- ['^ ^,rF^^,S^^^^S Il i^ 1 V(1 ^ Estrategias de control del virus del rizado amarillo del tomate rr rr , r ,r r estadios hasta alcanzar su forma adulta. Duuando se observa al microscopio l'/ f•i^•frs c/c^l ri;,crc/cr nmcu•i/lo dc^l rante gran parte de su desarrollo, estas lar electrónico. TYLCV presenta la mor tunrute (1^1^ZCl^) es un /fe^^on ^ u ^ •irrrs vas son inmóviles. fología característica de los geminipertc^nec•ic^^uc^ a la fiuxilin clr Ic ^.ti Para controlar las infecciones por virus, virus, con una cápsida formada por ^^c^mini ^ •irrrs. 1•:ste ^•ir•us c^.ti Ir^ caresn clc^ se pueden adoptar distintas estrategias dirila unión de dos subunidades idéntiunu c/e^ lu.ti en%erme^clucles mírs gidas a impedir su entrada en la planta, mecas. En el interior de cada virión de TYLCV, se impurtnntes quc^ zf/éctn a Ic ^.ti crrltirns diante el control del vector que lo transmite, o localiza el genoma del virus en forma de una cle tnmate^ a ^rire! m ^ntdial. Fn los bien impidiendo la replicación y/o propagarnolécula de DNA circular de cadena sencilla. últimns /^ n ^ros el "1•1^'I,('l' sc^ ha ción del virus en los tejidos de la planta. EI número de moléculas que componen el gee.^^tc^nrlido rúpiclnntentc^, ^• hcn^ c^n clia noma de TYLCV varía dependiendo de la esc^ct^r /^ rc^sc^ntc^ c^n casi tuclus las ;.nnns de Con^tol ^I^^I vi^^ Iflr pecie, desde una (virus monopartitos) a dos (virus bipartitos). ^ nrc^ric•a, _ 1 siu, :^^i-ic•a r/:'rn•upcr cvn•c^ EI control del vector de transmisión puede En el genoma de las especies de TYLCV climn /^ern ^ ite• el cultirn clel tnmcrtc^. realizarse de tres maneras diferentes: con monopartitas, como las presentes en EspaMaribel Franco, Gabriel Morilla y Eduardo R. trol químico, control físico y control biológico. ña, se identifican seis genes denominados Bejarano. Departamento de Genética. CP, V2, Rep, C2, C3 y C4. Adicionalmente, • Control químico. EI empleo de insectici Universidad de Málaga. das contra 8. tabaci es una de las estrategias existe una región que no contiene ningún que mejor resultado ha dado hasta la fecha gen, denominada región intergénica (IR), sipara combatir la enfermedad producida por tuada entre los genes Rep y V2, donde se loTYLCV. Se han utilizado productos caliza el origen para la replicación del como imidacrotophos, cypermethrin, genoma. imidacloprid, buprofecin o endosul En España se han localizado dos fán. Sin embargo, estos productos especies de TYLCV. La especie denono están exentos de problemas como minada TYLCV-Sr fue detectada por la aparición de insectos parcial o to primera vez en 1992 en zonas del sutalmente resistentes. deste español. En 1997 se detectó la • Control físico. En los cultivos de presencia de otra especie, denomiinvernadero, se pueden utilizar, como nada TYLCV- IL, capaz de infectar medidas físicas de protección frente además de tomate, judía y pimiento. a la mosca blanca, mallas que impi Las zonas afectadas por esta infec dan el contacto de la planta con el inción se corresponden con áreas de secto o plásticos que absorben la luz cultivo de las provincias de Málaga, ultravioleta, que disminuyen la intenGranada, Almería, Murcia. Alicante y sidad de la infección, ya que eliminan Valencia. Este año se ha detectado la parte de la radiación que el insecto presencia de TYLCV-IL también en la necesita para "ver" la planta de la provincia de Barcelona y de TYLCV-Sr que se aliinenta. en las Islas Canarias. Una de las medidas generalmen TYLCV es transmitido por Bemisia te adoptadas, tanto en cultivos al aire tabaci. Este insecto, de 1 mm de talibre, como en los de invernadero, es maño, conocido popularmente como el empleo de láminas amarillas de la mosca blanca del tabaco, algodón polietileno impregnadas con alguna o boniato es capaz, además, de sustancia pegajosa, hacia las que las transmitir otros grupos de virus (carmoscas se sienten atraídas, quedanlavirus, closterovirus, potyvirus, nedo adheridas a las mismas. povirus y crinivirus). Su ciclo de vida • Control biológico. EI control biotiene una duración aproximada de 21 lógico es una estrategia alternativa días, en los que las hembras