TRABAJO FINAL DE GENÉTICA USO DE LA ESTERILIDAD MASCULINA PARA EL MEJORAMIENTO VEGETAL Profesor: Juan Arias Integrantes: Gerardo Alvarado Gaudenclo Rodríguez Natalia Sequeira Pablo Zapata Guácimo, 11 de agosto de 1997. INTRODUCCIÓN Desde hace muchos años se han buscado nuevas tácticas de mejoramiento genético enfermedades y con para encontrar mejores variedades características resistentes productivas. a Los mejoradores genéticos se han encargado de buscar las mejores opciones para obtener líneas puras que sean accesibles para el productor y que tengan buenos rendimientos. Una de las técnicas más efectivas encontradas es la creación de semilla híbrida, con alta capacidad heterótica, ésta semilla por sobredominancia es superior a ambos padres. Sin embargo, esta característica sólo se presenta en la primera generación, debido a que en los cruces de híbridos aparece una segregación, provocando la eliminación de homocigosis fenotípica. La híbridos herramienta es más utilizada para la creación de la androesterilidad. Esta puede definirse como la incapacidad de un gameto masculino para fecundar el óvulo, a causa de su falla de funcionalidad por causas genéticamente determinadas. (Comide et al, 1985) La androesterilidad puede dividirse en tres tipos de esterilidad: ¾Esterilidad funcional en este tipo de esterilidad el polen no existe, pero los estambres son indehiscentes. ¾Esterilidad polínica: se caracteriza por la ausencia escasa presencia de polen. ¾Esterilidad existe mal estaminal: formación ausencia de estambres. ésta del se presenta androceo o cuando cuando hay Ahora bien, la fertilidad femenina no se ve afectada por la esterilidad masculina, además se logra una clara diferenciación con respecto a los mecanismos de incompatibilidad, en los cuales los estambres son normales y el polen es funcional, al menos en la fecundación de ciertos genotipos. (Cordine et a1, 1985) Por otra parte, en el transcurso de la evolución la androesterilidad ha podido conducir a la separación de los sexos. La androesterilidad no es un fenómeno que ocurre ampliamente en condiciones naturales, sino que más bien sólo aparece esporádicamente. Aunque estos mutantes son perjudiciales en las poblaciones naturales, resultan de gran utilidad para los mejoradores, porque les proporcionan la posibilidad de castrar genéticamente las plantas. Su uso es cada vez mayor en la producción de híbridos, presenta la necesidad de que el mejorador de plantas se familiarice con su base genética y su expresión. (Comide et al, 1985) Con respecto puede al dividirse génica, determinismo en tres genético tipos androesterílidad de la androesterilidad diferentes: androesterilidad citoplasmática y androesterilidad génica-citoplasmática. OBJETIVOS Este trabajo de investigación bibliográfica fue realizado con los siguientes objetivos: i. Enriquecer nuestros conocimientos en El campo del mejoramiento genético vegetal. ii. Conocer la importancia mejoramiento vegetal. de la androesterilidad para el ANDROESTERILIDAD GÉNICA La androesterilidad génica está dada por genes nucleares. La naturaleza recesiva, de estos aunque genes también es1 se en la conocen mayoría genes de los casos, dominantes que determinan la androesterilidad, como sucede en la zanahoria y en el algodón. La representación de los genes de androesterilidad se efectúa mediante la abreviatura ms ( male-sterile) y un subíndice que permite realizar la distinción en el caso que existan varios. (Comide et al, 1985) ANDROESTERILIDAD CITOPLASMÁTICA La androesterilidad citoplasmática se atribuye a factores citoplasmáticos: y es transmitida de generación en generación en forma continua1 siempre que se disponga un individuo que actúe como polinizador, ya que el citoplasma de la descendencia es casi totalmente materno y, en consecuencia, la descendencia de la planta androesteril será también androesteril. (Comide et al, 1985) No se conoce un solo caso donde la androesterilidad sea únicamente de origen citoplasmático, lo que equivale a decir que en la especie considerada no existen genes restauradores de la fertilidad. La androesterilidad citoplasmática puede transmitirse por medio de injertos en ciertas ocasiones, por lo que ha traído que algunos autores le atribuyan una naturaleza viral. Por ejemplo, si se injerta una remolacha de tipo O (que es fértil con un citoplasma normal y los genes recesivos de la esterilidad) sobre una planta androestéril, tanto el injerto como su descendencia se tornan androestériles. Sin embargo, el citoplasma androestéril puede ser transformado en androfértil por efectos del calor. (Comide et af, 1985) Cabe aclarar que los citoplasmas androestériles aparecen frecuentemente después de cruzamientos entre especies diferentes o variedades muy alejadas. Un ejemplo de esto es el caso de los cruzamientos de las variedades de trigo Triticum timopheevi y Tritícum vulgare, el reemplazamiento de los cromosomas por retrocruce de T. timopheevi por T. vulgare, en un citoplasma T. timopheevi, ha permitido la aparición de la androesterilidad citoplasmática en el trigo.( Comide et al, 1985) ANDROESTERILIDAD GÉNICO-CITOPLASMÁTICA Este entre tipo genes de y androesterilidad factores depende de citoplasmáticos. la interacción Difiere de la androesterilidad citoplasmática en que la descendencia de las plantas androestériles no es necesariamente androestéril, sino que puede ser androfértil, en dependencia del genotipo de la planta que actúa como polinizador. Este tipo de androesterilidad fue encontrada en 1944 con la variedad androestéril de cebolla Italian red, de acuerdo con los investigadores se pueden establecer dos tipos de citoplasma: fértil (F) y estéril (S). La presencia de genes restauradores hace la diferencia en este tipo de androesterilidad. Todas las plantas con citoplasma fértil producen polen viable, y se pueden presentar cualesquiera de los siguientes genotipos: FRR, FRr y Frr.(Comide et al, 1985) El gen dominante R tiene la propiedad de restaurar el citoplasma S. De esta forma, los genotipos SRR y SRr permiten la formación de polen fértil, mientras que el genotipo Srr no tiene la capacidad de restaurar la fertilidad. (Comide et al, 1985) CONTROL GÉNICO DE LA ANDROESTERILIDAD EN PLANTAS SUPERIORES Se considera la existencia de dos tipos de control génico de la androesterlíldad en las plantas superiores: ¾Androesterilidad funcional ¾Androesterilidad debida a la acción de los genes ms. Androestirlildad funcional Este tipo de androesterilidad es producido por la acción de genes mutantes, los cuales provocan una ausencia de diferenciación de los puntos de crecimiento en diferentes formas especificas. estambres Bajo como diferenciación. la los En influencia tejidos otros de de la mutantes estos genes, arcospora tanto no funcionales, los presentan se producen células germinales masculinas1 pero la fertilización de la célula huevo no tiene lugar, bien porque las anteras permanecen cerradas, o bien por la separación espacial entre las anteras y el estigma.(Comide et al, 1985) Existen muchos mutantes masculinas y femeninas determinados que las los funcionales, que se pero producen existen, células además, mecanismos genéticamente condicionados que impiden células polinización en o germinales fertilización. masculinas El genomio se de utilicen Pisum en la contiene algunos genes que son los responsables del funcionamiento de los mecanismos de abertura de las anteras. En estos mutantes, la microsporogénesis es normal y se producen los granos de polen, pero estos no pueden ser utilizados porque permanecen dentro de los sacos polínicos.( Comide et al, 1985) La androesterilidad puede estar provocada también por genes que realizan estambres una en transformación carpelos. Esta parcial o completa acción génica de los dirige la transformación de las flores hermafroditas unisexuales femeninas. (Comide et al, 1985) Androesterlildad debida a la acción de los genes ms Esta androesterilidad influye directamente sobre el curso de la microsporogénesis y no actúa en la macrosporogénesis. Los genes ms provocan la ruptura del proceso de microsporogénesis en un estadio meiótico específico para cada gen del grupo. La ruptura se produce mediante la degeneración de las células madres del polen, impidiendo la producción de células germinales masculinas, mientras que los órganos sexuales femeninos presentan un funcionamiento normal, por lo cual estos pueden ser utilizados como progenitores femeninos en los programas de cruzamiento.(Comide et al, 1985) Genes que influyen sobre la microsporogénesis. Los genes que influyen en la microsporogénesis son los que provocan una gran diferenciación en uno de los puntos de crecimiento, dando como resultado que los órganos sexuales masculinos no se encuentren presentes o que no sean capaces de funcionar normalmente. Ahora bien, se conocen algunos genes que provocan la ruptura completa de dicho androesterilidad proceso, que está y de esta completamente forma, se produce condicionada. A una estos genes los designan como ms en la literatura. La microsporogénesis comienza normalmente en estos mutantes y, en un estadio meiótico, específico para cada gen ms, se produce una degeneración de los cromosomas, del núcleo y finalmente de las células madres del polen. Estos genes provocan que en estos mutantes las células germinales masculinas no lleguen a producirse. ( Comide et al, 1965) A pesar del comportamiento meiótico uniforme de los mutantes androestériles, la androesterilidad condicionada genéticamente no es un fenómeno verdaderamente uniforme. Se conocen por lo menos cuatro grupos diferentes de mutantes androestériles en las plantas superiores. Por la acción de los genes recesivos simples. Por la acción de los genes dominantes simples. Por la acción conjunta de varios genes recesivos. Por la cooperación de los genes ms con un tipo específico de citoplasma. UTILIZACIÓN GENOTI PICA Y AMBIENTAL SOBRE LA ANDROESTERILI DAD CITO PLASMÁTICA La utilización del carácter androestéril citoplasmático ha permitido la producción más eficaz de semillas híbridas y el aprovechamiento práctico de la heterosis en F1. Sin embargo, la reacción estéril citoplasmática está condicionada a factores tanto genéticos como genotípicos y ambientales. En las experiencias llevadas a cabo para determinar la reacción estéril (o fértil) de las líneas o combinaciones híbridas androestériles citoplasmáticas, se obtuvo el efecto diferencial de diferentes genotipos y recuperación) de de distintos la ambientes expresión de la en la modificación reacción estéril. (o Los resultados demostraron la necesidad de verificar la reacción para la esterilidad citoplasmática de distintas líneas individualmente y en diferentes combinaciones híbridas en el área amplia de su posible difusión en diferentes años. (Bokde, 1971) Se observaron las diferencias significativas entre los distintos genotipos, como así también entre los 5 citoplasmas estériles. A su vez la interacción entre citoplasmas y genotipos en la expresión de la reacción estéril en plantas F1 fue muy significativa, indicando la reacción diferencial de distintos genotipos según la fuente de esterilidad citoplasmática. Además se observó una interacción marcada de citoplasmas estériles con las condiciones ambientales, demostrando una variación estéril variable de cada citoplasma bajo condición particular del ambiente. (Bokde, 1971) UTILIZACIÓN PRÁCTICA DE LA ANDROESTERILIDAD Algunas aplicaciones de la androesterilidad son: Obtención de híbridos F1 que es el caso mas frecuente, Introducción en variedades sintéticas. Obtención partenocárpicas, de frutos como se sin hace semillas en naturalmente las en la variedades mandarina Clementina cuando se encuentra alejada de polinizadores extraños. Producción de flores en plantas ornamentales. (Comide et al, 1985) De todas las anteriores, la más importante es la obtención de híbridos F1, con la finalidad de explotar la heterosis, que es uno de los objetivos fundamentales en el mejoramiento de algunos cultivos. Las variedades F1 se obtienen por el cruzamiento de dos líneas homocigotas y se utilizan diferentes técnicas en su producción; Emasculación manual. Control de la polinización de las plantas hembras en los cultivos aislados. Fenómenos de autoincompatibildad y de competencia entre el autopolen y el alopolen. Androesterildad con determinismo génico-citoplasmático: que resulta el procedimiento más práctico para obtener, en las especies hermafroditas, líneas o clones únicamente femeninos. Como ventajas de las variedades híbridas F1 se puede mencionar: a) Los híbridos F1 permiten introducir caracteres deseados que son controlados por genes dominantes, como ciertas resistencias a enfermedades. b) Se puede obtener un gran número de combinaciones con un restringido número de líneas. c) Es posible la producción en gran escala de fenotipos heterocigóticos particulares, como puede ser, por ejemplo, una coloración específica en una especie floral. Entre los inconvenientes de las variedades mencionar: híbridas cabe a) En las especies alógamas, la producción de líneas homocigotas no es siempre fácil o posible. Las líneas obtenidas, son poco vigorosas, con un mal comportamiento en condiciones culturales normales. Además, son productoras de semillas con muy mala germinación. b) El número de genes letales es eliminado a causa del proceso de homocigosis (y algunos juegan un papel muy importante en la población natural para el efecto de la heterosis), esto implica una pérdida potencial en el vigor híbrido como consecuencia del poco conocimiento de los genes que presentan las resultantes del proceso de endogamia. (Comide et al, 1985) líneas UTILIZACIÓN DE LA ANDROESTERILIDAD GÉNICA Suponiendo que la androesterilidad está determinada por un gen recesivo ms, el procedimiento a seguir en un programa de obtención de semilla híbrida, utilizando este tipo de androesterilidad sería: a) Cruzamiento Ms Ms X ms*ms Ms ms b) Parte de semilla obtenida se reserva y la otra se siembra, obteniéndose la siguiente proporción: Ms ms x Ms ms ¼ MsMs + ½ Msms + ¼ c) msms Toda la semilla obtenida se siembra en líneas alternas junto con las que habían reservado de tipo Msms, según el esquema de siembra siguiente: A ¼ Ms Ms ½ Msms ¼ msms B Msms A ¼ MsMs ½ Msms ¼ msms B Msms Antes de la antesis, se eliminan los fenotipos fértiles de los surcos A en los que hay mezcla de genotipos (correspondientes a los genotipos Msms y MsMs). Sólo quedarán los individuos msms, que al ser polinizados por las plantas Msms de los surcos B, producirán una descendencia con 50% de plantas androestériles y 50% de fértiles heterocigóticas. Msms X Msms ½ Msms + ½ msms d) de Esta mezcla genotípica de semillas ya puede ser multiplicada forma indefinida, exclusivamente la siendo semilla suficiente producida sobre para ello plantas recoger msms, que habrán sido marcadas convenientemente. e) Para obtener la semilla híbrida comercial, es suficiente sembrar en líneas alternas la semilla de la variedad V1, que ha sido conservada en la forma indicada, y semilla de la otra variedad V2. Eliminando antes de la antesis las plantas fértiles de los surcos de la variedad V1, se obtendrán híbridos de cruzamiento V1x V2. La discriminación de plantas fértiles y androestériles en el campo puede hacerse por observación de las flores. Sin embargo, existe el riesgo de que si las diferencias morfológicas entre las flores fértiles y estériles no se aprecien bien hasta el momento de la antesis, y que se efectúe la eliminación de forma tardía. (Comide et al, 1985). UTILIZACIÓN DE LA AN DROESTERILIDAD CITOPLASMÁTICA Este tipo de androesterilidad se transmite de generación en generación, ya que el citoplasma de las plantas hijas es el mismo que el de la madre. El mantenimiento de la androesterilidad es, por lo tanto, fácil y seguro siempre que se disponga de un polinizador adecuado. También es utilizable en plantas ornamentales, puesto que el periodo de floración es más largo en las plantas que no producen semillas que en las plantas fértiles, y en las especies cultivadas vegetativamente. Si la especie se cultiva por polinización semilla, de las sería plantas necesario asegurar androestériles con una las buena de otra variedad o línea fértil. (Comide et al, 1985) UTILIZACIÓN DE LA ANDROESTERILIDAD GENICO-CITOPLASMÁTICA Este tipo de androesterilidad ofrece mayores perspectivas en la mejora genética y ya ha producido sus frutos prácticos, como se prueba en la cebolla, el maíz, y el sorgo, entre otros. (Comide et al, 1985) Con el citoplasma pueden actuar uno o dos pares de genes que restauran la fertilidad1 aún en combinación con el citoplasma estéril. Se presenta el siguiente modelo genético: estéril (S) y normal o fértil (F), y un par de alelos (R y r), de modo que pueden darse los siguientes genotipos y fenotipos: (S) rr..........androestéril (S) RR (S) Rr (F) RR androfértiles (F) Rr ( F) rr La utilización de la androesterilidad génico-citoplasmática como medio de utilizar la heterosis en un programa de mejoramiento, estará de acuerdo con el aprovechamiento que se haga de la especie cultivada, ya sea por sus partes vegetativas o por sus semillas. (Comide et al, 1985) METODOLOGÍA PARA EL APROVECHAMIENTO COMERCIAL En un gran número beneficio que aporta finalidad de producir de la plantas cultivadas, androesterilidad, híbridos. A se sobre continuación utiliza todo se el con la presenta algunos casos en el cual ha sido utilizada la androesterilidad para el mejoramiento genético: Tomate. En 1915 se encontró la primera planta androestéril en tomate. El mutante encontrado presentaba bases hereditarias monogénicas recesivas y la ausencia de polen. Aunque determinadas condiciones parcial, ambientales esto Conjuntamente a pueden no asegura la los estudios de condicionar una dehiscencia androesterilidad la completa. incompatibilidad intra e interespecífica del género Lycopersicon, se comenzaron a realizar estudios de la esterilidad atribuible a la interacción génico citoplasmática. En el caso especifico del tomate, que presenta una antesis distribuida sobre un largo periodo de tiempo, son necesarios tratamientos repetidos que provocan la androesterilidad total. El amplio número de mutantes androestériles disponibles presenta un alto grado de variabilidad en la expresión de la androesterilidad consiguiente, es bajo diferentes posible condiciones encontrar ambientales. mutantes y Por condiciones ambientales en las cuales se facilite la obtención del mayor grado de expresión de la androesteriiidad.