UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE GUIA DIDACTICA INGENIERÍA GENÉTICA AGROPECUARIA Dra. LUZ MERY BERNAL PARRA Ph.D. BIOLOGA GENETISTA Bogotá, 2007 1 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria PROTOCOLO ACADÉMICO 1. Nombre del curso: Palabras clave: Institución: Ciudad: Autor(es) del Protocolo Académico: Año: Unidad Académica: FICHA TÉCNICA INGENIERÍA GENÉTICA AGROPECUARIA Ingeniería Genética, ADN recombinante, Organismos Genéticamente Modificados (OGM), Transgénesis Vegetal, Transgénesis Animal Universidad Nacional Abierta y a Distancia -UNAD. Bogotá – Colombia Luz Mery Bernal Parra Tel. 2459470/3002225525 lmbernal@etb.net.co lmbernalp@gmail.com 2007. Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente. Campo de formación: Área del conocimiento: Profesional Biología, Microbiología, Agronomía, Veterinaria y programas afines. Créditos académicos: Dos (2), correspondiente a 96 horas de trabajo académico: 64 horas promedio de estudio independiente y 32 horas promedio de acompañamiento tutorial. Metodológico (Teórico-Práctico). Estudiantes de diversos programas de postgrado de la Facultad de Ciencias Agrarias o de otras Facultades de la Institución. El estudiante describe y relaciona las técnicas empleadas en la ingeniería genética para la obtención de OGM, así como de manera suficiente adquiere nociones, conceptos y resuelve situaciones relacionados con la tecnología del ADN recombinante. El estudiante desarrolla habilidades prácticas en el manejo de técnicas de biología molecular claves para la aplicación de la tecnología del ADN recombinante. El estudiante utiliza los fundamentos teóricos para determinar las principales aplicaciones de esta tecnología especialmente en el campo agropecuario. A distancia. Tipo de curso: Destinatarios: Competencia general de aprendizaje: Metodología de oferta: Formato de circulación: Denominación de las unidades didácticas: Zootecnia, Documentos impresos en papel con apoyo en Web; CDROM. Unidad 1. Conceptos y perspectiva histórica de la tecnología del ADN recombinante. Unidad 2. Aspectos tecnológicos en la obtención de plantas y animales transgénicos. 2 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 2. INTRODUCCIÓN Desde hace milenios el hombre ha domesticado diversas especies animales y vegetales para beneficio propio y para mejorar el ambiente. De estas especies se obtiene una gran cantidad de productos que contribuyen al sostenimiento de la población. La agricultura, la ganadería y la pesca (todas ellas actividades de importancia en la economía de los países) dependen de la explotación de organismos superiores, como también de una gama muy variada de productos que son resultado de la actividad de microorganismos; alimentos y bebidas fermentadas, solventes, antibióticos, vitaminas, enzimas, fármacos y muchos otros más. Todas las técnicas de aprovechamiento de los sistemas biológicos, se inscriben en el ámbito de la biotecnología, a la cual se ha incorporado recientemente la ingeniería genética que hace posible la manipulación del genoma de los seres vivos. Así, gracias a la utilización de los conocimientos de biología y a las técnicas propias de bioquímica, microbiología, genética, biología molecular e ingeniería química, la biotecnología permite aprovechar en el plano tecnológico las propiedades y los productos de microorganismos, células en cultivo y organismos superiores. Podemos considerar la biotecnología como un ámbito de formación e integración vertical de capacidades científico-tecnológicas que requiere una permanente actualización de diferentes conocimientos en disciplinas de base como genética, bioquímica, ingeniería de procesos, así como un espacio de innovación horizontal que cruza transversalmente diferentes sectores productivos, tales como el agropecuario, agroindustrial y farmacéutico, de modo que ofrece amplias perspectivas para desarrollar productos y servicios. Los avances de la biotecnología especialmente en la ingeniería genética, están transformando los mercados y ampliando el horizonte de oportunidades en diversos campos de la agroindustria y tiene un impacto decisivo en la intensificación y diversificación de las cadenas y procesos productivos. El crecimiento poblacional es muy importante en términos cuantitativos. En el año 2030 la FAO ha señalado que habrá 10 mil millones de personas –o sea casi un 40% más de las de hoy- y que la mitad de esta población vivirá en ciudades. Esto tiene componentes de fuerte urbanización y de cambios rápidos de los valores culturales de los pueblos. Desafía a los sistemas, ya que hay que proveer a los nuevos ciudadanos de educación, servicios y alimentos. Se debe asegurar alimentación para todos –pobres y ricos- y por tanto se necesitan nuevas cadenas agroindustriales que aseguren la producción y la distribución de los alimentos. En relación con el medio ambiente, se evidencia una variación de los parámetros que caracterizan al clima a lo largo del planeta. Los efectos para la agricultura se manifiestan en modificaciones en las temperaturas medias, los regímenes de precipitación, la estacionalidad, los incrementos en pestes y ocurrencia de malezas entre otros. Las nuevas condiciones ambientales establecen que los cultivos y los sistemas deban poseer nuevas capacidades para la producción. 3 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria La ciencia y la tecnología están transformando la estructura económica y social de muchas naciones y, por ser instrumento indispensable de progreso, necesita un impulso sin precedentes. La UNAD consciente de los avances biotecnológicos diseñó un curso de Ingeniería Genética Agropecuaria orientado a profesionales en el área, que contribuya a la investigación y desarrollo de productos y servicios relacionados con el sector agropecuario y agroindustrial. También que proporcione información para viabilizar la aplicación más efectiva de la tecnología disponible, para evaluar políticas y programas y sugerir prioridades para nuevos direccionamientos en investigación. El objetivo fundamental del curso consiste en preparar profesionales que tengan los conocimientos para desarrollar tecnología de punta en esta área y que estén capacitados para incorporar nuevas técnicas. Los alumnos serán incentivados a participar activamente en los trabajos de laboratorio ya que de esta manera serán entendidas las técnicas del ADN recombinante, aprenderán cómo y por qué son producidas las plantas y los animales transgénicos y sus aplicaciones. De igual manera serán estimulados para participar en las discusiones sobre este controvertido tema. El curso Ingeniería Genética Agropecuaria está compuesto de dos créditos académicos, se inscribe en el campo de postgraduación con un carácter electivo y pertenece al tipo metodológico (teórico-práctico), por lo cual el estudiante además de los conocimientos teóricos, tendrá la oportunidad de complementarlos con prácticas de observación en campo, como visita a entidades que desarrollan esta tecnología. Además son designadas prácticas complementarias en el laboratorio. El curso académico se estructura en dos (2) Unidades: • Unidad 1. Conceptos y perspectiva histórica de la tecnología del ADN recombinante • Unidad 2. Aspectos tecnológicos en la obtención de plantas y animales transgénicos La Unidad 1. Comprende los temas principales que se reúnen bajo la denominación de tecnología de ADN recombinante. En este campo se han verificado los progresos más notables de los últimos años, sobre los cuales reside el futuro de la ingeniería genética. Estos temas serán presentados bajo una perspectiva histórica en donde se conocerá cómo y a quién se deben algunos de los progresos fundamentales. Con el objeto de comprender la tecnología del ADN recombinante se debe comenzar por conocer las principales moléculas constitutivas. Una introducción básica al estudio de la molécula de ADN como unidad fundamental, se hará en uno de los capítulos de esta unidad, donde se examinará la estructura y su función y se relacionará con las diferentes enzimas de restricción claves para generar un Organismo Genéticamente Modificado 4 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria (OGM). Los principales métodos de estudio del ADN también serán enunciados y se hará énfasis en la comprensión de estos por medio de ayudas audiovisuales y recursos educativos en la Internet. También en esta unidad se examinarán los principales métodos de transformación del organismo huésped y se analizará en particular el papel de las principales técnicas que nos llevan a detectar si el gen foráneo se ha integrado al genoma, y si se expresa. Además se expondrá de manera sucinta las bases que nos llevan a determinar la respuesta biológica de la planta o animal transformado y seleccionar cuál de los clones obtenidos es de interés comercial o científico. La Unidad 2. Abarca los aspectos fundamentales en la obtención de un OGM tanto animal como vegetal. Esta unidad adquiere importancia especial, puesto que en ella se exponen los fundamentos recientes sobre esta tecnología, los factores que intervienen en el uso de una u otra técnica, además las continuas interrelaciones entre ellas. Así mismo, se tocan tópicos relacionados con aplicaciones prácticas de la transgénesis vegetal y animal. Cada uno de los capítulos cuenta con una introducción que permite que el alumno se familiarice con conceptos que serán abordados más adelante. Cabe destacar de modo significativo la lección sobre: Implicaciones biológicas, éticas, económicas y comerciales de los OGMs, donde se expone de manera breve algunas de las controversias que ha generado en la sociedad la aplicación de esta tecnología. Son muchas las dudas generadas en la población, relativas a los OGMs: ¿Qué puede pasar si se ingiere un transgénico?, ¿Habrá transgénicos a la venta en los supermercados, sin qué los productos estén debidamente identificados y rotulados?, ¿Cuál es la legislación vigente y cual sería el efecto a mediano y largo plazo si algunos transgénicos se dispersan en el ambiente?. Estas y otras preguntas serán aclaradas parcialmente con la información suministrada en la lección, pero además se propone un foro abarcando estos temas que será abierto después de la lectura de artículos publicados en diversos sitios de Internet. Este foro esta encaminado a emitir juicios de valor, personales y fundamentados, sobre las implicaciones éticas de la manipulación genética. La metodología que se emplea en el desarrollo del curso consiste en información teórica suministrada al estudiante que le permite desenvolver la habilidad para comprender y relacionar los conceptos y técnicas empleadas en la nueva tecnología que se le presenta. La consulta de textos, artículos científicos y recursos educativos en la Internet pretende servir de apoyo para un aprendizaje más amplio que garantice una mejor asimilación de las temáticas estudiadas. Es de gran importancia tanto el trabajo individual como la participación activa del estudiante con el tutor y de los estudiantes entre sí. Por medio de actividades específicas se promueve esta integración. 