EVALUACIÓN DE LA MATERIA ORGÁNICA SOLUBLE DURANTE EL PROCESO DE VERMICOMPOSTEO LUGO de la F.J., DEL AGUILA J. P., ARELLANO L.M., OLMEDO J.Y., SERRANO G.N., VACA P. R. Lab. de Edafología y Estudios Ambientales, Facultad de Ciencias, UAEMex jlugo@uamex.mx Palabras claves: materia orgánica soluble, vermicomposta y grupos funcionales. RESUMEN En el proceso de vermicomposteo se hace necesario el estudio de ciertas variedades de sustancias orgánicas que son fundamentales, es el caso de la materia orgánica soluble (MOS). En la elaboración de las vermicomposta se ven favorecidas las condiciones físicas del suelo mediante las interacciones de los agregados con los grupos hidrofóbicos de las sustancias húmicas al modificar su estructura y el nivel de su fertilidad. Por lo que en este trabajo se evaluaron los cambios en la calidad de la materia orgánica producidos mediante el proceso de vermicomposteo. Se trabajó en 4 tiempos ( 15, 30, 45 y 60 días) de vermicomposteo y posterior a esto a las muestras se les realizo la exracción de la materia orgánica libre y materia orgánica soluble. Se obtuvo que la materia orgánica libre (MOL) tuvo un comportamiento homogéneo en los tiempos estudiados. En cuanto a la MOS en la relación E4/E6 los primeros días del vermicomposteo (15, 30 y 45 días) presentó un grado de asociación mayor en la moléculas y por tanto se presume una mayor humificación. Con respecto a la parte final del proceso (60 días) se observa menor complejidad en las moléculas y menor grado de humificación. Las densidades ópticas relativas (DOR) de la MOS tuvieron una predominancia alifática. INTRODUCCIÓN La calidad del suelo aun es un termino subjetivo que, desde el punto de vista biogeoquímico, se expresa por la medida en que los constituyentes vegetales y microbianos se han modificado en sustancias de naturaleza diferente (sustancia húmicas) que no existen en los seres vivientes, y que se forman en el suelo, a medida en que la materia orgánica (MO) se ha unido a la fracción mineral, ya sea por encapsulación o protección física por la arcilla, o por la asociación de coloides orgánicos y minerales. Desde el punto de vista agrobiológico se habla de calidad de la MO como la medida en mejorar la productividad del suelo y sus características físicas, aumentando la capacidad de regulación de la solución del suelo (Almendros y Dorado, 1999). La denominación genérica de materia orgánica del suelo (SOM), hace referencia a los restos orgánicos de plantas y animales en distintas etapas de transformación, a los compuestos de síntesis microbiológica y/o química, y a los restos de microorganismos y pequeños animales, vivos o muertos (Schnitzer y Khan, 1978; Solomon et al., 2002). Aproximadamente la tercera parte de la materia orgánica puede ser identificada como grupos de sustancias con características químicas relativamente definidas tales como biopolímeros 1 provenientes de residuos vegetales (polisacáridos, polipéptidos, lignina, materiales cuticulares, etcétera); el resto de la materia orgánica es considerada como material húmico que deriva de las transformaciones químicas, físicas y biológicas de restos animales, vegetales y microbianos, resultado de un proceso complejo llamado humificación; por lo que los procesos de humificación y degradación resultan en una pérdida de las características de los materiales estructuralmente identificables (Schnitzer, 1991; Chefetz et al., 2002). La materia orgánica libre (MOL) es considerada como la hojarasca fresca depositada en el suelo, está representa un aspecto negativo de la humificación; este término designa la descomposición más o menos rápida de la materia prima vegetal que, en general, se divide mecánicamente, o es enterrada en los horizontes minerales por la actividad animal (lombrices) y es atacada muy rápidamente por las bacterias