MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL P ERÚ MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE IDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA: REDUVIIDAE) DEL PERÚ ELABORACIÓN: Blgo. ABRAHAM G. CÁCERES LÁZARO División de Entomología. Centro Nacional de Salud Pública MPR-CNSP-019 1 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL PERÚ Catalogación hecha por el Centro de Documentación e Información del Instituto Nacional de Salud (INS) Cáceres Lázaro, Abraham Manual de procedimientos de identificación de triatominos (hemiptera: reduviidae) del Perú/Elaborado por Abraham Cáceres Lázaro. -- Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2005. 60 p.: 15 cm. -- (Serie de Normas Técnicas; 41) 1.TRIATOMA /crecimiento y desarrollo 2. INSECTOS VECTORES 3. CONTROL VECTORIAL 4. TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO 5. PERÚ I. Cáceres Lázaro, Abraham III. Instituto Nacional de Salud (Perú) IV. Perú. Ministerio de Salud ISBN 9972– 857 – 26 – 3 (O.C.) ISBN 9972– 857 – 47 – 6 (N° 41) ISSN 1607– 4904 Hecho el Depósito Legal Nº 1501012005-1348 © Ministerio de Salud, 2005 Av. Salaverry, cuadra 8 s/n, Jesús María, Lima, Perú Teléfono: (511) 431-0410 © Instituto Nacional de Salud, 2005 Cápac Yupanqui 1400, Jesús María, Lima, Perú Teléfono: (511) 471-9920 Fax: (511) 471-0179 Correo electrónico: revmedex@ins.gob.pe Página web: www.ins.gob.pe Publicación aprobada con R.J. Nº 111-2005-J-OPD/INS Portada: Espécimen macho de Triatoma infestans Se autoriza su reproducción total o parcial, siempre y cuando se cite la fuente. MPR-CNSP-019 2 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL P ERÚ CONTENIDO INTRODUCCIÓN 5 SECCIÓN 1 1.1. Objetivo ....................................................................................................... 7 1.2. Campo de aplicación ................................................................................... 7 1.3. Responsabilidades ....................................................................................... 7 1.4. Documentos de referencia ........................................................................... 8 1.5. Definiciones ................................................................................................ 8 SECCIÓN 2 2.1. Disposiciones .............................................................................................. 11 2.2. Principales medidas de bioseguridad .......................................................... 11 SECCIÓN 3 3.1. Generalidades de los triatominos ................................................................ 13 3.2. Los triatominos ........................................................................................... 13 3.3. Ecología de los triatominos ......................................................................... 14 3.4. Ciclo biológico ............................................................................................. 15 3.5. Características morfológicas de los triatominos ......................................... 19 SECCIÓN 4 4.1. Encuesta y vigilancia de triatominos ........................................................... 24 4.2. Método para detectar infestaciones ........................................................... 24 4.3. Examinar los ambientes internos (intradomicilios) y externos (peridomicilios) de una vivienda ............................................................... 25 4.4. Buscar triatominos en ambientes extradomiciliarios (selváticos) ............... 27 4.5. Equipos para capturar triatominos ............................................................. 29 4.6. Envío de triatominos ................................................................................... 29 4.7. Indicadores entomológicos .......................................................................... 31 SECCIÓN 5 5.1. Identificación de triatominos ...................................................................... 35 5.2. Clave taxonómica para triatominos del Perú .............................................. 35 MPR-CNSP-019 3 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL PERÚ SECCIÓN 6 6.1. Montaje de ejemplares de triatominos en alfileres ..................................... 39 SECCIÓN 7 7.1. Estudio de la infección natural .................................................................... 41 7.2. Examen de triatominos para investigar Trypanosoma cruzi o Trypanosoma rangeli ................................................................................... 42 SECCIÓN 8 8.1. Adaptar colonias de triatominos al laboratorio .......................................... 45 SECCIÓN 9 9.1. Xenodiagnóstico .......................................................................................... 46 SECCIÓN 10 10.1. Lista de especies en el Perú ...................................................................... 49 10.2. Triatoma infestans (Klug, 1834) ............................................................... 50 10.3. Panstrongylus herreri (Wygodzinsky, 1948) .......................................... 51 10.4. Rhodnius ecuadoriensis (Lent y León, 1958) .......................................... 52 SECCIÓN 11 11.1. Bibliografía ................................................................................................ 53 ANEXO A .......................................................................................................... 57 ANEXO B .......................................................................................................... 59 ANEXO C .......................................................................................................... 61 MPR-CNSP-019 4 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL P ERÚ INTRODUCCIÓN La enfermedad de Chagas o trypanosomiasis americana es una infección ocasionada por el parásitoTrypanosoma cruzi y constituye un problema de salud pública para América Latina. La enfermedad se distribuye entre el límite de México con los Estados Unidos y el sur de Chile y Argentina lo que corresponde a los paralelos 42º LN y 45º LS. La trypanosomiasis americana es una de las enfermedades prioritarias para el Programa del Banco Mundial de la OMS/UNDP. Después de la malaria, es la más seria y de amplia distribución en los seres humanos de las Américas. Su presencia en el continente americano data de hace más de 2000 años; pues, se ha demostrado el megacolon chagásico y posiblemente cardiopatía en momias exhumadas pertenecientes a los indios Wankarani establecidos en el interior de la Provincia de Tarapacá a 1100 msnm (norte de Chile) procedentes de Bolivia. Los vectores del agente etiológico de la trypanosomiasis americana son los insectos triatominos que se encuentran distribuidos en las regiones neotropicales y neárticas desde los 41º LN y 46º LS. Aproximadamente, 90 millones de personas en Latinoamérica están en riesgo de infectarse con el Trypanosoma cruzi, y se estima que entre 16 y 18 millones de ellas se encuentran infectadas. En el Perú, esta enfermedad es un problema de salud pública que afecta a la población de 15 departamentos, siendo dos las zonas más afectadas: a) Nororiente, y b) Sudoccidental. Con respecto a los triatominos, se han notificado en localidades de algunas provincias de 20 departamentos. En la historia natural de esta enfermedad, uno de los eslabones que permite establecer la medida de control y vigilancia epidemiológica es, sin duda, el estudio de los triatominos transmisores y los factores determinantes para considerarlos vectores efectivos. El control de la enfermedad de Chagas se basa en la eliminación o control de las poblaciones de los triatominos mediante diversas estrategias como el control químico, el ordenamiento del medio y la educación sanitaria. Para ello, es importante también la decisión de organizar y llevar adelante un programa antitriatomínico que debe tener una base en la decisión política a largo plazo para que sustente su permanencia, su vigilancia, así como la formulación y desarrollo de investigaciones. Lo contrario, implica correr riesgos serios en la interrupción del programa, lo que significaría perder los esfuerzos y recursos invertidos, y lo más grave y peligroso, no alcanzar los objetivos. MPR-CNSP-019 5 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) DEL PERÚ El presente Manual de procedimientos de identificación de triatominos (hemiptera: reduviidae) del Perú proporciona de manera sencilla y resumida la información de los aspectos entomológicos básicos y fundamentales para apoyar la investigación y los programas de vigilancia y control de esta enfermedad. Se agradece a todas las personas que de alguna manera han apoyado y brindado facilidades para la redacción del presente manuscrito, en especial al Dr. César Náquira Velarde y al Dr. Alfonso Zavaleta Martínez-Vargas por las sugerencias y la revisión del Manual; a la Dra. Juana Lung de Herrer, por facilitar las referencias bibliográficas, y a los Dres. Alejandro Llamoga Sánchez y Roque Fernández Vera por haber realizado algunas tomas fotográficas de los triatominos, que sirvieron para ilustrar el presente manual. MPR-CNSP-019 6 I NSTITUTO N ACIONAL DE S ALUD MANUAL DE MPR-CNSP-019 P ROCEDIMIENTOS DE I NDENTIFICACIÓN 7 DE TRIATOMINOS (H EMIPTERA : R EDUIIDAE ) I NSTITUTO N ACIONAL DEL DE P ERÚ S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 1 GENERALIDADES 1.1. OBJETIVO Brindar información referente a los procedimientos y técnicas de: 1) captura, 2) conservación, 3) embalaje, 4) transporte de ejemplares, 5) montaje, y 6) identificación de los triatominos, con énfasis en los que han sido incriminados como vectores del agente etiológico de la enfermedad de Chagas; asimismo, el estudio de su capacidad vectorial. Se concluye con la presentación de claves para diferenciar géneros y especies de triatominos notificados en el Perú. 1.2. CAMPO DE APLICACIÓN Para el personal de los laboratorios regionales, intermedios y locales que integran la Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública. 1.3. RESPONSABILIDADES 1.3.1. El Centro Nacional de Salud Pública (CNSP), a través de la Dirección Ejecutiva de Enfermedades Transmisibles (DET), es responsable de autorizar la elaboración, revisión y actualización del presente manual, de acuerdo con los procedimientos aprobados por el Instituto Nacional de Salud. 1.3.2. Los directores regionales de salud y los directores o jefes de los establecimientos de salud son responsables de autorizar, proporcionar los recursos necesarios y designar al personal responsable y calificado para la aplicación y la supervisión de las disposiciones contenidas en el presente manual. 1.3.3. El personal de los establecimientos de salud es responsable de planificar las acciones, organizar, controlar y capacitar al personal; así como de proporcionar equipos, materiales, reactivos e instalaciones. 1.3.4. Los jefes o responsables de los laboratorios deben asegurar el control interno de la calidad. 