( Comide et al, 1985) Los genes ms-32 y ms-35 han sido utilizados en Francia para la obtención de híbridos comerciales, realizándose un estudio en cuanto a su situación en los grupos de ligamento. El gen ms-35 fue utilizado exitosamente en combinación con la resistencia al virus del mosaico del tabaco, controlado por el genotipo Tm22 Tm1/++ en la producción de híbridos F1 de tomate Este alelo tiene una utilización cada vez mayor en la producción de semillas híbridas de tomate en Francia. ( Comide et al 1985) Maíz. De las plantas cultivadas el maíz es una de las que más atención ha recibido por parte de los genetistas y mejoradores de las plantas, que han explotado toda la variabilidad genética presente en las colecciones mundiales de esta planta. Un ejemplo de la aplicación de la genética a este cultivo es la obtención de semilla híbrida. La semilla que se ha utilizado en más de una generación después del cruzamiento, no presenta las ventajas F1, a causa de la segregación. Por consiguiente cada ano es necesario recurrir a la F1, si se desea uniformidad y vigor híbrido. La semilla comercial puede obtenerse del cruzamiento entre dos híbridos provenientes de cuatro líneas parentales diferentes. Aunque las plantas obtenidas no son todas iguales entre si, la uniformidad fenotípica es satisfactoria y el precio de la semilla mucho más caro que el de la producida mediante polinización libre. Las líneas puras que se van a cruzar se deben sembrar en campos aislados de otras fuentes de polen. La línea utilizada como progenitor debe ser emasculada antes de que produzca polen. Los cruzamientos simples se usan para la producción de semilla híbrida a cuatro vías. Se ha establecido un método que elimina la emasculación de la línea femenina mediante la utilización de las androesterilidad génico-citoplasmática. Línea A: progenitor macho con factor citoplasmático y ningún restaurador. Línea A1: Idéntica desde el punto de vista de los factores génicos nucleares, sin factor citoplasmático ni restauradores. Evidentemente la primera se mantiene de manera indefinida en presencia de la segunda. Línea B: Sin factor citoplasmático y sin restaurador. Se cruza A x B sembrándolas alternadamente, como se hace en la producción de semilla híbrida, con la diferencia que no se practica la emasculación en A. El producto del cruzamiento será el híbrido A x G androestéril. Línea C: Con la presencia del factor citoplasmático y la ausencia del restaurador al igual que en A. Debido a eso la línea deberá de ser mantenida con una gemela C1 sin esterilidad citoplasmática ni restauradores (equivalente a A1). Línea D: con restauradores. Se cruza C x D como se hizo con A x B, aunque el resultado es diferente, a causa de la dominancia del gen restaurador el híbrido resultará fértil. Se procederá entonces a sembrar A x B estéril alternadamente con C x D fértil, aunque heterocigótico para el gen restaurador, obteniéndose de esta forma el híbrido doble (a cuatro vías) que dará 50% de plantas androestériles y 50% de plantas normales. (Comide et al, 1985) Con el fin de encontrar híbridos adaptados a las condiciones de los diferentes investigación con ambientes el productivos, cultivo del se maíz realizó una utilizando la androesterilidad para resolver los problemas de estrés que se le puede presentar a la planta durante su desarrollo. Uno de los experimentos consistía en sembrar maíz híbrido con una alta densidad; en total se realizaron 5 experimentos bajo diferentes condiciones (con malezas, exceso de agua, sin agua, sin malezas, alta densidad y baja densidad). Los resultados obtenidos indica que las mezclas de plantas androestériles-androfértiles, constituían una herramienta válida para aumentar la estabilidad del rendimiento ante una limitación en la oferta de los recursos del ambiente. (Uhart et al, 1995 ) Sorgo. Se encontró en 1959 en Day Milo la androesterilidad génico citoplasmática la cual es de muy simple uso y muy segura por su respuesta. Se realizaron cruzamientos de Milo y Kafir buscando androesterilidad génico-citoplasmática. La primera generación fue fértil, pero se encontró androesterilidad en la segunda generación. Los primeros híbridos realizados con este sistema se obtuvieron cruzando Day Milo x Combine Kafir 60. Este sistema de androesterilidad se denominó A1 y consiste en la interacción de los genes nucleares de Kafir con el ADN de las organelas del citoplasma de Milo. La restauración de la fertilidad se produce por la presencia de un gen dominante que poseen las líneas Milo. El uso continuo de un mismo citoplasma ocasione reducción de la variabilidad, pues muchas madres de híbridos se parecen ya que deben esterilizarse en el citoplasma Milo. Otro problema es que los padres se restringen a aquellos que restauren la fertilidad. (Shaw et al, 1988) En 1964 se encontró el citoplasma 9E como fuente de la androesterilidad, pero era diferente a Milo. Se realizaron estudios con dos direcciones; 1) Uso de isolíneas que difieren sólo en sus citoplasmas, en cruzamiento con grupo de líneas testigos, para evaluar la respuesta en F1. Todo esto con el objetivo de identificar nuevas líneas mantenedoras y recuperadoras de la androesterilidad. Se utilizaron líneas que comúnmente son usadas en la producción de híbridos: BTx 378 y BTx 399 utilizadas como madres de híbridos en el citoplasma A1 (Milo); RTx 4309, RTAM 428, RTx 434, RTx 432, SC 103-12, RTx 2767, RTx 2737 citoplasmas utilizados A1, ya que como padres actúan como de híbridos en recuperadores los de la androesterilidad sobre dicho citoplasma. El estudio realizado, demostró que las líneas BTx 378 y BTx 399 se comportaron como estériles en los tres citoplasmas; esto confirma el porqué de su utilización como mantenedoras en el citoplasma A1 para la producción de híbridos comerciales. Las líneas RTx 432 y SC 103-12 se comportaron como recuperadoras de androesterilidad, esto brinda la posibilidad de realizar nuevas combinaciones de líneas para la producción de híbridos comerciales utilizándose como líneas recuperadoras las líneas RTx 432 y SC 103-12. (Shaw et al, 1988) Arroz. El CIAT, con el objetivo de incorporar un gen de androesterilidad obtenido por la mutación artificial en una línea recurrente de arroz de riego, realizó una investigación, la cual consiste en el cruzamiento entre material androestéril (Tox 10114-1) y un polinizador ocasional (COL 1/M312A); para la obtención de F1 y F2. Se seleccionaron las plantas androestériles para cruzarlas con un padre recurrente (CT 6047-13-5-3-4-M). El padre recurrente se retrocruzamientos vuelve (BC1, a BC2 emplear y BC3) para hasta realizar poder tres llegar a la obtención de la isolínea androestéril (CT 6047-13-5-3-4-M). (Mora et al, 1990) En la población F2 del BC1 se establecieron las diferencias entre las plantas androestériles y las androfértiles por las características plantas morfológicas androestériles asociadas presentaron a escaso la floración. desarrollo en Las la formación de las anteras, producción de semillas y una tardía floración; dichas plantas presentaron un porte más bajo que las fértiles Ahora bien, el número de panículas por planta fue mayor en las plantas androestériles, posiblemente debido a la ausencia de semillas en dichas plantas. (Mora et al, 1990) Las observaciones anteriores permiten corroborar la existencia de un excelente nivel de expresión de androesterilidad incorporada en las líneas seleccionadas. Esto indica un gran acierto en el plan de conversión genética y de obtención de isolíneas androestériles de proyección, para futuros planes de recombinación mediante selección recurrente. CONCLUSIONES I. Los mejoradores variedades genéticos resistentes rendimiento han a con el fin enfermedades utilizado la y de encontrar con un androesterilidad mayor vegetal como un medio para el mejoramiento genético de algunas variedades por medio de la producción de híbridos. II. La androesterilidad no afecta la fertilidad femenina, ya que una planta puede ser androestéril, ya sea por la ausencia de polen o por la mala formación del androceo, pero esto no viene a afectar la fertilidad del pistilo. III. La androesterilidad puede dividirse en Androesterilidad génica, que está androesterilidad factores dada por citoplasmática, citoplasmáticos y la genes que es nucleares, atribuida androesterilidad a génico- citoplasmática, que depende de la interacción entre genes y factores citoplasmáticos. IV. Existe el tipo de androesterilidad funcional, en la cual puede que hayan células masculinas y femeninas funcionales, pero que por ciertos factores el polen no puede ser usado para la fertilización. V. Existe el tipo de androesterilidad funcional, en la cual puede que hayan células masculinas y femeninas funcionales, pero que por ciertos factores el polen no puede ser usado para la fertilización. VI. La androesterilidad generación en citoplasmática generación y es la se mas transmite usada para de el mejoramiento genético de algunas especies, tales como: el maíz, el tomate, el sorgo, el arroz, entre otros; la androesterilidad citoplasmática ha permitido producción más eficaz de semillas híbridas. la REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Bodke, S. 1971. Influencia genotípica ambiental sobre la androesterilidad citoplasmática. Estación Experimental Regional Agropecuaria. Pergamino, Argentina. No 105; pp 33-34. Cornide, M. T; Lima, H; Galvez, G; Sigarroa, A. 1985. Genética Vegetal y Fitomejoramiento. Editorial Cientifico~Técnica. La Habana, Cuba. Mora, J; Estrada, E; Sarkarung, S. 1990. Transferencia de genes de androesterilidad a una línea avanzada de arroz de riego. Acta Agronómica (Col). 40 (3-4); 17-18. Uhart, S.A; Frugone, M.I; Terzzoli, G; Andrade, F,H. 1995. Androesterilidad en maíz y tolerancia al estrés. INTA Balcarde. Balcarde, Argentina. No 136; 23 pp. PREG UNTAS TEMA: USO DE LA ESTERILIDAD MASCULINA PARA EL MEJORAMIENTO DE VEGETAL 1- ¿CUALES SON LOS TRES TIPOS DE ESTERILIDAD? 2- ¿CUALES SON LOS TRES TIPOS DE ANDROESTERILIDAD Y EN QUE SE DIFERENCIAN? 3- ¿COMO SE DA LA ANDROESTERILIDAD? 4- ¿COMO SE DA LA ANDROESTERILIDAD POR ACCION DE GENES? 5- ¿EN QUE SE UTILIZA LA ANDROESTERILIDAD? 6- ¿MENCIONE LAS TECNICAS DE PRODUCCION PARA LA OBTENCION DE HIBRIDOS? 7- ¿CUAL ES LA TECNICA OBTENCION DE HIBRIDOS ? DE PRÓDUCCION MAS PRACTICA 8- ¿MENCIONE TRES VENTAJAS DE LAS VARIEDADES HÍBRIDAS? 9- ¿QUE PROBLEMAS PRESENTAN LOS HIBRIDOS? 10- ¿COMO SE OBTIENEN LAS SEMILLAS HIBRIDAS DEL MAIZ? PARA LA ESCUELA DE AGRICULTURA DE LA REGIÓN TROPICAL HÚMEDA LA CLONACIÓN Y SUS APLICACIONES Integrantes: Armijos Christian Durán Ricardo Estrada Erwin Tasso Fiorella Profesor: Juan Arias Guácimo, 10 de agosto de 1997 ESCUELA DE AGRICULTURA DE LA REGIÓN TROPICAL HÚMEDA LA CLONACIÓN Y SUS APLICACIONES INTRODUCCIÓN Durante los últimos años se han desarrollado nuevas tecnologías en el área de las ciencias biológicas. Estos nuevos conocimientos se están aplicando a la agricultura, la ganadería, la producción de alimentos, la producción de medicamentos, y en el diagnóstico de enfermedades en seres humanos, aún antes de que estos nazcan. A éstas técnicas se las ha llamado de muchas formas; ingeniería genética, manipulación genética, clonaje molecular y más genéricamente biotecnología (Rodríguez, 1989). Quizá una de las técnicas más poderosas con que cuenta la biotecnología y específicamente la ingeniería genética es el clonaje. Ya hace más de 40 años en que Watson y Crick descubrieron la estructura y la función del ADN como la biblioteca donde se encuentra almacenada toda la información genética de un organismo (Salisbury y Jensen, 1994). El clonaje es el proceso mediante el cual se duplica la información genética o ADN de un individuo. Este proceso ha sido utilizado desde hace mucho tiempo atrás. Un ejemplo de ello ha sido la propagación de determinadas especies vegetales por medio de estacas. Sin embargo en los últimos años esta técnica ha sido mejorada para el beneficio del ser humano (Salisbury y Jensen, 1994). Uno de los desarrollos más importantes es la aplicación de la donación en la reproducción vegetativa de plantas, en la cual, los horticultores han perfeccionado la técnica y en la actualidad se pueden obtener poblaciones completas de plantas a partir de un solo individuo. Uno de los casos más llamativos en este sentido es el de la naranja sin semilla, originada a partir de un único árbol en el sur de California, Estados Unidos. Los cientos de miles de árboles de esta naranja que hoy día se encuentran produciendo se lograron a partir de una planta original. Sin embargo, existe una nueva técnica de donación, que no implica la utilización de pedazos completos de un organismo, sino que se toman masas de células, que a su vez se deshacen, y de cada célula individual se desarrolla una planta completa. En este contexto en la actualidad es posible tomar un pequeño fragmento de tejido de un individuo, o tal vez incluso una sola célula, la cual se puede emplear para generar un nuevo ser de características idénticas (Salisbury y Jensen, 1994). También se hace uso de microorganismos conocidos (bacterias, levaduras, hongos, virus y otros) con el objetivo de duplicar la información genética de ciertas características de interés al ser humano, como la producción de hormonas, reproducción de ADN, entre otras (Jensen y Salisbury, 1994). OBJETIVOS - Definir el concepto de donación y los beneficios que tiene el ser humano a partir de este proceso. Dar a conocer las diferentes áreas en que la donación es aplicable. Determinar los diferentes métodos por los cuales se hace uso de esta práctica. REVISIÓN DE LITERATURA Casi tan pronto como Watson y Crick propusieron helicoidal del ADN en 1953, se comenzó a predecir que los científicos tendrían la capacidad de modificar el forma que ellos desearan. Se pensaba que el ADN el modelo algún día ADN en la producido especialmente se podría introducir en las células, con lo cual se desarrollarían nuevos organismos de acuerdo con las instrucciones que los biólogos moleculares hubiesen especificado. Aunque todo esto eran comentarios de prensa> incluso publicaciones más especializadas, existían graves problemas que resolver antes de lograr tales objetivos. Las sustancias, por una parte no entran y salen rápidamente de las células, las que a su vez cuentan con mecanismos para enfrentar la intrusión de partículas extrañas; además el ADN se encuentra por si mismo protegido y no se puede manejar con facilidad. Sin embargo, en los últimos años se ha avanzado notablemente, logrando que hoy aquellos problemas ya no representen grandes obstáculos, y cada día se está más cerca del momento en el que las