anexo i - Introducción a la Producción Animal

GENETICA MENDELIANA
Se presenta un repaso de la base de la genética clásica, y se introducen los términos
propios de la disciplina, para un comprensible mejoramiento animal a nivel del gendesde abajo hacia arriba.
GENES, CROMOSOMAS Y GENOTIPOS
La unidad básica de herencia es denominada gen. Los genes son segmentos de ácido
desoxirribonucleico o ADN, la molécula compleja que forma el código genético para
todos los seres vivos.
Los genes son secciones relativamente pequeñas de cromosomas y estos son largos
hilos de ADN y proteínas asociadas, presentes en el núcleo de cada célula del
organismo.
Los cromosomas se presentan de a pares, un cromosoma del par heredado del padre y
otro heredado de la madre. El número de pares de cromosomas depende de la
especie. Los humanos por ejemplo tienen 23 pares.
Los bovinos 30, los perros 39. Un par representativo de cromosomas homólogos es
representado en la figura 3.1.
En la figura 3.1 se muestran dos locus hipotéticos: “J” y “B”. Locus es una palabra en
latín y denota el sitio que ocupa un gen en particular en el cromosoma. En cada locus
hay un par de genes, un gen en el cromosoma paterno y un gen en el cromosoma
materno. Los genes en un locus se expresa simbólicamente con una sola letra o
combinación de ellas. Por ejemplo, los dos genes en el locus J en un individuo pueden
ser designados J y j. Si un gen es representado con una letra mayúscula y el segundo
con letra minúscula (u otra variante), implica que hay una diferencia química y
funcional entre ellos. J y j son llamados alelos, formas alternativas de un gen
encontradas en el locus J. Si los dos genes en el locus J fueran funcionalmente
parecidos, ambos tendrían el mismo símbolo.
Aunque que hay solo dos genes en un locus particular en un individuo, los dos podrían
ser un subconjunto, de una serie más grande de formas alternativas del gen. En otras
palabras, puede haber alelos múltiples.
En los perros por ejemplo, hay un locus que afecta el color del manto conocido como
locus E (por extensión de la pigmentación). Puede haber tres alelos diferentes en el
locus: E que causa la extensión completa del pigmento, (es decir no inhibe la
pigmentación), Ebr que es atigrado), y e, el cual inhibe la pigmentación. Cualquier
perro puede tener un máximo de dos de los tres alelos en la serie E. En el ejemplo
hipotético mostrado en la figura 3.1, si hubiese cuatro alelos posibles en el locus B,
podrían ser presentados como B, b, b’ y b’’.
La combinación de genes en un locus en particular se denomina genotipo,
especialmente un genotipo de un locus. Si J y j son los únicos alelos posibles en el locus
J, entonces pueden haber tres genotipos: JJ, Jj y jj. Debido a que hay cuatro alelos
posibles en el locus B, hay potencial para muchos más genotipos: BB, Bb, Bb’, Bb’’, bb,
bb’,bb’’, b’b’, b’b’’ y b’’b’’. Si consideramos ambos loci (plural de locus) B y J juntos,
entonces hay un número más grande de genotipos de dos locus: JJBB, JJBb,
JJBb’,…jjb’’b’’ 30 genotipos de dos locus en total.
Un genotipo de un locus es considerado homocigoto si ambos genes en ese locus son
funcionalmente iguales. Los genotipos JJ, jj, BB, bb, b’b’ y b’’b’’ son ejemplos de
homocigotas. Genotipos de un locus que contengan genes funcionalmente diferentes
son considerados heterocigotos. Los genotipos Jj,Bb,Bb’,Bb’’,bb’,bb’’ y b’b’’ son
ejemplos de heterocigotos.
CÉLULAS GERMINALES Y SU FORMACIÓN
La primera ley de Mendel es conocida como ley de segregación. Manifiesta que en la
formación de las células germinales o gametos (en el macho, espermatozoide; y en la
hembra, óvulo), los dos genes en un locus de la célula madre se separan y solo un gen
es incorporado en cada célula germinal.
La segregación: es
la separación de
genes
ligados
durante
la
formación
de
células germinales
Hoy llamamos al proceso que crea las células germinales meiosis. La meiosis es
bastante complicada, involucra un número de pasos intrincados durante el cual no solo
los genes sino cromosomas homólogos enteros se separan (mire la figura 3.2). Los
gametos contienen sólo un gen del par.
Los gametos que pueden ser obtenidos de varios genotipos de dos locus, se muestran
en la figura 3.3. Note que cada gameto contiene solo un gen de cada locus. Mientras
que el genotipo de dos locus originales contenía cuatro genes juntos, cada gameto
contiene solo dos. Como regla, las células germinales contienen la mitad del número
de cromosomas y por lo tanto poseen la mitad del número de genes de las células
somáticas.
El número de gametos que puede ser obtenido a partir del genotipo de los padres
depende de cuan heterocigoto es el genotipo. Por ejemplo, el genotipo JJBB, es
completamente homocigoto. Puede producir un solo tipo de gameto: JB. A partir del
genotipo parcialmente heterocigoto JJBb pueden obtenerse dos tipos de gametos, y el
genotipo completamente heterocigoto JjBb, puede producir cuatro tipos de gametos.
La figura 3.3 ilustra la segunda ley de Mendel, la ley de distribución independiente, de
genes en loci diferentes
Los genes se distribuyen independientemente durante la meiosis si todos los gametos
posibles se forman en proporciones iguales. Para que esto ocurra, un gen dado de un
determinado locus tiene que tener una probabilidad igual de estar presente en la
misma célula germinal con cualquiera de los dos genes de otro locus. Como ejemplo,
considere el genotipo JjBb en la figura 3.3. Los individuos JjBb, pueden producir
cuatro gametos posibles: JB, Jb, jB, y jb. Si los cuatro gametos se producen en
proporciones iguales (permitiendo alguna libertad de elección para la eventual
variación), entonces estos genes se han distribuido independientemente. Sin embargo,
si solo se producen los gametos JB y jb o si se producen a mayores frecuencias que los
gametos Jb y jB, entonces la ley de la distribución independiente ha sido violada. En
este caso, parecerá que el alelo J está “pegado” con el alelo B y el alelo j está
análogamente pegado con el alelo b.