1.3.5. Los profesionales designados para realizar el diagnóstico son responsables de controlar el cumplimiento de las disposiciones contenidas 7 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 7 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ en el presente manual y, además, de mantener la confiabilidad de sus actividades e informar a las instancias superiores en caso de ocurrencia de variaciones en las especificaciones de los procedimientos establecidos. 1.3.6. El personal asignado para realizar esta actividad, descrita en el presente manual, debe estar calificado para manejar técnicas y métodos de ensayo, aplicar medidas de bioseguridad y de buenas prácticas de laboratorio, y mantener la confiabilidad de las actividades que realiza. 1.4. DOCUMENTOS DE REFERENCIA 1.4.1. Instituto Nacional de Salud. Manual de procedimientos de laboratorio para la obtención y envío de muestras (1). Serie de Normas Técnicas Nº 15, 2da ed., 1997. 1.4.2. Instituto Nacional de Salud. Manual de normas de bioseguridad. Serie de Normas Técnicas Nº 18, 2da ed., 1997. 1.5. DEFINICIONES 1.5.1. Capacidad vectorial. Factibilidad del triatomino para transmitir los trypanosomatideos. 1.5.2. Clípeo. Borde anterior de la cabeza, compuesto de dos escleritos: uno grande posterior, denominado postclípeo y otro pequeño anterior, articulado flexiblemente al postclípeo. 1.5.3. Conexivo. Margen lateral saliente en el abdomen de los hemípteros. 1.5.4. Cópula. Unión física de los insectos machos y hembras. 1.5.5. Doméstico. Triatomino que desarrolla todo el ciclo evolutivo en el interior de una vivienda. 1.5.6. Depredador. Un insecto que naturalmente caza y devora a otros insectos. 1.5.7. Escutelo. Porción posterior de la superficie dorsal del mesotórax, visible en la base de las alas. Es un esclerito triangular en todos los géneros, excepto en el Parabelminus en el que se presenta trapezoidal. La superficie dorsal del escutelo es rugosa, con un área central más o menos deprimida y bordeada por dos o más surcos convergentes; la 8 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 8 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ proyección posterior del escutelo en muchos casos es cilíndrica, elongada y subhorizontal con ápice puntiagudo, redondeado o a veces truncado. 1.5.8. Estercolarios. Agrupamiento de Trypanosoma que lleva a cabo su desarrollo en el intestino del insecto vector. 1.5.9. Exotepterigoto. Adjetivo que se deriva de exopteriota, subdivisión de los insectos que incluye a los hemípteros y otras órdenes cuya metamorfosis o desarrollo a través de su ciclo de vida pasa de huevo a ninfa y a adulto. A esta forma de desarrollo se le denomina también hemimetábolo o metamorfosis incompleta. 1.5.10. Exuvia. Cubierta exterior de la que se despojan los insectos cuando mudan a su próxima etapa de desarrollo. 1.5.11. Gena. Es un segmento de la cabeza ubicado lateralmente al clípeo. El ápice de éste puede ser redondeado o en punta. 1.5.12. Hemiélitro. Alas delanteras de los hemípteros con una porción basal más gruesa y otra porción distal membranosa. 1.5.13. Hábitat. Lugar donde vive en forma natural el insecto. 1.5.14. Huésped. Organismo en el cual se aloja un parásito u otros microorganismos. 1.5.15. Hemíptera. Uno de los 29 órdenes de insectos. Estos poseen alas delanteras denominadas hemiélitros y tienen piezas bucales chupadoras y perforadoras. 1.5.16. Índice de Infestación Domiciliaria (IID). Número de viviendas infestadas sobre el número total de viviendas encuestadas multiplicado por 100; se expresa en porcentaje. Es útil para estratificar áreas por intervenir mediante control vectorial. 1.5.17. Índice Trypano-Triatominico (ITT). Es el número de triatominos infectados naturalmente con Trypanosoma cruzi sobre el total de triatominos examinados multiplicado por 100; se expresa en porcentaje. Es útil para estratificar áreas por intervenir mediante muestreo parasitológico para enfermedad de Chagas y para efectuar el control vectorial. 1.5.18. Metacíclico. Forma infectante del Trypanosoma presente en las heces del vector. 1.5.19. Ocelo. Son ojos simples situados a ambos lados de la cabeza, casi detrás de los ojos compuestos. 9 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 9 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 1.5.20. Operculado. Término que se usa para describir a los huevos que poseen una tapa notoria. 1.5.21. Ovipostura. Postura de los huevos. 1.5.22. Peridoméstico. Insecto que vive en depósitos, corrales de aves u otros abrigos de animales cercanos a las viviendas. 1.5.23. Polimorfismo. Que presenta forma distinta, que no está relacionada con las etapas del ciclo de vida. 1.5.24. Proboscis. Piezas bucales de los hemípteros que forman un tubo enroscado bajo la cabeza. El tubo tiene un estilete que penetra los tejidos del huésped. 1.5.25. Pronoto. Es un esclerito a manera de escudo que cubre el mesotórax de forma trapezoidal, posee dos lóbulos anteriores y dos posteriores; el lóbulo posterior puede presentar una superficie lisa o granulosa y tubérculos distales y laterales. 1.5.26. Rostrum o rostro. Es el órgano picador chupador. Se inserta debajo del lado posterior de la cabeza, a la cual se denomina gula. El rostrum en los triatominos hematófagos consta de tres segmentos; en la gran mayoría de los redúvidos entomófagos el rostrum es curvado. El segundo segmento generalmente es el más largo y el tercero es el más corto. 1.5.27. Surco estridulatorio. Es una depresión o surco localizado en la porción central del prosternum (porción ventral del protórax) donde descansa el ápice del rostrum cuando se encuentra replegado o doblado hacia abajo. 1.5.28. Xenodiagnóstico. Método para el diagnóstico parasitológico de la enfermedad de Chagas, donde se permite que un triatomino no infectado se alimente con sangre del paciente, examinándose el contenido rectal del insecto a partir de los 15 días posteriores, en busca de parásitos que probablemente hayan podido multiplicarse en sus intestinos. 1.5.29. Yugo. Es una placa de la cabeza situada en la base de la gena, es de forma subtriangular y pequeña. 10 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 10 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 2 2.1. DISPOSICIONES 2.1.1. Las disposiciones contenidas en el Manual de normas de bioseguridad. Serie de Normas Técnicas Nº 18, 2da ed., son aplicables para el cumplimiento de las disposiciones del presente manual. 2.1.2. Se debe aplicar las medidas de bioseguridad pertinentes, especialmente las aplicables a: 2.1.2.1. El ambiente. 2.1.2.2. El equipo. 2.1.2.3. El personal. 2.1.2.4. Animales de experimentación. 2.1.2.5. Los triatominos. 2.1.2.6. Las muestras y su procesamiento. 2.1.2.7. La esterilización. 2.1.3. La bioseguridad es un conjunto de medidas preventivas para proteger la salud y la seguridad del personal que trabaja en el laboratorio, frente a diferentes riesgos producidos por agentes. 2.1.4. Es responsabilidad de la dirección del laboratorio, establecer y aplicar las normas y procedimientos de bioseguridad detalladas por escrito. 2.1.5. La dirección del establecimiento de salud debe dar las facilidades para que las normas de bioseguridad se cumplan. 2.1.6. Los principales peligros son las exposiciones por puntura accidental con agujas de jeringas, estiletes, pinzas, etc.; por corte con bisturí, láminas y cubreobjetos contaminados y por exposición en membranas mucosas o en la piel que presenta lesión activa, laceraciones, heridas o rasguños. 2.2. PRINCIPALES MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD 2.2.1. Todos los triatominos deben ser trasladados de su ambiente natural al laboratorio en vasos colectores apropiados, para evitar que escapen. 2.2.2. A todos los triatominos se les debe tratar como potencialmente infectados con Trypanosoma cruzi. 11 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 11 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 2.2.3. En el momento de manipular, identificar y disectar los triatominos, se debe utilizar mascarillas, guantes nuevos y guardapolvo. 2.2.4. Lavarse las manos luego de concluir el trabajo con los triatominos. 2.2.5. Si la persona que va a manipular los triatominos presenta cortaduras o rasguños en las manos y antebrazos, éstos deben ser cubiertos y estar bien protegidos. 2.2.6. Debe utilizarse zapatos que cubran los pies, no debe usarse sandalias o zapatos abiertos. 2.2.7. El procesamiento de los triatominos debe realizarse sobre una superficie de trabajo protegido por papel absorbente plastificado o papel de filtro. 2.2.8. La superficie de trabajo debe ser descontaminada por el operador antes y después de cada actividad. 2.2.9. Informar inmediatamente cualquier accidente al jefe del laboratorio. 2.2.10. Se debe disponer de un ambiente apropiado para el lavado de los ojos en caso de exposición accidental por salpicaduras. 2.2.11. Todos los instrumentos utilizados durante el trabajo con triatominos deben descontaminarse antes de ser eliminados, en solución desinfectante y luego ser autoclavados (121°C durante 20 minutos) o incinerarlos. 2.2.12. Si se trabaja con cultivo para Trypanosoma cruzi, se debe usar una cabina de flujo laminar y mechero Bunsen o mechero de alcohol. 2.2.13. El animal infectado experimentalmente con Trypanosoma cruzi debe ser colocado en una jaula apropiada y segura, a la que se le adherirá una etiqueta que indique ANIMAL INFECTADO CON TRYPANOSOMA CRUZI, para luego depositarla en un ambiente seguro y apropiado. 12 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 12 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 3 3.1. GENERALIDADES DE LOS TRIATOMINOS El orden Hemiptera se divide en cuatro subórdenes: COLEORRHYNCHA HETERÓPTERA AUCHENORRHYNCHA STEINORRYNCHA 1 Familia 75 Familias 28 Familias 41 Familias Fitófagos Fitófagos y Fitófagos Fitófagos predatores En el suborden Heteróptera se ubica la familia Reduviidae con 25 subfamilias, todas de ellas predatoras, excepto la subfamilia Triatominae que es hematófaga y está integrada por más de 100 especies. 3.2. LOS TRIATOMINOS Son insectos del orden Hemiptera. Se caracterizan por poseer aparato bucal succionador; la mayoría son fitófagos, algunos predadores y unos pocos son hematófagos. 3.2.1. Su distribución abarca América y Asia, pero la mayor densidad de las especies se localiza en América. 3.2.2. A los triatominos se les denomina con diversos nombres regionales, como: “chinches hocicones” y “cacarachuelos” en México; “chinches mamones” y “chinches de monte” en Panamá; “pitos” en Colombia; en Venezuela “pitos” y “chipos”; en Bolivia “hitas”; en Ecuador “chinchorros”, “chupasangre” y “chinches de caballo”; en Argentina, Chile, Uruguay y otras partes de Sudamérica se les denomina “vinchucas”; en Perú se les conoce como: “chinches”, “chinchones” y “chirimachas”; en Brasil se les conoce como “barbeiros”. 3.2.3. Estos hemípteros son de tamaño pequeño o mediano, el cual varía considerablemente en los diferentes grupos de géneros, aunque la hembra casi siempre supera al macho en tamaño. La coloración es generalmente sencilla, no obstante, también existen especies con colores vistosos. 