 PUEDEN MODULAR LAS CORRIENTES INDUCIDAS POR NMDA INDEPENDIENTEMENTE DE AMPc EN LAS NEURONAS NEOESTRIATALES DE LA RATA. Alba G. Vera-Castañeda (avalada por José Ramón Eguibar Cuenca), Jorge Flores-Hernández Amaal Islam, Carlos Cepeda, Michael S. Levine. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Instituto de Fisiología, Apartado Postal 406, Puebla, Puebla, México. Universidad de California en Los Angeles, Mental Retardation Research Center, Los Angeles, CA., 90025 USA. Los receptores GABA-B son expresados por las neuronas dopaminérgicas de la sustancia nigra compacta. Los receptores se encuentran tanto en el área somato-dendrítica como en las terminales de las proyecciones de las neuronas al estriado y muy probablemente en las terminales de las proyecciones al globo pálido. Estos receptores regulan tanto el disparo neuronal como la liberación de dopamina de las terminales. Aquí hemos explorado el papel de estos receptores en el control de la actividad motora de la rata. Los experimentos se realizaron en ratas a las que se les implantaron unilateralmente cánulas guías en el globo pálido a través de las cuales se introducían las cánulas para la microinyección de agonistas o antagonistas de los receptores GABA-B y determinando por la conducta de giro los efectos motores que pudieran producir. Tanto el baclofen (agonista) como el saclofen (antagonista) por sí solos no produjeron ningún efecto. Sin embargo, después de la administración de metanfetamina (10 mgs/Kg, i.p.), el baclofen (1 µg) produjo un giro ipsilateral muy marcado (alrededor de 14 giros/min) y muy prolongado (más de 2 horas). Paradójicamente, también el saclofen (1 µg) después de la anfetamina produjo giro ipsilateral. En este caso el giro fue menos frecuente (alrededor de 5 giros/min) y de corta duración (alrededor de 40 min). Estos resultados sugieren que los receptores GABA-B regulan la liberación de dopamina en el globo pálido y por lo tanto los efectos motores de la acción dopaminérgica en este núcleo, el cual ejerce un importante control de la actividad motora del animal. Financiado por el donativo CONACyT G-34706-N Las neuronas neoestriatales de proyección reciben entradas glutamatérgicas desde la corteza y el tálamo. Esta actividad es en parte mediada por los receptores tipo NMDA. Asimismo las neuronas neoestriatales reciben influencia dopaminérgica que se origina en la parte compacta de la sustancia negra. Este estudio fue realizado en neuronas medianas neoestriatales agudamente disociadas de rata, bajo el protocolo de registro electrofisiológico en modo de célula completa, se administró NMDA 100 µM por 3 segundos cada 15 segundos, esto indujo una corriente entrante de alrededor de 500 pA. Cuando se aplica el agonista al receptor de dopamina D1, el SKF 81297 la corriente activada por NMDA se incrementan alrededor de un 30%. Los receptores de tipo D1 han sido relacionados con el incremento en las concentraciones intracelulares de AMPc, el cual activa a la proteína quinasa A (PKA). En este estudio encontramos que la aplicación de agonistas de AMPc como el cpt-AMPc, la activación de la adenilato ciclasa con forskolina o bloqueo de proteínas G con GDPβS no mimetizan el efecto del SKF-81297. Estos estudios muestran que los receptores de dopamina tipo D1 pueden actuar independientemente de la formación de AMPc. C-121 C-122 ISQUEMIA CEREBRAL GLOBAL AGUDA EN LA RATA POR “OCLUSION DE LOS 4 VASOS”. EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA PROGESTERONA. Montes-del Carmen P.*, Hernández-Morales L*, López-Loaeza E.*, Letechipía-Vallejo G.*, Cervantes M. y Moralí G. U. Inv. Médica en Farmacología, CMN Siglo XXI, IMSS, México, DF, Centro de Inv. Biomédica de Michoacán, IMSS y Facultad de Medicina, Univ.Michoacana de Sn. N.H., Morelia, Michoacán. EVALUACIÓN DE LA MELATONINA Y LAS VITAMINAS C Y E, EN EL ESTRÉS OXIDATIVO CEREBRAL INDUCIDO IN VIVO, POR LA PROTEÍNA β-AMILOIDE. Rosales-Corral, S.A.* (avalado por Gabriel Ortiz Genaro), Valdivia-Velázquez, M*, Martínez-Barboza, S.G,*. Centro de Investigación Biomédica de Occidente del IMSS. Entre los modelos animales de isquemia cerebral global aguda, uno accesible, que brinde resultados reproducibles y permita realizar evaluaciones anatomo-funcionales del daño resultante, es un punto de partida indispensable para estudios de neuroprotección. El modelo de “oclusión de los cuatro vasos” (arterias vertebrales y carótidas) en la rata, ha sido modificado por diversos autores en el intento de obtener resultados predecibles y reducir la mortalidad de los individuos. Se comparó la efectividad de 3 variantes, en 75 ratas macho adultas, asignadas al azar a los siguientes grupos: 1) modelo original, 20 min de isquemia; 2) 20 min de isquemia, con control de la circulación colateral hacia el cerebro; 3) modelo de isquemia breve repetida (3 min x 3, a intervalos de 1 h). Se evaluaron los porcentajes de sobrevivencia y de cumplimiento de los criterios de éxito del modelo (pérdida de la conciencia durante y postisquemia), así como la pérdida de neuronas pìramidales del hipocampo. Los grupos 1 y 3 tuvieron baja mortalidad pero bajos porcentajes (12 y 15%) de cumplimiento de los criterios de isquemia severa y de daño al hipocampo. El grupo 2 tuvo 26% de mortalidad pero un mejor cumplimiento del criterio de isquemia (60%) y daño en el 100% de las ratas que lo cumplieron. Al utilizar este modelo en ratas tratadas con progesterona (10 mg/kg/día) se incrementó la sobrevivencia y se previno la despoblación neuronal del hipocampo, demostrándose un efecto neuroprotector significativo. Este modelo está permitiendo evaluar el efecto de otros esquemas de tratamiento. Apoyo del CONACYT, Proyecto No. 31073-M. Se comparó la efectividad de tres antioxidantes comunes para bloquear, o reducir al menos, el nivel de estrés oxidativo e inflamación provocados por la proteína β-Amiloide, el elemento protagónico más estudiado en la patogenia de la enfermedad de Alzheimer. Se evaluaron las vitaminas E y C, por tratarse de sustancias de uso muy común, que se consumen incluso sin prescripción médica. Se compararon estos agentes con la melatonina, una neurohormona producida por la glándula pineal, ampliamente estudiada como sustancia “barredora” de radicales libres, pero con implicaciones más profundas, relacionadas quizá con funciones neuromoduladoras. Se hizo un estudio experimental comparativo entre animales que recibieron β-amiloide, contra otros que recibieron líquido cefalorraquídeo artificial; por vía intracerebral, sobre región CA1 del hipocampo, mediante cirugía estereotáxica; un tercer grupo de “testigos manipulados” no fueron inyectados con ningún fármaco. De cada grupo se formaron 3 subgrupos, según el tratamiento que recibieran: melatonina, vitamina C, o vitamina E. Los resultados muestran que el β-amiloide induce estrés oxidativo, caracterizado en este estudio por la elevación de nitritos y lipoperóxidos, y una respuesta neuroinflamatoria determinada por la elevación de las interleucinas IL-1, IL-6 y TNF-α. El empleo de antioxidantes redujo de manera significativa todos estos parámetros. No hubo diferencias significativas entre la melatonina, la vitamina C y la vitamina E respecto a su capacidad para reducir nitritos y lipoperóxidos. Sin embargo, la melatonina mostró por lo menos dos veces mayor capacidad para reducir la respuesta pro-inflamatoria inducida por el βamiloide. C-123 C-124 NIVELES DEL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALFA (TNF-α) EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR GLUTAMATO MONOSÓDICO (GMS) EN LA RATA. 1 Chaparro-Huerta V.*, 1,2Rivera-Cervantes M.C.* y 1,2Beas-Zárate C. 1Laboratorio de Neurobiología Molecular del Centro de Investigación Biomédica de Occidente, IMSS, y 2Depto. de Biol. Cel. y Mol. , C.U.C.B.A. U. de G. EFECTO DEL ACETOACETATO SOBRE LA MUERTE NEURONAL EN UN MODELO DE INHIBICIÓN GLICOLÍTICA CRÓNICA Y SU RELACIÓN CON LOS NIVELES DE ATP CEREBRALES. Haces M.L.*, Montiel T.*, Massieu L. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. La sobreactivación de receptores a glutamato (R-Glu) puede inducir apoptosis (AP) por un mecanismo que involucra la entrada masiva de calcio, lo que produce un fenómeno de excitotoxicidad, tal como se presenta en diversas condiciones neurodegenerativas agudas. La muerte neuronal por efectos tóxicos del Glu también puede ser por necrosis. Recientemente se ha asociado la inflamación del cerebro y la activación de la microglia en procesos neurodegnerativos, debido a que ésta secreta factores proinflamatorios, como el TNF-α, que se acumula bajo estas condiciones, además participan en la iniciación de eventos que desencadenan la AP. Por lo que en el presente trabajo se evaluó la participación del TNF-α en diferentes regiones cerebrales (corteza, estriado e hipocampo ) de ratas wistar que fueron tratadas neonatalmente (1,3,5 y 7 días de edad) con GMS (4 mg/g) vía subcutánea. Se midieron los niveles de TNF-α por ELISA a los 8, 10 y 14 días de edad posnatal. Los resultados muestran un incremento del 235%, 57% y del 22.5% a los 8, 10 y 14 días de edad posnatal en la corteza cerebral bajo el tratamiento con GMS. En el estriado, este incremento fue del 145%, 10% y 20 % a los 8, 10 y 14 días respectivamente del grupo tratado con GMS. El hipocampo presentó un incremento de 155%, 7.5% y un 16% a los 8, 10 y 14 días del grupo experimental. Estos resultados indican que después de un daño celular y un proceso inflamatorio severo existe un incremento de los niveles de TNF-α. Lo que sugiere que ésta citocina podría tener un papel importante en los mecanismos que llevan a la muerte neuronal por sobre activación de R-Glu. Trabajo financiado parcialmente por CONACYT 30901-M a C.B.Zy Beca No.158761 a V.Ch.H . La alta demanda energética del cerebro depende principalmente del aporte de glucosa. Cuando este aporte no es suficiente, por ejemplo durante la isquemia y la hipoglicemia, ocurre muerte neuronal siendo la capa CA1 del hipocampo una de las regiones más vulnerables. La búsqueda de sustratos metabólicos alternativos a la glucosa que puedan restituir los niveles energéticos podría ser una nueva estrategia para prevenir el daño neuronal. La muerte neuronal en estas condiciones está mediada en parte por glutamato. Además, existe una relación ahora bien establecida entre los efectos tóxicos del glutamato y la deficiencia energética celular. En este trabajo, se usó un modelo crónico de inhibición glicolítica, utilizando yodoacetato, un inhibidor de la enzima gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa. Se inyectaron ratas con yodoacetato (15 mg/kg) durante tres días y al tercer día los animales se inyectaron intrahipocampalmente con un inhibidor de la recaptura del glutamato (500 nmol/µl), el L-trans-pirrolidin-2,4-dicarboxilato (PDC). En estas condiciones se observa degeneración de las células de la capa CA1 del hipocampo. Se estudió el posible efecto neuroprotector del acetoacetato, un cuerpo cetónico capaz de incorporarse al ciclo de Krebs como acetilCo-A, administrado por diferentes vías. Los resultados indican que el acetotoacetato es capaz de proteger contra la muerte neuronal inducida en estas condiciones y su administración sistémica tiende a incrementar los niveles de ATP, lo que parece indicar que parte de su efecto protector está relacionado con la recuperación de los niveles de ATP. En las ratas tratadas únicamente con el yodoacetato los niveles de ATP disminuyen ligeramente de forma transitoria. Trabajo financiado por DGAPA-UNAM proyecto IN-203400. C-125 C-126 MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR GLUTAMATO Y SU RELACIÓN CON EL ESTADO METABOLICO EN EL ESTRIADO DE LA RATA. Del Río P.*, Montiel T.*, Massieu L. Instituto de Fisiología Celular, UNAM. SOBRE-EXPRESIÓN DEL FACTOR NEUROTRÓFICO DERIVADO DE CEREBRO (BDNF) EN CÉLULAS GLIALES. Arregui-Mena L.* y Segovia J. Dept. Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, México, 07300, D.F. La neurotoxicidad del glutamato se ha vinculado con la muerte neuronal asociada con enfermedades neurodegenerativas así como con episodios de hipoxia/isquemia y con el trauma cerebral. Se ha establecido que el incremento de los niveles extracelulares de glutamato no es suficiente para inducir un daño neuronal agudo, sino que se requiere además una falla en el metabolismo energético (Neuroscience 2001, 106: 669-677). Con el fin de conocer el papel del metabolismo mitocondrial en la muerte neuronal producida por glutamato en el estriado de la rata, se determinaron los niveles de ATP de ratas tratadas sistémicamente con la toxina mitocondrial, ácido 3-nitropropiónico (3-NP) (15 mg/Kg/día durante dos días) y con una dosis subtóxica de glutamato intraestriatal (500 nmol/µl). Los resultados indican que el 30% de las ratas tratadas con 3-NP presenta rigidez de los miembros posteriores y una disminución significativa de los niveles de ATP en el estriado. Las ratas que no presentan esta conducta tienen los niveles de ATP igual que los de los animales control. La administración de glutamato intraestriatal no modifica los niveles de ATP ni produce muerte neuronal en las ratas intactas. En los animales tratados con 3-NP el glutamato produce muerte neuronal aunque no disminuye los niveles de ATP. La lesión por glutamato es mayor en las ratas que presentaron la sintomatología. Estos resultados indican que aún cuando los niveles de ATP están intactos el glutamato produce una muerte neuronal cuando existe una alteración mitocondrial; cuando los niveles de ATP disminuyen considerablemente, como en las ratas con sintomatología, el daño por glutamato se hace mas evidente. Trabajo financiado por PAPIIT Proyecto IN 203400 La Enfermedad de Huntington (EH) es una enfermedad neurodegenerativa causada por la expansión de repetidos de CAG en la región que codifica para la proteína huntingtina. La EH se caracteriza como un desorden del movimiento con cambios psiquiátricos debido a la muerte selectiva de las neuronas espinosas medianas del estriado. Los mecanismos por los cuales este incremento en los repetidos CAG dañan y destruyen a las neuronas aún no se conocen. Además, no existe cura ni tratamiento efectivo contra esta enfermedad, a pesar de que se puede diagnosticar varios años antes de que los síntomas se manifiesten. Se ha demostrado que diferentes factores tróficos promueven la sobrevivencia de las neuronas espinosas medianas, entre ellos el factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF). El presente trabajo tiene como objetivo sobreexpresar el BDNF in vitro en una línea celular derivada de glioma murino (C6), regulado a nivel transcripcional por el promotor de la proteína glial fibrilar acídica (Gfa2), como una alternativa de terapia génica en la EH. El promotor Gfa2 se expresa de forma exclusiva en astrocitos y es modulado por daño en el sistema nervioso central. Resultados: Se construyeron los vectores pgfa2-BDNF, pgShuttleBDNF y pgATBDNF; se verificaron por análisis restricción y PCR la correcta orientación del transgen; se comprobó por RT-PCR la expresión del mRNA de BDNF y por inmunocitoquímica la expresión de la proteína a partir del vector pATBDNF en células C6. Conclusiones: se logró subclonar de forma correcta el BDNF en tres vectores distintos; y se demostró la expresión del mRNA y la proteína de BDNF. C-127 C-128 MECANISMOS INVOLUCRADOS EN LA MUERTE NEURONAL INDUCIDA POR INHIBICION GLICOLITICA EN NEURONAS DE HIPOCAMPO DE RATA. HernándezFonseca, K.* y Massieu, L. Instituto de Fisiológia Celular, UNAM. INFLUENCIA DE LA OXITOCINA SOBRE EL ARBOL DENDRITICO DE MOTONEURONAS QUE INERVAN AL MUSCULO PUBOCOCCIGEO EN RATAS MACHO ESPINALIZADAS. Pérez CA*, Pacheco P, Hernández ME* y Manzo J. Inst. de Neuroetología, U.V. Xalapa, Ver.; Inst. de Inv. Biomédicas. U.N.A.M., México, D.F. Después de un episodio isquémico ó hipoglicémico ocurre muerte neuronal desencadenada por la disminución de los niveles de ATP, el aumento en los niveles de glutamato extracelular y el incremento en la concentración de calcio intracelular. La muerte que se presenta en estas condiciones es de tipo excitotoxico. Recientemente se ha establecido una estrecha relación entre las propiedades tóxicas del glutamato y el estado energético celular. Una de las regiones más vulnerables al daño isquémico/hipoglicémico es el hipocampo. En el presente trabajo cultivos neuronales de hipocampo fueron expuestos a yodoacetato, un inhibidor de la enzima gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa a diferentes concentraciones por 30 minutos. Se observó un 50% de muerte con 50µM de yodoacetato, así como una reducción progresiva de los niveles de ATP. La muerte inducida por yodoacetato (50 µM) es contrarestada por antagonistas de receptores a glutamato (MK-801 y NBQX), por sustratos energéticos (acetoacetato y piruvato) y por dantroleno (antagonista de receptores a rianodina). Estos resultados indican que la muerte inducida por la inhibición glicolítica es de tipo excitotoxico, debido a que los antagonistas de los receptores a glutamato previenen la muerte. La proteción obtenida con dantroleno indica una contribución de los alamacenes de calcio del reticulo endoplasmático al proceso de muerte. De la misma manera el proceso de muerte podría estar relacionado con los niveles energéticos celulares, ya que la presencia de sustratos energéticos la previenen. Trabajo financiado parcilamente por PAPIIT IN203400. En nuestro laboratorio hemos observado que la lesión de médula espinal disminuye la tinción intracelular con una enzima conocida como peroxidasa de rábano (WGA-HRP) en las motoneuronas que inervan al músculo pubococcígeo (Pc) de la rata macho. Proponemos que la tinción intracelular sirve para indicar la actividad de la neurona y que esta actividad refleja la captura de transporte de la enzima por la motoneurona. Hipotetizamos que el núcleo paraventricular hipotalámico (PvN) influye en la actividad de motoneuronas espinales a través de la liberación de oxitocina (OT) sobre las dendritas de estas motoneuronas. Así, decidimos probar si la oxitocina intratecal induciría un aumento en la tinción intracelular en las motoneuronas de ratas espinalizadas. Utilizamos ratas macho adultas Wistar agrupadas en: intactas de la médula espinal y con implante intratecal; espinalizadas con implante intratecal conectada a una minibomba Alzet con solución salina; y espinalizadas con tratamiento oxitocinérgico. Las motoneuronas del músculo Pc se marcaron retrógradamente con WGA-HRP y se les realizó un análisis computarizado de la morfometría en las células teñidas. Los resultados muestran que la OT induce un aumento significativo (p<0.01) en las características morfométricas de las motoneuronas. Además sus dendritas se dirigen principalmente hacia la región lateral. Así, se propone que la OT promueve la actividad de estas motoneuronas en ratas espinalizadas y, posiblemente, sus dendritas que se dirigen a la región lateral son más sensibles a la OT. Esto explicaría la participación del músculo Pc en los procesos de micción y reproducción. Proyecto CONACYT 33124-N (J.M.) y Beca CONACYT Reg. No. 153785 (C.A.P.) C-129 C-130 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN SISTÉMICA DE PILOCARPINA SOBRE LA DISMINUCIÓN DE NEURONAS DE LA REGIÓN CA1 HIPOCAMPAL. EN RATAS. Gómez Díaz A.*, Pacheco-Rosado J+., Ortiz-Butrón R.+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México,D.F. DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES DE CITOCINAS Y FACTORES TRÓFICOS EN EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO DE PACIENTES CON GLIOBLASTOMA MULTIFORME. Dueñas-Jiménez J.M., MezaBautista M.A.*, Mendoza-Magaña M.L., Ramírez-Herrera M.A., Nuño López C.*, Dueñas-Jiménez S.H. Laboratorio de Neurofisiología, Departamento de Fisiología y Departamento de Neurociencias, Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara y Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, Guadalajara Jalisco México. En experimentos previos se ha demostrado que ratas hipotiroideas presentan un menor número de neuronas piramidales en la región hipocampal. Por otro lado, se sabe que la administración sistémica de pilocarpina produce patrones motores convulsivos y estados epilépticos provocando citotoxicidad hipocampal, por lo que se consideró importante observar si las células piramidales de la región CA1 de las ratas hipotiroideas se ven afectadas por el tratamiento sistémico de pilocarpina. Se emplearon ratas Wistar hembra con un peso de 200-300g, las cuales se dividieron en los grupo eutiroideo (n=9) e hipotiroideo (n=8). Estas últimas recibieron metimazol disuelto en el agua de beber (60 mg/Kg/4 semanas). Ambos grupos se inyectaron subcutáneamente con atropina (10 mg/Kg) para evitar los efectos adversos autonómicos. 30 minutos después se les administró pilocarpina 30 mg/Kg o solución salina 0.9% por vía i.p. tanto a las ratas eutiroideas como a las hipotiroideas. Dos semanas posteriores a este tratamiento, los animales se perfundieron por vía cardíaca con formol al 10%. Los cerebros se incluyeron en parafina y se realizaron cortes coronales cerebrales de 7µm de grosor. Se tiñeron con azul de Toluidina 1%. Se obtuvo para cada rata el promedio del número de neuronas piramidales en 10,000 µm2 de la zona CA1 hipocampal. Los resultados muestran que el tratamiento con pilocarpina (30 mg/Kg) a las ratas hipotiroideas produjo una disminución del 61% en el número de células totales en CA1, mientras que a pesar de haber administrado una dosis mayor de pilocarpina (100 mg/Kg) a las ratas eutiroideas, la disminución fue de sólo el 22%. Por lo que concluímos que la pilocarpina sí provoca degeneración celular hipocampal en las ratas hipotiroideas. + Becaros DEDICT-COFAA-IPN. Este proyecto es apoyado por DEPIIPN 970509. El glioblastoma multiforme (GM) representa el 80% de los tumores cerebrales primarios en el adulto. Distintas citocinas y factores tróficos participan en el desarrollo, transformación, progresión y metástasis del glioblastoma multiforme entre estos están: el Factor de crecimiento epidérmico (EGF), el Factor de crecimiento vasoendotelial (VEGF), Factor de necrosis tumoral alfa (TNFalfa), Interleucina 10 (IL-10), Fas ligando y su receptor Fas-APO-1 entre otros. El objetivo del presente estudio fue evaluar la concentración de: VEGF, EGF, TNF alfa, IL-10, Fas-Apo-1 en el líquido cefalorraquídeo (LCR) de pacientes con GM y en el LCR de pacientes sanos (a través de mielografías ). Los pacientes con GM exhibieron niveles elevados y estadísticamente significativos de EGF con respecto a los controles, con un promedio en ng/ml de 7.86 + 8.7 en el grupo de pacientes con GM contra 0.520 + 0.43 en los controles (p<0.01). La concentración de TNFalfa fue de 0.568 + 0.46 para el grupo de pacientes con GM y 0.1330 + 0.080 ng/ml para el grupo control con una p<0.01. La concentración de VEGF se elevo extraordinariamente solo en dos pacientes del grupo con GM . El promedio de la concentración de IL-10 y Fas (CD95) entre los grupos de estudio fue similar. La concentración de EGF y TNFalfa obtenida del LCR de los pacientes con GM pudiera ser utilizada como valor pronóstico al incluirse a los estudios clínicos del paciente como edema cerebral y crecimiento ventricular. C-131 C-132 DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA DE NEUROESTIMULACIÓN INALÁMBRICO (VIA RADIOFRECUENCIA). Bernal-Díaz A*, Martínez-Tenorio A*, Fernández-Mas R*, Almazán-Alvarado S* y Martínez A. UNAM Campus Aragón, Inst. Nal. Psiquiatría SSA. México, 14370, D.F. IMPLEMENTACION DE UN SISTEMA ELECTRÓNICO PORTÁTIL DE BIORRETROALIMENTACION PARA USO CLINICO. Aguillón Pantaleón, M.A.*, (Avalado por Martínez Cervantes Adrián), Castro García M.*, Almazán Alvarado, S.*. Laboratorio de Bioingeniería, Subdirección de Investigaciones en Neurociencias del Instituto Nacional de Psiquiatría, México, D.F. Los métodos de estimulación eléctrica que se realizan en la investigación son manuales provocando estrés en el sujeto experimental (animal o humano), generando interferencia en las mediciones de conducta asociada con los estímulos, además los equipos son voluminosos y deben de estar aislados eléctricamente. Objetivo: Diseñar y desarrollar un sistema de neuro-estimulación inalámbrico (via radio-frecuencia) para estimulación eléctrica. Se utilizaron dos tarjetas*, una receptora EVAL-315-LC con un microcontrolador PICLC84 y una transmisora con un microcontrolador PIC17C42; puerto RS232; pantalla LCD para estación base; una PC para la transmisión de datos; y componentes electrónicos. Procedimiento: los microcontroladores se programaron en lenguaje ensamblador, y se montaron en las tarjetas. El envió de parámetros de estimulación entre la estación base y la PC es asíncrona y el envío entre la estación base y el estimulador es sincrona. Resultados: Se diseño un programa en Java para la comunicación entre PC y estación base. Se desarrolló un protocolo de comunicación de 48 bits (bits de datos), para la transmisión de la estación base a los estimuladores, la cual se realizó a una distancia de 40m, arrojando los siguientes datos: en 17000 transmisiones sólo hubo 160 fallas, en un ambiente con interferencia; y de 12000 transmisiones sólo 8 fallaron en un ambiente sin interferencia. El circuito se aisló eléctricamente con un silicón para ser implantado con sus propias baterías con una autonomía de cuatro meses. Conclusión: El desarrollo de este sistema esta enfocado hacia la estimulación para investigación en neurofisiología, ya que debido a sus características puede ser aplicado en cualquier área del sistema nervioso que requiera ser estimulada eléctricamente. *Links Technologies. Se agradece el apoyo del Instituto Nacional de Psiquiatría SSA a los proyectos número 3220 y 3410 para la realización de este trabajo. Las técnicas de Biorretroalimentación usadas en la práctica clínica para el diagnostico y la evaluación, son utilizadas con finalidades y propósitos diferentes, y sobre todo, la de su empleo como técnica primordial para el tratamiento de diversos problemas clínicos, como estrés, relajamiento muscular, etc. En cuanto a la aplicación técnica o utilización práctica de la Biorretroalimentación, conviene ante todo, recordar que la tecnología propia de los aparatos electrónicos utilizados, por compleja que sea, no asegura por sí misma la eficacia terapéutica, sino que ésta depende únicamente del correcto uso que se haga de los mismos en concordancia con la metodología y los principios de la Psicología. El objetivo de este trabajo es implementar un sistema electrónico, modular y portátil de Biorretroalimentación para ser utilizado en el área clínica. El sistema consta de los siguientes módulos de medición: I) Medidor de la conductancia de la piel, dada en Siemens (σ), II) Sensor de Temperatura, en escala de grados Celsius (°C) y por último III) Electromiógrafo, el cual dará la actividad o tensión muscular en milivolts (mV). Todos los datos y resultados obtenidos son procesados por medio de convertidores analógico-digital (A/D) y visualizados a través de una pantalla de cristal líquido (LCD), que es controlada por circuitos integrados programables (PIC), con la cual podemos medir los parámetros antes mencionados de los pacientes. Una de las principales ventajas de este sistema es su tamaño reducido y su fácil operación. Además de que puede operar por modulo independiente y reducir el consumo de energía. C-133 C-134 DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UN SISTEMA DE REGISTRO CON SENSORES INFRARROJOS, PARA EL ESTUDIO DEL CICLO CIRCADIANO EN ANFIBIOS. Hernández. Pérez A.*, Elías Viñas David, Departamento de Bioelectrónica, CINVESTAV IPN, 07360, México D.F. EFECTO DE LOS CAMPOS MAGNÉTICOS DE EXTREMA BAJA FRECUENCIA APLICADOS CON UN DISPOSITIVO DISEÑADO PARA CÉLULAS EN CULTIVO. Verdugo Díaz, L. 1, Hernández Hernández, H. 2*, Elías Viñas, D. 2*. 1Depto. de Fisiología, Fac. de Medicina, UNAM. 2Depto. de Ingeniería Eléctrica, Sección de Bioelectrónica, CINVESTAV, IPN. El sistema de registro que se propone es un método de detección de ritmo biológico con luz infrarroja la cual es emitida por un fotodiodo, con ello se pretende estudiar la modificación del ciclo circadiano, con cambios farmacológicos y cambios en su ciclo Luz-Oscuridad. Los estudios se realizan con anfibios (acosiles) los cuales presentan una gran resistencia a la luz y su sistema nervioso no es muy complejo. El registro se obtiene haciendo incidir un haz de luz infrarroja de un fotodiodo hacia un fototransistor este se cortara cuando el anfibio cruce entre el fotodiodo y el fototransistor y se detectara la actividad o movimiento del anfibio. El siguiente paso será ver la posición del anfibio y el tiempo de duración de este en un mismo lugar, esta dirección de lugar será proporcionada por un contador BCD que a su vez estará sincronizado por un dispositivo que nos ayudara a reconocer la dirección de cada fototransistor. Cabe mencionar que la señal que excitara a los fotodiodos es una señal de pulsos de un periodo de duración de T = 2.885 miliseg. Y el tiempo de lectura de cada fototransistor es de 28.85 miliseg. Esto nos da que en 1 segundo se registraran los 35 fototransistores. La manera de visualizar los datos será mediante una PC y un programa en lenguaje C, este programa nos da la ventaja de visualizar los datos parciales que se han obtenido en un periodo de tiempo, mientras el experimento sigue en marcha, otras ventajas es desplegar la hora de inicio y el tiempo que lleva transcurrido el experimento, también se puede visualizar el número de actividades que se registra por hora. Los efectos inducidos por los campos magnéticos de extrema baja frecuencia (CM EBF) en los sistemas vivos, han sido muy controvertidos. Esto se debe fundamentalmente a que los resultados obtenidos dependen del tipo y los parámetros aplicados (intensidad, frecuencia y duración). Con el objeto de tener un mejor control de estos parámetros, se diseñó un sistema de estimulación para cultivos celulares. El dispositivo consiste de un sistema mecánico y un electrónico. El sistema mecánico permite colocar un par de imanes de ferrita a diferentes distancias con respecto a la caja de cultivo y así variar la intensidad del flujo magnético. El sistema electrónico controla la velocidad del motor y con un gaussómetro de CA y CD (0-30 mT) se registran las intensidades de flujo magnético. El dispositivo permite variar en 12 frecuencias la velocidad de giro (de 1 a 12 Hz), la duración de la estimulación (2, 4, 6 o horas) y el número de eventos (1, 3, 5 y 7 días). Por el momento hemos probado el dispositivo para cultivos de células cromafines de rata recién nacida. Se escogió este modelo ya que se ha reportado la capacidad de transdiferenciación de las células frente a diferentes estímulos. Las células cromafines estimuladas con campos magnéticos de 60 Hz y 1 mT presentan cambios en su forma, liberación de catecolaminas y respuestas electrofisiológicas. Con el dispositivo diseñado, al aplicar el CM EBF durante una semana (dos horas diarias 5 Hz de frecuencia y 1 mT) se observó un cambio en la forma de las células cromafines y un crecimiento del cultivo diferente al cultivo control. Los resultados obtenidos nos permiten iniciar el estudio sistemático del efecto de los CM EBF sobre las células en cultivo. Así, la combinación de los diferentes parámetros de estimulación permitirá definir mejor los efectos inducidos por los CM EBF en las células. C-135 C-136 CALCULO Y VARIACIONES EN LOS VECTORES DE LA CORRIENTE ELECTRICA EN EL CORAZON, INDUCIDOS POR UN INHIBIDOR DE LA P-GLICOPROTEINA (OC144093) EN DOSIS MULTIPLES CON VOLUNTARIAS SANAS. Castro García M.*, (Avalado por Martínez Cervantes Adrián), Tera Ponce, S.*, Castañeda Flores, J.L.*, Aguillón Pantaleón, M.A.*, Almazán Alvarado, S.*, Valencia Méndez, G.*, Luján Estrada, M. Lab. de Bioingeniería, Subdirección de Investigaciones en Neurociencias del Instituto Nacional de Psiquiatría. Depto. de Farmacología Clínica. Facultad de Medicina, UNAM-Hospital Español. México, D.F. LA AGMATINA PRODUCE ANALGESIA PERIFÉRICA EN LA PRUEBA DE FORMALINA. Rocha-González H.I.* (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Medina-Santillan R.*, Reyes-García G.*, Mejía-González N.*, Chaidez-Ramírez.*, Vidal-Cantú G.* y Departamento de Farmacobiología, Granados-Soto V.* CINVESTAV-IPN, México, D.F. El OC 144-093 es un imidazol con una sustitución novedosa, cuyo mecanismo de acción es inhibir a la P-Glicoproteína (P-gp). Este compuesto ha sido diseñado para revertir la resistencia farmacológica múltiple (MDR) de los pacientes sometidos a quimioterapia antineoplásica producida por una sobre expresión de esta proteína. La P-gp es una proteína de membrana de 170 kD, que actúa como una bomba de eflujo de energía que se asocia al MDR. Su localización sugiere una función fisiológica en el eflujo celular de varias sustancias activas en diversos órganos. Asimismo, en la reducción de el ingreso celular de xenobióticos. El objetivo de este trabajo es calcular y determinar los cambios en los vectores de corriente del corazón que pueden ser inducidos por el OC144-093. El estudio se llevo a cabo con 6 voluntarias sanas de entre 18 y 40 años de edad, administrándoles los siguientes niveles de dosis a intervalos de 12 hrs., Fase I: 300 mg, II: 500 mg y III: 600 mg. Durante el estudio se monitoreó la presión arterial, frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, temperatura axilar y 3 electrocardiogramas (basal, a 4 y 12 hrs. posteriormente a la administración). Se pudo observar un incremento en el segmento PQ el cual lo relacionamos con la dosis de OC 144-093, como consecuencia los vectores de corriente del corazón tuvieron variaciones. que aunque caen en rangos clínicamente normales, presentan alteraciones en su magnitud y sentido, que estadísticamente son significativos, pero clínicamente estas modificaciones no se consideran de relevancia, por lo que se podría sugerir que la P-gp posee una función cardiaca por lo que se tendría que considerar realizar otros estudios para determinar la función de esta proteína. La agmatina es un neurotransmisor que se sintetiza en el cerebro a partir de L-arginina. Se distribuye en el sistema nervioso central y se une con alta afinidad a receptores a NMDA, α2-adrenérgicos y otros receptores acoplados a canales catiónicos; así también, inhibe a la sintasa de óxido nítrico inducible (SONi). Numerosos estudios han encontrado que el bloqueo de los receptores a NMDA y la inhibición de la SONi le permiten a la agmatina antagonizar algunos estados de hiperalgesia, dolor persistente, inflamación, neuropatía y daño a la médula espinal. Por lo que se ha sugerido que la agmatina puede ser candidato a fármaco analgésico. El objetivo del presente trabajo consistió en evaluar el posible efecto analgésico periférico local en ratas sometidas a pretratamiento y post-tratamiento local. La conducta dolorosa se cuantificó como el número de sacudidas por minuto cada 5 minutos por 60 minutos. La reducción en el número de sacudidas se consideró como analgesia. El pretratamiento local (100-900 ng/pata) y espinal (100-900 ng/rata), así como el post-tratramiento local (100-900 ng/pata) con agmatina redujo de manera dependiente de la dosis el número de sacudidas (p<0.05, Anova seguido de Tukey). En contraste, el posttratamiento espinal (300-3200 ng/rata) produjo analgesia, pero solo a dosis 3 veces mayores. Los resultados indican que la agmatina produce analgesia periférica (local) en el modelo de dolor inducido por formalina. Además, los datos sugieren la importancia del tratamiento profiláctico para reducir el dolor mas eficientemente. C-137 C-138 EFECTO DEL BLOQUEO DE LA SINTASA DE ÓXIDO NÍTRICO Y DE CANALES DE K+ EN EL EFECTO ANALGÉSICO DE DICLOFENACO. Lozano-Cuenca, J* (Avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia) y Granados-Soto, V*. Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN. México, D.F. LAS VITAMINAS B AUMENTAN EL EFECTO ANTIHIPERALGÉSICO DEL DICLOFENACO EN LA RATA. Caram Salas N. L.* (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), VidalCantú G. C.*, Medina-Santillan R.*, Reyes-García G.* y GranadosSoto V.* Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN, México, DF, Escuela Superior de Medicina-IPN. La estimulación periférica del sistema óxido nítrico (ON)-GMPc y la apertura de canales periféricos de K+ sensibles a ATP (KATP) y Existe evidencia que el complejo de vitaminas B disminuye la respuesta de neuronas talámicas a estímulos nociceptivos en la rata. El propósito de este trabajo fue establecer si el complejo de vitaminas B (B1, B6 y B12; proporción 100:100:1, respectivamente) y el diclofenaco actúan sinérgicamente para reducir la hiperalgesia térmica en la rata. Ratas Wistar hembras se inyectaron con 50 µl de carragenina (1%) en la superficie plantar de la pata posterior derecha de la rata 10 minutos antes de la administración oral de los analgésicos. Luego, los animales se sometieron a un estímulo térmico para evaluar la hiperalgesia. La latencia normal en las ratas fue alrededor de 10 segundos durante las 4 horas que duró la prueba. La latencia de retiro de la pata en animales previamente tratados con carragenina se redujo aproximadamente a 4 segundos. El aumento de la latencia ante el estímulo térmico se consideró como efecto anti-hiperalgésico. La administración de diclofenaco (1.8-5.6 mg/kg, p.o.) aumentó de manera dosis dependiente la latencia de retiro de la pata ante el estímulo térmico (p<0.05, Anova seguido de Tukey). En contraste, el complejo de vitaminas B (56177 mg/kg, p.o.) no aumentó la latencia de retiro de la pata ante el estímulo térmico. La co-administración de una dosis no efectiva de diclofenaco (1.8 mg/kg, p.o.) y dosis crecientes del complejo de vitaminas B (18-56 mg/kg, p.o.) aumentaron significativamente y de manera dependiente de la dosis la latencia de retiro. El efecto anti-hiperalgésico de la combinación, pero no del diclofenaco, fue suficiente para volver a los animales a la latencia basal. Nuestros datos demuestran que las vitaminas del complejo B incrementan significantemente el efecto anti-hiperalgésico del diclofenaco en el modelo de hiperalgesia térmica sugiriendo el uso de esta combinación en dolor inflamatorio en humanos. de baja conductancia activados por Ca2+ (SK) participan en el efecto analgésico de fármacos antiinflamatorios no esteroidales. En este trabajo se investigó la posible participación de la sintasa de ON y de los canales KATP y SK a nivel periférico y espinal en la analgesia del diclofenaco administrado por vía oral. Ratas Wistar hembra se inyectaron con formalina (1%) en la pata posterior derecha y se observó el número de sacudidas en periodos de 1 minuto cada 5 minutos durante 60 minutos. La administración de formalina produjo una conducta típica de sacudidas indicativa de dolor y la reducción de esa conducta se consideró como analgesia. La administración oral de diclofenaco (1-10 mg/kg) redujo de manera dependiente de la dosis el dolor inducido por formalina (p<0.01, Anova seguido de Tukey). La administración periférica local o espinal (i.t.) de glibenclamida (12.5-100 µg, local; 25-75 µg, i.t.) (bloqueador de canales KATP), apamina (0.1-1 µg, local; 0.001-1 µg, i.t.) (bloqueador de canales SK) y L-NAME (1-100 µg, local; 1-50 µg, i.t.) (bloqueador de la sintasa de ON), pero no DNAME (100 µg, local; 50 µg, i.t.) (isómero inactivo) o salina redujeron de manera significativa y dosis dependiente la analgesia producida por diclofenaco (p<0.01, Anova seguido de Tukey). El inhibidor de la sintasa y los bloqueadores de canales no produjeron efecto cuando se administraron de manera individual. Estos resultados sugieren que el efecto analgésico del diclofenaco administrado por vía oral se debe a su capacidad para estimular la síntesis y/o liberación de ON y la apertura de canales de K+ (KATP y SK) a nivel periférico y espinal. C-139 C-140 + LOS BLOQUEADORES DE CANALES DE K ANTAGONIZAN EL EFECTO ANTIALODÍNICO DE GABAPENTINA EN LA RATA. Mixcoatl-Zecuatl T.* (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), Vidal-Cantú G.*, Medina-Santillan R.**, Reyes-García G.** y Granados-Soto V.* Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN; **Esc. Sup Med-IPN, México, DF. POSSIBLE ROLE OF POTASSIUM CHANNELS IN ANTINOCICEPTION INDUCED BY METAMIZOL. Ortiz, M.I.*1,2 (avalado por Rocha Arrieta Luisa Lilia), CastañedaHernández, G.*1 and Granados-Soto, V.*3. 1Sección Externa de Farmacología, CINVESTAV-IPN, México, D.F. 2Área Académica de Medicina del ICSa, UAEH, Pachuca, Hidalgo, 3Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV, IPN, México, D.F. Algunas líneas de investigación demuestran que la gabapentina (GBP) es efectiva en el dolor neuropático. Sin embargo, aún no se conoce completamente su mecanismo de acción. Se ha reportado que la GBP disminuye la liberación de noradrenalina evocada por concentraciones altas de K+ en rebanadas de cerebro de rata y este efecto se bloquea por glibenclamida. Dado que la glibenclamida es un bloqueador del canal K+ sensible a ATP nosotros especulamos que estos canales podrían participar en el efecto antialodínico de GBP. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue evaluar si el efecto de gabapentina sobre el dolor neuropático es antagonizado por glibenclamida y otros bloqueadores de canales de K+ (apamina y caribdotoxina). A ratas Wistar hembras de 120-140 g de peso corporal se les ligaron los nervios espinales izquierdos L5 y L6, y 15 días después se les insertó una cánula intratecal, 5 días después se hizo la prueba de umbral de retiró de la pata izquierda con filamentos “von Frey”. Solo las ratas que desarrollaron alodinia se utilizaron en el estudio. La administración espinal de GBP redujo de manera dependiente de la dosis la alodinia producida por la ligadura de los nervios L5 y L6 (p<0.05, Anova, seguido de Tukey). La glibenclamida (12.5-75 µg; inhibidor del canal de K+ sensible a ATP), el apamina (0.1-3 ng; inhibidor del canal de K+ de baja conductancia activado por Ca2+) y la caribdotoxina (0.01-1 ng; inhibidor del canal de K+ de alta conductancia activado por Ca2+), pero no el vehículo, bloquearon parcialmente el efecto producido por GBP de manera dosis dependiente (p<0.05, Anova, seguido de Tukey). Dado que los bloqueadores de canales de K+ que utilizamos antagonizan parcialmente el efecto de GBP, especulamos que esta sustancia podría facilitar la apertura de dichos canales en neuronas espinales y con ello producir su efecto antialodínico. Metamizol is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) which has strong antipyretic, analgesic and spasmolitic actions but small anti-inflammatory activity. Metamizol inhibits prostaglandin synthesis in both the periphery and the central nervous system. There is evidence that in the periphery metamizol-induced antinociception can be diminished by either the NO synthase or soluble guanylyl cyclase inhibition. Recent evidence suggests that ketorolac- or diclofenac-induced antinociception involves the modulation of the NO-cyclic GMP pathway. Furthermore, we have found that the antinociception induced by these drugs can be prevented by K+ channel inhibitors suggesting that both drugs could activate the NO-cyclic GMP-K+ channel pathway in order to produce their peripheral antinociceptive effect. Like diclofenac and ketorolac, metamizol modulates the NO-cyclic GMP pathway at the periphery. Therefore, the possibility of modulation of K+ channels by metamizol exists. The present work assessed the possible participation of K+ channels in the peripheral antinociceptive action of metamizol in the 1% formalin test. Local peripheral administration of metamizol (50-200 µg/paw) produced a dosedependent antinociception only during the second phase of the test. Local peripheral pretreatment of the paw with charybdotoxin (0.1-2 µg) and apamin (0.1-10 µg) (large- and small-conductance Ca2+activated K+ channel blockers, respectively), 4-aminopyridine (1050 µg) and tetraethylammonium (50-100 µg) (voltage-dependent K+ channel inhibitors), but not glibenclamide or tolbutamide (10-50 µg) (ATP-sensitive K+ channel inhibitors), dose-dependently prevented metamizol-induced antinociception. The above results suggest that metamizol could open large- and small-conductance Ca2+-activated K+ channels, but not ATP-sensitive K+ channels, in order to produce its peripheral antinociceptive effect in the formalin test. C-141 C-142 EFECTOS DE LA ESPINALIZACIÓN EN RATAS NEONATAS SOBRE LA RESPUESTA AL TAIL FLICK PROVOCADA POR TRES TEMPERATURAS. Fajardo V.*, Muciño-Carmona E.*, Carrillo P.* y Pablo Pacheco, Instituto de Neuroetología, U. V., Xalapa Veracruz. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México D. F. ACTIVIDAD ANTIINFLAMATORIA DE Annona reticulata y Porophyllum tagetoides. Casas-García, G.*, Martínez-Juárez, M.E.*, Vázquez-Cruz, B. y Segura-Cobos, D.* Farmacología, UIICSE, FES Iztacala, UNAM. México, D.F. La latencia del reflejo de retiro de la cola (LRC) provocado por estimulación térmica, es utilizada para evaluar la respuesta nociceptiva de la rata adulta. Con ella se ha descrito que las temperaturas superiores a 45°C activan fibras Aδ, mientras que la temperatura de 40°C activan fibras C. Las investigaciones en ratas neonatas son escasas y controversiales, Por ello en el presente trabajo se evaluó el efecto de tres temperaturas: 50°, 45° y 40°C y de la espinalización temprana. Se utilizaron camadas de ratas neonatas (4 machos y 4 hembras) de la cepa Wistar. Los individuos se dividieron en intacto, falsa lesión y lesión para cada grupo de temperatura. Las pruebas se realizaron estimulando la región media de la cola, a las dos horas de iniciada la fase oscura. Se realizaron cada dos días a partir del día postnatal 7 (P7) hasta P21 y cada 5 días hasta P30. En P15, se realizó una cirugía para descubrir el segmento T8-T9 de la médula espinal y sólo al grupo de lesión se le seccionó y extrajo dicho segmento. Después de la recuperación de la anestesia, los animales se regresaron a sus camadas. Los resultados obtenidos, indican que la LRC obtenida por estimulación de 40°C presenta diferencias sexuales. Son los machos quienes presentan mayores LRC’s. Esta diferencia se pierde con la espinalización ya que comparados con su control, la lesión causa reducción de la LRC en ambos sexos. Por su parte la LRC obtenida por estimulación con 45 y 50°C no presentan diferencias entre los sexos o debidas a la espinalización. Con estos resultados, se concluye que la información térmica de 40°C que es llevada por fibras C es modulada por centros superiores del sistema nervioso (SN) y que dicha modulación es sexualmente dimórfica. Las temperaturas de 45 y 50°C que activan fibras Aδ no son moduladas por el SN ni la LRC obtenida presenta diferencias asociadas al sexo de los individuos CONACYT. VFG153777 y EMC153788 Annona reticulata y Porophyllum tagetoides se utilizan en el tratamiento de padecimientos inflamatorios en México; sin embargo, no existen evidencias farmacológicas que validen su uso medicinal, por lo cual decidimos investigar la posible actividad antiinflamatoria y analgésica del extracto acuoso de estas plantas. Las hojas de A. reticulata se colectaron en Cerro Azul, Ver. y las ramas de P. tagetoides se adquirieron en el Mercado de la Merced de la Ciudad de México. Ambas plantas se extrajeron con agua a ebullición. Se emplearon ratas Wistar, machos, de 200 a 250 g de peso y ratones machos de la cepa CD1, de 20-25 g de peso. Se probó el efecto de los extractos (200 y 300 mg/kg, v.o.) en los modelos de inflamación aguda: formación de edema con carragenina (1 mg) en las extremidades posteriores de las ratas y la migración de neutrófilos a la cavidad peritoneal irritada con carragenina (300 µg/3 mL) de las ratas. Se probó el efecto analgésico de las plantas en las contorsiones abdominales inducidas con ácido acético (60 mg/kg, i.p.) a ratones durante 20 min. A. reticulata y P. tagetoides (300 mg/kg) inhibieron la formación del edema en un 41% (296 ± 62 µL) y 59% (204 ± 67 µL), respectivamente (control: 499 ± 55 µL, indometacina (IND) 10 mg/kg: 87 ± 20 µL); redujeron la migración celular en un 54% (7, 206 ± 1, 266 neutrófilos (NEUT)/ mm3) y 40% (9, 492 ± 1142 NEUT/mm3), respectivamente (control: 15, 700 ± 934 NEUT/mm3; dexametasona 1 mg/kg: 4, 400 ± 150 NEUT/mm3); y redujeron el número de contorsiones (CONT) en 63% (13 ± 3 CONT) y 50% (18 ± 4 CONT), respectivamente (control: 36 ± 2 CONT; IND 10 mg/kg: 7 ± 2 CONT). Nuestros resultados sugieren que A. reticulata y P. Tagetoides tienen propiedades antiinflamatorias los resultados no pueden corroborar el uso de la población. C-143 C-144 PARTICIPACIÓN DE LA VÍA L-ARG-ON-GMPC EN EL EFECTO ANTINOCICEPTIVO DEL ROFECOXIB. DécigaCampos, M.* y López-Muñoz, F.J. Departamento de Farmacobiología del CINVESTAV, IPN., México, D.F. PARTICIPACIÓN PERIFÉRICA DE SEROTONINA Y PROSTAGLANDINAS EN LA NOCICEPCIÓN INFLAMATORIA INDUCIDA EN UN MODELO DE ARTRITIS GOTOSA. Rosa Ventura Martínez* y Francisco J. López-Muñoz. Departamento de Farmacobiología del CINVESTAV-IPN, México D.F. Los fármacos más utilizados para el tratamiento del dolor son los analgésicos antiinflamatorios no esteroideos (AAINES), éstos tienen como principal mecanismo de acción la inhibición de la enzima ciclooxigenasa (COX) quien forma parte de la biosíntesis de prostaglandinas, las cuales participan en la generación de dolor. Se ha determinado que algunos de estos fármacos tienen mecanismos adicionales de acción; como la activación de la vía opioide, la vía serotoninérgica y la vía del ON-GMPc para generar antinocicepción. Respecto a la vía del óxido nítrico (ON) se ha demostrado en varios modelos experimentales de nocicepción que el ON a nivel periférico participa en la analgesia producida por algunos AAINES. En el presente trabajo se evaluó la participación de la vía de la L-ARG-ON-GMPc a nivel periférico (local) en el efecto antinociceptivo producido por la administración oral del rofecoxib (un fármaco con mayor actividad para inhibir a la COX2), del cual no se conocen otros mecanismos adicionales de acción. El efecto antinociceptivo se determinó en ratas en un modelo que semeja a la enfermedad artritis gotosa en humano y que consiste en administrar ácido úrico en la articulación de la rata. El efecto antinociceptivo del rofecoxib (10 mg/kg) es bloqueado totalmente por la administración previa de un inhibidor de la sintasa de ON (LNAME), y parcialmente por un inhibidor de la guanilato ciclasa. Adicionalmente, el efecto antinociceptivo del rofecoxib se incrementa cuando se administra previamente un precursor de ON (L-ARG) así como un donador no enzimático de ON (SIN-1). Estos resultados sugieren que el rofecoxib además de inhibir a la COX-2 presenta un mecanismo adicional de acción como es la activación de la vía de la L-ARG-ON-GMPc a nivel periférico (local). Dos mediadores que están perfectamente caracterizados como hiperalgésicos a nivel periférico en diversos modelos antinociceptivos son la serotonina y las prostaglandinas. Sin embargo, la participación de la serotonina como mediador hiperalgésico involucra a un receptor diferente dependiendo del tipo de estímulo nocivo empleado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la participación tanto de la serotonina como de las prostaglandinas a nivel periférico en la nocicepción inducida por ácido úrico en ratas. Los resultados indican que el pretratamiento con inhibidores de la COX-1 (SC-560, 100 µg/art) y COX-2 (rofecoxib, 100 µg/art); así como antagonistas a los receptores 5-HT2A (ketanseina, 400 µg/art) y 5-HT3 (tropisetrón, 530 µg/art) administrados i.art. antes del ácido úrico, retrasaron estadísticamente la disfunción producida en este modelo comparado con el ABC del control (445.19±25.46, 500.51±9.95, 219.98±18.61 y 207.68±21.69 ua vs 63.67±7.78 ua, respectivamente; ANOVA, “t” de Dunnett, P<0.01). Sin embargo, sólo los inhibidores tanto de la COX-1 como de la COX-2 produjeron un efecto antinociceptivo cuando se administraron 2.5 h después del ácido úrico (188.94 ± 29.84 y 118.16 ± 7.12 ua vs. 0.67 ± 0.3 ua, respectivamente; ANOVA, “t” de Dunnett, P<0.01), lo cual no sucedió con los antagonistas de los receptores a serotonina, ketanserina y tropisetrón, analizados en este estudio (0.33 ± 0.15 y 0.45 ± 0.15 ua vs. 0.67 ± 0.3 ua, respectivamente). Los resultados indican que las PGs (generadas por ambas COX) participan tanto en la generación de la nocicepción como en su mantenimiento y que la 5-HT (al actuar por lo menos sobre los receptores 5-HT3 y 5HT2A) contribuye sólo a la generación del efecto nociceptivo generado por la administración intraarticular del ácido úrico al 30% pero no en su mantenimiento. Estos estudios nos ayudan a conocer acerca del mecanismo de acción de los analgésicos que se utilizan para la enfermedad clínica de la gota, y además, en algún momento poder utilizar fármacos más específicos para este estado patológico tan importante en la clínica-médica. C-145 C-146 EFECTO DE LAS CONDUCTAS MATERNALES SOBRE LA SENSIBILIDAD AL DOLOR EN LA RATA LACTANTE. Tlachi, J.L.,* Gómora, P., Beyer, C. Centro de Investigación en Reproducción Animal, CINVESTAV-UAT. EFECTO DE LA LIDOCAÍNA SOBRE LA EXPRESIÓN DE c-fos EN EL HIPOCAMPO DE RATAS EUTIROIDEAS. AlvaSánchez* C., Ortiz-Butrón R.+ y Pacheco-Rosado J+. Depto. de Fisiología “Dr. Mauricio-Russek”, ENCB-I.P.N., México, D. F. La conducta sexual tanto en la rata macho como en la hembra reduce la sensibilidad al dolor (SD) (Gonzalez-Mariscal y col., 1984 y Gómora y col 1984). En la rata gestante o lactante también se reduce la SD. Sin embargo, se desconoce sí la conducta maternal (CM) reduce la SD en la rata lactante. Para explorar esta posibilidad, estudiamos el efecto de las conductas de husmear a las crías, el acarreo de estas al sitio del nido sobre el umbral de la respuesta de vocalización a choque eléctrico (URVCE) a la cola en la rata lactante. Los días 3, 6 y 14 de lactancia, la camada fue retirada de la madre y se evalúo el URVCE. Se aplico un choque eléctrico con una intensidad de 30% por arriba del umbral (CSU) a la cola de la rata cada 10 segundos en 10 y 30 ocasiones en ausencia y presencia de la camada. En ausencia de la camada, las hembras vocalizaron con una media de 8/10, 8/10 y 7/10 CSU en los días 3, 6 y 14 de lactancia. Esta alta frecuencia de vocalización fue reducida significativamente (p<0.05) cuando la camada se regresó con la madre 2/30, 8/30 y 6/30 CSU. En la segunda parte del trabajo estudiamos el efecto de la succión sobre la SD. El URVCE fue evaluado en hembras lactantes al final de la separación (3 o 6 h) de las crías de la madre y durante 5, 20, 30 y 60 minutos de la reunión de las crías con la madre en los días 6, 14 y 21 de la lactancia. Una hembra ovariectomizada (ovx) fue el control para cada hembra lactante. Los datos se representan como porcentaje de cambio en base al primer valor del URVCE. El URVCE en las hembras lactantes se elevó significativamente (p<0.05) a los 5 (24 vs –10%), 20 (33 vs –9%), 30 (57 vs –5%) y 60 (21 vs –8%) en comparación al de las hembras ovx. Los resultados sugieren que la SD puede ser reducida por la CM en la rata lactante. La excitotoxicidad es un proceso en el cual hay muerte celular por activación de los mecanismos excitadores propios del sistema nervioso. Este proceso puede presentarse durante las convulsiones, dependiendo del modelo experimental utilizado. Existen evidencias en las que muestran la participación del gen de expresión temprana c-fos en los procesos de supervivencia y muerte celular. El objetivo del presente trabajo fue el de observar la expresión de c-fos en giro dentado de hipocampo (GD) durante la inducción de convulsiones con lidocaína, administrada en dosis única (modelo agudo) y crónicamente (kindling químico). Se emplearon ratas Wistar macho, las se dividieron en tres grupos: a) s.s 0.9% (i.p.) b) lidocaína i.p. (90 mg/kg) y c) lidocaína i.p. diariamente (60 mg/kg) hasta obtener 3 convulsiones tónico-clónico generalizadas en forma consecutiva. Dos horas posteriores a las convulsiones, se decapitaron y los cerebros se congelaron a –70ºC hasta realizar la técnica de inmuno-histoquímica ABC-P para proteína Fos. Los cortes de las regiones –1.8 a -2.8 mm posteriores a bregma, se observaron en un microscopio óptico de luz y se contó el número de neuronas en 10,000 µm2 de GD, obteniéndose el porcentaje de células granulares normales con y sin expresión de c-fos, células granulares alteradas con y sin expresión de c-fos. El modelo agudo provocó un mayor daño neuronal respecto al control y al modelo crónico. Este aumento va acompañado de una mayor expresión de c-fos. Proponemos que la administración aguda de lidocaína induce daño neuronal el cual es ocasionado por la exitotoxicidad mediada por la expresión del gen c-fos. + Becarios DEDICT-COFAA-IPN. Apoyado por DEPI-IPN. C-147 C-148 EFECTO DE LA LIDOCAÍNA SOBRE LA EXPRESIÓN DE c-Fos EN EL HIPOCAMPO DE RATAS HIPOTIROIDEAS. Cano-Europa E.*, Ortiz-Butrón R.+ y Pacheco-Rosado J+. Depto. de Fisiología “Dr. Mauricio-Russek”, ENCB-I.P.N., México,D.F. EFECTOS DEL PENTILENTETRAZOL (PTZ) Y LA 4AMINOPIRIDINA (4-AP) SOBRE LOS POTENCIALES AUDITIVOS EVOCADOS DEL TALLO CEREBRAL (PAETC) Y LA SENSIBILIDAD AUDITIVA. Nekrassov, V.*, y Sitges, M. CNR, Inst. Nacional de la Comunicación Humana, SSA. e Inst. de Investigaciones Biomédicas, UNAM, México. Hemos encontrado en trabajos previos, que las ratas hipotiroideas se convulsionan más fácilmente cuando se administra lidocaína (i.p.). Por otro lado, también hemos visto que las ratas hipotiroideas tienen un menor número de células en la región hipocampal de CA3. Además, se sabe que un influjo de Ca2+, en las neuronas centrales, por la activación de canales NMDA induce la expresión temprana de c-fos. Por lo que el objetivo del presente trabajo fue el de observar si un estado de hipotiroidismo modifica la expresión de c-fos en hipocampo. Se emplearon ratas Wistar macho, las cuales recibieron metimazol disuelto en el agua de beber (60 mg/Kg/4 semanas). Estas ratas se dividieron en dos grupos: a) s.s 0.9% (i.p.) y b) lidocaína (i.p., 60 mg/kg) diariamente hasta la obtención de 3 veces consecutivas de convulsiones tónico-clónico generalizadas. Dos horas posterior al inicio de las convulsiones, se decapitaron y los cerebros se congelaron a –70ºC hasta evaluar la expresión del proto-oncogene c-fos determinado por el método inmunohistoquímico ABC-P. Finalmente se diferenciaron con rojo neutro 1%. Los cortes de las regiones –1.8 a -2.8 mm posteriores a bregma, se observaron en un microscopio óptico de luz y se contó el número de neuronas en 10,000 µm2 de la región de CA3 y GD, obteniéndose el porcentaje de neuronas normales con y sin expresión de c-Fos, y el de neuronas alteradas con y sin expresión de c-fos. El hipotiroidismo provocó daño neuronal en CA3 y en GD. Sin embargo, la expresión de c-fos es mayor en GD que en CA3. Además, el kindling aumenta la expresión de c-Fos en ambas regiones. + Becarios DEDICT-COFAA-IPN. Apoyado por DEPI-IPN. Los PAETC son potenciales evocados formados por varias ondas que se presentan dentro de los primeros 10 mseg después de aplicar un estímulo auditivo. Los cambios en las ondas de los PAETC indican alteraciones de núcleos auditivos específicos en el tallo cerebral. Varios estudios en pacientes epilépticos reportan anomalías en algunas de las ondas de los PAETC. Desafortunadamente en el caso de los pacientes es difícil realizar un control estricto de las variables experimentales ya que particularmente aquellos con epilepsia generalizada están o han sido medicamentados. En el presente trabajo investigamos el efecto de la epilepsia generalizada, inducida con PTZ (100 mg/kg, i.p.) y con 4-AP (2 mg/kg, i.p.) en cobayos, sobre la amplitud y la latencia de las diferentes ondas de los PAETC y sobre el umbral auditivo. La comparación de los parámetros de las ondas de los PAETC antes y a varios tiempos después de la inyección de los agentes convulsivantes indica que, aunque los mecanismos de acción del PTZ y de la 4-AP son diferentes, ambos elevan notoriamente el umbral auditivo y ejercen efectos comunes sobre la onda P4 (i.e. disminuyen su amplitud y aumentan su latencia). El PTZ además aumenta las latencias de las ondas P2 y P3 mientras que la 4-AP ejerce un aumento dramático de la amplitud de la onda P3. Existe un paralelismo entre la severidad de los cambios inducidos por los convulsivantes sobre el EEG y sobre los PAETC. Estos hallazgos indican que el núcleo lateral de la oliva superior (que genera la onda P4) puede estar involucrado tanto en el desarrollo de la epilepsia generalizada como en la disminución de la sensibilidad auditiva inducidas por ambos agentes convulsivantes. C-149 C-150 EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE CICLOSERINA EN GIRO DENTADO SOBRE EL KINDLING QUÍMICO EN RATAS. Záyago-Ortiz M.*, Hernández-García A.* y PachecoRosado J+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México, D.F. EFECTO DE LA DISMINUCIÓN DE NEURONAS DE LA REGIÓN CA3 HIPOCAMPAL POR ÁCIDO KAÍNICO SOBRE EL DESARROLLO DEL KINDLING QUÍMICO EN RATAS. Perez-Cruz Y.*, Hernández-García A.*, Ortiz-Butrón R.+. Depto. de Fisiología, ENCB-I.P.N., México, D.F. La Epilepsia es un trastorno intermitente del sistema nervioso central, debida a una descarga brusca, excesiva y desordenada de las neuronas cerebrales. Una de las regiones que participa en la generación de las crisis convulsivas es el hipocampo. Esta estructura presenta circuitos reverberantes en los que la excitación y la inhibición se encuentra en equilibrio. Se consideró importante estudiar si la administración en giro dentado de cicloserina (agonista glutamatérgico tipo NMDA) altera el proceso convulsivo en ratas. Se emplearon ratas Wistar macho, con un peso de 200-300 g, las cuales se dividieron en los grupos control y tratado. Se colocó una cánula guía en giro dentado hipocampal y después de 1 semana de haber realizado la cirugía se administró 1 µl de S.S. para el grupo control y 1 µl de cicloserina (0.5M) para el tratado. Posteriormente se administró a ambos grupos lidocaína diariamente por vía ip., hasta que los animales presentaron convulsiones tónicoclónicas generalizadas. Para determinar el sitio exacto de la cánula, los animales se perfundieron por vía cardíaca con formol al 10% y se realizaron cortes coronales por congelación de 15 µm de grosor. Se tiñeron con la técnica de Kluver-Barrera modificada. Se descartaron los animales en los que la cánula no estuviera en la región de giro dentado. La susceptibilidad a presentar convulsiones se midió comparando el número de estímulos necesarios para alcanzar por primera vez las diferentes fases del kindling, encontrándose una diferencia significativa en las fases 2 y 3 (p<0.05) entre el grupo control y el tratado. Los resultados muestran que la administración de cicloserina en giro dentado hipocampal favorece la presencia de convulsiones. +Becario DEDICT-COFAA-IPN. Se ha considerado que el hipocampo es una estructura que participa en la amplificación de las descargas convulsivas que tienen su origen en las regiones límbicas. En experimentos previos se ha demostrado que un estado hipotiroideo facilita los procesos convulsivos. Por otro lado, se sabe que la administración sistémica de ácido kainico, produce daño selectivo de las células piramidales de la región CA3 hipocampal. Por lo anterior se consideró importante observar si dicha destrucción es selectiva y altera el umbral al kindling químico con lidocaína. Se emplearon ratas hembra Wistar (200- 300g), se dividieron en los grupo eutiroideo e hipotiroideo. Estas últimas recibieron metimazol disuelto en el agua de beber (60 mg/Kg/4 semanas). Se administró ácido kaínico i.p. a ratas eutiroideas con dosis unica de 1mg/Kg y 5mg/Kg y a las ratas hipotiroideas con una dosis de 1mg/Kg. Dos semanas posteriores a este tratamiento, se les administró diariamente lidocaína (60 mg/Kg/día), hasta el desarrollo de convulsiones tónico-clónicas. Los animales se perfundieron por vía cardíaca con formol al 10%. Posteriormente los cerebros se incluyeron en parafina y se realizaron cortes coronales cerebrales de 7µm de grosor. Se tiñeron con la técnica de Kluver-Barrera modificada. Los resultados muestran que la aplicación de ácido kaínico provoca disminución neuronal de ambos grupos de ratas. También se observó que a mayor daño hipocampal aumenta la susceptibilidad al kindling. Proponemos que el hipocampo participa en la generación de convulsiones inducidas por lidocaína. + Becaria DEDICT-COFAA-IPN. Este proyecto es apoyado por DEPI-IPN 970509. C-151 C-152 RESISTENCIA A LAS CRISIS CONVULSIVAS PRODUCIDAS POR NMDA DESPUÉS DEL TRATAMIENTO NEONATAL CON GLUTAMATO MONOSÓDICO. 1Ureña-Guerrero, M.E.*, 1López- Pérez, S.J.*, 1Morales-Villagrán, A.* y 1,2Beas-Zárate, C. 1Lab. de Neurobiología, Depto. de Biol. Cel. y Mol., CUCBA, U. de G.; y 2Div. de Neurociencias, CIBO-IMSS, Guadalajara, Jalisco, México. EVALUACIÓN DEL EFECTO DEL ÁCIDO KAÍNICO EN RATAS PREVIAMENTE TRANSPLANTADAS CON UNA LÍNEA CELULAR GABAÉRGICA. Castillo C.G.*, Mendoza M.S.*, Giordano M. Laboratorio de Plasticidad Cerebral, Centro de Neurobiología, Campus UNAM- UAQ, Km. 13 Carretera Qro. S.L.P., Juriquilla, Queretaro, Qro., México. La neurodegeneración excitotóxica se genera por sobreactivación de los receptores para glutamato. La administración subcutánea de glutamato monosódico (GMS), como modelo de excitotoxicidad, modifica la neurotransmisión inhibidora GABAérgica en corteza cerebral, estriado e hipocampo. Debido a que alteraciones en la inhibición neuronal pueden facilitar la generación de crisis convulsivas, en este trabajo se evaluó el efecto convulsivante del N-Metil-D-Aspartato (NMDA) después del tratamiento neonatal con GMS. Se utilizaron tres grupos de ratas (macho de la cepa Wistar): 1.Intacto; 2.GMS (4mg/g de peso corporal); y 3.NaCl equipolar al GMS (1.38 mg/g de peso corporal). Animales recién nacidos recibieron una sola inyección subcutánea, los días 1,3,5 y 7 de edad. A los 60 días de edad se les implantaron: una cánula de infusión en el ventrículo lateral derecho y cuatro electrodos monopolares bilaterales, 2 en corteza motora y 2 en hipocampo. Cuatro horas después, se infundió 1.25-25 nmol de NMDA. En animales intactos, 5, 10 y 25nmol de NMDA produjeron crisis límbicas que evolucionaron hacia el status epilépticus. Las dosis de 3, 2.5 y 1.25 produjeron como síntoma más severo, el patrón convulsivo conocido como “rearing” y las alteraciones conductuales persistieron, al menos, 45 minutos después de la aplicación del NMDA. En animales tratados con GMS las dosis bajas, producen crisis tónico-clónicas generalizadas y carreras alocadas, sin embargo, las crisis desaparecen alrededor de los 20 minutos posteriores a la aplicación del NMDA. Trenes de descargas de alta frecuencia y amplitud aparecieron, casí inmediatamente después de iniciada la administración del convulsivante en ratas intactas. Sin embargo, en animales tratados con GMS, las alteraciones en la actividad eléctrica cerebral fueron menos severas. Los resultados indican que el tratamiento con GMS promueve una resistencia a las crisis convulsivas inducidas por NMDA, debido posiblemente a cambios en la composición de subunidades de los receptores para NMDA, mismos que se han demostrado recientemente en este modelo. Trabajo financiado parcialmente por CONACyT 30901-M, C.B.Z. Becario CONACyT 158721, M.E.U.G. Uno de los modelos animales de la epilepsia del lóbulo temporal consiste en la aplicación sistémica de ácido kaínico (KA) utilizando bajas dosis y de manera repetida (Hellier, J.L. et al., 1998). El KA genera alteraciones tanto de la transmisión glutamatérgica como de la GABAérgica provocando crisis convulsivas tónico-clónicas (Ben-Ari, Y., 2000). Usando este modelo se evaluó el efecto neuroprotector sobre el desarrollo de las crisis producido por el transplante en la sustancia nigra pars reticulata de una línea celular inmortalizada transfectada con el cDNA del GAD67h (ConejeroGoldberg, c. et al., 2000). Se usaron ratas macho de la cepa Sprague - Dawley que se distribuyeron en 3 grupos: vehículo VEH, transplante con la línea celular M213-20 cl-4 transfectada con el cDNA del GAD67h (Cl-4) y por último un grupo de ratas solo tratado con KA (CTRL). A las 8 semanas posteriores a la cirugía se realizó el tratamiento con el KA. Tanto al grupo Cl-4 como al CTRL se les administró KA por vía intraperitoneal a una dosis de 5 mg/kg/hr hasta desarrollar la fase V descrita por Racine. Al grupo VEH se le administró por la misma vía solución salina Los resultados obtenidos hasta el momento muestran que el grupo previamente transplantado con CL-4 necesitó un mayor número de inyecciones de KA para llegar a presentar la fase V. Así mismo la cantidad de fases III, IV y V que desarrollaron fue menor con respecto al grupo sin transplante. Estos resultados conductuales se relacionarán con la localización anatómica del transplante, una vez concluido el análisis histológico. C-153 C-154 CAMBIOS EN LOS NIVELES DE RECEPTOR DELTA OPIOIDE EN CEREBRO DE RATAS CON EPILEPSIA POR ÁCIDO KAÍNICO. Araiza, I.* y Rocha L. Farmacobiología CINVESTAV-IPN. EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIEPILÉPTICO DEL ÁCIDO 2-METOXI-4-(2-PROPENIL)FENOXIACÉTICO POR EL MÉTODO DE KINDLING ELÉCTRICO AMIGDALINO EN RATA. García-González A1*., PachecoRosado J2+., Hernández-García A2*., Labarrios F3*., Tamariz J3*+., y Chamorro-Cevallos G1*+. 1Laboratorio de Toxicología Preclínica, 2 Dpto. de Fisiología, 3Dpto. de Química Orgánica. ENCB-I.P.N. México, D.F. La activación del receptor delta opioide produce un efecto inhibitorio en la actividad epiléptica. El Ácido Kaínico (AK) i.p. es un modelo de epilepsia del lóbulo temporal (ELT) que activa al sistema de los opioides endógenos. Estudios en humano demuestran que pacientes con ELT presentan un aumento significativo en los niveles de receptor delta opioide en la corteza temporal. En el presente estudio se evaluó por autorradiografía los niveles de receptor delta en cerebro de ratas con epilepsia por AK i.p. Se utilizaron ratas Wistar macho 250-300 gr. Un grupo experimental (AK; n=6) recibió una inyección de AK (10 mg/kg ) en un volumen total de (1ml/kg i.p.). Los animales del grupo control (CTRAK: n=6) se manipularon igual que el grupo AK, excepto que se les inyectó solución salina. A los 40 días posteriores al tratamiento, los animales se sacrificaron por decapitación y sus cerebros se procesaron con autorradiografía para receptores delta (10 nM de 3HDPDPE). El grupo AK presentó niveles elevados del receptor delta en las siguientes áreas cerebrales: núcleos amigdalinos basolateral derecho (35%) e izquierdo (26%); las cortezas temporales derecha (57%) e izquierda (57%) y las cortezas del cíngulo derecha (59%) e izquierda (43%). Tres ratas (50%) del grupo AK mostraron un decremento significativo en la unión al receptor delta en las cortezas piriforme derecha (60%) e izquierda (69%). Cabe resaltar que los cambios encontrados en los niveles de receptor delta en la corteza temporal, se correlacionan de manera importante con los cambios observados en receptores delta en corteza temporal de pacientes con ELT. Los resultados obtenidos sugieren que el modelo de ácido kaínico i.p. en rata reproduce con eficiencia los cambios de los receptores delta opioide que se dan en humanos con ELT. Parcialmente financiado por CONACyT 31702M y Fundación Miguel Alemán. La α-asarona, principio activo de la planta Guatteria gaumeri, ha demostrado alta eficacia como agente anticonvulsionante. Sin embargo, en diferentes modelos experimentales produjo mutagenicidad, teratogenicidad y carcinogenicidad. Por tal motivo se han sintetizado análogos estructurales, uno de los cuales es el ácido 2-metoxi-4-(2-propenil)fenoxiacético (AMPF). Se estudió la actividad antiepiléptica de esta molécula en ratas Wistar macho con un peso aproximado de 250-350 g al inicio del estudio, las cuales fueron implantadas en la amígdala izquierda con un electrodo bipolar. Después de una semana de recuperación postquirúrgica, se formaron 5 grupos experimentales: a) Testigo, b) AMPF 40 mg/kg, c) AMPF 80 mg/kg, d) α-asarona 40 mg/kg, y e) α-asarona 80 mg/kg, los cuales recibieron un tren de impulsos cuadrados de 1 ms de duración a una frecuencia de 50 Hz, de 300 µA de intensidad, durante 10 seg, cada 30 min, 12 veces al día hasta que se presentara 3 crisis fase V. De acuerdo a los resultados obtenidos la mayor protección (82%) fue debida a la α-asarona (80 mg/kg), siguiéndola la dosis baja de este compuesto con un 50%, a continuación el AMPF 40 mg/kg (40%) y por último el AMPF (80 mg/kg) en un 25%. Se concluye que la α-asarona brinda mayor protección y posee cierta ventaja sobre el compuesto fenoxiacético en el establecimiento del kindling amigdalino. Trabajo apoyado parcialmente por CONACYT 31694N. + Becarios DEDICT-COFAA-IPN. C-155 C-156 PALMITONA RETARDA EL ESTABLECIMIENTO DEL “KINDLING” QUÍMICO INDUCIDO CON PENTILENTETRAZOL EN EL RATÓN. González-Trujano, ME*., Briones, VM*., Neri, L*., Navarrete, A*. y Rocha, L. Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente. Depto. De Farmacobiología del CINVESTAV-IPN. Facultad de Química-UNAM. México. EPILEPSIA FOCAL AMIGDALINA: EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN DEL NERVIO VAGO. López-Ruiz E*, VegaFlores G*, Arias Caballero A*, Fernández-Guardiola A y Martínez A. Facultad de Psicología UNAM y Instituto Nacional de Psiquiatría SSA. México, 14370 D.F. Palmitona es un compuesto lípido aislado del extracto etanólico de las hojas de Annona diversifolia. Esta cetona produce efectos antiepilépticos en modelos experimentales de epilepsia agudos que involucran inhibición del sistema GABAérgico tales como pentilentetrazol (PTZ) y bicuculina, y en convulsiones inducidas por la 4-aminopiridina. En el presente estudio, el efecto de la palmitona se evaluó en el establecimiento de las crisis generalizadas del “kindling” químico inducido con PTZ. Se utilizaron ratones Taconic (25-30 g, n=6). El grupo control recibió el vehículo y los grupos experimentales una dosis de 10 o 20 mg/kg de la palmitona. Los tratamientos se realizaron i.p. cada tercer día y los ratones recibieron una dosis de PTZ (40 mg/kg) una hora después de cada tratamiento. Los ratones administrados con la palmitona requirieron de 12 administraciones de PTZ para manifestar las crisis generalizadas en comparación con 6 administraciones de PTZ requeridas para el grupo control. En todos los grupos se observó un aumento progresivo en el porcentaje de animales con crisis generalizada. Sin embargo, en los grupos tratados con la palmitona sólo aproximadamente el 50% de los animales en comparación con el 100% del grupo control manifestó crisis generalizada. Estudios de microdiálisis muestran que la palmitona disminuye las concentraciones extracelulares del aminoácido excitador glutamato. Estos resultados sugieren que una disminución en la liberación de glutamato podría ser parte del mecanismo de acción de la palmitona para evitar el establecimiento del “kindling” químico en los ratones. Apoyado parcialmente por CONACYT 21420M y 115173, la Fundación Miguel Alemán y el INP “Ramón de la Fuente” Se ha descrito el efecto anticonvulsivo de la estimulación eléctrica del nervio vago (NV) y del ritmo theta hipocampal sobre la ocurrencia de crisis epilépticas. En la relación con el sueño y la vigilia también se ha descrito que la ocurrencia de crisis epilépticas es menor durante el sueño paradójico o la vigilia, condiciones en la cual se presenta el ritmo theta hipocampal. El objetivo es observar el efecto anticonvulsivo del nervio vago por la evocación del ritmo theta sobre la epilepsia focal amigdalina en ratas. Se utilizaron 9 ratas macho de la cepa Wistar, que fueron implantadas para registro convencional de sueño, una cánula unida a un electrodo dirigida hacia la amígdala (AM) del lóbulo temporal y el NV izquierdo. Se registro un control de una hora y posteriormente la penicilina G sódica (Pn) se microinyectó en AM 50 UI. Una hora después de la Pn se estimulo eléctricamente el NV (ENV) (1.2-3.0 mA, pulsos de 0.5 ms, 30 Hz) durante 30 s con intervalos de 15 minutos en dos horas. La actividad eléctrica cerebral se registró durante cinco horas. La ENV modifica a la actividad interictal induciendo un aumento en la latencia de aparición y una disminución del 9.1 % en el tiempo total. Por otro lado observamos una facilitación de las espigas durante el sueño de ondas lentas y una disminución en el sueño MOR en presencia del ritmo theta, comprobando el efecto anticonvulsivo en este modelo de epilepsia. Se muestra que la ENV causa un aumento en la latencia de aparición y una reducción de las espigas interictales. Este efecto está mostrando un mecanismo de control en las crisis límbicas, por lo que se sugiere que la ENV induce el ritmo theta a partir de las conexiones de relevo entre el NTS y el hipocampo, las cuales involucran al área infralímbica de la corteza medial frontal y tálamo medial e intralaminar. Este trabajo fue apoyado parcialmente por CONACYT 31771-N, DGAPA IN-203396 UNAM, Instituto Nacional de Psiquiatría SSA 3220. C-157 C-158 ANÁLISIS AUTORRADIOGRÁFICO DEL EFECTO DEL “KINDLING” ELÉCTRICO AMIGDALINO Y DE LA ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA TIPO “QUENCHING” EN LA ADENILATO CICLASA EN CEREBROS DE RATA. López-Meraz M.L.*1,2, Neri-Bazán L.*1, Briones M.*2 y Rocha L.1 1 Departamento de Farmacobiología, CINVESTAV-IPN; 2 Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente”. ESTIMULACIÓN ELÉCTRICA ANTIEPILEPTICA EN LÓBULO TEMPORAL DE HUMANOS CON EPILEPSIA RESISTENTE A FÁRMACOS MODIFICA LOS NIVELES TISULARES DE AMINOÁCIDOS. Cuéllar, M*1,3 . Velasco, M*2 ., Velasco, F*2., Velasco, A.L*2., Neri, L*1., Briones, M*3., Rocha, L1. 1Farmacobiología, CINVESTAV-IPN. 2Hospital General de México. 3Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente”. El “kindling” eléctrico es un modelo experimental de epileptogénesis y epilepsia del lóbulo temporal. Por otra parte, un tipo de estimulación eléctrica de baja frecuencia denominada “quenching” evita el paso de crisis parciales a generalizadas en el “kindling”. En el presente estudio se evaluó por autorradiografía in vitro la unión de 3H-forskolina (10 nM) a la adenilato ciclasa en el cerebro de ratas con “kindling” eléctrico amigdalino (K) (tren de 1 s de duración con pulsos de 1 ms a 60 Hz a una intensidad entre 100 y 400 µA, dos veces al día hasta presentar 5 crisis fase V consecutivamente); en ratas que únicamente recibieron estimulación tipo “quenching” (Q) (tren de 15 min de duración con pulsos de 0.1 ms a 1 Hz a una intensidad entre 200 y 400 µA dos veces al día, para un total de 40 estimulaciones), y en ratas que recibieron estimulación tipo “kindling” e inmediatamente después estimulación tipo “quenching” (K+Q) durante 40 ensayos. En comparación con el grupo control, que no recibió ningún tipo de estimulación, se observó una disminución de la unión de 3H-forskolina en la amígdala anterior (AA) contralateral al sitio de estimulación en los grupos K (29.01%) y K+Q que presentó crisis generalizadas y/o estado kindled (48.6%), al igual que en la AA de ambos hemisferios cerebrales en el grupo K+Q que presentó únicamente crisis parciales (48.41% ipsi y 49.45% contralateral). El grupo Q no mostró cambios significativos en la unión de 3H-forskolina. Estos resultados indican cambios diferenciales en la unión a la adenilato ciclasa dependiendo de la fase del “kindling” presentada y que la AA es una estructura altamente sensible a tales modificaciones. La disminución en la unión de 3H-forskolina en la AA puede asociarse a mecanismos que previenen la propagación de la actividad epiléptica. Apoyado por CONACyT beca 153240. Objetivo: Los pacientes con epilepsia del lóbulo temporal (ELT) presentan disminución del contenido del ácido gamma-aminobútirico (GABA) en el foco epiléptico (hipocampo). Por otra parte, la estimulación eléctrica crónica subumbral (EEC) en hipocampo de pacientes con ELT induce efecto antiepiléptico. Se sugiere que la EEC incrementa el contenido tisular de aminoácidos inhibitorios. Materiales y Métodos: El contenido tisular de aminoácidos de hipocampo y parahipocampo de pacientes con ELT y sometidos a EEC (grupo EEC, n=4), se determinó por la técnica de cromatografía de líquidos de alta resolución. La EEC consistió de estimulación continua de pulsos bifásicos (pulso de 0.45 seg de duración a una frecuencia de 130/seg, a una amplitud de 0.2-0.4 mA evocados a través de un generador de pulsos Medtronic DBS). El tejido control se obtuvo de pacientes con ELT sin EEC (grupo ELT, n=10). Resultados: Cuando se comparó con el grupo ELT, el grupo EEC mostró en hipocampo un incremento en los niveles de contenido tisular de GABA (332%), taurina (126%), glicina (114%), glutamina (220%) y glutamato (296%), mientras que en parahipocampo se observó incremento de taurina (156%), glutamina (181%) y aspartato (199%). Conclusión: Estos resultados sugieren que la EEC activa a neurotransmisores inhibitorios y excitatorios en hipocampo y parahipocampo de pacientes con ELT. Estos cambios pueden estar asociados al efecto antiepiléptico que induce la EEC. Apoyado por CONACYT (31702-M). C-159 C-160 ALTERACIONES EN LA COMPRENSIÓN DE ORACIONES DE DIFERENTE GRADO DE COMPLEJIDAD SINTACTICA INDUCIDAS CON ESTIMULACIÓN ELECTRICA CORTICAL 1 2 (EEC). Trejo-Martínez, D.* , Marcos-Ortega, J. * , Gadea-Lacasa N. *2, Martínez-Rosas, A. R. 3 y Ondarza-Rovira, Rodolfo3. 1Universidad Nacional Autónoma de México, 2Hospital General de México, 3Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía “MVS” (INNNMVS). LA SEROTONINA MODULA LOS EPISODIOS DE INMOVILIDAD INDUCIDOS POR MANIPULACIÓN EN EL MUTANTE MIELINICO taiep. Ita M.L.,* Cortés M.C.* y Eguibar J.R., Instituto de Fisiología, B.U.A.P. Apdo. Postal 406. Puebla, Pue. México El área de Broca no solo participa en la expresión del lenguaje oral, sino que también es fundamental para la comprensión oral de las diferentes estructuras sintácticas. La EEC es una técnica ampliamente utilizada para la localización funcional de áreas cerebrales debido a la precisión anatómica y a la posibilidad de inducir disfunción en el lenguaje durante procedimientos quirúrgicos en los que el paciente es intervenido despierto. Son escasos los reportes con respecto a la investigación de la comprensión oral de la sintaxis con el empleo de técnicas de EEC transoperatoria. No existen reportes al respecto en hispanohablantes y los estudios realizados en otros idiomas carecen de un control lingüístico específico. Nuestros objetivos fueron comprobar en nuestra población la participación del área de Broca en la comprensión de cuatro tipos de oraciones de diferente grado de complejidad sintáctica y realizar un análisis neurolingüístico de las alteraciones inducidas. En este trabajo se incluyeron 5 pacientes epilépticos del INNNMVS, diestros, quienes fueron sometidos a neurocirugía estereotáctica y funcional despiertos bajo técnicas de neuroleptoanalgesia (tres controles y dos experimentales). La comprensión del lenguaje oral se exploró por medio de un instrumento lingüístico diseñado por dos de los autores para la valoración del efecto de la concordancia sujeto-verbo en la comprensión de la sintaxis en afásicos de Broca hispanohablantes. En los dos sujetos experimentales se logró interferir en la comprensión oral de las oraciones presentadas, con lo que se demuestra la participación del área de Broca en dicha tarea. En ambos pacientes el porcentaje de errores cometido en cada tipo de oración es proporcional a la complejidad sintáctica. También se encontró una variante anatomo-funcional importante en dichos sujetos. Estos resultados nos muestran que la técnica de EEC transoperatoria es un método adecuado para la investigación de algunos procesos lingüísticos desde el punto de vista de la neuropsicología cognitiva (supuesto de transparencia, Caramazza, 1984). La rata taiep es un mutante mielínico que presenta signos neurológicos como son: temblor, ataxia, inmovilidad, epilepsia y parálisis. Esta rata desarrolla episodios de inmovilidad (EI) inducidos al suspenderlos de la cola de los 7 a los 9 meses de edad. Durante los EI, registros electroencefalográficos muestran la presencia de una desincronización de la corteza cerebral, asociado a ritmo theta en el hipocampo, características similares a las observadas en el sueño de movimientos oculares rápidos (MOR). Adicionalmente, estas ratas presentan una latencia corta al primer episodio de sueño MOR y una desorganización de esta etapa de sueño. Estos signos y síntomas son similares a los que muestran los pacientes afectados por la narcolepsia-cataplejía, así como también en los perros narcolépticos Doberman y labrador. Se ha observado que la serotonina incrementa la vigilia, así como una disminución de la transmisión serotoninérgica disminuye los episodios de cataplejía. En el presente trabajo exploramos el efecto de drogas serotoninérgicas con acción sobre los receptores tanto pre como postsinápticos, administradas por vía intraperitoneal en un esquema de dosis crecientes sucesivas con un intervalo cada 48 hrs. Los resultados indican que el 8-OH-DPAT (agonista 5-HT1A), no disminuyó singificativamente los EI, mientras que el DOI (agonista 5-HT2A) los disminuyó de manera dosis dependiente aboliéndolos con la dosis de 300 y 1,000 µg/kg. La espiperona (antagonista 5HT2A) incrementó los EI significativamente, mientras que la ketanserina (antagonista 5-HT2A) los disminuyó. Nuestros resultados muestran que el sistema serotoninérgico está involucrado en la regulación de los EI inducidos por manipulación en la rata taiep. Parcialmente financiado por CONACYT 31758-N. VPPII-2002 y VIEP II 76GOI a cargo JRE.MCC y MLIA son becarias del CONACYT C-161 C-162 ACTIVIDAD OSCILATORIA DURANTE EL SUEÑO PARADÓJICO. ORGANIZACIÓN EN BANDAS ANCHAS. del Río-Portilla Y.*1, Muñoz-Torres, Z.*1, Guevara, M.A.2, Corsi-Cabrera, M.1 1Laboratorio de sueño, Facultad de Psicología, Posgrado, UNAM, México. D.F. 2Inst de Neurociencias U de Guadalajara, Jal. VAGUS NERVE CHRONIC STIMULATION IN CATS: EFFECTS ON SLEEP AND EEG POWER SPECTRA ANALYSIS. Martínez-Vargas D*, Valdés-Cruz A*, MagdalenoMadrigal VM*, Fernández-Mas R*, Almazán-Alvarado S*, Fernández-Guardiola A. Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón De La Fuente Muñiz”. Calzada México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, Tlalpan México, D. F. 14370 Para identificar las etapas del sueño se ha utilizado la división tradicional de las bandas anchas del EEG, que surgió a partir de su inspección visual. Estudios previos realizados en el laboratorio han demostrado que las bandas tradicionales no reflejan adecuadamente la microarquitectura del EEG de las etapas de sueño. Durante el sueño paradójico (SP) se presentan fenómenos fásicos y tónicos los cuales se consideran fisiológica y funcionalmente diferentes, por tal motivo el presente trabajo pretende identificar finamente las bandas electroencefalográficas que caractericen al SP tónico sin movimientos oculares (SPT) y fásico con movimientos oculares (SPF). Se registro el EEG de SPT, SPF y de vigilia con ojos cerrados (VOC) de 8 hombres diestros voluntarios entre 23 y 30 años de edad. Se obtuvieron los espectros de potencia de 1 a 90 Hz con 1Hz de resolución y los resultados se sometieron a un análisis de componentes principales (ACP) para cada condición. Los ACP mostraron una división de bandas que difieren entre los tres estados fisiológicos y de las bandas tradicionales. Para VOC no hubo distinción entre delta y theta, mientras que las frecuencias rápidas fueron separadas finamente en tres bandas de beta y dos de gamma. Para las dos condiciones de sueño se separó la frecuencia de 1Hz. Para SPF se identificó una banda independiente de theta que covaría con beta mientras que para SPT se agrupan las frecuencias que corresponden a delta theta y alfa en una sola banda y se separan dos bandas estrechas de 13 y 14Hz. La identificación de una banda de theta es exclusiva del SPF y al covariar con beta indica una activación tanto cortical como hipocámpica. The purpose was to analyze the sleep structure and the dynamics of EEG activity effects in freely-moving cats with left vagus nerve electrical stimulation (VNS). Six adult male cats we-re implanted stereotaxically into both temporal lobe amygdalae, and both lateral geniculate bodies to recording ponto-geniculo-occipital waves (PGO). Was recorded EEG, EMG and EOG for convencional sleep recording. A bipolar hook stainless-steel electrode was implanted in the unsectioned left vagus nerve. VNS during 1 minute (1.5-3.0 mA, 0.5 ms pulse 30 Hz.) 5 times (started 10:00 am) at 1 hour rate, during 5 days was done. All cats had 5 base line (BL) and 5 poststimulation (PS) recordings. Six cats were undergone to five daily 23 hours sleep recording (starting 08:00 a.m.) at each one of the three conditions. EEG data were transferred through and analog/digital system to a cumputer for spectral power analysis. Total time and number of each stage and density of PGO waves of REM were analyzed. The VNS induced significative increase of density of PGO waves (p< 0. 05) and total time of REM sleep (p< 0.05). Also, eventually, unexpected transitions from wake stage to REM sleep. Spectral power analysis show an increse in the relative power during slow wave sleep (SWS) (bands 0.5-4.0 Hz and 12-14 Hz), and during fast activity in the quiet wake (W) (27-31 Hz) with VNS. Our results suggest that VNS influences through vagal afferences related with areas which play a role in all sleep stages. The relevance of spectral power analysis must be emphasized, since long-term changes were observed which were reflected on SWS and W relative power increase, despite that these sleep stages had no changes in the total time. C-163 C-164 MICROARQUITECTURA DE LA ACTIVIDAD EEG DEL SUEÑO PARADÓJICO FÁSICO Y TÓNICO EN EL HOMBRE. Muñoz-Torres, Z.* del Río-Portilla, Y. * Corsi-Cabrera, M. Laboratorio de sueño, Facultad de Psicología, Posgrado, UNAM. México D.F. INTERACCION DEL PEPTIDO VASOACTIVO INTESTINAL (VIP) Y DE UN ANTAGONISTA MUSCARINICO M2 EN LA REGULACION DE SUEÑO EN LA REGION PONTINA DEL GATO. Jiménez Anguiano, A*., Manríque Arias, J.C*. y Velázquez Moctezuma, J. Area de Neurociencias. Depto. de Biología de la Reproducción. Universidad Autónoma MetropolitanaIztapalapa. C.P.09340. México D.F. El sueño paradójico (SP) se caracteriza por fenómenos fásicos que ocurren intermitentemente sobre un fondo de cambios fisiológicos tónicos; entre ellos destacan los movimientos oculares rápidos, las ondas PGO y los cambios vegetativos. Estos fenómenos fásicos tienden a agruparse en el tiempo y están asociados a salvas de disparos neuronales en el área peribraquial. Los estudios sobre microarquitectura del EEG del SP son muy escasos y no hacen diferencia entre SP tónico y fásico. Este estudio se realizó con el objeto de obtener una mejor descripción de la microarquitectura del SP fásico y tónico. Participaron 10 voluntarios hombres (23-30 años), con hábitos regulares de sueño, en buen estado de salud. Se registró el sueño por dos noches consecutivas (Fp1, Fp2, F3, F4, C3, C4, T3, T4, P3, P4, O1, O2, EOG, EMG). La señal se capturó en una computadora PC a través de un convertidor analógico digital con una frecuencia de muestreo de 256Hz. Se seleccionaron épocas de 2 segundos libres de artefactos, pertenecientes a SP, veinte de SP con movimientos oculares o fásico (SPf), y veinte sin movimientos oculares o tónico (SPt). Se obtuvo el espectro de potencia absoluta y de correlación de 1 a 90 Hz con una resolución de 1Hz. El SPf se caracterizó por mayor potencia absoluta (PA) (ANOVAs; p<0.009) en 5 y 9 Hz y de 20 a 25 Hz, y menor en 12, 13 y 15 Hz. También por mayor correlación interhemisférica en 4 Hz y de 18 a 49Hz y menor en 1Hz. El SPf se caracteriza por mayor activación y acoplamiento temporal cortical e hipocámpico. Diversos trabajos han mostrado que la administración intracerebroventricular del péptido vasoactivo intestinal (VIP) incrementa la cantidad de sueño MOR (SMOR) en condiciones normales y de insomnio. Asimismo, se ha mostrado que el VIP induce SMOR posterior a su administración en la formación reticular pontina medial (FRPm) de la rata. En nuestro laboratorio hemos mostrado que la administración de VIP en la FRPm del gato también induce sueño MOR, pero en el núcleo del rafé dorsal (RD) solo incrementa el sueño de ondas lentas (SOL) I. Por otra parte, se ha evidenciado que la administración de varios agonistas muscarínicos, de tipo M2 en la FRPm del gato producen un incremento en la cantidad de SMOR. No obstante, los mecanismos de acción a través del cuál el VIP produce dicho efecto se desconocen. Por lo que entonces, el objetivo del presente trabajo fue determinar la posible participación de los subtipos de receptores muscarínicos M2 en el aumento de sueño MOR inducido por la administración de VIP en la FRPm y en el RD. Para este estudio, utilizamos 5 gatos adultos (2.5-3 kg), los cuáles fueron estereotáxicamente implantados para registros convencionales de sueño. Adicionalmente, les implantamos dos cánulas de acero inoxidable en la FRPm y en el RD. Después de una semana de recuperación, los animales fueron registrados durante 8 horas continuas posterior a las siguientes inyecciones:.Grupo 1: Recibió 0.1 µl de solución salina en la FRPm. Grupo 2: Recibió Metoctramina (MET) - un antagonista de los receptores muscarínicos M2- (1.8 uM/0.1 µl). Grupo 3: Recibió MET y 15 min después VIP (10 ng). Después de una semana de recuperación, las mismas inyecciones fueron realizadas en el RD. Los resultados mostraron que la MET administrada en la FRPm disminuye el SMOR y el SOL II con un incremento en la vigilia. Cuando la MET fue inyectada en combinación con el VIP se normalizó la cantidad de sueño MOR. Por otra parte, la administración de MET en el RD incrementó el SMOR y el SOL I. Después, cuando la MET fue administrada en combinación con el VIP, no se observaron efectos. Estos resultados sugieren que el VIP puede influenciar el SMOR a través de un mecanismo que no involucra receptores tipo M2 en la FRPm, mientras que en el RD parece que se establece otro tipo de interacción con el sistema serotoninérgico que facilita el SMOR. Trabajo apoyado parcialmente por: CONACyT # I31726-N (JAA) C-165 C-166 EVALUACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE GAP-43 Y SINAPTOFISINA EN LA CORTEZA SOMATO-SENSORIAL PRIMARIA (S1) DE ANIMALES CIEGOS. Guzmán-López, J.A., Geovannini-Acuña, H., Gutiérrez-Ospina, G. Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBM, UNAM, México D.F., 04510 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA RESPUESTA AUDITIVA DEL TALLO CEREBRAL DEL REPTIL Sceloporus torquatus. Morales-Martínez J1*., González-Piña R.2*, Alfaro-Rodríguez A3*, y Ayala-Guerrero F.4 1Laboratorio de Neurofisiología Auditiva, 2Laboratorio de Plasticidad Cerebral, 3 Laboratorio de Neuroquímica, InCH-CNR, SSA. 4Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, UNAM. La lesión irreversible de los ojos en el período perinatal de la rata conduce a una expansión de S1. Se cree que este tipo de plasticidad sensoriomodal resulta del incremento en los niveles de actividad neuronal a lo largo de las vías sensoriales intactas. Sin embargo, evidencia obtenida en el laboratorio apoya que la expansión de S1 en animales ciegos es independiente de la actividad asociada al uso, y que ésta se restringe a un período crítico que abarca los primeros siete días de vida postnatal. Creemos que la expansión de S1 resulta de una reorganización cortical intrínseca dada por el crecimiento axonal y remodelación de dendritas corticales a través de un mecanismo independiente de la actividad. GAP-43 es una proteína del cono de crecimiento que participa en la regulación del crecimiento del axón. Mediante ensayos de inmunotransferencia hemos encontrado que los niveles de GAP-43 se encuentran transitoriamente elevados en la corteza somatosensorial de animales enucleados durante los primeros días de vida postnatal. Esta elevación es máxima a los 7.5 días y desciende a niveles equivalentes de expresión a aquellos observados en los animales control hacia los 10 días de edad. En contraste, los niveles de expresión de sinaptofisina, una proteína que se encuentra en la vesículas sinápticas, no mostró diferencias significativas entre animales control y enucleados. Estos resultados apoyan que la expansión de S1 en animales ciegos desde el nacimiento se debe, al menos en parte, a la reorganización del crecimiento axonal. Este trabajo fue realizado con apoyo de CONACYT 38615N y J28035N Se ha observado que los potenciales provocados de la respuesta auditiva registrada en el tallo cerebral de los vertebrados homeotermos, como los mamíferos, se modifican por variaciones en la temperatura corporal.. Sin embargo, la disminución de la temperatura en organismos homeotermos no puede alcanzar niveles significativos sin ocasionar la muerte del individuo. En cambio, en los vertebrados poikilotermos como los reptiles, debido a sus características fisiológicas, es posible inducir temperaturas corporales extremadamente bajas de manera reversible. Estas características, permiten analizar los potenciales auditivos provocados a temperaturas significativamente bajas. Con este propósito, se utilizaron 25 ejemplares adultos del reptil Sceloporus torquatus, a los cuales se les colocaron electrodos para registrar las respuestas auditivas provocadas por estímulos con una intensidad de 70 db aplicados cada 5 minutos durante 50 minutos bajo 3 condiciones diferentes: a) Control, b) Bajo hipotermia inducida al sumergir al reptil en agua con hielo hasta alcanzar una temperatura corporal que oscilo entre 0 y 4°C, 3) Durante la recuperación de la temperatura. RESULTADOS. La hipotermia produjo una reducción en la amplitud y un alargamiento de la latencia de las respuestas. Estos efectos fueron reversibles, observándose una recuperación progresiva a los niveles control a medida que se incrementaba la temperatura corporal. Estos hallazgos indican que los potenciales auditivos provocados en los reptiles se modifican significativamente con los cambios de temperatura corporal, resistiendo temperaturas extremadamente bajas sin presentar daño irreversible por hipotermia. C-167 C-168 GRUPOS DE NEURONAS CORTICALES SON INFLUENCIADAS POR NEURONAS DEL ASTA DORSAL CON ACTIVIDAD ESPONTÁNEA. Vázquez, D.*, Rojas-Piloni, G.*, Martínez, L.*, Méndez, I.*, Flores, A. y Manjarrez, E.* Instituto de Fisiología. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. DISTRIBUCIÓN DE GRUPOS NEURONALES CON ACTIVIDAD ESPONTÁNEA EN LA MÉDULA ESPINAL CERVICAL DEL GATO. Pérez, H.*, Martínez, L.*, Vélez, D.*, Rojas-Piloni, G.*, Flores, A. y Manjarrez, E.*. Instituto de Fisiología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. México. Los potenciales espontáneos negativos del dorso de la médula espinal (PNDM) se generan por la activación sincrónica de neuronas del asta dorsal. Estas neuronas reciben entradas monosinápticas de aferentes cutáneos de bajo umbral. Es bien conocido que la información cutánea alcanza la corteza somatosensorial por relevos que incluyen a la vía de las columnas dorsales, u otras vías que se originan en el asta dorsal. En este trabajo exploramos la influencia de las neuronas que generan los PNDM espontáneos sobre la actividad eléctrica de grupos de neuronas de la corteza somatosensorial. Se realizaron registros simultáneos de los PNDM, así como registros de potenciales de campo en la corteza pericrusiata (PCC) contralateral de gatos anestesiados. Se observó que los PCC espontáneos se encuentran precedidos por PNDM con una latencia de 14.4±3.5 ms (n=6). Esta latencia fue muy similar a la latencia de los PCC provocados (11.5±2.1 ms; n=6) por estimulación de aferentes cutáneos de bajo umbral. Además, se encontró que la amplitud de los PCC asociados a los PNDM es mayor en sitios cercanos a la línea media y disminuyen gradualmente en posiciones más laterales. La amplitud de los PCC espontáneos disminuyó (52.7±9.7%, n=6) después de seccionar las columnas dorsales, y se abolió totalmente con la posterior lesión al funículo dorsolateral ipsilateral. Concluimos que la actividad espontánea cortical no solo se origina de la actividad espontánea de neuronas supra-espinales, sino que también de la actividad espontánea de grupos de neuronas de la médula espinal. Apoyado por CONACyT J36062-N (M.E.) y beca VIEP-BUAP (V.D). El grupo neuronal que genera los potenciales negativos espontáneos del dorso de la médula (PNDM) lumbar se localiza en los segmentos L6-L7. Éste grupo recibe entradas monosinápticas de aferentes cutáneos de bajo umbral. Además, estas neuronas proporcionan un nivel de actividad basal que regula el flujo de información táctil hacia la corteza somatosensorial. La ubicación de éste grupo neuronal a un nivel cervical no se ha examinado. El objetivo de éste estudio fue explorar la distribución de los conjuntos de neuronas que originan los PNDM a lo largo de los segmentos cervicales. Se calculó el área del espectro de potencia de la actividad espontánea en la médula espinal de gatos anestesiados, paralizados y ventilados artificialmente. Los registros indican que en los segmentos espinales C3-C4 existe un grupo de neuronas que produce los PNDM. También se encontró una ausencia de coherencia entre la actividad espontánea de los segmentos lumbares y cervicales. Esto indica que en el gato anestesiado las neuronas espinales cervicales y lumbares no se encuentran funcionalmente acopladas entre sí. Además, el análisis de la amplitud de los potenciales de campo a diferentes profundidades en el segmento cervical mostró que el grupo neuronal que genera los potenciales espontáneos cervicales se encuentra en las láminas III-VI de la médula espinal. Concluimos que en la médula espinal del gato anestesiado coexisten dos poblaciones de neuronas independientes con actividad espontánea, que se distribuyen en las láminas III-VI de los segmentos L6-L7 y C3-C4. Parcialmente apoyado por CONACyT proyecto J36062-N (M.E.); Beca “La ciencia en tus manos” (P.H.). C-169 C-170 LA PROTEINA DE LA UNION ESTRECHA ZO-2 POSEE SEÑALES DE IMPORTACION Y EXPORTACION NUCLEAR. Ponce, A.∗ Ortiz-Navarrete, V.,∗ Jaramillo, B.∗, y Gonzalez-Mariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, México, D.F. EN EL NUCLEO ZO-2 SE ENCUENTRA FOSFORILADA EN SITIOS CONSENSO PARA PKC Y ASOCIADA A LA MATRIZ NUCLEAR. Jaramillo, B.∗, Betanzos, A.,∗ y GonzálezMariscal, L. Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias. CINVESTAV, México, D.F. La proteína ZO-2 se localiza tanto en las uniones estrechas (UE) como en los “moteados” núcleares. Nosotros encontramos que ZO2 posee 3 señales básicas y clásicas de localización nuclear, dos de ellas bipartitas. Además descubrimos que entre estas señales se localizan dominios RS, los cuales son regiones con múltiples repetidos arginina/serina que son suficientes para dirigir proteínas a los “moteados” nucleares. La secuencia de ZO-2 también contiene 2 señales putativas de exportación nuclear (NES). Estas señales se caracterizan por ser suficientes y necesarias para exportar proteínas presentes en el núcleo. Con el fin de determinar la funcionalidad de las NES que posee ZO-2, nosotros hemos acoplado estas señales a la ovalbúmina, una molécula que carece de señales de exportación nuclear. Posteriormente, a las células epiteliales MDCK les microinyectamos el núcleo con una mezcla de NES-ovalbumina y albúmina rhodaminada, esta última como control de la inyección nuclear. Las fijamos y tratamos con un anticuerpo antiovalbúmina y su correspondiente segundo anticuerpo fluoresceinado. Encontramos que la albúmina rodhaminada permance en el núcleo, mientras que la ovalbúmina acoplada a la NES-2 pero no a la NES1 se mueve al citoplasma. Por lo tanto concluimos que NES-2 es una señal funcional que puede ser la responsable de la salida de ZO-2 del núcleo. Nosotros previamente encontramos que la proteína submembranal de la unión estrecha (UE), ZO-2 se localiza conspicuamente en el núcleo de las monocapas subconfluentes. En este organelo ZO-2 co-localiza con el factor de procesamiento alternativo SC-35 y con algunos factores de transcripción. Diversos procesos nucleares esenciales tales como la transcripción y el procesamiento del ARN mensajero, requieren del anclaje de sus elementos a la matriz nuclear. Esta se encuentra constituida por el conjunto de materiales que permanecen insolubles y que resisten al tratamiento secuencial de los núcleos aislados con detergentes, nucleasas y soluciones amortiguadoras de alta fuerza iónica. Siguiendo protocolos clásicos, hemos obtenido una preparación de matriz nuclear de las células MDCK en la que por inmunofluorescencia detectamos la presencia de ZO-2. Por Western blot encontramos que en esta preparación de matriz nuclear estan presentes ZO-2, lamina B1 y actina y en cambio, no detectamos a la proteína de membrana plasmática Na+-K+ATPasa, ni a la proteína nuclear soluble histona 4. Además observamos que al inmunoprecipitar a ZO-2 del núcleo, bajan también la actina y la lamina B1. Por tanto pensamos que ZO-2 está estrechamente asociada a la matriz nuclear. Al analizar con un anticuerpo que reconoce a serinas fosforiladas por PKC, encontramos que la ZO-2 nuclear de las células subconfluentes está significativamente más fosforilada que aquella que se localiza en las UE de las monocapas confluentes. Previamente demostramos la hiperfosforilación por PKC de ZO-2 en monocapas sin UE o en proceso de desensamble, ahora con los nuevos datos reforzamos y planteamos la posibilidad de que la fosforilación por PKC juegue un papel en el movimiento y funcionamiento de ZO-2 en el núcleo. C-171 C-172 CARACTERIZACIÓN DE CÉLULAS β PANCREÁTICAS DE RATAS EN DESARROLLO. Aguayo C*, Sánchez-Soto C*, ArellanesLicea E*, Hiriart M. Instituto Fisiología Celular, UNAM. ANÁLISIS DE LA SECRECIÓN DE INSULINA EN PRESENCIA DE ACIDO RETINOICO Y NGF. Sánchez-Duran A*; Sánchez-Soto C* y Marcia Hiriart*. Instituto de Fisiología Celular, UNAM.México.D.F.CP 4510. Las células β pancreáticas, a través de la secreción de insulina, promueven el uso eficiente de nutrientes y contribuyen a la homeostasis de la glucosa. Se ha observado que las células β son hipofuncionales en el período fetal y neonatal ya que solamente un pequeño porcentaje responde al aumento de glucosa secretando mayor cantidad de insulina, además secretan una menor cantidad de hormona que las adultas. El cambio de alimentación durante el primer mes de vida (destete) es un momento crucial en la maduración de las células β debido al cambio de las demandas metabólicas. El factor de crecimiento neuronal (NGF) podría contribuir a la maduración de las células β, ya que expresan el receptor de alta afinidad a NGF y además sintetizan y secretan NGF en respuesta al aumento en la concentración de glucosa extracelular, sugiriendo una acción autócrina/parácrina de este factor sobre la célula β. Objetivo. Caracterizar la maduración funcional de las células β durante el destete, así como la contribución del NGF en este proceso. Métodos. En células β primarias de ratas de 28 días (1 semana posterior al destete) se analizó la expresión de insulina y NGF (50 ng/ml) por inmunofluorescencia. Se midió la secreción de insulina con el ensayo hemolítico inverso tras 48 h de cultivo en presencia y ausencia de NGF. Resultados. A esta edad todas las células β (positivas a insulina) también expresan NGF, aunque solamente el 51±9 % de las células insulares son β, en contraste con las adultas en el que el porcentaje es mayor. El tratamiento en cultivo con NGF no altera la proporción de células β identificadas. A diferencia de las células fetales, las células β de 28 d son sensibles a los cambios en la concentración de glucosa, ya que secretan 113 % más en glucosa 15.6 mM que en 5.6 mM. Las células cultivadas con NGF secretan un 81% más en 5.6 mM y un 70% más en 15.6mM glucosa que sus controles respectivos. Discusión. El páncreas de ratas de 28 d de edad es morfológica y funcionalmente diferente al páncreas adulto, y es probable que el NGF contribuya a la maduración funcional de las células β ya que aumenta su capacidad para secretar insulina. Este trabajo fue apoyado por DGAPA211800. El factor de crecimiento neuronal (NGF) es un modulador importante de la plasticidad de la célula β pancreática. Recientemente hemos demostrado que las células ß sintetizan y producen NGF, y que este NGF endógeno tiene un efecto parácrino sobre la secreción de insulina de las células ß. El ácido retinoico (AR) es un potenciador de los efectos del NGF sobre la morfología de las células derivadas de la cresta neural, ya que aumenta la expresión de los receptores p75 y TrkA en estos tipos celulares. Los efectos del AR en el páncreas son controversiales, en embriones de rata se ha observado que el AR solo o en combinación con el factor de crecimiento parecido a la insulina induce la proliferación de las células ß, sin embargo en células INS-I la inhibe, pero aumenta la secreción de insulina. Por lo anterior decidimos caracterizar el efecto del AR sobre la secreción de insulina de las células ß primarias, para lo cual se cultivaron células ß pancreáticas de rata macho adulto (250-280 g) durante una semana en presencia de 10 nmol/l de AR o de la combinación de RA y 50 ng/ml de NGF y se evaluó su respuesta a glucosa en 5.6 y 15.6 mM de glucosa, durante 1h con el ensayo hemolítico inverso (RHPA). El tratamiento con AR disminuye la secreción de insulina de las células testigo en un 51% en 15.6 mM de glucosa, sin afectar la secreción en 5.6 mM. En estudios recientes demostramos que la secreción de insulina de las células cultivadas con NGF aumenta 250 % en 5.6 y 170 % en 15.6 mM con respecto a sus controles, en cambio en presencia de ambos factores, la secreción total de insulina disminuye hasta un 36 % en 5.6 mM y en un 42 % en 15.6 mM con respectivos controles. Estos datos sugieren que el AR podría intervenir en la vía de señalización del NGF, inhibiendo sus efectos la secreción de insulina. Este trabajo fue apoyado por DGAPA 211800, CONACYT 13740-N y Fundación Miguel Alemán. C-173 C-174 CÉLULAS PRODUCTORAS DE CATECOLAMINAS EN LA PARED DE LA VENA PORTA. Ramos-Hernández, J.M.