manifestaciones genéticas sean más comunes (Salisbury y Jensen, 1994). Uno de los desarrollos más importantes es el resultado de modificar la técnica antigua de la donación. El hombre haciendo uso de los avances tecnológicos de la ciencia ha logrado perfeccionar ésta técnica en las distintas áreas de interés, con el objetivo de obtener distintos beneficios, estos van desde el campo agropecuario hasta los avances en la medicina de los últimos tiempos (Rodríguez, 1989). En el contexto agropecuario se han desarrollado formas de reproducción vegetativa que han dado como resultado poblaciones completas de plantas a partir de un solo individuo, uno de los casos más llamativos fue la propagación de la naranja sin semilla originada a partir de un solo árbol. Las plantas de naranja sin semilla que hoy se encuentran produciendo se obtuvieron a partir de una planta original o sus esquejes. No obstante en la actualidad con el mejoramiento de la técnica de donación no se requiere de partes completas de un organismo para ser reproducidos, sino que ahora se pueden tomar masas de células de este organismo para propagar de cada una de estas una población completa (González y Vega, 1992) Esto ya sé esta aplicando comercialmente con plantas de interés agrícola. El inicio del cultivo de tejidos vegetales es un ejemplo de esto, con esta metodología se puede obtener un mayor número de plantas a partir de un escaso material genético seleccionado como patrón. Es así como a partir de meristemos y ápices se han propagado en gran escala algunas plantas tropicales. El banano (Musa acuminata L.AAA) es un ejemplo de ellas, mediante esta técnica se han producido ciento de miles de plantas libres de plagas y enfermedades, lo que elimina la dispersión de estos parásitos en el material de siembra y mejora la productividad (Arias y Valverde, 1997). El tejido de cultivo o micropropagación tiene su mayor capacidad de propagación en especies arbóreas, ya que muchas especies como el poró (Erytrina spp.) muestra ciertas deficiencias en la propagación por estacas, debido a la pérdida de la capacidad de enraizamiento a medida que el árbol de origen envejece; además los árboles portadores de estacas deben ser los suficientemente maduros como para expresar sus características, es por ello que se dificulta la obtención de grandes cantidades de plantas a partir de un solo patrón seleccionado mediante este método. Una opción es utilizar la metodología del tejido o micropropagación. La principal ventaja reside en su gran capacidad de multiplicación vegetativa a partir de fragmentos de órganos o tejidos de una sola planta madre seleccionada (Berrios et. al., 1991). Actualmente el mayor auge que ha tenido la técnica de donación, es el transplante de embriones en animales. La técnica consiste en colectar oocitos de animales poco valiosos y remover la información genética propia de la madre luego se toman los núcleos (información genética) del embrión valioso que se desea "donar" y se inserta uno en cada oocito. Así de un embrión de cuatro células se produce cuatro oocitos "transplantados". Luego los oocitos se someten a impulsos eléctricos (electrofusión) para promover la fusión del material genético y se ponen a madurar los embriones dentro de una oveja. Este procedimiento se puede repetir para producir nuevos individuos idénticos (clones) y a estos embriones se pueden transferir a animales receptores para producir una progenie completa (Rodríguez, 1989). De Boer y Van Arendonk (1994), hacían mención de la posibilidad de reproducir mediante la donación a aquellos animales con un alto potencial productivo como es el caso de animales productores de leche o carne. Sin embargo Wilmut y sus colegas (1997), del Scotlan'd Roslin Institute utilizando el clonamiento de embriones lograron luego de 276 intentos el nacimiento de la oveja Dolly. Para la creación de Dolly se recolectaron células de la glándula mamaria de una oveja (raza, Finn Dorset), que poseía seis años de edad y estaba en los tres últimos meses de preñez. Se utilizó el oocito de una oveja donadora al cuál se le extrajo el núcleo. Al oocito sin núcleo se le fusionó la célula de la glándula mamaria, y se reinició su desarrollo por medio de pulsaciones eléctricas. El embrión reconstruido fue transplantado a una oveja receptora (Scottish Blackface) y se monitoreó su desarrollo por medio de ultrasonido. El zoológico de San Diego> Estados Unidos, a emprendido en la actualidad un programa en el que se pretende reproducir aquellas especies en peligro de extinción mediante la técnica de donación. Sin embargo David Wildt del U.S. National Zoo's Conservation and Research Center in Front Royal, Virginia, hace mención de la dificultad que existiría para donar los animales en extinción, ya que el ciclo reproductivo de estos animales ha sido en muchos de los casos poco entendido (Coher, 1997). Otra aplicación que tiene la donación es el uso que se le ha dado en el adelanto científico de la medicina humana, en la cual se pueden donar partes complementarias de ADN que posean afinidad por determinado receptor. En este caso se toman células β con el propósito de donar partes complementarias del ADN que posean afinidad elevada del receptor de sulfonilurea que es capaz de detectar cambios en las concentraciones de ADP y ATP; además detectar la actividad de Katp y por consiguiente modular la liberación de insulina (Arruda et. al., 1993). Otro uso de la aplicación de esta técnica es la donación de fragmentos de ADN que están relacionados con la entrada y sobrevivencia de Mycobacterium tuberculosis dentro de las células humanas. Esta práctica se realiza con el fin de conocer los dos distintos locus en el fragmento donado de ADN de M.tuberculosis que le confieren la sobrevivencia de por lo menos 24 horas dentro de las células del humano (Bryan et. al., 1995). DISCUSIÓN Actualmente los beneficios que la donación le proporciona al ser humano son de diferente índole, estos van desde la simple propagación vegetativa de plantas, hasta el transplante nuclear de embriones en mamíferos (Rodríguez, 1989). Los beneficios que la donación ha otorgado al campo agrícola han sido muy positivos, ya que mediante esta técnica se ha logrado reproducir en un menor tiempo especies de importancia socioeconómica; tales como banano, yuca, piña, cítricos; e inclusive determinadas especies vegetales en las que se dificulta su reproducción sexual. Sin embargo a través del tiempo un cultivo obtenido mediante donación es cada vez más vulnerable al ataque de plagas, ya que al no existir variabilidad genética en un cultivo una determinada plaga puede diseminarse con mucha más facilidad (Salisbury y Jensen, 1994). También la donación de mamíferos proporciona muchos beneficios ya que mediante esta técnica se pueden donar animales con un alto valor productivo. Además el clonaje animal ofrece posibilidades de avanzar en investigaciones médicas sobre el diagnóstico y tratamiento de enfermedades que afectan al ser humano. Al mismo tiempo se presenta la posibilidad de donar animales en peligro de extinción, sin embargo esto traería consigo la despreocupación de la humanidad en cuanto a preservar los recursos del mundo (Coher, 1997). Cabe señalar que la técnica de donación no necesariamente implica la duplicación completa del material genético de un organismo, si no que se pueden reproducir fragmentos de ADN de interés al ser humano, tal es el caso de ciertos genes de valor terapéutico, cuyo producto final podrá ser manipulado genéticamente para resistir a las enfermedades animales o para reproducir en ellos enfermedades humana, convirtiéndose así en valiosos "conejillos de indias" para tratamientos médicos (Arruda eL al., 1993). Si la técnica de donación, que ha probado ser efectiva en vegetales y mamíferos como es el caso de la oveja Dolly, se implementara en seres humanos traería como consecuencia problemas ético-sociales, ya que violaría algunos de los principios básicos que gobiernan la procreación médicamente asistida. Entre estos principios están la dignidad del ser humano, la protección de la seguridad del material genético humano. Además de desatarse a nivel mundial la aparición de un mercado negro de órganos humanos (Kahn, 1997). CONCLUSIONES - A diferencia del concepto de lo que se cree que es donación; mediante esta investigación se evidencia que la donación va desde la simple propagación asexual de plantas hasta el transplante nuclear en embriones animales. - La técnica de donación ha brindado al ser humano múltiples beneficios, desde sus aplicaciones en el área agropecuaria hasta las investigaciones en la medicina humana. - Si la donación se aplicara a seres humanos traería consecuencias éticas inaceptables para algunas sociedades. - Si bien la investigación sobre clonaje humano puede dar beneficios como aplicaciones terapéuticas, se debe en todo momento estar alerta a sus posibles consecuencias negativas, como la transmisión de enfermedades entre especies. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ARIAS, O; VALVERDE, M. 1997. Producción y variación somaclonal de plantas de banano variedad Grande Naine producidas por cultivo de tejidos. Asbana. No 28.6-15 p. ARRUDA, 5. BOMFIM, G; KNIGHTS, R; HUIMA-BYRON, T; RILEY, L. 1993. Cloning of an M. tuberculosis DNA Fragment Associated with Entry and Survival Inside Cells. Science. EE.UU. Vol. 261. No 5127. 1454-1456 p. BERRIOS A; SANDOVAL, F; MUELLER, L. 1991. Propagación Clonal in vitro de Diferentes Especies de Poró. Turrialba. Vol. 41. No 4.607-614 p. BRYAN, L; NICHOLS, C; WECHSLER, J; CLEMENT, J; BOYD, A; GONZALES, G; SOSA, H; NGUY, K; BRYAN, J; NELSON, D. 1995. Cloning of the 2b Cell High-Affinity Sulfonylurea Receptor: A Regulator of Insulin Secretion. Science. EE.UU. Vol.268. No 5209.423-425 p. COHER, J;. 1997. Conservation Biology, Can Cloning Help Save Beleaguered Species. Science. EE.UU. Vol. 276. No 5317. 13291330 p. DE BOHER, 1; VAN ARENDONK, J. 1994. Market Share for Semen and Cloned Embryons in Dairy Herds. Journal of Dairy Science. EE.UU. Vol. 77. 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Marque la mejor alternativa que para usted significa clonaje: a) b) c) d) e) Duplicación Duplicación Propagación Propagación Todas de un fragmento de ADN completa del ADN de un organismo por semillas por estaca 6. ¿Qué desventajas extinción? tendría el donar animales en vías de 7. ¿En el área agropecuaria, cuáles son las ventajas que provee el clonaje? 8. ¿Qué es el ADN y cual es la importancia en el proceso del clonaje? 9. ¿Cuáles serían las repercusiones clonaje en seres humanos? que traería 10. ¿El clonaje es de tiempos modernos, explique? consigo el ESCUELA DE AGRICULTURA DE LA REGIÓN TROPICAL HÚMEDA GENÉTICA APLICADA TRABAJO FINAL: SEXADO DE EMBRIONES Grupo de clase: 4 Grupo de trabajo: 5 Fecha: 11/8/97 Rodrigo Letona Marlon Menegat Adriana Riba La mayor parte de las necesidades alimenticias del hombre se cubren directamente por los vegetales, pero estos no contienen todos los principios nutritivos que necesitan los seres humanos. La mayor parte de estos nutrientes se encuentran en los tejidos, órganos y secreciones de animales superiores, por lo que ha sido necesario que la población humana busque la manera de satisfacer estas necesidades mediante el mejoramiento genético, entre otros, de los animales que le sirven como alimento (Salisbury et al; 1978). El desarrollo de nuestros conocimientos acerca del funcionamiento de los procesos reproductores ha sido mucho más lento que en lo que respecta a cualquier otra función del cuerpo. En cuanto a los mamíferos, la inexistencia de huevos visibles sin la ayuda de microscopio y el tiempo que transcurre entre el apareamiento y el momento en que es posible reconocer los productos de la concepción en el útero constituían obstáculos que solo con la invención de auxiliares ópticos adecuados y la formación de la teoría celular pudieron descubrimiento reciente que se ha venido desarrollando con gran rapidez (Cole y Cupps; 1992). La reproducción implica la producción por el macho y por la hembra de células diferenciadas funcionalmente (gametos), cada una de estas células posee un pronúcleo que contiene cromatina, la cual es la sustancia protoplasmática en los cromosomas y está formada por una estructura proteica y ácido desoxirribonucleico (ADN). El ADN es el material del que están constituidos los genes y es el material de la herencia, el que delimita que una especie sea una clase particular de animal. (Hafez; 1962). El ganado vacuno tiene 30 pares de cromosomas, uno de estos pares de cromosomas corresponden a los cromosomas sexuales; los restantes pares son los que se conocen como autosomas. En los machos de los mamíferos uno de los cromosomas sexuales es mayor que el otro siendo el cromosoma X el más grande y el cromosoma Y el más pequeño, representándose como XY. En la hembra ambos cromosomas sexuales son idénticos o similares, siendo estos XX (Salisbury et al;1978). En el momento de la fecundación el óvulo y el espermatozoide van a presentar con un número haploide de cromosomas, se funden formando el cigoto cromosomas. Esto se el cual debe presenta a que la durante dotación la completa primera de división meiótica en la formación del óvulo, cada uno recibe un cromosoma X. Mientras que la espermatogénesis, la división deduccional da lugar a que la mitad de los espermatozoides reciban el cromosoma X y la otra mitad el cromosoma Y. Cuando ocurre la fecundación se da la posibilidad que cualquiera de los espermatozoides que sean portadores de cromosoma X o del cromosoma Y fecunden el óvulo. Si un espermatozoide portador del cromosoma Y es el que penetra en el óvulo ocurrirá una combinación cromosómica XY y determinaran un macho, por el contrario si el espermatozoide lleva un cromosoma X, el individuo producido será una hembra XX (Salisbury et al; 1978). Bajo la influencia de los genes contenidos en sus cromosomas sexuales el embrión modificaciones masculinas que del mamífero conducen (testículos) o a la experimenta una diferenciación femeninas (ovarios), serie de y de gónadas conductos masculinos o femeninos. El embrión muy joven posee el potencial para la diferenciación sexual, si la gónada que se va a desarrollar es un ovario, las células germinales se concentran en la corteza para formar oogonios, mientras que en la formación de testículos las células se concentran en la médula (Hunter, 1989). La determinación del sexo es un tema que ha desatado una viva polémica, las teorías que se han aventurado para explicar porqué un individuo es macho o hembra han sido cuestionadas a lo largo del tiempo. Es obvio que no se podría anticipar una respuesta correcta respecto a esto hasta que se conoció el núcleo celular y se describió el papel de los cromosomas. Acontecimientos más recientes en este campo, como ha sido el descubrimiento de que el caso del sapo de Sudáfrica (Xenopus laevis), es la composición genética de las gónadas y no de las mismas células germinales, lo que determina el sexo (Cole y Cupps,1992). La determinación del sexo es importante en la ovulación múltiple y en la transferencia de embriones, pero existen dos razones principales las cuales están relacionadas entre sí para la determinación del sexo, estas son: multiplicar el número de descendientes del sexo deseado y alivianar los costos, ya que permite el uso exacto de los recursos. Sexar y congelar embriones permite a programas de mejoramiento genético, mayor flexibilidad ya que estos embriones podrán ser transportados de finca en finca y hasta en niveles internacionales (Thibier y Nibart, 1995). Diferentes métodos de sincronización del ciclo de celo se han utilizado para aumentar el índice mitótico y la precisión de la determinación del sexo en embriones de bovinos (Hossepian et al,1994). A partir de 1970 han existido varios métodos para el sexado de embriones como lo son: el análisis atogénico el cual resultó poco práctico e incierto al igual que la técnica de hibridación. Estos fueron desechados desde entonces, fue entonces que con la identificación el cromosoma Y de bovino, específico del ADN se desarrolla la técnica de amplificación de ADN por PCR (polymerase chain reaction) la que ayudó a que el sexado de embriones fuera realidad (Thibier & Nibart, 1995). Este método a su vez permite la determinación del sexo del embrión en un estado inmaduro en esta etapa, sin causarle daño ya que es un método sensitivo y preciso (Kirkpatrick y Monson, 1992). Para esta técnica se han utilizado tanto embriones frescos como congelados para la