13 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 13 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 3.3. ECOLOGÍA DE LOS TRIATOMINOS 3.3.1. La principal característica biológica de los triatominos, tanto de las ninfas como de los adultos de ambos sexos, es la de succionar sangre, principalmente de aves y mamíferos. 3.3.2. Sus hábitats naturales son ecotopos silvestres que sirven de nidos, refugios o lugares de descanso para mamíferos, aves y reptiles; los cuales constituyen sus fuentes naturales de alimentación. Algunos triatominos tienen preferencia por cierta especie en particular, pero la mayoría de ellos se alimenta de una amplia variedad de huéspedes. 3.3.3. Generalmente los triatominos se alimentan durante la noche, pero en lugares oscuros pueden alimentarse durante el día. 3.3.4. La presencia de animales incrementa y preserva la población, pues èstos se constituyen en fuentes de alimentación; algunos animales pueden ser predadores de triatominos, y a la vez desempeñar un papel en la dispersión pasiva de los vectores, constituyéndose como huéspedes y como reservorios de diversos patógenos. Por otro lado, los factores climáticos, principalmente la temperatura, al parecer controlan el índice de incremento de las poblaciones de los triatominos. 3.3.5. Otro factor para la colonización, proliferación y mantención de los triatominos son las condiciones de edificación de las viviendas que crean microhábitats apropiados. En las construcciones de las viviendas se observan hendiduras, rajaduras y grietas en las paredes y techos de barro o cemento; asimismo, en las uniones entre los adobes y ladrillos, los espacios entre tablas de madera, también los techos de hojas de palmeras. Otros factores que favorecen la infestación son el uso de telas como cortinas, el almacenamiento de los productos de las cosechas, el depósito de adobes y el apilamiento de maderas y palos dentro de la casa, y, por último, la presencia de animales domésticos en el interior de las casas, como: cuyes, conejos, gallinas, pavos, perros, gatos, etc. 3.3.6. La picadura es poco dolorosa y se puede soportar, provocando sólo a veces un ligero prurito y en algunas ocasiones una ampolla en el lugar de la picada, siendo la cara, los miembros superiores y los pies los más afectados. 3.3.7. Al momento o después de alimentarse, el triatomino hace una deyección líquida que tiene dos aspectos: uno de color amarillento que se seca rápidamente al contacto del aire, y otro que se seca lentamente y es de color negro. Este comportamiento de picar y defecar se debería a 14 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 14 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ la necesidad del triatomino de succionar más sangre y almacenarla desocupando su intestino. 3.4. CICLO BIOLÓGICO 3.4.1. Los triatominos son insectos hemimetábolos. De huevo pasan por cinco estadios ninfales (Fig.1), en los que son muy parecidos a los adultos pero de menor tamaño y carecen de alas. La obtención de sangre para los triatominos es muy necesaria para la muda y continuación de su desarrollo. 3.4.2. El ciclo de vida de los triatominos oscila entre 4 y 16 meses o más. Muchas especies de triatominos han sido adaptados a condiciones de laboratorio con temperaturas que fluctúan entre 24 ºC y 27 ºC, y a una humedad relativa entre 70% y 75%, con la finalidad de conocer el ciclo biológico de cada triatomino. Respecto de estos estudios se da a conocer lo siguiente: Figura 1. Ciclo biológico de un triatomino. 3.4.3. Huevo Los huevos son colocados entre 10 y 15 días después de la cópula. Algunas hembras no apareadas pueden poner algunos huevos, pero éstos serán infértiles. Las hembras fértiles generalmente ponen huevos una sola vez, pero en muchos casos continúan poniendo huevos durante toda su vida. El número de huevos puestos por hembra y la frecuencia de la ovipostura depende principalmente de la cantidad de sangre ingerida. En la mayoría de los casos, cada hembra pondrá entre 100 y 600 huevos durante su vida. 15 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 15 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Los triatominos son de hábitos terrestres, generalmente colocan sus huevos individualmente o en grupo, en cualquier lugar que encuentre la hembra. Pero las especies que habitan en los árboles –como es el caso de la mayoría de especies de Rhodnius– colocan sus huevos en grupos pequeños adheridos al sustrato. Los huevos son de forma oval, más o menos elípticos (Fig. 2 y 3), presentan un opérculo en uno de sus extremos, por el cual emerge la ninfa I. Al inicio, los huevos son de color blanco-perla o gris, posteriormente cambian a rosado o rojizo a medida que el embrión desarrolla, observándose por transparencia los ojos de la futura ninfa. El tiempo que transcurre desde la puesta de los huevos hasta que eclosiona la primera ninfa varía para cada especie; también varía para una misma especie cuando habitan en regiones diferentes. En algunas especies el tiempo es de entre 10 y 30 días. El corión presenta ornamentaciones que varían según las especies. Figura 2. Huevos eclosionados de Panstrongylus herreri. 16 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 16 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Figura 3. Huevos eclosionados de Triatoma infestans. 3.4.3. Ninfa (Fig. 4) Presenta cinco estadios ninfales. Transcurridos de dos a tres días después de emerger, las ninfas ya están listas para alimentarse; de no conseguir alimento pueden pasar varias semanas en ayunas. Todas las etapas de ninfas normalmente se alimentan de la misma variedad de huéspedes que los adultos presentes en el mismo hábitat. Bajo buenas condiciones, las ninfas pueden ingerir sangre hasta nueve veces su peso, mientras que los adultos, aproximadamente, de 2 a 4 veces. Generalmente, las ninfas que están en el quinto estadio son las que absorben la mayor cantidad de sangre, esto va algunas veces de 400 a 1000 por especie asociada al ser humano. Todos los estadios de ninfa, así como ambos sexos, pueden sobrevivir durante períodos largos sin ingerir alimento, llegando en algunos casos hasta 11 meses. Figura 4. Vista dorsal de una ninfa de triatomino. 17 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 17 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS I DENTIFICACIÓN DE DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 3.4.4. Adulto (Fig. 5 y 6) Los triatominos adultos se diferencian de la ninfa por sus alas anteriores y posteriores bien desarrolladas y por ser sexualmente maduros, con los genitales completamente desarrollados. La hembra copula sólo una vez y después de ser fecundada comienza la postura, antes de los 30 días. En algunas especies pueden observarse hasta 40 posturas que sobrepasan los 200 huevos. Los adultos tienen un par de ocelos sensibles a la luz en la parte posterior de la cabeza, justo detrás de los ojos. Las ninfas no tienen estos ocelos. Figura 5. Triatomino hembra. Figura 6. Triatomino macho. 18 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 18 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 3.5. CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS TRIATOMINOS 3.5.1. Cabeza Es de forma variada. Algunos tienen la cabeza más o menos alargada y otros algo cónica. Se inicia en un ápice simple no dividido, que les permite dar movimientos notablemente libres; además, puede ser relativamente lisa o estar provista de numerosos tubérculos. La cabeza está divida en dos regiones: una situada delante de los ojos denominada región anteocular, y otra posterior llamada postocular; la región anteocular suele ser más larga que la postocular (Figs. 7, 7a). La región anteocular presenta lateralmente dos surcos longitudinales: las genas que limitan una región central estrecha y alargada a la cual se le denomina clípeo, y el epistoma; por detrás de los surcos y un poco por encima de las bases antenales se presentan dos pequeñas prominencias denominadas tubérculos, procesos frontales. La región postocular es relativamente corta, se estrecha hacia atrás para formar el cuello, y en ella se encuentran dos pequeños órganos casi redondeados, hialinos y transparentes que están situados lateralmente por detrás de los bordes superiores de los ojos, son los llamados ocelos, que en algunas hembras ápteras pueden ser rudimentarios o estar ausentes. El rostro, también denominado proboscis, es recto, alargado y delgado, formado por tres segmentos desiguales. Puede ser lanzado hacia delante, pero en reposo se encuentra debajo de la cabeza, llegando generalmente hasta el tórax. Su inserción se hace hacia delante de la región anteocular (Fig. 7a). Las antenas están compuestas por cuatro segmentos, de los cuales el primero es más corto que la cabeza. Se inician a ambos lados de la región anteocular en los llamados tubérculos anteníferos, por delante y a la mitad de los ojos, casi en la extremidad cefálica. Los ojos compuestos son prominentes y anteceden al par de ojos simples u ocelos que, por lo general, están colocados en protuberancias, excepto en las ninfas, las cuales carecen de ellos. 19 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 19 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ A n te C líp e o P o st C líp e o G en a Yug o R e g ió n A n te o c u la r Tu b é rcu lo A n te n ífe ro O jo A ce lo R e g ió n P o s o c u la r C u e llo Figura 7. Vista dorsal de la cabeza. O celos Tu bé rcu lo A nte nífe ro Yu go C lípe o G en a L ab ro R o stro O jo Figura 7a. Vista lateral de la cabeza. 3.5.2. Tórax En esta sección la parte más visible es el protórax, el cual tiene una forma trapezoidal y su cara dorsal o pronoto se halla dividida en dos porciones: una anterior o lóbulo anterior y otra posterior o lóbulo posterior (Fig. 8). La línea divisoria entre los lóbulos generalmente se halla situada más próxima al ápice que a la base y, lateralmente, existen unas expansiones más o menos prominentes llamadas ángulos anteriores o posteriores, según su posición. En los ángulos anteriores o porciones laterales del lóbulo anterior, se encuentran unos pequeños salientes en forma de tubérculos o espinas denominadas 20 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 20 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ tubérculos pronotales anteriores, los cuales se dividen en: a) tubérculo distal y b) tubérculo lateral. Los ángulos posteriores o porciones laterales del lóbulo posterior carecen de salientes, pero su forma puede ser redondeada o aguda. En la parte que se encuentra por detrás del pronoto existe una estructura de forma triangular llamada escutelo, que es corto, cuyo ápice es simple o muchas veces provisto de un proceso elevado agudo o romo (Fig. 8). Lateralmente, el tórax presenta las pleuras que están divididas en tres pares: pro, meso y meta pleura (Fig. 8a). Ventralmente encontramos de delante hacia atrás el pro, meso y metasterno (Fig. 8b). Á ngu lo A n terolateral C ollar Tubé rcu lo D istal L ó bulo Anterior Tubé rcu lo Latera l L ób ulo P oste rior Á ngulo H um eral C arena E scutelo Figura 8. Vista dorsal del protórax y escutelo. P ro ste rn o C oxa A ceta bulo C oxa An terior P ro ple ura E s cu telo M eso ste rn o C oxa M edia R o stro A c etab u lo A n terio r C o xa A nte rior M e tap leu ra M eta ste rn o M e s op leu ra Figura 8b. Vista ventral de la cabeza y el tórax. Figura 8a. Vista lateral de la cabeza, protórax y del escutelo. 