Los loci que afectaban los caracteres que Mendel observaba en sus plantas de poroto
todos estaban en diferentes cromosomas. Los cromosomas se distribuyen
independientemente (es decir, no hay tendencia en ciertos cromosomas de pegarse
entre si en la formación de células germinales), entonces los genes en esos
cromosomas, también se distribuyen independientemente. Hoy en día sabemos que
hay excepciones a la ley, pero son excepciones, no la regla.
Las excepciones a la segunda ley de Mendel son causadas por el Ligamiento. Dos loci
están ligados si están en el mismo cromosoma.
Debido a que los cromosomas homólogos enteros – no solamente los genes- se
separan durante la meiosis, los genes en el mismo cromosoma tienden a terminar en
el mismo gameto. Sin embargo, ésta es solamente una tendencia debido a un
fenómeno llamado entrecruzamiento.
El entrecruzamiento o crossing over es el intercambio recíproco de segmentos de
cromosomas entre homólogos. Ocurre durante la meiosis previamente al momento
en que los cromosomas homólogos son separados para formar gametos.
La figura 3.4 representa cromosomas homólogos (a) antes del entrecruzamiento y (b)
luego del entrecruzamiento. Los cromosomas en la figura 3.4 (a) tienen un patrón de
fondo diferente (rayado y liso) para mostrar su origen en distintos progenitores. Note
que antes del entrecruzamiento, los alelos J y B están ligados, como también los alelos
j y b. En el proceso de entrecruzamiento se producen “roturas” mutuas en sitios
idénticos en cada cromosoma, y los fragmentos son intercambiados. Debido a que el
rompimiento o “rotura” en la figura 3.4 se produce entre los loci J y B, los genes en
estos loci se recombinan y ahora están ligados con una nueva disposición. La
recombinación es la formación de una nueva combinación de genes en un
cromosoma como resultado del entrecruzamiento.
Un solo evento de entrecruzamiento es mostrado en la figura 3.4.Eventos de
entrecruzamientos múltiple son comunes, y la probabilidad de recombinación de
genes en cualquier a de dos loci ligados depende de la distancia entre los loci. Los loci
que están alejados (como los loci J y B) es probable que se recombinen a menudo.
A fin práctico, los genes en estos loci se distribuirán independientemente, igual que lo
harían si estuviesen juntos en diferentes cromosomas. La recombinación es menos
probable para loci que están muy cercanos, porque la probabilidad de que ocurra una
ruptura entre ellos es mucho menor. Estos loci estrechamente ligados, crean
excepciones a la segunda ley de Mendel. Pero en las especies de mayor interés
productivo, los genes están distribuidos en un gran número de cromosomas, y una
vinculación estrecha entre dos loci de interés es relativamente rara.
FORMACIÓN DEL EMBRIÓN
Cuando un macho es satisfactoriamente apareado con una hembra, se unen el
espermatozoide y el óvulo y se forma un embrión. En la jerga genética, decimos que
los gametos del padre y la madre se combinan para formar un cigoto.
Los cigotos son hijos. Tienen el número normal de genes y cromosomas, la mitad del
padre y la mitad de la madre. El proceso que determina qué o cual óvulo madurará (se
desarrolla fisiológicamente y hará dehiscencia) y que espermatozoide tiene éxito en la
fertilización del óvulo
se denomina selección
de gametos.
Algunos
gametos
contienen
defectos
genéticos que los
hacen no viables. Estos
gametos
son
naturalmente
seleccionados
en
contra. Sin embargo, a pesar de esta forma de selección natural, la selección de
gametos es esencialmente al azar. En otras palabras, casi todos los gametos tienen las
mismas chances de producir un cigoto.
Un recurso comúnmente utilizado para determinar los cigotos posibles de obtener del
apareamiento de dos genotipos paternos cualquiera es el cuadrado de Punnett. El
cuadrado de Punnett es una cuadrícula de dos dimensiones. A lo largo de la parte
superior de la cuadrícula están listados los posibles gametos de un padre, a lo largo del
lado izquierdo de la cuadrícula están listados los gametos posibles del otro padre.
Dentro de las celdas de la cuadrícula se encuentran los posibles gametos del
apareamiento. Son obtenidos por una simple combinación de los gametos de cada fila
y columna del cuadrado. Un ejemplo de dos locus se muestra en la figura 3.5. En este
ejemplo, un macho JjBb es apareado con una hembra JjBb. Cada padre puede producir
cuatro gametos diferentes: JB, Jb, jB y jb, entonces hay cuatro filas y cuatro columnas
en el cuadrado de Punnett, resultando en 16 celdas. Sin embargo, no todas las celdas
contienen un cigoto único. Algunas celdas del cuadrado contienen el mismo genotipo.
En este caso particular, hay nueve tipos distintos de cigotos.
Si cada gameto listado a lo largo de la parte superior y al costado del cuadrado de
Punnett se produce con la misma frecuencia, cada celda dentro del cuadrado se
debería producir con la misma frecuencia. Entonces, es posible determinar la
probabilidad de cualquier genotipo en particular en la progenie, observando la
frecuencia de las celdas que contienen ese genotipo. Y si se sabe que fenotipo está
asociado con cada genotipo – como es el caso de los caracteres de herencia simple no
poligénicos – también se puede determinar las proporciones de los fenotipos
esperadas en la progenie.
El color del manto en ganado Shorthorn provee un buen ejemplo. El Shorthorn tiene
tres colores básicos posibles: rojo, blanco y rosillo (combinación de pelo rojo y blanco).
Estos colores son controlados por el locus R. Los individuos RR son rojos y los
individuos rr son blancos y los Rr rosillos. El apareamiento de dos animales rosillos es
ilustrado en el cuadrado de Punnett en la figura 3.6. Como está indicado en la
frecuencia de las celdas que contienen cada genotipo, los tres genotipos y fenotipos
de los hijos se
deben producir
en
una
proporción
1:2:1 – un rojo,
dos rosillos, un
blanco.
Esta
relación es una
expectativa, no
podemos decir
que
cada
cuatro
terneros de provenientes de apareamientos rosillos, uno será rojo, dos rosillos y uno
blanco. Sin embargo, en promedio la proporción se cumplirá, y con un gran número de
hijos de este apareamiento podremos anticipar los colores de los mantos para que se
ajuste estrechamente a la proporción 1:2:1
La figura 3.6 es un ejemplo del cuadrado de Punnett de un locus. La figura 3.5 es un
ejemplo de dos locus. El cuadrado de Punnett puede ser utilizado para ilustrar
apareamientos que incluyan cualquier cantidad de loci. Pero con objetivos prácticos,
los cuadrados que contienen más de unos pocos loci se vuelven “inmanejables”. Un
cuadrado de Punnett que muestre el apareamiento de individuos heterocigotos en
cuatro loci, tendría 256 celdas.