5 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria Se sugieren prácticas de campo en las que se contempla la visita a entidades que desarrollan esta tecnología como el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA), Universidad Nacional de Colombia y Pontificia Universidad Javeriana. Además se ha designado una práctica de laboratorio complementario donde se elabora el protocolo correspondiente a la Construcción de un Mapa de restricción, con el manejo de enzimas de restricción, herramientas básicas de la ingeniería genética y el uso de la reacción en cadena de la polimerasa, técnica ampliamente utilizada. Al final del curso el alumno esta capacitado para la elaboración de un trabajo escrito sobre un modelo de investigación, en donde se emplearan algunas de las técnicas estudiadas, teniendo como base los conocimientos teóricos, prácticos, las lecturas de textos, artículos científicos y consultas en Internet. El modelo propuesto debe ser un sistema integrado por un componente productivo y por un componente de desarrollo tecnológico. Se debe elaborar un diseño conceptual del modelo y deben ser planteados los objetivos, marco teórico, conclusiones y recomendaciones. La propuesta será analizada y discutida en clase tutorial. Los criterios de evaluación se guían por los parámetros propuestos en el Proyecto Académico Pedagógico que presenta diferentes niveles de acuerdo a las circunstancias y situaciones acordadas entre tutores y estudiantes. Autoevaluación: el propio estudiante evalúa su proceso de aprendizaje e identifica sus alcances y limitaciones. Coevaluación: proceso colaborativo de evaluación por medio del cual se valora el trabajo personal, los progresos, inquietudes y aportes frente a sus compañeros. Heteroevaluación: valoración del tutor de los resultados del aprendizaje donde se determina los avances y logros de los estudiantes por medio de estrategias metodológicas destinadas para este fin. Se incluye el uso del portafolio de desempeño personal en donde se llevaran los registros del trabajo cognitivo como el informe de lecturas, preguntas contextualizadas y talleres. Además se programa una evaluación final. 6 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 3. JUSTIFICACION La Ingeniería Genética tiene como arma poderosa la manipulación del ADN para identificar, seleccionar, aislar y transferir genes específicos, seleccionados de un amplio pool génico. Con el uso de esta tecnología se espera alcanzar nuevos productos ecológicamente sustentables, más productivos y de superior calidad. Esta ciencia está revolucionando todas las áreas del conocimiento incluyendo la agricultura y la ganadería, campos que en este momento ya son considerados blanco de una gran transformación tecnológica. Los analistas aseguran que el siglo XXI será el siglo de la Ingeniería Genética. Por tanto se trata de un área estratégica y de gran interés para las Universidades que ofrecen las Carreras Agropecuarias. El conocimiento de las técnicas de ADN recombinante y su aplicación conducen al avance de la productividad agropecuaria, al mejoramiento en la calidad de los alimentos, al desarrollo de estrategias que reduzcan el uso de pesticidas y fertilizantes, con la consecuente protección del suelo. Cualquier tecnología compleja necesita para su desarrollo de una infraestructura sustentada en una comunidad que involucre la investigación, la educación, la legislación. Se requiere una comunidad para hacer que una tecnología pase por etapas de prueba, de concepto, desarrollo, maduración, extensión y finalmente termine con su adopción. Muchos esfuerzos con distintas modalidades se han aplicado en diversos países para catalizar el crecimiento de estas nuevas biotecnologías. En todos ellos la estrategia esta dirigida a establecer una comunidad con visión científica y competitiva. Es importante entonces fomentar el establecimiento de una capacidad científica en biotecnología, especialmente en herramientas como la ingeniería genética, en alumnos, principalmente en aquellos que de alguna manera tiene relación con las carreras agropecuarias y afines, que puedan producir un impacto favorable en el desarrollo socioeconómico e impulsar la capacidad de investigación. Este curso está diseñado para cumplir con lo propuesto anteriormente y además crear en el alumno una capacidad de reflexión y crítica en cuanto a la aplicación de esta metodología. 7 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 4. INTENCIONALIDADES FORMATIVAS 4.1. PROPÓSITOS Contribuir a la formación científica de los estudiantes, mediante la profundización en los conocimientos teóricos y prácticos relacionados con la Ingeniería Genética. Valorar la importancia que actualmente tienen estas técnicas y su proyección a futuro, evaluando sus implicaciones en las distintas áreas del conocimiento. Capacitar al estudiante en el uso de las nuevas tecnologías para viabilizar la aplicación más efectiva de la tecnología disponible en el campo agropecuario. Generar en el estudiante procesos de análisis que lleven a integrar los diferentes conceptos para futuras aplicaciones. 4.2. OBJETIVOS Proporcionar los conceptos que permitan entender la Biotecnología como una ciencia que está revolucionando la producción. Adquirir conocimientos sobre la Ingeniería Genética concretamente los encaminados a entender y comprender los fundamentos de la transgénesis. Definir los términos afines con la biotecnología del ADN recombinante y conocer las bases científicas de las metodologías moleculares relacionadas. Identificar los métodos directos de transformación de células vegetal y animales para la obtención de un OGM. 4.3. COMPETENCIAS El estudiante describe y relaciona las técnicas empleadas en la ingeniería genética para la obtención de un OGM, así como de manera suficiente adquiere nociones, conceptos y resuelve situaciones relacionados con la tecnología del ADN recombinante. El estudiante desarrolla habilidades prácticas en el manejo de técnicas de biología molecular claves para la aplicación de la tecnología del ADN recombinante. El estudiante utiliza los fundamentos teóricos para determinar las principales aplicaciones de esta tecnología. 8 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 4.4. METAS Una vez el estudiante finalice el curso de Ingeniería Genética Agropecuaria estará en capacidad de: Reconocer, desarrollar y aplicar la nueva metodología como apoyo a sus actividades profesionales. Entender la relación entre ADN recombinante y OGMs. Presentar y sustentar un informe personal sobre un modelo de investigación, en donde se aplique el conocimiento adquirido y se relacione con conocimientos adquiridos en otros cursos académicos. 9 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria UNIDAD 1. Conceptos CAPITULO 1. Biotecnología *Introducción *Conceptos *Biotecnología en producción agrícola y animal *Estructura del ADN *Historia y perspectiva histórica de la tecnologia del ADN recombinante. 2. Aspectos tecnológicos en la obtención de plantas y animales transgénicos TEMAS SECCIONES *Líneas puras *Micropropagación genómica *Transferencia de embriones *Fecundación in vitro *Sexado de semen y embriones *Caracterización molecular de genotipos 2. . Tecnología del ADN recombinante *El ADN recombinante y su historia *Conceptos *Principios de la Tecnología de ADN Recombinante l *Principios de la Tecnología de ADN Recombinante ll *Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) *Clonación del ADN *Enzimas de restricción *Vectores 3. Métodos de análisis del ADN *Obtención del ADN *Southern Blot *Northern Blot *Western Blot *Electroforesis *Hibridación de los Ácidos Nucleicos *Extracción del ADN en tejidos vegetales y animales 4. Biotecnología Vegetal *Métodos directos de transformación para introducir genes de interés en la célula vegetal *Obtención de un vector en transgénesis vegetal *Electroporación de protoplastos *Infección con Agrobacterium tumefaciens *Transformación de células de Agrobacterium con genes de interés *Plásmido *Gen de interés *Gen de selección. *Promotores *Operón *Tecnología antisentido *Aplicación de la técnica *Otros Métodos de Transformación *Plásmido Ti *Plásmido “helper” *T-ADN 5. Métodos de transformación 10 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria *Conjugación *Shock térmico (freeze – thaw) *Interruptor a distancia: transwitch *Selección *Enraizamiento *Rustificación *Biobalística *Resistencia a insectos *Resistencia a virus *Infección por hongos *Infección por bacterias *Resistencia a estrés abiótico *Tolerancia a herbicidas *Incremento del valor nutricional de los alimentos * 6. Biotecnología animal *Métodos de obtención de animales transgénicos *Técnicas de transgénesis *Principales aplicaciones *Algunos ejemplos de animales transgénicos Animales knockout *Animales knockin *Construcción e Inserción del transgén *Espermatozoides vectores *Microinyección de ADN *Vectores virales *Manipulación de células embrionarias *Control de enfermedades *Producción de proteínas terapéuticas *Xenotrasplantes *Pecuaria e Industria *Modificación de la leche para consumo humano 11 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 6. CONTEXTO TEÓRICO Ya desde 1798, Thomas Malthus, en su ensayo “An Essay on the Principle of Population” (Ensayo sobre el principio de la Población), anunciaba que la producción mundial de alimentos sería insuficiente para acompañar el aumento demográfico. La población mundial crece aceleradamente, de acuerdo con algunas proyecciones, a un ritmo de cerca de 90 millones de personas por año. Se estima que 15% de la población del mundo en desarrollo, aproximadamente 80 millones, no tienen comida suficiente para sus necesidades, por causa de la pobreza. La falta de alimentos tiene como consecuencia la muerte de casi seis millones de niños con menos de cinco años en países en desarrollo (UNICEF, 1998). Se suma a esto, las deficiencias en micronutrientes como yodo, hierro y vitamina A. La producción de alimentos para acompañar la demanda tendrá que ser encuadrada en un contexto de escasez de factores de producción (suelo y agua), sin agravar los efectos al medio ambiente que podrían