21 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 21 C oxa Po ste rior I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Las ninfas carecen de alas, mientras los adultos de ambos sexos generalmente son alados. Los hemiélitros o alas anteriores (Fig. 9) presentan un aspecto peculiar y cubren parcial o totalmente el abdomen, a la vez que presentan diseños típicos. El corio (mitad basal) es mucho más grueso y oscuro que la membrana (mitad apical), la cual, por lo general, presenta manchas y está provista de tres venas longitudinales que incluyen cuatro celdas. Las alas posteriores tienen cinco venas longitudinales, son membranosas y más cortas y finas que las anteriores (Fig. 9a). Las patas caminadoras son largas y delgadas, con las márgenes internas de los fémures inermes o provistas de espinas. Las tibias anteriores y medias de los machos casi siempre tienen fosas esponjosas y sencillas. Los tarsos están formados por tres segmentos y terminan en dos uñas (Fig. 9b). Figura 9. Ala posterior. Figura 9b. Pata anterior. Figura 9a. Ala anterior. 22 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 22 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 3.5.3 Abdomen Es alargado, más o menos ancho, con o sin marcas en su margen lateral al cual se le denomina conexivo. Consta de nueve segmentos en la hembra y diez en el macho; el primer segmento es muy reducido, carece de cerdas y casi siempre está desprovisto de otros apéndices abdominales. Los machos, en la parte extrema del abdomen, tienen una apariencia suavemente redondeada, cuando se les mira desde arriba (Figs. 10 y 10a); mientras que en las hembras, la punta del abdomen tiene una apariencia lobulada o puntiaguda (Figs. 11 y 11a). Hacia los lados y ventralmente se encuentran los estigmas o espiráculos respiratorios. Morfología externa del macho Morfología externa de la hembra Conexivos Ala anterior Extremidad Extremidad redondeada del macho recortada de la hembra Figura 10. Vista dorsal del extremo posterior del macho Figura 11. Vista dorsal del extremo posterior de la hembra Esterrito VI Vista ventral Espiráculo Respiratorio Esterrito VII Esterrito VII Esterrito VIII Esterrito VIII Conapórisis posterior Hipopigio Clásper Tertigio IX Figura 10a. Vista ventral del extremo posterior del macho 23 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd Figura 11a. Vista ventral del extremo posterior de la hembra 23 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 4 4.1. ENCUESTA Y VIGILANCIA DE TRIATOMINOS Procedimiento mediante el cual se determina la presencia de especímenes vivos o muertos de triatominos, rastros de ellos como heces, restos de corión de los huevos y exuvias. Se determina también la tasa de infección natural por Trypanosoma cruzi. Todos los triatominos son de origen silvestre y muchas especies aún se encuentran en sus hábitats naturales; otras especies ya están adaptadas a las viviendas, donde las personas y algunos animales domésticos existentes en el interior o exterior de las viviendas les sirven de alimento; además, la vivienda les brinda protección de las condiciones climáticas desfavorables. Otras especies se encuentran en proceso de domiciliación. Las adaptaciones de los triatominos mencionadas arriba, son producto del deterioro de su hábitat natural, pues al no encontrar alimento suficiente, migran hacia los alrededores de las viviendas o al interior de éstas, adaptándose a ellas, ya que encuentran las condiciones favorables para obtener alimento y reproducirse. 4.2. MÉTODO PARA DETECTAR INFESTACIONES Las infestaciones de las viviendas por los triatominos pueden ser demostradas por el hallazgo de los triatominos o por los residuos del corión (cáscara), exuvias o huellas de heces. La secuencia normal de una inspección, ya sea en un área endémica o no endémica, es la siguiente: 1) Preguntar a las personas que habitan las viviendas si han visto o encontrado triatominos o si han sido picadas mientras descansaban en el interior de sus viviendas. A las personas se les debe mostrar triatominos disecados. 2) Examinar los ambientes internos (intradomicilios) y externos (peridomicilios) de la vivienda. 3) Buscar triatominos en ambientes extradomiciliarios (silvestres). 4.2.1. Informe de las personas La persona encargada de realizar la vigilancia entomológica de los triatominos, debe preparar una buena muestra donde figuren todos los estadios del triatomino. Ésta debe ser mostrada a los habitantes de las viviendas y referirse preferentemente con el nombre que se le conoce localmente. En algunas 24 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 24 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ ocasiones, las personas de las viviendas no pueden reconocer al ejemplar, pero la mayoría de los pobladores de las zonas endémicas las reconocen diferenciándolos con los chinches de cama. Hay que tener presente, que las personas pueden confundir los reduvideos predadores y los fitófagos con los hematófagos. Se debe tener en cuenta que si la vivienda se encuentra altamente infestada, las personas tendrán oportunidad de conocer de la existencia de los triatominos, pero si el nivel de infestación es bajo, probablemente no se hayan percatado de su presencia. En otras ocasiones, los dueños de las viviendas mencionan que éstas están infestadas, cuando en realidad no lo están, con la finalidad de que el tratamiento con insecticidas pueda eliminar a otros insectos como cucarachas, pulgas, etc. 4.2.1.1. Evidencias indirectas de infestación Las pruebas indirectas de infestación están dadas por las huellas de las heces dejadas por los triatominos sobre paredes y artefactos tales como cuadros, almanaques colgados sobre las paredes, etc.; esto demostrará que los triatominos están o han estado presentes en la vivienda. Las heces de los triatominos tienen como característica la forma de goteo de cera de las velas y algunas veces presentan una mezcla de líneas de color negro o marrón muy oscuro. El hallazgo de estos rastros demuestra evidentemente la presencia de los triatominos, pero esto no significa que aún se encuentren en la vivienda. Sin embargo, debemos tener presente que si los rastros son encontrados en cosas expuestas más recientemente como almanaques, por ejemplo, ellos serán la prueba de que aún existen en la vivienda. Un método de encuesta bastante útil es el de colocar o clavar papeles de color sobre las paredes de la vivienda, de esta manera se obtendrán los rastros de heces de los triatominos y así podremos, según las fechas, determinar su presencia reciente. 4.3. EXAMINAR LOS AMBIENTES INTERNOS (INTRADOMICILIOS) Y EXTERNOS (PERIDOMICILIOS) DE UNA VIVIENDA Los triatominos que se han adaptado al interior de las viviendas deberán ser colectados en los diferentes ambientes de la vivienda de la siguiente forma: a) manual, b) con sustancias irritantes, y c) sin uso de sustancias irritantes. 25 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 25 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 4.3.1. Captura manual Preferentemente, en cada vivienda, la colecta debe ser realizada por una sola persona. En cada vivienda, el colector debe buscar a los triatominos durante 15 a 30 minutos. El colector debe buscar detenidamente los triatominos o detectar sus rastros en sus refugios, ya sea grietas y hendiduras de las paredes, techos y corrales de animales, mediante el uso de pinzas y linternas. Adicionalmente, se buscará en las ropas, cajas, muebles, almanaques y otros lugares sombreados. Este tipo de captura presenta la desventaja de que no refleja la estructura etaria de la población de triatominos, ya que algunos permanecen escondidos en grietas donde no puede llegar el hombre. Al finalizar la encuesta en todas las viviendas se realizará el conteo por estadios ninfales, adultos, por sexos y presencia de huevos, asimismo, se contabilizará el número de especímenes por vivienda. Los ejemplares capturados se colocarán en vasos colectores o también se pueden utilizar bolsas de polietileno de acuerdo con el ambiente de captura (cuyeros, dormitorios, cocina-comedor, etc.). En ocasiones son útiles las cajitas de fósforo vacías los vasos deben contener papel plegado que facilitará a los triatominos ocultarse de la luz. Esta misma metodología es empleada para colectar en ambientes peridomiciliarios. El hecho de encontrar triatominos muertos, exuvias o restos de corión de los huevos, es una clara indicación de que la vivienda ha estado infestada, lo que no indica infestación actual. Por otro lado, si sólo se colecta uno o dos ejemplares vivos y no encontramos otras evidencias de infestación, esto podría indicar sólo la presencia casual de los triatominos inmigrantes o de una verdadera infestación. Sin embargo, si se encuentran ninfas vivas en el interior o en los peridomicilios de las viviendas, esto será la prueba más clara de que existe infestación. Los triatominos capturados vivos se deben contar y mantener con vida dentro de los vasos colectores; éstos deberán estar rotulados indicando los datos correspondientes a la fecha, lugar y ambiente de captura, hasta el momento que se realice la identificación y examine las heces para determinar la presencia de trypanosomatideos. Para encuestar un área antes de la campaña de control, es muy importante la participación de los moradores, a quienes, luego de un entrenamiento previo a ésta, se les emplea para que realicen la actividad bajo supervisión. Antes de realizar la encuesta y la campaña de control, es necesario anotar en el croquis de la localidad, la posición de las viviendas, las casas donde se encontraron triatominos vivos y aquéllas donde se encontró evidencias indirectas. Durante 26 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 26 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ la fase de ataque de la campaña de control con insecticidas, todas las casas deberán ser rociadas, sin importar que estén infestadas o no. Por lo que posteriormente al tratamiento es necesario realizar un seguimiento para detectar la eficacia de los rociamientos y ver cuáles son las viviendas que continúan infestadas, con la finalidad de planificar y diseñar la toma de decisiones correspondientes. Si se encuentran rastros de heces sobre las paredes después del control, éstos no son indicadores de que persistan los triatominos, ya que no podría determinarse si fueron dejados antes o después del tratamiento. Además, si la infestación persiste, será probablemente en un nivel bastante bajo, y los triatominos vivos no podrán ser detectados en los 15 y 30 minutos que dura la inspección de la vivienda. 