LA ALEATORIEDAD DE LA HERENCIA
Lo significativo de las leyes de Mendel recae en su explicación de la especial naturaleza
de la herencia, las antiguas “partículas” son lo que ahora llamamos genes, y por ende
la explicación de cómo se mantiene la variabilidad genética en la población. Previo a
los descubrimientos de Mendel, la escuela del pensamiento genético más aceptada
incluía una teoría de la herencia de la “mezcla”, en la cual la información hereditaria
estaba contenida en fluidos, probablemente, incluso en la sangre, y era la mezcla de
fluidos parentales la cual determinaba la estructura genética de un hijo. La teoría de la
mezcla fue fatalmente incorrecta. No pudo explicar nunca porqué, luego de muchas
generaciones de mezclar fluidos, los individuos de una población eran una mezcla
similar. En otras palabras, no podía explicar porque hay tanta variación genética en la
mayoría de las poblaciones y porque la variación no disminuye a través del tiempo. El
trabajo de Mendel proveyó la respuesta y refutó la teoría de mezcla para siempre,
aunque a raíz de eso hoy en día todavía usamos términos como porcentaje de sangre
para describir el linaje de un animal.
Para tener una mejor idea del efecto de la herencia mendeliana en la preservación de
la variabilidad genética, considere un individuo que es heterocigoto en un loci de 100.
Asumiendo la segregación y la distribución independiente, este individuo puede
producir más de 1.2 x 1030 gametos únicos y diferentes. Y si estos individuos fueran
apareados con otro individuo como él, más de 5 x 1047 cigotos únicos podrían ser
posibles. Eso es 500 billones de cigotos – no hay dos iguales. Estos números son tan
grandes que son incomprensibles. La mayoría de los animales domésticos son
heterocigotos en mucho más de 100 loci. Un número mucho más realista de loci
heterocigotos puede estar alrededor de los miles o decenas de miles. Los números
resultantes para gametos posibles y cigotos son asombrosos.
Los procesos que aseguran la variabilidad genética son aleatorios por naturaleza. La
distribución independiente de los genes durante la formación de células germinales es
casi toda aleatoria; solamente un ligamiento estrecho previene la aleatoriedad
completa. No hay forma de predecir que combinación de genes estará presente en un
gameto en particular. Algunos gametos recibirán muestras favorables de genes; otros
no.
El proceso de selección de gametos en la formación del embrión es igualmente
aleatorio. No hay forma de predecir la estructura genética del óvulo que será el
próximo en madurar o predecir la estructura genética del espermatozoide que tiene
éxito, entre millones, en la fertilización del óvulo. Se puede pensar en el proceso
aleatorio de distribución independiente y en la selección de gametos como dos
procesos separados o como piezas de un solo proceso. De cualquier forma, el
resultado es el mismo: la muestra de genes que recibe el hijo de sus padres es
aleatoria.
El muestreo mendeliano es entonces el muestro aleatorio, de los genes parentales
causados por la segregación y la distribución independiente de los genes durante la
formación de células germinales y por la selección aleatoria de gametos en la
formación del embrión.
La aleatoriedad de la herencia es críticamente importante desde el punto de vista de
la evolución, y como se verá más adelante, también es de vital importancia para el
éxito de la selección artificial. Sin embargo, crea un problema para los criadores –
reduce nuestra habilidad para controlar los resultados de los apareamientos. Podemos
aumentar las probabilidades de tener una progenie superior apareando padres que
sabemos que tienen valores de cría superiores, pero no tenemos el control sobre el
muestreo mendeliano de los genes, los cual determina la estructura genética de la
progenie.
El hecho de que el padre y la madre han producido un hijo sobresaliente en el pasado,
no garantiza que producirán un hijo igualmente sobresaliente en el futuro. Igualmente,
solo porque el primer apareamiento de dos individuos haya producido resultados
menos deseables, eso no significa que no sea posible obtener mejores resultados de
este apareamiento.
El muestreo mendeliano en peces es ilustrado en la figura 3.7 (Se eligieron peces como
ejemplo porque tienen una alta fecundidad – un solo apareamiento produce muchos
hijos). En (a) se aparean dos individuos con mérito genético inferior para la tasa de
crecimiento. Los hijos de este apareamiento no son todos iguales porque el muestreo
mendeliano ha causado que reciban diferentes conjuntos de genes de sus padres. Con
respecto al mérito genético para la tasa de crecimiento (la escala horizontal en la
figura 3.7), la progenie parece tener una distribución normal. La mayoría tiene mérito
genético para la tasa de crecimiento próximo al mérito promedio de sus padres, el
cual, en este caso es inferior. Algunos (aquellos en el extremo izquierdo de la
distribución) son realmente pobres, pero unos pocos (aquellos en el extremo derecho
de la distribución) son genéticamente capaces de un crecimiento bastante rápido. En
(b) se aparean dos individuos con mérito genético para tasa de crecimiento superior.
Nuevamente el muestreo mendeliano causa variación en los hijos. En este caso la
mayoría de ellos son superiores – algunos extremadamente buenos – y unos pocos son
inferiores. Note que a pesar de que el muestreo mendeliano causa una variación
considerable en la progenie producida por un determinado apareamiento, la
probabilidad de obtener un hijo superior es mayor cuando se aparean padres
superiores entre sí que cuando se aparean padres inferiores.
HERENCIA RELACIONADA AL SEXO
Para algunos caracteres, la expresión génica difiere en machos y hembras. Las causas
son variadas, pero se pueden poner bajo 3 categorías: Ligadas al sexo; Limitadas al
sexo; Herencia influenciada por el sexo.
Herencia ligada al sexo
En mamíferos un par de cromosomas comprenden los cromosomas sexuales, X e Y,
con las hembras que tienen 2 cromosomas X y los machos que tienen un X y un Y. La
hembra hereda un cromosoma X de cada uno de sus progenitores. Los machos
heredan un cromosoma X de su madre y un cromosoma Y de su padre. (En las aves es a
la inversa, los machos son XX y las hembras XY). Los cromosomas X e Y, aunque son
miembros de un par, son bastante diferentes entre sí. No tienen correspondencia en
las regiones del ADN, y los genes de estos cromosomas se dicen que son ligados al
sexo. Debido a que los machos mamíferos son hemicigotas para los genes que
aparecen en el cromosoma X (los machos tienen solo 1 copia), la herencia ligada al
sexo difiere del patrón de la tradicional genética mendeliana.