ser causados por el crecimiento de áreas para agricultura. Cambios en los patrones del clima y alteraciones en el uso de la tierra ampliaran los problemas de producción. Es prioritario entonces, encontrar una alternativa capaz de sustentar el aumento poblacional. Una de las opciones con mayor viabilidad pasa por el área de la biotecnología, particularmente en el desarrollo de OGMs tanto en el campo de la agricultura, como en la ganadería. La ingeniería genética surge, potencialmente, como una tecnología que permitiría con su aplicación, ganancia en la productividad, aumento en la oferta de alimentos, al mismo tiempo que reduciría el ritmo de explotación de nuevas áreas cultivables, generando con esto resultados positivos para el medio ambiente y la sociedad como un todo. Estando esta tecnología en máximo desarrollo, se encuentra más susceptible a la polémica. Esta nace de la asociación de los OGMs con temas tan sensibles como la salud, la alimentación y el medio ambiente, llevando al rechazo de una parte de la sociedad, para que estos organismos se establezcan. Sin embargo, existe gran desinformación al respecto de los posibles impactos que la ingeniería genética pueda tener sobre la calidad del producto final para el consumo humano, además de existir dudas acerca de los posibles efectos a largo plazo para el medio ambiente. En un documento específico sobre este tema, la FAO reconoce que la biotecnología, específicamente la ingeniería genética, se esta estableciendo en la mayoría de los países. Sin embargo, el nivel de investigación, desarrollo y uso para la agricultura, ganadería y pesca en los países del tercer mundo, está lejos del nivel de los países industrializados. Entre los países en desarrollo, el estatus varía considerablemente. Unos pocos como Brasil, México, Argentina, India, China y República de Corea, han procurado obtener plena capacidad científica y tecnológica, especialmente en la biotecnología agrícola. Otros como Indonesia, Malasia, Filipinas y Tailandia, están desarrollando esta tecnología especialmente para su aplicación en agricultura e industria. La participación del sector 12 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria privado para adquirir capacidades biotecnológicas no es significativa en la mayoría de estos países. Todo lo anterior indica la necesidad de formar especialistas en esta área que tengan conocimientos específicos de las nuevas tecnologías y que puedan ampliar la escala de recursos humanos para colaborar en un determinado proyecto que permita la articulación de las aplicaciones biotecnológicas a nivel de las cadenas productivas, orientadas al desarrollo de productos y servicios. Es imperativa la adopción de medidas que permitan el fomento de la investigación, la enseñanza y la difusión de la ciencia y la tecnología. Además es imperativo conocer información científica válida y de alta calidad, para poder transmitirla a la gente del común que no tiene acceso a esta información y que por posiciones cada vez más radicales puede oponerse al uso de esta tecnología. La formación de los profesionales agrícolas debe contemplar el conocimiento de la cultura comunitaria y del medio para desarrollar un papel más integral en la orientación de los procesos productivos. 13 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 7. METODOLOGÍA Con respecto a la metodología, está orientada para que el proceso de aprendizaje sea óptimo, para esto se propone la implementada por la UNAD, con el uso de ayudas pedagógicas y tecnológicas ya existentes, donde las actividades de aprendizaje sean de carácter individual y grupal, permitiendo que el alumno genere el proceso de aprendizaje a su propio ritmo de trabajo. La lectura del Protocolo y la Guía de Actividades le permiten al estudiante un desempeño adecuado en este proceso ya que encontrará la información necesaria (visión general del curso, propósitos, metodología de trabajo) para que relacione secuencialmente su aprendizaje. El estudiante debe seguir el plan de trabajo propuesto en la Guía, y además complementarlo con actividades orientadas por el tutor. El estudio individual es independiente y es el tipo de actividad al que el estudiante dedica más tiempo y para ello se vale de todos los medios y ayudas pedagógicas proporcionadas, además con orientación del tutor serán realizadas diferentes actividades en los llamados, encuentros programados, que pueden ser a nivel individual, en pequeños grupos o en grandes grupos. Estos encuentros pueden ser virtuales o presenciales y el objetivo específico es el de interactuar con el tutor, con los demás integrantes del curso y tener la oportunidad de resolver inquietudes, analizar casos especiales, ampliar conceptos, compartir experiencias personales, discutir problemas específicos. La asesoría por parte del tutor será continua, se manejarán diferentes mediaciones de comunicación sincrónica como el teléfono, la tutoría y asincrónica como el correo electrónico y el foro virtual. El estudiante recibirá una bibliografía que debe ser una herramienta de consulta. El estudiante deberá facilitar su proceso de aprendizaje presentando oportunamente los trabajos propuestos en las sesiones designadas para esto. Se realizarán prácticas de campo que se programarán desde el inicio del curso, como la visita a entidades que desarrollan la tecnología del ADN recombinante (Instituto Colombiano Agropecuario (ICA), Universidad Nacional de Colombia y Pontificia Universidad Javeriana). Además se ha designado una práctica de laboratorio complementario donde se elabora el protocolo correspondiente a la Construcción de un Mapa de restricción, con el manejo de enzimas de restricción, herramientas básicas de la ingeniería genética y el uso de la Reacción en Cadena de la Polimerasa, técnica ampliamente utilizada. Todo lo anteriormente descrito será complementado con la elaboración de talleres específicos para cada actividad práctica. 14 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria Se realizará un foro acerca de las Implicaciones biológicas, éticas, económicas y comerciales de los OGMs donde cada alumno debe participar obligatoriamente y que será abierto después de la lectura de artículos publicados en diversos sitios de Internet. Esta actividad virtual tendrá espacio y tiempo programado dentro del período académico. Cada alumno debe participar en forma asincrónica dando respuesta a una pregunta. El tutor retroalimentará en forma constructiva los contenidos aportados por los estudiantes y cada estudiante podrá interactuar sobre aportes que hagan los compañeros. Al final del curso el alumno esta capacitado para la elaboración de un trabajo escrito sobre un modelo de investigación, en donde se emplearan algunas de las técnicas estudiadas, teniendo como base los conocimientos teóricos, prácticos, las lecturas de textos, artículos científicos y consultas en Internet. El modelo propuesto debe ser un sistema integrado por un componente productivo y por un componente de desarrollo tecnológico. Se debe elaborar un diseño conceptual del modelo y deben ser planteados los objetivos, metodología y conclusiones. La propuesta será analizada y discutida en clase tutorial. Después de cada Unidad serán programadas actividades, tareas y lecturas recomendadas que el estudiante debe estrictamente desarrollar, estas actividades están encaminadas a enriquecer el conocimiento y motivarán al estudiante a la búsqueda de información adicional, la cual podrá obtenerse en la bibliografía suministrada que se encuentran al final del texto. La programación de laboratorios y salidas, tiene como objetivo que exista una relación del contenido teórico y experimental. Cada alumno antes de la práctica debe consultar acerca de la metodología que se va a desarrollar. Un informe de laboratorio tiene que ser elaborado por el estudiante y entregado una semana después, donde se especifique resumen, palabras claves, introducción, metodología, resultados, discusión, conclusiones y bibliografía, con el fin de adquirir herramientas de síntesis, análisis y crítica sobre el trabajo realizado. 15 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 8. EVALUACION Como se mencionó anteriormente, los criterios de evaluación se guían por los parámetros propuestos en el Proyecto Académico Pedagógico que presenta diferentes niveles: Autoevaluación: Es un proceso de autocrítica que evalúa el proyecto personal de aprendizaje. Se verifica a partir de la reflexión objetiva que el estudiante hace de su propio proceso de aprendizaje. El estudiante debe calificar constructivamente sus propios esfuerzos, su grado de participación en trabajos colaborativos y el aporte personal al proceso de aprendizaje. Coevaluación: Se realiza mediante evaluación por los compañeros. Esta metodología propicia la retroalimentación cualitativa, la integración del grupo, la cooperación, la responsabilidad y favorece el desarrollo de competencias cognitivas y de convivencia. Heteroevaluación: El tutor hace una evaluación del proceso de aprendizaje de cada estudiante durante el curso. Esta evaluación esta encaminada a verificar la adquisición de competencias y logros de aprendizaje. La participación individual y colectiva, lo mismo que los aportes en foros, calidad del trabajo de investigación, claridad en la presentación de los informes escritos, puntualidad en la entrega y la actitud que demuestre el estudiante para aprender, serán criterios de evaluación que el tutor deberá tener presente. 