y hongos del suelo (Duchaufour, 1984). El estudio de la materia orgánica soluble (MOS) es muy importe debido al gran número de sitios que presenta para formar complejos de diferente fuerza, por lo que juega un papel fundamental en la movilización, inmovilización y transporte de los contaminantes; además de que interactúa intensivamente con las superficies minerales alterando significativamente sus características (Sanders y McGrath, 1988; Calace et al., 2001). La espectrofotometría de infrarrojo, se basa en la absorción de la radiación electromagnética, en la región comprendida entre los 4000-400 cm-1, que causa tensiones vibratorias en las moléculas. Su principal aplicaciones en el reconocimiento de los grupos funcionales presentes en la muestra, al efectuar un barrido en la región de interés donde se presentan las interacciones entre el material y la energía térmica (Serrano, 2005), permite identificar cualitativamente los grupos atómicos que constituyen al material en estudio. La espectrofotometría de luz visible, constituye uno de los métodos no destructivos más empleados para la caracterización de las sustancias húmicas. En estado sólido, los ácidos húmicos son de color negro o pardo muy oscuro debido a los grupos cromóforos y auxócromos, potenciadores de color (Schnitzer y Khan, 1972). Los valores de las absorbancia de las densidades ópticas a 465 nm (E4) y 665nm (E6); la relación entre ellas se utiliza para la caracterización de la materia orgánica y de los ácido húmicos, siendo también considerada como un índice de humificación (Kumada y Sato, 1980). Chen et al.,(1977) observaron que la relación E4/E6 esta inversamente relacionado con el tamaño, peso molecular y grado de asociación entre las moléculas de las sustancias húmicas, pudiendo considerarse como un indicador del grado de complejidad. La intensidad del color, se relaciona con la concentración de radicales libres estables con un alto grado de resonancia, presentes en los ácidos húmicos y fúlvicos, generalmente del tipo semiquinona (Schnitzer y Khan, 1972). Asimismo, empíricamente, la intensidad del color se relaciona con la aromaticidad, incrementándose con el grado de transformación de las sustancias húmicas (hecho relacionado con el grado de humificación – grado de diagénesis de las moléculas biogénicas que pueden constituir el material de origen para la formación del humus) (Traina et al., 1990). Las intensidades de las distintas bandas de los IR están influidos tanto por la concentración de la materia a evaluar en las pastillas de KBr preparadas 2 para obtener los espectros, como sus propiedades físicas, por estas razones, las relaciones de absorción del IR son usados por muchos autores para la caracterización de la materia orgánica soluble y ácidos húmicos (Lugo, 2002). Por tanto las densidades ópticas relativas (DOR) con respecto a una banda fija, permite mostrar datos comparativos entre distintos espectros. Las densidades ópticas relativas se obtienen dividiendo las absorbancias de las diferentes bandas entre una banda fija, para este caso se seleccionaron las bandasla obtenidas a 2920 cm-1 (tensión C-H alifática) y 1510 cm-1 (tensión C=C aromática). En el proceso de vermicomposteo se hace necesario el estudio de ciertas variedades de sustancias orgánicas que son fundamentales, es el caso de la materia orgánica soluble (MOS), la cual se compone de una o más moléculas complejas, que varían en tamaño, proporción, polaridad, y tasa de descomposición (Boyle y Paul, 1989). En la elaboración de las vermicomposta se ven favorecidas las condiciones físicas del suelo mediante las interacciones de los agregados con los grupos hidrofóbicos de las sustancias húmicas al modificar su estructura y el nivel de su fertilidad (Kononova, 1983). Por lo que en este trabajo se evaluaron los cambios en la calidad