Un ejemplo de herencia ligada al sexo es la coloración “carey” o tricolor en gatos.
El “carey” es una mezcla de colores que aparece en parches, siempre con algo de
naranja, a menudo con blanco y negro o gris atigrado. (Con suficiente blanco es un
gato Calico).
Los carey ó “tricolor” son hembras (con muy raras excepciones), porque el locus para
coloración naranja se encuentra en el cromosoma X. Las hembras con 2 cromosomas X
pueden tener genotipos tanto OO, Oo, ó bien oo en el locus naranja (O del inglés
orange). Las OO son naranjas, las oo son del color que dicten los otros loci (es decir que
el alelo o no tiene efecto) y las Oo son carey o tricolor. La razón por la que ocurren los
parches de color en los genotipos Oo es que un determinado cromosoma X es
inactivado al azar en las células que se forman en el desarrollo temprano del embrión.
En algunas células embrionarias, el cromosoma X derivado del padre es inactivado. Por
lo tanto todas las células hijas tendrán inactivados los cromosomas X paternos.
En otras células embrionarias y sus descendientes, el cromosoma X materno es el que
se inactiva. Como resultado en ciertas áreas del cuerpo de individuos carey el alelo O
es activo y el color naranja se expresa, pero en otras áreas el alelo o es activo y el color
naranja no se expresa. Los machos tienen un solo cromosoma X y por lo tanto un solo
alelo en el locus naranja. Un macho con genotipo O es naranja, mientras que con
genotipo o no es naranja y no existen machos carey o tricolor.
En resumen:
Hembras
Machos
OO
Naranja
O
Naranja
Oo
Carey
o
No naranja
oo
No naranja
Herencia limitada al sexo
En la herencia limitada al sexo la expresión fenotípica a un carácter se limita a uno de
los sexos.
Por ejemplo la producción de leche, se limita al sexo, los machos no producen leche,
aunque portan genes para ello.
Lo caracteres limitados al sexo, se piensa que son condicionados hormonalmente. Las
hormonas femeninas permiten el desarrollo mamario y la producción de leche. Si los
genes en los cromosomas sexuales están completamente involucrados, estos tienen
probablemente solo un efecto indirecto a través de su influencia en la producción
hormonal.
Herencia influenciada por el sexo
En la herencia influenciada por el sexo, el modo de expresión del gen difiere entre
machos y hembras. Por ejemplo un alelo se puede expresar como dominante en un
sexo y como recesivo en el otro.
La herencia de los tocos o cachos (vestigios de cuernos generalmente pequeños en el
ganado bovino) es influenciada por el sexo. El alelo para los tocos, Sc del inglés scurs, es
dominante en los machos y recesivo en las hembras. Así, si un macho porta solo una
copia del alelo tendrá tocos, pero una hembra debe tener las dos copias del alelos para
tener tocos.
Hembras
Machos
Sn Sn
Sin tocos
Sn Sn
Sin tocos
Sc Sn
Sin tocos
Sc Sn
Con tocos
Sc Sc
Con tocos
Sc Sc
Con tocos
Un patrón idéntico afecta la expresión de los cuernos en ovinos. Note que al contrario
que las características limitadas al sexo, las influenciadas por el sexo pueden aparecer
en ambos sexos. Aunque generalmente, son más frecuentes en un sexo que en el otro.
GENÉTICA DE POBLACIONES
Los principios mendelianos explican los mecanismos genéticos en individuos. Sin
embargo, nuestra labor no es cambiar a los individuos, sino las poblaciones. Entonces
debemos tomar los conocimientos sobre la herencia mendeliana y extenderlo del nivel
del individuo al nivel de las poblaciones.
FRECUENCIAS GÉNICAS Y GENOTÍPICAS
Al describir un individuo para un carácter de herencia simple, nos referimos a genes
específicos, o bien podemos describir su genotipo para uno o dos locus. Por ejemplo,
podemos referirnos a la raza de gallinas Andaluza azul como si tuviera alelos negros
(B), o blanco (b) en un locus que afecta el color de las plumas, o podemos decir que un
pollo en particular tiene un genotipo heterocigoto Bb en ese locus. Sin embargo
¿Cómo describimos una población? ¿Cómo describimos un lote completo de gallinas
andaluzas azules? La respuesta es utilizar la frecuencia de genes y genotipos.
La frecuencia génica o frecuencia alélica es la frecuencia relativa de un alelo particular
en una población. Es una medida de cuan común es el alelo en relación a otros alelos
en ese locus en la población. Las frecuencias relativas van de 0 a 1. Por ejemplo, si un
alelo no existe en una población, su frecuencia es 0. Si es el único alelo en su locus en
la población, su frecuencia génica es 1. Si alcanza al 35 % de los genes en el locus en la
población, su frecuencia génica es 0.35.
Cuando hay solo dos alelos posibles en un locus, la frecuencia del alelo “dominante” es
comúnmente representada por la letra minúscula p y la frecuencia del alelo “recesivo”
por la letra minúscula q. (Los términos dominante y recesivo están puestos entre
comillas porque hay situaciones en que ningún alelo es dominante. En casos de
ausencia de dominancia, la asignación de p o q para referirse a la frecuencia de un
alelo en particular es arbitraria).
Por ejemplo considere un lote de 100 andaluzas, 36 son negras (BB), 44 son azules
(Bb, en realidad gris), 20 son blancas (bb). En el locus que afecta el color de las plumas
de las andaluzas hay un total de 200 genes en esta población – dos genes por cada uno
de los 100 individuos. Los 36 individuos negros, cada uno tiene 2 genes (o alelos)
negros, los 44 azules cada uno tiene un gen negro, y los blancos no tienen genes
negros. La cantidad total de genes negros en el lote es por lo tanto 2 x 36 + 44 =116, y
la frecuencia génica del alelo negro es entonces 116 de 200 o en forma decimal, 0.58.
Igualmente, no hay genes blancos en las gallinas negras, 44 genes blancos en las azules
y 40 genes blancos en los individuos blancos, un total de 84 genes blancos en el lote.