4.3.2. Utilizando sustancias irritantes Se emplea el procedimiento mencionado anteriormente y se aprovecha la acción de algunos piretroides o piretrinas. Mediante esta metodología se incrementa la captura de los triatominos, pero limita que los ejemplares capturados muertos sean usados en otros tipos de estudios. Esta metodología es usada con frecuencia en localidades donde la densidad triatomínica es baja; también se usa cuando se va a programar una encuesta entomológica previa al rociamiento de una zona y transcurrido uno o dos días del rociamiento se programa una encuesta posrociado, donde se recogerá los triatominos muertos después del rociado. 4.4. BUSCAR TRIATOMINOS EN AMBIENTES EXTRADOMICILIARIOS (SELVÁTICOS) Realizar investigaciones de triatominos en el ambiente silvestre es importante para: • Conocer los ecotopos de los triatominos. • Conocer la interrelación trófica en el hábitat. • Evaluar el desplazamiento de los triatominos y las tendencias de dispersión. • Evaluar la capacidad de domiciliación que tienen algunos triatominos al invadir viviendas humanas o peridomicilios existentes en el área. • Estudiar el comportamiento de las especies en sus ecotopos. • Conocer sus enemigos naturales en el micro o macrohábitat. Para ello se emplean los siguientes procedimientos: 27 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 27 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 4.4.1. Expulsión de los ejemplares del interior de su microhábitat mediante procedimientos químicos Para ello se emplean sustancias químicas movilizantes y repelentes, por ejemplo las piretrinas o los piretroides; el inconveniente es que muchos ejemplares mueren al ser capturados y esto limita el estudio posterior. 4.4.2. Disección de hábitats Ha sido utilizado por muchos investigadores. Puede comprender desde deshacer un pequeño nido de aves hasta la disección de una palmera o arbustos. La disección de nidos se emplea para el estudio del área poblacional, del ciclo biológico en el hábitat natural, y además para conocer el hábitat de los triatominos silvestres; asimismo, nos permite determinar los refugios de algunos vertebrados que favorecen la presencia de triatominos. 4.4.3. Trampas sin cebo animal Se basa en el uso de cajas de cartón o madera con agujeros de entrada y con trozos de papel para impedir su salida, o también se puede emplear cañas de bambú que serán colocadas en ambientes como bosques o cuevas. Las trampas son utilizadas con éxito cuando se propone realizar encuestas domiciliarias posrociado. 4.4.4. Trampas con cebo animal Es uno de los métodos más utilizados por sus excelentes resultados. Una de ellas consiste en una caja de madera con dos compartimentos, en uno de los extremos se coloca un animal de sangre caliente (conejo, gato, perro, gallina o rata) y en el otro extremo se colocan embudos pequeños hacia adentro que facilitarán la entrada de los triatominos, pero impedirán la salida. Los vertebrados deberán estar separados de los triatominos capturados mediante el uso de una tela metálica con orificios pequeños. 4.4.4.1. Otro tipo de trampa consiste en una simple jaula rodeada de papel o tela adhesiva, donde quedan adheridos los triatominos que se aproximan a los vertebrados para alimentarse. 4.4.5. Atracción mediante fuente luminosa Se han empleado lámparas que emiten luz ultravioleta. Éstas son de utilidad restringida, pues generalmente atraen triatominos adultos machos. 28 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 28 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 4.4.6. Marcación, suelta y recaptura Esta técnica nos brinda información cuantitativa. Para el marcado de los insectos se pueden emplear polvos fosforescentes de diversos colores e isótopos radioactivos, éstos sólo son aplicados a triatominos adultos y tienen una duración aproximada de 40 días. 4.5. EQUIPOS PARA CAPTURAR TRIATOMINOS Cada laboratorio que pretende realizar o está desarrollando vigilancia entomológica en triatominos o intenta realizar trabajos de investigación con triatominos debe tener o adquirir los siguientes instrumentos: • Pinzas rectas, largas y metálicas de 20 cm. • Alambre grueso de 80 cm de largo. • Linterna. • Cajas de “tecnoport” (poliestireno). • Vasos colectores. • Bolsas plásticas medianas. • Papel periódico plegado. • Cinta “maskingtape” (cinta adhesiva). • Ficha de encuesta. 4.6. ENVÍO DE TRIATOMINOS Los triatominos capturados en las localidades de muestreo deben llegar vivos al establecimiento de salud o al lugar donde se realizará la identificación y determinación si están o no infectados con trypanosomatideos, para ello se usarán los vasos colectores. 4.6.1. Vasos colectores Estos vasos deben ser de preferencia de plástico y de boca ancha de 13 cm de largo x 12 cm de diámetro. La tapa del vaso debe ser a presión. Ésta se debe hacer una abertura de 8 cm de diámetro, la cual debe estar cubierta por una organza. Es recomendable que se coloque papel filtro, periódico o cartulina 29 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 29 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ con dobleces en el interior de los vasos, los cuales le brindarán mayor área de reposo, permanecerán más frescos y tendrán oscuridad (Fig. 12). Figura 12. Vaso colector. Si sólo se capturan adultos, en el vaso se colocará de 10 a 12 ejemplares, pero si los ejemplares capturados corresponden a estadios inmaduros (ninfas) en cada vaso el número será de entre 15 y 20 ejemplares. La tapa se debe colocar a presión, y además debe asegurarse con cinta adhesiva la parte superior del vaso con parte de la tapa; esto se hace con la finalidad de que los vasos no logren destaparse con el movimiento y evitar que los triatominos puedan salir. Cada vaso deberá rotularse con los siguientes datos de captura: localidad, distrito, provincia, departamento, ambiente de captura (peri, intra o extradomicilio, especificando el lugar, por ejemplo corral de aves, dormitorio, cuyero, etc.), área rural o urbana, altitud, hora y fecha de captura y nombre (s) de la (s) persona (s) que realizó la captura. Estos datos deben ser escritos con lápiz en papel o sobre una cinta adhesiva, para luego ser adherida en la parte externa del vaso. 30 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 30 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Los vasos deben ser colocados de costado, unos sobre otros, colocando papel higiénico, servilletas u otro material entre ellos para que les sirva de “colchón”. Éstos serán colocados de costado con la finalidad que los triatominos tengan mayor espacio para desplazarse; también, se pueden colocar en cajas de cartón. La caja de “tecnopor” o de cartón debe ser colocada en el interior de otra caja grande que la protegerá de los golpes, en la tapa externa de ésta se debe rotular la dirección del establecimiento de salud o la del laboratorio referencial regional o del Instituto Nacional de Salud; además, se escribirá en los costados y lugares visibles: FRÁGIL, MATERIAL BIOLÓGICO SIN VALOR COMERCIAL. 4.7. INDICADORES ENTOMOLÓGICOS Las condiciones de riesgo de transmisión vectorial domiciliaria de la enfermedad de Chagas son: a) Que el vector esté presente. b) Que el vector esté infectado. c) Que el vector colonice la habitación humana. Estas condiciones pueden ser traducidas en indicadores que miden el riesgo, los cuales pueden ser categorizados en: 4.7.1. Indicadores Operacionales Sirven para la toma de decisión y tipo de conducta a seguir ante la presencia del vector. Se debe tener presente que, si el objetivo es eliminar al vector, la presencia de éste es condición suficiente para intervenir una zona. Tenemos los siguientes índices: 4.7.1.1. Índice de Dispersión Nos permite conocer el grado de concentración y la distribución del vector dentro de una determinada área o lugar: ID % = Nº de localidades infestadas con triatominos Nº de localidades examinadas 31 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 31 x 100 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 4.7.2. Indicadores de seguimiento y evaluación. Tenemos los siguientes: 4.7.2.1. Infestación domiciliaria En función de la limitada sensibilidad de los métodos de detección por búsqueda activa del vector (hora/hombre) en áreas en que se usa esta metodología, debe considerarse a la localidad como unidad mínima de intervención. En caso de usar métodos permanentes de detección, puede que la unidad de intervención sea la vivienda o casa. ID % = Nº de viviendas infestadas con triatominos Nº de viviendas inspeccionadas x 100 4.7.2.2. Índice de Infestación Intradomiciliaria III % = Nº de intradomicilios infestados con triatominos Nº de intradomicilios inspeccionados x 100 4.7.2.3. Índice de Infestación Peridomiciliaria IIP % = Nº de peridomicilios infestados con triatominos Nº de peridomicilios inspeccionados x 100 4.7.2.4. Índice de Infección Natural (por T. cruzi) ITT % = Nº de triatominos Infectados con Trypanosoma cruzi Nº de triatominos examinados x 100 4.7.2.5. Índice de Colonización IC % = Nº de casas con ninfas de triatominos Nº de casas positivas con triatominos x 100 4.7.2.6. Índice de Densidad ID % = Nº de triatominos capturados 32 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd Nº de viviendas inspeccionadas 32 x 100 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Estos indicadores nos informan sobre el avance y permanencia de los logros a obtener, permitiendo monitorizar indirectamente las actividades, razón por la cual deben ser usados regularmente. 4.7.3. Indicadores del sistema de vigilancia (seguimiento) Estos indicadores serán usados en la validación del sistema de vigilancia, (evaluación del programa). Son los siguientes: 4.7.3.1. Índice de Cobertura IC = Nº de localidades con infestación anterior por triatominos con vigilancia instalada Nº de localidades con infestación anterior por triatominos x 100 4.7.3.2. Índice de Producción a) Nº de unidades de notificación productivas Nº de unidades de notificación instaladas b) Nº de unidades con notificación negativa Nº de unidades de notificación instalada x 100 x 100 4.7.3.3. Calidad de la Producción a) Nº de localidades positivas por vestigios de triatominos N° de localidades con notificación positiva x 100 b) Nº de localidades positivas por captura o captura de triatominos Nº de localidades con notificación positiva c) N.º de local. posit. con captura de triatom. de una especie particular N.