Envejecimiento orgs acuat L. Rodríguez-Graña Archivo

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Envejecimiento en organismos acuáticos
Laura Rodríguez-Graña
Curso Introducción a la Ecología
2011
Contenido
• Conceptos generales en envejecimiento
definiciones
modelos de estudio
principales teorías sobre sus causas
mecanismos desencadenantes y de reparación
ecología del envejecimiento
consecuencias del envejecimiento
• Copépodos como modelo de estudio
importancia de los copépodos en el ambiente acuático
el caso de Acartia tonsa
• Otras aplicaciones
estrés oxidativo y contaminación
Envejecimiento
•proceso universal
• se inició con el origen de la vida y con la evolución
hace 3.5 billones años *
* Harman 1981 – Proc Natl Acad Sci USA 78: 7124
Envejecimiento
“Deterioro progresivo que ocurre en la mayoría de los organismos,
que incluye debilidad, aumento de la susceptibilidad a enfermedades y
a condiciones ambientales adversas, pérdida de mobilidad y agilidad, y
cambios fisiológicos relacionados con la edad “*
También incluye una reducción en la capacidad reproductiva
* Theodore Goldsmith 2007 – The evolution of aging – 2ª edición
Envejecimiento en humanos
Conciencia mortalidad
Búsqueda reversibilidad envejecimiento
Dance of Death, Lübeck 1463
Consecuencias sociales y económicas
Desarrollo tratamientos enfermedades
asociadas el envejecimiento
Organismos modelo
• Algunas mutaciones genéticas prolongan la vida en animales de
laboratorio
• Mutaciones se conservan a lo largo de la filogenia, incluidos mamíferos
• Investigaciones aplicadas a estudiar y revertir procesos en humanos
Nemátodo
Caenorhabdites elegans
Mosca de la fruta
Drosophila melanogaster
Ratón de laboratorio
¿Qué pasa con otros animales?
• envejecimiento con amplia distribución filogenética
• longevidad varía entre taxas
Elephas maximus
80 años
Clemmys insculpta
60 años
Loxia leucoptera
Myotis lucifugus
30 años
Eligmodontia typus
0.8 años
4 años
¿Qué pasa con otros animales?
100 años
Briozoario colonial
¿Inmortal?
0.10 años
152 años
Strongylocentrotus franciscanus
31 años
Acartia tonsa
0.25 años
Acipenser fulvescens
Pelecanus occidentalis
Nothobranchius furzeri
Artica islandica
400 años
Envejecimiento y Ecología
• consecuencias del envejecimiento en la performance y aptitud biológica del indiv.
• efectos cambios ambientales en el envejecimiento
• desarrollo de estudios en organismos no-modelos
• estudio comparativos entre taxas
• estimaciones tasa envejecimiento en poblaciones naturales
• evolución del envejecimiento
• vínculos entre evolución del envejecimiento y evolución de estrategias
sexuales
Ricklefs et al 2008. Functional Ecology Vol 22
Nussey et al 2008. Functional Ecology Vol 22
Monaghan et al 2008. Functional Ecology Vol 22
¿porqué se envejece?
se atribuye a:
• defectos en el desarrollo
• defectos genéticos
• ambiente
• enfermedades
• proceso inherente: “proceso de envejecimiento”
Teorías del envejecimiento
• vinculadas a la teoría de la evolución
¿es una característica que ha evolucionado porque le confiere
al organismo algún beneficio?
¿o es un defecto, una limitación?
¿los organismos están diseñados a envejecer?