determinación del sexo. De estudios realizados se ha observado que los embriones frescos presentan mejores resultados, ya que estos son exactos en un 98% y eficientes en un 95% debido a que son altamente sensitivos. Por otro lado existe una tendencia congelados a sobrevivir, ya muy que pequeña no de los resisten embriones las bajas temperaturas, además estos son más difíciles de identificar y corren el de peligro que la biopsia reduzca los índices de preñez (Thibier & Nibart, 1995). Muchos de determinación los del embriones sexo son que desechados se utilizan por no para contar la con una morfología buena, que facilite la identificación de sexo. Los embriones que se utilizan para el sexado deben de ser clasificados como 1 (buenos o excelentes) en algunas ocasiones se pueden utilizar los clasificados como 2 en el estado de mórula compacta hacia el blastocisto, pero con la zona pelucida intacta (Thibier y Nibart, 1995). Al momento de sexar embriones es importante evitar la contaminación del DNA de los embriones, especialmente en células masculinas, para esto se debe de lavar los embriones 10 veces y los instrumentos con los cuales los embriones entran en contacto cada vez que estos lo hagan. Este método desarrollo, consiste tomando por lo en tomar general células entre 3 del y 5 embrión células en por embrión. Los técnicos, prefieren tener más de una célula, ya que esta se embriones puede que contaminar se les hace a la la hora de biopsia, desarrollado in vitro (Utsumi et al, 1994). la se biopsia. les Estos continua su Las células tomadas del embrión, son enjuagadas tres veces con KCI células para son eliminar sales colocadas en minerales un ajenas microtubo a con este. una Estas solución amortiguadora de proteinasa de Potasio y los dos sets de primers. En el caso de que se retrase la labor del sexado de embriones esta solución puede ser enfriada. El DNA es liberado por calor al cabo de 1 hora a una temperatura de 55ªC, destruyéndose después la proteinasa K. Inmediatamente después se les agrega un medio para que reacciones, el cual incluye el TAQ polimerase, esto es colocado en el PCR, el cual es una máquina que multiplica el DNA, ya que contiene las bases adenina, guanina, citosina y timina (Kirkpartick y Monson, 1992). Este DNA electroforesis, ya el multiplicado cual se se coloca en coloca en un una máquina gel del de mismo nombre, que hace que las bandas se separen y a las que se les toma una fotografía, con lo que se determinará el sexo. El embrión es masculino cuando 443 bp y 148 bp son vistos, por el contrario el embrión es femenino cuando los 148 bp están ausentes (Utsumi et al, 1994). Es probable que pueda ocurrir una inhibición parcial o total en la amplificación del DNA, lo cual se puede deber a tres causas: 1-. La concentración de sales minerales como el fosfato, entre otros puede interferir en el proceso de amplificación 2-. El volumen del medio en el cual la amplificación se está llevando a cabo puede resultar desbalanceado en cuanto a la concentración de varios compuestos presentes. 3-. La calidad del TAQ polymerase. La eficiencia de esta técnica se ha probado en más de tres mil embriones que han sido sexados (Thibiery Nibart,1995). El FISH (fluorescense in-situ hybridization) es un nuevo método que se a empezado a utilizar para determinar el sexo en embriones, pero que aún no esta muy desarrollado. Se dice que este método es mejor para determinar la secuencia del ADN, ya que el método por PCR hace susceptible al embrión a contaminación. Además determina anomalías que se presentan en los cromosomas del embrión (Kovar y Rickords, 1997). PREGUNTAS l- ¿Porqué considera usted que se hizo necesaria la práctica del sexado de embriones? Se hizo necesaria debido a que la mayor parte de los nutrientes que consume el hombre son de origen animal, lo que requiere una explotación adecuada para suplementar estas necesidades, utilizándose para esto el mejoramiento genético como es el caso de la determinación del sexo. 2- ¿Cuál es la importancia del sexado de embriones? Las importancias principales del sexado de embriones son las siguientes: multiplicar el número de descendientes del sexo deseado y alivianar los costos, ya que permite el uso exacto de los recursos. 3- ¿Qué es la cromatina y de que esta formada? La cromatina es la sustancia protoplasmática en los cromosomas y está formada por una estructura protéica y ácido desoxirribonucleico (ADN). 4- ¿Cuántos pares de cromosomas tiene el ganado vacuno, como representa tanto en machos como en hembras el cromosoma sexual y como se denominan los otros cromosomas? El ganado vacuno tiene 30 pares de cromosomas. El cromosoma sexual de los machos se representa como XY y en las hembras como XX, llamándoles a los otros cromosomas autosomales. 5- ¿En que parte del cigoto se concentran las células para la diferenciación sexual? Si la gonada que se va a desarrollar es un ovario, las células germinales se concentran en la corteza para formar oogonios, mientras que en la formación de los testículos las células se concentran en la médula. 6- ¿Cuál es el método más utilizado en la multiplicación del ADN? El método mas utilizado para la multiplicación del ADN es el PCR (Polymerase chain reaction). 7- En la determinación del sexo se utilizan tanto embriones frescos como congelados. Diga cuales de estos dos presentan mejores resultados. Los embriones frescos son los que han presentado mejores resultados ya que estos son exactos en un 98%, en cambio los embriones congelados muchas veces tienen una tendencia muy pequeña a sobrevivir. 8- Explique resumidamente el método del sexado de embriones por medio del PCR. Se extraen los embriones, estos se lavan diez veces para luego extraerles entre 3-5 células, las cuales se lavaran 3 veces con KCI. Después estas células se colocarán en un microtubo el cual se colocará en el PCR para proceder a la multiplicación del ADN. Luego se colocará en una gelatina de electroforesis, para así separar las bandas que serán fotografiadas y poder determinar el sexo del embrión. 9- Una vez tomada la fotografía como se distingue si el embrión es macho o embra. El embrión es masculino cuando se presentan 443 bp y 148 bp, es decir que cuenta con dos bandas, mientras que en el caso de la hembra no se presentan los 148 bp, es decir solo hay una banda. 10- ¿Cuál es el método que se ha empezado a utilizar para determinar el sexo en embriones en los últimos años y por qué su preferencia? El método que se ha utilizado es el FISH y se dice que este es mejor para determinar la secuencia del ADN ya que el PCR hace susceptible el embrión a contaminación y porque determina anomalías en los cromosomas. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA COLE, H. CUPPS, P. 1992. Reproducción de los animales domésticos Editorial Acribia SA. 3 era edición. Zaragoza, España. 551p. HAFEZ, E. 1962. Reproducción de los animales de granja. Editorial Herrero. México, México. 482p. HOSSEPIAN DE LIMA, V, DE BEM, A; JORGE, W. 1994. Effect of cell cycle synchronization on the accuracy of murine and bovine embryo sex determination. Theriogenology. p 521-533. HUNTER, R. 1989. 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Thriegenology, January. p. 323 Trabajo final: Sexado de Embriones Grupo: 04 Subgrupo: 05 Fecha: 18/08/97 Marlon Menegat, Adriana Riba y Rodrigo Letona PREGUNTAS 1- ¿Porqué considera usted que se hizo necesaria la práctica del sexado de embriones? Se hizo necesaria debido a que la mayor parte de los nutrientes que consume el hombre son de origen animal, lo que requiere una explotación adecuada para suplementar estas necesidades, utilizándose para esto el mejoramiento genético como es el caso de la determinación del sexo. 2- ¿Cuál es la importancia del sexado de embriones? Las importancias principales del sexado de embriones son las siguientes: multiplicar el número de descendientes del sexo deseado y alivianar los costos, ya que permite el uso exacto de los recursos. 3- ¿Qué es la cromatina y de que esta formada? La cromatina es la sustancia protoplasmática en los cromosomas y está formada por una estructura protéica y ácido desoxirribonucleico (ADN). 4- ¿Cuántos pares de cromosomas tiene el ganado vacuno, como representa tanto en machos como en hembras el cromosoma sexual y como se denominan los otros cromosomas? El ganado vacuno tiene 30 pares de cromosoma. El cromosoma sexual de los machos se representa como XY y en las hembras como XX, llamándoles a los otros cromosomas autosomales. 5- ¿En que parte del cigoto se concentran las células para la diferenciación sexual? Si la gonada que se va a desarrollar es un ovario, las células germinales se concentran en la corteza para formar oogonios, mientras que en la formación de los testículos las células se concentran en la médula. 6- ¿Cuál es el método más utilizado en la multiplicación del ADN? El método mas utilizado para la multiplicación del AON es el PCR (Polymerase chain reaction). 7- En la determinación del sexo se utilizan tanto embriones frescos como congelados. Diga cuales de estos dos presentan mejores resultados. Los embriones frescos son los que han presentado mejores resultados ya que estos son exactos en un 98%, en cambio los embriones congelados muchas veces tienen una tendencia muy pequeña a sobrevivir. 8- Explique resumidamente el método del sexado de embriones por medio del PCR. Se extraen los embriones, estos se lavan 10 veces para luego extraerles entre 3-5 células; las cuales se lavaran 3 veces con KCI. Después estas células se colocaran en un microtubo el cual se colocará en el PCR para proceder a la multiplicación del ADN. Luego esto se colocará en una gelatina de electroforesis, para así separar las bandas que serán fotografiadas y poder determinar el sexo del embrión. 9- Una vez tomada la fotografía como se distingue si el embrión es macho o embra. El embrión es masculino cuando se presentan 443 bp y 148 bp, es decir que cuenta con dos bandas, mientras que en el caso de la hembra no se presentan los 148 bp, es decir solo hay una banda. 1O- ¿Cuál es el método que se ha empezado a utilizar para determinar el sexo en embriones en los últimos años y por qué su preferencia? El método que se ha utilizado es el FISH y se dice que este es mejor para determinar la secuencia del ADN ya que el PCR hace susceptible el embrión a contaminación y porque determina anomalías en los cromosomas.1 CONTROL DE INSECTOS CON EL USO DE ESTERILIDAD OBTENIDA POR MEDIO DE RADIACION ELABORADO POR: NOILLY VIQUEZ EVANDRO ADAMS RAFAEL SEGURA THOMAS LITTLETON PRESENTADO A: PROFESOR J. ARIAS EARTH, 11 de agosto de 1997 CONTROL DE INSECTOS CON EL USO DE LA ESTERILIDAD OBTENIDA POR RADIACIÓN. E.Adams; N. Víquez; R.Segura; T. Littleton INTRODUCCION Las plagas insectiles han sido desde hace mucho tiempo, uno de los principales problemas que ha presentado el sector agropecuario en cuanto a perdidas económicas. Con la aparición de los productos químicos sintéticos, se logra controlar por cierto tiempo a estas plagas. Con el pasar de los años, la mayoría de los insectos fueron adquiriendo resistencia a estas moléculas Químicas extrañas a su organismo. Ante este problema, fue que varios científicos empezaron a buscar diferentes técnicas de control para plagas insectiles. Los métodos que han dado biológico. Uno de estériles que se buenos estos resultados, métodos lleva a cabo es la por son los técnica varios de de control insectos métodos. La esterilización por medio de irradiación con rayos gamma es uno de los métodos elaboración que de mejores este resultados trabajo importantes de esta técnica. se ha presentado. tratarán los En puntos la más 2. OBJETIVO Realizar una recolección de información a respecto de la utilización de esterilidad en irradiación insectos por como rayos gamma para obtener método de control la biológico (autocida). 3. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 3.1 HISTORIA La técnica de control de insectos a través de la esterilidad, obtenida por efecto de la radiación, fue creada por los entomólogos estadounidenses E. F. Knipling y R. C. Bushland en el decenio de los treinta. Ellos aprovecharon experimentos del suizo, Premio Nobel de medicina, H. J. Muller, que había aplicado la técnica para en el control de la mosca del mediterráneo (Ceratitis capitata).(FAO, 1992) La técnica surgió respondiendo a la necesidad de encontrar una solución para el control de insectos plagas, en específico el caso del gusano barrenador del ganado (Cochliomyra horminovorax) causador de grandes perdidas económicas anuales en los Estados Unidos. La necesidad de una nueva técnica nació a raíz de la poca durabilidad de los productos químicos utilizados para el control de esta plaga. La Técnica de los insectos Estériles (TIE) tubo inicio buscando la erradicación del gusano barrenador, en la Isla de Curazao que se encuentra a 40 km de la costa venezolana (AID, 1965). 3.2 ESPECIES UTILIZADAS La TIE es utilizada en varias especies, las cuales deben cumplir con ciertas características físicas y biológicas. Algunas de las especies en las que se ha utilizado esta técnica son el ácaro (Acaro capitata), siro la L), mosca la mosca picadora del de mediterráneo los establos (Ceratitis (Stomaxis calcitraos), una lepidoptera llamada (Helicoverpa zea) y la más conocida la mosca del gusano barrenador (Cochliomyia hominovorax). 3.3 ETAPAS EN QUE SE APLICA EL TRATAMIENTO Los insectos pueden ser sometidos a la TIE en sus etapas de crisálida frecuencia (pupa) las y en estado primeras, pues adulto, los utilizándose adultos son con usados mayor para reproducirse en el laboratorio (FAO,1992). 3.4 METODOS DE RECOLECCION Y ALIMENTACIÓN El primer paso de esta técnica es la recolección de los insectos que serán llevados al laboratorio y para esto se han puesto en práctica diferentes tipos de atrayentes o trampas las cuales varían según la especie. Los atrayentes más utilizados son animales centinelas heridos así como hígado, pescado y frutos podridos. Mayormente lo que se obtiene con estas trampas son masas de huevos que son ovopositadas por las hembras silvestres. En el caso del gusano barrenador la trampa que más se utiliza, debido a su efectividad y bajo costo es el hígado podrido. (BREWER, 1992, HAMMACK, 1991). Cuando las moscas adultas y las masas de huevos han sido llevadas al laboratorio estas son colocadas en diferentes tipos de substratos para su crecimiento. En el caso del gusano barrenador las moscas adultas son puestas en un substrato a base de sangre bovina fresca o helada y de los fluidos atractivos de heridas infectadas, causados por la misma mosca. Estos substratos son utilizados para su alimentación y la de las larvas, después que el proceso de ovoposición se haya llevado a cabo.(TAYLOR; BRUCE Y GARCIA, 1991). En el caso de las masas de huevos, originalmente eran sometidos a una dieta a base de un gel como agente sintético copolímero, que por su alto costo fue reducido o reemplazado por un substrato conteniendo olote de maíz molido y el polvo del olote (centro) del elote.(PARKER Y WELCH,1991). 3.5 TRATAMIENTO RADIOACTIVO La TIE originalmente consistió en aplicar irradiación de rayos “x” que esterilizaban pupas y moscas adultas. En la actualidad los rayos “x” ya no se utilizan, pues fueron reemplazados por los rayos gamma producidos por Cobalto60 y Cesio137. La radiación causa la esterilidad, pero no mata ni disminuye significativamente el instinto y la capacidad de los machos de aparearse con las hembras silvestres fértiles para que se produzcan huevos no fecundos.(THOMAS Y MANGAN, 1992) En el caso del gusano barrenador este es expuesto a la acción radioactiva para su esterilización 5% días después de iniciada su fase de crisálida (pupa), por un tiempo de 10 a 15 minutos, con una intensidad aproximada a 8000 roentgens, lo que provoca que tanto machos como hembras sean afectados resultando estériles. Es de suma importancia mantener la intensidad óptima de radiación, ya que si el insecto es expuesto a cantidades bajas le causa una excitación que mas bien puede provocar mayor capacidad reproductiva, por el contrario si se excede se pueden causar daños fisiológicos que no le permitirían que se apareara, causando la muerte en casos extremos.(FAO ,1992) 3.6 EFECTOS DE LA RADIACIÓN La radiación causa diferentes daños a los organismos de los insectos, como lo son efectos en la espermatogénesis, embrio génesis y efectos a nivel de los cromosomas. En el primer caso se dan modificaciones en la espermatogénesis y en la anatomía del aparato reproductor masculino. La radiación induce a severos cambios en las células gonadales incluyendo la dilatación del retículo endoplasmático y la disrupción del cristae mitocondrial. Daños de la célula en desarrollo son causados por una interrupción de la espermatogénesis, con reducción en el número de espermátidas.