guia de laboratorio practica 4 identificación carbohidratos, lipidos y

GUIA DE LABORATORIO
PRACTICA 4
IDENTIFICACIÓN CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTEINAS
PROGRAMA DE ENFERMERIA
CURSO INTEGRADO DE PROCESOS BIOLOGICOS
Leidy Diana Ardila Leal
Docente.
INTRODUCCIÓN
En la elaboración de la presente práctica se van a realizar reacciones para
entender y conocer más claramente las biomoléculas, sus propiedades y la
presencia o no en algunos alimentos que consumimos en nuestra vida diaria.
OBJETIVO
Determinar de forma cualitativa
MARCO TEORICO
Los Seres vivos están constituidos por:
Bioelementos: son todos los elementos químicos que constituyen a los seres
vivos. Según su abundancia se pueden clasificar en tres grupos:
Bioelementos primarios: son los más abundantes. Representan el 99,3% del total
de átomos del ser vivo. Los principales son el e, H, o, N.
Bioelementos secundarios: constituyen prácticamente el 0,7% del total de átomos
del ser vivo. Los principales son P, K, S, Na, el, Mg, Fe.
Oligoelementos: son elementos que aparecen en cantidades ínfimas o trazas, pero
aun así su presencia es esencial para el correcto funcionamiento del ser vivo. Los
principales son Mn, Zn, F, Mo, Se.
Biomoléculas: son las moléculas que constituyen los seres vivos. Atendiendo a su
naturaleza química se pueden clasificar
Biomoléculas inorgánicas, tales como el agua, los gases (dióxido de carbono),
sales inorgánicas (fosfato y carbonatos),
Biomoléculas orgánicas, tales como los glúcidos (glucosa, glucógeno), lípidos
(triacilglicéridos, colesterol), proteínas (hemoglobina) y los ácidos nucleicos (DNA
y RNA).
Carbohidratos
Dentro de esta categoría se incluyen sustancias que cumplen funciones
importantes como componentes de plantas y animales, proporcionando estructura
en los primeros y constituyéndose en fuente de energía en los segundos. Los
carbohidratos, también conocidos como glúcidos, sacáridos o hidratos de carbono,
están compuestos principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno.
Los carbohidratos son polihidroxialdehídos, polihidroxicetonas o compuestos que,
por hidrólisis, se convierten en aquellos. El criterio seguido a la hora de
clasificarlos está establecido de acuerdo con el comportamiento seguido por el
carbohidrato cuando es sometido a hidrólisis ácida. De esta manera tenemos
básicamente tres grupos: Monosacaridos, Oligosaaridos y Polisacaridos. (Cuero,
et al 2010).
Lípidos
Los lípidos pertenecen a otra clase de biomoléculas, a aquellos que siendo
insolubles en agua pueden ser extraídas a partir de las células con disolventes
orgánicos de polaridad baja como el éter y el cloroformo. Cierta clase de lípidos,
los fosfolípidos, son constituyentes esenciales de las membranas celulares y otros
son importantes moléculas de reserva energética y componentes básicos de
hormonas, vitaminas y prostaglandinas. Los lípidos también pueden clasificarse.
Una primera división los sitúa en tres: lípidos simples, compuestos y derivados.
Proteínas
Las proteínas desempeñan una amplia variedad de funciones en plantas y
animales. Estas funciones se pueden agrupar en dos clases: dinámicas y
estructurales. Entre las funciones dinámicas de las proteínas se encuentran el
transporte de sustancias, el control metabólico, la contracción, la comunicación y
la catálisis de transformaciones químicas. En cuanto a sus funciones estructurales,
las proteínas proporcionan la matriz para los tejidos óseo y conjuntivo que dan
igualmente forma al organismo.
Las proteínas son polímeros de a-aminoácidos. Es interesante anotar que todos
los tipos diferentes de proteínas se sintetizan inicialmente como polímeros de 20
aminoácidos, conocidos como aminoácidos comunes. Además de los aminoácidos
comunes, en las proteínas se encuentran aminoácidos derivados, formados a
partir de los comunes, normalmente mediante una reacción catalizada por una
enzima. Los aminoácidos comunes tienen en común un átomo de carbono central,
denominado carbono-a, al que están unidos covalentemente un grupo ácido
carboxílico (-COOH), un grupo amino (-NH2) y un átomo de hidrógeno (-H).
Además de esto, al átomo de carbono se le une una cadena lateral, designada
como R, la cual es diferente para cada uno de los aminoácidos comunes (Cuero,
et al 2010).
MATERIALES
Materiales entregados en la practica
Por grupo de trabajo
8 tubos de ensayo
Gradilla
Mortero
Materiales traidos por el estudiante
Goteros plasticos
Alimento procesado por grupos
Grupo 1 (Chocolate/Chocolatina)
Grupo 2 (Embutido)
Grupo 3 (Fruta roja)
Montajes y pruebas
Grupo 4 (Mantequilla)
Agua destilada
Grupo 5 (Galleta)
Montaje para calentamiento (Mechero, Grupo 6 (250ml Leche entera)
Trípode, Malla de asbesto)
Solución de Lugol
Reactivo de Biuret
Reactivo de Sudan
HN03 concentrado
H2S04 concentrado
Solución de alfa naftol
Solución de Reactivo de Benedict
Solución de carbohidratos al 1 %
(glucosa, fructosa)
METODOLOGÍA
PROCEDIMIENTO PREVIOS DE LA PRÁCTICA
Preparación de la solución de almidón.
En un Beaker de 250ml, disolver por calentamiento O,5 gr de almidón en 5ml de
agua, Una vez disuelto, agregar 45ml de agua destilada y caliente hasta ebullición.
Se debe obtener una solución casi transparente con el que se va a trabajar.
Preparación de la muestra para proteínas.
Solución de albúmina (Clara de huevo): Al preparar la solución de clara de huevo
hágalo de la siguiente manera: "Se bate la clara de huevo durante unos instantes y
se mezcla después con cinco veces su volumen de agua. La mezcla se filtra a
través de una estopilla y el filtrado se usa para realizar las experiencias de esta
práctica".
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Reacción de Lugol.