La frecuencia génica del alelo blanco es entonces 84 de 200 o 0.42. En cada caso
hemos simplemente contado el número de genes de un tipo particular y dividido por el
total de genes en un locus en la población. Las ecuaciones para las frecuencias génicas
en nuestro ejemplo de las andaluzas pueden ser escritas así:
Note que p + q = 1. Esto siempre será cierto si hay solo 2 alelos posibles en un locus. Si
hay múltiples alelos en un locus, entonces la suma de las frecuencias génicas debe ser
igual a 1. Por ejemplo, si los alelos posibles fueran B, b y b’ debemos llamar las
frecuencias génicas de estos alelos p,q,r, respectivamente. Entonces p + q + r = 1.
La frecuencia genotípica es la frecuencia relativa de un genotipo particular de un locus
en una población. Las letras mayúsculas son utilizadas para anotar las frecuencias
genotípicas. Con sólo dos alelos en un locus, P se refiere a la frecuencia genotípica del
genotipo homocigota “dominante”, H se refiere a la frecuencia del genotipo
heterocigoto y Q se refiere a la frecuencia del genotipo homocigota “recesivo”.
En nuestro lote de andaluzas, hay 36 genotipos BB, 44 genotipos Bb y 20 genotipos bb
de un total de 100 individuos. Por lo tanto:
Para calcular frecuencias genotípicas, simplemente cuente el número de individuos en
un genotipo particular y divide por el número total de individuos en una población.
Note que P+H+Q = 1. Esto siempre será cierto si hay solo tres genotipos posibles en un
locus. Si hay más de tres genotipos posibles, entonces la suma de las frecuencias
genotípicas de cada genotipo tiene que ser igual a 1. Por ejemplo si los alelos posibles
fueran B,b y b’ con posibles genotipos de un locus BB,bb, b’b’, Bb, Bb’ y bb, podríamos
llamar las frecuencias genotípicas P,Q,R,H (Bb) ,H( Bb’), y
H (bb’),respectivamente.
Entonces P+Q+R+H (Bb)+H( Bb’)+H (bb’) = 1.
Existen varios factores que afectan las frecuencias génicas y genotípicas en una
población, entre ellos, las herramientas básicas para el mejoramiento animal: selección
y sistemas de apareamiento. El estudio de estos factores compone la rama de la
genética conocida como genética poblacional.
LA LEY DE HARDY-WEINGBERG
La ley de Hardy- Weinberg esencialmente dice que si no hay fuerzas para cambiar las
frecuencias génicas y genotípicas en una población, esas frecuencias se mantienen
constantes.
En una población grande en reproducción, en ausencia de selección, mutación o
migración las frecuencias génicas y genotípicas se mantienen constantes de generación
en generación, y las frecuencias genotípicas se relacionan con las frecuencias génicas
por medio de fórmulas.
Fuerzas que cambian las frecuencias génicas y genotípicas
La ley menciona específicamente la selección, mutación y migración. Sabemos que la
selección modifica las frecuencias. De hecho, el propósito de la selección artificial es
cambiar las frecuencias génicas.
La mutación, el proceso que altera el ADN para crear nuevos alelos, tiene algún efecto
sobre las frecuencias génicas y genotípicas, pero debido a que la mutación es un
evento raro, el efecto es pequeño.
La migración, es el movimiento de individuos hacia dentro o fuera de una población. La
migración particularmente involucra la introducción de un número grande de
individuos genéticamente diferentes en una población, puede tener grandes efectos
en las frecuencias génicas y genotípicas.
La ley de Hardy- Weinberg también expone que una población en equilibrio tiene que
ser apareada de manera aleatoria. Las poblaciones pequeñas se convierten en
consanguíneas rápidamente, y como hemos visto anteriormente, la consanguinidad
cambia las frecuencias genotípicas incrementando la homocigocis. Y en las pequeñas
poblaciones las frecuencias génicas pueden cambiar puramente por casualidad,
fenómeno conocido como deriva genética. El apareamiento aleatorio implica la
ausencia de cualquier esquema de apareamiento sistemático. En nuestro ejemplo del
locus B, si no hubiésemos apareado de manera aleatoria, sino que hubiéramos
aplicado una regla que diga que los genotipos BB solo pueden aparearse con otros
genotipos BB, entonces podríamos haber esperado frecuencias genotípicas diferentes
(y no estáticas). Entonces el apareamiento aleatorio es necesario para el equilibrio
Hardy- Weinberg, y además como sugiere nuestro ejemplo, solo se necesita una
población con apareamiento aleatorio para llegar al equilibrio. El apareamiento
aleatorio entre los animales F1 creó un equilibrio en la generación F2.
La derivación de las fórmulas Hardy- Weinberg relacionando frecuencias genotípicas
con frecuencias génicas es simple. Si las frecuencias génicas en un locus particular en
una población en equilibrio son p y q, entonces las fórmulas son las que aparecen en el
siguiente cuadro de Punnett.
p
q
p
p2
pq
q
pq
q2
No debemos confundir p2 2pq y q2 de Hardy- Weinberg con la razón 1:2:1 esperada
cuando se aparean dos homocigotos. A pesar de que la razón 1:2:1 puede ser
considerada una aplicación especial de la ley Hardy- Weinberg (cuando p=q=0.5), los
dos conceptos son utilizados en contextos muy diferentes.
¿Existen verdaderamente poblaciones en equilibrio Hardy- Weinberg? Claramente no.
Ninguna población es infinitamente grande, apareada perfectamente al azar o libre de
selección natural y mutación. Algunas poblaciones se encuentran muy cercanas al
equilibrio, sin embargo, que las fórmulas Hardy- Weinberg encajen bien puede ser de
gran utilidad.
Como un ejemplo de la utilidad Hardy- Weinberg, vayamos nuevamente a las
poblaciones 1 y 2 y su descendencia F1. El objetivo de hacer este cruzamiento era
mostrar como los cruzamientos en este caso incrementan la heterocigosis. Recuerde
por la figura 4.4 que la frecuencia genotípica de los heterocigotas para el locus B en la
población F1 era 0.74.Determinamos esto multiplicando las frecuencias génicas de las
poblaciones de los padres. Lo que no sabemos son las frecuencias de los heterocigotas
en esas poblaciones originales. Sin embargo podemos calcularlas asumiendo el
equilibrio Hardy- Weinberg. Las frecuencias de las poblaciones heterocigotas en las
poblaciones 1 y 2, como fue determinado por la fórmula Hardy- Weinberg son,
H1 = 2p1q1
= 2(.8)(.2)
= 32
H2 = 2p2q2
= 2(.1)(.9)
= .18
La frecuencia heterocigota promedio en las poblaciones de los padres es (H1+H2) /2 ó
(0.32 +0.18)/2 =0.25.Compare esa figura con la frecuencia de los heterocigotas en los
cruzamientos F1 (0.74). Cruzando las poblaciones 1 y 2, la heterocigosis casi triplicó.