(SZLENDAK; 1992). En los huevos fértiles se da es la interrupción de la embriogénesis provocando que estos se rompan y los embriones mueran.(CARPENTER, 1992) La radiación por rayos gamma actúa en los cromosomas, causando un sinnúmero de alteraciones, por ejemplo, al romper los filamentos de ADN, las puntas rotas de los filamentos se pegan entre sí alterando originalmente. El el nuevo orden en cromosoma el que que se se forme encontraban tendrá dos centrómeros, por lo tanto dará origen a dos nuevos cromosomas los cuales presentarán malformaciones, por otra parte los filamentos que se juntaron pudieron haber dado origen a un cromosoma diferente a los demás, resultando en una mutación que afecta la reproducción del insecto. (VANDERVLOEDT Y KLASSEH 1991). 3.7 DISEMINACIÓN DE LOS INSECTOS ESTERILES Una vez que los insectos han sido sometidos a la radiación y por lo tanto han sido esterilizados, el paso siguiente es la diseminación de los mismos. Esta consiste en la liberación de los insectos en el campo, colocándolos en cajas especiales para que sean transportadas en grandes cantidades por medio de aviones. Estas cajas son distribuidas a lo largo de la zona geográfica donde se desea erradicar la plaga, los insectos estériles se soltaran a razón de 1601/km2. Se deben hacer monitoreos para asegurarse de que la cantidad liberada sea suficiente para llevar a cabo la erradicación y de no ser así se deben liberar semanalmente hasta cumplir el objetivo. (AID, 1965) Según estudios se deben liberar alrededor de 10 insectos estériles por cada insecto silvestre, esto para que los primeros puedan desplazar a los machos silvestres ya que la mayoría de los insectos son territoriales. 3.8 LIMITANTES El programa de erradicación de insectos utilizando la TIE se puede ver afectada por varios factores que alteran la duración y los resultados de la misma, como lo son el radio de acción de la plaga (extensión territorial) así como la intensidad de la plaga o sea la cantidad en que ella se presente. - Los altos costos, la hacen inalcanzable para los agropecuaristas. En el caso de que se quiera llevar a cabo un programa de erradicación, es importante que la plaga esté presente en grandes cantidades y grandes extensiones para que sea viable su aplicación. - Como la técnica no puede ser puesta en práctica por un solo productor rural, ni en solo un pequeña zona, se requiere de apoyo de entidades gubernamentales, como los ministerios de agricultura y ganadería del país, a fin de que se pueda hacer un programa de tal ámbito. - No es aplicable a todas las especies, ya que se requiere que los insectos presenten ciertas características, físicas, químicas y biológicas.(FAO, 1992) 3.9 RESULTADOS QUE SE HAN PRESENTADO Hasta ahora los resultados que ha presentado la técnica ha sido bastante satisfactorios, barrenador el cual continente americano, ha sido como es erradicado partiendo de los el en caso del gran Estados gusano parte Unidos del hasta llegar a Panamá. La TIE también fue utilizada en el norte del continente africano para erradicar el gusano barrenador: Este programa de erradicación fue más fácil de llevar a cabo ya que la técnica se puso en práctica al principio de la infestación de la plaga. Además por no ser este insecto nativo de esta zona, el área de infestación donde se encontraba no territorial. (FAO, 1992 Y AID, 1965) era de grande extensión 5. BIBLIOGRAFIA BREWER F. D. 1992. Gel extenders in larval diet of(Cochliomyia hominovorax) (EEUU). Journal of economic entomology (Mich) 185(2): 445-450. CARPENTER, J.E. radiation. 1992. (EEUU). Response Journal to a subterilizing of economic mutua; AID. dose os entomology.(Mich). 185(3): 779-781. Centro Regional de ayuda 1965. Preguntas y respuestas sobre la lucha del gusano barrenador del ganado. México. 2da.ed. 18 p. FAO. 1992. Erradicación del gusano barrenador del ganado. México. 16 p. HAMMACH, L. 1991. Ovoposition by screwworm files on contact with host fluids (EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 184 (1): 185-190. PARKER,WELCH collecting J. 1991. Alternative egg masses from to sentinel animals for wild females of the screwworm (EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 184(5):14761479. PARKER, WELCH, J. 1991. Field comparisons of attractants for the screwworm fly in a tropical dry forest in Costa Rica (EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 184(4): 1189-1195. SZLENDAK, E, BOCZEK, J; OLIVER, J. 1992. Effects of radiation on spermatogenesis in (Acarus siro.L) (EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 185 (1): 162-167. TAYLOR, D; BRUCE, J; GARCÍA, R. 1991. Gelled diet for screwworm mass production(EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 184 (3): 927-935. THOMAS, D, MANGAN, R. 1992. Persistence of sterile screwworm flies at are lease site (EEUU). Journal of economic entomology (Mich). 185(2): 441-444. VANDERVLODT, A.M.; KLASSEN, W. 1991. The development and application of the sterile insect technique (SYF) for new World screwworm erradication. (EEUU) zootecnia (EEUU). n° especial: 42-49. Revista mundial de CONTROL DE INSECTOS CON EL USO DE LA ESTERILIDAD OBTENIDA POR RADIACIÓN. PREGUNTAS 1. ¿Cual es la principal ventaja de la técnica de esterilización de insectos (TIE) en comparación con otros métodos de control? 2. ¿ Qué es lo que se busca al aplicar la radiación en los insectos? 3. ¿ Cuales son los factores que deben ser llevados en cuenta, al aplicar la radiación con el fin de esterelizar los insectos? 4.¿Cuales son los efectos de la radiación en la espermatogénesis? 5. ¿Cuales son los efectos de la radiación en la gametogénesis? 6. ¿Cuales son los efectos de la radiación sobre los cromosomas? 7. ¿Si número hablamos de de diseminación, insectos que se cual suelte por es la área importancia del o por número de insectos silvestres? 8. ¿Cual es la importancia del radio de acción y de la intensidad de una plaga que se quiera erradicar? 9. ¿Cual es el único programa de erradicación de insectos por medio de esterilidad obtenida por radiación que tuvo éxito? 10. ¿Por que motivos no se hace mas uso de esta técnica si ella es tan eficiente? ESCUELA DE AGRICULTURA DE LA REGIÓN TROPICAL HÚMEDA EL USO DEL ADN EN EL MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL Autores: Javier Ardaya Raquel Meléndez Luis Pitti Enrique Reyes Presentado a: Dr. Juan Arías Guácimo, 28 de julio de 1997 TABLA DE CONTENIDO 1. INTRODUCCIÓN 2. OBJETIVOS 3. CONCEPTO DE ADN 4. CONCEPTO DE MEJORAMIENTO GENÉTICO POR MEDIO DEL USO DE ADN 5. TÉCNICAS DE MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL 6. APLICACIÓN DEL MEJORAMIENTO GENÉTICO SEGÚN LAS ÁREAS INTERÉS 7. IMPORTANCIA DEL MEJORAMIENTO GENÉTICO EN LA AGRICULTURA 8. CONCLUSIONES 9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS DE EL USO DEL ADN EN EL MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL Javier Ardaya, Raquel Meléndez, Luis Pitti, Enrique Reyes 1. INTRODUCCIÓN Los cambios en el fenotipo de los seres vivientes, a través del tiempo, variación en comprueban las la variación especies se de traduce sus en genotipos. la Esta aparición de características fenotípicas que anteriormente este individuo no poseía (Ville et al.,1992) El desarrollo de muchas plantas y animales se ha visto afectado por los cambios que ha sufrido su medio ambiente por la intervención del ser humano. Debido a esto, solamente los individuos que poseen las características más adaptables a su medio de vida sobreviven. Se produce una selección natural de los individuos que se logran adaptar y el resto pasan al proceso de extinción (Ville et al., 1992). La aparición de nuevas características a través de generaciones sucesivas, permiten que el hombre caiga en cuenta de que puede aprovechar estos cambios para obtener especies que posean características deseables. El descubrimiento de la molécula de ADN, como soporte de la información genética de un individuo, hace que se estudie la posibilidad de su manipulación en los genes, que codifiquen características hereditarias, y de esta manera obtener plantas y animales mejorados (Sinnott et al., 1992). El crecimiento demográfico exagerado y la poca disponibilidad de espacios agrícolas, en los últimos siglos, han creado la necesidad de buscar alternativas para; producir alimentos en mayor cantidad y menor espacio. Por esta razón, mejoramiento genético viene a ser una herramienta de suma importancia agricultura, como medio de producción más eficiente de alimentos. Otras aplicaciones del mejoramiento genético en la agricultura es la obtención de razas que demuestran mayor resistencia a condiciones adversas a su desarrollo, como plagas y clima (Sinnott et al. 1992). La manipulación del ADN se basa en técnicas innovadoras, por lo que es tema de investigación actual. Su potencial para conseguir cambios rápidos en especies agrícolas de importancia, hacen que se ponga (Sinnott et al., 1992) mayor empeño en esta área investigación 2. OBJETIVOS 1. Exponer el concepto de mejoramiento genético por medio del uso del ADN. 2. Presentar diferentes técnicas de por medio de manipulación de ADN, mejoramiento analizando genético algunos puntos positivos y negativos que éstos posean. 3. Sintetizar la importancia del mejoramiento genético en la agricultura 3. CONCEPTO DE ADN El concepto de ADN parte de la definición de gen y su forma de acción. La estrecha relación que existía entre un gen y la síntesis de una proteína se desarrolla a principios del presente siglo, con Garrod quien propuso que la ausencia de una enzima específica en los hereditarias. Sin Tatum quienes seres humanos podría darse por causas embargo, no fue hasta en 194º, con Beadle y con estudios de mutaciones en Neurospora determinaron que cada gen era responsable por la síntesis de una sola enzima. Esta hipótesis se mantuvo por 10 años, hasta que posteriormente, establecieron que un gen da origen a una sola cadena polipéptica. Por medio de experimentación en ratas, con virus activados e inactivados, se demostró que el material genético heredable era el ADN (Acido desoxiribonucléico) y por eso las células haploides contenían la mitad de ADN que las diploides. De esta forma, se retoman las leyes de herencia Mendeliana establecidas anteriormente. El ADN está formado por nucleótidos que constan de una pentosa, un fosfato y una base nitrogenada. Los nucleótidos se unen por enlaces fosfodiester covalentes, formándose así una larga cadena de azúcares y fosfatos; además la cadena de ADN tiene una dirección específica, regida por los azúcares que están en sus extremos. La forma estructural nucleótidos del ADN es una complementarios. hélice Para que doble la con cadenas información de genética pueda transmitirse, el ADN tiene la facultad de replicarse de forma semiconservativa. Esta forma de replicación permite que existan cambios en el material genético por mutaciones en las cadenas de nucleótidos, los que serán transmitidos a las nuevas generaciones de células. En las células Eucariotas, el ADN se encuentra en el núcleo, en forma de cromosomas que varían en forma y en tamaño, y contienen cadena sencilla de ADN antes de la replicación del material genético. Siendo los genes porciones de ADN, su expresión necesita de varios pasos: Primeramente, el ADN traducido a ARN, el cual por medio de los ribosomas, estructuras del citoplasma celular y sintetizadores de proteínas, forman las proteínas o enzimas codificadas por el ADN en un inicio. La codificación de estas proteínas se hace por cadenas de tripletos nucleótidos. Las proteínas codificadas por el ADN son las que están en la base de la expresión de características en los individuos (Ville et al., 1992). 4. CONCEPTO DE MEJORAMIENTO GENÉTICO POR MEDIO DEL USO DE ADN Existen dos tipos de conceptos de mejoramiento genético; uno relacionado con la evolución natural de las especies y otro que involucra los intereses del ser humano y la sociedad en que éste se desenvuelve. La evolución natural de las especies se da por la estrecha relación entre la información que conforma el genotipo de un individuo y el fenotipo del mismo. La expresión del fenotipo se rige en gran parte en el medio ambiente en donde se desarrolla el individuo y por esta razón, a través del tiempo produce una selección natural de los individuos que demuestran mayor adaptabilidad al medio. Desde este punto de vista, la evolución es una forma de mejoramiento genético, puesto que se hace una selección de individuos que tienen mayor potencial para desarrollarse (Griffithis, et al, 1993). La selección heterocigosis en natural la de población, los individuos permitiendo mayor aumenta la cantidad de combinaciones de genes, generando individuos con características nuevas. La factores, variación los más en el genotipo conocidos son: es causado las por varios mutaciones, las recombinaciones de ADN y las migraciones. Algunos de estos factores acarrean cambios en las poblaciones más rápidamente que otros, el hombre saca provecho de esto para aplicar una selección artificial de individuos con características favorables. La selección que usa el ser humano es de tres tipos: por truncación, por truncación constante y truncación proporcional. La primera alternativa es por medio de un banco genético, la segunda es por medio de mejoramiento a través de generaciones sucesivas y la tercera por selección de individuos que cumplen con una cierta característica específica (Griffiths et al, 1993). A partir de la manipulación directa del ADN, el hombre ha obtenido plantas y animales como grandes productores de alimentos. Tenemos el ejemplo de la evolución del maíz, que por hibridaciones se han obtenido especies que son muy superiores productivamente a sus ancestros (Roush, 1996). trabaja con animales, líneas. Otras realizando aplicaciones del cruces Del mismo modo se para mejoramiento obtener genético mejores son la comprensión de teorías evolutivas, o la investigación del ADN, así como su funcionamiento y potencial para ser utilizado en beneficio del hombre (Griffiths et al, 1993). Los bancos genéticos han ganado importancia los últimos tiempos en los programas de hibridación y mejoramiento genético. Estas fuentes de variabilidad son un respaldo para la investigación futura, retroalimentación. Las puesto que son colecciones de plantas fuentes de naturales se conservan como fuente informativa para mejorar las especies de plantas cultivadas y escoger las mejores características de producción. Los bancos de ADN permiten además hacer estudios de frecuencias génicas heredabilidad de en la progenie genes. En un y evaluar principio se índices trabajó con de la búsqueda de especies más resistentes a estrés ambiental, como la hibridación del tomate cultivado y especies de tomate silvestre, donde los nuevos muy cultivares demuestran una mejor resistencia a plagas y cambios climáticos. Un aspecto de suma importancia para los mejoradores genéticos es la variabilidad del genotipo de las especies, variabilidad puesto que genética, se hay ha ADN demostrado una que mayor con mayor resistencia a circunstancias adversas en las plantas y animales (Hodgkin y Debouck, s.f.) 5.TÉCNICAS DE MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL El durante mejoramiento miles de de años plantas solamente y animales por el ha sido cruzamiento manejado en forma selectiva. Por este medio se logra obtener rasgos deseables en la variedades, de plantas o animales, a partir de otra variedad que contiene En esos rasgos. el caso particular de las plantas cultivadas, las variedades primitivas o especies estrechamente relacionadas, a menudo tienen rasgos, como es la resistencia a enfermedades y otras, que pueden ser transmitidos por el cruzamiento (Ville et al.,1992). Los parientes silvestres de las especies cultivadas son un rico recurso de características de las cuales hemos utilizado una pequeña fracción de su potencial en el mejoramiento de cultivos. Muchas características como la resistencia a insectos y a algunas enfermedades, mejoradores han sido están extraídas de continuamente germoplasma reclutando exótico. Los características aprovechables que pueden obtener de germoplasma silvestre. El único problema es que las características indeseables son muy difíciles de separar (Paterson et al, 1991). Paralelamente al trabajo de los mejoradores