deposipara el control de la mosca blanca. tan en el envés de las hojas entre basada en el uso de enemigos natu 100 y 300 huevos, que al eclosionar Planta de tomate con los síntoma típicos de la infección por TYLCV. rales del vector. EI desarrollo de esproducen larvas que pasan porvarios 26,!Vida Rural/15 de abril 2000 tos sistemas de control podría permitir la reducción o incluso la eliminación del uso de insecticidas. Entre los parásitos más importantes de B. tabaci, se encuentran los pertenecientes a los géneros Encarsia y Eretmocerus. transferir esta resistencia a tomate se Ilevó a cabo con la accesión LA 121 de L. pimpinellifolium. Posteriormente, se encontró tolerancia a TYLCV en la accesión PI 126935 de L. peruvianum y del cruzamiento de plantas de esta accesión con tomate se obtuvo el híbrido TY 20. Tam bién se ha encontrado tolerancia en diferentes accesiones de L. cheesmanii y L. hirsu tum. Los últimos estudios apuntan a L. chilense como la mejor fuente de resistencia, a pesar de la existencia de ba rreras interespecíficas que im piden la obtención eficiente de híbridos con L. esculentU111. • Resistencias codificadas por el virus. En ocasiones, la infección de una planta con un virus conlleva la "inmunización natural" de la planta contra infecciones posteriores del mismo virus o de virus re lacionados. Este fenómeno, que recibe el nombre genérico de protección cruzada, es Conl^ol f^n la ^^I^an^r En varios laboratorios del mundo se están Ilevando a cabo proyectos para obtener plantas resistentes a TYLCV mediante la introducción, en las plantas, de fragmentos de DNA del virus o de especies de plantas relacionadas. Para Ile var a cabo este proceso, se han utilizado tanto técnicas de mejora tradicional como de transformación genética. • Resistencias codificadas por la planta. Se conocen varios ejemplos de genes de plantas que producen resistencia a TYLCV. Desgraciadamente, estos genes no se en cuentran en Lycopersicon esculentum, pero sí en otras especies silvestres del mismo género (Lycopersicon). Las resistencias encontradas en L. pimpinellifolium han sido las más utilizadas, ya que no existen barreras de hibridación entre esta especie y el tomate. EI primer prograirla de cruzamiento para Lon^ Shelf Life omates pa ra e l mund o estern See4^ .^__^ ^-. :^,.• ,^ Western Seed España, S.A. Centro de Investigación 8^ Desarrollo iels: +34 - 928 12 44 14 •+34 - 928 78 42 12 Fax: +34 - 928 78 42 11 Las Palmas - España E-^naii:wse^^Plix.infercom.es http:/ % www.ediho.es / wes4ern i lla , ^ a^uralmen^e. Western Seed México, S.A. de C.V. Oficina de Venta y Comercialización Tels: +52 • 3122 5286 •+52 - 3122 3449 Fax: +52 - 3122 4181 Guadalajara - México E-rz5aii.xe twru^pra^ q..,^ ^.^-^^: Western Seed International B.V. Oficina de Venta y Comercialización Tel: +31 - 174 648283 Fax: +31 - 174 648199 Naaldwijk - Holanda - E-mail:wseurope^'caiw. nl http: // www. western seed. n I M i 'll ^^ J^ ^_' n t e n s i v o s debido posiblemente a la toxicidad de conocido desde la antig ^ edad y ha sido la proteína truncada. utilizado para disminuir los daños pro2) Expresión de RNA-antisentido. La ducidos por la infección con estirpes viproducción de RNA-antisentido consisrulentas de un virus. La estrategia conte en la expresión de un RNA mensajesiste en infectar deliberadamente las ro (RNAm) que es complementario al plantaciones con una estirpe avirulenta RNAm que codifica para una determio atenuada de un virus para prevenir innada proteína vírica. Esta es una estrafecciones con virus más agresivos de tegia muy utilizada para la supresión de la misma especie o especies relacionala expresión génica en muchos orgadas. nismos. Esta estrategia se ha utilizado Pueden ser varios los mecanismos para obtener plantas de Nicotiana benresponsables del efecto de protección thamiana resistentes a TYLCV-Sr, mecruzada y entre ellos se encuentra la diante la expresión del RNA antisentido producción de partículas subgenómidel gen Rep. cas durante la infección. Estas partícu3) Producción de partículas subgelas son moléculas que se pueden fornómicas del virus. La transformación de mar durante el proceso