de la materia orgánica producidos mediante el proceso de vermicomposteo. METODOLOGÍA Se realizaron cuatro muestreos a partir de la cuarta semana de iniciado el proceso de vermicomposteo, donde el primer muestreo se realizó a los quince días hasta completar 60. Las muestras se secaron, molieron, tamizaron y homogenizaron para después hacer la extracción de la MOL y MOS, esta se realizó de la siguiente manera, se pesó 50 g de vermicomposta a la cual se le adicionó 150 mL de H2O y se agitó durante 3 horas a 300 rpm; posterior a esto, se centrífugo y el sobrenadante obtenido se filtró con papel Whatman 40, lo obtenido en el papel, se pesó, obteniendo así la materia orgánica libre (MOL): El sobrenadante obtenido de la MOL se colocó en bolsas de diálisis que se pusieron a dializar contra agua destilada para eliminar las sales; para comprobar que no tuvieran sales, se realizo una prueba con AgNO3. el resultado de la diálisis se puso en cajas petri a 60°C en una estufa durante una noche, el material recuperado se considera la materia orgánica soluble (MOS). Con este material finamente molido se realizaron las pastillas de 200 mg de KBr que contiene 2 mg de muestra desecados en la estufa. Los espectros infrarrojos (IR) con transformada de Fourier se obtuvieron digitalmente en el rango de 4000 a 400 cm-1, en un espectrofotómetro marca Bruker modelo IFS28. RESULTADOS Y DISCUSIÓN La materia orgánica libre en los tiempos estudiados tuvo un comportamiento homogénea, a los 15 días fue de 0.016, a los 30 días fue de 0.025, a los 45 días de 0.03 y a los 60 días de 0.02 gramos. Lo que nos indica que se necesita mas tiempo para que se observe una disminución considerable de la MOL, ya que en condiciones naturales la descomposición de la hojarasca fresca tarda de 10 a 20 años dependiendo al tipo de suelo, clima y vegetación (Duchaufour, 1987). En cuanto a la relación E4/E6 los datos se muestran en el cuadro I; a los 15 días es baja, a 30 días se observa un aumento con respecto a esta, por el 3 contrario a los 40 días disminuye considerablemente y a los 60 días se observa el mayor aumento. Originalmente se consideraba que una baja relación E4/E6 era indicativo de un alto grado de aromaticidad y un valor elevado reflejaría un alto contendido de compuestos alifáticos. Más recientemente se ha pensado que la relación E4/E6 está inversamente relacionado con el tamaño o peso molecular y con el grado de asociación de las moléculas de las sustancias húmicas pudiendo considerarlo como un indicador del grado de complejidad (Chen et al., 1977). De manera que, cuando la condensación y aromaticidad de las sustancias húmicas aumenta, la humificación decrece (Anderson, 1977 y Stevenson, 1982). Por tanto, en los primeros días del vermicomposteo (15, 30 y 45 días) se presentó un grado de asociación mayor en la moléculas y una mayor humificación. Con respecto a la parte final del proceso (60 días) se observa menor complejidad en las moléculas y por lo tanto menor grado de humificación. Cuadro 1. Relación E4/E6 de la materia orgánica soluble en los diferentes tiempos de vermicomposteo. Tiempo de E4 (465nm) vermicomposteo 15 días 0.533 30 días 1.000 45 días 0.436 60 días 1.155 E6 (665nm) E4/E6 nm 0.194 0.253 0.208 0.225 2.74 3.95 2.09 6.88 La espectroscopia de IR ha sido aplicada frecuentemente al estudio de materiales de suelos con el propósito de obtener información sobre la naturaleza de los grupos funcionales. Los IR obtenidos en este estudio presentan una banda muy ancha a los 3400 cm-1 que se atribuye a grupos alcohólicos (O-H de grupos carboxilo e hidroxilo), una banda no bien definida a los 2920 cm-1 corresponde grupos alifáticos (vibración C=O de ácidos carboxílicos y cetonas), posterior a esto, aparece un hombro a los 1720 cm-1 que corresponde a ácidos carboxílicos, una banda bien definida