• derivan de diferentes posturas respecto a los mecanismos que
conducen a la selección natural
Teorías del envejecimiento:
Mutación acumulada
• La fuerza de la selección natural disminuye una vez
que el organismo alcanza una edad donde ya no
se reproduce
Aparición
característica fatal
Peter Medawar
1952
antes pubertad
después pubertad
Selección en contra
Muerte antes de la reproducción
No pasa a la descendencia
Selección débil
No es relevante
Afectará la capacidad de sobrevivencia
y de tener más descendientes
• el envejecimiento ocurre porque la fuerza selección es débil
Teorías del envejecimiento:
Genes pleiotrópicos antagónicos
Pleiotropía: cuando un solo alelo o forma de un
gen puede afectar más de una característica
George Williams
1957
• el envejecimiento ocurre debido al efecto combinado de
muchos genes pleiotrópicos que tienen efectos positivos
durante la juventud pero negativos al avanzar la edad
• esos genes pleiotrópicos son seleccionados positivamente
(permanecen en la población)
Teorías del envejecimiento: Cuerpo
descartable
• el organismo experimenta daños (moléculas, células, tejidos),
y éstos se acumulan con la edad
Tom Kirkwood
1977
• daños causados por productos del metabolismo y
agentes externos
• procesos y mecanismos prevención y reparación daños
no son perfectos
Teorías del envejecimiento: Cuerpo
descartable
• individuo invierte recursos para:
- mantener funcionamiento del cuerpo
- obtener alimento, reproducirse, evadir predadores
Tom Kirkwood
1977
• envejecimiento: compromiso entre el uso de recursos para
mantenimiento y para otras actividades
• mantenimiento no se realizaría más allá de una edad razonable
esperada para un organismo en un cierto ambiente
• ambientes benignos/estables: expectativa vida más larga,
selección natural favorecería mecanismos de mantenimiento
Teorías del envejecimiento: Resumen
¿porqué la selección natural no elimina el envejecimiento?
• teorías no son mutuamente excluyentes
• Acumulación daño: fuerzas selección natural son débiles
• Pleiotropía antagónica: consecuencia de un vínculo desafortunado
entre los beneficios de cierta característica en la juventud y sus
consecuencias negativas a edad avanzada
• Cuerpo descartable: daño es inevitable pero la tasa de envejecimiento
es consecuencia del grado con que la selección o circunstancias
individuales favorecen la distribución de recursos para reparación
mecanismos
• basados en daños
- resulta de la interacción con
el ambiente
- productos del metabolismo causan
daños en céls y tejidos en forma
continua y acumulativa
• basados en una programación
- regulado por procesos genéticos
y predeterminados
- no es al azar
mitocondria
daños
Teoría estrés oxidativo *
• Dentro del organismo se producen compuestos que contienen Oxígeno y/o
número impar de e y son altamente reactivos:
ROS (especies radicalares del oxígeno)
RNS (especies radicalares de nitrógeno)
• ROS se producen en forma
endógena (mitocondria)
exógena (UV, tóxicos del ambiente, quimioterapéuticos)
+
(defensa, señalización celular)
• en exceso dañan proteínas, ADN, lípidos (estrés oxidativo)
• defensas antioxidantes y mecanismos reparación no son 100% eficientes
• ROS se acumulan con la edad
• Existe correlación negativa entre producción ROS y longevidad
* Harman D 1956 J Gerontology 11: 298
• en cantidades óptimas cumplen funciones
daños: Ejemplo
Moluscos bivalvos
Formación ROS y defensas antioxidantes
Especies de nado explosivo
Altos consumos de oxígeno
Poco longevas
Especies de vida sésil
Alta densidad mitocondrias
Bajos niveles ROS
Eliminan mitocondrias con la edad
Baja densidad mitocondrias
pectinidos
Muy longevas
Niveles medios/altos ROS
Liberación protones
Alta actividad antioxidante
Invierten más en reparación
Artica islandica ca. 400 años
Abele et al 2009 Experimental Gerontology 44:307
Poca actividad antioxidante
Invierten poco en reparación
Bajos consumos de oxígeno
daños: Ejemplo
Moluscos bivalvos
Formación ROS y defensas antioxidantes
MLSP = maximum life span = máxima duración de vida
Abele et al 2009 Experimental Gerontology 44:307
almejas
cefalópodos
pectinidos
Mecanismos basados en daños
2- Acortamiento telómeros
Telómeros: regiones de ADN no codificado y repetido que cubren
el extremo de los cromosomas
• Contribuyen con la estabilidad del genoma
• Permiten que las céls se repliquen lo necesario para cons
un organismo y reparar tejidos sin perder secuencias codif
• Largo Telómero disminuye hasta cierto nivel, después del cuál
la célula entra en estado de senescencia celular:
mueren
viven pero liberan sustancias nocivas
• Enzimas telomerasas reparan telómeros agregando
una secuencia telomérica al final del cromosoma
Campisi et al 2001. Exp Gerontol 36
• En cada división celular parte del ADN del final de los crom
no se divide y se pierde: los telómeros se acortan
daños: Ejemplo
•Langosta crecimiento continuo
•Disminuye la tasa de crecimiento con la edad
•Alta actividad telomerasa en tejidos
Mecanismos basados en programación
Teoría del desarrollo
Envejecimiento está genéticamente determinado/regulado
¿qué regula el reloj biológico?