16 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 9. GLOSARIO DE TERMINOS ÁCIDOS NUCLEICOS: Biomoléculas formadas por macropolímeros de nucleótidos, o polinucleótidos. Está presente en todas las células y constituye la base material de la herencia que se transmite de una a otra generación. Existen dos tipos, el ácido desoxirribonucleico (ADN) y el ácido ribonucléico (ARN). ADENINA (adenine): Sustancia de naturaleza química básica que se encuentra formando parte del ADN y del ARN. Uno de los constituyentes del par de bases adenina-timina. ADN Ácido Desoxirribonucleico: Ácido nucleico formado por nucleótidos en los que el azúcar es desoxirribosa, y las bases nitrogenadas son adenina, timina, citosina y guanina. Excepto en los retrovirus que tienen ARN, el ADN codifica la información para la reproducción y funcionamiento de las células y para la replicación de la propia molécula de ADN. Representa la copia de seguridad o depósito de la información genética primaria, que en las células eucarióticas está confinada en la caja fuerte del núcleo. ADN desnudo: ADN desprovisto de cubierta proteínica o lipídica. Para la transferencia de genes, suele estar constituida por un plásmido bacteriano que contiene el gen a transferir. Se inyecta directamente en el tejido objetivo donde se expresa generalmente sin integrarse en el genoma de las células huésped. ADN recombinante (ADNr): Molécula de ADN formado por recombinación de fragmentos de ADN de orígenes diferentes. La (o las) proteína que codifica es una proteína recombinante. Se construye mediante la unión de un fragmento de ADN de origen diverso a un vector, como, por ejemplo, un plásmido circular bacteriano. El vector se abre por un sitio específico, se le inserta entonces el fragmento de ADN de origen diverso y se cierra de nuevo. El ADN recombinante se multiplica en una célula huésped en la que puede replicarse el vector. ADENOVIRUS: Virus con ADN, desprovistos de cubierta, que comprende 47 subtipos la mayoría de los cuales atacan preferentemente las vías respiratorias aunque no son muchos los que resultan patógenos para el hombre. Los vectores derivados de los serotipos 2 y 5 se utilizan para la terapia génica in vivo. AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism): Fragmento amplificado de longitud polimórfica. Es un tipo de marcador molecular que involucra la amplificación de un conjunto específico de fragmentos de restricción mediante PCR utilizando un precursor marcado. AGROBACTERIA: Género de bacterias del suelo que introducen genes a ciertos vegetales mediante sus plásmidos. 17 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria Agrobacterium tumefaciens: Bacterias pertenecientes al género Agrobacterium, un agente patógeno vegetal que tiene la capacidad natural de transferir genes a las plantas que infecta (huésped), inyectando su plásmido Ti (tumor induction). Éste codifica una serie de genes involucrados en la regulación del crecimiento vegetal, provocando que las células vegetales infectadas crezcan sin control. Reemplazando los genes que desregulan el crecimiento de la planta por los genes que se desea incorporar por medio de técnicas de ADN recombinante, el plásmido se utiliza como herramienta para la producción de organismos vegetales transgénicos. ALELOS: Cada uno de los dos genes presentes en el mismo lugar (locus) del par de cromosomas homólogos. En general, uno de los diferentes estados alternativos del mismo gen. ANTICODON: Secuencia de tres nucleótidos en una molécula de ARNt que forma puentes de H con el triplete complementario (codón) de ARNm. ARN Ácido Ribonucléico: Ácido nucleico formado por nucleótidos en los que el azúcar es ribosa, y las bases nitrogenadas son adenina, uracilo, citosina y guanina. Actúa como intermediario y complemento de las instrucciones genéticas codificadas en el ADN. Existen varios tipos diferentes de ARN, relacionados con la síntesis de proteínas. Así, existe ARN mensajero (ARNm), ARN ribosómico (ARNr), ARN de transferencia (ARNt) y un ARN heterogéneo nuclear (ARN Hn). El ARN es normalmente el producto de la transcripción de un molde de ADN, aunque en los retrovirus el ARN actúa de plantilla y el ADN de copia. ARNHn ARN heterogéneo nuclear = ARNm primario: localizado en el núcleo y de tamaño variable. Precursor del ARN mensajero, se transforma en él tras la eliminación de los intrones, las secuencias que no codifican genes. ARN mensajero (ARNm): Molécula de ARN que representa una copia en negativo de las secuencias de aminoácidos de un gen. Las secuencias no codificantes (intrones) han sido ya extraídas. Con pocas excepciones el ARNm posee una secuencia de cerca de 200 adeninas (cola de poli A), unida a su extremo 3' que no es codificada por el ADN. AUTÓGAMAS: Las plantas autógamas son aquellas que se reproducen sexualmente por autofecundación. Bacillus thuringiensis Bt: Bacteria que genera una toxina proteica que infecta larvas de lepidópteros y causa su parálisis o muerte vía septicemia general. La toxina es ampliamente utilizada como insecticida. BACTERIAS: Microorganismos unicelulares que se multiplican por división celular. Incluyen los organismos conocidos más pequeños con estructura celular. Las células generalmente se encuentran recubiertas por una pared celular rígida y se caracterizan por carecer de núcleo (es decir, son células procariotas). Se clasifican en función de la forma 18 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria que adoptan, como cocos (esferas), bacilos (alargados como bastoncillos) y espirilos (en espiral). BACTERIOFAGO (Fago): Virus que infectan bacterias. BIOLOGÍA MOLECULAR: Parte de la biología que trata de los fenómenos biológicos a nivel molecular. En sentido restringido comprende la interpretación de dichos fenómenos sobre la base de la participación de las proteínas y ácidos nucleicos. BIOMOLÉCULAS: Elementos arquitectónicos básicos de los seres vivos, antiguamente llamados principios inmediatos. Las biomoléculas inorgánicas son sobretodo agua, sales minerales y gases como oxígeno y dióxido de carbono. Los grupos de compuestos orgánicos exclusivos de los seres vivos son cuatro: glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. BIOSEGURIDAD: Políticas y procedimientos adoptados para garantizar la segura aplicación de la biotecnología en salud y ambiente (se aplica principalmente al uso seguro de organismos transgénicos). BIOTECNOLOGÍA: Toda aplicación tecnológica que utilice sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos en usos específicos. CARÁCTER: Rasgo distintivo como expresión de un gen. CATALIZADOR: Sustancia que altera la velocidad de una reacción química, acelerándola o retrasándola, pudiendo recuperarse sin cambios esenciales en su forma o composición al final de la reacción. CEBADOR (primer): Pequeña cadena de nucleótidos a partir de la cual la ADN polimerasa inicia la síntesis de una molécula nueva de ADN. CÉLULA: Unidad de estructura y función de plantas y animales que consta típicamente de una masa de citoplasma que encierra un núcleo (excepto en procariontes) y esta limitada por una membrana diferencialmente permeable. Es la unidad viva más simple que se reproduce por división. Normalmente cada célula contiene material genético en forma de ADN incorporado a un núcleo celular, que se escinde al dividirse la célula. Los organismos superiores contienen grandes cantidades de células interdependientes. Sin embargo, éstas últimas pueden tratarse independientemente como células libres en medios de cultivos apropiados. CEPA: En microbiología, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo patrimonio genético. 19 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria CISTEÍNA: Es uno de los veintidós aminoácidos que utilizan las células para sintetizar proteínas. Es un aminoácido no esencial, azufrado, que puede oxidarse dando el dímero cistina. Se sintetiza a partir de la metionina, que es un aminoácido esencial. CLONACIÓN CELULAR: Proceso de multiplicación de células genéticamente idénticas, a partir de una sola célula. CLONACIÓN DE GENES: Técnica que consiste en multiplicar un fragmento de ADN recombinante en una célula-huésped (generalmente una bacteria o una levadura) y aislar luego las copias de ADN así obtenidas. CLONACIÓN MOLECULAR: Inserción de un segmento de ADN ajeno, de una determinada longitud, dentro de un vector que se replica en un huésped específico. CLONES: Grupo de células o de organismos de idéntica constitución genética entre sí y con el antepasado común del que proceden por división binaria o por reproducción asexual. CÓDIGO: Conjunto de reglas o preceptos, dispuestos según un plan metódico y sistemático, que reglamentan el funcionamiento de cualquier materia. También la correspondencia entre una información y las señales que la materializan. Por ejemplo: código penal, de tráfico, marítimo, morse, telegráfico, código alimentario, código aeronáutico Q, código binario. CÓDIGO DEL TRIPLETE: Sucesión de tres bases de tres nucleótidos en la molécula de ADN que cifra un aminoácido. CÓDIGO GENÉTICO: Código cifrado por la disposición de nucleótidos en la cadena polinucleótida de un cromosoma que rige la expresión de la información genética en proteínas, es decir, la sucesión de aminoácidos en la cadena polipeptídica. La información sobre todas las características determinadas genéticamente en los seres vivos, está almacenada en el ADN y cifrada mediante las 4 bases nitrogenadas. Cada sucesión adyacente de tres bases (codón) rige la inserción de un aminoácido específico. En el ARN la timina es sustituida por uracilo. La información se transmite de una generación a otra mediante la producción de réplicas exactas del código. CODÓN: Secuencia de tres nucleótidos consecutivos en un gen o molécula de ARNm determinada por sus bases nitrogenadas, que especificará la posición de un aminoácido en una proteína. CONJUGACIÓN: Uno de los procesos naturales de transferencia de material genético de una bacteria a otra, junto con la transducción y la trasformación, realizado por contacto entre ellas. 20 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria CÓSMIDO: Vector híbrido que contiene en sus extremos sitios cos, que son reconocidos durante el rellenado de las cabezas de los fagos lambda. Los cósmidos son útiles para clonar segmentos grandes de ADN (hasta 50 kb). CRICK, FRANCIS HARRY: Nacionalidad Reino Unido, Northampton 1916. Licenciado en Ciencias Físicas, se dedica a la labor docente e imparte clases de biología en la Universidad de Cambridge. Su presencia en este ámbito le lleva a formar parte de la Unidad del Consejo de Investigación Médica de Cambridge. Estudió los métodos de difracción de rayos X en cristales para llegar a conocer la estructura de los biopolímeros. Además se especializó en el estudio de los genes y desarrollo un método para saber si una imagen de rayos X remitía a una estructura helicoidal. Junto con James Watson, bioquímico y genetista estadounidense se especializó en el estudio del ADN. Ambos sentaron las bases de muchos estudios posteriores al conocer el modo en que se replican los genes, además de confirmar que son portadores de información. Juntos descubrieron el principio molecular de doble hélice para el ADN. Crick y James D. Watson, junto con Maurice Wilkins, recibieron el Premio Nobel de Fisiología y Medicina. Las investigaciones de Crick siguieron encaminadas hacia el estudio de los ácidos nucléicos en relación con el código de la herencia. CROMOSOMA: Corpúsculo intracelular alargado que consta de ADN, asociado con proteínas, y constituido por una serie lineal de unidades funcionales conocidas como genes. La especie humana tiene 46 cromosomas (23 pares). Su número varía desde el mínimo de un cromosoma en las obreras de la hormiga Myrmecia