Este es un ejemplo dramático de cómo el cruzamiento aumenta la heterocigosis. Si las
poblaciones de los padres hubiesen sido más similares, (por ejemplo que sus
frecuencias génicas en el locus B no hayan sido tan diferentes), el incremento de la
heterocigosis a partir del cruzamiento hubiese sido menos sensacional pero todavía
evidente.
ACCION GÉNICA:
Es la acción del conjunto de genes sobre el fenotipo del animal. La acción de estos de
acuerdo al valor relativo de expresión de cada genotipo.
Las diversas formas de acción génica pueden ser, que los genes cuando se encuentran
juntos sean: cooperadores unos con otros o interferir en la acción de otro. De acuerdo
a esto la acción pueden ser:
- Aditiva
- No aditiva
- Dominancia
- Completa
- Parcial
- Sobredominancia
- Epistasis
1. Acción Aditiva
En la acción génica aditiva: el heterocigótico tiene un valor igual a la media de los dos
homocigóticos.
Cada gen que constituye el genotipo del animal, promueve un aumento en el valor
fenotípico del individuo independiente de los otros genes presentes. No hay
dominancia entre los alelos. El efecto de cada gen se adiciona al efecto de los demás,
determinando un efecto medio total en el fenotipo del animal.
En este caso no hay dominancia, la expresión del heterocigota está exactamente a
mitad de camino entre las expresiones de los genotipos homocigotas.
Para un ejemplo hipotético, considere la resistencia a una enfermedad en particular –
digamos tuberculosis. Si al exponerse al patógeno de la tuberculosis, los animales con
dos copias del gen resistente a la tuberculosis (Tr) sobrevive el 100% de las veces, los
animales con dos copias para el gen susceptible a la tuberculosis (Ts) y los
heterocigotos (Tr Ts ) sobrevive el 70 % de las veces, entonces no existe dominancia en
el locus. La expresión del heterocigoto está exactamente a mitad de camino entre las
expresiones de los genotipos homocigotos.
2. Dominancia y epistasis
Mendel descubrió que la expresión de un gen en un locus depende del otro gen
presente en ese locus. Sus plantas de arvejas eran o altas o tan bajas que se consideran
enanas. Las plantas enanas eran de genotipo tt, pero las plantas altas eran o TT o Tt
(vea la figura 3.8). El gen para la pequeñez (t) producía un enano cuando estaba
apareado con otro gen t. Pero cuando el alelo t era apareado con un alelo alto T, la
planta no era de un tamaño intermedio como es de esperarse. En cambio, era tan alta
como las plantas TT- el alelo t parecía no tener efecto alguno. Hoy decimos que el alelo
T, es dominante sobre el alelo t. En los heterocigotos, el alelo T se expresa mientras
que el alelo t no. Entonces, se dice que el alelo t es recesivo.
Dominancia
Es la interacción entre genes en un solo locus tal que en los heterocigotos, un alelo
tiene más efecto que el otro. El alelo con mayor efecto es dominante sobre su
homólogo recesivo.
El fenómeno de la dominancia es importante para el mejoramiento animal por dos
razones. La primera se refiere a caracteres de herencia simple como los que estudiaba
Mendel en sus arvejas. Para estos caracteres, la dominancia explica porque
obtenemos varios fenotipos en proporciones particulares cuando hacemos
apareamientos específicos. Entender la naturaleza de la dominancia en estas
situaciones nos permite predecir los resultados de los apareamientos. Este capítulo
contiene ejemplos que involucran caracteres de color del manto.
La segunda razón involucra caracteres poligénicos. Para estos caracteres la dominancia
es la fuente principal de vigor híbrido y de la depresión endogámica. (La epistasis, un
concepto relacionado, es importante para el mejoramiento animal por las mismas
razones).
Los alelos dominantes son usualmente representados por una letra mayúscula y los
alelos recesivos por una letra minúscula. En el locus J, el genotipo JJ es llamado
genotipo homocigoto dominante, el genotipo Jj es el genotipo heterocigoto y el
genotipo jj es el genotipo homocigoto recesivo. La letra o combinación de letras para
representar un locus usualmente es una forma de abreviación relacionada con las
características del gen dominante (por lo tanto el locus T para las plantas altas (tall en
inglés) de Mendel versus las enanas). Desafortunadamente, la literatura genética está
llena de excepciones a esta conversión: Mendel estudiaba loci que afectaban el color y
forma de la semilla en las plantas de arvejas, y estos loci habían sido designados G y W,
a pesar de que el color verde (de green) y la forma (wrinkle ) rugosa eran condiciones
recesivas.
Existen varias formas posibles de dominancia en un locus. Realmente, estas formas de
dominancia no son fundamentalmente diferentes- varían solamente grado.
Dominancia completa
En las arvejas de Mendel, el modo de expresión de genes en el locus T era dominancia
completa. Esta es la forma clásica de dominancia en la cual la expresión del genotipo
heterocigoto no es diferente de la expresión del genotipo homocigota con dos genes
dominantes. Los heterocigotos Tt y los homocigotas TT eran igualmente altos,
fenotípicamente eran indistinguibles.
La dominancia completa es común en una cantidad de caracteres de herencia simple
en los animales. Ejemplos típicos en los bovinos son el carácter mocho (el alelo P para
mocho es completamente dominante sobre el alelo p para astado) y el color del manto
negro o rojo (el alelo B para negro es completamente dominante sobre el alelo b para
rojo).
Muchas condiciones letales, semiletales o deletéreas en animales, involucran
dominancia completa, y el gen problemático es usualmente el alelo recesivo. Un
ejemplo es el síndrome araña en las ovejas. El alelo S es el gen normal en el locus S. El
alelo s es el gen recesivo responsable del síndrome araña- frecuente debilitamiento de
las piernas en corderos. Los individuos SS y Ss son perfectamente normales. Solamente
los corderos homocigotas recesivos ss muestran la condición de araña. Debido a que
los genes deletéreos completamente recesivos pueden ser acarreados y difundidos por
animales heterocigotos aparentemente normales, son de particular preocupación para
los criadores.