º de localidades con notificación positiva 33 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 33 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. x 100 x 100 DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS d) DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) Nº de localidades tratadas Nº de localidades notificadas positivas e) Nº de viviendas tratadas Nº de viviendas notificadas positivas 34 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 34 DEL P ERÚ x 100 x 100 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 5 5.1. IDENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS La persona que se encargará de la identificación de los triatominos debe estar capacitada. Él o ella debe obtener referencias bibliográficas de las descripciones originales u obtener buenas copias; asimismo, debe tener especímenes notificados para su jurisdicción, los cuales deben estar montados en alfileres y conservados en cajas entomológicas que servirán para compararlas con los recién obtenidos. A continuación se adjunta una clave para los triatominos del Perú. 5.2. CLAVE TAXONÓMICA PARA TRIATOMINOS DEL PERÚ La clave taxonómica que se presenta fue elaborada por Elliot A., Guillén Z., Nakashima I., investigadores del Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión” de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, y publicada en la Rev Per Ent 1988, 31:18-20, con el título de: “Identificación de los Chinches Triatominos (Hemíptera, Reduviidae) conocidos del Perú”. Dicha clave es práctica y didáctica para personas que se inician en los estudios de los triatominos del Perú. 1. Ocelos en elevaciones bien destacadas en la región postocular de la cabeza ........ 4 Ocelos no elevados …………………............................................................... 2 2. Cabeza alargada, no muy convexa, vista de perfil, genas que se extienden más allá del clípeo, tubérculos anteníferos lejos de los ojos ....................... 3 Cabeza ovalada, pilosa, muy convexa; genas que no sobrepasan el clípeo; tubérculos anteníferos próximos a los ojos …............................ Cavernícola pilosa Barber, 1937. 3. Primer segmento del rostro tan largo como el segundo, escutelo con procesos triangulares en su base, segmentos dorsales del conexivo con pliegue longitudinal ....................................................................................... Belminus peruvianus Herrer, Lent, Wygodzinsky, 1954. 35 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 35 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Primer segmento del rostro más corto que el segundo, escutelo triangular; sin procesos laterales en su base, conexivo dorsal sin pliegue longitudinal. Fémur sin espina, tarsos muy cortos: 1/5 de la tibia .............................. Microtriatoma tridinadensis Lent, 1951. 4. Cabeza cilíndrica mayor que el doble del ancho, antenas implantadas próximas al ápice de la cabeza ........................................................................... 5 Cabeza con antenas implantadas lejos del ápice de la cabeza ............... 7 5. Cabeza y patas con manchitas irregulares dándoles aspecto jaspead o .................................................................................................................. 6 Cabeza y patas sin manchitas y con escasos dibujos regulares, banda longitudinal clara que se extiende desde el clípeo al cuello ………….….. Rhodnius robustus Larrousse, 1927. 6. Conexivo con manchas grandes oscuras que distalmente terminan en puntas longitud 15 - 22 mm …….................…………… Rhodnius pictipes Stal, 1872. Conexivo con manchas oscuras basales sin puntas, longitud de 12-15 mm ..................................................... Rhodnius ecuadoriensis Lent y León, 1958. 7. Cabeza relativamente corta y ancha, tubérculos anteníferos insertados cerca del borde anterior de los ojos, cabeza y cuerpo lampiños ................... 8 Cabeza cilíndrica, tubérculos anteníferos no cercanos a los ojos, el rostro alcanza el prosterno que presenta surco estridulatorio ............................ 12 8. Apéndice posterior del escutelo alargado, subcilíndrico, estrechado axialmente .................................................................................................... 9 Apéndice posterior del escutelo corto, redondeado, cónico o truncado apicalmente ................................................................................................ 10 36 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 36 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 9. Especímenes casi totalmente negros, conexivo con pequeña mancha roja en los ángulos póstero laterales........................................... Panstrongylus chinai Del Ponte, 1929. Especímenes de color claro, conexivo con manchas en el tercio anterior, vientre con mancha central y 2 laterales ...................... Panstrongylus geniculatus Latreille,1811. 10. Yugo romo, conexivo con mancha en forma de una “F”.................... Panstrongylus rufotuberculatus Champion, 1899. Yugo en punta ............................................................................................. 11 11. Tibias negras con manchita amarilla subbasal ..................... Panstrongylus lignarius Walker,1873. Tibias totalmente negras ….......……......... Panstrongylus herreri Wygodzinsky, 1948. 12. Apéndice posterior del escutelo en forma de espina fuerte, larga de punta afilada; primer segmento del rostro tan largo como el segundo ............ 13 Apéndice posterior del escutelo diferente, primer segmento del rostro más corto que el segundo ................................................................................. 14 13. Lóbulo anterior del pronoto con dos espinas, ángulo humeral espinoso....................................................……........ Eratyrus mucronatus Stal, 1859. Lóbulo anterior del pronoto con dos tubérculos, ángulo humeral terminado en tubérculo ……..………………................................. Eratyrus cuspidatus Stal, 1859. 14. Pronoto negro uniforme ............................................................................. 15 Pronoto oscuro con manchas ................................................................... 16 15. Patas oscuras, conexivo con manchas oscuras en el tercio anterior, corión amarillo y mancha central negra ............................................... Triatoma dimidiata Latreille, 1811. 37 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 37 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Patas oscuras, trocánter, base del fémur y base de la tibia, amarillos, manchas del conexivo, incluyen la sutura ...............…………............. Triatoma infestans Klug, 1834. 16. Patas oscuras uniformes .......................................................................... 17 Patas negras con el ápice del fémur y base de la tibia con estrecho anillo amarillo, conexivo con mancha central oscura...................... Triatoma nigromaculata Stal, 1859. 17. Cabeza oscura, pronoto anterior con margen lateral rojo. Conexivo con una banda central oscura ….............……………....... Triatoma carrioni Larrousse, 1926. Cabeza marrón rojiza con dos bandas longitudinales centrales de color negro, que parten de los tubérculos anteníferos hasta el surco postocular, pronoto anterior con una banda rojiza central y dos sublaterales cortas. Mancha del conexivo no cubre todo el segmento ………………...................…….. Hermanlentia matsunoi Fernández, 1988. Véase Anexo C, para diferenciar las estructuras de algunas especies (Figuras. 13-21). 38 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 38 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 6 6.1. MONTAJE DE EJEMPLARES DE TRIATOMINOS EN ALFILERES Una vez identificados los triatominos (adultos y estadios inmaduros), es necesario que dichos ejemplares sean conservados ya que servirán de referencia. Para el montaje de los triatominos se debe seguir los siguientes pasos: 1° Colocar los triatominos vivos en un envase de vidrio de boca ancha con tapa de rosca hermético (15 cm de alto x 10 cm de ancho), agregar una pequeña porción de algodón embebido con acetato de etilo, el cual permanecerá entre 15 y 30 minutos. 2° Transcurrido el tiempo, retirar el algodón; asimismo, cada ejemplar debe ser colocado en el tablero ajustable para insectos, con la finalidad de extender adecuadamente las patas, la probóscide y las antenas; permaneciendo en ella aproximadamente 12 horas. 3° Se debe seleccionar el número apropiado de los alfileres entomológicos (preferentemente para los adultos de los géneros: Triatoma y Panstrongylus) que pueden ser el número 2 ó 4; mientras que para los del género Rhodnius, como para los otros géneros existentes y para los estadios inmaduros (ninfas) serían los números 0, 1 ó 2. 4° El triatomino será colocado sobre un bloque de “tecnopor” pequeño y al nivel del extremo inferior derecho del pronoto se debe introducir el alfiler seleccionado hasta la tercera parte. Realizado esto, se retira el alfiler del «tecnopor» y se introduce nuevamente en el centro del bloque de cartulina de 10 mm x 5 mm, donde deben estar escritos con tinta china el nombre científico de la especie y el sexo; seguidamente se introduce el alfiler en otro bloque de cartulina de 6 mm x 15 mm, donde se escribe el código de registro del ejemplar para el laboratorio o la institución respectiva; y finalmente, introducir a otro bloque de cartulina de 10 mm x 20 mm, donde se consignarán los datos de captura del triatomino. La distancia entre el ejemplar y el primer bloque de cartulina debe ser de aproximadamente 4 mm, y así sucesivamente del primer bloque de cartulina con el segundo y el segundo con el tercero (Fig. 22). 39 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 39 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Figura 22. Montaje de triatominos en alfileres. 40 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 40 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 7 7.1. ESTUDIO DE INFECCIÓN NATURAL Para determinar si un triatomino está infectado por trypanosomatideos, se deben seguir los siguientes pasos: 7.1.1. La persona que va a manipular el triatomino debe usar guantes, mascarillas y guardapolvo. La manipulación se tiene que realizar en una cabina de flujo laminar y si no se tiene, es necesario adaptar un mechero Bunsen o de alcohol. Además, se debe tener un envase con lejía al 5%. 7.1.2. Separar todos los triatominos muertos encontrados en los vasos colectores, después identificar la especie a la que pertenece, dividir por sexo y estadios, y luego continuar con los ejemplares vivos. 7.1.3. Al ejemplar seleccionado se le coge del tórax con una pinza, luego frotar la parte dorsal y ventral del abdomen con un hisopo humedecido en solución salina con antibiótico y colocarlo en posición dorsoventral sobre una lámina portaobjeto limpia, a unos 0,5 cm de la parte final del abdomen, después dejar caer dos gotas de solución salina. Luego, con otra pinza limpia presionar en el octavo y noveno segmento abdominal con la finalidad de que expulse las heces. Con otra pinza limpia, realizando movimientos suaves en un solo sentido, homogeneizar las heces expulsadas con la solución salina. 7.1.4. Sobre la muestra se coloca un cubre objeto limpio, para ser observado al microscopio con aumento de 10X, depués se pasa a 40X. La observación debe iniciarse en uno de los extremos de la muestra, luego seguir en una sola dirección ya sea en forma longitudinal u horizontal; una vez llegada a la parte final de la muestra se avanza al campo siguiente y se retrocede, siguiendo de la misma forma hasta observar toda la muestra. 