pilosula hasta los 1.260 cromosomas (630 pares) del helecho Ophioglussum recitulatum. DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR: Formulado por Crick, postula que la información genética contenida en los cromosomas determina la síntesis de las proteínas mediante la traducción de un molde intermediario de ARN, formado anteriormente por la transcripción del ADN. También satisface la hipótesis formulada anteriormente por Beadle, Tatum y Horowitz de un gen = un enzima. Tiene dos casos que escapan a la regla: la transcripción inversa como reacción complementaria de doble sentido y, aparentemente, los priones. DOMINANTE: Referido a un gen, el que sólo necesita una dosis para expresarse por lo que enmascara la presencia de su alelo recesivo. La mayoría de los alelos dominantes representan el estado evolucionado y completamente funcional del gen. Eco RI: Enzima de restricción obtenida de E. coli. Reconoce la secuencia palídrome GAATTC y produce cortes de tipo escalonados (entre G y A). CTTAAG. ELECTROFORESIS: Técnica para separar moléculas de diferentes tamaños y cargas, típicamente ADN ó proteínas. La muestra se pone en una matriz que generalmente es un gel (Ej. acrilamida para proteínas; agarosa para ARN y ADN), se somete a la acción de un 21 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria campo eléctrico y las moléculas se separan de acuerdo a carga y tamaños. Para moléculas de ADN y ARN donde todas tienen igual carga, migran más rápido aquellas de menor tamaño. ENLACE FOSFODIESTER: En ácidos nucleicos, es el enlace covalente que une a los grupos fosfatos de nucleótidos adyacentes, uniendo el C5' de una pentosa con el C3' de la otra pentosa. Los enlaces fosfodiesteres junto con los azúcares forman el esqueleto de las moléculas de ácidos nucleicos. ENZIMA: Catalizador biológico, normalmente una proteína, que mediatiza y promueve un proceso químico sin ser ella misma alterada o destruida. Son catalizadores extremadamente eficientes y muy específicamente vinculados a reacciones particulares. ENZIMA DE RESTRICCIÓN Ó ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN: Enzimas bacterianas sintetizadas como reacción defensiva frente a la invasión de ADN extraño, como por ejemplo bacteriófagos ADN, a los que degrada mientras que el propio está protegido por metilaciones específicas. Cada una de estas enzimas escinde el ADN siempre en el mismo sitio, en loci específicos o secuencias objetivo. Son las tijeras de la ingeniería genética que abrieron las puertas a la manipulación genética. Reconocen una secuencia específica entre 4 a 6 pares de bases de DNA de doble hebra y cortan un enlace fosfodiester en cada una de las hebras. Según el tipo de enzimas el corte puede generar moléculas de DNA con extremos cohesivos de tipo palíndrome ("sticky ends") ó extremos ciegos (“blunt end”) ES (células): Embryo-derived stem cells. Células embrionarias no diferenciadas. Pueden cultivarse in vitro de manera prolongada y modificadas genéticamente. En un ratón, por ejemplo, una vez implantadas en un embrión contribuyen a la formación de un individuoquimera que puede transmitir genéticamente la modificación a su descendencia. ESPECIE: Clasificación taxonómica formada por el conjunto de poblaciones naturales que pueden cruzarse entre sí real o potencialmente. Es decir, que se determina de forma empírica: dos individuos pertenecen a la misma especie si pueden generar descendencia reproducible; en caso contrario son de especies diferentes. ESTRATEGIA SECUENCIADORA DE DISPARO (Shot Gun): Técnica de análisis de secuencias de nucleótidos. EVOLUCIÓN BIOLÓGICA: Cambios primero molecular, después celular, y por último de organismos, a lo largo de la historia como resultado de mutaciones en el ADN, de su reproducción y de procesos de selección. Los caracteres adquiridos en vida no se heredan. La especie humana comparte el 98'4% del ADN con el de dos especies de chimpancé, el común y el pigmeo. La evolución depende sobretodo de mutaciones en los genes reguladores de los genes estructurales, que hacen que se activen o desactiven, más que de mutaciones en los mismos genes estructurales. 22 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria EXONES: Secuencias de ADN específicas de genes, que codifican secuencias de aminoácidos en las proteínas. EXPRESIÓN DEL GEN: Producto proteico resultado del conjunto de mecanismos que efectúan la decodificación de la información contenida en un gen, procesada mediante transcripción y traducción. EX-SITU: Relativo a la conservación de recursos genéticos fuera de su hábitat natural, como bancos genéticos, zoológicos o botánicos. FÁRMACO: Droga, medicamento FENOTIPO: Conjunto de todas los caracteres aparentes expresados por un organismo, sean o no hereditarias. FERMENTACIÓN: Conversión biológica anaeróbica (sin oxígeno) de las moléculas orgánicas, generalmente hidratos de carbono, en alcohol, ácido láctico y gases, mediante la acción de ciertos enzimas que actúan bien directamente o como componentes de ciertas bacterias y levaduras. En su uso más coloquial, el término hace referencia a menudo a bioprocesos que no están estrictamente relacionados con la fermentación. FRANKLIN, ROSALIND: Nace en Inglaterra el 25 de Julio de 1920, murió en Londres el 16 de abril de 1958. Obtuvo la primera fotografía de difracción de rayos X que reveló de manera inconfundible, la estructura helicoidal de la molécula de ADN. Esa imagen, conocida hoy como la famosa fotografía 51, fue un respaldo experimental crucial para que Watson y Crick establecieran, en 1953, la célebre hipótesis de la "doble hélice". GEN: Unidad física y funcional del material hereditario que determina un carácter del individuo y que se transmite de generación en generación. Su base material la constituye una porción de cromosoma (locus) que codifica la información mediante secuencias de ADN. GEN ESTRUCTURAL: El que regula la formación de un enzima o de una proteína estructural. GENES MARCADORES: Son utilizados para seleccionar el OGM, diferenciándolo de los organismos que no han sido modificados, a partir de la presencia o ausencia de actividades específicas relacionada con el gen marcador. Si el gen marcador confiere resistencia a un antibiótico, éste será utilizado para seleccionar las células resistentes que han incorporado el transgén. GENÉTICA: Ciencia que trata de la reproducción, herencia, variación y el conjunto de fenómenos y problemas relativos a la descendencia. 23 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria GENOMA: Conjunto de todos los genes de un organismo, de todo el patrimonio genético almacenado en el conjunto de su ADN o de sus cromosomas. GENOMA VEGETAL: Conjunto de genes (nuclear y citoplasmático) de un organismo. El genoma de una planta puede contener 25 mil genes, mientras que el genoma humano puede contener hasta 100 mil genes. GENOMICA: Rama de la biología que se encarga del estudio de los genomas. Más específicamente de la caracterización y localización de las secuencias que conforman el ADN de los genes. GENOTIPO: Constitución genética, de un organismo en relación a un rasgo hereditario específico o a un conjunto de ellos. GERMOPLASMA (Banco de Germoplasma): La variabilidad genética total, representada por células germinales, disponibles para una población particular de organismos. En vegetales, es una colección de material vegetal vivo, en forma de semillas y esporas. Sus objetivos son localizar, recolectar y conservar plantas consideradas de interés prioritario y trabajar para el conocimiento científico orientado a la optimización de la conservación y uso de los recursos fitogenéticos. GLIFOSATO: Producto químico herbicida, utilizado en los cultivos para el control de malezas. Interfiere con una enzima de la planta que participa en la síntesis de tres aminoácidos aromáticos que son necesarios para sintetizar sus proteínas. Las plantas transgénicas resistentes a glifosato, (plantas rr, por el nombre comercial del glifosato roundup ready), como la soja, colza, papa, remolacha, calabaza, maíz; tienen en su genoma una copia de la enzima proveniente de Agrobacterium, que resiste la acción del glifosato y pueden sobrevivir a la acción del herbicida. GUANINA: Sustancia de naturaleza química básica que se encuentra formando parte del ADN y del ARN. Uno de los constituyentes del par de bases citosina-guanina. HEREDITARIO: Que se transmite de generación en generación. HETERODÚPLEX: Molécula de ADN de doble cadena, formada por hibridación de cadenas sencillas complementarias, de diferentes orígenes. Sólo las secuencias de ADN homólogas o complementarias pueden formar regiones de doble cadena, mientras que las secuencias de ADN no complementarias quedan como cadenas sencillas y son visibles como tales en el microscopio electrónico. HIBRIDACIÓN: Proceso de generación de una molécula, célula u organismo combinado con material genético procedente de organismos diferentes. En las técnicas tradicionales, 24 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria los híbridos se producían mediante el cruzamiento de variedades distintas de animales y plantas por alineación o apareamiento de bases de dos moléculas de ADN de cadena sencilla que son homólogas o complementarias. La tecnología de fusión celular y la manipulación transgénica son las nuevas modalidades de hibridación introducidas por la manipulación genética. HIBRIDOMA: Célula híbrida. Se obtiene fusionando células plasmáticas con células de mieloma (cancerosas) que tienen la capacidad de crecer y dividirse continuamente. HORMONA: Sustancias químicas de acción especializada que actuando como mensajeras, controlan tejidos y órganos situados en cualquier parte del organismo, en aquellas células que responden al estímulo que provocan. La diferencia entre las hormonas de animales y plantas está en que las primeras se elaboran en órganos específicos y regulan casi todas las funciones orgánicas. HUÉSPED: Animal o vegetal que alberga o nutre otro organismo (parásito). En manipulación genética, organismo de tipo microbiano, animal o planta cuyo metabolismo se usa para la reproducción de un virus, plásmido o cualquier otra forma de ADN extraño a ese organismo y que incorpora elementos de ADN recombinado. INFECCIÓN: Invasión de un ser vivo por un agente patógeno que desencadena una enfermedad. INFORMACIÓN GENÉTICA: Es la información biológica hereditaria (la que puede pasar de padres a hijos). Está contenida en estructuras de ADN, como los cromosomas, excepto en algunos virus que transportan su información genética en el RNA (ver retrovirus). INGENIERÍA GENÉTICA: Conjunto de técnicas utilizadas para introducir un gen extraño (heterólogo) en un organismo con el fin de modificar su material genético y los productos de expresión. INTEGRACIÓN GENÉTICA: Inserción de una secuencia de ADN en otra por recombinación. INTERFERÓN: Proteína con actividad antivírica, es producida por células animales en respuesta a la infección por virus. Los interferones se sintetizan como una respuesta más rápida a la infección vírica que la formación de anticuerpos. Se utilizan de forma masiva como agentes terapéuticos contra enfermedades víricas y algunas formas de cáncer. INTRONES: Secuencias de ADN que no codifican genes y cuya función es desconocida. El 90% del genoma humano no es codificante. 