genéticos, que usan todavía las hibridaciones y cruces para el mejoramiento los Ingenieros genetistas buscan aislar el ADN para escoger genes que codifican caracteres deseables. Sin embargo, en los últimos tiempos, se a buscado una fusión de las dos técnicas (Sinnott et al, 1985). A través de la ingeniería genética se ha logrado incorporar genes extraños dentro del ADN de animales y plantas. Estos organismos reciben el nombre de transgénicos. Por ejemplo, si en una planta se introducen ordinariamente no se cruza genes de cepas con las que las posibilidades de mejoramiento se elevan en gran medida. La gente dedicada a la genética vegetal puede disponer ahora de muchos fondos de investigación debido al potencial económico de los rendimientos mejorados (Ville et al., 1992). La introducción de ADN extraño dentro de una célula no es algo fácil, es por eso que se recurrió al uso de vectores como virus y bacterias (Schell, 1967). El sistema vector más utilizado en plantas es el uso de la bacteria formadora de agallas Agrobacterium tumefasciens (Schell, 1967). Esta bacteria tiene la capacidad de provocar tumores en los vegetales, lo realiza por la introducción de un plásmido inductor de tumores (Ville et al., 1992). Es posible utilizar el plásmido para introducir o insertar genes en células vegetales, los cuales se trasmitirán por vía sexual a través de la semilla a la siguiente generación, pero también puede reproducirse por medios asexuales. La desventaja del Agrobacterium es que se deber utilizar la bacteria sin el poder patogénico y en esta forma es una molécula grande de difícil manejo. Además, la expresión de genes no se mantiene mucho tiempo por la bacteria, porque no logra integrar el ADN en el núcleo de la célula sino sólo en el ADN de trasferencia (Nevo et al., 1995). Por otro lado, el Agrobacterium solamente puede infectar plantas dicotiledóneas en consecuencia, el rango de hospederos es muy limitado y en el caso de gramíneas que son monocotiledóneas y la principal fuente de alimento del hombre no puede realizarse mejora genética por este medio (Schell, 1987). Los usos futuros del vector, por la industria agrícola, espera poder ayudar en la introducción de genes específicos en plantas vulnerables que puedan protegerlas de herbicidas no selectivos, insectos y virus. Existen muchos otros métodos innovadores para transferir genes en células extrañas, puesto que a partir de la última década se ha dado mucho énfasis al desarrollo del ADN recombinante (Schell, 1987). Hay métodos como la microinyección de pronúcleos, donde se introduce un pool de genes donados en un huevo recién efectividad. fertilizado, En algunas este especies método las tiene inserciones un de 70% de ADN con retrovirus atenuados han tenido éxito, las limitantes de este método es que se da mucho mozaisismo (desórdenes en la expresión de los genes) y que el cultivo del retrovirus es difícil. Un sistema también utilizado es la introducción de genes a estructuras embriónicas, sin embargo este método no es muy efectivo. Se ha utilizado también al esperma masculino como otro vector transmisor de genes en la fertilización de óvulos (Schell, 1987). Según el método de transgénesis el daño de ADN de plantas receptoras es más o menos grande. Actualmente ya existen métodos que consiguen mayor estabilidad en la transgénesis. Los mejores métodos a pesar de que poseen limitantes son: • Bombardeo de microproyectiles: Se suele realizar por medio de descargas eléctricas, con presión de gases como el helio (probado únicamente en anfibios) (Pereni et al., 1986). • Transformación mediante protoplastos: Se hace transgénesis en células totipotentes y luego se cultivan plantas a partir de estas células. Estas células son perfectas para estudios de mejoramiento. El ADN se transmite solo rompiendo la membrana celular y se logra revirtiendo la permeabilización de la membrana con impulsos eléctricos (Pereni et al., 1988). • Incorporación con fibra de silicón: Se puede incorporar ADN a los núcleos de células de plantas receptoras con la ayuda de una fibra de silicón. Aunque este método tiene oposición ya que el silicón es de composición similar al asbesto y pudiera ser cancerígeno (Haberfeid et al., 1993). • Los animales transgénicos también forman un área inmerisa de estudio. Una forma de reconstruir genéticamente las proteínas animales consiste en utilizar animales vivos transgénicos que son animales productores de proteínas específicas para su aprovechamiento por el ser humano (Vilie et al., 1992). 6. APLICACIÓN DEL MEJORAMIENTO GENÉTICO SEGÚN LAS ÁREAS DE INTERÉS Actualmente, se está aprovechando el mejoramiento genético para aplicarlo en plantas y animales para un mayor beneficio del hombre. Estas aplicaciones se observan en el incremento de la producción y el aumento en la calidad de los productos. Por ejemplo, se están utilizando cerdos transgénicos, que con la sobreproducción de hormonas de crecimiento adquieren peso extremadamente rápido aunque presentan problemas de artritis en su desarrollo. Los cerdos transgénicos tienen además menos acumulación de grasa, por lo que producen proteína más saludable. Este es un ejemplo de aplicación de cambios en el ADN, provocando cambios en los niveles y calidad de producción de carne. Otro caso de aumento de producción es la transferencia de un sarcoma virus de una rata, en aves, logrando una hipertrofie de los músculos y la reducción de producción de grasa (Pursel y Rexroad, 1993). La producción de lana en mayor cantidad se ha logrado con la integración de aminoácido cisteína en el ADN de las células de las ovejas, por medio de bacterias. En este caso la manipulación del ADN para la expresión y conservación de la proteína que aumenta la producción de lana, es indispensable. En efecto la cisteína es utilizada únicamente si es integrada dentro del ADN nuclear (Pursel y Rexroad, 1993). Las aplicaciones de manipulación de ADN para el aumento de la producción en especies domésticas son extremadamente diversas, por la creciente demanda de alimentos. Sin embargo, con todo esto no sólo se busca aumento en la producción, sino también, la supresión de limitantes de producción y por lo tanto, se pone de igual forma mucho énfasis en la investigación de especies resistentes a plagas o estrés ambiental. Para obtener una mayor resistencia a enfermedades o producción de anticuerpos contra muchos virus en los animales, se pueden transmitir características. inmunoglobulinas, genes Se mayor ha específicos logrado número de que mayor macrófagos codifican estas producción y de resistencia a varios tipos de retrovirus en algunas especies domésticas (Pursel y Rexroad, 1993). La selección es un factor de suma importancia para lograr el mejoramiento en las poblaciones en que se están trabajando En cuanto a selección se refiere, la naturaleza tiene medios de control como el fenómeno del asesinato del macho después de la copulación, para evitar la endogamia en futuras generaciones. De esta manera se asegura la variabilidad dentro de una especie y el proceso de evolución se hace continuo (Hurst y Hurst 1996). Al contrario, el hombre, para el mejoramiento animal o vegetal suele caer en endogamia, causando efectos secundarios detrimentales en las líneas de plantas o animales mejorados Existen casos en que la selección es altamente exitosa, por ejemplo, selección bajo condiciones natural de controladas, peces. Se han se puede hecho realizar estudios una sobre heredabilidad de un carácter ligado al sexo, que muestran que las hembras se encargan de seleccionar los machos más grandes para aparearse. De esta característica se aprovecha el hombre para obtener una línea de peces de mayor tamaño, que producen carne más eficientemente. Esto demuestra que los caracteres ligados al sexo son de gran interés para el mejora miento genético, puesto que están basados en genes que se identifican fácilmente y se expresan selectivamente en la progenie (Wilcockson et al, 1995). Por otra parte, el uso de marcadores de ADN puede ser una herramienta de diagnosis de enfermedades causadas por defectos genéticos hereditarios, y practicar una selección según este criterio. En un estudio donde utilizaron marcadores de ADN para diagnóstico genómico de la enfermedad Parálisis Hipercálemica Periódica (HYPP) en caballos cuarto de milla se hizo la detección del punto de mutación. Se analizaron 12 caballos descendientes del linaje impressive. Se sometieron los ADN purificados de los leucocitos de estos animales, mediante la técnica de Reacción de Cadena de Polímerasa (PCR) y fueron digeridos por la enzima de restricción Taq I. De esta forma, se estableció el diagnóstico genómico de la HYPP. Los resultados obtenidos fueron: 9 animales portadores heterocigotes y 3 normales homocigotes. Estos resultados demuestran la efectividad del método, para controla esta enfermedad, seleccionando los animales que salgan normales y descartando los portadores. Otro estudio consistió en el análisis de 10 bovinos de la raza Holstein descendientes de la línea Ivanhoe, para la diagnosis genómica del punto de mutación causante de la enfermedad: Deficiencia de Adhesión de Leucocitos Bovinos (BLAD). El ADN de los leucocitos de estos animales fueron sometidos nuevamente a la técnica de Reacción de Cadena de Polimerasa (PCR), pero esta vez fue digerido por la enzima de restricción HAE III y TAQ I. Los resultados revelaron que 2 animales eran portadores y 8 normales. Se pueden eliminar los portadores y detrimentales eficiencia animal mantener en de los sanos generaciones esta práctica por selección y para eliminar posteriores, para evitar esto certificar problemas de los genes demuestra el la mejoramiento producción en la progenie (García et al., 1996). El mejoramiento genético es una herramienta de gran potencial para la obtención de alimentos más saludables y en limitantes porque mayor cantidad, es área un de sin embargo investigación mantiene y no ha sus sido introducida completamente al área de producción. La alta recombinación del ADN permite la obtención de diferentes cuitivares o líneas de plantas y animales mejorados, pero no se ha logrado que éstos tengan ventajas de desarrollo en absolutamente todas las áreas de producción. Por ejemplo, en muchos casos se obtienen plantas de alta producción pero poco resistentes a alguna plaga en especial o bien pueden ser estériles, como suele pasar con un sin número de hibridaciones (Kata et al., 1994). 7. IMPORTANCIA DEL MEJORAMIENTO GENÉTICO EN LA AGRICULTURA Gracias a las técnicas de mejoramiento animal y vegetal se han logrado abastecer las necesidades alimenticias de la población mundial, dejando al pasado las grandes hambrunas como la sucedida en Irlanda en el año 1876. Estas técnicas ofrecen una mayor seguridad para la alimentación de las futuras poblaciones, ya que las especies mejoradas producen una mayor cantidad de alimento en un menor espacio, reduciendo de esta manera el grado de sobreexplotación de los recursos naturales. Además, otro de los propósitos de estas técnicas de mejoramiento es el buscar métodos de cultivos mas amigables con el medio ambiente creando individuos que ofrezcan mayor productividad con mayor resistencia a plagas y enfermedades, reduciendo así, el sobre uso de para la agroquímicos que degradan la fuente de producción. La ingeniería agricultura puesto genética que es es una de vital forma de importancia obtener cultivos y animales que generen mayor ganancias al presentar una eficiencia productiva frente a la difícil situación actual. El uso del ADN se está convirtiendo en una herramienta de gran ayuda para el sector agropecuario, ya que con este se está logrando maximizar la producción de plantas y animales, seleccionando y manteniendo las características deseables de generación en generación. Por medio del uso de ADN, se han logrado muchos objetivos productivos como por ejemplo: se obtienen gametos o animales de raza para producir carne a partir de vacas lecheras y rE con la capacidad de adaptarse a un ecosistema específlco (Pursel y Rexroad, 1993). Se logran beneficios económicos a partir de multiplicación y transformación de las plantas donadas (Hiron, 1991). Se crean individuos muy superiores productivamente a sus ancestros a través de hibridaciones como en el maíz (Kata et al., 1994). Muchas otras características deseables se han conseguido como resistencia a un herbicida específico, a insectos, hongos, bacterias y virus usando plantas con genes de un agente vector. Otro ejemplo es también el aumento de la efectividad alimenticia en plantas como en los trigos, con mayor cantidad de proteínas (Nevo et aL, 1995). La efectividad del mejoramiento genético se logra mediante una selección de genes deseables para transmitirlos a la progenie y eliminando los indeseables, aunque estos últimos son muy difícil de eliminar. Esto se hace a base de marcadores químicos de diversos tipos como por ejemplo, se pueden realizar únicamente los cruzamientos de plantas que contienen los genes que se desea obteniendo individuos con caracteres producción (Kata et el., 1994). óptimos para una mejor 8. CONCLUSIONES El uso del ADN para el mejoramiento animal y vegetal ha dado muy buenos resultados, ya que ha logrado el incremento en la producción, a la vez que se obtiene una mejor calidad en los productos. Del determinados mismo modo, individuos se adquieren ha podido resistencia conseguir a que condiciones climáticas adversas como también a enfermedades a las cuales eran vulnerables. El manipuleo del ADN para obtener sujetos que presenten características importantes de interés para el desarrollo del ser humano, ha sido un área de intensa investigación. Se han utilizado varias técnicas de manipulación genética a lo largo de la evolución de esta área de la ciencia, las cuales han ido mejorando constantemente con el paso del tiempo. Desde el uso de cruzamiento entre especies animales y vegetales, pasando por la implantación de ADN extranjero en el núcleo de una célula son algunos de los métodos que se han utilizado en la búsqueda de maximizar la productividad de los cultivos animales para el beneficio del ser humano. Si bien es cierto que la aplicación del mejoramiento genético animal y vegetal está en su gran mayoría dirigida a la agricultura, pues se trata de obtener más mejores productos para el consumo humano, todavía esta área necesita mayor inversión. Muchos de los programas mejoradores pasan mucho tiempo en estado de observación y certificación antes de ser disponibles para, los usuarios, en este caso los agricultores y requieren también la aceptación productivo. de Por los otro mismos para lado, es permanecer importante en el mencionar sistema que el manipulamiento del ADN tiene mucha importancia en otras áreas de interés del ser humano, como es la medicina por ejemplo. El manipulamiento y el uso del ADN para el mejoramiento animal y vegetal debe ser considerado como una herramienta útil para mejorar las condiciones en las que se encuentra el ser humano moderno. Tratando de vencer aquellos factores como enfermedades, plagas y hambrunas que acabarían con la sociedad humana. 9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS GARCÍA, J.; SÁNCHEZ, A.; VISITIN, J.; LUNGE, V.; BARBANTE, M. AND BERTOLLI, J. diagnóstico mutacao Utilizacao genómico pontual de de marcadores animales causadora de domésticos: da Paralisia DNA para deteccao o da Hipercalémica periódica (HYPP) em equimos da raca Quarto de milha. Braz. J Vet. Res. Anim. Sci. (1996) 38:136-138. GRIFFITHS, A.; MILLER, J; SUZUKI, O; LEWONTIN, R; GELBART, W. 1993. Introduction to enetic Analysis. 5ta edición. New York, USA, FREEMAN. 840 p. HABERFELD, A.; KALAY, O.; WEISBERGER, P.; GAL, O. J. Application of Multilocus molecular ANO HILLIEL, markers in Cattle Breeding: Minisatellites and microsatellítes. J. Dairy Sci (1993) 76:645-652. HIRON, J. La Biotecnología: Una forma de modificar el patrimonio genético. Look Japan (1991) 28: 2-4. HODGKIN, T. ANO DEBOUCK, O. Some possible applications of molecular genetic in the conservation of wild species for crop improvement. Conservation of Plant Genes 153-173. HURST, L. D. ANO HURST, G. 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EL USO DEL ADN PARA EL MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL PREGUNTAS 1. ¿Qué propiedad del AON hace que la progenie posea la mitad de la información genética del padre y la mitad de la madre? 2. ¿Cuál es la importancia de mantener bancos genéticos? 3. ¿Para qué se están usando los bancos genéticos? 4. ¿Qué efecto tiene la endogamia en las líneas vegetales y animales? 