La dominancia completa es una de las
formas de dominancia en las cuales los genotipos homocigotos y heterocigoto
dominante tienen la misma expresión fenotípica. A diferencia del color del manto en
los Shorthorn en los cuales cada genotipo (RR, Rr o rr) está asociado con un fenotipo
distinto (rojo, rosillo o blanco), los caracteres afectados por la dominancia completa
tienen más de un genotipo para un fenotipo. Por ejemplo, los bovinos mochos pueden
ser PP o Pp. Como resultado la proporción clásica 1:2:1 esperada del apareamiento de
dos heterocigotos no ocurrirá con dominancia completa.
Para ver como resultan los apareamientos que involucran dominancia completa,
considere cruzas de Angus y Hereford astado. El ganado Angus puro es mocho
homocigota (PP). Por otro lado, los Hereford son astados. Los toros Angus apareados
con vacas Hereford astadas (o viceversa) producen hijos todos heterocigotos pero
fenotípicamente mochos, como puedes ver del cuadro de Punnett siguiente:
Cuando se aparean cruzas Angus X
Hereford entre ellos, se producen hijos
mochos y astados en una proporción de
tres mochos por un astado (vea el cuadro
de Punnett siguiente). Dos de tres del tipo
mocho serán heterocigotos, uno de tres
serán mochos homocigotas.
El carácter mocho no es el único carácter
de herencia simple en el cual difieren
Angus y Hereford. Los Hereford son
colorados. La gran mayoría de los Angus son negros. La combinación de los loci P y B
provee un ejemplo más complejo de dominancia completa. Asumiendo que los toros
Angus son homocigotas para el gen de color negro, el apareamiento de toros Angus
con vacas Hereford produce hijos todos negros y mochos.
Cuando estos son apareados entre ellos, se producen nueve genotipos distintos, pero
debido a la dominancia completa, se reconocen solo cuatro fenotipos: negro/mocho,
negro/astado, rojo/mocho, rojo/astado. Esto sucederá en una relación de
aproximadamente 9:3:3:1
Dominancia Parcial
La característica definitoria de la dominancia completa es que la expresión del
genotipo heterocigota es idéntica a la expresión del genotipo homocigota dominante.
Esto se muestra gráficamente en la figura 3.9.
La línea horizontal representa una continuidad de la expresión génica. Si el locus J
afectara, la altura (como el locus T de Mendel), entonces los puntos de la línea
significarán mayores y mayores expresiones de la altura yendo de izquierda a derecha.
Note que el punto en la línea para la expresión del heterocigota ( JJ’) es idéntico al
punto representando la expresión del genotipo homocigota JJ. Por lo tanto, la
dominancia es completa, y el alelo J es el dominante porque enmascara
completamente la expresión del alelo J’ en el heterocigota.
La dominancia parcial, es representada en la figura 3.10. Con la dominancia parcial, la
expresión del heterocigota es intermedia a la expresiones de los genotipos
homocigotos y se parece más estrechamente a la expresión del genotipo homocigota
dominante.
En la figura 3.10, el genotipo JJ’ se encuentra en algún punto entre J’J’ y JJ. En (a) el
heterocigoto se parece más al homocigota JJ. En este caso el alelo J es parcialmente
dominante sobre el alelo J’ porque tiene una expresión mayor en el heterocigoto. J es
el alelo dominante. La dominancia parcial también es mostrada en la figura (b), solo
que en este caso el heterocigoto se encuentra más cerca de J’J’ que de JJ, haciendo a J’
el alelo dominante.
Un ejemplo del mundo real de dominancia parcial es la condición conocida como HYPP
(Parálisis hiperpotasémica periódica) en los caballos. HYPP causa episodios de
temblores musculares que van desde sacudidas o temblores hasta colapso completo.
En algunas instancias puede ser fatal. EL gen mutante que causa HYPP es heredado
como parcialmente dominante. A pesar de que los signos clínicos de HYPP varían
considerablemente entre los caballos, los síntomas son más severos para los animales
HYPP homocigotos que para los heterocigotos.
El HYPP es un caso particularmente interesante porque se esparce bastante rápido
entre los caballos de espectáculo y placer en los Estados Unidos. Normalmente se
esperaría que un gen dominante deletéreo, sea auto eliminatorio incluso si es solo
parcialmente dominante, después de todo, se expresa en los heterocigotos.
Sin embargo, el gen HYPP no fue rápidamente eliminado, porque (1) no es
completamente letal y (2) los portadores a menudo exhiben musculatura pesada –
característica deseada en las competencias de riendas. El gen ha persistido en caballos
porque la tendencia de los criadores de seleccionar en su favor sin saberlo.
Si compara la dominancia completa como se muestra en la figura 3.9, con la
dominancia parcial como se representa en la figura 3.10, podrá ver que la forma de
dominancia es definida por la posición del heterocigoto en relación a la posición de los
dos homocigotos. Esto es cierto para cualquier forma de dominancia y lleva a una regla
general: Para determinar el tipo de dominancia y el alelo dominante, hay que comparar
las expresiones del heterocigoto con las expresiones de los genotipos homocigotos. Una
forma fácil de hacer estos es usando un diagrama de línea como aquellos en las figuras
3.9 y 3.10.
Sobredominancia
La última forma de dominancia, sobredominancia, es ilustrada en la figura 3.12. Con
sobredominancia, la expresión del heterocigoto está fuera del rango definido por las
expresiones de los genotipos homocigotas y de la expresión más cercana a la del
genotipo homocigoto dominante. La sobredominancia a menudo se caracteriza por
tener un “heterocigoto superior”. “Superior” probablemente no sea la mejor palabra –
“extremo” puede ser la correcta. En la figura 3.12 (a) el heterocigoto se encuentra a la
derecha del genotipo JJ. J es entonces el alelo dominante. En (b) el heterocigoto se
encuentra a la izquierda del genotipo J’J’, haciendo a J’ el alelo dominante.
