Tinción

Tinción o coloración de bacterias
Los procedimientos que ponen de manifiesto diferencias entre las células bacterianas o en partes una célula se
conoce como técnica de coloración diferenciales. Son algo mas que elaboradas que la técnica simple en la que
las células se someten a una sola solución colorante o reactivo colorante.
Las tinciones se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no ha muerto el proceso
termina de hacerlo. El método, por consiguiente, es bastante drástico y puede producir artificios.
Las tinciones mas frecuente son sales. Las tinciones básicas consiste en un catión coloreado unido a un anión
incoloro, mientras las ácidas constituyen exactamente lo contrario, unido a dos cationes. Las células
bacterianas son abundantes en ácidos nucleicos, los cuales portan cargas negativas en formas de fosfatos.
Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterias, y por tanto, pueden utilizarse para teñir al fondo con un
color de contraste.
Las tinciones básicas tiñen uniformemente en las células bacterianas, a menos que antes de destruyan el ARN
del citoplasma. También se pueden usar técnicas de tinción especiales para flagelos, membranas celulares,
paredes celulares, gránulos, nucleótidos y esporas.
Tinción acidorresistente
Las bacterias acidorresistentes son las que retiene la carbolficsina, aun cuando intente descolorarlas con un
mezcla de alcohol y ácido clorhídrico. Las bacterias acidorresistentes se tiñen de color rojo; el resto adquiere
el color del colorante de contraste en este caso el verde o azul.
Tinción negativa
Este procedimiento consiste en la tinción de fondo con un colorante ácidos para dejar las células incoloras en
contraste. Comúnmente se utiliza el colorante negro llamado nigrusína. El método sirve para observar
bacterias o estructuras que difícilmente se tiñen con las técnicas directas.
Tinción de los flagelos
Los flagelos son estructuras demasiado finas para poder ser visibles en el microscopio de luz. Sin embargo si
se tratan con una suspensión coloidal inestable de sales de ácidos tánico para formar un precipitado denso en
la pared celular y en los flagelos, se pueden poner de manifiesto su presencia y disposición en las células. De
esta manera el diámetro aparenta que la estructura aumento de tamaño con fuscina básica los hace visibles en
el microscopio óptico.
Tinción de la cápsula
La cápsula se pone de manifiesto mediante una coloración negativa o una modificación de esta. Uno de los
métodos de ´´ tinción de la cápsula ´´ incluye el tratamiento de las bacterias con un solución caliente de cristal
violeta seguido por un lavado con una solución de sulfato de cobre. El sulfato de cobre también imparte color
al fondo y esto resulta en que la célula y el fondo aparezcan teñido en color azul oscuro mientras la cápsula
aparece de color azul pálido.
Tinción del núcleo
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Los núcleos se pueden teñir por la tinción de Feulgen la cual es especifica para el ADN.
Tinción de la esporas
Las esporas se observan de la manera mas simple como cuerpos refringentes intracelulares en suspensiones de
bacterias sin teñir, la parte de las esporas relativamente impermeable, las esporas comúnmente se tiñen con
verde de malaquita y carbolfucsina o carbolfucsina
Tinción Gram.
Una característica taxonómica importante de las bacteria es su respuesta a la tinción a de Gram esta
característica parece ser fundamental, reacción a la tinción se correlaciona a con muchas otras propiedades
morfológicas en maneras relacionadas filogenéticamente. Microorganismo potencialmente grampositivo
puede verse como tal cuando concurren un conjunto de particular de condiciones ambientales en un cultivo
joven. El procedimiento para tinción de Gram se inicia con la aplicación de un colorante básico el cristal de
violeta. Luego se aplica una solución de yodo en este momento todas las bacterias de tiñen de azul.
Continuación las células se tratan con alcohol las células grampósitiva contienen el cristal violeta−yodo y
permanecen de color azul; en cambio las gramnegativa se descoloran completamente por el alcohol. Por
ultimo se aplican un colorante de contraste safranina, que es un colorante rojo. De esta manera, las células
gramnegativas, previamente descoloradas, toman el colorante de contraste y las células grampositivas ahora
aparecen púrpura.
La base de la reacción diferencial de Gram es la estructura de la pared celular. Esta técnica diferencial es una
de las de uso mas común en microbiología. El frote bacteriano teñido se somete a las soluciones siguientes en
el orden en que se indica: cristal violeta, alcohol y safranina o alguna otra solución de contraste conveniente.
Las bacterias gramnegativas contienen un gran porcentaje mas alto de lípidos que de las bacterias
grampositivas. Las paredes celulares de la bacterias gramnegativas son también mas delgadas que las
grampositivas con alcohol extrae lípidos con lo cual se aumenta la porosidad o permeabilidad de la pared
celular gramnegativa. Así el complejo cristal violeta−yodo (CV−I) puede extraerse en los organismos
gramnegativos y de esta manera se destiñen las paredes celulares de las bacterias grampositivas, por su
composición diferente (bajo contenido lípido) se deshidratan alcohol y se logra extraer el complejo (CV−I).
En las bacterias (CV−I) queda retenido en la pared después del tratamiento con etanol, la cual se supone se
supone causa una disminución de en el diámetro de los poros glucopéptido o péptidoglicano de la pared
celular. Las bacterias gramnegativas tienen una cantidad mucho menor de pépidoglicano con ligaduras
cruzadas menos extensas que en las paredes de las bacterias grampositivas.
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