*, Becerril-Montes, A.*, Piñón, M., Racotta, R. Departamento de Fisiología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, y Departamento de Morfología, Escuela Superior de Medicina, IPN, México. EFECTO DEL GnRH Y TRH SOBRE SINTAXINA Y SNAP25 EN LA ADENOHIPOFISIS DE RATA IN VITRO. Quintanar J.L., Salinas E.*, Montoya R.*, Campos R.* y Orozco G.*Depto. de Fisiología y Farmacología y Depto. de Microbiología. Centro de Ciencias Básicas. Universidad Autónoma de Aguascalientes. Se ha atribuido a la región portohepática un posible papel en el control de la ingesta de alimento. Dado que la administración intraperitoneal de catecolaminas produce hipofagia en animales hambrientos, el objetivo del presente trabajo fue identificar células productoras de catecolaminas en la pared de vena porta. Por laparotomía se obtuvo: vena porta y como controles vena cava, arteria carótida y glándulas suprarrenales de rata. Se realizaron por congelación y por inclusión en parafina, cortes seriados longitudinales y transversales. Se aplicaron métodos de tinción para la demostración de catecolaminas, la descripción morfológica, la relación de la fluorescencia con el material elástico, la demostración de granulaciones citoplasmáticas y la diferenciación de células cebadas. En la adventicia de la vena porta, se observaron imágenes fluorescentes de células de forma oval. Topográficamente, en la pared de vena porta se identificaron células de citoplasma basófilo y núcleo pequeño de aproximadamente 30 micras de diámetro mayor, con granulaciones argentafines pequeñas, diferentes de otras marcadas por granulaciones citoplasmáticas metacromáticas. Se concluye que en la pared de la vena porta existen células con características histoquímicas sugestivas de contenido de catecolaminas. Trabajo financiado parcialmente por CGPI-IPN. A. Becerril, R. Racotta y M. Piñón son becarios de DEDICTCOFAA, IPN. La sintaxina y la proteína asociada a sinaptosomas de 25 kDa (SNAP-25) son proteínas que participan en el anclaje y fusión del gránulo secretor durante la exocitosis hormonal. Nuestro objetivo fue establecer si la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) y la hormona liberadora de tirotropina (TRH), afectaban la expresión de estas proteínas en células adenohipofisiarias de rata en cultivo. Se utilizaron ratas macho adultas Wistar como donadores de adenohipófisis. Las células se obtuvieron por dispersión mecánico-enzimática y se sembraron 1X105/pocillo. 24 h después, las células se incubaron con GnRH (10 nM) o TRH (100 nM) durante 4 h o 5 días. Después de las incubaciones, en los medios se cuantificó la secreción de LH y TSH por ELISA. Las células fueron procesadas para electroforesis y por inmunoblot se identificaron la sintaxina y la SNAP-25 reveladas con quimioluminiscencia y cuantificadas por densitometría, expresando los resultados como la intensidad media (IM) por µg de proteína. Los resultados fueron que la sintaxina se incrementa con TRH tanto a las 4 h como a los 5 días de incubación; de 2.4 (control sin tratamiento), a 2.9 y 5.6 de IM respectivamente. Igualmente la GnRH la incrementó, de 2.4 del control, a 3.9 en 4 horas y 5.7 de IM en 5 días. Sin embargo, tanto la TRH como la GnRH durante 4 h, indujo una disminución de SNAP-25, de 9.3 del control, a 4.5 y 4.4 de IM respectivamente. Igualmente la incubación durante 5 días, produjo una disminución de 10.9 del control a 4.7 con TRH y a 5.6 de IM con GnRH. Por otro lado, la TRH y GnRH estimularon la secreción de TSH y LH respectivamente. Con estos resultados se puede concluir que aunque la GnRH y la TRH incrementan la expresión de sintaxina e inhiben la expresión de SNAP-25, la secreción de LH y TSH no se modifica. C-175 C-176 RESPUESTA DE CROMATOFOROS DE CRUSTÁCEO A UN NEUROPÉPTIDO DE INSECTOS. Porras, M. G.*+, Anaya, V*++, Loof, A. D.*! y Aréchiga, H.+ División de Estudios de Posgrado e Investigación, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F.+; Departamento de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV++, México, D.F. y Zoological Institute, Katholieke Universiteit Leuven, Belgium! CAMBIOS DIARIOS DE LOS CRIPTOCROMOS EN EL TALLO OCULAR DEL ACOCIL Procambarus clarkii. Escamilla-Chimal, E.G*, Hernández-Herrera G.*, Gloria-Soria A.* y Fanjul-Moles M.L. Laboratorio de Neurofisiología Comparada, Facultad de Ciencias, UNAM, México, D.F. Se han descrito muy diversos efectos cruzados entre neuropéptidos nativos de distintos grupos de artrópodos y no hay conceptos de validez general sobre la evolución de los receptores y mecanismos fisiológicos mediados por estos agentes. En el presente trabajo se exploró el posible efecto de una cromatoforotropina recientemente descrita en insectos, el undecapéptido corazonina, sobre la posición de los pigmentos tegumentarios del acocil, que están bajo el control de otros neuropéptidos, cuya estructura química guarda similitud con el undecapéptido en cuestión. Los experimentos se realizaron en epitelios aislados de acociles adultos, jóvenes, sin distinción de sexo, de las especies Procambarus clarkii y Cherax quadricarinatus; se determinó micrométricamente la posición de los gránulos pigmentarios intracelulares en los cromatóforos hipodérmicos. La aplicación tópica de corazonina, en una gama de concentraciones entre 10-9 y 10-5 M causó un efecto dependiente de la dosis y del estado previo de adaptación. Durante la fase diurna, cuando los eritróforos tienen sus gránulos dispersos y los leucóforos los tienen agregados, la corazonina induce agregación en los primeros y dispersión en los segundos. Durante la fase nocturna, induce los efectos opuestos. Estos efectos son parcialmente bloqueados por un anticuerpo específico contra la corazonina. Estas observaciones sugieren la posibilidad de efectos cromatoforotrópicos cruzados entre péptidos de diferentes grupos de artrópodos. Trabajo parcialmente apoyado por PAPIIT/UNAM Proyecto No: IN200701 y CONACYT 38645N. El criptocromo (CRY) es una proteína extrarretiniana asociada a grupos de pterina y flavina. Estos son pigmentos fotoactivos que absorben la luz azul y median la fotorrecepción circadiana en plantas y animales. Hay evidencias de que la proteína CRY presenta oscilaciones circadianas en diferentes especies, sin embargo en el acocil no se han llevado a cabo este tipo de estudios. En este trabajo se investigó: 1) si CRY está presente en el tallo ocular del acocil y 2) si CRY muestra variaciones a lo largo de las 24 horas. Dieciocho acociles adultos de la especie Procambarus clarkii, mantenidos en condiciones de luz-obscuridad (LO) 12:12 (encendido de la luz a las 7:00 h) se anestesiaron durante un ciclo de 24 h a diferentes horas del día (3:00, 7:00, 11:00, 15:00, 19:00 y 23:00), para disectar los tallos oculares. El tejido se procesó con la técnica de Western Blott (WB). Se usó un anticuerpo policlonal de conejo anti-CRY de Drosophila. Las bandas del WB fueron escaneadas y posteriormente cuantificadas con el programa Sigma Scan Pro (Jandel), midiendo el área y la intensidad de cada banda. Los resultados obtenidos mostraron que hay una mayor cantidad de CRY a las 19:00 h (100%) y una menor cantidad a las 3:00 h (51%). Los datos de la inmunotransferencia se normalizaron y se analizaron mediante la prueba de cosinor, mostrando una clara oscilación circadiana (%R = 96.36) con el cenit a las 17.53 h y el nadir de las 24 a las 5 h. Lo anterior nos indica que CRY si presenta cambios a lo largo de las 24 h y que esta proteína aumenta durante el día subjetivo del animal y disminuye en la noche subjetiva tardía. Este trabajo fue financiado por PAPIIT IN-212901. C-177 C-178 EFECTO DE LA LUZ Y LA PINEALECTOMIA SOBRE EL RITMO CIRCADIANO DE ACTIVIDAD LOCOMOTORA EN LA LAGARTIJA Scelophorus torquatus. Corona Lagunas JJ* y Miranda Anaya M. Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias UNAM, México DF 04510. DISOCIACION DE LOS RITMOS CIRCADICOS CONDUCTUALES EN RATAS SOMETIDAS A OSCURIDAD 1,2 2 CONSTANTE. Carmona, C. *, Gómora, P. , Rodríguez-Sosa, 1 Universidad Autónoma del Edo. L.3, Beyer, C2. y Aréchiga, H.3 de Hidalgo. 2CIRA CINVESTAV-UAT. Tlaxcala. 3División de Estudios de Postgrado e Investigación, Facultad de Medicina UNAM, México, D.F. En el presente trabajo se estudió el efecto de la pinealectomía y de la luz constante sobre el ritmo circadiano de actividad locomotora (RCAL) en la lagartija Scelophorus torquatus. Los animales fueron colectados en el campo y mantenidos durante dos semanas para su aclimatación en condiciones de laboratorio. La actividad fue individualmente registrada mediante sensores infrarrojos ubicados en terrarios. Los datos obtenidos fueron colectados y agrupados cada 10 minutos mediante una PC para después ser graficados en actogramas y analizados con periodograma de X2. En un primer grupo se usaron 6 animales adultos en los que se registró la actividad en 8 ciclos de 12 hs luz y 12 hs de oscuridad (LO). Posteriormente fueron expuestos a condiciones constantes de luz roja tenue de 1 lx (Llr) durante 15 días. La pinealectomía se hizo en animales anestesiados, mediante una incisión a través del ojo parietal y se observó el RCAL en condiciones de Llr y LO. En un segundo grupo de 3 animales, se registró la actividad en Llr durante 15 días y después se observó el efecto de la luz brillante constante de150 lx (LL) durante 20 días más. Los resultados obtenidos muestran que en los animales intactos se presenta un ritmo circadiano con un periodo promedio (23.78± 0.51 hs). Después de la pinealectomía, el ritmo circadiano se mantuvo en la mayoría de animales, con periodos distintos a los controles (25.58 ± 2.13 hs). Durante LL se observó arritmia principalmente. Los resultados obtenidos indican que el oscilador responsable del RCAL no parece estar ubicado en la glándula pineal, sin embargo ésta estructura participa en la modulación del periodo del ritmo, semejante a lo observado en otras especies de lacertilios. Uno de los temas fundamentales de la cronobiología, es el estudio de las relaciones temporales entre los diversos ritmos circádicos en un organismo dado. Así, la demostración de que en condiciones ambientales constantes el ritmo de la temperatura corporal adopta una periodicidad diferente a la del ritmo del sueño y la vigilia, llevo a postular la existencia de marcapasos circádicos de diversas funciones corporales, en condiciones de oscuridad continua. En ratas macho Wistar adultas, colocadas en cámaras con temperatura e iluminación controlada durante cuatro semanas, se exploraron los ritmos circádicos en los siguientes patrones conductuales: 1) actividad locomotora, 2) ingestión de agua, 3) aseo, 4) exploración y 5) umbral del dolor, tanto por la emisión de vocalizaciones como por reacciones motoras. Se comparó la ritmicidad en condiciones normales de ciclos de luz-oscuridad (14-10 h), con la existente en oscuridad continua. Se encontró, que en condiciones ambientales cíclicas todos los patrones conductuales muestran el mismo periodo y guardan relaciones de fases constantes, con diferentes acrofases, en oscuridad continua se disocian los ritmos, con diferencias de amplitud, de periodicidad y de fase. En tanto que los ritmos relacionados con la motilidad y la ingesta de agua y alimento mantuvieron un periodo cercano a 24 h, el del umbral de vocalización al dolor persistió con un periodo de 27.3 h. Estos datos sugieren la existencia de diferentes sistemas cronobiológicos generadores de ritmos conductuales. Trabajo parcialmente apoyado por PAPIIT/UNAM Proyecto No: IN200701 C-179 C-180 VARIACIONES DIURNAS DE CORTICOSTERONA Y SU RESPUESTA AL ESTRÉS CRÓNICO EN RATAS MACHO CASTRADOS. Retana-Márquez, S., Bonilla Jaime, H.*, Vázquez Palacios, G. * y Velázquez-Moctezuma, J. Departamento de Biología de la Reproducción. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México, D.F. EFECTO DE LA BUSPIRONA Y DEL DIAZEPAM SOBRE LA AVERSIÓN CONDICIONADA AL SABOR PRODUCIDO POR CLORURO DE LITIO (LiCl). Reyes E, Sánchez-Castillo H, Miranda F, y Velázquez-Martínez DN. Depto. de Psicofisiología. Facultad de Psicología; Facultad de Estudios Superiores, Iztacala. UNAM. México. Se ha reportado que la respuesta del eje hipotálamo-hipófisisadrenal (HHA) al estrés está modulada por los esteroides gonadales, específicamente la testosterona (T). Se sabe que el estrés provoca una mayor respuesta del eje HHA en los machos castrados y que el tratamiento con testosterona regresa los niveles post-estrés de corticosterona a los valores basales. En este trabajo se analizó la variación diurna de corticosterona, así como la respuesta de este corticosteroide al estrés por inmersión en agua fría (IMS), en machos castrados y en intactos. Ratas macho de la cepa Wistar, fueron asignados al azar a uno de los siguientes grupos: 1) machos castrados, sin ningún tratamiento adicional durante un mes; 2) machos castrados, tratados con propionato de testosterona (PT) durante un mes; 3) machos castrados expuestos a IMS durante 5 días consecutivos al inicio de la fase de luz; 4) machos castrados expuestos a IMS por 5 días al inicio de la fase de obscuridad; 5) machos castrados, tratados con PT y expuestos a IMS por 5 días; 6) machos castrados, tratados con PT y expuestos a IMS por 5 días; 7) Grupo control, sin manipulación alguna. Las variaciones diurnas en los niveles de corticosterona, así como sus modificaciones debidas al estrés fueron evaluadas mediante HPLC. Los niveles basales de corticosterona observados en los machos castrados fueron significativamente mayores que los de los machos intactos, no estresados, en ambas fases del ciclo de luz-obscuridad. La respuesta al estrés crónico por IMS también fue mayor en los machos castrados, comparada con la que presentaron los machos castrados y tratados pon PT, en ambas fases del ciclo de luz-obscuridad. Estos resultados muestran la importancia de la testosterona en la modulación de la actividad basal diurna del eje HHA, así como para la respuesta de este eje al estrés. En estudios previos se ha reportado que la buspirona (agonista 5HT1A) puede prevenir el Condicionamiento Aversivo al Sabor (CAS). Debido a que este fármaco también tiene efectos ansiolíticos el presente trabajo tuvo como objetivo determinar si los efectos ansiolíticos de otro fármaco (diazepam), que tiene un mecanismo diferente de acción al de la buspirona, también es capaz de evitar la formación del CAS producido por LiCl. Se entrenaron a 4 grupos de 6 ratas macho de la cepa Wistar, cada uno bajo el procedimiento del CAS, antecedido por una inyección i.p. (30 min. antes de la sesión) de diazepam (0.0, 0.25, 1.0 y 3.0 mg/kg). Se encontró que el diazepam no tiene efecto alguno sobre el CAS producido por LiCl. Los datos obtenidos apoyan la hipótesis de que la capacidad de la buspirona para prevenir la adquisición del CAS, probablemente es mediado por mecanismos serotonérgicos, ya que los efectos ansiolíticos de la buspirona y del diazepam parecen no tener relación con la adquisición del CAS. Este Trabajo fue apoyado por DGAPA IN-208201, CONACYT 37066-H. Agradecemos el apoyo técnico del Ingeniero Fernando Salinas Iñiguez de URIDES. C-181 C-182 UN NUEVO DERIVADO DE LAS XANTINAS: EL A15Bu, MEJORA LAS CONDUCTAS MOTORAS. Parra C.C*1, (avalado por Félix Luna Morales), Alonso V.M*1., Maxil T.R*1, Ávila R.T*1, Muñoz Z.A*1, Sandoval J*1, Florán B*2 y Limón I.D*1. 1Facultad de Ciencias Químicas-B.U.A.P. y 2Depto de Fisiología. CINVESTAV-IPN. INDUCCIÓN DE VIGILIA INDEPENDIENTE DE ACTIVACIÓN MOTORA POSTERIOR A LA ESTIMULACIÓN ESTRIATAL DOPAMINÉRGICA. MenaSegovia, J.*, Terrés, M.L.*, Giordano M. Laboratorio de Plasticidad Cerebral, Instituto de Neurobiología, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro 76230. Los receptores A2A se encuentran ampliamente distribuidos en el estriado y globo pálido. Estos receptores participan en las conductas motoras. Actualmente se investigan nuevos antagonistas A2A derivados de las xantinas con una actividad farmacológica sobre las conductas motoras. El objetivo del presente trabajo es evaluar el efecto de A15Bu, un nuevo derivado de las xantinas sobre diferentes conductas motoras. Las pruebas conductuales que se utilizaron fueron la conducta de giro, la prueba de la escalera y la prueba de catalepsia en barra fija. Para estos experimentos se utilizaron dos lotes (n=16/lote) de ratas macho adultas lesionadas en la SNc con 2 µl de 6-OHDA (8 µg/µl), posteriormente la lesión fue evaluada con metanfetamina a una dosis de 7 mg/kg vía s.c. Para el primer lote la administración de A15Bu y de los antagonistas A2A, ZM241385 y CSC las dosis fueron: de 1 mg/kg, 10 mg/kg y 1 mg/kg vía s.c, las cuales provocaron decrementos de 54%, 38% y 54% respectivamente sobre la conducta de giro en rata lesionada. Al segundo lote, la administración crónica de A15Bu a una dosis de 1 mg/kg mejoro en un 60% el movimiento de la pata contralateral en la prueba de la escalera en rata lesionada. Finalmente la administración de A15Bu revirtió en un 44% el efecto cataléptico en la prueba de barra fija, en rata con previa administración de perfenazina (10 mg/kg v.o.). Estos datos sugieren que el A15Bu mejora las conductas motoras en ratas con lesión dopaminérgica y revierte la catalepsia inducida por drogas psicótropicas, estos efectos quizás se deban al bloqueo de los receptores A2A. Experimentalmente ha sido demostrado que las afectaciones en el estriado en ratas producen un incremento en la cantidad de vigilia probablemente ocasionado por una desinhibición de los núcleos blanco de proyección de los ganglios basales, y que estos cambios son independientes del incremento de la actividad motora. El núcleo tegmental pedúnculo pontino (NTPP), que recibe aferentes GABAérgicas de los ganglios basales, muestra inmunorreactividad para c-Fos después de la administración intraestriatal de anfetamina, probablemente debido a la inhibición de los núcleos de salida de los ganglios basales. De esta manera, es posible que la desinhibición del NTPP se manifieste como un incremento en la vigilia. Por tal motivo, 8 ratas Sprague-Dawley fueron implantadas con cánulas bilaterales dirigidas al estriado anterodorsal y electrodos bipolares a la corteza occipital y al músculo para registros electrofisiológicos. Previo al inicio de los registros, se les administró a través de las cánulas una dosis de anfetamina (15µg/1µl), lidocaína (2%) o solución salina (0.9%) durante un minuto. Posteriormente, se realizaron registros para evaluar la actividad motora y los estados de vigilancia durante cuatro horas. Los resultados indican que la anfetamina incrementó la distancia total recorrida y el tiempo de movimiento durante los primeros 45 minutos posteriores a su administración. Por otro lado, produjo un aumento en la cantidad de vigilia a expensas de sueño de ondas lentas (SOL) que se mantuvo a lo largo de todo el registro. Estos resultados sugieren que el estriado se encuentra involucrado en procesos de activación cortical inespecífica que pueden manifestarse como cambios en el ciclo sueño vigilia. C-183 C-184 EFECTO BILATERAL DE METANFETAMINA EN EL GLOBO PALIDO EXTERNO SOBRE LA ACTIVIDAD MOTORA Y LOS NIVELES DE OXIDO NITRICO. Bastida J. C*., (avalado por Félix Luna Morales), Maxil T. R*., M-Mendieta L*., G-Quiroga E*. y Limón I. D*. Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP. EL TRATAMIENTO CON DOSIS BAJAS DE CAFEÍNA DURANTE UNA SEMANA NO INDUCE TOLERANCIA AL SINERGISMO CON EL TRIHEXIFENIDILO PARA INHIBIR LA CATALEPSIA INDUCIDA CON HALOPERIDOL Moo-Puc, R. E* (Avalada por Góngora-Alfaro, José L.), Villanueva-Toledo, J. *, Góngora–Alfaro, J.L. Centro de Investigaciones Regionales - Universidad Autónoma de Yucatán. Se ha demostrado el papel de la dopamina en globo pálido externo (GPe) en la modulación de la actividad motora. Las drogas dopaminérgicas que produzcan cambios excesivos en la neurotransmisión dopaminérgica en GPe, producirán daños motores a través de la formación de radicales libres como NO. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la administración bilateral en GPe de metanfetamina sobre la actividad motora y los niveles de NO en corteza frontal y estriado. Se ocuparon ratas macho de la cepa Wistar a las cuales se les implantó una cánula bilateral en GPe. (AP= -0.3, L= ± 2.6, P= -5.6). Después de la recuperación postoperatoria se le administró por ambos lados a un grupo 1 µl de SSI y a otro grupo 1µl de metanfetamina [50 µg/µl]. Diez minutos después de la administración local se sometieron ambos grupos a la prueba de actividad motora en campo cerrado por 60 minutos. Se cuantificó el número de veces que el animal interrumpe la trayectoria del haz de luz. Al término se sacrificaron los animales y se extrajeron estriado y corteza frontal y posteriormente se les cuantificó los niveles de NO por el método de Griess. Los resultados obtenidos en la prueba de campo cerrado muestran que la metanfetamina en el GPe incrementó un 50% en la actividad motora respecto al grupo control. La determinación de los niveles de NO en estriado y corteza frontal no presentaron diferencia significativa respecto al grupo control. Estos resultados nos indican que el efecto de la metanfetamina sobre el aumento en la actividad motora es debido al incremento de la actividad dopaminérgica en el GPe sin cambios en los niveles de NO en estriado y corteza frontal. Antecedentes: La cafeína, un antagonista de los receptores de adenosina A1 y A2A, actúa de manera sinérgica con el antagonista muscarínico trihexifenidilo (THF) para inhibir la catalepsia inducida por haloperidol, un modelo de la enfermedad de Parkinson. Sin embargo, durante su uso repetido, se desarrolla tolerancia a los efectos motores de la cafeína. Objetivo: Evaluar si la administración repetida de dosis bajas de cafeína durante una semana produce tolerancia al efecto sinérgico con el THF para inhibir la catalepsia inducida por haloperidol. Métodos: A ratas machos de la cepa Wistar se les administró cafeína (1 mg/kg, s.c.) o agua destilada (1 ml/kg, s.c.) tres veces al día durante 7 días, entre las 8-9, 15-16 y 20-21 horas. El grupo de agua destilada fue para evaluar la influencia de las inyecciones repetidas sobre la catalepsia, la cual fue inducida el octavo día con haloperidol (2 mg/kg, s.c). La catalepsia fue evaluada a intervalos de 15 minutos, midiendo el tiempo en que las ratas mantenían sus dos patas delanteras sobre una barra metálica a 9 cm del piso, por un máximo de 300 s. Para cada rata se calculó el área bajo la curva durante un período de 5 h. La latencia fue definida como el tiempo transcurrido entre la inyección de haloperidol y el minuto durante el cual las ratas permanecieron sobre la barra durante un mínimo de 150 s. Los tratamientos fueron administrados por vía s.c. 30 min antes del haloperidol; 1) agua destilada (1 ml/kg); 2) cafeína (1 mg/kg); 3) THF (0.1 mg/kg) y 4) cafeína (1 mg/kg, s.c ) + THF (0.1 mg/kg). La dosis de THF usada fue la que mostró mayor sinergismo con la cafeína en experimentos previos. Resultados: Después de administrar dosis bajas de cafeína (3 mg/kg/día) o agua destilada (3 ml/kg/día) durante una semana se mantuvo el efecto sinérgico entre la cafeína y el THF para inhibir la catalepsia inducida por haloperidol, así como para prolongar la latencia de inicio de catalepsia. Conclusiones: Estos resultados indican que la administración repetida de cafeína a la dosis de 3 mg/kg/día no induce tolerancia a sus efectos motores, lo cual sugiere que este antagonista de los receptores de adenosina A1 y A2A podría ser usado a dosis bajas como adyuvante de la terapia anticolinérgica de la enfermedad de Parkinson. (Apoyado por el proyecto CONACYT 31377-N, otorgado a JLGA) C-185 C-186 SINERGISMO ENTRE LOS ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES DE ADENOSINA A2A Y EL TRIHEXIFENIDILO PARA INHIBIR LA CATALEPSIA INDUCIDA CON HALOPERIDOL Góngora-Alfaro, José L1, Villanueva-Toledo, J.*1, Moo-Puc, R.E*1, Sandoval-Ramírez, J.*2, MuñozZurita, A.*2, Limón-Pérez de León, D.*2. (1) Centro de Investigaciones Regionales de la Universidad Autónoma de Yucatán y (2) Centro de Investigación de la Facultad de Ciencias Químicas de la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. EL AGONISTA D1 (SKF-38393) EN EL GLOBO PALIDO EXTERNO REVIERTE LA CATALEPSIA PRODUCIDA POR DROGAS ANTIPSICÓTICAS. Avila-Ruíz Tania*1, Flores Gonzalo*2, Limón Pérez I.D.*1 y Luna Morales F.1 (1) Lab. de Neurofarmacología de la Fac. Cs. Químicas de la BUAP y (2) Instituto de Fisiología BUAP. Antecedentes: Previamente hemos encontrado que la cafeína, un antagonista de los receptores de adenosina A1 y A2A, actúa de manera sinérgica con el antagonista muscarínico trihexifenidilo (THF) para inhibir la catalepsia inducida por haloperidol (modelo de la enfermedad de Parkinson). Objetivo: Comparar la actividad sinérgica del antagonista adenosinérgico ZM241385 (que tiene una afinidad mil veces mayor por los receptores A2A que por los A1) con la del antagonista adenosinérgico A15Bu (que tiene afinidades similares para ambos receptores), cuando se administran conjuntamente con THF, para inhibir la catalepsia inducida por haloperidol. Métodos: Se usaron ratas macho de la cepa Wistar. La catalepsia fue inducida con haloperidol (2 mg/kg, s.c.) y fue evaluada cada 15 min, midiendo el tiempo en que las ratas mantenían sus dos patas delanteras sobre una barra metálica a 9 cm del piso, por un máximo de 300 s. Para cada rata se calculó el área bajo la curva durante un período de 5 h. La latencia fue definida como el tiempo transcurrido entre la inyección de haloperidol y el minuto durante el cual las ratas permanecieron sobre la barra durante un mínimo de 150 s. Los tratamientos fueron administrados por vía s.c. 30 min antes del haloperidol; 1) vehículo (aceite mineral/DMSO [4:1], 1 ml/kg); 2) antagonista adenosninérgico (5.2 µmol/kg); 3) THF (0.1 mg/kg) y 4) antagonista adenosinérgico (5.2 µmol/kg, s.c ) + THF (0.1 mg/kg). La dosis de THF usada fue la que mostró mayor sinergismo con la cafeína en experimentos previos. Resultados: Ambos antagonistas adenosinérgicos inhibieron significativamente la catalepsia: A15Bu (-30 ± 7%) y ZM241385 (-43 ± 6%) y también prolongaron su latencia de inicio. Por su parte, el THF no tuvo efecto por sí solo, pero sí intensificó la acción inhibitoria de los antagonistas adenosinérgicos: THF + A15Bu (-62 ± 3%) y THF + ZM241385 (-61 ± 6%) y prolongó aún más la latencia de inicio de la catalepsia. Conclusiones: Estos resultados sugieren que los antagonistas de los receptores de la adenosina A2A podrían ser usados como adyuvantes de la terapia anticolinérgica en la enfermedad de Parkinson, permitiendo reducir las dosis y por consiguiente, los efectos adversos de los fármacos antimuscarínicos. (Financiado por el proyecto CONACYT 31377-N a JLGA) Las drogas antipsicóticas como la perfenazina y el haloperidol producen episodios de inmovilidad probablemente al bloqueo de receptores dopaminérgicos D2 presentes en los ganglios básales. Si esto fuese cierto el incremento de los niveles de dopamina revertirían el estado de catalepsia. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de la administración de un agonista dopaminérgico D1 (SKF-38393) en el globo pálido externo (GPe) sobre la catalepsia inducida por drogas antipsicóticas. Se emplearon ratas macho adultas de la cepa Wistar, a las cuales se les implantó una cánula de administración por medio de una cirugía estereotáxica en el GPe. A un grupo se le indujo episodios de catalepsia al administrar 1µl [50µg/µl] de haloperidol en el GPe y a otro grupo al administrar perfenazina 10mg/kg v.o./10 días. A ambos grupos se les administró 1µl de SKF-38393 [10µg/µl] en el GPe. La catalepsia fue evaluada en el modelo de barra fija durante 120 min. Se considero el tiempo en que el animal permaneció sostenido sobre sus dos patas delanteras en la barra. Tanto la administración de haloperidol y perfenacina incrementaron la conducta cataléptica en un 80% respecto a su grupo control. En estas condiciones, la administración de SKF-38393 en el globo pálido externo redujo en un 20% la catalepsia inducida por el haloperidol localmente y un 60% en el grupo con perfenazina. Estos datos nos sugieren que la estimulación glutamatérgica en el globo pálido externo reduce el efecto cataléptico de las drogas antipsicóticas esto quizás se deba a un incremento del tono dopaminérgico en el globo pálido externo. C-187 C-188 PARTICIPACIÓN DE MECANISMOS SEROTONÉRGICOS EN LA MEMORIA DE INTERVALO: EFECTOS DEL AGONISTA 5-HT1B/2C MCPP. Sánchez-Castillo, H.* y Velázquez-Martínez, D. N. Depto. de Psicofisiología. Facultad de Psicología. UNAM. México. PARTICIPACIÓN DE LOS RECEPTORES 5-HT1A Y 5-HT2C EN LA REGULACIÓN DE LA ESTRUCTURA ALIMENTARIA DE RATAS. Escartín-Pérez, R.E.* (avalado por Benjamín Florán Garduño), Mancilla-Díaz, J.M.*, Villaseñor-Franco, R.M.* y González-Hernández, B.* Laboratorio de Neurobiología de la Alimentación. FES Iztacala, UNAM, México. DGAPA IN304300. Se ha mostrado que el sistema serotonérgico (5-Hidroxitriptamina, 5-HT) juega un papel importante en la conducta de estimación temporal. Experimentos anteriores mostraron que la destrucción de las vías ascendentes serotonérgicas producen un movimiento en el punto de bisección hacía los estímulos de corta duración; sin embargo, la administración del agonista 5-HT1A 8-OH-DPAT no ha generado evidencia clara de la participación de este sistema. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los efectos del agonista 5-HT1B/2C mCPP en la memoria de intervalo evaluada con la tarea de procedimiento de pico. Se utilizaron ratas macho de la cepa Wistar mantenidas al 85% de su peso inicial con un ciclo luzoscuridad 12-12. Los sujetos fueron entrenados en un programa de Intervalo Fijo 30 s (IF30) para obtener sucrosa como reforzador; una vez obtenido el patrón típico de respuesta se introdujeron ensayos vacíos (ensayos prueba) los cuales eran extendidos a 120 s y el reforzador era omitido. Los resultados obtenidos muestran que el mCPP produce un decremento en la tasa de respuesta, sin embargo este efecto no es dosis-dependiente. Por otra parte el tiempo de ocurrencia del pico no se afecta de forma significativa aunque si se observa una mayor sensibilidad al tiempo de reforzamiento. Los resultados obtenidos sugieren que la participación de mecanismos serotonérgicos en la memoria de intervalo no es clara o que podría estar mediada por otro subtipo de receptores. Este Trabajo fue apoyado por DGAPA IN-208201, CONACyT 37066H. Agradecemos el apoyo técnico del Ingeniero Fernando Salinas Iñiguez de URIDES. La conducta alimentaria es regulada por una gran variedad de sustancias endógenas que actúan tanto a nivel central como periférico. A nivel central, la serotonina (5-HT) ha sido vinculada con el control de la conducta alimentaria, principalmente en la ingesta voluntaria de carbohidratos y se ha sugerido que dicha acción modulatoria es mediada principalmente por los subtipos de receptores 5-HT1A, 5-HT1B y 5-HT2C del núcleo paraventricular del hipotálamo (NPH). Con la finalidad de establecer la participación de los receptores 5-HT1A y 5-HT2C del NPH en la regulación de la conducta alimentaria, se evaluaron los efectos de la 5HT (2 µg) en ratas pretratadas con los antagonistas 1A y 2C, WAY100635 (2 µg) y RS-102221 (2 µg). Todos los fármacos fueron administrados en el NPH. Los animales fueron mantenidos en un ciclo de luz invertido de 12hx12h y tuvieron acceso libre al agua y a una dieta de proteínas, carbohidratos y grasas en comederos separados. Se realizó un registro de duración continua (30 min) para evaluar los cambios en la ingesta y los parámetros alimentarios de cada nutrimento (frecuencia, duración, tiempos entre episodios alimentarios y tasa local de alimentación) producidos por las inyecciones intrahipotalámicas. El efecto inhibitorio sobre el consumo de carbohidratos producido por la 5HT fue bloqueado por el pretratamiento con RS-102221, mientras que el pretratamiento con WAY-100635 sólo lo atenuó. Los patrones alimentarios fueron afectados diferencialmente por los pretratamientos con WAY-100635 o RS-102221. En conclusión, los presentes resultados indican que los receptores 5-HT2C son parte importante en la acción regulatoria que tiene la actividad serotoninérgica hipotalámica en la ingesta voluntaria de carbohidratos y los parámetros alimentarios asociados. C-189 C-190 EL ANTAGONISTA DOPAMINERGICO S(+)-RACLOPRIDE NO BLOQUEA EL CONDICIONAMIENTO DE PREFERENCIA DE LUGAR INDUCIDO POR COPULA REGULADA EN RATAS HEMBRA. García-Horsman P.* y Paredes Guerrero R. INB, UNAM Querétaro. CONDICIONAMIENTO DE PREFERENCIA DE LUGAR CON ANFETAMINA: INTERACCIÓN CON EL SISTEMA SEROTONÉRGICO. Orozco, G.*, Osorio, A.* Y VelázquezMartínez, D.N. Laboratorio de Farmacología Conductual, Facultad de Psicología, UNAM. México. Se ha comprobado que la conducta sexual induce un estado afectivo-positivo en la rata hembra cuando ésta tiene la posibilidad de controlar él numero de contactos o interacciones sexuales con el macho. Se ha reportado, que la dopamina esta involucrada en conductas reforzantes (agua, alimento) y que principalmente los receptores D2 intervienen en la conducta sexual. En el laboratorio, estamos interesados en estudiar el papel de la dopamina en el estado reforzante inducido por la copula regulada. Anteriormente hemos demostrado que las dosis de 0.25 mg/kg de flupentixol y 0.125 mg/kg de raclopride antagonistas DA no producen alteraciones en la ejecución motora. El estado reforzante inducido por la copula regulada ha sido evaluado utilizando el paradigma de condicionamiento de preferencia de lugar (CPL). Resultados en nuestro laboratorio demuestran que las hembras pasan mas tiempo en el compartimento de la caja asociado a la copula regulada, que en el compartimento preferido inicialmente. Tanto el flupentixol como el raclopride en dosis que no interfieren con la actividad locomotora de las ratas, bloquean el CPL inducido por anfetamina. Utilizando el paradigma de CPL hemos comprobado que el antagonista D1/D2 flupentixol en una dosis de 0.25 mg/kg no bloquea el CPL asociado a la copula regulada. En el presente trabajo demostramos que el antagonista D2 raclopride en una dosis de 0.125 mg/kg tampoco bloquea el CPL inducido por la copula regulada. Estos resultados nos permiten concluir que los receptores D2 no están involucrados en los efectos reforzantes inducidos por copula regulada. En el procedimiento de condicionamiento de preferencia de lugar (CPP) se refleja la preferencia que un sujeto tiene por un contexto debido a que en ocasiones previas el sujeto ha experimentado el efecto de un fármaco en ese contexto. Se ha utilizado para medir las propiedades reforzantes de varios estímulos (alimento, fármacos, drogas de abuso, etc). En particular se ha descrito que la anfetamina y el alimento producen CPP en ratas. Sin embargo, existe poca evidencia de la modulación serotonérgica de estos efectos. El objetivo del estudio fue evaluar el efecto del agonista 5-HT2B/2C mCPP y del antagonista selectivo 5-HT2C RS102221 en el CPP inducido por anfetamina y alimento. Ratas macho de la cepa Wistar se entrenaron en cajas de condicionamiento de preferencia de lugar provistas de fotoceldas. Las cajas están divididas en tres compartimentos: uno negro, uno blanco y otro gris, separados entre si. El entrenamiento consistió en tres fases: Fase de precondicionamiento, exploración libre de los compartimentos. Fase de condicionamiento, administración de anfetamina y confinamiento del animal a uno de los compartimentos; administración de vehículo y confinamiento al compartimento contrario. Fase de postcondicionamiento, administración de fármacos 5-HT y evaluación del tiempo de estancia en los compartimentos. Se observó CPP con alimento y con anfetamina; además se observó que con mCPP el tiempo de estancia fue similar al observado con la anfetamina mientras que con el RS10221 el tiempo de estancia fue modificado en los compartimentos. Lo anterior sugiere la posible participación de la 5-HT en CPP provocado por la anfetamina. Apoyado por DGAPA IN-208201, CONACyT 37066-H. Agradecemos el apoyo técnico del Ing. Fernando Salinas Iñiguez de URIDES. Apoyado por CONACYT 28039N y DGAPA IN228199 C-191 C-192 ESTIMACIÓN TEMPORAL: PARTICIPACIÓN DE MECANISMOS SEROTONÉRGICOS EN UNA TAREA DE BISECCIÓN TEMPORAL. Osorio A, González R, y VelázquezMartínez DN. Depto. de Psicofisiología, Facultad de Psicología, UNAM. México. CAMBIOS EN EL CONSUMO DE ALCOHOL DEPENDIENTES DE LA DURACIÓN DEL TRATAMIENTO CON ESTRÓGENOS EN LA RATA MACHO. Vázquez-Cortés, C.