7.1.5. Terminada la observación se retira el cubreobjeto. Si la muestra es positiva se deja secar al medio ambiente, luego es enumerada y rotulada con los datos del triatomino capturado incluyendo la fecha de la observación. 7.1.6. Una vez que la muestra ha secado, es necesario cubrirla con unas gotas de alcohol metílico y secar al medio ambiente. Si la observación se realiza en el campo, es necesario fijar la muestra y luego depositarla en los lamineros. Para posteriormente colorearlas en el puesto o centro de salud más próximo. 41 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 41 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ 7.1.7. Es recomendable que la fijación y la coloración de la muestra se realice en el mismo día. Si no es posible colorearla el mismo día, la lámina será colocada en una caja pequeña de “tecnopor” para ser coloreada al día siguiente. 7.1.8. La coloración de la muestra se realizará de dos maneras, según el nivel del laboratorio: a) Cubrir toda la muestra con el colorante Giemsa durante 20 minutos; b) La lámina debe ser introducida en un Koplin conteniendo el colorante Giemsa que cubrirá toda la muestra durante 20 minutos. 7.1.9. Transcurrido el tiempo se debe lavar la lámina coloreada, con la finalidad de eliminar el exceso de colorante. Dejar secar al medio ambiente. 7.1.10. La muestra debe observarse primeramente a 10X, con la finalidad de observar el campo, después a 40X y finalmente a 100X, previamente se debe añadir aceite de inmersión. 7.1.11. Anotar todos los datos en la ficha respectiva adjunta. 7.1.12. Las pinzas y los cubreobjetos utilizados deben ser colocados en el envase que contenga lejía al 5%, en caso contrario pasados por el fuego del mechero. 7.1.13. Todos los triatominos donde se han observado trypanosomatideos deben ser depositados en un envase para posteriormente ser incinerados; mientras que los negativos, si permanecen en buenas condiciones, dejarlos en el insectario para posteriormente ser revisados por segunda vez. Y si continúan siendo negativos, se les da muerte colocando todos los ejemplares en un envase de vidrio de boca ancha y dejando caer algodón embebido con cloroformo. 7.2 EXAMEN DE TRIATOMINOS PARA INVESTIGAR TRYPANOSOMA CRUZI O TRYPANOSOMA RANGELI 7.2.1. El examen individual y completo de los triatominos comprende el examen sucesivo de: 1. Hemolinfa. 2. Glándulas salivales. 3. Intestino posterior. 42 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 42 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Para realizar el examen, es necesario que los triatominos vivos se depositen en envases de vidrio de boca ancha, luego se adiciona una porción pequeña de algodón embebido en acetato de etilo durante 15 minutos. Al momento de la disección, se obtiene fragmentos del cuerpo del insecto, los que deben ser depositados en un envase con lejía al 5% o fenol al 5 %. A continuación se mencionan algunas pautas para realizar los exámenes en triatominos y observar trypanosomatideos en hemolinfa, gándulas salivales e intestino: 7.2.1.1. Examen de hemolinfa. Seguir los siguientes pasos: a) Sobre un portaobjeto limpio, sostener el triatomino a la altura del tórax con una pinza. b) Con el bisturí cortar una pata a nivel del extremo distal del fémur. c) Después presionar suavemente el dorso ventralmente a nivel del tórax. d) Dejar caer gotitas de hemolinfa sobre un portaobjeto, luego colocar el cubreobjeto al microscopio y observar con aumento de 10X y 40X. 7.2.1.2. Examen de glándulas salivales a) Anestesiar al triatomino. b) Colocar el triatomino ventralmente sobre un portaobjeto limpio. c) Con el bisturí cortar el conexivo por sus dos extremos. d) Se levanta suavemente el exoesqueleto dorsal completo con pinzas o estiletes de disección. e) Con estiletes de disección extraer suavemente las glándulas salivales (que son de color rojo y trilobular). f) Preparar un portaobjeto limpio, en el centro colocar una gota de solución salina y sobre ella depositar las glándulas salivales. g) Luego colocar el cubreobjeto y observar al microscopio con aumentos de 10X y 40X. 7.2.1.3. Examen de intestino posterior a) Realizar los pasos del examen de glándulas salivales desde “a” hasta “d”. b) Con una pinza de punta fina se coge el recto y se desliza el intestino (postmesenterio, la región del píloro y la ampolla rectal) suavemente de izquierda a derecha. 43 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 43 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL c) DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Cortar el intestino y depositar en un portaobjeto conteniendo unas gotas de solución salina. d) Colocar sobre el intestino un cubreobjeto. e) Observar al microscopio con aumentos de 10X y 40X. 44 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 44 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 8 8.1. ADAPTAR COLONIAS DE TRIATOMINOS AL LABORATORIO 8.1.1. La crianza de triatominos en los laboratorios es de gran utilidad, pues se usan para realizar diversos estudios, tales como: conocer el ciclo biológico, realizar xenodiagnóstico, conocer la preferencia alimenticia, realizar estudios genéticos, así como para evaluar la persistencia de los insecticidas, etc. 8.1.2. El insectario puede ser una habitación pequeña con cámara climatizada cerrada herméticamente, con paredes lisas y aptas para el lavado. Dicho insectario debe tener estantes de fácil limpieza donde se colocarán recipientes conteniendo diferentes estadios del triatomino por separado. Es necesario prevenir la invasión de hormigas, cucarachas u otros depredadores que puedan afectar a la colonia de triatominos. No se debe usar insecticida en el ambiente del insectario; la temperatura del insectario debe estar entre 24 ºC y 27 ºC y la humedad relativa entre 70% y 75%. Es necesario que la persona encargada del insectario registre todos los días la temperatura y humedad relativa en un cuaderno de notas. 8.1.3. Los recipientes deben ser preferentemente de vidrio o policarbonato de boca ancha, transparente de 30 cm de largo por 18 cm de ancho, y autoclavables. En la base y pared del recipiente se debe colocar papel filtro o secante para absorber las deyecciones de los triatominos. En el interior de cada recipiente se debe colocar papel o cartulina preferentemente de color negro y plegado en forma vertical de menor tamaño que la altura del recipiente. La tapa del recipiente debe ser hermética, pero con un agujero que debe ser forrado internamente con organza. 8.1.4. Para la alimentación de los triatominos, se emplea una variedad de aves, como: pollos, gallinas, palomas; también se pueden utilizar ratones criados en laboratorio, etc. Al momento de la alimentación es necesario tener presente que el animal no debe moverse, si el animal es de tamaño regular es necesario sedarlo, administrando clorhidrato de ketamina en dosis que varía entre 10 y 60 mg/kg. La alimentación de los triatominos será por un periodo de 30 minutos. 45 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 45 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 9 9.1. XENODIAGNÓSTICO 9.1.1. El xenodiagnóstico es una técnica introducida por Brumpt en 1914, que viene a ser un procedimiento en el que se utiliza triatominos para detectar la infección por Trypanosoma cruzi en el hombre y otros mamíferos. 9.1.2. Para el xenodiagnóstico se emplean estadios inmaduros de triatominos, especialmente ninfas criadas en el laboratorio del III y IV estadio; si no se tuvieran estos estadios, se pueden usar ninfas del II o V estadio; las cuales deben estar libres de infección y no deben de haber ingerido sangre unos 25 a 40 días. En el laboratorio, se examina el contenido rectal del insecto a partir de los 15 días después de la alimentación –su alimentación ha sido sobre aves (gallinas)– con la finalidad de buscar Trypanosoma sp. que se hayan multiplicado en el intestino del insecto. 9.2. A continuación, se mencionan los pasos a seguir: 9.2.1. La persona encargada de aplicar este método debe usar guantes quirúrgicos, tener cajas de madera cilíndrica de 3 cm de altura x 3,5 cm de diámetro, cuyo interior debe ser forrado con papel de filtro que sirve como absorbente de las materias fecales y para evitar el exceso de humedad, asimismo para mantener colonias de triatominos adaptados al laboratorio. 9.2.2. En la caja de madera cilíndrica (Fig. 23), se debe colocar entre 6 y 10 ninfas del III o IV estadio, la abertura de la caja debe estar cubierta con una organza sujetada con un par de bandas elásticas; esto se hace con la finalidad de facilitar la respiración y la alimentación de las ninfas. 9.2.3. La abertura de la caja cilíndrica cubierta con la organza se aplica sobre el miembro superior del paciente con sospecha de tener Trypanosoma en sangre circulante, preferentemente en la parte anterior del antebrazo, ésta deberá estar sujeta al antebrazo con una banda elástica o cinta engomada, permaneciendo en esa posición entre 20 y 30 minutos (Fig. 24). 46 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 46 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Figura 23. Caja de madera cilíndrica. Figura 24. Xenodiagnóstico. 9.2.4. Durante el tiempo expuesto, como las ninfas están ávidas de alimentarse, van a obtener sangre del antebrazo de la persona. 9.2.5. Una vez transcurrido el tiempo, los triatominos alimentados (que han aumentado de volumen) serán transferidos a nuevos vasos colectores, en cuyo interior debe colocarse previamente papel plegable, los cuales se 47 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 47 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ transportarán al insectario que debe tener las condiciones de temperatura y humedad relativa ambiental adecuadas, donde se las mantendrán sin realimentarlas. 9.2.6. Transcurridos 15 días después de la alimentación se deben obtener las muestras a examinar, en busca de formas móviles de Trypanosoma cruzi; éstas se obtendrán mediante diversas metodologías: a) Por presión abdominal suave para lograr una gota de deyecciones (deposiciones u orina del insecto), lo que debe repetirse a los 30, 60 y 90 días cuando son negativas, b) Por presión abdominal entre los 30 y 45 días, y en caso que resulte negativa, repetir a los 30 y 60 días y extraer el intestino de la ninfa, el cual se triturará y homogeneizará. 48 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 48 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 10 10.1. LISTA DE ESPECIES EN EL PERÚ Hasta el momento se han notificado 18 especies de triatominos en el Perú. De algunas de ellas se amplía la distribución geográfica, otras abarcan alrededor de 5 departamentos y otras de distribución restringida. Los triatominos han sido capturados en ambientes intra, peri y extradomicilios de zonas urbanas y rurales de los valles occidentales e interandinos, así como también en zonas de la selva alta y selva baja. A continuación, se mencionan las especies notificadas hasta el momento para el Perú: • Triatoma infestans (Klug, 1834) • Triatoma dimidiata (Latreille, 1811) • Triatoma carrioni (Larrousse, 1926) • Hermanlentia matsunoi (Fernández-Loayza, 1989) • Triatoma nigromaculata (Stal, 1872) • Panstrongylus herreri (Wygodzinsky, 1948) • Panstrongylus chinai (Del Ponte, 1929) • Panstrongylus rufotuberculatus (Champion, 1899) • Panstrongylus geniculatus (Latreille, 1811) • Panstrongylus lignarius (Walker, 1873) • Rhodnius ecuadoriensis (Lent y León, 1958) • Rhodnius pictipes (Stal, 1872) • Rhodnius robustus (Larrousse, 1927) • Belminus peruvianus (Herrer, Lent & Wygodzinsky, 1954) • Microtriatoma trinidadensis (Lent, 1951) • Eratyrus mucronatus (Stal, 1859) • Eratyrus cuspidatus (Stal, 1859) • Cavernicola pilosa (Barber, 1937). 