5. ¿Por qué el mejoramiento de plantas y animales se hace por manipulación directamente del ADN y no del ARNn o el ARNt? 6. ¿Por qué usan vectores para el mejoramiento genético? 7. ¿Cuál es la desventaja del uso de vectores? 8. ¿Porqué es importante la diagnosis de una enfermedad genómica hereditaria? 9. ¿Cómo ha sabido aprovechar el hombre la selección natural en peces? 10. ¿Cómo obtiene el hombre individuos superiores a sus ancestros en el sector agropecuario? GENETICA APLICADA MEJORAMIENTO GENETICO EN BANANO ATRAVEN DEL USO DE POLIPLOIDIA PRESENTADO POR: José Esteban Ballestero Mónica Lozano Luis Alejandro Navarro PRESENTADO A: Prof. Juan Arias GRUPO 4 Mercedes de Guácimo, 11 de agosto de 1997 MEJORAMIENTO GENETICO EN BANANO ATRAVES DEL USO DE POLIPLOIDIA José Esteban Ballestero Garro, Mónica Lozano Luque, Luis Alejandro Navarro Bulgarelli Desde hace varios años, la genética ha sido una herramienta de gran mejorar calidad. importancia los cultivos, De necesidades para estas de la la agricultura, logrando manera demanda se de altas ha porque ha logrado producciones alcanzado productos y buena satisfacer alimenticios. las En los últimos años el fitomejoramiento genético se ha intensificado por factores como: epifitas, condiciones ambientales adversas, exigencias de calidad por el mercado, la creciente población y la globalización mundial, los cuales limitan la producción. A través de la recombinación de genes, se ha creado nuevos genotipos de plantas como las variedades híbridas con diferentes características agronómicas. Posteriormente se han seleccionado las plantas con las mejores cualidades como líneas parentales, con el propósito recombinación de de genes, desarrollar la su progenie. variabilidad genética En se esta puede manifestar a través de cambios en el número de cromosomas. Usualmente se estudian organismos haploides (n) y diploides (2n). Sin embargo, existen organismos que poseen más de dos juegos completos de cromosomas y desempeñan un papel importante en el sector agrícola. Estos organismos se les conoce con el nombre de Poliploides. Según Gardner (1991) dentro de todos los géneros vegetales conocidos, la mitad de ellos poseen especies poliploides, y la tercera parte de los astros lo son (Milton, 1987). Con base al origen de los cromosomas, existen dos tipos de poliploidia, la autopoliploidia y la alopoliploidia. Los autopoliploides son organismos que poseen múltiples e idénticos juegos de cromosomas y que a la vez se originan de una misma especie. Estos presentan diferentes grados de esterilidad y dependiendo del número de genomas, se les denomina triploides, tetraploides y así sucesivamente. Mientras que los alopoliploides son un producto (le la hibridación de diferentes genomas provenientes de distintas especies. La combinación de estos dos tipos de poliploidia se conoce como autoalopoliploidia, la que aparentemente fue importante en el proceso de evolución de las plantas. La poliploidia tiene una gran importancia en el fitomejoramiento debido a que influye en el incremento y en la diversidad genética del reino vegetal. Este incremento es logrado por cambios en los caracteres de una planta, al alterar el número cromosómico y características por de lo tanto estos el número poliploides se de genes. encuentran Entre su las mayor tamaño, vigorosidad y mayor productividad. Además existen otros cambios como la presencia de tallos más gruesos y resistentes, hojas más anchas y con mayor espesor y frutos y semillas más grandes. Es por esto, que los fitogenetistas buscan duplicar artificialmente el número cromosómico de plantas diploides de una determinada especie. Un ejemplo clásico del uso de poliploidia es el cultivo del banano. Esta actividad es una de las empresas más productivas en el sector agrícola en estos momentos. Sin embargo, a través de su historial se han presentado grandes problemas como enfermedades, sequías y principalmente grandes exigencias en el mercado, que se han podido minimizar con el uso de híbridos provenientes de cruces que dan origen a variedades poliploides. El mejoramiento genético del género Musa ha entrado en un periodo de abundante productividad. Existe un alto número de híbridos producidos en el campo, los cuales han sido seleccionados después de una larga evaluación, esperando altos rendimientos. La resistencia a la Sigatoka Negra (Micosphaerella fijiensis) y el hecho de lograr una mayor productividad son comúnmente los parámetros mas importantes usados en el programa de mejoramiento diferentes del banano, instituciones, el la cual FHIA se en efectúa Honduras, en la cuatro IRFA en Guadalupe, el CNPMF en Brasil y el ITA en Nigeria. El progreso logrado en estos programas depende de la identificación de cultivares diploides con características superiores en el banco de genes y posteriormente el cruce entre ellos para obtener líneas parentales mejoradas. Finalmente estas líneas parentales son cruzadas con cultivares triploides, lo que conlleva a la producción de híbridos tetraploides con resistencia a enfermedades, cambios significativos en el rendimiento y otras características agronómicas deseadas (Langhe, 1993). El banano (Musa spp. AAB y AAA) son plantas perennes del trópico, las cuales desarrollaron frutas partenocárpicas. Los genomas de las principales especies cultivadas se derivan de especies de balbiciana diploides Colla), las salvajes que (Musa acuminata transmiten los Colla genomas y Musa A y B respectivamente. La mayoría de las musas cultivadas actualmente son diploides, estériles y desarrollan un fruto partenocárpico (Ortiz, Vuylsteke, 1995). Según Simmonds (1976) las plantas de los cultivares triploides en banano crecen mas rápido y tienen un mayor tamaño que los diploides. Además los triploides poseen racimos más pesados al desarrollar un fruto más grande por lo que generan una mayor producción. Antes de 1973 la variedad cultivada en el banano era el Gros Michel, que se caracteriza por ser una planta alta, de buena producción y con un sabor de fruto muy dulce. A partir de 1959 se empezaron los programas de creación de híbridos para producir plantas mas pequeñas, por motivo al volcamiento de la planta provocado por el nematodo RadouphuIus simils. Además, en estos programas se trabajó con líneas parentales que fueran resistentes al Mal de Panamá (Fusarium oxysporum), que en aquellos tiempos debido a la alta susceptibilidad del Gros Michel, se consideraba la enfermedad más importante del banano (Rowe y Richardson, 1975). Al trabajar el cruzamiento con mutantes de la variedad gros Michel como el Highgate enano y el Lowgate enano, se crearon los clones triploides Cavendish. Las variedades Valery y Grande Naine (triploides Cavendish) plantaciones resistencia de al Gros Mal de reemplazaron Michel, Panamá casi por puesto y una que buena completo a presentan aceptación las alta en el mercado, ya que su sabor, aunque no supera al Gros Michel, es apreciado por los consumidores. Otra de las ventajas que presentan estos clones es que su tamaño es inferior al del Gros Michel, cualidad importante por que existe menos volcamiento por causa de fuertes vientos o por el peso de racimo (Rowe y Richardson, 1975). Antes de que la Sigatoka Negra se convirtiera en una enfermedad seria en el mundo, las actividades de mejoramiento genético se centraban a incrementar las exportaciones de banano. Sin embargo. con la epifitia de Sígatoka Negra en Honduras en 1973, las investigaciones se orientaron hacia el desarrollo de cultivares resisitentes. Esta enfermedad es considerada como el factor más limitante en la producción del banano en el mundo por que reduce los rendimientos de cosecha entre un 30 y un 50%. Existen estrategias de control químico, no obstante, son socioeconómicamente rechazadas, y por lo tanto se considera que el desarrollo de híbridos resistentes es la técnica más apropiada para el control de esta enfermedad (Vuylsteke, et al, 1993) Para la producción de híbridos con resistencia se identificaron clones con semilla fértil, ya que la mayoría de las variedades diploides son infértiles. Por ejemplo, en el IITA de 113 cultivares en la colección de Musas, sólo 37 son capaces de producir verdadera semilla y un polen viable. De estas plantas se obtuvo sólo una fuente de resistencia para la enfermedad, debido a que los otros recursos genéticos que también generan resistencia, presentan características agronómicas no deseadas, principalmente en peso y tamaño del racimo y esterilidad. Se ha utilizado el clon Burmannicordes) como “Calcutta la línea 4” (Musa parental mas acuminatta frecuente spp. en la producción de híbridos resistentes (Vuylsteke, et al, 1993; Rowe, Rosales, l993). Diferentes estudios basados en la variedad salvaje “Calcutta 4” demuestran que al utilizar variedades resistentes con carácter dominante en forma homocigota, no transmitían en la mayoría de veces dicha característica a la progenie tetraploide. Las diversas reacciones a la Sigatoka Negra por parte de la progenie de bananos tetraploides sugieren que la resistencia a esta enfermedad puede ser regulada por genes recesivos (Vuylsteke, et al, 1992). Por lo tanto se ha podido utilizar variedades susceptibles, pero con superiores cualidades agronómicas para los cruces, y de igual manera se resistencia a dicha enfermedad. ha obtenido una progenie con De esta manera, se han creado siete híbridos tetraploides que están siendo evaluados en seis países de Latinoamérica. El objetivo principal de esta investigación es determinar las reacciones de las plantas a la Sigatoka y de igual manera probar la producción de estos híbridos en el campo. Aparentemente la resistencia ala Sigatoka Negra permite elevar los rendimientos por planta, debido a que existe una mayor superficie en la lámina de la hoja que puede ser utilizada en la fotosíntesis. Como resultado se ha logrado obtener racimos mas pesados y grandes, además se redujo el tiempo entre un ciclo de producción y otro. Una característica típica de los tretraploides es que requieren más de un mes para comercialización. la También, maduración, lo como nuevas estas que beneficia su variedades se derivan de los clones Cavendish, presentan resistencia al Mal de Panamá y tolerancia al nemátodo Radouphulus similis (Rowe y Rosales, 1993). Uno de estos híbridos tetraploides es el FHIA 1 que es resultado del cruce entre el Prata Enano x el clon SH- 3481, que presenta un sabor parecido al de la manzana por lo tanto puede ser un posible sustituto para la variedad Lady finger. Por otra parte el FHIA 2 se obtuvo del cruce entre el clon Williams Cavendish x SH-3393. Este híbrido es muy semejante al clon Valery y puede ser un posible substituto de los cultivares Cavendish, donde la Sigatoka Negra ha sido incontrolable. Ambos tetraploides presentan un sabor muy almidonoso, por lo que no son aceptados en el mercado. características De esta manera, agronómicas aunque deseadas no tengan pueden todas sustituir completo a cultivos de grandes escalas, como el Cavendish. las por A través poliploidia de es este tina estudio herramienta se de puede gran concluir que la importancia para la agricultura. En el caso del cultivo de banano, con la poliploidia se han desarrollado híbridos que ofrecen una mayor producción y resistencia a las principales enfermedades, tal es el caso de los clones FHLA. Con la utilización de estos híbridos se ahorra dinero en el control de enfermedades y de igual manera existe una mayor ganancia económica al haber una mayor producción. En un futuro se debe de trabajar en la producción de híbridos con características de los tetraploides antes mencionados, pero con el sabor semejante al del Gros Michel (Rowe y Rosales, 1993). REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS BRAVER, O.1987. Novena ed. Fitogenética aplicada. Mexico, D.F. Editorial Limusa. 518p. DE LANGHE, E. 1993. Genetic improvement of Banana and Plantain; the New Era. CIRAD-FLHOR (France). 1-9. MILTON, J. 1987. Décima ed. Mejoramiento genético cosechas. México, D.F. Editorial Limusa 453 p. de las MILTON, J. 1987. Tercera ed. Breeding field crops. Ontario, Canadá, Editorial Library of congress catalog. 724 p. ROWE, P; ROSALES, F. 1993. Genetic improvement of Bananas, Platains and Cooking bananas in FHIA. Honduras. CIRAD-FLHOR (France). 243 -257. ROWE, P.; RICHARDSON, D. 1975. Breedíng bananas for diseases resistance, fruit quality and yield. Bulletin no. 2. La Lima, Honduras: Tropical Agricultural Research Services (SIATSA). 4lpp. SIMMONDS, N. 1976. Bananas. In: Simmonds, N. (ed.) Evolution of crop plants, pp. 211-215. Longman, New York and London. VUYLSTEKE, D.; ORTIZ, R.; SWENNEN, R. 1993. Genetic improvement of plantains at The IITA. CIRAD- FLHOR (France). 267 - 281. VUYLSTEKE, D.; ORTIZ, R.; SWENNEN, R. 1993. 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Por otro lado, los alopoliploides son un producto de la hibridación de diferentes genomas provenientes de distintas especies. 3. ¿ Qué es la autoalopoliploidia? - La autoalopoliploidia es la combinación entre los dos tipos de poliploidia, autopoliploides y alopoliploides. Esta combinación fue importante en el proceso de la evolución de las plantas. 4. Mencione tres ventajas de la poliploidia - La resistencia a enfermedades - Vigorosidad en plantas - Mayor producción 5. ¿Cuál es la mayor desventaja que poliploidia? - La mayor desventaja en la poliploidia algunas plantas presentan esterilidad. se es presenta el hecho en la de que 6. ¿ Cuál es el método para producir tetraploides en el banano? a. Identificar diploides con semilla fértil. b. Seleccionarlos y cruzarlos entre si, para crear triploides c. Los triploides de la progenie se cruzan con los diploides, donde el resultado será un híbrido tetraploide. 7. ¿ Qué beneficios ha traído el uso de la poliploidia en el banano? - El uso de la poliploidia en el banano ha logrado controlar enfermedades importantes como la Sigatoka Negra y El Mal de Panamá, además se han incrementado considerablemente los rendimientos por planta. 8. ¿ Qué dificultades se mejoramiento genético en el presentaron en el programa de - Las dificultades que se presentaron en el programa, fue que la mayoría de las variedades producidas mostraron ser infértiles y estos híbridos no presentan un sabor que sea aceptado por el consumidor. 9. ¿ Cuales son los parámetros más importantes utilizados para el programa de mejoramiento? - Los parámetros más importantes fueron: la resistencia a enfermedades y elevar los rendimientos productivos. 10. ¿ Cuál es el futuro del mejoramiento genético en el cultivo del banano? - En el futuro se debe orientar el mejoramiento genético en la producción de híbridos con las características de mayor producción y resistencia ha enfermedades que presentan los clones FHIA. Sin embargo, con un sabor semejante al del Gros Michel. ESCUELA DE LA REGION TROPICAL HUMEDA Trabajo Final de Genética FACTORES QUE DETERMINAN EL SEXO EN PECES Presentada por: Mayra Del Cid. Marcelo Macedo. Jorge Madrigal. José H. Vásquez. 