*, Barrios De Tomasi, E.* y Juárez, J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara., Guadalajara, Jal., Méx. El procedimiento de bisección temporal ha sido utilizado para ilustrar algunas características de la conducta de estimación temporal. En este tipo de procedimiento el sujeto es entrenado a responder en uno de dos operandos (A y B) dependiendo de la duración del estímulo (“corto” vs. “largo”). Después de haberse obtenido una discriminación estable se introducen ensayos de prueba usando estímulos de duración intermedia y, en cada caso, se registra el porcentaje de elección al operando de duración larga. En diferentes estudios se ha descrito la participación de mecanismos serotonérgicos y dopaminérgicos ya que con la destrucción de los núcleos del rafé se observa un corrimiento en el punto de bisección hacia las duraciones cortas. Sin embargo, no se ha determinado la participación diferencial de los subtipos de receptores a la serotonina (5-HT) y a la dopamina (DA). El objetivo del presente estudio fue evaluar la participación diferencial de este subtipo de receptores en una tarea de bisección temporal en ratas por medio de la administración de diferentes dosis de 8-OH-DPAT (agonista 5-HT1A), anfetamina (inhibidor de recaptura DA y agonista D2) y TFMPP (agonista 5-HT2C/1B). Los resultados mostraron que con la administración de diferentes dosis de 8-OH-DPAT no se observaron cambios estadísticamente significativos en el punto de bisección (PB), en el límen (L) y en la fracción de Weber (FW). Respecto a la anfetamina se observaron diferencias estadísticamente significativas en los tres parámetros analizados. Respecto a la administración de TFMPP solo se observaron cambios con la dosis mas alta, sugiriendo una participación indirecta del subtipo de receptores estudiados. Los estrógenos producen un incremento de la internalización de receptores a opioides, lo cual inicialmente reduciría su disponibilidad y posteriormente podría causar una sobre-regulación de los mismos después de varios días de tratamiento. Por otra parte, se conoce que el alcohol (alc) incrementa la actividad opioide. Con el fin de investigar si el consumo de alc se modifica dependiendo del tiempo de exposición a los estrógenos. Se utilizaron 18 ratas macho Wistar adultas gonadectomizadas. Nueve ratas fueron tratadas con aceite 0.05 ml/sujeto/día durante 6 días y posteriormente con benzoato de estradiol (E) 5µg/sujeto/día por 6 días más [grupo 1 (G1)]. A las 9 ratas restantes se les administró la misma dosis de E durante 12 días consecutivos [grupo 2 (G2)]. Los sujetos fueron expuestos a alc voluntario al 10% antes (preT), en los últimos 6 de los 12 días de tratamiento y después del mismo (posT). El tratamiento con E produjo un decremento significativo en la preferencia por el alc y también en la cantidad de alc consumido en el G1, contrario a esto, los E incrementaron significativamente ambas medidas en el G2. Estas diferencias fueron significativas con respecto a los periodos de preT. Los valores del consumo de alc en el periodo posT regresaron a los que tenían en el periodo preT solamente en el grupo G2. Los E decrementaron el consumo de alimento con respecto a los periodos preT y posT en ambos grupos, sin embargo este efecto no parece tener alguna relación causal con el efecto en el consumo del alcohol. Los resultados apoyan el efecto diferencial de los E sobre el consumo de alc dependiente de la duración del tratamiento, lo cual se sugiere podría estar relacionado con la acción de los E sobre el sistema opioide. Este trabajo fue apoyado por DGAPA IN-208201, CONACyT 37066H. Agradecemos el apoyo técnico del Ingeniero Fernando Salinas Iñiguez de URIDES. C-193 C-194 LOS ESTRÓGENOS POTENCIAN LOS EFECTOS DE LOS NALTREXONA SOBRE EL CONSUMO DEL ALCOHOL EN LA RATA MACHO. Barrios De Tomasi E y Juárez J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara, Gdl, Jal., Méx. INTAKE OF ETHANOL OF FEMALE RATS TREATED WITH ESTRADIOL VALERATE. Irma Sofia Ledesma de la Teja*, Larry D. Reid,* Meta L. Reid*, Marco A. Sánchez, Arnulfo Díaz-Trujillo*, Adriana Oviedo*, Gina L. Quirarte and Roberto A. Prado-Alcalá. Instituto de Neurobiologia, UNAM; Rensselaer, Troy, NY, USA; and Laboratorio de Fisiologia, U.A.Q., Queretaro, Mexico Existe evidencia de que la naltrexona produce un decremento en el consumo del alcohol, debido a que disminuye las propiedades reforzantes del mismo. Los estrógenos producen un aumento en la internalización de receptores opioides por lo que reduce su disponibilidad para potencializar el efecto de la naltrexona. Con el fin de estudiar dicho efecto se utilizaron 10 ratas Wistar machos adultos castrados, durante 3 días tuvieron acceso a una condición voluntaria al alcohol (alcohol-agua AW) y 3 días a una condición forzada (A) (6% etanol) (PosC). Posteriormente la mitad de los sujetos fueron tratados con benzoato de estradiol (EB) (5µg/sujeto/día) y la otra mitad con aceite (Oil). Después de 8 días se les intercambiaron los tratamientos. Simultáneamente con los tratamientos se les permitió el acceso diario a A (6 días) y AW (2 días). Después de 8 días sin ningún tratamiento (PosEB), se les administró dos dosis de naltrexona (Ntx) (2.5mg/Kg/día/sujeto) + EB a 5 sujetos y Ntx + Oil a los otros 5. Después de 4 días de inyecciones se les invirtieron los tratamientos. Durante este período tuvieron acceso 3 días a A y 1 día a AW El acceso al A o AW se llevó acabo en jaulas individuales provistas de un dispositivo (dipsómetro) que cuenta, en forma automática, los accesos al los bebederos por intervalo de tiempo. En la exposición a A, se encontró ciclicidad circadiana (luz-osc), la cual estuvo representada por un mayor número de accesos al bebedero durante el periodo de oscuridad en todos los períodos. En la exposición a AW, se observó esta ciclicidad únicamente para posC, en los demás períodos no se encuentra esta diferencias de fases. En el acceso a A se encontró un decremento en el consumo en los grupos EB, Ntx+oil siendo significativo con respecto a C, oil y PosEB, en el caso de Ntx+EB fue significativo en relación a todos los tratamientos. Con respecto al consumo de alcohol voluntario no se encontraron diferencias significativas entre los grupos. Con estos resultados pudimos comprobar que el efecto de la Ntx se potencia con la administración de los estrógenos. Estradiol valerate (EV) is a preparation designed for the slow release, across days, of estradiol. Previous research has shown that 2 mg a female rat produces marked changes in intake of ethanol. If rats are taking alcoholic beverages at the time of injections, intakes are reduced. Subsequently, intakes increase and eventually are greater than controls. Once there are enhanced intakes, they persist for months. EV enhances intakes across a number of variables, e.g., with various alcoholic beverages, with various strains, and with beverages presented at various times (including months) after one injection. There, however, is no systematic study of doses that might affect intake of ethanol. Consequently, female Wistar rats were given one of 9 doses of EV (ranging from .001 to 2 mg a rat) and their intake of a 12% sweetened alcoholic beverage monitored for 6 weeks (4 days/week, 6 hr/day) beginning 6 days after the injections. Ten rats receiving 2 mg of EV had ovarectomies before the injections. The rats receiving 2 mg of EV, including those with ovarectomies, took significantly more ethanol from the 3rd week of measurement and beyond. The mean of intake of ethanol, across 24 chances to take it, was for the EV-group 95 g/kg and for the Placebos 73 g/kg, (p < .02). Other doses produced variable effects. The data support the idea that pharmacological doses of estradiol produce enduring changes in females that can be manifest as an enhanced appetite for alcoholic beverages. We thank the technical assistance of Dr. Martín García, Angel Méndez Olalde, Lourdes Lara, and Pilar Galarza. Supported by DGAPA-UNAM and CONACYT. C-195 C-196 EFECTO DE LOS ESTRÓGENOS SOBRE EL CONSUMO DE ALCOHOL EN LA RATA MACHO. Virgen Enciso M*, Barrios De Tomasí E* y Juárez J. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara, Guadalajara, Jalisco, México. LAS SUBLINEAS HY Y LY DE RATAS SPRAGUEDAWLEY MUESTRAN DIFERENTES NIVELES DE APRENDIZAJE. Spíndola, E.* 1, Quiroz, A.* 1, Díaz M.* 2, Cortés M.C.* 2, Roldán G.1 y Eguíbar J.R.2. 1Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, 2 Instituto de Fisiología, BUAP. El objetivo del presente trabajo tuvo su base en la escasa y contradictoria evidencia que existe en relación a los efectos de los estrógenos sobre el consumo de alcohol. El estudio se llevó a cabo en dos fases: En la primera se eligieron 16 ratas macho, 8 de las cuales fueron castradas. A las 16 se les aplicó 5µg de benzoato de estradiol (BE) día/macho (por 8 días). Únicamente en la primera fase el alcohol fue adicionado con azúcar. En la segunda fase se usaron 10 machos, a todos se les castró y se les aplicó 5 µg de BE/día/macho o 0.05 ml de aceite/día/macho (por 8 días) en forma contrabalanceada. Se midieron consumos de alcohol, total de líquidos, consumos en los ciclos de luz-oscuridad, frecuencia de accesos a los bebederos, además de consumo de alimento y peso corporal. En ambos experimentos los sujetos fueron expuestos al alcohol en condición forzada (CF) y voluntaria (CV). El efecto más evidente fue una disminución en el consumo de alcohol durante el tratamiento con BE. Este efecto presentó variaciones dependientes de la condición gonadal de los machos y del tipo de exposición (voluntaria o forzada). En general, los consumos fueron más frecuentes durante la fase de oscuridad independientemente del líquido ingerido. El BE decrementó la frecuencia de lameteos al bebedero con alcohol pero no la distribución de accesos al mismo durante el día en la CF. En cambio, en la CV, el BE afectó tanto la frecuencia como la distribución de accesos al alcohol. Además el estradiol inhibió la ingestión de alimento. Los datos apoyan que el BE tiene un efecto inhibitorio en el consumo de alcohol, lo cual podría estar asociado a la acción de los estrógenos sobre el sistema opioide. Las sublíneas de ratas Sprague-Dawley HY (high yawning) y LY (low yawning) se obtuvieron mediante cruzamientos endogámicos a partir de machos con alta y baja frecuencia de bostezo (FB) respectivamente. Debido a que existe una relación directa entre la FB y la activación del sistema colinérgico, se ha postulado que las ratas HY podrían tener una concentración basal más alta de acetilcolina (ACh) que las ratas LY. Es bien sabido que la administración exógena de ACh y sus agonistas facilitan el aprendizaje y la retención de la memoria, por lo tanto, en el presente estudio se compararon las capacidades cognitivas de ambas sublíneas utilizando tres modelos diferentes de aprendizaje. Se llevaron a cabo experimentos estándar de condicionamiento aversivo al sabor (CAS) y condicionamiento aversivo al olor (CAO), en los cuales se evaluó la memoria gustativa y olfativa a largo plazo, respectivamente; además, se realizó una prueba de reconocimiento social (RS), en la que se midió la memoria a corto plazo. Los datos indican que no existen diferencias significativas en el CAO. No obstante, en el modelo de CAS las ratas HY mostraron una aversión significativamente mayor. En el caso del RS, se observó una mejor retención 20 minutos después del entrenamiento en estas mismas ratas. Estos resultados sugieren que las ratas de sublínea HY tienen un mejor desempeño en algunas tareas de aprendizaje, pero no en todas y lo cual podría estar relacionado con un aumento en el tono colinérgico. C-197 C-198 DISMINUCIÓN DEL TIEMPO DE RECONOCIMIENTO SOCIAL EN RATAS MACHO POR EL EFECTO DE LA EXPOSICIÓN A CAMPOS MAGNÉTICOS DE EXTREMA BAJA FRECUENCIA. Reyes-Guerrero, G.*1,3, Donatti-Albarrán, O.*1, Elías, D.2, Domínguez-González, A.*1, Vázquez, M.*1, Pérez, J.*2, Verdugo-Díaz, L.1 y Guevara-Guzmán, R.1. 1 Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México. 2Sección de Bioelectrónica, CINVESTAV, IPN, México. 3Departamento de Biología de la Reproducción, UAM- Iztapalapa, México. PAPEL DE LOS RECEPTORES NMDA EN EL APRENDIZAJE OLFATIVO. Solís-Avila, C.P.*, QuirozSaldívar, A.I.* y Roldán-Roldán, G. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM, México. Actualmente es cuestión en debate los efectos de los campos magnéticos (CM) de extrema baja frecuencia (EBF) sobre los sistemas biológicos. Existen reportes que muestran que los CM-EBF pueden incrementar o disminuir los procesos de memoria en los roedores. El objetivo de este estudio es evaluar los efectos de la estimulación con CM-EBF sobre el reconocimiento social de ratas adultas. Para ello, durante 9 días, dos horas por día en la mañana, ratas Wistar macho adultas fueron expuestas a campos magnéticos verticales sinusoidales de 60Hz a 1mT, aplicados con un par de bobinas Helmholtz. El grupo control consistió en animales expuestos únicamente al campo geológico local. Dos días previos, y justo antes de la prueba, cada animal fue habituado a la caja de prueba por 4 min. Después, a cada rata adulta se le presentó un juvenil conespecífico por 4 min. en dos ocasiones, separadas por un intervalo inter-exposición de 30 min. Las interacciones durante las exposiciones fueron videogabadas y luego evaluadas por un programa de cómputo. Nuestros resultados muestran que, comparados con el grupo control, en los animales expuestos a CM-EBF se observa una reducción significativa del tiempo que utilizan los adultos en el reconocimiento social del juvenil, 30 min. después de la exposición inicial. Este hallazgo puede ser interpretado en términos de una mejora de la memoria de reconocimiento social en animales estimulados con CM-EBF. DGAPA: IN209999. Los receptores glutamatérgicos tipo NMDA (N-metil-D-aspartato) están críticamente involucrados en procesos de plasticidad neuronal tales como la Potenciación a Largo Plazo (LTP), el aprendizaje y la consolidación de la memoria. Se sabe que estos receptores participan en la adquisición de Aversión al Olor Potenciada por el Sabor (TPOA) en ratas adultas y que su activación es necesaria para el aprendizaje olfativo en ratas neonatas. En el presente estudio se evaluó el papel de los receptores NMDA en el Condicionamiento Aversivo al Olor (CAO). Se emplearon ratas macho cepa Wistar (250-300 gr) las cuales se privaron de agua 24 hrs antes del inicio del estudio, que se realizó en seis días consecutivos. En los primeros dos días del experimento, los animales se habituaron a beber agua durante 10 minutos; al tercer día se expusieron a esencia de vainilla mientras bebían. El cuarto día (adquisición) las ratas fueron expuestas a esencia de almendras al momento de tomar agua e inmediatamente después de beber se les inyectó LiCl 0.15M (2% de su peso). El quinto día se les permitió beber solo agua durante 10 minutos. El sexto día (retención) se realizó la prueba en la cual se comparó el índice de preferencia entre la esencia de vainilla y la esencia de almendra. Los grupos experimentales fueron tratados sistémicamente con MK-801 (antagonista del receptor NMDA) en dosis de 0.02, 0.1 ó 0.5 mg/kg a distintos tiempos post-adquisición o antes de la prueba de retención. Los resultados obtenidos muestran una reducción en la respuesta condicionada (CAO) en los animales tratados con el fármaco durante la adquisición, observándose también que este efecto amnésico es dependiente de la dosis y del tiempo; a partir de esto se concluye que los receptores NMDA son necesarios para la adquisión y la fase temprana de la consolidación del Condicionamiento Aversivo al Olor, pero no para su evocación. C-199 C-200 DISOCIACIÓN DEL EFECTO ANSIÓLITICO Y AMNÉSICO DEL MIDAZOLAM EN EL LABERINTO ELEVADO EN T. González-López, M.R.*, Gómez-Romero J.G.*, García-Saldívar, N.L.* y Cruz-Morales, S.E. Maestría en Psicología y Laboratorio de Psicofarmacología, FES-Iztacala, UNAM. EFECTOS DE ESCOPOLAMINA EN EL LABERINTO ELEVADO EN T. Gómez-Romero J.G.*, Castillo, G.* GonzálezLópez, M. R. A.* y Cruz-Morales, S.E. Maestría en Psicología y Laboratorio de Psicofarmacología, FES-Iztacala, UNAM. Las benzodiazepinas, además del efecto ansiolítico pueden producir amnesia, sin embargo los datos en la literatura no son muy consistentes. En los últimos años se desarrolló un procedimiento que permite medir la ansiedad y la memoria en una misma tarea por medio del laberinto elevado en T (LET). El LET tiene tres brazos de iguales dimensiones, uno cerrado y dos abiertos, elevados 50 cm del piso; los animales son entrenados en una tarea de evitación inhibitoria, donde se miden las respuestas de evitación y escape en dos sesiones. El objetivo de este experimento fue evaluar los efectos del midazolam (MDZ) en una tarea de evitación inhibitoria en el LET. Ratas machos Wistar fueron tratadas con 1, 2 mg/kg, ip de MDZ o salina 15 min antes de ser expuestos al LET. El procedimiento consiste en colocar al sujeto en el fondo del brazo cerrado y registrar la latencia para dejar ese brazo en 3 ensayos consecutivos (latencia de evitación); en el ensayo de escape se coloca al sujeto en un brazo abierto y se mide el tiempo que tarda en abandonarlo. Veinticuatro horas después se evaluaron las latencias de retención para cada una de las respuestas. Se encontraron efectos significativos por droga, ensayo y la interacción droga-ensayo en las latencias de evitación y escape. En los grupos tratados con MDZ se observaron diferencias en el escape 1 (efecto ansiolítico), pero no en el escape 2. Se detectaron diferencias en las latencias de evitación en el segundo día entre los grupos de salina y MDZ (efecto amnésico). Los datos obtenidos sugieren que el MDZ produce amnesia anterógrada y tiene efectos ansiolíticos. Trabajo apoyado por PAPCA, FEZ-Iztacala, UNAM. La administración escopolamina (ESC) tiene efectos sobre la memoria. Recientemente se desarrolló un procedimiento que permite evaluar la ansiedad y la memoria, el laberinto elevado en T (LET). En este procedimiento se emplea una tarea de evitación inhibitoria, pero en lugar de administrar un choque como estímulo aversivo, el estímulo aversivo que se emplea es la aversión natural a los espacios abiertos, el LET consiste en dos brazos abiertos y uno cerrado, elevados 50cms del piso. Con el fin de aportar más información sobre la validez de este modelo para evaluar memoria, el objetivo de este experimento fue estudiar el efecto de la preadministración de escopolamina en el LET. Ratas machos Wistar fueron entrenadas en evitación inhibitoria en el LET 15 min después de haber sido tratadas con 0, 0.5, 1 o 3 mg/kg, ip de escopolamina. En el entrenamiento se colocó al sujeto en el fondo del brazo cerrado, registrándose el tiempo que tomó en dejarlo (latencia de evitación), en 3 ensayos consecutivos; en el ensayo de escape se colocó al sujeto en el extremo de un brazo abierto, y se registró el tiempo que tardó en abandonarlo y entrar al brazo cerrado (latencia de escape). Veinticuatro horas después se realizó la sesión de prueba. En las latencias de evitación se encontraron efectos significativos por dosis, ensayo y la interacción dosisensayo. Los grupos tratados con 1 y 3 mg de escopolamina mostraron latencias más cortas con respecto al grupo de salina cuando fueron probados a las 24 hr, lo cual es un índice del efecto amnésico de la ESC. No se encontraron diferencias significativas en las latencias de escape. La ESC produjo amnesia anterógrada en los grupos entrenados con mayores dosis, como era de esperarse no se detectó ningún efecto ansiolítico. Estos datos consistentes con los efectos reportados para los anticolinérgicos y proporcionan mayor validez a este procedimiento. Trabajo apoyado por PAPCA, FEZ-Iztacala, UNAM. C-201 C-202 INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD THETA DE ALTA FRECUENCIA DURANTE EL APRENDIZAJE ESPACIAL DEPENDIENTE DEL HIPOCAMPO. +Olvera-Cortés, M. E.*; +Gaytán-Tocavén, L.* y #González-Burgos, I. #Laboratorio de Psicobiología, +Laboratorio de Neurofisiología Experimental. Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Michoacán. EL KINDLING EN LA AMIGDALA Y CORTEZA INSULAR MODIFICA EL APRENDIZAJE AVERSIVO A LOS SABORES. López L.M.*, Camacho, F.J.* y Paredes R.G.* Instituto de Neurobiología, UNAM, Querétaro. La actividad theta hipocampal, particularmente de alta frecuencia, ocurre durante el despliegue de conductas asociadas a la adquisición de información, sin embargo no se ha demostrado una relación theta-aprendizaje independientemente de la producción de movimiento. OBJETIVO: comparar la expresión de actividad theta hipocampal de alta frecuencia, en animales entrenados en tres pruebas de aprendizaje espacial con demanda motora semejante, pero solo una de ellas dependiente del hipocampo. MÉTODOS: 29 ratas Sprague-Dawley fueron divididas en tres grupos: Aprendizaje de lugar (n=10), de señal (n=9) y egocéntrico (n=10). Concomitante al entrenamiento en el laberinto acuático de Morris, se registró el electroencefalograma del área CA1 hipocampal. Se obtuvo el espectro de poder de la banda de alta frecuencia (6.5-9.5 Hz) y se calculó el porcentaje de cambio de poder entre el registro alerta inmóvil y el de búsqueda de la plataforma de escape durante los 6 días de entrenamiento, para cada grupo. RESULTADOS: El ANOVA de medidas repetidas reveló un incremento del theta de alta frecuencia durante la adquisición del aprendizaje dependiente del hipocampo que fue significativo los días 4 y 5 con respecto al primero, mientras que los otros dos grupos no mostraron cambios. El cambio en actividad theta no fue paralelo a cambios en la velocidad de nado. CONCLUSIÓN: La actividad theta de alta frecuencia se incrementó solamente durante el aprendizaje dependiente del hipocampo, y fue independiente de la actividad motora desplegada. C-203 EFECTO DE LA LESIÓN INTRAESTRIATAL DE TERMINALES SEROTONINÉRGICAS SOBRE EL DESARROLLO DEL APRENDIZAJE ESPACIAL EGOCÉNTRICO EN LA RATA. Anguiano-Rodríguez, P.* (Avalado por González Burgos Ignacio), Gaytán-Tocavén, L.*, Olvera-Cortés, E.* Laboratorio de Neurofisiología Experimental, Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. Michoacán. Se ha propuesto que los ganglios basales organizan el aprendizaje espacial egocéntrico y que el abatimiento de la serotonina cerebral lo facilita, sin embargo no se ha establecido la relación entre dicha facilitación y la función estriatal. OBJETIVO: determinar si la lesión del sistema serotoninérgico intraestriatal facilita el aprendizaje egocéntrico. MATERIAL Y METODOS: 24 ratas Sprague-Dawley hembras de 21 días de edad fueron divididas en tres grupos: Testigo intacto (n=6), Experimental (n=9) que recibió la aplicación intra-estriatal de 5,7-dihidroxitriptamina y Control (n=9) que recibió ácido ascórbico. El aprendizaje egocéntrico fue evaluado a los 40 y 60 días de edad usando un laberinto acuático. La latencia de escape fue registrada y comparada intragrupal (ANOVA de friedman y Wilcoxon), e intergrupalmente (Kruskal Wallis y U de Mann Withney). Al concluir las pruebas se midió y comparó el contenido de catecolaminas estriatales por cromatografía líquida de alta resolución (ANOVA y Tukey). RESULTADOS: Mientras que a los 40 días los grupos control y experimental tuvieron latencias mayores, a los 60 días el grupo testigo fue menos eficiente (p=0.002 y p<0.001, respectivamente). El contenido de serotonina estraiatal no fue diferente pero la dopamina de los grupos control y experimental fue menor con respecto al grupo testigo (P<0.01). CONCLUSIONES: La lesión temprana de las terminales serotoninérgicas estriatales produjo la facilitación del aprendizaje egocéntrico a través de mecanismos trans-sinápticos sobre la función dopaminérgica. El kindling es un modelo que consiste en estímulos eléctricos breves y de baja intensidad que son aplicados en ciertas regiones cerebrales que eventualmente desarrollan crisis generalizadas y producen cambios conductuales y neuronales a largo plazo. En trabajos anteriores nosotros mostramos que el kindling induce copulación en ratas macho no copuladoras y facilita al igual que el macho la conducta coital en las hembras. En el presente estudio evaluaremos si el kindling puede modificar el aprendizaje, utilizando como paradigma el condicionamiento aversivo a los sabores (CAS), en el cual se han identificado claramente las vías anatómicas involucradas en este aprendizaje. En este paradigma los animales adquieren aversión al sabor cuando se les presenta un estímulo neutro (EN) seguido por una malestar gástrico provocado por el estímulo incondicionado (EI). Se usaron ratas Wistar, las cuales fueron implantadas en la amígdala (AMG) o corteza insular (CI) derecha y estimuladas eléctricamente una vez diariamente. Cuando el kindling quedó establecido los animales fueron privados de agua por 24 horas y luego se les dió de tomar agua en dos sesiones de 10 minutos por 4 días. En el 5o día el agua fue reemplazada por una solución de sacarosa (1%), 20 minutos más tarde a los animales se les inyectó cloruro de litio (7.5 ml/kg i.p, 0.2 M) para inducir el malestar gastrointestinal. Los animales con kindling en la AMG aumentaron el periodo de extinción del CAS. Es decir, tomaron más días para regresar a los niveles de la línea base comparados con los animales “sham”. Los animales con kindling en la CI presentaron una retención mayor en el CAS, es decir bebieron menos solución sacarosa que el grupo “sham” y AMG. Los resultados del presente experimento muestran que el kindling puede modificar una tarea de aprendizaje e indica que una modificación local de la función cerebral está correlacionada con cambios conductuales. Apoyado por CONACYT 28039N y DGAPA IN228199 C-204 INCREMENTO DE SINAPTOFISINA EN CA3 DE RATAS ENTRENADAS EN LA TAREA DE EVITACION INHIBITORIA. Quiroz, C.*, Garín, M.E.* Quirarte, G. L. y Prado-Alcalá R.A. Instituto de Neurobiología, UNAM El hipocampo dorsal (HCD) participa en la consolidación de la tarea de prevención pasiva, pero con altos niveles de reforzamiento la consolidación es posible aún sin la actividad del HCD. Para conocer la naturaleza de los cambios que ocurren en el hipocampo cuando se entrena con un choque intenso, cuarenta ratas fueron utilizadas para estudiar las posibles diferencias en la expresión de sinaptofisina asociadas al entrenamiento. Los animales fueron divididos en 4 grupos: entrenados con choque bajo (0.8 mA), con choque alto (1 mA) y dos grupos control que recibieron uno u otro choque en una cámara no relacionada a la evitación inhibitoria. Cuarenta y ocho horas después del entrenamiento o el choque eléctrico, todos los animales fueron probados en la cámara de evitación inhibitoria y dos horas más tarde sacrificados. Se realizó un ensayo inmunohistoquímico para cuantificar los niveles de sinaptofisina en CA1 y CA3 del HCD de cada grupo. En el grupo entrenado con 0.8 mA se encontró un incremento significativo en la expresión de sinaptofisina con respecto a su control. En el grupo entrenado con 1 mA no se encontraron diferencias con respecto a su control, pero en ambos, la expresión de sinaptofisina es mayor que en los grupos sujetos a un choque de 0.8 mA. No se encontraron diferencias en la expresión de sinaptofisina en CA1 en ninguno de los grupos. Los resultados señalan una representación diferente del engrama dependiendo de la intensidad de entrenamiento. Agradecemos la asistencia técnica de Angel Méndez y Pilar Galarza. Trabajo apoyado por DGAPA, PAPIIT y por CONACYT, 115578 C-205 C-206 LA CORTICOSTERONA EN EL ESTRIADO FACILITA LA CONSOLIDACIÓN DE LA MEMORIA EN FORMA DEPENDIENTE DE LA DOSIS. Medina, C.*, Sánchez-Reséndis, O.*, Galindo, L.*, Prado-Alcalá, R.A. y Quirarte, G. Instituto de Neurobiología, UNAM. NÚCLEO CAUDADO Y APRENDIZAJE. L. LA APLICACIÓN INTRAESTRIATAL DE TETRODOTOXINA ANTES DEL ENTRENAMIENTO DE EVITACIÓN INHIBITORIA NO PRODUCE DEPENDENCIA DE ESTADO. Luisa E. Galindo*, Gina L. Quirarte, Cristina Medina* y Roberto A. Prado-Alcalá. Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma de México, Queretaro, México 76230. Se han reportado efectos moduladores de los corticosteroides sobre la memoria cuando son administrados tanto sistémica como directamente en el hipocampo o la amígdala. En virtud de que existen otras estructuras cerebrales importantes para los procesos de memoria en las que los efectos de los corticosteroides no han sido estudiados, el objetivo de este estudio fue determinar si la administración de corticosterona en el estriado de ratas afecta la consolidación de la memoria en la tarea de evitación inhibitoria de un ensayo. Se realizaron tres experimentos. En el primero, se inyectaron varias dosis (5, 10, 20, 30 y 60 ng/µl) de corticosterona en el estriado de ratas inmediatamente después de la sesión de entrenamiento y se midió la retención 48 hr mas tarde. Se encontró un efecto sobre la retención dependiente de la dosis: la dosis de 10 ng de corticosterona facilita significativamente la retención. En el segundo experimento, los animales fueron inyectados con corticosterona 15, 30 ó 120 min después del entrenamiento. Se observó el efecto facilitador de la corticosterona sólo en los dos primeros intervalos. En el tercer experimento, se inyectaron después del entrenamiento y previas a la inyección de corticosterona, dos diferentes dosis (1 ó 10 ng/µl) del antagonista a los receptores de glucocorticoides tipo II, RU-38486. La dosis alta de RU bloquea el efecto facilitador de la corticosterona (10 ng/µl). Los resultados demuestran que la activación de los receptores a glucocorticoides en el estriado juega un importante papel en la consolidación de la memoria. Agradecemos la asistencia técnica de Martín García, Ángel Méndez Olalde, Lourdes Lara y Pilar Galarza.Trabajo apoyado por DGAPA-UNAM y CONACyT. La inactivación temporal del estriado, inducida por tetrodotoxina (TTX) 60 min antes ó 15 min después del entrenamiento en evitación inhibitoria (EI), produce deficiencias significativas en la retención de esta tarea. El presente trabajo fue diseñado para ampliar el estudio temporal de los efectos de la TTX, y para evaluar si las deficiencias debidas a la aplicación pre-entrenamiento de esta toxina, se deben simplemente a un efecto de dependencia de estado, o a una interferencia con procesos de memoria. En el presente trabajo estudiamos los efectos de la microinyección bilateral de TTX (10 ng) en el estriado anterodorsal de ratas con los siguientes parámetros temporales: a) 60 min antes del entrenamiento en EI, b) tanto a los 60 min antes de EI como 60 min antes de la prueba de retención, o c) inmediatamente después del entrenamiento. Las pruebas de retención de la tarea se efectuaron 48 horas después del entrenamiento. Para cada intervalo de inyección de TTX, se estudió un grupo control inyectado con el vehículo. Encontramos una profunda deficiencia en la retención en todos los grupos experimentales, independientemente del momento en que se inyectó la TTX. Estos resultados confirman que la actividad normal del estriado es indispensable para la retención de EI, y demuestran que los efectos producidos por su aplicación antes del entrenamiento no son debidos a un fenómeno de dependencia de estado. Agradecemos la asistencia técnica de Martín García, Ángel Méndez Olalde, Lourdes Lara, Pilar Galarza.Trabajo apoyado por DGAPAUNAM y CONACyT. C-207 C-208 INTELIGENCIA Y PERFIL COGNOSCITIVO EN NIÑAS CON HIPERPLASIA ADRENAL CONGÉNITA. Inozemtseva, O.*1 (avalado por Juárez González Jorge), Matute, E.*1,2 y Aceves, M.A.*3 1 Instituto de Neurociencias, 2 Departamento de Estudios en Educación, U de G; 3 Centro Medico de Occidente, IMSS. Guadalajara. ACTIVIDAD ELECTROFISIOLÓGICA ASOCIADA AL RECONOCIMIENTO DE INFORMACIÓN AUDITIVA Téllez-Alanís, B.*1,2 ALMACENADA A LARGO PLAZO. Barra, E. F.*1, Ruiz, A.*1 y Cansino, S.1 1Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología UNAM y 2 Facultad de Psicología UAEM. Los dos tipos más comunes de hiperplasia adrenal congénita (HAC) se caracterizan por la falta de la enzima 21α-hydroxilasa. En el tipo I existe insuficiencia de glucocorticoides y en el tipo II de gluco- y de mineralocorticoides. Los estudios realizados sobre las características cognoscitivas en la HAC mesclan sujetos con los dos tipos y señalan la presencia de un incremento, un decremento o ausencia de diferencia significativa en el CI total en las niñas con HAC comparadas con sus controles. A partir del supuesto de que los pacientes con HAC de tipo II podrían presentar mayores alteraciones, dadas sus condiciones fisiológicas, el objetivo del presente trabajo fue analizar el perfil cognoscitivo de las niñas con HAC de tipo II. Con tal fin se aplicó el WISC-RM a 7 niñas con HAC de tipo II (GHAC) de 7 a 12 años de edad y a sus controles sanos (GC) del igual medio socioeconómico, pareadas por edad, grado escolar y tipo de escuela. A pesar de que las puntuaciones obtenidas por el GHAC en el CI total, CI verbal y CI de ejecución se encuentran dentro del rango considerado como “normal”, el GHAC presenta una puntuación significativamente más baja en el CI total y el CI verbal al compararlo con el GC. En la escala verbal, el GHAC obtuvo una puntuación por debajo de la media en las subescalas de Información y Aritmética (ambas relacionadas con la memoria verbal a largo plazo); sin embargo, las diferencias entre ambos grupos no son significativas. En la escala de ejecución, el GHAC presenta puntuaciones por debajo de la media en las subescalas de Diseño con Cubos y Rompecabezas (relacionadas con praxias constructivas), solo la diferencia entre ambos grupos es significativa en Diseño con Cubos. Es probable que las niñas de tipo II presenten un perfil cognoscitivo propio, que merece un estudio más exhaustivo. El estudio de la memoria humana generalmente se ha realizado en condiciones controladas de laboratorio en las que el sujeto aprende estímulos que posteriormente serán evaluados en una tarea de recuerdo o reconocimiento. El estudio de la memoria por métodos más naturales es menor debido al riesgo de contar con controles experimentales pobres. El objetivo de este estudio fue evaluar el reconocimiento de información que fue adquirida por el sujeto a lo largo de su vida y no durante una fase de estudio previa. Así, la memoria se evalúa de forma natural sin perder el control experimental ya que presentamos información específica que forma parte de los conocimientos que poseen los sujetos. Se registraron los Potenciales Relacionados a Eventos en 24 participantes. Los estímulos fueron pares de nombres PAÍS/CIUDAD presentados auditivamente de forma congruente (la ciudad pertenece al país) o incongruente (no pertenece) y la tarea del sujeto fue indicar si la ciudad pertenecía o no al país. Los análisis mostraron un aumento en la latencia del componente P200 en los electrodos parietales y occipitales del hemisferio izquierdo durante los ensayos congruentes. El componente N400 presentó mayor amplitud ante los estímulos incongruentes y durante los ensayos incorrectos e inseguros. El componente P300 no presentó diferencias de amplitud en función de la congruencia, sin embargo, su amplitud sí fue mayor en los ensayos correctos y seguros. Los componentes N400 y P300 caracterizaron los procesos de reconocimiento, y cuando éste fue exitoso se presentaron cambios fisiológicos alrededor de los 200 milisegundos después del inicio del procesamiento mnémico. Apoyado por la DGAPA (IN300700) y el CONACyT (36203H). C-209 C-210 RASGOS NEUROFISIOLÓGICOS DISTINTIVOS DE LA MEMORIA SENSORIAL Y DE LA MEMORIA A CORTO PLAZO VISUAL. Ruiz, A.1*, Téllez-Alanís, B. 1 y 2* y Cansino, S.1. 1Laboratorio de NeuroCognición, Facultad de Psicología, UNAM. 2Facultad de Psicología, UAEM. APRENDIZAJE SIMULTANEO DE DOS CALIBRACIONES VISUOMOTORAS EN ADAPTACIÓN A PRISMAS. Díaz, R.* Herrera, W.* Murray, VC.* Méndez, M.* Castillo, J.