Las investigaciones están en
• Muerte celular genéticamente programada (apoptosis)
• Cambios hormonales asociados al crecimiento *
(mientras se crece no se envejecería)
• programas genéticos vinculados al desarrollo **
* Gosden R 1996 Cheating Time WH Freeman &Company, NY
** deMagalhaes & Church 2005 Physiology (Bethesde) 20: 252
Programación: ejemplo
Phestilla sibogae
larva
• Duración estadío larval determinado por el encuentro
con un estímulo específico que induce la metamorfosis
(tipo sustrato)
Miller SE & Hadfield MG 1990 Science 248
• Pausa en el desarrollo entre al inicio y final de la
metamorfosis
• Envejecimiento se suspende durante la pausa
• La longevidad post-larval no es afectada por la
duración estadío larval
• La longevidad total varía con la duración período
larval
Mecanismos basados en programación
Beneficios /Costos pausa desarrollo:
+ Energía dirigida a la búsqueda de sustrato óptimo
(en vez de reparar efectos envejecimiento)
- mayor riesgo de mortalidad por depredación
- postergación reproducción (no descendencia)
- menos reservas y tamaño más pequeño al asentarse
(efectos posteriores en crecimiento y reproducción)
Miller SE & Hadfield MG 1990 Science 248
Mecanismos basados en programación
Ejemplo: reproducción en salmón Oncorhynchus nerka
• rápido envejecimiento después de la reproducción
• durante reproducción ocurre una cascada de
cambios hormonales:
deja de comer
desarrolla patologías
muere
• animales castrados viven el doble pero también
desarrollan cascada hormonal
Finch CE 1990 Longevity, senescence and genome. The University of Chicago Press
Mecanismos causan envejecimiento: Resumen
• El envejecimiento se produce por acumulación de daños en el organismo
a lo largo de la vida (e.g. Teoría estrés oxidativo)
Estos daños son causados por:
productos endógenos y/o externos
por fallas en los mecanismos de reparación y sistemas de defensa
• El envejecimiento está genéticamente programado
(e.g. Teoría muerte programada)
existe un vínculo entre crecimiento/desarrollo y envejecimiento
envejecimiento y desarrollo son regulados por los mismos
mecanismos genéticos y procesos
Consecuencias del Envejecimiento
(1) Disminución en la ingesta de alimento
Humanos/ratones (anorexia del envejecimiento)
- alteraciones del SNC que controla las funciones de quimioreceptores (olfato)
- cambios en la sensación de saciedad gastrointestinal
- aumento de hormonas que disminuyen la ingesta (Leptina)
Aves marinas
- Thalassarche chrysostoma (albatros cabeza gris)
- Disminución ingesta en machos (masa ganada/día)
Morley 2001 J Gerontology Vol. 56A
Catry et al 2006. Proc. R. Soc. B
Consecuencias del Envejecimiento
(2) Pérdida capacidad reproductiva y cambios en los patrones de
fecundidad
Mosca, rata, ratón, coleópteros
- descenso en la producción de ovocitos
- cambios en la secreción de gonadotropinas
- cambios en factor de crecimiento-tipo insulina (IGF)
- pérdida de la función masculina