10 de agosto de 1997. INTRODUCCION La determinación de sexo en peces es muy importante en la industria de la acuacultura. En algunas de las especies una de las formas de sexar más rápido y más eficiente es la producción de monosexopoblaciones, que son de gran importancia económica, por ejemplo: en la cultura de las truchas arco-iris, las hembras tienen un alto valor económico. Los machos comienzan a madurar durante los dos años, antes de llegar al porte de cosecha. Durante la maduración la conversión de la comida aumenta y la calidad de la carne decrece. Esto da como resultado que los machos pierdan interés en las fincas. Actualmente es posible obtener un 100% de hembras, ya que acabada la primavera se manipular el sexo de las crías. Sólo dos grupos de especies de peces, las carpas y las truchas, poseen una larga historia en la piscicultura. Varios especies de cargas se han cultivado en Asia por lo menos por cuatro siglos. No obstante, los métodos de producción no recurrían a la tecnología y la reproducción se llevaba a cabo naturalmente en los recolectaban en su estanques estado de granja silvestre. No o los juveniles se existe evidencia de programas de mejoramiento genético, podría asumirse que estos primeros productores seguían un mejor con la mejor" (Gall, 1991). procedimiento de aparear "el ESTABLECIMIENTO DEL SEXO GENETICO En muchas de las especies existen diferencias macroscópicas entre los sexos, como lo es por ejemplo, coloración paterna, características secundarias sexuales (Salmón), y diferentes crías (Carpa común y la Anguila europea ) y la especie de pez gato. Sin embargo, este criterio es aplicado solamente para tratar el sexo fenotípico e individual. También se debe tomar en cuenta que este criterio no se puede usar para distinguir los sexos antes del período o tiempo de diferenciación. Por lo tanto el establecimiento del sexo genético es una herramienta muy importante. No sólo para explotar el recurso, sino también para la industria de acuacultura. Existen diferentes técnicas disponibles para establecer el sexo genéticamente, entre ellas: pruebas de ADN, cariotipos o bandas de cromosomas, HY- antígenos, clon de anticuerpos. DETERMINACION DEL SEXO EN PESCADOS TELEOST Aunque muchas de las teleost especies con cromosomas sexuales no heteromórficos podrían ser demostrados, el sistema heterosomal donde pueden ser usadas otras técnicas. Aproximadamente hace veinte años atrás, estas técnicas eran la más utilizadas para especificar el sexo en los mercados (por ejemplo, el eslabón sexual que da variedad de color) o los usos de cruzamientos intra y interespecíficos relatados a su especie. Recientemente estos tipos de recursos son conducidos directamente por las técnicas genotípicas de la reproducción en combinación de los cruces experimentales con el genotipo de la progenie. En esta progenie puede ser invertido el sexo utilizando la aplicación de hormonas esteroides exógenas. HERENCIA DEL SEXO EN EL RASGO MENDELIANO Los modelos de determinación de sexo en pescados son los siguientes: + Herencia cromosomal. + Determinación del sexo poligénica. Basado en estos, los rangos el sexo a finales de la primavera se realizan los cruces experimentales. Esto determina el sexo y empieza a aparecer el sistema que determina el sexo, prevalece más en pescados, en el XX-Y sistema homogametos femeninos. En un cruzamiento normal se produce 50 y 50 razones de sexos. La reproducción femenina puede producir un 100% en la población femenina en muchos casos. La producción monosexual en una población puede ser de gran importancia económica. La cultura de las tilapias a obtenido grandes progresos cuando ha encontrado estos cruces donde se encuentra toda la población hembra. Esta es una de las primeras explicaciones que asumimos al sistema dual (XX-XY, WZ-ZZ) de la determinación de sexos en las especies de tilapia. Uno de los resultados, es cuatro cromosomas sexuales envueltos en los cruces interespecíficos. Se asume que el cromosoma W y Z son idénticos (Avtalion y Hammerman, 1978). El seguimiento de tres cromosomas sexuales que determinan ek sexo pueden ser aplicados en las especies de tilapia como se demuestra en el cuadro a continuación. Cuadro 1. Genotipos asumidos diversas especie de tilapia. de la determinación sexual Hembra Macho Especies WY YY O.homorum, O. aureus, S. macrochir XX XY O. mossambicus, O. Nicolitus, O. niger de Cruzamiento machos homogamético (YY, Fe. O. homorum) con hembras homogaméticas (XX, Fe. O. mossambicus) como resultado un 100% Machos (XY) a finales de primavera, ahora se tomará en consideración que Y es dominante sobre X ( entonces XY es macho) y W es dominante de Y ( WY es hembra). En otras palabras la influencia de Y es más valiosa en los machos que en X y la influencia de W es más valiosa en hembras que X (entonces WY es hembra y XY es macho, entonces el cromosoma W es dominante en la femenización que el cromosoma X). EL AMBIENTE EN LA DETERMINACIÓN DEL SEXO No solo los genotipos, sino también los factores ambientales, como la temperatura determinación del y sexo. la densidad, Este fenómeno pueden es influir conocido en la como el Ambiente en la determinación del sexo (ADS), es muy común en los reptiles. En los lagartos y las tortugas, la temperatura en la incubación de los huevos determina hembras van a nacer. que cantidad de machos o Chan y Yeung (1983), hicieron una seña de literatura acerca de el ADS en los pescados teleost. En esta reseña, se siguieron ejemplos de ADS en el pez Medina menidia el cual será discutido a continuación. El pez marino Medina menidia engendra en primavera y puede producir de 4 a 5 hornadas de huevos de 2 a 3 meses. En la primera hornada contiene significativamente más hembras que lo esperado 50%. machos. Se En las siguiente hornadas, estas contienen más ha visto que en las primeras hornadas, las temperaturas son más bajas que en las posteriores hornadas. Esto comprueba importante menidia. hipótesis para Por reproducidos que la dice que determinación tanto, macho artificialmente o la del hembra bajo temperatura sexo M. en del el pez menidia condiciones de agua es Medina pueden ser laboratorio. Diversas hornadas de huevos son fertilizadas con el esperma del mismo macho. Cada hornada es dividida en dos y encubada en temperaturas bajas como (11- 19ºC) y altas como (17 – 25º C). En la hornada 5 independiente de la sexta hornada, significativamente hay más hembras que machos en los grupos de huevos, esto es producido por la temperatura del agua. Entre los grupos diferentes de temperaturas, el porcentaje de hembras sin embargo puede fluctuar, esto demuestra la influencia genética aditivo a la determinación del sexo (Conovery Kynard, 1981). ESQUEMA DE LA DIFERENCIACION SEXUAL meiosis de las células ferminales gonadal diferenciación dierenciación somática. Lo que determina la diferenciación cexual son: Los esteroides sexuales (SPC) andrógenos = testículos estrógenos = ovarios MORFOLOGÍA DE LOS SISTEMAS REPRODUCTIVOS Machos: testículos vas deferens Espermatogénesis (espermagonia papila urogenital espermátidas) dentro de cistos cistos: lobular (Sertoil) e intersticial (Leydig). Espermatogénesis y espermiogénesis: espermatogonio espermatocito espermátidas oviductos cloaca espermatozos Hembra: ovarios oogonios, oocitos, células foliculares, vasculares, nerviosas, etc. Tipos de ovarios: 1. Sincronismo total (anguila, salmón) 2. Sincronía por grupos (trucha) 3. Asincronismo Desarrollo del ovario: los oocitos son rodeados por la célula del folículo re-arreglo de las células del folículo = capa granulosa envoltura folicular (células del estroma y tejido conectivos)=teca Oogénesis: Fase pre-vitelogénica (oocitos primarios) Fase vitelogénica endógena exógena Fase post-vitelogénica Atresia Endocrinologia: Estímulos ambientales pituitaria hígado GtH hipotálamo ovario vitelogenina GnRH 17-beta- estradiol crecimiento del oocito Fertilización; Estimulación hormonal de la maduración sexual: Tiene el fin de aumentar los niveles sanguíneos de GtH. Productos: cPs, HCG, GnRH sintética + pimozida o domperidon Dosis: especie específica, pureza de la hormona, etc. Control Sexual: 1. Feminización (truchas) 1- Ginogénesis: solo el material genético femenino es pasado a los descendientes A: inactivación del genoma masculino: Co6O o cs137, químicos, radiación UV B: restauración de poliploidia I: (2pb-ginogénesis) previniendo expulsión del segundo cuerpo polar II: (EM-ginogénesis) evitando la primera división 2- Feminización hormonal: estrógenos período labil dos métodos: en la dieta (e.g. 17-beta-estradiol, 20.100 ppm (mg/kg) inmerción agua (microgramos/L en 30 días) 2. Masculinización (tilapias) 1- Androgénesis: Sólo el material genético masculino es pasado a los descendientes a: Inactivación del genoma femenino (destrucción del pro-núcleo) b: Restauración de primera división) la diploidia (supresisión de la mg/kg de 2- Masculinización hormonal: andrógenos Período labil metil-testosterona alimento.) (desde 0.5 hasta 400 3- Esterilización. Genética: Inducción a triploidía (interferencia en meiosis 1) reyención del segundo cuerpo polar luego de 2pb- ginogénesis Hormonal: Andrógenos dosis altas GENETICA Y LA REPRODUCCION EN LA ACUACULTURA Durante los pasados 20 años, la genérica de los peces ha dado grandes pasos piscicultores gracias de a manejar las la mejoras en la reproducción y capacidad de de los deliberar los experimentos y la aplicación. El descubrimiento general ha sido que la genética cuantitativa de los peces difiere muy poco de la de otros animales y que la aplicación de técnicas de mejoramiento animal son similares para peces y otros animales. Además1 un sin número de técnicas novedosas como manipulación plosdy e inversión de sexo son relativamente fáciles de lograr con varias especies Como resultado, se han posibilitado algunos acercamientos muy especializados a la investigación y sus aplicaciones a la producción de peces, se ve limitada solo por la imaginación de los productores. Sin embargo, sólo se ha dado una aplicación limitada en una basta porción de la industria y el mejoramiento genético de los bancos se ha logrado en pocas instancias. La razón de esta dicotomía aparente entre la oportunidad y la realidad parece relacionarse con la falta de énfasis sobre el mejoramiento genético que demuestra la industria. CONCLUSIONES Actualmente la genética es muy utilizada en la industria de la acuacultura. La manipulación del ambiente o la adición de hormonas, son entre muchos factores los determinantes del sexo en los peces. Lo que contribuye al hombre a obtener un mejor producto de alta calidad que es lo que exige el mercado actual. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS AVTALIONN, R.R.; DON, J. (1990). Determinación del sexo en los genes de Tilapia. Introducción a la teoría de la influencia autosomal. Bamidgesh 30. 115p. CHAN, S.T.H.; YEUNG, W.S.B. (1983). Control del sexo reservado en peces bajo condiciones naturales. Academic Press Inc. New York, NY. 222 p. CONOVER, D.O.; KYNARD, B.E. (1981). El determinación del sexo. Interacción de genotipos en peces. Science, vol. 213p. ambiente en la la temperatura y GALL, G. A. 1991. La genética y la reproducción en la acualcultura. Journal Animal science. Publicado por Sociedad americana de animales. Vol 69, n° 10. Octubre 1991. ESCUELA DE AGRICULTURA DE LA REGION TROPICAL HUMEDA Genética aplicada Profesor: Juan Arias. Grupo: 6 Factores que determinan el sexo en peces 1- ¿Por qué el sexado de peces en la acuacultura tiene una importancia económica? 2- Mencione algunos factores que determinan el sexo en los peces. 3- Mencione dos genéticamente. 4- técnicas utilizadas para establecer el sexo Mencione dos factores ambientales que determinan el sexo en peces y de un ejemplo de alguna especie. 5- ¿Usted cree que el sexado de peces influye en la evolución de los mismos? 6- En los peces teleost, ¿Cómo puede ser invertido el sexo en la progenie? 7- ¿Cómo se comprobó que la temperatura del agua es importante para la determinación del sexo en el pez Medina menidia? 8- ¿Qué procedimiento se asume que utilizaron los primeros productores en el sexado de peces? 9- ¿Qué criterios solamente fenotípico e individual? aplican para tratar el sexo 10- Mencione 2 ventajas y desventajas de la determinación del sexo en peces? EL USO DEL ADN PARA EL MEJORAMIENTO ANIMAL Y VEGETAL PREGUNTAS 1. ¿Qué propiedad del ADN hace que la progenie posea la mitad de la información genética del padre y la mitad de la madre? 2. ¿Cuál es la importancia de mantener bancos genéticos? 3. ¿Para qué se están usando los bancos genéticos? 4. ¿Qué efecto tiene la endogamia en las líneas vegetales y animales? 5. ¿Por qué el mejoramiento de plantas y animales se hace por manipulación directamente del ADN y no del ARNn o el ARNt? 6. ¿Por qué usan vectores para el mejoramiento genético? 7. ¿Cuál es la desventaja del uso de vectores? 8. ¿Por qué es importante genómíca hereditaria? la diagnosis de una enfermedad 9. ¿Cómo ha sabido aprovechar el hombre la selección natural en peces? 1O.¿Cómo obtiene el hombre individuos superiores a sus ancestros en el sector agropecuario? PREGUNTAS 1. ¿ Qué es la poliploidia? - La poliploidia es la cualidad de algunos organismos de poseer más de dos juegos completos de cromosomas, o sea son organismos que superan el numero cromosámico de los diploides 2. ¿Cuales son las dos clases de poliploidia? Explique. - Las dos clases de poliploidia son: La autopoliploidia y la alopoliploidia Los autopoliploides son organismos que poseen múltiples e idénticos juegos de cromosomas y que a la vez se originan de una misma especie. Por otro lado, los alopoliploides son un producto de la hibridación de diferentes genomas provenientes de distintas especies. 3. ¿Que es la autoalopoliploidia? - La autoalopoliploidia es la combinación entra los dos tipos de poliploidia, autopoliploides y alopoliploides. Esta combinación fue importante en el proceso de la evolución de las plantas. 4. Mencione tres ventajas de la poliploidia. - La resistencia a enfermedades - Vigorosidad en plantas - Mayor producción 5. ¿Cuál es la mayor desventaja que poliploidia? - La mayor desventaja en la poliploidia algunas plantas presentan esterilidad. se es presenta el hecho en de la que 6. ¿Cuál es el método para producir tetraploides en el banano? a. Identificar diploides con semilla fértil. b. Seleccionarlos y cruzarlos entre si, para crear triploides c. Los triploides de la progenie se cruzan con los diploides, donde el resultado será un híbrido tetraploide. 7. ¿Qué beneficios ha traído el uso de la poliploidia en el banano? - El uso de la poliploidia en el banano ha logrado controlar enfermedades importantes como la Sigatoka Negra y El Mal de Panamá, además se han incrementado considerablemente los rendimientos por planta. 8. ¿Que dificultades se presentaron en el programa de mejoramiento genérico en el banano? - Las dificultades que se presentaron en el programa, fue que la mayoría de las variedades producidas mostraron ser infértiles y estos híbridos no presentan un sabor que sea aceptado por el consumidor. 9. ¿ Cuales son los parámetros más importantes utilizados; para el programa de mejoramiento? - Los parámetros más importantes fueron: la resistencia a enfermedades y elevar los rendimientos productivos. 10. ¿ Cuál es el futuro del mejoramiento genético en el cultivo del banano? - En el futuro se debe orientar el mejoramiento genético en la producción de híbridos con las características de mayor producción y resistencia ha enfermedades que presentan los clones. Sin embargo, con un sabor semejante al del Gros Michel. PREGUNTAS 1. ¿ Qué es la poliploidia? La poliploidia es la cualidad de algunos organismos de poseer más de dos juegos completos de cromosomas, o sea son organismos que sttperan el numero cromosómico de los diploides 2. ¿ Cuales son las dos clases de poliploidia? Explique. Las dos clases de poliploidia son; La autopoliploidia y la alopoliploidia. Los autopoliploides son organismos que poseen múltiples e idénticos juegos de cromosomas y que a la vez se originan de una misma especie. Por otro lado, los alopoliploides son un producto de la hibridación de diferentes genomas provenientes de distintas especies. 3. ¿ Qué es la autoalopoliploidia? La autoalopoliploidia es la combinación entre los dos tipos de poliploidia, autopoliploides y alopoliploidoes. Esta combinación file importante en el proceso de la evolución de las plantas. 4. Mencione tres ventajas de la poliploidia. - La resistencia a enfermedades - Vigorosidad en plantas - Mayor producción 5. ¿Cual es la mayor desventaja que se presenta en la poliploidia? La mayor desventaja en la poliploidia es el hecho de que algunas plantas presentan esterilidad. 6. ¿Cual es el método para producir tetraploides en el banano? a. Identificar diploides con semilla fértil. b. Seleccionarlos y cruzarlos entre si, para crear triploides c. Los triploides de la progepie se cruzan con los diploides, donde el resultado será un híbrido tetraploide. 7. ¿Qué beneficios ha traído el uso de la poliploidia en el banano? El uso de la poliploidia en el banano ha logrado controlar enfermedades importantes como la Sigatoka Negra y El Mal de Panamá, además se han incrementado considerablemente los rendimientos por planta. 8. ¿Que dificultades se presentaron en el programa de mejoramiento genético en el banano? - Las dificultades que se presentaron en el programa, fue que la mayoría de las variedades producidas mostraron ser infértiles y estos híbridos no presentan un sabor que sea aceptado por el consumidor. 9. ¿ Cuales son los parámetros más importantes utilizados: para el programa de mejoramiento? - Los parámetros mas importantes fueron: la resistencia a enfermedades y elevar los rendimientos productivos. 10. ¿ Cuál es el futuro del mejoramiento genético en el cultivo del banano? - En el futuro se debe orientar el mejoramiento genético en la producción de híbridos con las características de mayor producción y resistencia ha enfermedades que presentan los clones FHIIA. Sin embargo, con un sabor semejante al del Gros Michel.