25 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria in situ: Referido a conservación de recursos genéticos, la que se realiza en su medio natural, y que para las especies domesticadas se verifica en el medio donde desarrollaron sus propiedades distintivas. in vitro: Expresión latina que significa literalmente “en vidrio”. Las tecnologías in vitro separan partes de organismos viviente en depósitos cerrados para manipular y mantener este material. Muchas aplicaciones conocidas y relativamente antiguas pertenecen a esta categoría, entre ellas, el cultivo de células y de tejidos vegetales, la manipulación de genes o fragmentos de ADN. in vivo: Expresión latina que hace referencia a las condiciones normales que ocurren con los organismos vivos o en la naturaleza. KILOBASE (Kb): Unidad empleada para medir la longitud de los fragmentos de ADN constituidos por una serie de bases. 1 Kb = 1.000 bases. LISINA: Es un aminoácido esencial y necesario para la síntesis de proteína así como para el metabolismo de los carbohidratos y los ácidos grasos. Puede mejorar la producción de energía y la utilización del calcio. MANIPULACIÓN GENÉTICA: Formación de nuevas combinaciones de material hereditario por inserción de moléculas de ácido nucleico, obtenidas fuera de la célula, en el interior de cualquier virus, plásmido bacteriano u otro sistema vector fuera de la célula. De esta forma se permite su incorporación a un organismo huésped en el que no aparecen de forma natural pero en el que dichas moléculas son capaces de reproducirse de forma continuada. Al referirse al proceso en sí, puede hablarse de manipulación genética, ingeniería genética o tecnología de ADN recombinante. También admite la denominación de clonación molecular o clonación de genes, dado que la formación de material heredable puede propagarse o crecer mediante el cultivo de una línea de organismos genéticamente idénticos. MATERIAL GENÉTICO: Todo material de origen vegetal, animal, microbiano o de otro tipo que contenga unidades funcionales de la herencia. MEDICAMENTOS RECOMBINANTES: De momento se han comercializado la eritropoyetina, insulina humana, hormona del crecimiento (HGF), interferón alfa y gamma, G-CSF o factor estimulante de colonias de células, factor activador del plasminógeno o TPA, interleuquina 2, factor VIII sanguíneo, DNasa. MEDIO DE CULTIVO: Conjunto de substratos, minerales, factores de crecimiento y vitaminas que se usan para el cultivo de microorganismos (bacterias, levaduras, etc.) o líneas celulares derivadas de animales y plantas. 26 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria METILACIÓN DE ADN: Adición de grupos metilo al ADN, generalmente asociado con la inactivación de genes en cromosomas. MICROINYECCIÓN: Técnica que permite introducir en una célula un gen en solución, gracias a una micropipeta y bajo microscopio. MICROORGANISMO: Organismos microscópicos pertenecientes por regla general a virus, bacterias, algas, hongos o protozoos. MICROPROPAGACIÓN: Es una biotecnología que se aplica a especies vegetales con el fin de obtener una población en el menor período de tiempo posible. Se la conoce como una técnica de respuesta rápida, puesto que se logran resultados en períodos de 3 a 6 meses, en contraposición con otras técnicas en las que el tiempo es mayor. Se puede decir, que es además versátil puesto que se adapta a los requerimientos de cada especie en estudio, al aprovechar al máximo la totipotencia celular, para canalizarla hacia la propagación. MONÓMERO: Compuesto de bajo peso molecular cuyas moléculas son capaces de reaccionar entre sí o con otras para dar lugar a un polímero. MUTACIÓN: Cambio del material genético. Puede afectar a cambios en un par de bases del ADN, en un gen específico o en la estructura cromosómica. La mutación en la línea germinal o relativa a las células sexuales, puede conducir a patologías genéticas o a cambios substanciales de la evolución biológica. En relación a las células somáticas la mutación constituye el origen de algunos cánceres y de ciertos aspectos del envejecimiento. NORTHERN BLOT: Técnica que permite la identificación de moléculas específicas de RNA. Básicamente consiste en la separación electroforética de ARN y traspaso a un filtro e hibridización con una sonda marcada. NUCLEASA: Enzima capaz de romper una cadena de ADN o ARN. NÚCLEO: Orgánulo del interior de las células eucariotas que contiene la información genética y que está separado del citoplasma mediante una membrana. NUCLEÓSIDO: Combinación de un azúcar pentosa con una base nitrogenada púrica o pirimidínica. NUCLEÓTIDO: Monómero de los ácidos nucleicos, integrado por la combinación de una base nitrogenada (purina o pirimidina), un azúcar (ribosa o desoxirribosa) y un grupo fosfato. Se obtiene como producto de la hidrólisis de ácidos nucleicos por acción de nucleasas. 27 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria OGM: Organismo Genéticamente Modificado: cualquier organismo cuyo material genético ha sido modificado de una manera que no se produce de forma natural en el apareamiento (multiplicación) o en la recombinación natural. Se clasifican como de alto riesgo o de bajo riesgo, atendiendo a su naturaleza, a la del organismo receptor o parenteral, y a las características del vector y del inserto utilizados en la operación. ONCOGÉN o GEN TRANSFORMANTE: Gen que produce la transformación morfológica de células hísticas en cultivo o formación tumoral en animales. Se han identificado oncogenes en retrovirus de transformación aguda o en ensayos de transfección de ADN de tumores. Los oncogenes están presentes en todas las especies animales e intervienen en los procesos de diferenciación y crecimiento celular. En condiciones normales están inactivos (protooncogenes) pero pueden activarse como consecuencia de mutaciones o de infecciones por virus oncogénicos. Las alteraciones cromosómicas, como roturas y delecciones, pueden activar los oncogenes. OPERADOR: Región de la molécula de DNA adyacente al promotor que interactúa con proteína represora específica para controlar la expresión de genes adyacentes. OPERÓN: Unidad genética en procariontes que consiste de uno ó más genes estructurales cuya transcripción está controlada por un gen operador adyacente y un promotor. ORGANISMO: Entidad biológica capaz de reproducirse o de transferir material genético, incluyéndose dentro de este concepto a las entidades microbiológicas, sean o no celulares. Casi todo organismo está formado por células, que pueden agruparse en órganos, y éstos a su vez en sistemas, cada uno de los cuales realizan funciones específicas. PALÍNDROME: Son secuencias de ADN de doble hebra del tipo repetidas invertidas. La lectura en la secuencia de bases es igual de derecha a izquierda, como de izquierda a derecha. Ejemplo: 5' ATGGCGCCAT 3' 3' TACCGCGGTA 5' PAR DE BASES (bp): Se refiere a un par de bases complementarias, cada base presente en una hebra diferente de la molécula. Ej: AT y GC. Kpb: se refiere a miles de pares de bases. Mbp: se refiere a mega pares de bases. PCR: Ver Reacción en Cadena de Polimerasa. PLÁSMIDO: Molécula de DNA extracromosomal, circular que posee genes no esenciales y de acuerdo al tipo de plásmido puede replicarse de manera dependiente ó independiente de la replicación del cromosoma de la célula huésped. 28 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria PLÁSMIDO Ti: Plásmido inductor de tumor presente en Agrobacterium tumefaciens. PRIMER (Oligonucleótido Iniciador): Se refiere a una secuencia corta (generalmente RNA) que se sintetiza a partir de la enzima primasa en la forma de primosoma, utilizando como templado cada una de las hebras del DNA que se autoduplicarán. El primer proporciona un extremo 3' OH libre para que las enzimas DNA polimerasas prosigan el proceso de síntesis de DNA. Finalmente los primers son eliminados y reemplazados por secuencias de DNA. Proyecto Genoma Humano: Programa de Investigación consistente en determinar la secuencia completa de nucleótidos de los cromosomas de la especie humana y de organismos modelo utilizados en experimentación de laboratorio (la bacteria Escherichia coli, la levadura Bacillus subtilis, el nematodo Caenorhabditis elegans o la mosca del vinagre Drosofila melanogaster), para conocer todos y cada uno de los genes humanos, su localización y función. Liderado por James D. Watson y dependiente del Departamento de Energía y de los Institutos Nacionales de Salud de Estados Unidos, cuenta con un presupuesto anual de 200 millones de dólares (mas de 20.000 millones de pesetas) desde 1990 hasta 2005. Entre 1981 y 1995 se han concedido en todo el mundo 1.175 patentes sobre material genético humano. REACCIÓN en CADENA de POLIMERASA: Técnica de análisis del genoma mediante la amplificación ilimitada de porciones específicas del ADN, aunque sean minúsculas. Es un método revolucionario de amplificación exponencial del ADN por la intervención de una enzima termoestable, la Taq polimerasa, inventado por el americano Kary Mullis en 1985 por lo que se le concedió en 1993 el premio Nobel. Es el proceso fundamental para la secuenciación del Proyecto Genoma Humano. RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms): Fragmentos de restricción de longitud polimórfica. Son uno de los marcadores moleculares de mayor utilización en mejoramiento genético. Para obtener un patrón de RFLP se debe aislar DNA, se digiere con enzimas de restricción y se analizan mediante un Southern Blot hibridándose con una sonda marcada. RECOMBINACIÓN GENÉTICA: Redisposición genética. In vitro entre fragmentos de ADN de orígenes diferentes o no contiguos. In vivo entre copias homólogas de un mismo gen (manipulación cromosómica), o como resultado de la integración en el genoma de un elemento genético (trasposón, profago o transgén). REPLICACIÓN: Proceso por el que una molécula de ADN o ARN origina otra idéntica a la preexistente. En general, duplicación del ácido nucleico. 