Se toman y rotulan tres (4) tubos de ensayo y se rotulan con el nombre de
glucosa, fructosa, almidón y agua destilada.
En cada uno de ellos se depositan 2ml de las distintas soluciones de
carbohidratos al 1 % y agua destilada.
Agregue dos gotas de solución de lugol y mezcle bien.
Sólo coloque el tubo en posición vertical y observe la formación del color.
Tome el tubo que ha trabajado como almidón e introdúzcalo en agua
hirviendo. ¿Qué se observa?
Reacción de Benedict.



Se toman y rotulan tres (4) tubos de ensayo con el nombre de glucosa,
fructosa, almidón y agua destilada
En cada uno de ellos se depositan 2ml de las distintas soluciones de
carbohidratos al 1 % y agua destilada
Agregar 2ml de reactivo de Beneditc y mezcle bien.


Luego llevar los tubos de ensayo a un baño de maría durante dos minutos.
Deje reposar y observe las diferentes tonalidades presentes en los tubos de
ensayo.
IDENTIFICACION DE PROTEINAS.
Reacción de Biuret





En una gradilla Se toman 2 tubos de ensayo de 16 x 150 y se rotulan como
PATRON y otro como CONTROL.
Se deposita en un tubo marcado como patrón 20gotas de solución de
ovoalbúmina preparada.
Se deposita en el tubo marcado como control 20gotas de agua destilada.
Tome cada tubo y agregue 10 GOTAS de REACTIVO DE BIURET, mezclar
suavemente cada tubo. Hágalo de manera lenta, segura.
Caliente suavemente de ser necesario en el baño de María. Deje enfriar.
Reacción Xantoproteica



En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada
y en el tubo control 20 gotas de agua destilada.
Tomar cada tubo y agregar 10 GOTAS de Ácido Nítrico concentrado,
hacerlo de manera lenta, segura por las paredes del tubo. Colocarlos a
baño de María. Deje enfriar
Desnaturalización de proteínas - Método del calor



En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada
y en el tubo control 20 gotas de agua destilada.
Se introducen al baño de María que se encuentre hirviendo. Deje enfriar.
Desnaturalización de proteínas - Método por alcohol

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL.


Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada
y en el tubo control 20 gotas de agua destilada.
A cada tubo y agregar 20 GOTAS de alcohol etílico/metanol, mezclar
suavemente cada tubo. Hágalo de manera lenta, segura.
IDENTIFICACION DE GRASAS.
Reacción del Sudan



En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20 gotas de solución de aceite vegetal y en el
tubo control 20 gotas de agua destilada.
Adicionar a los tubos 10 gotas de reactivo de Sudan, mezclar suavemente
cada tubo. Hágalo de manera lenta, segura.
Reacción de saponificación




En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL
Depositar en el tubo patrón 2ml del aceite vegetal, y en el tubo control la
misma cantidad de agua destilada
Adicionar a los tubos 2ml de hidróxido sódico al 20%
Agitar enérgicamente y llevar el tubo a baño maría durante 20 minutos.
Nota: Pasado el tiempo se puede visualizar en el tubo tres capas, en la
capa intermedia se podrá visualizar la solución de forma grumosa (jabón
formado)
Solubilidad



En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro
como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 3ml de éter o cualquier otro disolvente orgánico
y en el tubo control 3ml de agua destilada.
Añadir a cada tubo 1ml de aceite vegetal y agitar fuertemente
Interrogante para resolver antes de la práctica
1. Mencione 1 procedimiento diferente a los de la guía para identificar lípidos.
2. ¿Qué son los azucares reductores?
3. ¿Nombre al menos 3 procedimientos diferentes a los de la guía, útiles para
determinar proteínas?
4. ¿Que es saponificación?
Interrogantes para resolver después de elaborada la práctica.
1. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Benedict?
2. ¿La celulosa daría positiva a la prueba del lugol? ¿El azul que aparece tras
calentar y enfriar una reacción de lugol es igual de intenso? ¿Por qué?
3. ¿Por qué solo en el almidón dio positiva la prueba del lugol? ¿Por qué?
(opcional - si es necesario realice un dibujo en donde se refleje la prueba)
¿A qué se debe la variación en el color?
4. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Sudan? ¿Qué
composición tiene el reactivo de Sudan?
5. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Biuret?