49 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 49 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Ahora bien, se mencionarán algunas especies de triatominos que están incriminados como vectores de Trypanosoma cruzi y Trypanosoma rangeli: 10.2. Triatoma infestans (Klug, 1834) Especie considerada como vector principal de Trypanosoma cruzi en el sur del Perú, es una especie doméstica (Fig. 25). Al realizar encuestas entomológicas se obtuvieron índices elevados de densidad, infestación domiciliaria y niveles de infección por T. cruzi. Tiene una distribución geográfica en los vallles occidentales de la costa sur del Perú, desde los departamentos de Ica, Arequipa, Moquegua y Tacna; y valles interandinos de Ayacucho (Provincia de Paucar de Sarasara) y Apurímac (a lo largo del valle Pachachaca). Se ubica geográficamente en el área entre los paralelos 13º y 18º 20" latitud sur. En la zona de distribución geográfica, la altitud se circunscribe desde el nivel del mar hasta los 3500 msnm. Figura 25. Un espécimen macho de T. infestans. 50 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 50 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ Herrer menciona que esta especie ingresó al Perú en las dos últimas décadas del siglo XIX procedente de Chile mediante una dispersión pasiva, como por ejemplo: traslado de enseres domésticos y animales. En 1958 fue registrado en Lima. Los índices más elevados de infección domiciliaria se asocian a las áreas donde se dedican a la crianza del cuy (Cavia porcellus), estos animales son considerados como excelentes reservorios del T. cruzi. Las viviendas de estas áreas están construidas con adobe, quincha o estera; y en los ambientes peridomésticos las personas encierran o crian porcinos, bovinos, caprinos, ovinos y aves, los cuales crean condiciones favorables para que el triatomino permanezca en la vivienda. 10.3. Panstrongylus herreri (Wygodzinsky, 1948) Especie considerada importante en la transmisión de T. cruzi en la zona Nororiental del Perú (Fig. 26). Está circunscrita a los valles interandinos de los ríos: Pucará, Chinchipe, Marañón y Huallaga, se incluyen a las provincias de San Ignacio, Jaén, Cutervo y Santa Cruz (Cajamarca); Bagua, Utcubamba, Luya, Rodríguez de Mendoza (Amazonas); Lamas, Moyobamba, Rioja (San Martín) y La Mar (Ayacucho), hasta el momento no se han notificado en los valles occidentales del norte. Figura 26. Un espécimen macho de P. chinai. Estudios realizados por diversos investigadores, desde su descripción hasta la fecha, mencionan que es una especie de hábitos domiciliarios en mayor porcentaje, pero también se les encuentra en ambientes peri y extradomiciliarios de la región de la selva húmeda entre los 400 y 1650 msnm. 51 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 51 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ El grado de domiciliación está asociado a la convivencia del hombre con el cuy y otros animales domésticos; asimismo, a la presencia de animales silvestres que ocasionalmente se acercan a las viviendas construidas con adobe, quincha o madera, tales como: Didelphys sp., Rattus norvegicus, Rattus rattus, Akodon sp, etc. En esta zona, a este especie de triatominos la conocen con el nombre de “chinche grande”. En algunas zonas de Utcubamba (Amazonas) el índice de infestación domicliaria supera el 55% y el índice de trypano-triatomino sobrepasa el 45% (Cáceres et al., 2002). 10.4. Rhodnius ecuadoriensis (Lent y León, 1958) Especie que se distribuye en la zona noreste del Perú (Tumbes, Piura, Lambayeque, Cajamarca, La Libertad y Ancash). En 1970, Herrer menciona la infección con T. rangeli en ejemplares capturados de la región nororiental. En 1972, en Piura se encontró ejemplares de esta especie infectados con T. cruzi y T. rangeli; y en Cajamarca, con T. rangeli. En la zona de Chicama se han encontrado ejemplares infectados por T. rangeli. Náquira et al., (1972) consideran a esta especie como domiciliaria y silvestre (Fig. 27). Sus hábitats preferidos son los gallineros y palomares, pero también se le ha encontrado en palmeras (Elaeis guineensis). En Ecuador, se le ha encontrado en nidos de marsupiales. En ambientes intradomiciliarios se han capturado sólo ejemplares adultos; pero también es frecuente encontrarlos próximos a los lugares donde encierran cuyes, asimismo, en los huecos de los árboles. Figura 27. Espécimen de R. ecuadoriensis. 52 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 52 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ SECCIÓN 11 11.1 BIBLIOGRAFÍA • Arrarte J. Nota preliminar acerca de la infección natural del Panstrongylus chinai (Del Ponte 1929) por el T. cruzi. Rev Med Peru; 1955, 26: 447-8. • Cáceres A, Troyes L, Gonzales A, Llontop E, Bonilla C, Murias E, Heredia N, Velásquez C, Yáñez C. Enfermedad de Chagas en la región nororiental del Perú. I. Triatominos (Hemiptera, Reduviidae) presentes en Cajamarca y Amazonas-Perú. Rev Per Med Exp Salud Publica. 2002; 19: 17-23. • Cerisola JA, Rohwedder RW, Del Prado CE. 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SILVESTRE RAMA S DE BLOQU ES DE BLOQU ES DE M A D R IG U E R A PALMERA TRONC OS ROCA S AMBIENTES DE JEFE DE FAMILIA VIV IENDA P ROCEDIMIENTOS FECHA DATO S METEO ROLÓGICOS Y ALTITUD TEMPER ATURA: HUM EDAD RE LATIVA: ALTITUD DE UBICACIÓN G EOGRÁFICA DEPARTAME NTO: PROVINCIA: DISTRITO: LOCALIDAD: FICH A N º: ................... FICHA DE CAPTURA DE TRIATOMINOS ANEXO A MANUAL DEL DE P ERÚ S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) 58 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd DE 58 DEL I NSTITUTO N ACIONAL P ERÚ DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ ANEXO B ENVÍO DE ESPECÍMENES DE TRIATOMINOS DISA / Subregión de Salud: UTES / Ubass: Establecimiento de Salud: Establecimiento de Salud: 1. Datos de captura (Nivel local): Nº de muestra Fecha de captura Procedencia Altitud msnm Provincia Distrito N° de ejemplares Localidad Lugar de captura Responsable de la captura Fecha de remisión _______________________________________________________________________ 2. Laboratorio regional / subregional (Nivel regional): Estadios Nº de muestra Adultos Macho Total positivos a T. cruzi Ninfas Hembra I II III IV ITT % Especie identificada V Fecha de observación: Responsable del laboratorio __________________________________________________________ 3. INS- Diagnóstico confirmatorio: Nº de muestra Provincia Distrito Nº de ejemplares examinados Fecha de examen Ejemplares positivos a T. cruzi Especie identificada ITT % Responsable __________________________________________________________ 59 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 59 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:34 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) 60 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd DE 60 DEL I NSTITUTO N ACIONAL P ERÚ DE 28/04/05, 05:34 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ ANEXO C Se ilustra algunas estructuras diferenciales de los triatominos peruanos, incriminados como vectores de la Trypanosoma cruzi y T. rangeli. A B D C E Figura 13. Panstrogylus geniculatus. A) Vista dorsal de la cabeza. B) Vista lateral de la cabeza. C) Vista lateral de la parte anteocular de la cabeza. D) Diseño de la parte ventral del abdomen. E) Esquema del fémur anterior. 61 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 61 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:35 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) A DEL P ERÚ B D C Figura 14. Panstrongylus herreri. A) Vista dorsal de la cabeza. B) Pronoto. C) Escutelo. D) Vista lateral de la cabeza y parte anterior del tórax. 62 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 62 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:35 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ A C B D Figura 15. Panstrongylus chinai. A) Vista lateral de la cabeza. B) Vista dorsal de la cabeza y el pronoto. C) Escutelo. D) Esquema del conexivo dorsal. 63 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 63 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:35 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) A DEL P ERÚ B C Figura 16. Triatoma infestans. A) Vista dorsal de la cabeza. B) Esquema de la pata media. C) Vista lateral de la cabeza. 64 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 64 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:35 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ A B D C Figura 17. Triatoma carrioni. A) Hembra: Cabeza y parte anterior del pronoto. B) Hembra: Vista lateral de la cabeza. C) Macho: Vista dorsal de la cabeza. D) Escutelo. 65 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 65 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:35 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ A B D Figura 18. Rhodnius ecuadoriensis A) Cabeza, pronoto y escutelo. B) Cabeza, vista lateral. 66 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 66 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:35 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ A B C D Figura 19. Rhodnius robustus. A) B) C) D) Vista lateral de la cabeza. Cuello. Vista dorsal de la cabeza. Esquema del escutelo. 67 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 67 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:35 p.m. DE S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN T RIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DE DEL P ERÚ B A C Figura 20. Rhodnius pictipes. A) Vista dorsal de la cabeza. B) Vista lateral de la cabeza. C) Antena. 68 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 68 I NSTITUTO N ACIONAL DE 28/04/05, 05:35 p.m. S ALUD MANUAL DE P ROCEDIMIENTOS DE I DENTIFICACIÓN DE TRIATOMINOS (HEMIPTERA : REDUVIIDAE) DEL P ERÚ B A C D E Figura 21. Belminus peruvianus. A) B) C) D) E) Vista vertral. Vista lateral de la cabeza. Hemielitro. Vista dorsal de la cabeza. Escutelo. 69 MPR-CNSP-019 manual de CHAGASnueva versión.pmd 69 I NSTITUTO N ACIONAL 28/04/05, 05:35 p.m. DE S ALUD CEPREDIM La imprenta de tu universidad SE TERMINÓ DE IMPRIMIR EN EL MES DE ENERO DE 2005, EN LOS TALLERES GRÁFICOS DEL CENTRO DE PRODUCCIÓN EDITORIAL E IMPRENTA DE UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS JR. PARURO 119. LIMA 1. TELEFAX: 428-5210 CORREO ELECTRÓNICO: CEPEDIT@UNMSM.EDU.PE TIRAJE: 1000 EJEMPLARES LA manual de CHAGASnueva versión.pmd 71 28/04/05, 05:35 p.m.