29 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria REPLICÓN: Estructura de ácido nucleico con capacidad de autoduplicación. Son replicones los cromosomas de las células eucariotas, el ADN nuclear de los procariotas, los plásmidos y los ácidos nucleicos de los virus. RESISTENCIA O TOLERANCIA: Característica de un organismo, por el cual es capaz de protegerse a sí mismo de los efectos de un organismo patógeno, de una plaga o de una sustancia particular. RETROVIRUS: Virus cuyo genoma está constituido por ARN monocatenario, que es transcrito de forma inversa en ADN durante su infección y replicación. La copia de ADN se integra en el ADN cromosómico del huésped. Esta copia, llamada provirus, se transcribe en ARN vírico y produce múltiples ARNm que codifican productos proteicos del virus o de oncogenes. Los retrovirus mas conocidos son los virus del SIDA (VIH) y de la leucemia humana de los linfocitos T (HTLV). El mas utilizado para la transferencia de genes es el virus de la leucemia murina de Moloney (Mo-MLV). RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms): Fragmentos de restricción de longitud polimórfica. Son uno de los marcadores moleculares de mayor utilización en mejoramiento genético. Para obtener un patrón de RFLP se debe aislar DNA, se digiere con enzimas de restricción y se analizan mediante un Southern Blot hibridándose con una sonda marcada. REVOLUCIÓN VERDE: Periodo en el que hubo un incremento de la producción agrícola a partir de 1960, como consecuencia del empleo de técnicas de producción modernas, concretadas en la selección genética y la explotación intensiva permitida por el regadío y basada en la utilización masiva de fertilizantes, pesticidas y herbicidas. SECUENCIA de ADN: Orden de encadenamiento de las bases nitrogenadas de los nucleótidos que constituyen el ADN y que cifra toda la información genética. Cuando es codificante (exón), define el orden de los aminoácidos que forman la proteína correspondiente. SISTEMA: Conjunto coherente de elementos en interacción que pueden ser aislados del resto del universo con la ayuda de un criterio apropiado. SNPs: Polimorfismos de un único nucleótido (single-nucleotide polimorphisms). Es el tipo de polimorfismo más común en el genoma humano, y se refiere a la diferencia en un solo par de bases de un gen, con respecto al mismo gen en otro individuo. Los SNPs son estables y en promedio se encuentran cada 1000 pb en el genoma. Aquellos incluidos en secuencias codificadoras se llaman cSNPs y pueden ser utilizados como marcadores de enfermedades. 30 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria SONDA de ADN: Fragmento de ADN conocido que se utiliza para averiguar si los cromosomas investigados contienen la secuencia complementaria. La FDA americana ha autorizado 60 productos diagnósticos basados en sondas de ADN que determinan la predisposición a padecer enfermedades. SOUTHERN BLOT: Técnica desarrollada por E.M. Southern y utilizada para analizar fragmentos de ADN, los cuales son separados mediante electroforesis, transferidos a un filtro e incubados con sonda específica. STR: Secuencia en Tandem Repetida. También conocido como microsatélite. Tipo de marcador molecular que involucra amplificación por PCR de secuencias de ADN seleccionadas repetidas en tandem. TÉCNICA DE RECOMBINACIÓN DEL ADN: Conjunto de técnicas de manipulación genética que emplea la recombinación in vitro asociada a la inserción, réplica y expresión del ADN recombinado dentro de células vivas. TERAPIA GÉNICA: Conjunto de procesos destinados a la introducción in vitro o in vivo de un gen normal en células, germinales o somáticas, en las que el mismo gen, anormal, provoca una deficiencia funcional, origen de una enfermedad, o la de un gen codificador de una proteína, por ejemplo, con una acción antitumoral en las células cancerosas, o antivírica en células infectadas por un virus patógeno. TOXINA: Proteína responsable de la especificidad funcional de ciertas bacterias, que es venenosa para determinados organismos. Entre las mejor conocidas, tanto por su estructura como por los mecanismos de acción, figuran las toxinas colérica y tetánica que interaccionan con las células diana a través de gangliósidos de membrana. TRADUCCIÓN GENÉTICA: Cambio de la información contenida en la secuencia de los cuatro nucleótidos del ARNm, debido al ordenamiento de los 20 aminoácidos en la estructura de las cadenas polipeptídicas. Cada aminoácido se une a una pequeña molécula específica de ARN que sirve para su identificación, denominado ARN de transferencia. Esta molécula transfiere los aminoácidos libres de la solución al punto de formación de las cadenas polipeptídicas cuando está indicado por las instrucciones contenidas en la molécula de ARN mensajero. El proceso tiene lugar en la interacción de los codones del ARNm con la región del anticodon de los aminoacil-ARNt. Se distinguen en ella las etapas de iniciación, elongación y terminación en la que participan diferentes factores proteicos. TRANSDUCCIÓN: Proceso natural de transferencia de material genético, originalmente entre bacterias, como la conjugación y la transformación, que se efectúa por medio de un bacteriófago que transporta un fragmento cromosómico del huésped a otra bacteria. 31 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria TRANSCRIPCIÓN GENÉTICA: Biosíntesis de una molécula de ARN por polimerización de nucleótidos complementarios a un ADN patrón. Esta molécula de ARN es un precursor de ARNm y representa una copia fiel de la secuencia complementaria de ADN de la que ha sido transcrita. Una secuencia específica situada por delante del gen (promotor) actúa identificando el sitio de inicio de la transcripción. En el ARN, el uracilo (U) ocupa las posiciones que la timidina (T) tiene en el ADN. Es la copia de trabajo de determinados segmentos de ADN. TRANSCRIPTASA INVERSA: Enzima codificada por retrovirus y que produce una copia de ADN utilizando como templado una molécula de ARN. La enzima cataliza tres reacciones consecutivas: 1. Síntesis de ADN dependiente de ARN. 2. Eliminación del ARN en el heteroduplex resultante ADN-ARN. 3. Síntesis de ADN dependiente de ADN. TRANSFECCIÓN de ADN: Introducción en una célula en cultivo convertida en permeable al ADN, de moléculas de ADN extrañas (heterólogas) insertadas en un vector. Reúne características comunes a la transformación y a la infección por bacteriófagos. La transformación requiere la integración del ADN exógeno en el cromosoma bacteriano mientras que la transfección usualmente no la requiere. El ADN extraño se asocia con el del cromosoma del huésped y se expresa como un fenotipo identificable. TRANSFORMACIÓN BACTERIANA: Uno de los procesos naturales de transferencia de material genético de una bacteria a otra, junto con la conjugación y la transducción, que es una integración directa del ADN. Experimentalmente consiste en hacer penetrar un fragmento de ADN en una bacteria para provocar en ella una recombinación genética. Por extensión (abusiva) se habla a veces de transformación para designar un proceso idéntico que afecta a las células eucarióticas (levaduras, células animales y vegetales). TRANSFORMACIÓN CELULAR: En una célula, adquisición de ciertas propiedades de una célula tumoral bajo la acción de virus o de genes causantes de tumores (oncógenes). TRANSGÉNESIS: Conjunto de procesos que permiten la transferencia de un gen (que se convierte en transgén) a un organismo receptor (llamado transgénico), que generalmente puede transmitirlo a su descendencia. Esta técnica permite la asociación de genes que no existe en la naturaleza, saltándose las barreras entre especies y entre reinos. TRIPTÓFANO: Un aminoácido esencial que el cuerpo utiliza para fabricar niacina y serotonina. UTILIZACIÓN CONFINADA de OMG: Cualquier actividad por la que se modifique el material genético de un organismo o por la que éste, así modificado, se cultive, almacene, emplee, transporte, destruya o elimine, siempre que en la realización de tales actividades se utilicen barreras físicas o una combinación de éstas con barreras químicas o biológicas, con el fin de limitar su contacto con la población humana y el medio ambiente. 32 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria UTILIZACIÓN SOSTENIBLE: Utilización de componentes de la diversidad biológica de un modo y a un ritmo tal que no ocasione la disminución a largo plazo de la diversidad biológica, con lo cual se mantienen las posibilidades de ésta de satisfacer las necesidades y las aspiraciones de las generaciones actuales y futuras. VACUNA: Antígeno procedente de uno o varios organismos patógenos que se administra para inducir la inmunidad activa protegiendo contra la infección de dichos organismos. Es una aplicación práctica de la inmunidad adquirida. VECTOR: Portador, que transfiere un agente de un huésped a otro. Sistema que permite la transferencia, la expresión y la replicación de un ADN extraño en células huésped para una posterior clonación o transgénesis. Se trata de una molécula de ADN (plásmido bacteriano, microsoma artificial de levadura o de bacteria) o de un virus defectuoso. Por extensión, un vector designa todo sistema de transferencia del gen, por ejemplo, un sistema sintético como el de los liposomas. VIRUS: Entidad infecciosa que, aunque puede sobrevivir extracelularmente, es un parásito absoluto porque solamente es capaz de replicarse en el seno de células vivas específicas, pero sin generar energía ni ninguna actividad metabólica. Los componentes permanentes de los virus son ácido nucleico (ADN o ARN, de una o de dos cadenas) envuelto por una cubierta proteica llamada cápside. WATSON, JAMES HENRY: Nacionalidad Estados Unidos, Chicago 1928. Su educación discurre en Chicago y más tarde se traslada a Indiana. Para ampliar su formación ingresó en el Consejo Nacional de Investigaciones de Copenhague. Comenzó a estudiar la estructura de los ácidos nucleicos. En esta época entra a trabajar en la Universidad de Cambridge, donde entra en contacto con Crick. Juntos analizan la estructura del ADN y formula el principio molecular de doble hélice para el ADN que mostraba la capacidad de la molécula para reproducirse. Watson también impartió clases de bioquímica y biología molecular en la Universidad de Harvard, aunque continuó trabajando para descubrir los secretos del código genético. A este bioquímico se debe el conocimiento del ARN, cuya función es la de trasmitir el código ADN a las estructuras celulares que crean las proteínas. En 1962 fue galardonado, junto con Crick y Maurice Wilkins, especialista en genética molecular, con el Premio Nobel de Fisiología y Medicina. Es autor de obras como "Mocecular Biology of Gene" y "The Double Helix". WESTERN BLOT Ó INMUNOBLOT: Reconocimiento de polipéptidos específicos en una muestra, después que las proteínas se han separado mediante electroforesis, transferidas (blot) a un filtro y reconocidas con un anticuerpo específico. YAC (Yeast Artificial Chromosome): Vector de clonación en la forma de un cromosoma artificial de levadura. Construido utilizando elementos cromosomales que incluyen telómeros (de ciliados), centrómeros, origen de replicación y genes marcadores de levadura. Se utilizan para clonar largas secuencias de ADN eucarionte. 