La supervivencia en ratas salvajes provee un ejemplo de sobredominancia. El gen para
la resistencia al veneno anticoagulante warfarina es heredado como dominante con
respecto a la resistencia al veneno. Ambos, homocigotos y heterocigotos no son
afectados por warfarina. Desafortunadamente – al menos desde el punto de vista de
las ratas- los homocigotas necesitan mayores niveles de vitamina K de lo que está
disponible
en
dietas
normales. Así en lugares
donde la warfarina es
utilizada, las ratas que no
tienen el gen de la resistencia
sucumben
al
envenenamiento, las ratas
homocigotas para el gen
sufren deficiencia de vitamina
K y los heterocigotos
permanecen sanos. Con respecto a la supervivencia el locus de la warfarina desarrolla
sobredominancia.
La sobredominancia es la forma más extrema de dominancia. Si sus cuatro formas son
ordenadas por grado de dominancia, progresarían de ausencia de dominancia a
dominancia parcial a dominancia completa a sobredominancia (figura 3.13)
Errores comunes acerca de Dominancia
El fenómeno de dominancia es a menudo incomprendido. Los estudiantes a menudo
asumen, por ejemplo que los genes dominantes son “buenos” y que los recesivos son
“malos”. En muchos casos tienen razón. Los genes recesivos letales y semiletales son
claramente malos, y hay una razón para creer que la habilidad de los alelos más
favorables de ser dominantes sobre alelos menos favorables es algo que ha
evolucionado a través del tiempo (después de todo los dominantes desfavorables
tenderían a ser eliminados por selección natural).
La teoría del vigor híbrido y de la depresión endogámica está basada en la asunción de
que los alelos dominantes son generalmente más favorables que los alelos recesivos.
Pero hay excepciones a la regla. Claramente el gen HYPP en caballos, parcialmente
dominante, no puede ser considerado favorable con respecto a la salud del animal.
Tampoco pueden los genes para color de manto rojo o la presencia de cuernos en el
ganado ser consideradas necesariamente desfavorables.
Un error más importante es que los genes dominantes son más comunes que los genes
recesivos. En realidad, los genes letales recesivos tienden a ser raros, porque son auto
eliminatorios, y cualquier recesivo desfavorable tiende a convertirse en menos común
porque son seleccionados en contra a través del tiempo. Sin embargo, nuevamente las
excepciones abundan. Por ejemplo, en la población de ganado Hereford astado los
genes dominantes para mocho y color del manto rojo son comunes al punto de ser los
únicos alelos en sus respectivos loci.
Puede ser cierto que generalmente los alelos dominantes son “mejores” y son más
comunes que los alelos recesivos. Sin embargo, es importante recordar que estas
características de alelos dominantes y recesivos no son parte de la definición de
dominancia.
La dominancia tiene que ver con la expresión relativa de los alelos en los heterocigotos
- nada más.
Epistasis
La dominancia involucra interacción de genes en un solo locus porque afectan al
fenotipo de un individuo. Los genes en diferentes loci también pueden interactuar, y
este tipo de interacción es denominada epistasis.
La epistasis puede ser definida como una interacción entre genes de diferentes loci, tal
que la expresión de los genes en un locus depende de los alelos presentes en uno o
más loci diferentes.
Con respecto a los caracteres de herencia simple, la epistasis es como la dominancia,
afecta los tipos y proporciones de fenotipos que podemos esperar de determinados
apareamientos. Y como la dominancia, la epistasis es una fuente de vigor híbrido y
depresión endogámica en caracteres poligénicos.
Un ejemplo de epistasis en herencia simple que es relativamente fácil de entender es
el color del manto en los Labradores retrievers. Los labradores tienen tres colores
básicos: negro, chocolate y amarillo. Estos colores son determinados por genes en dos
loci: El locus B (negro) y el locus E (extensión de la pigmentación), como sigue.
B_E
Negro
bbE_
Chocolate
__ ee
Amarillo
Los guiones en estos genotipos indican que los alelos pueden ser sustituidos sin
cambiar el genotipo. Por ejemplo, los labradores negros pueden ser BBEE, BBEe, BbEE
o BbEe. Los labradores amarillos pueden ser BBee, Bbee, o bbee. Note que la
expresión de los genes en el locus negro depende de los alelos presentes en el locus de
extensión. Entonces siempre y cuando haya al menos un alelo E en el locus de
extensión, no aparece, la dominancia completa en el locus negro, con negro siendo
dominante sobre chocolate. Sin embargo, si el genotipo en el locus de extensión es ee,
entonces los genes en el locus negro son irrelevantes – todos los animales serán
amarillos. Una muestra de los apareamientos de Labradores se puede ver en el
cuadrado de Punnett en la figura 3.14.
El apareamiento de dos animales totalmente heterocigotos negros es representado en
(a). Este apareamiento produce una mezcla de cachorros negros, chocolate y amarillos.
En (b) se aparean dos chocolates (bbEe). Debido a que chocolate es una condición
recesiva, normalmente se esperaría que los chocolate de raza pura produzcan solo
chocolates. Sin embargo, debido al efecto de la epistasis de los genes en el locus E,
este apareamiento también produce cachorros amarillos. Solo los Labradores amarillos
de pura raza (c) – un amarillo apareado con un amarillo producen solo amarillos.
El tipo de acción génica es definido por la posición del heterocigótico relativamente a
la media de los dos homocigóticos
Acción génica
Heterocigótico
Aditiva
d=0
Dom. completa
d=a
Dom. incompleta
0<d<a
Sobredomin.
d>a
Implicancias del modo de acción de los genes
En el caso de la acción aditiva la media de los hijos es siempre igual a la media de los
padres; podemos por lo tanto predecir lo que sucederá en la descendencia, y al
escoger y aparear los animales con valores más elevados vamos a tener descendencias
con media igual a estos. Consecuentemente, la acción génica aditiva será aprovechable
por la selección.
En el caso de la dominancia, los descendientes pueden ser superiores (F1)o inferiores
(F2) a la media de los padres, es decir no podemos predecir con presicion lo que va a
suceder en la descendencia de un apareamiento determinado, por lo que la elección
de individuos con valores de cría más elevados no resulta necesariamente en
descendencia con valores mas elevados.
De cualquier manera se puede ver que, en determinados tipos de apareamientos, el
valor de los hijos puede ser superior al valor medio de los padres, a lo que se le da el
nombre de heterosis. Esta es máxima en la F1, reduciéndose después (F2-F3) a la mitad
del valor observado en la F1. Por lo tanto en el caso de la acción de dominancia,
podemos sacar partido de la heterosispara la utilización en los cruzamientos.