Novoseltsev 2003. J Gerontology Vol 58A Partridge et al 2005 Cell, Vol. 120
Consecuencias del Envejecimiento
(3) Efectos sobre la descendencia
Fox 1993. Oecologia 96
Fox & Dingle 1994. Functional Ecology Vol. 8
Consecuencias del Envejecimiento
(4) Dinámica poblacional: proporción de sexos y longevidad
• La longevidad y expectativa de vida es en muchos casos sexo-
dependiente
• Los machos tienen mortalidad mayor y más prematura y un
envejecimiento más rápido respecto a las hembras
• Los machos invertirían menos en mantenimiento somático en favor de
la reproducción (cortejo, apareamiento, competencia por aparearse)
Vinogradov 1998. Acta Biotheoretica Vol 46 Bonduriansky et al. 2008. Functional Ecology 2008. Vol 22
Especie modelo para estudios en envejecimiento
• Tiempo generacional corto
• Tamaño pequeño
• Alta fecundidad
• Fácil de cultivar
• Referencias de su historia de vida y biología
¿Copépodos como modelo?
Reznick 1993 Genetica 91
Porqué copépodos
• Organismos clave en ecosistemas marinos
• Importante papel en las tramas tróficas y transferencias de Carbono
• Dinámica poblacional modulada por variaciones
tasas de mortalidad
fecundidad
crecimiento
tasas encuentro entre sexos
capacidad de cópula de los machos
Antecedentes generales copépodos
(1) Alimentación
Copépodos pueden ser selectivos en la dieta
Machos comen menos que la hembras
¿efecto envejecimiento en la ingesta?
Algunas algas tienen efectos tóxicos
Machos más sensibles a toxinas algales
¿Menor mecanismos de reparación en machos?
¿efecto antioxidante de algunas algas?
Avery et al 2008. Limnol Oceanogr 53
Antecedentes generales copépodos
(2) Capacidad reproductiva y patrones de fecundidad
• descenso producción huevos con la edad en Centropages typicus
• descenso número huevos por saco con la edad en Cyclops kolensis
¿efectos de la calidad del alimento en la reproducción con la edad?
Jamieson & Santer 2003. Hydrobiologia 510
Antecedentes generales copépodos
(3) Efectos sobre la descendencia
• Efecto materno relacionado con la nutrición de las hembras
(tamaño huevo, crecimiento, sobrevivencia y movilidad de nauplios)
• Efecto materno relacionado a la edad de la madre
(tamaño huevo, tiempo desarrollo nauplii, sobrevivencia nauplii)
¿podría haber algún efecto materno a nivel molecular?
Jamieson & Santer 2003. Hydrobiologia 510
Antecedentes generales copépodos
(4) Proporción sexos
• Relación de sexos sesgada hacia las hembras
• Longevidad de machos condicionada por
tasas de desarrollo más rápidas (maduran antes)
tamaño corporal más pequeño
nado más activo
más notorios frente a predadores
¿la pobre condición somática de machos tiene base Bioquímica-molecular?
Kiorboe 2006. Oecologia 148
Antecedentes generales copépodos
(5) Daños a nivel molecular
• Efecto de toxinas algales ingeridas por la madre sobre nauplii
¿es posible determinar daño oxidativo en copépodos?
De existir daño oxidativo, ¿está relacionado con la edad?