* y FernándezRuiz, J. Depto. Fisiología, Facultad de Medicina. UNAM. México D.F. La memoria sensorial (MS) se caracteriza por almacenar sólo las características físicas de los estímulos, mientras que en la memoria a corto plazo (MCP) la información alcanza a ser codificada. Para establecer las respuestas cerebrales que distinguen a estos dos sistemas de memoria, se registraron Potenciales Relacionados a Eventos (PREs) en 24 sujetos mientras realizaban una tarea de memoria de no-codificación (MS) y de codificación (MCP), que consistió en presentar sucesivamente dos matrices de seis letras mayúsculas (2 filas X 3 columnas). En un tercio de los ensayos, las dos matrices eran iguales, mientras que en el resto, diferentes. De estos últimos, en la mitad de los ensayos cambiaban dos letras de lugar y en el resto, dos letras se sustituían por nuevas. La tarea de los sujetos fue juzgar si las dos matrices eran iguales o diferentes; en la condición de codificación, los sujetos además indicaban que tipo de cambio había ocurrido cuando las matrices eran diferentes. Por lo tanto, la segunda condición requería recordar la identidad de la letra en orden para detectar el cambio de posición o su sustitución; en cambio, la condición de no-codificación únicamente requería detectar el cambio físico en la segunda matriz. Se registró una onda negativa alrededor de los 350 mseg post-estímulo, seguida de una onda positiva cerca de los 600 mseg post-estímulo en ambas condiciones cuando las matrices fueron diferentes. En la condición de no-codificación ambas ondas tuvieron mayor amplitud y un retraso en la latencia en comparación con la condición de codificación. Estas diferencias fueron más pronunciadas para el cambio de letra que para el de posición. Las distinciones neurofisiológicas entre la MS y la MCP visual son cuantitativas más que cualitativas; además, éstas son moduladas por la complejidad de la tarea. Apoyado por la DGAPA IN300700 y el CONACyT 36203H. La adaptación a prismas es un modelo útil para estudiar las bases del aprendizaje visuomotor. Con este paradigma se ha demostrado que los sujetos aprenden a calibrar por separado un campo visuomotor, al mirar y tirar con y sin prismas. Nosotros estudiamos el aprendizaje simultaneo de dos calibraciones visuomotoras, al mirar y tirar alternadamente en dos hemicampos visuales, los cuales son dependientes de la posición de los ojos. Dividimos el campo visual usando un armazón con prismas de 30 dioptrías en la mitad inferior, pero no en la mitad superior. Se presentaron alternadamente dos objetivos, uno de ellos aparece en el hemicampo superior y el otro en el hemicampo inferior, de tal manera que los sujetos siempre miraron ambos objetivos alineados verticalmente independientemente de que trajeran o no los prismas puestos. Estudiamos tres condiciones, 1. Los sujetos tiraron con prismas que abarcaron todo su campo visual. 2. Los sujetos con medios prismas, tiraron al objetivo inferior y solo miraban el objetivo superior. 3. Los sujetos con medios prismas tiraron al objetivo superior e inferior. Los resultados muestran: a) Los sujetos pueden mantener simultáneamente dos calibraciones visuomotoras (la calibración normal y la nueva), b) El aprendizaje de una nueva calibración afecta la calibración anterior (hay un pequeño desplazamiento en la dirección opuesta), c) La tasa de aprendizaje es menor en la condición dual, y d) En ausencia de tiros al objetivo superior, ocurre una calibración que se generaliza en el pos-efecto en ambos hemicampos. Concluimos que el sistema puede mantener dos calibraciones simultaneas cuyo acceso dependerá de la posición de los ojos. DGAPA IN-210300 y CONACyT 34817-M C-211 C-212 PERCEPCIÓN DEL ESTRÉS POR ESTUDIANTES DE LAS MATERIAS BÁSICAS EN LA CARRERA DE MEDICINA Fernández-Garza, N.E.* (avalado por Rocha, Luisa), LópezMéndez, M.A. y García Garza, M.S.A. Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Nuevo León. fisiologia@ccr.dsi.uanl.mx LA INFUSIÓN DE BENZOATO DE ESTRADIOL (BE) EN EL ÁREA PREÓPTICA MEDIA (aPOm) CAMBIA A LA HEMBRA VIRGEN DE CANÍBAL EN MATERNAL. Porfirio Gómora y Guadalupe Domínguez. Centro de Investigación en Reproducción Animal. CINVESTAV- UAT, Ixtacuixtla Tlaxcala. La carrera de medicina es considerada como muy exigente y en la cual los estudiantes se ven sometidos a un estrés importante. Esta idea no es nueva, lo que si es nuevo en nuestra institución, es el hecho de que el tema es cada vez más frecuente entre los estudiantes, que expresan su preocupación por el estrés al que se sienten sometidos. Con el objetivo de conocer cuantitativamente la percepción de los estudiantes sobre el estrés al que se someten durante los primeros tres años de la carrera, se aplicó una encuesta a 286 estudiantes. Los encuestados se categorizaron por sexo, tener o no materias pendientes de aprobar y semestre que cursan, comparándose los subgrupos. También se comparó el estrés percibido a consecuencia de tres materias pendientes de aprobar, anatomía, fisiología y farmacología. Los resultados mostraron que el 71. 15% de los encuestados se considera sometido a un nivel de estrés alto, siendo esta percepción mayor en los alumnos que no tienen materias pendientes de aprobar que en los que si tienen (p < 0.05), no hubo diferencia por sexo, por semestre que cursan ni por la materia pendiente de aprobar. La mayor percepción de estrés en los estudiantes sin materias pendientes de aprobar, puede considerarse como un factor favorable que los lleva a dedicar más tiempo al estudio. El aumento en la percepción del estrés por los estudiantes en estos últimos años, probablemente está relacionada con la cada vez mayor competitividad que se vive en el aula desde que se instauró nuevamente el examen de admisión. Estos resultados son importantes para el profesor, de manera que lo tome en cuenta impidiendo que el estrés sea un factor desfavorable en el proceso de enseñanza-aprendizaje. La hembra virgen de la rata, así como la de otros mamíferos puede o no atacar y matar a los críos de otras hembras. La exposición continua de los críos a la hembra virgen resulta en el cambio de la conducta caníbal (CC) a la conducta maternal (CM) (Jakubowski y Terkel 1985). Sin embargo, la hembra lactante, no muestra esta conducta. Lo que sugiere una reducción en la CC y una facilitación de la CM por las hormonas de la gestación al parto. Pero no se ha demostrado. Nosotros exploramos primero sí hay un cambio en la CC a la CM en las hembras vírgenes que mostraron el canibalismo después de la lesión del aPOm por el implante de cánulas. Los críos fueron protegidos con una canasta (10x10x10 cm) de malla introducida durante 3 h en la caja hogar de la rata por 5 días. Del día 6 al 15, los críos fueron expuestos a la hembra sin caja. Solo 5/17 hembras se comieron a los críos el día 6. El 45% de las 12 hembras que no lo hicieron, acarrearon a estos al sitio del nido, los limpiaron y adoptaron la postura de amamantar sobre ellos en los 10 días siguientes. Segundo, el efecto de la infusión de benzoato de estradiol (BE) en el aPOm sobre el cambio de la CC a CM en hembras vírgenes. Hembras vírgenes caníbales recibieron 100 y 200 ng de BE en el aPOm y 48 h después 3 críos fueron introducidos (3 h) en la caja hogar durante 10 días. Dos de 10 y 0/6 hembras tratadas con BE 100 y 200 ng en el aPOm se comieron a los críos. Pero, 6 de 8 y 6/6 hembras tratadas con BE 100 y 200 ng acarrearon a los críos al sitio del nido, los limpiaron y adoptaron la postura de amamantar en los 10 días siguientes. Los resultados sugieren que el estradiol en el aPOm cambia la CC a la CM en la hembra virgen. C-213 C-214 INFLUENCIA DEL ESTRADIOL Y LA PROGESTERONA SOBRE LA ATRACCION DE LA RATA HEMBRA POR EL LIQUIDO AMNIOTICO. Gracia, M.E*., Carmona, C*., Gómora, P y Beyer, C. Centro de Investigación en Reproducción Animal CINVESTAV-UAT. Tlaxcala, México. EFECTO DE LA ESTIMULACIÓN SENSORIAL TEMPRANA EN EL DESARROLLO DE LA CONDUCTA DE APIÑAMIENTO DE LA RATA. Soriano, O*., Torrero, C., Regalado, M*. y Salas, M. Departamento de Neurobiología del Desarrollo y Neurofisiología. Instituto de Neurobiología. Campus UNAM, Juriquilla. Querétaro, Qro., México. Al parto las hembras limpian al neonato y consumen el líquido amniótico (LA). La oveja es atraída por el LA periparto estableciéndose, así, el lazo madre-crío. En los roedores, la preferencia de la hembra por el LA no se ha estudiado. Por lo consiguiente evaluamos la preferencia por el LA, colectado el día 22 de gestación, en la hembra ciclando, gestante, periparturienta y lactante. La prueba se hizo en una jaula de acrílico (75X30X30 cm) con el piso elevado 5 cm. Debajo de los 4 orificios centrales se colocaron 2 recipientes con LA (0.2ml) y 2 con solución salina (SS) en forma de cruz. Registramos por 5 minutos el tiempo que la hembra olió el LA o la SS, al introducir la nariz en el orificio de la perforación. Resultados: la hembra prefirió el LA pero no la SS en el proestro (74% vs 26%) y el estro (75% vs 25%). En la gestación, los días 10 (77% vs 23%), 16 (77% vs 23%) y 18 (73% vs 27%) y desde 6 horas antes (70% vs 30%) a 3 horas postparto (60% vs 40%). En la lactancia, los días 6 (73% vs 27%) y 14 (69% vs 31%). En un segundo estudio, exploramos el efecto de estradiol y progesterona sobre la preferencia olfativa de la hembra ovariectomizada (ovx) por el LA. Hembras ovx, fueron inyectadas subcutáneamente a la hora cero con 10 ? g de benzoato de estradiol (BE) y 44 horas más tarde con 2 mg de progesterona (P4) en los siguientes grupos (n=8): 1) Aceite (A)+A; 2) BE+A; 3) BE+P4 y 4) A+P4. Cuatro horas después de P4, observamos que las hembras tratadas sólo con BE (67%) o P4 (73%) olieron más el LA que la SS (33%-27%), mientras que las hembras tratadas con BE+P4 no mostraron preferencia alguna (58% vs 42%). Los resultados sugieren que las hormonas del ciclo reproductivo influencian la preferencia olfativa por el LA en la rata hembra. La conducta de apiñamiento en las crías de la rata es muy importante para mantener la temperatura del grupo de animales, aunque diversos estudios indican que otras señales sensoriales también pueden desencadenarla. La estimulación somatosensorial neonatal es una influencia esencial para desarrollar la conducta de apiñamiento. En este estudio, se analiza la influencia que pudiera tener el manoseo neonatal temprano diario (5min, días 1-20 de edad) en el desarrollo del apiñamiento. Para este fin se caracterizó el desarrollo de la conducta de apiñamiento de ratas Wistar, reunidas en dos grupos experimentales (control y estimulado). El registro de la conducta de apiñamiento se realizó en las edades de 5, 10, 15 y 20 días. Se formaron 8 camadas para cada condición experimental y edad. La duración del registro fue de 60 min en el cual se midió la latencia, duración, tipo de apiñamiento (batería y pila) y temperatura de la pila de animales inicial y final. Los resultados mostraron que la estimulación sensorial temprana afectó importantemente la aparición de la conducta y la temperatura en la edad de 5 días, comparando con los grupos de las edades de 10, 15 y 20 días postparto. Sin embargo, en el desarrollo de la conducta de apiñamiento al parecer no hubo ningún efecto significativo, sólo el factor edad fue importante para modificar la conducta. En el tipo de apiñamiento de las crías de edad temprana predominó el patrón en batería y conforme avanzó la maduración el apiñamiento fue en pila. Estos resultados probablemente se relacionen con la interacción entre la estimulación somatosensorial temprana y la inmadurez motora y sensorial que tienen las crías más jóvenes, y a la cual se suma una situación estresante producida por la sobre estimulación. Con el apoyo parcial de DGAPA (IN205300), CONACyT (159544) y DGEP (91050221). C-215 C-216 DESARROLLO DEL JUEGO SOCIAL EN RATAS DESNUTRIDAS Y SENSORIALMENTE ESTIMULADAS. Regalado, M*., Torrero, C., Soriano, O*. y Salas, M. Instituto. de Neurobiología, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro, México. CONDUCTA MATERNA ESPONTANEA EN HEMBRAS VIRGENES DEL RATON DE LOS VOLCANES (Neotomodon a. alstoni). Luis-Díaz, J.A.* (avalado por Miranda-Anaya Manuel), Carmona-Castro A.*, Delgado-Solís J.*, Cedillo-Ildefonso B.*, Espinosa-Villanueva G* y Cárdenas-Vázquez R.* Laboratorio de Biología de la Reproducción, FES Iztacala y Departamento de Biología Celular, Facultad de Ciencias, UNAM. Hallazgos previos muestran que la rata desnutrida y parcialmente aislada de la madre y del ambiente del nido, incrementa su conducta de juego, indicado la importancia del ambiente sensorial neonatal para su desarrollo. Para separar los efectos de la restricción de alimento de los relacionados con el ambiente sensorial temprano, se analizó la ontogenia del juego de ratas Wistar desnutridas por la ligadura de los conductos galactóforos de una de un par de madres lactantes (DXL) del día 1-23 de edad, asociada o no a estimulación sensorial temprana. La estimulación consistió en manosear diariamente a las crías (5 min) del día 1-15 y exposición diaria a un ambiente enriquecido (30 min) del día 16-30 de edad. La conducta se grabó en 8 grupos (n=4 sujetos por grupo/condición) en sesiones de 10 min diarios. La frecuencia del juego (boxeo, lucha y encimamiento) se evaluó en los días 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, y 80 postparto. Las ratas del grupo DXL sin estimulación incrementaron la frecuencia del juego comparadas con sus testigos. La frecuencia del juego fue mayor en los machos y durante el juego en parejas. Asimismo, las ratas DXL y sus controles que recibieron estimulación temprana incrementaron la proporción del juego a lo largo del estudio en comparación con los grupos no estimulados, aunque en los desnutridos estimulados el juego total fue menor comparado con sus controles respectivos. Los hallazgos sugieren que el manoseo y la experiencia sensorial temprana, pudieran ejercer sus efectos sobre el desarrollo del juego a través de sus acciones sobre la respuesta al estrés, que al reducirse en la etapa juvenil incrementaría la expresión del juego. Con el apoyo parcial de DGAPA/UNAM, IN205300. En la rata de laboratorio el estado fisiológico asociado a la preñez o el parto no constituyen una condición necesaria para el disparo de la conducta materna, ya que cuando a hembras vírgenes se les sensibiliza, exponiéndolas a crías recién nacidas por un período de varios días, estas hembras se comportan en forma materna. Sin embargo, no exhiben una respuesta inmediata a la presencia de las crías. En otros roedores no existen estudios sobre la conducta materna de hembras vírgenes. En el presente trabajo se estudio la posible respuesta de conducta materna de hembras vírgenes del ratón de los volcanes. MATERIAL Y METODOS: 10 hembras vírgenes con una edad de 65 a 100 días del ratón de los volcanes fueron expuestas a crías de 3 días de nacidas. Cada hembra fue puesta en una jaula de acrílico (17x15x 2 cm) con cama de aserrín y después de un minuto introdujo la cría. Se registró la latencia de exhibición de actividades maternas, como aseo, abrigo, olfateo y recuperación de las crías. RESULTADOS: De las 10 hembras observadas 7 exhibieron conducta materna a la primera exposición con una latencia en un rango de 10 s a 5 min, 2 mostraron agresión hacia las crías y una se mostró indiferente después de 10 minutos exposición. La primera conducta materna evocada por la cría fue el aseo, seguida por el abrigo y el olfateo; al separar la cría de la hembra se observó la conducta de recuperación. DISCUSIÓN: La alta frecuencia observada de conducta materna ESPONTÁNEA, sin necesidad de un período de sensibilización, probablemente sea debido a que, como ocurre en Peromyscus californicus, esta especie forma sistemas familiares en la que todos los miembros participan en el cuidado de las crías. C-217 C-218 DESARROLLO DE NEURONAS DEL NÚCLEO MOTOR DEL FACIAL (NMF) EN RATAS DESNUTRIDAS. Torrero, C., Frías, C*., Regalado, M*., Soriano, O*., Alvarado, S*. y Salas, M. Instituto de Neurobiología. Campus Juriquilla. UNAM. Querétaro, Qro., México. PARTICIPACION SEROTONINERGICA Y DOPAMINERGICA EN LA RATA MADRE BIEN NUTRIDA Y DESNUTRIDA, DURANTE EL AMAMANTAMIENTO DE González RM* CRIA DESNUTRIDA IN UTERO. Manjarrez GGa, Hernández RJb. aLaboratorio de Neuroquímica, *UIM en Enfermedades Neurológicas, CMN, Siglo XXI. Instituto Mexicano del Seguro Social y bCINVESTAV IPN. La comunicación madre-cría depende de complejos mecanismos que incluyen entre otros a la mutua emisión de señales sensoriales y químicas que aseguran la sobrevida del recién nacido. Así la expresión facial de las crías en respuesta al alimento, eliminación de excretas, emisión de vocalizaciones y al dolor juega un papel relevante en la comunicación madre-cría hasta la fecha desconocido. Las neuronas de la región intermedia y medial del NMF de la rata, inervan los músculos de las regiones temporal, auricular, orbicular y cigomática que modulan la expresión facial. Para analizar si la privación parcial de alimento y la separación temprana de las crías de la madre, afectan el desarrollo de las neuronas del NMF, se cuantificó su desarrollo a los 5, 12, 20 y 30 días de edad. Las crías se desnutrieron por la separación parcial diaria (12h) de la madre y del nido en una incubadora (28°C) del día 1-23 de edad. Destete al día 25. En cortes de 125-150 µm de grosor preparados con la técnica de Golgi-Cox, se localizó el NMF, tomándose muestras de los órdenes y extensión dendríticas y medidas del área y volumen del soma neuronal. Se encontraron reducciones significativas (p<0.05) en el número de los órdenes y extensión dendríticas distales, de las neuronas estrelladas y multipolares con pocos efectos en las bipolares. Asimismo, las mediciones del soma neuronal de los diferentes tipos celulares tendieron a reducirse a los 20 y 30 días de edad. Se sugiere que la hipoplasia dendrítica asociada a la desnutrición neonatal, afecta el ingreso de señales y la elaboración de la descarga que participa en la expresión facial del neonato. Con el patrocinio parcial de GAPA/UNAM, IN205300. Objetivo. Determinar la participación serotoninérgica y dopaminérgica en la rata madre sometida a diferente: condición nutricia y estímulo de succión durante el amamantamiento. Material y método. Ratas Wistar de 200 g , adaptadas 2 semanas a condiciones de bioterio. Se formaron 2 grupos: Uno desnutrido (D) y otro control (C). 2 semanas después se aparearon con machos normales. Al nacer se entrecruzaron formando 4 grupos: Madre control que amamantó cría control (MCACC), madre desnutrida que alimentó a su cría (MDACD), madre control que amamantó cría desnutrida (MCACD) y madre desnutrida que alimentó cría control (MDACC). A las edades de 5, 10, 15 y 21 días al inicio y final de un período de succión, se determinó serotonina y dopamina hipotalámica y prolactina plasmática. Resultados. En las MDACD y MDACC aumentó la serotonina durante el amamantamiento (p<0.01). Además la serotonina disminuyó en las madres al final de la succión (p<0.01). La dopamina disminuyó al final del período de succión en las MDACD, MDACC y MCACD (p>0.01) y como se esperaba la prolactina plasmática aumento al final del período de succión en todas las madres (p<0.01). Discusión. La desnutrición eleva la serotonina hipotalámica, disminuye dopamina y se incrementa la prolactina plasmática. Además se confirmó que la succión disminuye tanto dopamina como serotonina al final del período de succión. Estos hallazgos sugieren que la serotonina juega un papel importante en la liberación de prolactina durante el amamantamiento. Este trabajo fue apoyado por la Coordinación de Investigación en Salud del IMSS. C-219 C-220 CAMBIOS EN LA DISPONIBILIDAD DE SEROTONINA NO EVITA EL RETRASO DE LA FORMACION DE LOS BARRILES EN LA CORTEZA SOMATOSENSORIAL DE RATA DESNUTRIDA IN UTERO. a Manjarrez GG, b Gutiérrez OG, b González C*, a Herrera MR*, b a López S*, b Medina I*, c Hernández RJ. Laboratorio de Neuroquímica. UIM en Enfermedades Neurológicas. CMN, Siglo XXI, IMSS. b Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM y c CINVESTAV IPN. RASGOS CONDUCTUALES ASOCIADOS A LA DESNUTRICIÓN PRE- Y POSTNATAL EN RATAS. 1FerreiraNuño A,* 1Morales-Otal A,* 2Vázquez EF,* 2Herrera MR,* 1 Velázquez-Moctezuma J, 2Manjarrez GG. 1Area de Neurociencias. Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa. 2 Laboratorio de Neuroquímica. UIM en Enfermedades Neurológicas. CMN, Siglo XXI, Instituto Mexicano del Seguro Social. Objetivo. Establecer la relación temporal entre la disponibilidad de serotonina (5-HT) y la aparición y formación de los barriles en la corteza somatosensorial (CSS) de la rata desnutrida in-útero. Material y métodos. Se utilizó un modelo experimental de desnutrición in-útero. Al nacimiento crías desnutridas y controles se les aplicó PCPA 300 mg/Kg de peso corporal al primero, 3, 5, 7 y 9 días. En estas edad se obtuvo la CSS para determinar el L-triptofano (L-Trp) y 5-HT. Otras crías de los mismos grupos fueron perfundidas con paraformaldehído, se les disecó la CSS y se efectuaron cortes del tejido de 50 µm de grosor que fueron teñidos con violeta de cresyl. Resultados. Existió una elevación del L-Trp y 5-HT en la CSS de los desnutridos y como era de esperarse las crías tratadas con PCPA mostraron un descenso del neurotransmisor del 90%. Nótese que la aparición y formación de los barriles en la CSS fue al quinto día de edad en los controles. Sin embargo fue notorio que los desnutridos mostraron un retraso 2 días. Interesantemente las crías tratadas con PCPA no mostraron cambios en el patrón de desarrollo de los barriles corticales. Discusión. Independientemente de que los desnutridos mostraron un aumento de la 5-HT en la CSS existió un retraso de la aparición de los barriles de 2 días. Sin embargo a pesar del descenso del neurotransmisor secundario a PCPA, la geometría y la somatotopía de los barriles fue similar a las crías no tratadas. Por lo tanto, estos hallazgos en conjunto nos permiten plantear que la 5-HT tiene un papel mínimo como señal de tiempo iniciadora de la aparición y formación de los barriles en la capa IV de la CSS. Este trabajo se realizó gracias al apoyo financiero otorgado por CONACYT (J28035-N, 30764-M, 38615N), Fundación Zevada y IMSS Objetivo. Caracterizar algunos rasgos conductuales asociados a la desnutrición en ratas, comparando los efectos de la desnutrición inútero que se mantiene postnatalmente hasta la edad adulta, contra la desnutrición in-útero que se recupera a partir del nacimiento. Métodos. Ratas hembras de la cepa Wistar fueron sometidas a un régimen dietético con el 50% del consumo normal de alimento. Una vez preñadas, se mantuvo la limitación alimenticia. Al nacimiento, las crías fueron separadas en dos grupos: El grupo A, fue amamantado por su madre desnutrida y después del destete, continuó con la limitación alimenticia. En el grupo B, la crías fueron amamantadas por madres controles intactas y después del destete dispusieron de alimento ad libitum. El grupo control (C) estuvo constituido por crías normalmente nutridas pre- y postnatalmente. A los 5 meses de edad todos los grupos fueron sometidos a las siguientes pruebas a) actividad en campo abierto (CA), b) consumo de agua con sacarosa (SAC), c) nado forzado (NF) y d) conducta sexual masculina (CSM). Resultados. Comparados con el control, las ratas de los grupos A y B mostraron hiperactividad locomotora en la prueba de CA; en la de NF, tuvieron mucho nado (no propositivo) y poca inmovilidad completa; en la prueba de SAC no tuvieron mayor consumo de sacarosa y su CSM presentó datos sugestivos de alteraciones que interfieren con la ejecución. Discusión. Los resultados obtenidos muestran que la desnutrición prenatal induce trastornos conductuales de largo plazo, que no son revertidos al corregirse la nutrición al nacimiento. C-221 C-222 INMUNOFENOTIPO DE RATONES DEFICIENTES DE Báez-Saldaña A, Garay, C.*, Delint, I.*, BIOTINA. Jorge, E.*, Díaz, G.*, Rosiles, R.* y Ortega, E.*. Departamento de Inmunología. Instituto de Investigaciones Biomédicas. U.N.A.M. México, D.F. INCIDENCIA DEL SÍNDROME DE DIFICULTAD RESPIRATORIA EN NEONATOS PRETÉRMINO. INFLUENCIA DE LA ADMINISTRACIÓN DE CORTICOESTEROIDES PREPARTO A LA MADRE. Vera, K.*, Gamiño, S.M., Caudillo, C*. y Cruz, E*. Línea Invest. en Neurofisiología. IIST-U. de Guanajuato. La biotina es una vitamina que actúa como grupo prostético de enzimas que fijan CO2 en diversas reacciones metabólicas. Humanos deficientes de biotina presentan alteraciones en el funcionamiento del Sistema Inmune. La patogénesis del daño inmunológico no se entiende todavía.. Se puede inducir la deficiencia de biotina en animales de experimentación, cuando se les proporciona una dieta que carece de biotina y contiene clara de huevo cruda como única fuente de proteína. Grupos de ratones macho Balb/cAnN recibieron dietas control, depletante de biotina o suficiente de biotina. En ninguno de los parámetros determinados se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos control y suficiente. En cambio, los ratones deficientes de biotina tuvieron menor ganancia de peso, menor peso del hígado, bazo y timo y menor celularidad en bazo y timo. En estos órganos de los ratones deficientes de biotina, las actividades de propionil CoA carboxilasa (PCC) y piruvato carboxilasa (PC) estaban deprimidas hasta en 80%. Con la dieta depletante de biotina las proporciones de las subpoblaciones de linfocitos estaban alteradas en el bazo desde las 4 semanas de estudio y en el timo después de las 12 semanas. La inoculación de Tripanozoma cruzy en ratones deficientes de biotina indujo un aumento en la parasitemia así como una mortalidad de hasta 60%. Sin embargo, la producción de anticuerpos en respuesta a la inoculación de antígenos timo dependientes así como timo independientes, no se vio afectada por la deficiencia de biotina. Estos hallazgos sugieren que la biotina puede tener un efecto importante en la maduración de los linfocitos y consecuentemente en la capacidad del Sistema Inmune a responder ante un reto antigénico. Debido a que no se observaron correlaciones directamente proporcionales entre la disminución de la actividad específica de las carboxilasas PCC y PC con ninguno de los parámetros estudia-dos, es posible que estos efectos se lleven a cabo indirectamente por las enzimas biotiniladas o directamente por la biotina. El parto pretérmino contribuye en un gran porcentaje a los índices de morbi-mortalidad perinatal. Una de las principales complicaciones del nacimiento pretérmino es el Síndrome de Dificultad Respiratoria (SDR). Aunque se reportan avances en la prevención y tratamiento del SDR, en México los datos estadísticos no son específicos. La administración de corticoesteroides (CS) se asocia con aceleración en la producción de surfactante y, como consecuencia, con disminución en la demanda de apoyo ventilatorio en el recién nacido pretérmino (RNPT). Objetivos: determinar la incidencia de SDR en RNPT y evaluar el uso de CS antenatales en dos hospitales del tercer nivel de atención. Métodos: Se estudió a todos los RNPT nacidos entre julio y noviembre del 2001. Se evaluaron los datos generales de la madre, antecedentes obstétricos, intraparto y neonatales. Para evaluar variables cuantitativas entre las instituciones se utilizó t Student y U de Mann Whitney. Para evaluar el efecto de los CS sobre presencia/ausencia de SDR se empleó una prueba X2. Resultados: Se evaluaron 422 RNPT, 199 HGR y 223 HGP T-48 IMSS. El uso de CS fue del 27%. La incidencia global de SDR fue del 24% (21% y 32% respectivamente). Se encontraron diferencias significativas para el peso, apgar al minuto y a los 5 minutos, así como en el índice de Silverman (p < 0.05). No se encontró asociación entre la administración de CS y la presencia o ausencia de SDR (X2 = 1.99; p = 0.15 HGR y X2 = 1.71; p = 0.19 HGP T-48); Discusión y conclusiones: La incidencia global de SDR en este estudio fue del 24%, inferior a lo reportado en otros países, del 30% en los RNPT, 20.9% en pos-término y del 4.2% para los RNPT. C-223 C-224 Pacheco COMPETENCIA ESPERMÁTICA EN RATAS Pablo1,2, Coria GA1*, Manzo J1. Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana1. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM2 pacheco@neuroetologia.net DIFERENTE FUNCIONALIDAD DE LA CORTEZA PREFRONTAL MEDIAL Y ORBITAL DURANTE LOCOMOCION SEXUALMENTE REFORZADA EN RATAS HEMBRA. Hernández-González, M., Ramos-Guevara, J.P.*, Prieto-Beracoechea, C.A.* y Guevara, M.A. Instituto de Neurociencias, Universidad de Guadalajara. Se ha reportado que en la cópula de dos ratas macho con una misma hembra, el último tiene una ventaja en la paternidad, pero no hay una explicación convincente. METODO: Para determinar la ventaja por el orden y el tiempo transcurrido entre dos machos copulando con una misma hembra, utilizamos machos albinos (A) y pigmentados, copulando con hembras A. El color en las crías permitió identificar su paternidad. Formamos 3 grupos de acuerdo al tiempo transcurrido entre la eyaculación del 1er macho y el inicio de cópula del 2°: I) 0 min, II) 5 min y III) 10 min. Para cada grupo se invirtió el orden de cópula. RESULTADOS: El 98%, 30% y 20% de las crías fueron del 2° macho en los grupos I, II y III respectivamente. Esto indica que en un periodo de 10 min. se define la ventaja o desventaja de dos machos que compiten. El modelo sugerido para explicar los resultados se basa en el transporte espermático (TE) a través del reflejo vagino-uterino, el cual consiste en que la distensión vaginal (DV) dada por el pene y tapón seminal produce información aferente a través del nervio pélvico hacia los segmentos L6-S1 y produciendo información eferente por la misma vía o quizá por los segmentos L1-L2 a través del nervio hipogástrico hacia el útero, el cual inicia contracciones peristálticas caudo-cefálicas promoviendo la succión de espermatozoides en un lapso de 5 min. Con DV muy prolongadas, el reflejo disminuye, apareciendo nuevamente después de un descanso de la vagina. Un 2° macho que copula inmediatamente después de la eyaculación del 1° puede retirar el tapón y depositar el suyo, promoviendo el TE. Si el 2° macho copula 10 min después del 1° se enfrenta a un útero incapaz de responder reflejamente, por lo tanto no hay TE. BECA CONACYT REGISTRO 128099 (GAC) La corteza prefrontal (CPF) participa en los aspectos cognitivos de alto orden como la memoria espacial y temporal, el aprendizaje y el procesamiento motivacional y emocional, así como la organización de conductas secuenciales bien definidas. La CPF de la rata se ha dividido en dos áreas funcionalmente distintas: la CPF medial (CPFm) y la CPF orbital (CPFo). Ya que la lesión de ambas áreas de la CPF provoca efectos diferentes sobre conductas típicas de la especie y aprendidas, resultó interesante evaluar la actividad electroencefalográfica de la CPFm y CPFo durante la locomoción sexualmente reforzada en ratas hembras. Ratas hembra Wistar implantadas a permanencia bilateralmente en la CPF medial y orbital, fueron registradas en la etapa de estro durante el reposo previo y durante el recorrido de un laberinto T para llegar a uno de los brazos donde se encontraba un macho sexualmente experto. En la CPFm izquierda y derecha, la potencia absoluta (PA), la potencia relativa (PR) y la correlación (r) interhemisférica de las bandas analizadas (4-7, 8-12, 13-21 Hz) presentaron cambios importantes durante el reposo previo con la rata sexualmente motivada, así como durante la locomoción en el laberinto T cuando se encontraba un macho en uno de los brazos, respecto al recorrido del laberinto sin la presencia de un macho. En la CPFo, sólo la PA de la banda de 4-7 Hz mostró un aumento durante la locomoción con motivación sexual respecto al recorrido sin motivación sexual. Estos resultados sugieren una mayor participación de la CPFm tanto en los procesos anticipatorios como en la ejecución sexualmente motivada de ratas hembra, en tanto que la CPFo parece participar sólo en la ejecución locomotora sexualmente motivada. Proyecto parcialmente apoyado por CONACYT,registro 28592N. C-225 C-226 EXPRESIÓN DEL GEN DE LA PROLACTINA (PRL) EN CÉLULAS GnRHÉRGICAS GT1-7 INMORTALIZADAS. OrtizCornejo F*, Martínez de la Escalera G, Nava G*, Ochoa A.* Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma de México, Campus UNAM Juriquilla, Querétaro, Qro, 76230, México. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE L A pCLOROANFETAMINA (pCA) EN LA ESPERMATOGÉNESIS EN LA RATA. Marín, M.*, Avilés, A.*, Aragón, A., Ayala, M.E., Domínguez, R. UIBR. Laboratorio de Pubertad. FES-Zaragoza. UNAM. El sistema reproductivo de los mamíferos está regulado por el eje hipotálamo-hipófisis-gónadas, comandado por la hormona hipotalámica liberadora de gonadotropinas o GnRH. El control que ejercen distintos neurotransmisores y hormonas sobre la secreción de la GnRH ha sido difícil de abordar experimentalmente, ya que la población de neuronas GnRHérgicas en los mamíferos es escasa (entre 1000 y 3000 células), además de que se encuentran anatómicamente dispersas. Este problema ha sido abordado mediante el desarrollo de líneas neuronales GnRHérgicas inmortalizadas de origen murino, las denominadas células GT1. En estas células se ha estudiado la regulación hormonal de la secreción de la GnRH encontrándose que, tanto la prolactina como los estrógenos ováricos tienen actividad. Las células GT1 expresan receptores a estrógenos y a prolactina. El presente estudio tuvo el propósito de explorar la posible expresión del gen de la prolactina en células GT1, lo que mostraría a está como un factor de regulación autócrina. Mediante trascripción inversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) encontramos que las células GT1-7 expresan el ARNm de la PRL en condiciones basales de cultivo. El tratamiento de las células con 17β estradiol (10 µM) incrementó marcadamente la expresión del gen de la prolactina, sugiriendo que al igual que en los lactotrópos hipofisiarios, el gen de la prolactina en las neuronas GnRHérgicas está bajo control regulatorio de un elemento de respuesta a estrógenos. En vista de estos resultados cabe la posibilidad de que la secreción de la GnRH en las neuronas GT1 y en las neuronas GnRHérgicas in situ, esté bajo la regulación autócrina de la prolactina y esta, a su vez, sea modulada por influencias gonadales. El sistema serotoninérgico regula la secreción de las gonadotropinas [Hormona estimulante del Folículo, (FSH) y Luteinizante (LH)], las cuales modulan las funciones del testículo. Por ello, en el presente trabajo se analiza la participación de este sistema de nuerotransmisión en la espermatogénesis y esteroidogénesis . Ratas macho de la cepa CIIZ-V de 30 días de edad recibieron 10 mg/kg pc. de pCA o solución salina cada 8 días hasta el día 65 que fueron sacrificadas. Se disecaron y pesaron los testículos, se realizó el conteo de espermatozoides (ES), así como una evaluación de la movilidad (MO) y viabilidad (VI). Se colectó la sangre y se cuantificó la concentración de testosterona (T) y progesterona (P4) por la técnica de radioinmunoanálisis. Los resultados se analizaron estadísticamente. En los animales tratados con pCA la masa testicular (MT) y del epidídimo (ME) disminuyó significativamente (MT: 1.77g ± 0.31 vs. 2.99g ± 0.30; ME: 0.408 g ± 0.05 vs. 0.634 g ± 0.06, p<0.05). En estos animales el número de ES, así como el porcentaje de MO y VI disminuyeron significativamente (ES: 97.32x104 ± 11.77 vs. 272.92x104 ± 16.22; MO: 24.6% ± 4.6 vs. 60.6% ± 5.13; VI: 29.6% ± 4.6 vs. 79.4% ± 6.8, p<0.05). La concentración de P4 se incrementó ligeramente (6 ng/ml ± 1.74 vs. 3.64 ng/ml ± 1.66, no significativo) y la de testosterona presenta un comportamiento inverso (2.254 ng/ml ± 0.90 vs. 3.85 ng/ml ± 1.02, no significativo). Los resultados nos permiten sugerir que el sistema serotoninérgico participa en la regulación de la espermatogénesis y la esteroidogénesis en el testículo, posiblemente debido a la modificación en la secreción de gonadotropinas. Trabajo apoyado por PUIS, DGPA IN210500. C-227 C-228 EFECTO DE ADMINISTRACIÓN DE ESTEROIDES SEXUALES (ES) EN LA ETAPA NEONATAL (EN) SOBRE EL DESARROLLO FOLICULAR Y LA ESTEROIDO-GÈNESIS EN LA RATA ADULTA. Rodríguez, M.S*., Monroy J*., Chavira R*, Ayala, M.E. y Domínguez, R. UIBR. FES-Zaragoza, UNAM. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE SEROTONINA EN EL PROCESO DE APOPTOSIS Y ATRESIA FOLICULAR. Gallegos, E.*, Aragón, A.*, Chavira R*, Ayala, ME., Domínguez R. UIBR. Laboratorio de Pubertad. FES-Zaragoza, UNAM. México. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. En la rata hembra la diferenciación sexual del eje hipotálamo-hipófisis es regulada por los ES. El tratamiento de ratas hembras con propionato de testosterona (PT) o dipropionato de estradiol (DE) en el día 5 (d5) provocan anovulación en la rata adulta. Para analizar si existen diferencias ováricas entre el animal tratado con PT o DE, analizamos los cambios en la población folicular, el grado de atresia (AF) y la secreción de 17β-estradiol (E2) en la etapa adulta. También, se analizo si la administración de progesterona (P4) protege al sistema de los efectos del PT. Ratas hembras de la cepa CIIZ-V se les administró 500 µg de PT o 100 µg de DE en el d5; 50 µg de P4 en el día 4 (d4) o P4 en el d4 más 1250 µg de PT en el d5. Otro grupo recibió 0.01 ml de aceite (Vh). Todos los animales fueron sacrificados en el día 60, a la autopsia se disecaron los ovarios, se fijaron y se procesaron para el análisis de la población folicular y en suero se cuantificó la concentración de E2 por radioinmunoanálisis. Los resultados se analizaron estadísticamente. El número de folículos totales medidos disminuyó en los animales tratados con PT o P4+ PT (PT: 35.83 ± 3.55, P4+PT: 51± 4.91 vs. Vh: 107.83 ± 17.88, p<0.05). El porcentaje de folículos sanos disminuyó en los animales androgenizados o estrogenizados (PT: 53.0 %, P4+ PT: 58.2 %; DE: 57.4 % vs. Vh: 80.4 %, p<0.05). La concentración de E2 disminuyó en los grupos de animales tratados con PT o DE (PT: 9.45 ± 0.98 ; DE: 9.49 ± 1.32 vs. Vh: 14.06 ± 1.03, p<0.05). Estos resultados nos permiten sugerir que la falta de ovulación en los animales tratados con PT o DE es el resultado de modificaciones en el crecimiento folicular y del incremento de la atresia, lo que se refleja en la disminución en la concentración de E2. Trabajo apoyado por PUIS, DGAPA IN210500. La estimulación del sistema serotoninérgico durante la fase juvenil bloquea parcialmente la primer ovulación. Con el fin de analizar si estas modificaciones están asociadas a alteraciones en el desarrollo folicular, en el presente estudio se analizan los efectos de la administración sistémica de sulfato de serotonina (S-5-HT) en el proceso de apoptosis en células de la granulosa (ACG) y en la producción de testosterona (T). Ratas de la cepa CIIZ-V fueron inyectadas con S-5-HT (37.5 µg/kg de peso) o solución salina a partir del día 30 de edad hasta el día del sacrificio (32d, 35d ó 37d). A la autopsia se disecaron, fijaron y procesaron los ovarios para la identificación de ACG por la técnica de TUNEL. En el suero se cuantificó la concentración de T por radioinmunoanálisis. El tratamiento con S-5-HT no modificó el número total de folículos (32d: 97.0 ± 24.8 vs. 132.3 ± 31.7; 35d: 173.3 ± 32.7 vs. 186.7 ± 14.8; 37d: 113.0 ± 8.7 vs. 104.0 ± 29.8), sin embargo resulto en un incremento en la proporción de folículos con ACG de los animales sacrificados a los 32 ó 37 días de edad (32d: 81.4% vs. 53.0%; 37d: 67.6% vs. 59.4%, p<0.05). Este incremento se asoció a la tendencia al aumento en la concentración sérica de T en los animales autopsiados a los 32 ó 37 días de edad (32d: 24.0 ± 8.0 pg vs. 15.0 ± 6.0 pg; 37d: 15.0 ± 8.0 pg vs. 10.0 ± 5.0 pg, no significativo). A partir de estos resultados permiten sugerimos que la serotonina participa en la regulación del proceso de apoptosis y atresia folicular durante la etapa prepuberal de la rata, y en la producción de hormonas esteroides, las cuales actúan como factores de supervivencia de la célula de la granulosa. Trabajo apoyado por PUIS y DGAPA clave IN210500. C-229 C-230 MODIFICACIONES EN EL CRECIMIENTO DEL FOLÍCULO OVÁRICO DE LA RATA PREPÚBER CON LESIÓN QUÍMICA DEL NÚCLEO DORSAL DEL RAFÉ (NDR). Monroy J*, Ayala ME, Chavira R* y Domínguez R. Laboratorio de Pubertad de la UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de la Nutrición, México. LOS ESTEROIDES SEXUALES MODULAN LOS EFECTOS DE LA TIMULINA EN LA LIBERACIÓN DE LA FSH Y LH POR LAS CÉLULAS DE ADENOHIPÓFISIS DE RATA HEMBRA. Hinojosa, L.1*, García, L.1*, Chavira, R.2*, Cárdenas, M. 2*, Romano, M.C.3, Domínguez, R.1 y Rosas, P.1*. 1UIBR, FES-Zaragoza, UNAM. 2INCMN "Salvador Zubirán". 3 Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias, CINVESTAV, IPN. México, D.F., México. La inervación serotoninérgica del hipotálamo se origina en neuronas localizadas en los núcleos del rafé. También se acepta que la secreción de las gonadotropinas y las funciones del ovario son reguladas por el sistema serotoninérgico. La inyección de 10 µl de 5,6dihidroxitriptamina (5,6-DHT) en el NDR de la rata de 30 días edad, bloquea la primera ovulación. Para analizar si la falta de ovulación es el resultado de modificaciones en el crecimiento y la función endócrina del folículo ovárico, se analizaron los efectos de la inyección de ácido ascórbico al 0.05% o la lesión del NDR, producida por la 5,6-DHT sobre la población folicular y las concentraciones sérica de progesterona (P4) y 17β-estradiol (E2). Los animales de los diferentes grupos experimentales fueron sacrificados ocho, diez o doce días después de realizar la intervención quirúrgica. En los animales sacrificados a los ocho y diez días después de la lesión del NDR, el número total de folículos medidos disminuyó (Ocho: 77.3±9.3 vs. 139.8±8.0; Diez: 72.5±7.0 vs. 103.5±9.8, p<0.05) y se incrementó a los doce días (143.7±10.5 vs. 88.0±11.0, p<0.05). La concentración de P4 disminuyó en los animales sacrificados a los ocho o doce días después de la lesión (Ocho: 1.5±0.4 vs. 9.9±1.1; Doce: 7.1±0.9 vs. 4.7±0.6, p<0.05). En los animales sacrificados a los diez y doce días la concentración de E2 en los animales desnervados fue menor que los testigos (Díez: 5.4±0.7 vs. 13.2±2.2; Doce: 15.2±0.8 vs. 25.4±3.4, p<0.05). Con base en los resultados obtenidos sugerimos que la inervación serotoninérgica que se origina en el NDR es esencial en el mantenimiento de los mecanismos neuroendócrinos que regulan las funciones del ovario. Apoyado por DGAPA IN210500, DGEP, PUIS y CONACyT. Previamente mostramos que los efectos de la timulina (T) en las células de adenohipófisis (CAHF) de rata modifican la liberación in vitro de las hormonas estimulante del folículo (FSH) y luteinizante (LH) dependiendo del día del ciclo estral. Por ello en el presente estudio se analizó la participación de los esteroides sexuales en la respuesta de las CAHF a la T, en la liberación de las gonadotropinas. Se utilizaron CAHF de rata hembra, pre-incubadas por 24 h en medio de cultivo con suero lavado. Posteriormente, las células se trataron durante 24 h con progesterona (P4) [50 ng/ml] o testosterona (TS) [100 pg/ml] o 17β-estradiol (E2) [100 pg/ml]. Al término de este tiempo, se cambio el medio y se agregó la T (100 ng), en presencia o no de la hormona liberadora de las gonadotropinas (GnRH) [10-9 M]. Los cultivos se incubaron por tres horas. En el medio se evaluó la concentración de FSH y LH (ng/ml) por RIA. Los resultados se expresan en media±e.e.m. Grupo FSH P4 TS E2 LH P4 TS E2 Testigo 11.4±1.4 13.0±2.0 15.5±3.4 8.5±0.5 58.6±6.1 47.7±5.0 59.2±4.0 51.2±3.3 T 11.8±1.4 22.3±2.4 a 9.4±0.7 13.9±3.1 53.3±3.9 77.1±10.0 a 49.4±3.8 69.8±5.0 a GnRH 21.4±3.8 a 17.9±1.7 13.2±1.4 29.6±5.4 a 178.7±20.0 a 98.1±10.4 a 109.3±12.4 a 149.6±21.1 a GnRH+T 30.8±6.5 20.6±1.7 30.1±6.0 b 18.2±1.0 169.1±18.8 113.2±7.6 144.7±6.2 b 135.7±11.8 a, p<0.05 vs. Testigo; b, p<0.05 vs. GnRH Los resultados muestran que la P4 y el E2 modulan los efectos de la T sobre las CAHF no estimuladas, ocasionando una mayor liberación de las gonadotropinas y la TS sólo lo hace al adicionarles GnRH, lo que sugiere que la acción de la timulina sobre los gonadotropos depende de la sensibilidad que les confiere el esteroide y de la presencia de GnRH. Apoyado por DGAPA-PAPIIT IN217301, PAEP 101312, 101313 y CONACyT. C-231 C-232 AFLUENCIA DE LINFOCITOS EN EL ENDOMETRIO DE LA CONEJA, DURANTE LOS PRIMEROS DIAS DE LA GESTACIÓN TEMPRANA Y PSEUDOGESTACIÓN+ Zamora, H.V*, Villaseñor G.H.*, Anzaldúa, A.S.*, Romano, M. y PérezMartínez, M*. Depto. de Morfología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. UNAM y Depto. de Fisiología, Biofísica y Neurociencias del CINVESTAV, IPN., México, D.F. EFECTOS DEL TRATAMIENTO CRÓNICO CON PLOMO SOBRE LA FUNCIÓN OVÁRICA EN LA RATA ADULTA. Ruiz, M.* (avalado por Morán José Luis), Handal, A.*, Morán, C.* & Gómez, E.* Laboratorio de Investigaciones Biológicas, Instituto de Ciencias, BUAP. En el contexto de la interacción inmunoendocrina que ocurre en el inicio de la gestación, la progesterona destaca por su papel regulador de diversos procesos tisulares. Con el propósito de evaluar la actividad migratoria de los linfocitos totales en el endometrio de conejas durante la gestación temprana y pseudogestación inducida con hCG se utilizaron conejas Nueva Zelanda gestantes y pseudogestantes (n= 41). En ambos grupos se evaluó la migración de linfocitos al endometrio en los días 1 al 5 y 8 postcoito. Se obtuvieron fragmentos de ambos cuernos uterinos de cada animal que se procesaron por inclusión en parafina para obtener cortes de 6-8µm y se tiñeron con Giemsa para identificar a los linfocitos. Se contaron los linfocitos presentes en 25 campos microscópicos, en la lámina epitelial-lámina propia de tejido conjuntivo con el objetivo 40X y un ocular con retícula micrométrica.El número de linfocitos totales presentes en el endometrio durante los días 1 al 5 y 8 de la gestación fue menor (P<0.05) con respecto a los valores encontrados en las hembras testigo, no gestantes (NG). En las animales pseudogestantes también hubo un menor número de linfocitos con respecto a las conejas NG, sin embargo la disminución de linfocitos encontrada en los días 1 y 2 fue más evidente que la observada para estos días en las conejas gestantes. En el día 8 se encontró menor número de células que el resto de los demás días. Se concluye que durante los 8 primeros días de la gestación el número de linfocitos presentes en la mucosa uterina disminuye y que en el estado de pseudogestación ocurre un patrón de afluencia de linfocitos similar al observado en la gestación. +Financiado por PAPIIT-UNAM (Proyecto IN 212101). Se ha descrito que el plomo induce alteraciones significativas en la ontogenia y el funcionamiento del sistema reproductor. Con el fin de analizar los efectos de la ingestión crónica de diferentes concentraciones acetato de plomo sobre el inicio de la pubertad, el desarrollo folicular y la ovulación, en el presente trabajo de utilizaron ratas hembra adultas de la cepa CII-ZV que fueron expuestas a diferentes concentraciones de acetato de plomo en el agua de beber durante 90 días, a partir del destete (30 días de edad). Cuatro grupos experimentales recibieron 0.0 (Control), 0.003, 0.03 y 0.6 g/l de acetato de plomo disuelto en el agua de beber, respectivamente. Los animales se sacrificaron en la mañana del primer estro vaginal después de los 120 días de edad. A la autopsia se disecaron y pesaron los ovarios y el útero, que fueron analizados histológicamente. La concentración de plomo en la sangre fue similar entre los grupos experimentales tratados con 0.003 y 0.03 g/l de acetato de plomo (5.8±1.6 vs. 3.4±0.7 µg/dL, n.s.), pero en el grupo tratado con 0.6 g/l, los niveles de plomo fueron significantemente más altos (18.2±2.2 µg/dL vs. las otras concentraciones de acetato de plomo, p<0.001; ANDEVA / Tukey-Kramer). En el grupo tratado con 0.6 g/l de acetato de plomo se observó un adelanto de la pubertad respecto a los grupos tratados con bajas concentraciones (0.003 y 0.03 g/l: 55.1±0.9 vs. 0.6 g/l: 49.8±1.6 días, p<0.001; U de Mann-Whitney). El peso de los ovarios y del útero fue similar en todos los grupos. El número de cuerpos lúteos frescos encontrados en los ovarios de los animales tratados con plomo fue significativamente menor, independiente de la concentración a la que fueron expuestos (Control: 10.8±0.8 vs. Acetato de Plomo: 6.2±0.5, p<0.001; U de Mann-Whitney). El porcentaje de atresia en la población folicular en los animales tratados con 0.6 g/l de acetato de plomo se incrementó en un 36% comparado con el control. El porcentaje de folículos preantrales sanos disminuyó a medida que se incrementó la concentración de plomo en el agua de beber (Control: 91.7±6.2 vs. 0.003 g/l: 80.8±0.9, 0.03 g/l: 68.7±5.9 y 0.6 g/l: 53.4±13.7). Estos resultados nos permiten sugerir que la intoxicación crónica con plomo inhibe la ovulación al afectar los mecanismos que controlan el desarrollo folicular de los ovarios. La ingestión de plomo a partir del momento del destete induce alteraciones significativas en los mecanismos endocrinos y neuroendocrinos que regulan la pubertad de la rata (Apoyado por FOMES 2000-22-22). C-233 C-234 ANÁLISIS ANATÓMICO E HISTOLÓGICO DEL ESFÍNTER EXTERNO DE LA URETRA DE LA RATA MACHO. MartínezReyes A.(*), Manzo J. y Pacheco Pablo. Lab. de Neurociencias, Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana . Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. Facultad de Medicina-Xalapa Universidad Veracruzana. MODIFICACIONES TEMPORALES EN LA OVULACIÓN INDUCIDAS POR EL BLOQUEO DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS EN LA SEGUNDA MITAD DEL CICLO ESTRAL. Pastelín, C.*, Morán, C.*, Handal, A. * & Morán, J. L. Laboratorio de Investigaciones Biológicas, ICUAP, Puebla. La micción y continencia urinaria, son funciones del tracto urinario inferior, que requiere de interacción morfológica y fisiológica entre la vejiga y de las estructuras relacionadas con la uretra. Así, con el propósito de dilucidar en este proceso la participación de la musculatura estriada relacionada con la uretra, se realizó el presente trabajo. Se utilizaron ratas macho Wistar, adultas de 250g a 350 grs., anestesiadas con Uretano. Se hizo estudio anatómico macroscópico y utilizando la técnica de tinción de hematoxilina y eosina se analizó histológicamente al esfínter externo de la uretra. Resultados: La cirugía macroscópica permitió identificar los músculos y tendones que conforman al esfínter externo de la uretra. De acuerdo a su orientación se clasificaron en: 1.- músculo interno (que rodea a la uretra membranosa), 2.- músculo externo (que cubre al músculo interno), 3.- músculo anterior superficial (que cubre a la uretra prostática, conductos de próstata, vas deferente, vesícula seminal y glándula coagulante), 4.- músculo posterior (localizado en la parte lateral del tercio distal del músculo externo) y 5.- músculo prostático. Se localizó un tendón ventral en la parte ventral del músculo externo y un tendón dorsal en la parte dorsal del músculo interno. Histológicamente se encontró que la musculatura estriada descrita arriba está formada de fibras con diferente diámetro de acuerdo al músculo estudiado. No se encontró musculatura lisa es estos músculos. Se corroboró también la dirección de las fibras de cada músculo y la presencia de tejido tendinoso. Conclusiones.- El esfínter externo de la uretra es un complejo muscular que se encuentra formado por cinco músculos estriados, que actúan sobre la uretra prostática y membranosa. Apoyado por PROMEP UVER-316 Se ha mostrado que la participación del sistema dopaminérgico (SDA) varía durante el ciclo estral de la rata. Aparentemente, el SDA influye de manera estimulante durante la primera mitad del ciclo estral para que se lleven a cabo los eventos neuroendocrinos y endocrinos que culminan con la ovulación, pero durante la segunda mitad del ciclo su participación no es muy clara. Con el propósito de analizar el efecto del bloqueo farmacológico del SDA en la segunda mitad del ciclo estral sobre la secreción de gonadotropinas y la ovulación, ratas adultas con ciclos estrales regulares de cuatro días recibieron una dosis única con 2.5 mg/kg peso (s.c.) de haloperidol (HLP), disuelto en dimetilsulfóxido (DMSO), a las 13:00 del día del diestro-2 (D-2) ó del proestro (P). Al grupo testigo se le administró DMSO puro a las 13:00 h en los mismos días. Grupos de animales con HLP se sacrificaron en la mañana del primer (1er) y segundo (2º) estro observado (EO). Las frecuencias de estro vaginal en el día del estro esperado (FEV) y de animales ovulantes al EO (FAO), así como los promedios de la duración del ciclo estral (DCE) al 1er ó 2º EO y del número total de ovocitos liberados (NOL) se muestran en la tabla: DCE (días) FAO Grupo Experimental FEV NOL DMSO 16/16 4.0 ± 0.0 16/16 10.9 ± 0.3 er 1 EO 8/12 10.6 ±0.3** 3/12* 7.3 ± 1.9 HLP en D-2 2º EO 12/15 5.2 ± 0.6 12/15 9.3 ± 0.9 er 1 EO 10/10 4.0 ± 0.0 2/10* 5, 5 HLP en P 2º EO 0/15 ? 10.1 ±1.2** 10/15* 8.3 ± 1.0 * p<0.05 vs. DMSO; ? p<0.001 vs. todos (Probabilidad Exacta de Fisher). ** p<0.01 vs. los otros grupos (Kruskall-Wallis/Dunn: KW). Respecto al control absoluto, la inyección de DMSO no alteró el ciclo estral ni la ovulación (FAO: 17/17; NOL: 11.9±0.4). El NOL disminuyó en los grupos tratados con HLP sacrificados al primero (6.4±1.2 vs. DMSO, p<0.01; KW) y segundo ciclo (8.9±0.7 vs. DMSO, p<0.05; KW). Estos resultados muestran que el bloqueo farmacológico del SDA en la segunda mitad del ciclo estral afecta la secreción de gonadotropinas e induce cambios temporales en la ovulación espontánea de la rata, lo que sugiere alteraciones en la función ovárica que prevalecen al menos hasta el segundo ciclo estral. Apoyado por CONACYT(convenio 28062-N) C-235 C-236 LAS GONADOTROPINAS RESTAURAN DISCRETAMENTE LA OVULACIÓN EN RATAS CON BLOQUEO DE LOS RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS EN LA PRIMERA MITAD DEL CICLO ESTRAL. Vargas, L. A.*, Morán, C. * & Morán, J. L. Laboratorio de Investigaciones Biológicas, ICUAP, Puebla. EFECTOS DE LA MICROINYECCIÓN DE EEDQ EN EL HIPOTÁLAMO ANTERIOR SOBRE EL CICLO ESTRAL DE LA Morán, J. L. Laboratorio de RATA. Meléndez, E.*, Morán C.* & Investigaciones Biológicas-ICUAP, Puebla. Diferentes estudios han mostrado que durante la primera mitad del ciclo estral de la rata, el sistema dopaminérgico desempeña un papel crucial en el desarrollo de los eventos neuroendocrinos y endocrinos que culminan con la ovulación. El bloqueo farmacológico de los receptores a dopamina (RDA), inducido por la administración de una dosis única de haloperidol (HLP) en el día del estro ó del diestro-1, incrementa la atresia folicular en los ovarios, reduciendo así su capacidad ovulatoria, y prolonga el ciclo estral a 16.4±0.6 días en ratas de ciclo estral regular (CER) de cuatro días. Con el fin analizar si los efectos del bloqueo sistémico de los RDA sobre la ovulación pueden ser revertidos con gonadotropinas, ratas de CER recibieron una dosis única con 2.5 mg/kg peso (s.c.) de HLP, disuelto en dimetilsulfóxido (DMSO), a las 13:00 del día del estro ó del diestro-1. Grupos experimentales fueron sacrificados en el día del estro esperado (EE) ó en el primer estro observado (EO) después de la inyección del HLP. Otros grupos con HLP recibieron: 1) dosis diarias de 3.7 µg/kg peso de GnRH sintética a las 13:00 h y se sacrificaron en la mañana al mínimo signo de EO; 2) dosis únicas con 8 u.i. de PMSG a las 13:00 h del diestro-2, seguida de 5 u.i. a las 13:00 h del proestro esperado, sacrificándose en la mañana del EE. Los resultados se muestran en la tabla siguiente: Grupos con: HLP? DMSO? Tasa de Animales Ovulantes (Pruebas de Chi Cuadrada) 20/20 No. Ovocitos Liberados (Kruskall-Wallis / Dunn) 11.3±0.3 Sacrificado al EO 20/20 8.8±0.5 £ Sacrificado al EE 0/20 * 0 GnRH (EO) 14/42 ** ? 1.9±0.2 ** ? PMSG + hCG (EE) 13/20 ** 5.5±0.9 ** * p<0.05 vs. grupos con DMSO y HLP Sacrificado al EO; ** p<0.05 vs. grupos sin tratamiento hormonal; ? p<0.05 vs. grupo con HLP tratado con PMSG + hCG. £ p<0.05 vs. grupo con DMSO (U de Mann-Whitney). Estos resultados confirman que el bloqueo de los RDA en la primera mitad del ciclo estral afecta sensiblemente la función ovárica en cuanto a los mecanismos que controlan la selección folicular, con efectos que no pueden ser revertidos con un tratamiento hormonal, lo que nos permite sugerir la existencia un papel directo de la dopamina en el control de la función ovárica. Apoyado por CONACYT(convenio 28062-N) Se ha mostrado que en el día del estro, el sistema dopaminérgico del hipotálamo anterior (HA) desempeña un papel lateralizado en el control de la ovulación; el implante de un antagonista dopaminérgico en el lado derecho del HA bloqueó de modo efectivo la ovulación pero el del lado izquierdo no. Con el fin de analizar las consecuencias de la interrupción de la información dopaminérgica (INDA) generada en uno de los lados del HA en ese día del ciclo estral (CE) sobre la secreción de gonadotropinas y las funciones del ovario, se estudió el efecto crónico de la microinyección (MI) de la neurotoxina dopaminérgica EEDQ en el lado derecho (DER), izquierdo (IZQ) ó en ambos lados (bilateral: BIL) del HA sobre el CE y la ovulación de ratas de CE regular de cuatro días. A las 13:00 h del día del estro, grupos de animales con CE regular recibieron MI en uno ó ambos lados del HA con: a) 1µL de EEDQ (30 µg/µL; 3 µg/min); b) 1µL de dimetilsulfoxido (DMSO; Vehículo: 0.2 µL/min) ó c) 1µL de NaCl 0.9% (MI Control: 0.2 µL/min). Los animales fueron sacrificados en la mañana del estro vaginal después de cuatro ciclos estrales completos. La MI BIL, DER ó IZQ en el HA entre los grupos con DMSO ó NaCl 0.9% no modificó las tasas de recuperación de CE regular (TCER) y de animales ovulantes (TAO), ni los días de duración del primero ó último CE ni el número de ovocitos liberados (NOL); sus datos se reunieron en tres grupos testigo (SHAM) que se compararon con las MI´s con EEDQ: 1er CE 4º CE TCER TAO NOL 9.3±1.0 4.0±0.0 18/18 18/18 10.9±0.4 DER 7.8±1.0 4.0±0.0 15/16 16/16 11.3±0.6 IZQ 8.8±1.1 4.1±0.1 12/16 16/16 10.9±0.4 † 4/8* 12.8±1.4 MI en HA BIL SHAM BIL EEDQ ‡ 14.8±0.4* ‡ 6.3±1.3** † 2/8** DER 12.0±1.3 4.0±0.0 7/8 8/8 11.2±0.9 IZQ 9.4±1.8 4.1±0.1 7/8 8/8 12.5±0.3 *p<0.05 vs. todos los SHAM; **p<0.05 vs. todos los grupos (‡ Kruskall-Wallis seguida de la prueba de Dunn) († Prueba de Probabilidad Exacta de Fisher). Estos resultados muestran que la interrupción de la INDA en ambos lados del HA afecta de modo crítico la secreción de gonadotropinas con efectos crónicos en el control del CE y la ovulación de la rata. Aparentemente, el lado izquierdo de HA emite señales que participan en el control de la función ovárica, ya que el NOL tiende a incrementarse cuando se interrumpe la INDA en ese lado del HA (SHAM BIL e IZQ (34): 10.9±0.3 vs. EEDQ BIL e IZQ (12): 12.6±0.5, p<0.003; U de Mann-Whitney). Apoyado por CONA C-237 C-238 CARACTERIZACIÓN DEL SISTEMA SEROTONINÉRGICO DEL EPIDÍDIMO DE LA RATA DURANTE LA MADURACIÓN SEXUAL. Tapia-Rodríguez, M.*, Jiménez-Trejo, F.J.*, Martínez-Coria H.*, Manjarrez-Gutiérrez G.* y GutiérrezOspina, G. Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBm, UNAM. y Unidad de Enfermedades Neurológicas, CMN s.XXI, IMSS, México D.F. EFECTO DEL EXTRACTO CRUDO DE Sedum oxypetalum EN EL EPITELIO VAGINAL DURANTE EL CICLO ESTRAL DE RATONES CD-1. Hernández-Cano, T,* (avalado por Racotta Poulieff Radu.), Montellano-Rosales H.* Laboratorio de Embriología. Depto. de Morfología y Farmacía. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN, 11340. México D.F. El epitelio del epidídimo secreta sustancias que promueven la maduración espermática. La presencia de neuronas en el estroma testicular sugiere, además, que éstas también pudieran participar en la regulación de la gametogénesis y/o en la maduración gamética. En apoyo a esta posibilidad, se ha reportado que el aumento del número de células neurales en el testículo, se asocia a infertilidad en seres humanos. En el laboratorio estamos caracterizando un sistema constituido por células neurales y epiteliales, diferentes de las células cebadas, asociadas al metabolismo de la serotonina (5HT) en la cabeza del epidídimo. Utilizando técnicas de inmunocitoquímica, identificamos células positivas para 5HT y triptofano5-hidroxilasa (TPH) en el intersticio y en la base del epitelio. También identificamos células epiteliales inmunorreactivas para el transportador de 5HT y el receptor 5HT1B. En ensayos de inmunotransferencia, hemos confirmado la presencia de tres isoformas de la TPH a lo largo del desarrollo del epidídimo. Finalmente, el uso de marcadores de células neuroendocrinas, tales como sinaptofisina y neurofilamentos, nos permite proponer que, al menos algunas de las células subepiteliales, tienen un origen neuroectodérmico. El papel del sistema celular serotoninérgico en el epidídimo es aún desconocido. Pensamos, sin embargo, que éste pudiera participar en el proceso de maduración espermática (e.g., en la adquisición de la motilidad) que tiene lugar en la cabeza del epidídimo. C-239 LA ADMINISTRACIÓN DE LA FRACCION 25-35 DE LA AMILOIDE- β INCREMENTA LOS NIVELES DE OXIDO NITRICO EN CORTEZA FRONTAL. Romero-Santos R.*1, Guevara F. J.*2, Limón I. D.*1, Félix Luna Morales1. 2Instituto Nacional de Neurología México D.F. y 1Laboratorio de Neurofarmacología FCQ-BUAP, Puebla, Pue. En cultivos de neuronas corticales de ratas el óxido nítrico (NO) y el daño neuronal se incrementó por la fracción 25-35 del péptido amiloide-β. Esto podría estar mediando la muerte neuronal en los pacientes con enfermedad de Alzheimer. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la administración de la fracción 25-35 del péptido amiloide-β (Aβ) sobre la producción de óxido nítrico en cerebros de ratas adultas. Se utilizaron ratas macho de la cepa Wistar (n=14/grupo). A dos grupos experimentales se les administró bilateralmente mediante cirugía esterotáxica 2µl de la fracción 25-35 del péptido Aβ (1mM) en corteza frontal con las siguientes coordenadas: (AP= 3.8, L= ±2.0, P= -1.3) y al grupo control SSI. A un grupo experimental se les extrajo corteza frontal (CF), corteza temporoparietal (CTP) y amígdala (A) 1 hora después de la cirugía y a otro grupo se le extrajeron los núcleos 15 días después. A todos los grupos se les cuantificó óxido nítrico mediante la técnica de Griess. Los resultados obtenidos después de 1 hora de la administración del péptido indican un incremento significativo de un 42% de óxido nítrico con respecto del grupo control en corteza frontal, manteniéndose elevados los niveles de NO después de 15 días de la administración del péptido Aβ en dicho núcleo. Sin embargo, no se encontraron cambios significativos en CTP y A. Estos datos nos sugieren que la administración bilateral de la fracción 25-35 del péptido Aβ podría estar mediando la producción de óxido nítrico lo que probablemente este ocasionando la muerte neuronal en los pacientes con enfermedad de Alzheimer. Plantas con propiedades espermicidas, se caracterizan por presentar alcaloides que inhiben síntesis de proteínas y DNA. Debido a que estudios fitoquímicos han demostrado que el extracto crudo de Sedum oxypetalum contiene metabolitos como alcaloides, saponinas y taninos, es interesante conocer el efecto del extracto sobre el epitelio vaginal durante las diferentes fases del ciclo estral de ratón. Ratones hembra CD-1 de 35g de peso se separaron en un grupo experimental que recibió intravaginalmente la solución del extracto crudo de 10 y 25 mg/kg, y un grupo testigo que recibió 0.05ml de solución salina, en cada una de las fases del ciclo estral. Para determinar los cambios citológicos se utilizó la técnica de Papanicolaou. Mediante el análisis citológico de los frotis obtenidos de las hembras tanto del grupo testigo como experimental, se determinó el valor estrogénico (que representa el grado de madurez de las células del epitelio vaginal) correspondiente a cada una de las fases del ciclo (proestro, estro, metaestro y diestro). Dicho valor presentó una disminución del 50% en todas las fases de las hembras tratadas con la dosis 10mg/kg, en tanto que con la dosis de 25mg/kg se observó una disminución del 34% sólo en las hembras que recibieron el extracto en las fases de estro y diestro. Según los resultados obtenidos podemos concluir que la inhibición de la maduración del epitelio vaginal depende de la concentración del extracto, así como de la fase del ciclo en la que se éste administrando. C-240 PERSISTENCIA DE LAS ALTERACIONES HISTOLÓGICAS DE LA CORTEZA CEREBRAL EN RATÓN DE 18 MESES DE EDAD CAUSADAS POR ADMINISTRACIÓN PRENATAL DE DIAZEPAM De la Fuente-Juárez, Graciela,* Márquez-Orozco, M.C., Márquez-Orozco, A, Gazca-Ramírez, M.V.* Enriquez-Nájera M,** y Varela-Mendoza A.** Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. **Alumnas del Programa NUCE. La exposición in útero a diazepam (DZ) altera el desarrollo de la corteza cerebral de fetos y ratones adultos de dos meses. El propósito de este trabajo fue investigar si en la corteza cerebral se acentúa el daño producido por la exposición prenatal a diazepam (DZ) en ratones de 18 meses de edad. Dos grupos de hembras de ratón de la cepa ICR, del día 6 al 17 de la gestación, recibieron por vía subcutánea, el primero (DZ), dosis únicas diarias de DZ de 2.7 mg/kg, y el segundo (S) solución salina. El tercer grupo (NT), no fue tratado. Las crías fueron alimentadas por nodrizas y a los 18 meses de edad se sacrificaron en una atmósfera de CO2, se obtuvo la corteza cerebral, se fijó en formol neutro al 10% y se incluyó en parafina. Los cortes se tiñeron con H-E y se observaron en un microscopio óptico de comparación. En el grupo DZ, había menor número de neuronas por campo (p <0.05). Con frecuencia existía un espacio perinuclear y estaba reducido el tamaño del núcleo de las neuronas. Algunas presentaban cúmulos densos de heterocromatina distribuidos de manera atípica. El neuropilo tenía un aspecto esponjoso, las dendritas apicales estaban engrosadas y desorientadas. Los grupos S, y NT, presentaron características histológicas normales. Las alteraciones son semejantes a las observadas en los ratones de dos meses de edad, que se podrían deber a que, al avanzar la edad se acentúan los efectos teratogénicos causados por el DZ en etapa fetal, que produce sobre la mitosis, la síntesis de proteínas, los organelos citoplásmicos y la migración celular. Los resultados comprueban que las alteraciones de la corteza cerebral de fetos de ratón inducidas por la administración prenatal de DZ, se agravan, en los ratones de 18 meses de edad. C-241 C-242 EFECTOS DEL FLUNITRAZEPAM SOBRE EL HÍGADO FETAL DE RATÓN. Márquez-Orozco, Ma. Cristina, MárquezOrozco, A., Gazca-Ramírez, M.V.* y De la Fuente-Juárez, G.* Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, UNAM. México 04510 D.F. DAÑO RENAL PROGRESIVO CAUSADO POR ESTRÉS OXIDATIVO SECUNDARIO A LA EXPOSICIÓN REPETIDA A BAJAS CONCENTRACIONES DE OZONO EN RATA. Canales-Medina M.* Rugerio-Vargas C.* Vega-Garcia M.I..* Borgonio-Perez G.* y Rivas- Aracibia S. Departamento de Fisiología y Departamento de Biología Celular y Tisular, Facultad de Medicina, UNAM. México, D.F. La exposición a ozono produce radicales libres derivados de oxígeno, y cuando las defensas antioxidantes pulmonares no pueden contrarrestar estas moléculas, entonces se forman especies reactivas de oxigeno (ROS) secundarias a la exposición a este gas, las cuales al pasar a la circulación sistémica llegan a todos los órganos, especialmente riñón donde causan cambios en el balance de oxidoreducción y daño celular. El objetivo de este estudio fue analizar los cambios progresivos en tejido renal (corteza y medula) producidos por incremento sistémico de ROS, secundario a exposición a ozono. Se emplearon 12 ratas macho de la cepa Wistar, de 3 meses de edad, con libre acceso a agua y comida, divididas en tres grupos (n= 4) con los siguientes tratamientos: Grupo 1 control (expuestas a aire); Grupo 2 expuestas a ozono (0.25 ppm durante 4 horas) 15 días; Grupo 3 expuestas a ozono (0.25 ppm durante 4 horas) 1 mes. Dos horas después de la ultima exposición, los animales fueron anestesiados y perfundidos. Los riñones fueron extraídos, fijados, y procesados en cortes histológicos, los cuales fueron teñidos con hematoxilina–eosina, Masson e inmunohistoquímica (anticuerpos contra S100). Los resultados indicaron que los riñones expuestos a ozono presentaron alteraciones microscópicas, consistentes en reducción de la altura de las células epiteliales de nefronas y túbulos colectores; aparición de inclusiones citoplasmáticas (menores a 0.5:m) de contenido incierto; y desprendimientos de la cápsula de Bowman en los glomérulos. Se encontró también un incremento en la inmunoreactividad contra S100 principalmente en la medula, los cuales demuestran la presencia de alteraciones endoteliales. Todas las alteraciones registradas avanzaron progresivamente dependiendo del periodo de exposición repetida a ozono: las mayores alteraciones se observaron en el grupo expuesto durante un mes. El flunitrazepam (FNZ) y el diazepam (DZ) son benzodiazepinas que atraviesan la barrera placentaria y por ser liposolubles se acumulan en el tejido hepático, que es alterado por el DZ. El propósito de este trabajo fue investigar si la administración de flunitrazepam (FNZ) a ratones, el día 6 de la gestación, causa en el hígado fetal de ratón alteraciones semejantes a las producidas por el DZ administrado prenatalmente. Dos grupos de hembras de ratón de la cepa ICR recibieron por vía oral, el día 6 de la gestación, el primero (FNZ), una sola dosis de FNZ de 2.5 mg/kg, y el segundo(S), solución salina. Un tercer grupo (NT), no fue tratado. Las hembras gestantes de los tres grupos se sacrificaron el día 18, en una atmósfera de CO2 y se obtuvieron los fetos. Se extrajo el hígado, se fijó en glutaraldehido al 2.5%, se posfijó en OsO4 al 1% y se incluyó en resina epóxica. Los cortes semifinos se tiñeron con azul de toluidina y se observaron en un microscopio óptico de comparación. En el grupo, FNZ se encontró que los hepatocitos eran de mayor tamaño que los de los grupos S y NT, con frecuencia eran binucleados, y presentaban abundantes gránulos basófilos. Los núcleos eran voluminosos, presentaban grumos de heterocromatina, localizados cerca de la membrana nuclear y uno o más nucléolos de gran tamaño. La cantidad de megacariocitos era significativamente mayor que en los controles (p<0.05). Entre los grupos S y NT, no se observaron diferencias histológicas. Los cambios podrían deberse a que el FNZ, al igual que el DZ inhiba la síntesis de proteínas, produzca un defecto genotóxico, y alteraciones en los organelos citoplásmicos semejantes a las observadas en el hígado de los fetos tratados con DZ. Los resultados comprueban que el FNZ administrado durante la gestación altera el hígado fetal de ratón. Es probable que los cambios observados, persistan en el adulto y tenga repercusiones fisiológicas. C-243 C-244 EFECTO DE LA EXPOSICIÓN REPETIDA A BAJAS DOSIS DE OZONO SOBRE EL TIMO. Rodríguez-Martínez, G.*(avalado por Rivas-Arancibia Selva), Rugerio-Vargas, C*. Rodríguez-Mata, V.* Rodríguez-Martínez, E.* Borgonio-Pérez, G.* y Rivas-Arancibia S. Departamento de Fisiología, Laboratorio de Biología Celular y Tisular. Facultad de Medicina, UNAM. México. EFECTO DE VANADIO SOBRE LA CITOLOGÍA DEL BULBO OLFATORIO DE RATON. Aguirre C.*,. (avalado por Selva Rivas Arancibia), Mondragón A.*, Meza P.*, Fortoul T.*, Ávila-Costa M. R.*, Sánchez I.*, López I.*, Niño-Cabrera G.*, Pasos F., Acevedo S.,Espinosa J.,* Aley P. y Colín-Barenque L.*. Depto. de Neurociencias de FES Iztacala. Depto. de Biología Celular y Tisular. UNAM. México. El ozono (O3) es un contaminante ambiental, que al ser inhalado, causa la producción de radicales libres. Cuando las defensas antioxidantes no son capaces de compensar el aumento de radicales libres, se forman especies reactivas de oxigeno (ROS) secundarias a la exposición a ozono, las cuales llegan al timo a través del torrente sanguíneo produciendo estrés oxidativo. Bajo condiciones normales, las células T inmunoincompetentes dejan la médula ósea y se dirigen a la periferia de la corteza timica para convertirse en células T inmunocompetentes. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la exposición repetida a bajas dosis de O3 sobre la organización de la corteza y la médula del timo dependiendo del tiempo de exposición. Para este fin se utilizaron 12 ratas macho de la cepa Wistar (300-350gr) alojadas en cajas de acrílico individuales con libre acceso a agua y comida, fueron divididas al azar en tres grupos (n=4) que recibieron uno de los siguientes tratamientos: 1) control (expuesto a aire), 2) expuesto a O3 15 días, y 3) expuesto a O3 30 días. Los animales estuvieron expuestos a 0.25 ppm de O3 durante 4 hrs. diarias, 2 hrs. después de la ultima exposición las ratas fueron anestesiadas y perfundidas y se extrajeron los timos y fueron procesados para técnicas histológicas (H-E y Masson) e inmunohistoquimicas contra la proteína S-100. Los resultados indicaron que los animales expuestos a O3 presentaron alteraciones en la organización tanto de la corteza como de la médula dependiendo del tiempo de exposición a este gas . A los 15 días se observó un aumento en los corpúsculos de Hassall y el tejido se torna mas lábil. A los 30 días aumentó el grosor de la corteza y se perdió la relación entre ambas capas, por lo que concluimos que el ozono altera de manera importante la organización del timo lo cual podría tener repercusiones en la función inmune del organismo. El vanadio es un elemento cuya presencia en la atmósfera se ha incrementado1, su vía de entrada es el sistema respiratorio por lo que el objetivo del presente trabajo fue estudiar los efectos de la inhalación de este metal en la capa granulosa del bulbo olfatorio. Se utilizaron ratones macho CD-1 de 35g., se expusieron a 0.02M de pentóxido de vanadio (V2O5), 2 veces por semana durante una hora cada exposición, por medio de un ultranebulizador sacrificándose después de 2, 4, 6 y 8 inhalaciones. El grupo control se expuso en las mismas condiciones con agua destilada. Los animales se perfundieron por vía intracardíaca con (glutaraldehído y paraformaldehído al 2% en amortiguador de fosfatos 0.1M); se extrajeron los bulbos y se mantuvieron durante 2 horas en fijador. Posteriormente fueron procesados con la técnica de Golgi rápido. El análisis citológico consistió en determinar las dimensiones de células granulosas y cuantificar el número de las espinas dendríticas en 20 µM de longitud a partir de la primera bifurcación de las dendritas secundarias. Se observó en todos animales expuestos durante 2, 4, 6 , y 8 inhalaciones de vanadio, mostraron un decremento significativo en el número de espinas dendríticas así como en las dimensiones del soma de las células en comparación con el grupo control. Los resultados sugieren que el bulbo olfatorio, como primer vía de entrada, es un órgano blanco de vanadio, debido a que la continua inhalación de este metal tóxico indujo alteraciones citológicas. 1 Fortoul et.al. Arch. Env. Health 2002 (en prensa) C-246 VARIACION EN LA CONCENTRACION DE VANADIO EN PULMON. RELACION CON DOSIS Y TIEMPO DE EXPOSICION. Sánchez- Cervantes I*. (Avalado por Selva Rivas Arancibia), Espejel Maya G*., Saldivar Osorio L.*, López Martínez I*, Colín-Barenque L.*, Acevedo Nava S*, Delgado V*., AvilaCasado MC, Gonzalez V.A.*, Avila-Costa MR* Fortoul T.I*.,. Fac. Medicina, Fac. Química, F.E.S. Iztacala, UNAM. EFECTO DE LA INGESTA PRE- Y POSTNATAL DE ETANOL SOBRE EL NUMERO DE NEURONAS DEL CIRCUITO TRISINAPTICO DEL HIPOCAMPO DE LA PROGENIE DE RATAS. González-Burgos, I. y VelázquezBecerra, C.* Laboratorio de Psicobiología, Centro de Investigación Biomédica de Michoacán, IMSS. / Div. de Est. de Postgrado, Fac. de Med., UMSNH. Morelia, Mich. El vanadio (V) se ha incrementado en la atmósfera de la Cd. de México y es de importancia DETERMINACION DE VANADIO EN PULMON estudiar cómo se modifica la concentración del metal en el pulmón, que es su sitio * * de ingreso, en diferentes * tiempos de inhalación. Se * utilizó un modelo en ratón * * % CD-1 que inhalaron durante 4 semanas una hora diaria con 2 diferentes 0.01 0.02 concentraciones (0.01M y 0.02M). El V se determinó por Espectrofotometría de Absorción Atómica con horno de grafito. Las concentraciones de V aumentaron a mayor número de inhalaciones (ver gráfica). Nuestros resultados muestran que con mayor tiempo de exposición las concentraciones de V aumentan, lo que implicaría que, de mantenerse las tendencias actuales de contaminantes en el ambiente, el V será un problema de salud en el futuro, por sus efectos tanto pulmonares, como probablemente en otros órganos. DGAPA 210301 y P.O.S. Institute. La exposición prenatal a etanol produce alteraciones neuropsicológicas diversas. Se han descrito efectos sobre estirpes neuronales hipocampales específicas en etapas circunscritas del desarrollo cerebral. En el presente estudio se cuantificó la proporción de células del circuito trisináptico del hipocampo de la progenie de ratas sometidas a ingesta pre- y postnatal de etanol. Se utilizaron ratas hembra Sprague–Dawley adultas, a las que se les proporcionó: a) etanol al 20% (v/v) en el agua de beber (grupo E); b) sacarosa al 15% (p/v) en el agua de beber (grupo C), o; c) agua y alimento a libre acceso (grupo T). El líquido y el alimento proporcionados al grupo C lo fueron en forma pareada respecto al grupo E. Los tratamientos abarcaron desde 20 días antes de la gestación hasta el destete de las crías. Se cuantificó el número de neuronas granulares del giro dentado y de los campos CA3 y CA1 del hipocampo, a los 21, 40 y 90 días de edad postnatal; en seis ratas macho por edad por grupo. Hubo menos neuronas granulares en el giro dentado a los 21 y 40 días, en tanto que en el campo CA3 ocurrió lo mismo a los 90 días. Por su parte, en el campo CA1 se observaron menos neuronas en todas las edades estudiadas. Dado el flujo unidireccional de información a través del circuito trisináptico, la diferente proporción de muerte neuronal observada podría estar relacionada con la desorganización y el deterioro de los procesos neuropsicológicos asociados a la actividad hipocampal. [V2O5] en µg/g de Tejido Pulmón + ERST C-245 2 CONTROL 4 INHALACIONES # 6 INHALACIONES 8 INHALACIONES #@ #? 1 0 * CONTROL CONTRA 4,6 Y 8 INHALACIONES p< 0.001 # 4 INH CONTRA 6 Y 8 INH. p< 0.05 @ 6 CONTRA 8 INH. p< 0.05 C-247 C-248 Thevetia peruviana DE EN TOXICIDAD AGUDA Martínez-Enríquez, M.E.∗, Moreno, L.A.∗, ROEDORES. Luna, M.∗, Magos, G.A.∗, 1Aguilar, A.∗ y Campos-Sepúlveda, A.E. Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina, UNAM. 1 Herbario IMSSM. CUANTIFICACIÓN DE LOS CAMBIOS DEL POTENCIAL EN MEMBRANAS DE Manduca sexta INDUCIDOS POR LA TOXINA BACTERIANA Cry1Ab MEDIANTE ENSAYOS DE FLUORESCENCIA. Muñoz-Garay, C* (avalado por Félix Ricardo). Gomez, I.* Sánchez, J.* Darszon, A* y Bravo A*. Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México. Cuernavaca Morelos México. La semilla de Thevetia peruviana (Apocinaceae), conocida como codo de fraile, se ha utilizado para reducir el peso corporal, el uso empírico e indiscriminado ha sido causa de numerosas intoxicaciones con consecuencias fatales, por lo que, el objetivo del presente estudio es identificar los efectos tóxicos de la administración aguda de la semilla de Thevetia en roedores. Se utilizaron ratones macho de 25 a 30 g de peso corporal, a los cuales, se les administró la semilla a varios niveles de dosis (156.25, 312.5, 625 y 935 mg/kg,) po. El grupo control únicamente recibió el vehículo (solución salina). Se midió la temperatura rectal, antes y a los 30, 60 y 120 min. después de la administración de la semilla. Los animales se observaron continuamente durante las primeras cuatro horas y se registro las manifestaciones de toxicidad. Se realizo un electrocardiograma (ECG) en ratas macho de 250 a 300 g de peso corporal. Los roedores mostraron temblor, aumento de la base de sustentación, relajación muscular, taquipnea, hipotermia marcada, retención urinaria, disnea, convulsiones generalizadas y muerte. El ECG que se practico a las ratas mostró severas alteraciones con las características de la intoxicación digitalica. La necropsia realizada mostró acentuada dilatación de la vejiga. Los hallazgos del estudio señalan que el hueso de fraile es un producto muy tóxico (categoría toxicológica 4) . Las toxinas (Txs) Cry de Bacillus thuringiensis son proteínas que se almacenan como cristales en la bacteria en su fase de espora. Las Txs Cry tienen como blanco diferentes especies de insectos principalmente, muchos de los cuales son plaga en cultivos o vectores de organismos que afectan la salud pública. Estas Txs son potenciales bioinsecticidas. El blanco molecular de las Cry es una clase de amino peptidasa y una proteína tipo caderina presentes en la microvellosidad apical (MV) de las células epiteliales del intestino de las larvas, estos receptores ayudan en la formación de poros en la membrana que permiten el flujo de iones y un desbalance osmótico que provoca lisis celular y muerte del individuo. La complicada morfología de las células ha impedido al momento realizar registros electrofisiológicos directamente en la célula blanco, sin embargo, vesículas de este epitelio, han ayudado a realizar ciertas interpretaciones de la selectividad iónica de la Tx. En el presente trabajo se estudiaron los cambios del potencial de membrana (Em) inducidos por las Txs Cry en vesículas de membranas del epitelio de intestino medio de M. sexta (Plaga de la planta del tabaco), mediante un colorante positivo fluorescente sensible al Em, la cianina diS-C3(5). Dado que el Em está determinado por la distribución de los iones y que la Tx altera tal distribución, este sistema resulta una buena herramienta para valorar la eficiencia de formación de poro de las Cry y también una forma de valorar las permeabilidades intrínsecas a K+ de estas células. Considerando que el receptor es el “ancla” de la Tx y éste se encuentra en la MV apical del intestino, en el presente trabajo se desarrolló un nuevo protocolo de purificación de membranas qué permite el enriquecimiento de la MV y la eliminación de los canales de las membranas basolaterales, lo cual incrementa la eficiencia formadora de poro de la Tx y disminuye la permeabilidad endógena a K+, sensible a Ba2+ y TEA+. C-249 C-250 ORGANIZACIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS EN CÉLULAS DE LA CORTEZA CEREBELOSA DEL RATÓN ADULTO. Rivera-Hernández, R.* (avalado por Morán Perales Jose Luis), Handal-Silva, A.*, Muñoz-Ortiz, J.F.*, HernándezMatlalcoatl, O.*, Enríquez-Silverio, A*, Hernández-Jáuregui, P* y Gómez-Conde, E.*. Centro de Investigación Biomédica de Oriente IMSS, Puebla, México. DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES DE CITOCINAS Y FACTORES TRÓFICOS EN EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO DE PACIENTES CON GLIOBLASTOMA MULTIFORME. Dueñas-Jiménez J.M., Meza-Bautista M.A.*, Mendoza-Magaña M.L., Ramírez-Herrera M.A., Nuño López C.*, Dueñas-Jiménez S.H. Laboratorio de Neurofisiología, Departamento de Fisiología y Departamento de Neurociencias, Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara y Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, Guadalajara Jalisco México. INTRODUCCIÓN: En las células del Sistema Nervioso Central como en el resto del organismo, el ADN asociado a proteínas constituye un complejo macromolecular denominado cromatina. Este material experimenta cambios cíclicos en su compactación en relación directa con la etapa del ciclo celular en que se encuentra la célula. OBJETIVO: El propósito de este estudio fue describir la organización estructural del ADN y del ARN en las células de la corteza cerebelosa del ratón adulto. MATERIAL Y MÉTODOS: Se realizaron cortes de tejido de corteza cerebelosa del ratón adulto incluidos en parafina, los cuales se tiñeron con Naranja de Acridina al 0.01% y se observaron por microscopía de fluorescencia. RESULTADOS: Las células de la piamadre mostraron núcleos ovoideos con abundantes condensaciones pequeñas de ADN distribuidas en toda la superficie del núcleo. En el estrato molecular se observaron células con núcleos redondos de tamaño variable. La eucromatina se observó difusa y la heterocromatina formó de una a dos condensaciones. El ARN se observó como un cuerpo redondo central de color anaranjado. Las células de Purkinje mostraron un núcleo ovoideo y grande con el ARN organizado en dos formas: una difusa y otra condensada. Esta última dispuesta alrededor del nucléolo y en ocasiones lejos de este. Las células de la capa granulosa mostraron núcleos ovoideos y redondos con grandes acúmulos de ADN distribuidos en toda la superficie del núcleo. CONCLUSIÓN: Se observó ADN y ARN en las células de Purkinje y en las del estrato molecular, no así en las del estrato granuloso, en el que predomina la abundante heterocromatina, la cuál se muestra en menor cantidad en las células de Purkinje y del estrato molecular. El glioblastoma multiforme (GM) representa el 80% de los tumores cerebrales primarios en el adulto. Distintas citocinas y factores tróficos participan en el desarrollo, transformación, progresión y metástasis del glioblastoma multiforme entre estos están: el Factor de crecimiento epidérmico (EGF), el Factor de crecimiento vasoendotelial (VEGF), Factor de necrosis tumoral alfa (TNFalfa), Interleucina 10 (IL-10), Fas ligando y su receptor Fas-APO-1 entre otros. El objetivo del presente estudio fue evaluar la concentración de: VEGF, EGF, TNF alfa, IL-10, Fas-Apo-1 en el líquido cefalorraquídeo (LCR) de pacientes con GM y en el LCR de pacientes sanos (a través de mielografías ). Los pacientes con GM exhibieron niveles elevados y estadísticamente significativos de EGF con respecto a los controles, con un promedio en ng/ml de 7.86 + 8.7 en el grupo de pacientes con GM contra 0.520 + 0.43 en los controles (p<0.01). La concentración de TNFalfa fue de 0.568 + 0.46 para el grupo de pacientes con GM y 0.1330 + 0.080 ng/ml para el grupo control con una p<0.01. La concentración de VEGF se elevo extraordinariamente solo en dos pacientes del grupo con GM . El promedio de la concentración de IL-10 y Fas (CD95) entre los grupos de estudio fue similar. La concentración de EGF y TNFalfa obtenida del LCR de los pacientes con GM pudiera ser utilizada como valor pronóstico al incluirse a los estudios clínicos del paciente como edema cerebral y crecimiento ventricular. Índice de autores C = Carteles y O = Orales A Acevedo Nava. S. Acevedo S. Aceves J. Aceves, M.A. Aguayo C. Aguilar Roblero R. Aguilar, A. Aguillón Pantaleón, M.A. Aguirre C. Alagón, A. Aley Medina P. Alfaro-Rodríguez A. Almazán Alvarado, S. Alonso V.M. Alquicer, G. P. Alquicer-Barrera, P. G. Altamirano L.M. Alvarado M. Alvarado R. Alvarado, S. Alvarado-Alvarez, R. Alvarez-Buylla, R. Alva-Sánchez C. Anaya Martínez. V. Anaya, V. Andre, J. Anell M.C. Angeles M. Anglés-Cano E. Anguiano-Rodríguez, P. Antón B. Antón-Tay, F. Anzaldúa, A.S. Apiquián, R. Apolonio, J. Aragón M.A. Aragón, A. Araiza, I. Aranda-Batalla, C. Arce, C. Aréchiga, H. Arellanes-Licea E, Arellano, M.G. Arenas, M.I Arias C. Arias Caballero A. Arias-Montaño, J.A. Arni, S. Arregui-Mena L. Arteaga, M. Arteaga-López P.R. Arzuffi-Barrera, R. Atonal F.F. Avecilla G. Avelino-Cruz, E. Ávila R.T. C-245 C-244 O-84, O-90, O-91, O-92, C101, C-103, C-104, C-105, C-116, C-117, C-118, C-119, C-207 C-171 O-46, O-60, O-61, O-62, O-63 C-247 C-132, C-135 C-244 O-76 O-38, O-39, C-244 C-166 C-131, C-132, C-135, C-162 C-181 O-47 O-41, O-78 O-35 C-25 O-65 C-217 O-67 C-73 C-146 C-116, O-84 O-66, C-175 O-18 C-19 O-50, O-62, O-63 C-32 C-203 C-114 C-106, C-107 C-231 C-50 C-77 O-35 C-226, C-228 C-153 C-44 C-51 O-40, O-66, O-67, C-175, C-178 C-171 O-87 C-15, C-16 C-75 O-05, C-156 O-21, O-89, O-91, O-92 O-75 C-126 O-14 C-84 C-67 C-19 O-02 C-74 C-181 Avila-Casado MC. Avila-Costa. M.R. Avila-Luna A. Avila-Ruíz Tania. Avilés K. Avilés, A. Ayala ME. Ayala-Guerrero F. Ayala-Moreno, R. C-245 O-38, O-39, C-244, C-245 C-66, C-68 C-186 O-12 C-226 C-78, C-226, C-227, C-228, C-229 C-66, C-68, C-166, O-59 C-43 B Backus KH. Báez, V.E. Baeza A. Báez-Saldaña A. Baños G. Bañuelos-Pineda J. Barajas-Martínez H. Bárbara, A. Bargas, J. Barinagarrementeria F. Barra, E. F. Barrera D. Barrios De Tomasi E. Barrón-Moreno F. Bastida J.C. Bautista, Amando Bazán, O. Beas-Zárate C. Becerril-Montes, A. Bellon-Velasco A. Benitez R. S.R. Benítez-Hernández JA. Benítez-King, G. Benítez-Sánchez, A.M. Bermúdez M. Bernal J. Bernal-Díaz A. Betanzos, A. Beyer C. Bitzer-Quintero O. Bolivar, J. Bonansco C. Bonilla Jaime, H. Bonilla, M.A. Borgonio-Perez G. Boyzo, M. A. Bravo A. Briones M. Bueno-Nava A. Bustos H. C-96 C-111 C-31 C-221 C-37 C-113 C-08 O-91 O-68, O-69, O-70, O-71, O-88, O-90 C-32 C-208 C-23 C-192, C-193, C-195 O-83 C-63, C-183 C-62 O-01 C-113, C-115, C-123, C-151, O-94 C-173 C-106 C-88 O-82 O-27, C-106, C-107 C-74 O-43 C-53, C-54, C-55, C-56, O-01 C-131 O-26, C-170 C-61, C-145, C-58, C-59, C-178, C-213 C-87 C-42 C-90 C-179 C-48 C-242, C-243, O-34 C-109, C-111 C-248 C-108, C-157, C-155, C-158 C-66, C-68 C-23 C Caba M. Camacho F.J. Camacho, M.A. Camacho-Arroyo I. Campos R. Campos-Sepúlveda, A.E. Canales-Medina M. Canchola, E. Cano A. Cano-Europa E. Cansino, S. Capin Ruth. Caram Salas N. L. Carbó R. Cárdenas, M. Cárdenas-Vázquez R. Cardoso Saldaña G. Carmona, C. Carmona-Castro A. Carrillo J.D. Carrillo P. Carrillo, E. Carrillo-Ruiz J.D. Carrisoza-Gaytán, R. Casas-García, G. Cassis O. Castañeda Flores, J.L. Castañeda-Hernández, G. Castelán, F. Castilla, S.A. Castillo C.G. Castillo Sebastián. Castillo, C. Castillo, G. Castillo, H.L Castillo, J. Castro García M. Castro-Valdez, I. Caudillo, C. Cebada J. Cedillo-Ildefonso B. Cepeda Carlos, Cerbón M. Cervantes M. Cifuentes, F. Clapp, C. Cogolludo A.L. Colín Barenque L. Contreras K. Contreras-Barrios M.A. Corbacho A.M. Coria GA. Corona Lagunas JJ Corsi-Cabrera, M. Cortés B.E. Cortés M.C. Cortés,E. Cortés-Julián, G. Covarrubias Castillo YL. Cruz M.E. Cruz, C. O-12, O-60 O-45, C-59, C-202 C-86 C-75, C-76 C-174 C-247 C-242 O-60 O-86 C-147 O-49, C-208, C-209 O-85 C-138 C-45 C-230 C-216 C-32 C-178, C-213 C-216 O-09 C-141 O-15 O-06, O-08 C-42 C-142 C-35 C-135 C-140 C-72 C-42 C-152 O-80 O-87 C-200 C-92 C-210 C-132, C-135 C-74 C-93, C-222 O-65, C-98 C-216 C-120 C-84 C-121 O-76 O-30, O-58 O-37 O-39, O-38, C-244, C-245 C-45 C-34, C-88 O-30 C-223 C-177 O-04, C-51, C-161, C-163 O-35 C-91, C-160, C-196 C-97 C-36 C-82 C-78, C-84 C-50 Cruz, E. Cruzblanca H. Cruz-Cruz, R. Cruz-Morales, S.E. Cuéllar, M. Cuevas M.E. Chaidez-Ramírez. Chamorro-Cevallos G. Chaparro-Huerta V. Chávez, H. Chavira R. Chen N. C-93, C-222 C-07 C-21 C-199, C-200 C-158 C-64 C-136 C-154 C-123 C-99, O-56, O-57, C-227, C-228, C-229, C-230, O-16 O-24 D Darszon, A. de La Cruz F. de la Fuente-Juárez, G. de la Peña Díaz A. de la Rosa Oropeza, P. de la Vega, M.T. Déciga-Campos, M. del Prado-Manríquez M.E. del Río P. del Río-Portilla Y. Delgadillo, J. A. Delgado V. Delgado-Solís J. Delint, I. Díaz M. Díaz, A.F. Díaz, G. Díaz, R. Diaz-Arista P. Díaz-de-León A.E. Díaz-Trujillo Arnulfo Diez-Martínez, O. Dobrovinskaya, O.R. Doland, R.J. Domínguez E. Domínguez R. Domínguez-González, A. Donatti-Albarrán, O. Duarte, G. Dueñas Z. Dueñas-Jiménez J.M. Dueñas-Jiménez S.H. C-11, C-248 C-69 C-39, G. C-240, C-241 C-32 C-79 O-89 C-143 C-44 C-125 C-51, C-161, C-163 O-11, O-15, C-57 C-245 C-216 C-221 C-196 C-15 C-221 C-210 C-31 O-06, O-08 C-194 C-52, O-54 C-10 O-49 C-59 C-77, C-78, C-84, C-226, C-227, C-228, C-229, C-230, O-16 C-197 C-197 O-15 O-58 C-130, C-250 C-92,C-130, C-250 E Eguibar J.R Elías Viñas Elías, D. Elizalde A. Elizalde-Lozano A. Elsner R. Enriquez-Nájera M. Enríquez-Silverio, A. O-43,C-60, C-90, C-91, C-196 C-133, C-134 C-197 C-19 C-08 O-36 C-240 C-249 Erlij, D. C-101, C-105, C-117, C-118, C-119, O-90 Escamilla-Chimal, E.G. C-176 Escartín-Pérez, R.E. C-188 Escobar Briones C.O-13, C-47 Escobar C. O-50, O-63, O-62 Escobar Carolina. O-64 Escobar-Pérez, Laura. C-42 Escobedo, Y. O-76 Espejel Maya G. C-245 Esperanza García, O-72 Espericueta Monsivais V.M. C-29 Espinosa J. C-244 Espinosa Tanguma R. C-29, C-30 Espinosa Villanueva J. O-38, O-39 Espinosa-Villanueva G. C-216 Espinoza-Villanueva J. C-66, C-68 Estudillo Flores, H. O-42 F Fajardo V. Fanjul-Moles M.L. Farías, J.M. Félix Luna Morales. Félix Morales Luna, Félix, R. Feria-Velasco Alfredo. Feria-Velasco, A. Fernández de Miguel F. Fernández JL. Fernández-Garza, N.E. Fernández-Guardiola A. Fernández-Mas R. Fernández-Ruiz, J. Ferreira-Nuño A. Ferrera P. Ferrer-Villada T. Figueroa, A. Fiordelisio T. Fleming, A.S. Florán B. Floran, L. Flores A. Flores G. Flores Gonzalo. Flores T.J. Flores, A. Flores, AIsasmendi, G.S. Flores, J.A. Flores-Abreu N. Flores-Álvarez, G. Flores-Hernández Flores-Soto M. E. Flores-Tochihuitl J. Fortoul T.I. Fregoso T. Fresán, A. C-141 C-94, C-176 C-17 C-239 C-63 C-11, C-12 O-80, O-85 C-102, C-115 O-28, O-32, O-33 C-83 C-211 O-05, C-156, C-162 C-131, C-162 C-210 C-220 C-75 C-33, C-35, O-74 O-88 O-22, C-71, C-09 O-10 C-103, C-104, C-105, C-117, C-118, C-119, C-181, C-103, C-104, C-105, C-78 O-41, O-43, O-78, O-79, O-93 C-186 C-64 O-52, O-53, O-54, O-55, C-167, C-168 C-97 O-15, C-57 O-28 O-47 C-120 C-113 O-43, O-93 O-38, O-39, C-244, C-245 C-69 C-50 Frías, C. Fuentes, D. Fuenzalida, M. C-217 O-76 C-90 G Gadea-Lacasa N. Gainer, H. Galarraga, E. Galindo Luisa E. Galindo, C.A. Galindo, L. Galindo,F. Galindo-Vilchis, L. Galván, E. Gallegos, E. Gallo B. Gamboa, E.C. Gamiño, S.M. Garateix, A. Garay, C. García E. García Garza, M.S.A. García Sierra, A. García U. García Villeda, I. García X. García, A. García, D.E. García, L. García, L.I. García, M. García, O. García-González A. García-Horsman P. García-Pérez E. García-Ramírez, M. García-Rivera, L. García-Saldívar, N.L. García-Villegas, M.R. Garín, M.E. Gavito, M.B. Gaytán-Tocavén, L. Gazca-Ramírez, M.V. Geovannini-Acuña, H. Gijón, E. Giordano M. Girón I. Gloria-Soria A. Gómez Díaz A. Gómez, E. Gomez, I. Gomez,G. Gómez-Conde, E. Gómez-Romero J.G. Gómez-Viquez, L. Gómora, P. Góngora–Alfaro, J.L. Gonzáles-Arenas A. González C. Gonzalez J. González L. C-159 O-29 O-68, O-69, O-70, O-71, O-88, O-90 C-206 C-04 C-205 C-97 C-51 C-17, O-73 C-228 C-80 C-110 C-93, C-222 C-03 C-221 O-33 C-211 C-95 O-20, O-65, C-98, C-79 C-34 C-89 C-14, C-15, C-16, C-17 O-16, C-230 C-86 C-50 O-77 C-154 C-189 O-32 O-92 O-51 C-199 O-75 C-204 C-91 C-201, C-203 C-39, C-240, C-241 C-165 C-34, C-88 C-152, C-182 C-80 C-176 C-129 C-232 C-248 O-52, C-97 C-249 C-199, C-200 O-20 C-145, C-178, C-213 C-184, C-185 C-76 C-219 O-19 C-23 González O. González R. González RM. Gonzalez V.A. Gonzalez, A. González, B. Gonzalez, C. González-Barrios J.A. González-Burgos, I. González-Frankenberger B. González-Hernández, B. González-López, M.R. González-Maciel A. González-Mariscal, G. Gonzalez-Mariscal, L. González-Martínez, T. González-Piña R. González-Ramírez Misael. González-Trujano, ME. G-Quiroga E. Gracia, M.E. Granados D. Granados-Soto V. Gronenberg, W. Guadalupe Domínguez. Guadarrama-Ortiz, P. Guarner V. Guarneros-Bañuelos,E. Gudiño-Cabrera,G. Guerra-Araiza C. Guerrero J.L. Guerrero, C.H. Guerrero, V. Guerrero-Cruz, F. Guerrero-Hernández, A. Guevara F.J. Guevara, M.A. Guevara-Guzmán, R. Gutiérrez N. Gutiérrez OG. Gutiérrez Valdez A.L. Gutiérrez, M. Gutiérrez-Moreno I. Gutiérrez-Ospina G. Guzmán J.N. Guzmán, C.B. Guzmán-López, J.A. C-59 C-191 C-218 C-245 O-10, O-20 C-118, C-119 O-30 O-83, O-84 C-102, C-201, C-115, C-246 O-03 C-188 C-199, C-200 O-31 C-61 C-41, C-169, C-170, O-26 C-22 C-66, C-68, C-166 O-80 C-155 C-183 C-213 O-06 C-136, C-138, C-139, C-137, C-140 C-94 C-212 O-61 C-45, O-86 C-67 O-81 C-76 O-58 C-92 C-53, C-54, C-55 C-44 O-20 C-64, C-239 O-04, C-161, C-224 O-18, C-197 C-38 C-219 O-38, O-39 C-52 O-34 O-51, C-165, C-237 O-68, O-69, O-70, O-90 C-110 C-165 H Haces M.L. Handal, A. Handal-Silva, A. Harmony T. Hernández. Pérez A. Hernández Gómez A. M. Hernández Hernández, H. Hernández J.A. Hernandez Ma. I. Hernández ME. Hernández RJ. C-124, C-232, C-234 C-249 O-02 O-03 C-133 O-48 C-134 O-07 C-80 C-25, C-128 C-218, C-109, C-219, C-100, C-111 Hernández ZE. Hernández, A. Hernández, H. Hernández, H.C. Hernández, J.M. Hernández, L. Hernández, M.E. Hernández, M. Hernández-Cano, T. Hernández-Cruz A. C-100 O-90, C-101 C-57 C-92 C-14, C-16 C-28 C-72, C-86 O-91 C-238 C-09, O-22, O-23, C-71, O-76 Hernández-Fonseca, K. C-127 Hernández-García A. C-108, C-149, C-150, C154, Hernández-González, M. C-224, Hernández-Gutiérrez, M.E. C-107, C-106, O-27 Hernández-Herrera G. C-176 Hernández-Jáuregui, P. C-249 Hernández-Kelly, L.C.R. C-72 Hernández-Matlalcoatl, O. C-249 Hernández-Montes, H. C-43 Hernández-Morales L. C-121 Hernández-Ochoa, E.O. C-14 Hernández-Valdivia C. O-72 Herrera Mendoza P. C-29 Herrera MR. C-100, C-219, C-220 Herrera, W. C-210 Hinojosa L. O-16, C-230 Hiriart M. C-21, C-22, C-171, C-172 House, S. O-29 Hudson Jennifer E. O-24 Hudson, Robyn C-62 Huerta, G.M. O-26 Huerta, M. C-28 Hurtazo H.A. O-45 I Ibáñez, O. Ibarra M Inozemtseva, O. Isasmendi, S.G Islam Amaal, Islas, S. Ita M.L. Izaguirre Avila R. C-101 O-37 C-207 O-52 C-120 C-41 C-160, C-91 C-32 J Jackson-Maldonado, D. Jaramillo Juárez F. Jaramillo, B. Jasso J. Jiménez Anguiano, A. Jiménez F. Jiménez N. Jiménez, A. Jiménez-Barrón, E. Jiménez-Trejo, F.J. Jorge, E. Juárez J. Juárez Oropeza M.A. Juárez-Díaz, I. C-95 C-40 C-169, C-170 C-23 C-164 O-06, O-07, O-08 O-23 C-61 C-27 C-237 C-221 C-192, C-193, C-195 C-36, C-38 O-41, O-78 K Kuri I. Kusano, K. C-71 O-29 L Labarrios F. Lamas, M. Lara Ayala, L. Lara, J. Laville A. Ledesma de la Teja Lemus, M. León-Olea M. Letechipía-Vallejo G. Levine Michael S. Lévy, F. Lewis, D. Lima-Hernández, F.J. Limón I.D. Limón Pérez I.D. Limón, A. Limón-Pérez de León, D. Liy S. G. Loof, A. D. López I. López L.M. López Martínez I. López- Pérez, S.J. López S. López, C. López-Bayghen, E. López-Hidalgo M.A. López-Juárez, A. López-Loaeza E. López-López, J.G. López-Méndez, M.A. López-Meraz M.L. López-Muñoz Francisco J. López-Muñoz, F.J. López-Pérez S.J. López-Riquelme, G.O. López-Robles E.E. López-Ruiz E. Lorenzana-Jiménez M. Lovic, V. Lozano-Cuenca, J. Luis-Díaz, J.A. Luján Estrada, M. Luna M.F. Luna Morales F. Luna, J. Luna, M. Luviano, L. Llamas Viramontes J. C-154 C-41 C-95 O-29 O-68, O-69, O-70, O-90 C-194 C-73 C-114 C-121 C-120 O-18 C-112 C-58 C-64, C-181, C-183, C-239, C-63 C-186 C-06 C-185 C-116 C-175 C-244 C-202 C-245 C-151 C-219 C-99 O-26 C-74 O-75 C-121 O-37 C-211 C-157 C-144 C-143 O-94 C-94 C-87 O-05, C-156 C-31 O-10 C-137 C-216 C-135 C-64, C-186 C-41 C-247 C-53, C-54, C-55, C-56 C-40 M Mackie, K. Macotela Y. Machado-Salas J. C-14, C-15, C-16 O-58 O-38, O-39 Madrigal-Quiñonez R. Magdaleno-Madrigal VM. Magos, G.A. Maldonado P. Mancilla-Díaz, J.M. Mancilla-Simbro, C. Manjarrez GG. Manjarrez, E. C-35 C-162 C-247 C-37 C-188 C-20 C-100, C-218, C-219, C-220 C-52, C-97, C-167, C-168, O-52, O-53, O-54, O-55 Manjarrez-Gutiérrez G. C-237 Manríque Arias, J.C. C-164 Manzo J. C-25, C-72, C-86, C-128, C-223, C-233 Maquet, P. O-49 Marcos-Ortega, J. C-159 Marín, M. C-226 Marosi Erzsébet., O-01 Marosi, E. C-53, C-54, C-55, C-56 Marquez I. O-09 Márquez-Orozco, A. C-39, C-240, C-241 Márquez-Orozco, M.C. C-39, C-240, C-241 Márquez-Villanueva Y. O-14 Martín, D. C-41 Martínez A. C-131, C-156 Martínez Contreras R.D. O-25 Martínez de la Escalera G. C-57, C-225, O-30, O-58 Martínez G.I. C-64 Martínez Martínez, E. O-51 Martínez T. O-50 Martínez, A O-05 Martínez, L. O-53, O-55, C-167, C-168 Martínez-Barboza, S.G. C-122 Martínez-Coria H. C-237 Martínez-Enríquez, M.E. C-247 Martínez-Estévez, M. C-10 Martinez-Fong D. O-84, O-83 Martínez-Gómez Margarita. C-62 Martínez-Gutiérrez, V. O-04 Martínez-Juárez, M.E. C-142 Martínez-Olivares, R. C-46 Martínez-Reyes A. C-233 Martínez-Rosas, A. R. C-159 Martínez-Tenorio A. C-131 Martínez-Vargas D. C-162 Mascher D. C-36, C-38, Massieu L. C-124, C-125, C-127, O-77 Matute, E. C-207 Maxil T.R. C-181, C-183 McRory, J. O-72 Medellín, M.A. C-50 Medina Cristina. C-206 Medina Fernández M. C-82 Medina I. C-219 Medina O. C-37 Medina, C. C-205 Medina, R.J.P. C-109 Medina-Santillan R. C-136, C-138, C-139 Mejía-González N. C-136 Meléndez, E. C-236 Melo, A.I. O-10 Mena-Segovia, J. C-182 Méndez, I. Méndez, L. Méndez, M.C. Mendoza J.Y. Mendoza M.S. Mendoza Ma. Eugenia Mendoza, H. Mendoza-Magaña M.L. Mendoza-Rodríguez C.A. Mendoza-Zamora, E. Mercado, C. R. Mercado-López, C. R. Merchant-Larios, H. Mexicano, G. Meza P. Meza, U. Meza-Bautista M.A. Millán-Aldaco D.A. Miller-Pérez C. Minzoni A. Miñana-Solis, M.C. Miranda A. Miranda Anaya M Miranda F. Mixcoatl-Zecuatl T. M-Mendieta L. Moctezuma-Martiñon, Molina-Hernández, A. Mondragón A. Monjaraz, E. Monroy J. Montellano-Rosales H. Montero, S. Montes-del Carmen P. Montiel Flores E. Montiel T. Montoya R. Moo-Puc, R. E. Morales L. Morales M.A. Morales-Martínez J. Morales-Otal A. Morales-Villagrán, A. Moralí G. U. Morán C. Morán, J. L. Moreno Córdoba EV. Moreno, L.A. Moreno-Mendoza, N. Morfin P. Moyaho, A. Muciño-Carmona E. Mucio-Ramírez S. Muñiz J. Muñoz Z.A. Muñoz-Garay, C. Muñoz-Ortiz, J.F. Muñoz-Torres, Z. Muñoz-Zurita, A. Murray, VC. C-52, O-54, O-55, C-167 C-49 C-93, C-210 O-50, O-63 C-152 C-83 C-73 C-130, C-250 C-84 O-40 C-109, C-110, C-111 O-46 O-17 O-59 C-244 C-13 C-130, C-250 O-23, C-71 C-114 O-32, O-33 C-47 C-69 C-177 C-180 C-139 C-63, C-183 C. O-41, O-78 O-21 C-244 C-74 C-227, C-229 C-238 C-73 C-121 O-38, O-39 C-124, C-125 C-174 C-184, C-185 C-77 O-31, O-75 C-166 C-220 C-102, C-151 C-121 C-232, C-234, C-235, C-236 C-234, C-235, C-236 C-82 C-247 O-17 O-58 C-60 C-141 C-114 C-26, C-10 C-181 C-248 C-249 C-161, C-163 C-185 C-210 N Namorado, M.C. Nava G. Nava, C. Navarrete, A. Navarrete, E. Navarro Huerta M.P. Navarro, V. Navarro-Polanco RA. Navarro-Quiroga I. Nekrassov, V. Neri L. Neri-Bazán L. Nicolás, Leticia Nicolini, H. Nieto-Sampedro, M. Niño-Cabrera G. Nowak, R. Nuñez D.A. Núñez, A. Nuño López C. C-41 C-225 C-118, 119 C-155 C-23, C-24 C-30 C-22 C-33 O-83, O-84 C-148 C-155, C-158,O-65 C-157 C-62 C-50 O-81 C-244 O-18 C-116 C-105 C-130, C-250 O Ochoa A. Olvera, E. Olvera-Cortés, E. Olvera-Cortés, M. E. Ondarza, R. Ondarza-Rovira, Rodolfo. Onetti Carlos. Ordaz S.B. Ordoñez Librado JL. Organista Esparza A. Orozco G. Orozco-Suárez Sandra. Orta-Salazar, G.J. Ortega, A. Ortega, E. Ortega, F. Ortiz Genaro Ortiz M.R. Ortíz, A. R. Ortiz, K. Ortiz, M.I. Ortiz-Butrón R. Ortiz-Cornejo F Ortiz-Hernández, R. Ortiz-Navarrete, V. Ortuño-Sahagún,D. Osorio A. Oviedo Adriana Oviedo Jiménez A. Oviedo, A. C-225 O-16 C-203 C-201 O-04 C-159 C-05 C-01 O-38, O-39 C-82 C-174, C-190 O-80, O-85 C-18 C-72, C-99, C-110 C-221 O-19 C-87 O-35 C-111 C-81 C-140 C-108, C-129, C-146, C-147, C-150 C-225 C-70 C-169 O-81 C-190, C-191 C-194 C-85 C-117 P Pablo Pacheco. Pacheco P. Pacheco, J. C-223, C-233, C-141 C-25, C-72, C-86, C-128 C-11 Pacheco-Rosado J. Palacios Alcocer, A. Palacios E. Paredes Carbajal M.C. Paredes E. A. Paredes Guerrero R. Paredes R.G Parra C.C. Parra Leticia Parra-Gámez L. Pasantes-Morales H. Pasos F. Pastelín, C. Pavón N. Pedraza J. Peraza A. Pérez CA. Pérez de la Mora Miguel. Pérez, H. Pérez, J. Pérez, M.C. Perez-Cruz Y. Pérez-León JA. Pérez-Martínez, M. Pérez-Roselló, T. Pérez-Vega, M.I. Pérez-Vizcaíno F. Perusquía M. Piñón, M. Poindron Pascal. Poindron, P. Ponce, A. Ponce-Pérez, L. Porfirio Gómora Porras, M. G. Posadas del Río F.A. Possani, L. Pottosin, I.I. Prado E. Prado-Alcalá R.A. Prado-Alcalá Roberto A. Prieto, B. Prieto-Beracoechea, C.A. Prieto-Corona, B. C-129, C-146, C-147, C-149, C-154 O-42 C-48, C-49 C-38, C-36 O-11 C-189 C-59, O-45, C-202 C-63, C-181 O-64 C-47,O-13, C-70 C-01 C-244 C-234 C-37 C-37 C-26 C-128 O-48 C-168 C-197 C-06 C-150 C-96 C-231 O-71, O-88 C-102, C-115 O-37 C-23, C-24 C-46, C-173 O-11 O-18, C-57 C-169 C-74 C-212 C-175 C-40 O-76 C-10 O-86 C-204, C-205 C-194, C-206 C-53, C-54, C-56, O-01 C-224 C-55 Q Quevedo, J. N. Quevedo-Corona, L. Quintanar J.L. Quintanar Stephano A. Quirarte Gina L. Quirarte, G. L. Quirarte, G. Quirarte, Gina L. Quiroz H. Quiroz, A. Quiroz, C. Quiroz-Saldívar, A.I. C-89 C-43 C-174 C-82 C-194 C-204 C-205 C-206 O-58 C-196 C-204 C-198 R Racotta, I.S. Racotta, R. Racotta-Poulieff R. Ramírez J.M. Ramírez, O. Ramírez-Alvarado M.T. Ramírez-Flores G. Ramírez-Herrera M.A. Ramírez-Rodríguez, G.B. Ramírez-San Juan, E. Ramos, J.I. Ramos-Guevara, J.P. Ramos-Hernández, J.M. Ramos-Loyo, J. Rangel, C. Regalado, M. Reid Larry D. Retana-Márquez S. Reyes E. Reyes Sánchez J.L. Reyes, A. Reyes, J.L. Reyes,A. Reyes-García G. Reyes-Guerrero, G. Reyna-Neyra, A. Rincón Sánchez A. R. Rivas- Aracibia S. Rivas-Manzano, P. C-70 Rivera J.C. Rivera-Cervantes M.C. Rivera-Gaxiola, M. Rivera-Hernández, R. Robles OA. Roces de Alvarez-Buylla, E. Rocha L. Rocha, B. Rocha-González H.I. Rodríguez M. Rodríguez Vázquez M.L. Rodríguez, J.G. Rodríguez, M. Rodríguez, M.S. Rodríguez-Cruz, M. Rodríguez-Martínez, E. Rodríguez-Martínez, G. Rodríguez-Mata, V. Rodríguez-Sosa, L. Rojas, F. Rojas-Paredes. D. Rojas-Piloni, G. Roldán G. Roldán-Roldán, G. Romano M. C. Romero A.C. Romero-Carbente, J.C. Romero-Santos R. Roncagliolo, M. C-48, C-49 C-46, C-81, C-173 C-43 C-59 C-27 C-74 C-08 C-130, C-250 O-27, C-106, C-107, C-67 O-59 C-224 C-173 O-04, C-51 C-103, C-104 C-214, C-215, C-217 C-194 C-179, O-14, C-180 C-40 O-68, O-69, O-70 C-41 C-56 C-136, C-138, C-139 C-197 C-75 C-40 C-242, C-243, O-34 O-58 C-123 C-95 C-249 C-100 C-73 C-108, C-153, C-155, C-157, C-158, O-65, C-97 C-136 C-53 C-40 O-15 C-54, C-55, C-56, O-01 C-227 C-44 C-243 C-243 C-243 C-178, O-40, O-66 C-72 O-79 O-53, O-55, C-167, C-168 C-196 C-198 C-80, C-230, C-231, O-16 C-29 C-60 C-239 C-90 Rosales-Corral, S.A. Rosas, P. Rosiles, R. Rovirosa M. J. Rugerio-Vargas C. Rugg, M.D. Ruiz, A. Ruiz, M. Ruiz-Rizo L. C-122 C-230, O-16 C-221 O-12 C-242, C-243, O-34, O-49 C-208, C-209 C-232 C-87 S Sabanero M. Salas, M. Salazar Juárez A. Salazar Juárez Salceda, E. Saldivar Osorio L. Salgado, H. Salgado-Ceballos Salinas E. Salinas-Stefanon, E. Sanberg P.R. Sánchez C. Sánchez- Cervantes I. Sánchez D. G. Sánchez Herrera IO. Sánchez I. Sánchez Ramos Sánchez, J. Sánchez, Marco A. Sanchez-Armass S. Sánchez-Castillo H. Sánchez-Chapula J. A. Sánchez-Duran A. Sánchez-Islas E. Sánchez-Lemus, E. Sanchez-Ramos J. Sánchez-Reséndis, O. Sánchez-Soto C. Sánchez-Soto, M. C. Sandoval J. Sandoval-Ramírez, J. Sanguinetti MC. Segovia J. Segura-Cobos, D. Serrano C.J. Sierra, A. Sierra, G. Sierra, J.J. Silva, I. Silva, M. Silva-Gómez, A.B. Silva-Pereyra, J. Sitges, M. Snutch, T.P. Solano-Agama MC. Solis J.L. Solis T. Solís-Avila, C.P. Song Shijie. Soria-Fregoso, C. C-83 C-42, C-214, C-215, C-217 O-13 O-64 C-03 C-245 O-71, O-88 O-85 C-174 C-18, C-20 O-24 O-22 C-245 C-88 C-82 C-244 C-85 C-248 C-194 C-30, O-19 C-180, C-187 C-08, C-33, C-35, O-74 C-172 C-114 O-89 O-24 C-205 C-171, C-172 C-21, C-22 C-181 C-185 C-33 C-126, O-82 C-142 C-11 C-101, C-103, O-91 C-41 O-21 C-103, C-104, O-42 C-24 O-47, O-79 C-95, O-02, C-02, C-04, C-148, O-73 O-72 C-83 C-64 O-50 C-198 O-24 C-115 Soriano, O. Sotelo, F. Soto Peredo, C. Soto, E. Spíndola, E. C-214, C-215, C-217 C-93 C-79 C-03, C-06, C-99, O-56, O-57 C-196 T Tamargo J. Tamariz J. Tapia, D. Tapia-Rodríguez, M. Téllez-Alanís, B. Tera Ponce, S. Terrazas A. Terrés, M.L. Tinajero Ruelas M. C-82 Tirso M.R. Tlachi, J.L. Toledo, R. Toral, C. Toro, S. Toro-Castillo, C. Torrero, C. Torres-Castillo Sergio. Torres-Durán, P.V. Torres-Jácome J. Torres-Vera Jose Luis. Trejo, D, Trejo, F Trejo-Martínez, D. Treviño, C.L. Trujillo, X. Tsusumi, V. O-37 C-154 C-42, O-68, O-69, O-70, O-90 C-237 C-208, C-209 C-135 O-11 C-182 C-63 C-145 O-60 C-83 C-09 C-13 C-214, C-215, C-217 O-85 C-36 C-35, O-74 O-85 O-04 C-02 C-159 C-11 C-28 C-11 U Ureña-Guerrero M.E. Uría Galicia, E. C-151, O-94 C-79 V Vaca L. Valdés J. Valdés-Cruz A. Valdez R. A. Valdiosera, R. Valdivia-Velázquez, M. Valencia Méndez, G. Valencia S.J.A. Valencia, I. Valencia, J. Valle Aguilera J.R. Varela-Mendoza A. Vargas A. Vargas G. Vargas, L. A. Vargas-Caballero M. Vásquez, C. Vázquez EF. Vázquez Palacios, G. Vázquez, D. C-01 O-25 C-162 C-80 C-101, O-90 C-122 C-135 C-88 O-87 C-34 C-30 C-240 O-86 O-93 C-235 O-32 C-28, C-112 C-220 C-179 C-167, O-53 Vázquez, M. Vázquez-Cortés, C. Vázquez-Cruz, B. Vázquez-Zuñiga.Y. Vega R. Vega, R. Vega-Flores G. Vega-Flores O. Vega-García I. Vega-Garcia M.I.. Vega-Hernández, A. Velasco A.L. Velasco F. Velasco M. Velasco, A.L. Velasco, F. Velasco-Torres, M. Velázquez Aragón, J. Velázquez Moctezuma, J. Velázquez-Becerra, C. Velázquez-Martínez DN. Velázquez-Moctezuma J. Vélez, D. Véliz, F.G. Ventura Martínez Rosa. Vera, K. Vera-Castañeda Alba G. Verdugo Díaz L. Verdugo L. Verduzco-Mendoza A. Vergara, R. Vergara-Aragón, P. Vidal-Cantú G. Vidrio H. Vielma, J. C-17, C-197 C-192 C-142 O-33 C-06 O-56, O-57 C-156 O-05 O-34 C-242 C-11, C-12 O-06, O-07, O-08, O-09 O-06, O-07, O-08, O-09 C-158, O-06, O-07 O-08, O-09 C-158 C-158 C-05 C-79 C-164 C-246 C-180, C-187, C-190, C-191 C-179, C-220, O-14 C-168, O-53, O-55 O-15 C-144 C-222 C-120 C-134, C-38, C-197 C-34 C-68 O-68, O-69, O-70, O-90 C-65 C-136, C. C-138, C-139 C-31 O-15 Vilchis, C. Villamar-Cruz O. Villanueva, I. Villanueva-Toledo, J. Villaseñor G.H. Villaseñor-Franco, R.M. Virgen A. Virgen Enciso M. O-71, O-88 C-76 C-46, C-81 C-184, C-185 C-231 C-188 C-26 C-195 W Wässle H. Whishaw, IQ. Willing Alison E. C-96 C-65 O-24 Y Yánez, G. Yarkov, A. C-53, C-54, C-55,C-56, O-01 C-73 Z Zabaleta Diana. Zambrano, Y.G. Zamora González J. Zamora J. Zamora, H.V. Zamudio S. Zaragozá-Arnáez F. Zarco de Coronado Zavala Alejandro. Záyago-Ortiz M. Zenteno-Savín, T. Zepeda, R.C. Zetina M.E. Zigova Tanja. O-85 C-17 C-32 C-37 C-231 C-69 O-37 O-44 O-85 C-149 O-36 C-72 O-31 O-24