33 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 10. FUENTES DOCUMENTALES LIBROS Y REVISTAS: Alberts B., Jhonson A., Lewis J., Raff M., Roberts K., Walter P. 2002. Molecular Biology of the Cell, a 4 ed. Garland Science. Anzola H., Guerrero L., Silva C., Artunduaga R. Actualidad y Futuro de los Organismos Modificados Genéticamente (OMG) en la Producción Agropecuaria. Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. Instituto Colombiano Agropecuario (ICA). Subgerencia de Protección y Regulación Pecuaria. Subgerencia de Protección y Regulación Agrícola. Bogotá. Colombia. Aramendis Rafael, Ms. Sc. Biotecnología en Colombia. Tras el fomento de bioindustrias competitivas. Bioplanet. www.bioplanet.net/magazine/bio_marabr_2000/bio_2000_marabr_escaner.htm Barcena Alicia., Katz Jorge., Morales Cesar., Schaper Marianne. Los transgénicos en América Latina y el Caribe: un debate abierto. Naciones Unidas. CEPAL. Santiago de Chile. 2004. Pág. 33-69 Benitez Burraco Antonio. Avances recientes en biotecnología vegetal e ingeniería genética de plantas. Editorial Reverté. España. 2005. Pág. 1- 52. Carbonero Pilar. 2004. Aspectos Tecnológicos de la Obtención de Plantas Transgénicas. Laboratorio de Bioquímica y Biología Molecular. Departamento de Biotecnología. Universidad Politécnica de Madrid. Madrid. España. http://www.plataforma.uchile.cl/fg/semestre2/_2004/biotec/modulo3/clase1/doc/aspectos%20.pdf Chaparro Giraldo Alejandro. 2005. Introducción a la Ingeniería Genética de Plantas. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias. Bogotá. 136p. Gingold E. B. 1993. Molecular Biology and Biotechnology. Edt. J. M. Walker. Royal Society of Chemistry, Cambridge. a Glick B.R., Pasternak. 1998. Molecular Biotechnology. 2 ed. ASM Press. Washington D.C. Houdebine, LM. 2003. Animal Transgenesis and Cloning. Wiley. Lemoine, N.R. 1999. Understanding Gene Therapy. BIOS Scientific Publishers. León, S. T. Rodríguez, S. L. 2002. Ciencia, tecnología y ambiente en la agricultura colombiana. Cuadernos Tierra y Justicia No 4. Ed: ILSA (Instituto Latinoamericano de Servicios Legales Alternativos). Bogotá. 44 p. 34 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria Meloni D., Lescano J. Producción e Identificación de Cultivos Transgénicos. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Agronomía y Agroindustrias. Santiago del Estero. Argentina. http://faa.unse.edu.ar/alumnos/document/biologia/idtransg.pdf Mountain, A. (2000). Gene therapy: the first decade. Trends Biotechnol. 18:119-28. NRC, 2002. Animal bioteclmology: science — based concerns. Committee on Defining Science Animal Biotechnology: Science — Based Concerns Associated with Products of Animal Biotechnology, Committee on Agricultural Biotechnology, Health, and the Environment, Board on Agriculture and Natural Resources, Board on Life Sciences, División on Earth and Life Studies. 181 pages. Washington, D. C. USA. Osta Rosario. Animales Transgénicos. Laboratorio de Genética Bioquímica y Grupos Sanguíneos. Facultad de Veterinaria. Universidad de Zaragoza. España. http://www.aragonesasi.com/boreas/articulos/transgen1.htm Savka M., Wang Y.S., Wilson M. 2002. How to Produce & Characterize Transgenic Plants. The American Biology Teacher. 64(4),286-300. Scragg, A. Biotecnología medioambiental. Editorial Acribia. Zaragoza – España. 1999. Pág. 243283. REVISTAS DE CONSULTA: Current Opinion in Biotechnology. http://www.sciencedirect.com. Trends in Biotechnology. http://www.sciencedirect.com Trends in Molecular Medicine. http://www.sciencedirect.com Nature Biotechnology. http://www.nature.com/nbt/ Molecular Reproduction and Development. http://www.wileyinterscience.com SITIOS WEB DE INTERÉS: http://www.biotech-info.net/ Ag BioTech InfoNet cover alls aspects of the applications of biotechnology and genetic engineering in agricultural production and food processing and marketing. Ag BioTech InfoNet is designed and manged by Ecologic, Inc, a Sandpoint, Idaho based company specializing in analyses of agriculture’s impact on the enviroment and food safety. http://agbiosafety.unl.edu/education.shtml University of Nebraska-Lincoln. The Education Center has educational materials with the goal of teaching the science of crop biotechnology. 35 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria http://cls.casa.colostate.edu/TransgenicCrops/ Transgenic Crops An Introduction and Resource Guide. Cultivos transgénicos. Excelente página elaboradas por la Universidad de Colorado. En ingles y en español. Explicaciones sobre la obtención de plantas transgénicas, sobre los productos actualmente en el mercado, y información actualizada sobre ventajas y posibles riesgos de los mismos. http://www.argenbio.org/h/biotecnologia/index.php Sitio del Consejo Argentino para la información y el desarrollo de la biotecnología. Índice de contenidos de biotecnología. Incluye texto, imágenes, animaciones, glosario. http://arbl.cvmbs.colostate.edu/hbooks/genetics/biotech/gels/ Técnicas y Simulaciones de electroforesis de geles de agarosa (un laboratorio virtual) donde se pueden ver fotografías de una corrida electroforética. http://web.mit.edu/esgbio/www/rdna/rdna.html Sitio web del Instituto Massachusetts que trata los temas de Southerns, Northerns, Westerns. de Tecnología de http://www.dnalc.org/resources/BiologyAnimationLibrary.htm Animación de varias técnicas cuyos archivos pueden descargarse para usar en un computador sin estar conectados a Internet. http://www.dnai.org/b/index.html manipulación de genes. Mediante animaciones recoge distintos procesos de la http://www.ppl-therapeutics.com/ PPL Therapeutics: es la compañía fundada por los investigadores que lograron la clonación de Dolly, centrada en la obtención de animales transgénicos diseñados para la producción de sustancias de interés terapéutico. Estas páginas explican la tecnología de transgénesis y las estrategias en la producción de fármacos. http://www.roslin.ac.uk/public/cloning.html Roslin Institute on line: páginas del Instituto Roslin de Escocia organismo de investigación pionero en transgénesis de animales de granja, con explicaciones, fotografías y enlaces de interés en el campo. http://www.cnb.uam.es/~transimp Transgénesis en mamíferos: Web del grupo de trabajo de transgénesis en mamíferos del Centro Nacional de Biotecnología (CNB-UAM) dentro de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular. http://www.eibe.info/ European Initiative for Biotechnology Education. Tiene un tema, el 9, dedicado a plantas transgénicas que es accesible en español. 36 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria http://www.safe-food.org Comida transgénica. Paginas donde se debaten los beneficios y posibles riesgos de estas tecnologías aplicadas a los productos de alimentación. http://www.monsanto.com Monsanto: páginas en español de una de las grandes multinacionales agrícolas implicadas en la investigación y comercialización de semillas transgénicas. Contiene información actualizada sobre nuevos productos, legislación y debates e informaciones relacionadas con el tema de plantas transgénicas agrícolas. http://www.fao.org/biotech/forum.asp FAO. Foro electrónico para Biotecnología auspiciado por la Food and Agriculture Organization de las Naciones Unidas. Conferencias, noticias y glosario sobre Biotecnología e Ingeniería Genética. 37 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria 11. GUIA DE ACTIVIDADES En la Guía de Actividades se describe la planificación estratégica de las situaciones didácticas, tendiente a que el alumno reconozca previamente las fases de aprendizaje como reconocimiento, profundización y transferencia. La siguiente matriz presenta los componentes estructurales de las fases de aprendizaje que debe evidenciar el estudiante. UNIDADES DIDÁCTICAS PALABRAS FASE DE APRENDIZAJE SITUACIONES DE SALIDA CLAVE CONCEPTOS Y PERSPECTIVA HISTÓRICA DE LA TECNOLOGIA DEL ADN RECOMBINANTE SITUACIONES DE ENTRADA/ CARÁCTER DEL CURSO RECONOCIMIENTO Mirada al curso en forma global, se plantean métodos, procedimientos, actividades de cada interfase y orientaciones necesarias para el desarrollo del curso. PROFUNDIZACION El estudiante identifica la biotecnología como una ciencia que esta revolucionando el mundo y reconoce los conceptos teóricos necesarios para entender la tecnología del ADN recombinante. Introducción al curso académico. El estudiante podrá tener una visión general del contenido del curso al leer el protocolo y la guía de actividades. Inducción sobre la fase de profundización. Desarrollo de competencias cognitivas, interpretativas y de descripción por medio de ayudas audiovisuales, tareas específicas y ejecución de prácticas de laboratorio con su respectivo informe. 38 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD Escuela de Ciencias Agrarias, Pecuarias y del Medio Ambiente Contenido didáctico del curso Ingeniería Genética Agropecuaria TRANSFERENCIA ASPECTOS TECNOLÓGICOS EN LA OBTENCIÓN DE PLANTAS Y ANIMALES TRANSGÉNICOS El estudiante se apropia del conocimiento sobre la tecnología del ADN recombinante. Actividades de seguimiento tutorial, uso de correo electrónico. Actividades de estudio en grupo colaborativo. Evaluación individual. El estudiante conoce los aspectos tecnológicos para la obtención de OGMs. nducción a la unidad II. Lecturas complementarias. Ayudas audiovisuales. Actividades en grupo El estudiante identifica las tecnologías apropiadas y relaciona la aplicación de estas en el campo agropecuario. Actividades en grupo colaborativo. Talleres. Vista a entidades que realizan estas técnicas. RECONOCIMIENTO PROFUNDIZACION TRANSFERENCIA El estudiante integra sus conocimientos y esta apto para iniciar un debate sobre los aspectos éticos y comerciales en el establecimiento de estas tecnologías. Actividad de estudio independiente. Seguimiento tutorial. Foro virtual El estudiante inicia la construcción de un proyecto de investigación, seleccionará un tema para desarrollarlo a nivel individual. 39