Ianora et al 2004 Nature 429
Envejecimiento sexo-específico y heredabilidad de
daño oxidativo en Acartia tonsa
Rodríguez-Graña, Calliari, Tiselius, Hansen, Nilsson-Sköld
Objetivos
(1) Efecto de la edad en
- tasas de alimentación
- fecundidad (hembras)
- éxito reproductivo (puestas/eclosión)
(2) Detectar daño oxidativo en copépodos
(3) Determinar si existe efecto diferencial de daño oxidativo entre M y H
(4) Determinar si el daño oxidativo es transmitido a la descendencia
(5) Explorar los efectos del alimento como potenciales antioxidantes
Metodología
Cultivos
algas
Fase exponencial
Cultivos
copépodos
luz, temperatura,
alimento
constante
Exp. de alimentación y
reproducción
Test ANOVA entre tratamientos
Aspecto, comportamiento, relación de sexos
• Cambios en la apariencia externa y comportamiento con la edad
adulto joven: exoesqueleto liso, claro y nado activo
adulto viejo: exoesqueleto con incrustaciones ciliados-algas, oscuros
y respuestas escapatorias lentas
• Cambios en la proporción de sexos
Tasas alimentación
• Hembras presentan mayores tasas de ingestión
• Ambos sexos ingirieron más TW
• Disminución de las tasas de alimentación con la edad con TW (RHO no signific.)
Producción de huevos y éxito de eclosión
• Disminución con la edad
53 h/H
37 h/H
• Disminución con la edad pero
no efecto de la comida
Daño oxidativo
Gel con proteínas Carboniladas,
Mayor daño, mayor intensidad
(Técnica OxyBlot)
• Machos: aumenta el daño oxidativo con la edad
• Hembras: no aumenta el daño oxidativo con la edad
Daño oxidativo
M = machos
F = hembras
• DO bajo a la edad 16 d
• DO en machos aumentó a la edad 37 d
• Machos alimentados con RHO exhibieron mayor DO a la edad 37 d
Daño Oxidativo y Efecto Materno
• Nauplii de hembras más viejas alimentadas con TW tuvieron mayor daño
oxidativo
Conclusiones
• Ingesta de alimento disminuyó con la edad
• EPR, EHS y NPR disminuyó con la edad
• Se estimó daño oxidativo en copépodos
• Mayor daño oxidativo en machos, ¿porqué?
- Hembras: mayor tasa de recambio de proteínas por reproducción
(a) 36-50 huevos d-1 = 37-50% remoción de masa corporal diaria;
4 espermatóforos d-1 = 2% remoción de masa corporal)
(b) se observó traspaso de proteínas oxidadas a los nauplios
- Hembras invertirían más en mantenimiento somático, machos en
reproducción
• Se detectó efecto materno negativo sobre la progenie con la edad
• No hubo un efecto claro del alimento sobre la oxidación
Perspectivas
Estudios
copépodos
Fertilidad en machos
Daño oxidativo basado en especies del Nitrógeno
Acortamiento de telómeros y actividad telomerasa
peces anuales
efecto materno en la calidad de huevos y larvas
Aplicaciones estudios estrés oxidativo
• sedimentos en puertos ricos en diversos tóxicos
que son liberados al agua durante el dragado
• derramamiento petróleo puerto Gotemburgo 2003
• especie Zoarces viviparus utilizada como centinela en estas actividades
• uso de biomarcadores para determinación riesgo ambiental:
- peroxidación lípidos medido como sustancias reactivas
al ácido thiobarbiturico (TBARS)
- proteínas con grupos carbonilos
Aplicaciones estudios estrés oxidativo
• eutrofización cuerpos agua
• Floraciones algales tóxicas: cianobacterias
• Cianobacterias producen sustancias patógenas:
microcistinas (MICs)
• MICs causan daños morfológicos, fisológicos y moleculares
• Inducen la producción de ROS
• Autores proponen diversos mecanismos por los que las
MICs producen daño oxidativo en diversos animales
acuáticos
Laeonereis acuta
Chasmagnathus granulatus
Danio rerio
Jenynsia multidentata
Gracias,
¿alguna
pregunta?
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