a los 1650 cm-1 que son vibraciones de enlaces peptídicos, también aparece una banda a los 1380 cm-1 que es parte del triplete de la lignina, la presencia de este pico nos puede indicar que la descomposición de la materia orgánica está en proceso, es decir no tenemos la lignina finalmente procesada, y finalmente alrededor de 1030-1060 cm-1 aparece un sistema de bandas de considerable intensidad propias de carbohidratos, un pico importante y que no suele verse es el de 1510 cm-1 en donde aparecen vibraciones de anillos aromáticos. Como se puede observan en la figura 1 los IR para los diferentes tiempos son muy homogéneos, solo difieren en la longitud del pico ya que algunos picos son mas prominentes que otros, pero en general tenemos los mismos compuestos a 15, 30, 45 y 60 días, por tanto no se presenta una variación en la formación de nuevos grupos funcionales durante el vermicomposteo. 4 1060 1250 1720 1605 1380 2960 2360 3400 60 días 45 días 30 días 15 días 3500 3000 2500 2000 1500 Longitud de onda cm-1 1000 Figura 1. Espectros infrarrojos de la materia orgánica soluble en los diferentes tiempos estudiados. Las densidades ópticas relativas se obtienen dividiendo las absorbancias de las diferentes bandas entre una banda fija, en este caso la obtenida a 2920 cm -1 (tensión C-H alifática), como se observa en el cuadro 2. Las densidades ópticas relativas respecto a una banda fija permiten mostrar datos comparativos entre distintos espectros, los datos obtenidos señalan que las muestras presentan preferentemente un carácter alifático (Lugo, 2002; Serrano, 2005). Las DOR en general en todos los tiempos de vermicomposteo trabajados (15, 30, 45 y 60 días) muestran una predominancia más alifática que de los grupos funcionales determiandos. Cuadro 2. Densidades ópticas relativas de la materia orgánica soluble en los diferentes tiempos de vermicomposteo. Picos 3400/2920 2920/2920 1720/2920 1650/2920 1610/2920 1460/2920 1380/2920 1250/2920 1080/2920 1050/2920 DOR(15 días) 1.908 1.000 0.542 1.144 1.318 0.533 0.843 0.704 0.964 0.991 DOR(30 días) 1.594 1.000 0.810 1.304 1.507 1.042 1.005 0.081 0.112 0.115 DOR(45 días) 2.374 1.000 1.329 1.3251.527 0.000 0.747 0.693 0.846 0.915 DOR(60 días) 1.719 1.000 0.625 1.282 1.463 0.000 0.000 0.693 0.846 0.915 5 En el cuadro 3 se muestra la interpretación de los valores obtenidos de las DOR. Cuadro 3. Interpretación de las densidades ópticas relativas Absorbancia/2920 cm-1 < 1 carácter alifático Absorbancia/2920 cm-1 > 1 dominancia del grupo funcional CONCLUSIONES En la primera fase del vermicomposteo se presentó un grado de asociación mayor en la moléculas y una mayor humificación, y en la parte final se observa menor complejidad en las moléculas y menor grado de humificación. No se observaron diferencias en la formación de nuevos compuestos químicos durante el vermicomposteo. La vermicomposta es un proceso importante para mejorar la calidad de la materia orgánica ya que esta en mas fácilmente degrada por los organismos del suelo. REFERENCIAS Almendros G. y Dorado J. (1999). Structural factors related to the biodegradability of laboratory-modified humic acid preparations. Eur. J.Soil sci. 50:227-236. Boyle M., Paul, E.A., (1989). Carbon and nitrogen mineralization kinetics in soil previously amended with sewage sludge soil. Soil Science Society of America Journal (53) 99-103. Calace N., Liberatori A., Petronio B.B., Pitroletti M., (2001). Characteristics of different molecular weight fractions of organic matter in landfill leachate and their role in soli sorption of heavy metals. Environ. Pollut. 113: 331-339. Chen W., Tan S. K., Tay J.H. (1977). Distribution Factional composition and realese of sediment-bound hearvy metals in trofical researvoirs.Wat Air and soil Pollut. 92:273-287. 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