de infección y plantas con genomas parciales del vique contienen una copia parcial del gerus atenúan la aparición e intensidad de noma del virus, incluyendo siempre el los síntomas, debido posiblemente a orígen de replicación. Su producción que compiten con el geminivirus por la conlleva la disminución de la replicamaquinaria de replicación del DNA. Aunción del genomio viral, por competencia que esta estrategia no se ha probado con la maquinaria de replicación. con TYLCV, sí ha dado buenos resultaEn el caso de TYLCV se ha demosdos para protegerfrente a una infección trado que la infección de distintas plancon otro geminivirus (el virus africano tas de tomate con mutantes de TYLCV del mosaico de la mandioca, ACMV). La de baja virulencia puede proteger efiCultivo de tomate en invernadero de Almería afectado por el virus. producción de estas partículas subgecientemente frente a aislados silvesnómicas está supeditada al establecitres y virulentos de TYLCV. Esta resismiento de una infección por el virus, que apor mismos es muy inferior a la de las plantas tencia no es debida a la formación de partícuta las proteínas necesarias para que se procontrol, y en la mayoría de ellas estos síntolas subgenómicas, ya que éstas no se han enduzca la replicación de ambas moléculas mas terminan por desaparecer. Se ha postucontrado nunca en infecciones para TYLCV. En nuestro laboratorio se ha desarrollalado que el mecanismo por el cual se produ• Obtención de resistencias por ingeniedo una estrategia mixta para la obtención de ce la resistencia es mediante la inhibición del ría genétíca. Con la puesta a punto de las técplantas resistentes a TYLCV, basada en la transporte del virus hacia el núcleo de la cénicas de ingeniería genética, se han desarroexpresión amplificable del RNA-antisentido lula vegetal. Ilado diversas estrategias para la obtención del gen Rep. Esta estrategia combina el RNA La expresión de la proteína truncada del de plantas resistentes a TYLCV basadas en antisentido con el concepto de partículas gen Rep produce la disminución o ausencia la introducción de secuencias de nucleótidos subgenómicas. EI RNA-antisentido se exprede los síntomas de la enfermedad, aunque dide diferentes orígenes, que codifican para sa a partir de un casete integrado en el gecha resistencia viene acompañada de la apafunciones no relacionadas con mecanismos nomio de la planta. En presencia del virus, rición en las plantas de fenotipos anormales, de resistencia a patógenos. La estrategia este casete es amplificado producienmás utilizada consiste en la introducdo moléculas circulares extracromosóción en las plantas de un fragmento del micas, capaces de replicarse, que progenoma del virus para la obtención de ducen RNA-antisentido del gen Rep. plantas resistentes al mismo. Este tipo Disponemos de plantas transgénicas de resistencias ha dado hasta la fecha de N. benthamiana que contienen las buenos resultados a nivel de laboratoconstrucciones para la expresión amrio y ya existen variedades de plantas plificable del RNA-antisentido del gen resistentes a virus que están en proceRep de TYLCV-Sr. Los resultados obteso de comercialización. nidos tras la infección con TYLCV-Sr En el caso de TYLCV, se han utiliza(aislado español), sugieren que las do tres estrategias para el desarrollo construcciones desarrolladas confiede este tipo de resistencia: ren cierto nivel de resistencia frente a 1) Expresión de genes del virus. este virus. Sin embargo, no confieren Para TYLCV existen dos ejemplos de reresistencia frente a TYLCV-IL que tamsistencia de este tipo: la expresión de bién se encuentra presente en Espala proteína de la cápsida ( CP) de la esña, ya que la producción de las molépecie TYLCV-IL y la expresión de la proculas extracromosómicas depende del teína truncada del gen Rep de TYLCVreconocimiento entre la proteína Rep Sr. Las plantas expresando CP desarroEsquema del genomio de TYLCV monopartito. del virus y el origen de replicación preIlan síntomas al ser infectadas por Las flechas corresponde a los genes. sente en el casete. ■ TYLCV-IL, aunque la intensidad de los 28/Vida Rural/15 de abril 2000