PROGRAMA NACIONAL SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PN-ACUI-MC-01-PV-03 Protocolo de Vigilancia Epidemiológica para El Síndrome de Taura Versión 01 Página 1 de 22 Elaborado por: Coordinador de Programa Revisado por: Coordinador de Unidad de Epidemiologia Aprobado por: Director General Tabla de contenido 1. INTRODUCCIÓN………………………………………………………………..... 2. ANTECEDENTES………………………………………………………………… 3. JUSTIFICACIÓN………………………………………………………………...... 4. EJECUTORES DEL PROGRAMA……………………………….......................... 4.1. Elaboración del protocolo de vigilancia………………………………….. 4.2. Recepción de denuncias de casos clínicamente compatible con Taura...... 4.3. Investigación y seguimiento de casos clínicamente compatible con Taura…………………………………………………………………...….. 4.4. Toma de Muestras......................................................................................... 4.5. Diagnóstico Laboratorial……………….………………………………… 4.6. Aplicación de prohibiciones a la importación…………………..………… 4.7. Capacitación………………………………………………………………. 5. COBERTURA DEL PROGRAMA……………………………………………… 6. OBJETIVO GENERAL………………………………………………………….. 7. OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………………….. 8. ENFERMEDAD A VIGILAR……………………………………………………. SINDROME DE TAURA………………………….. …………………………………….. 8.1. NOMBRE DE LA ENFERMEDAD …………………………………………... 8.2 HISTORIA NATURAL DE LA ENFERMEDAD……………………………….. 8.3 AGENTE ETIOLÓGICO………………………………………………………. 8.4. HUÉSPEDES, VECTORES, RESERVORIOS……………………………….…. 8.5. MECANISMOS DE TRANSMISIÓN…………………………………………… 9. DEFINICIÓN DE CASO………………………………………………………….. 3 3 4 5 5 5 5 6 6 7 7 7 7 8 8 8 8 8 9 9 10 10 9.1 Caso sospechoso…………………………………………………………………... 10 9.2 Caso confirmado…………………………………………………………………... 11 10. ESTRATEGIAS PARA LA VIGILANCIA Y SEGUIMIENTO EPIDEMIOLÓGICO……………………………………………………………….. 11 Bases legales y reglamentarias………………………………………………………… 11 10.1. Sistema de información y notificación…………………………………….. 13 10.1.1. Reporte de sospechas de enfermedad.…………………………………. 13 10.1.2. Seguimiento de casos clínicamente compatible con El Síndrome de Taura…………………………………………………………………… 13 PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 2 de Versión 01 22 . 10.1.3. Toma y remisión de muestras al Laboratorio………………………….. 10.1.4. Registro en el SIVE……………………………………………………. 10.1.5. Diagnóstico Laboratorial………………………………………………. 10.1.6. Resultado Laboratorial………………………………………………… 10.1.7. Entrega de Resultados…………………………………………………. 10.1.8. Elaboración de informes y comunicación en caso de eventos según el nivel que corresponda………………………………………………….. 11. VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA……………………………………………… 11.1. Descripción de las características de la población huésped……………… 11.2. TIPO DE VIGILANCIA……………………………………………………. 13 13 13 13 14 14 15 15 15 11.2.1. Vigilancia Pasiva………………………………………………………. 15 12. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL……………………………………………… 18 12.1. Laboratorios designados para el proceso de las muestras………………... 18 12.1.1. Laboratorio Nacional…………………………………………………... 18 12.1.2. Laboratorio de Referencia……………………………………………... 18 12.2. Prueba laboratorial a utilizar para el diagnóstico del Síndrome de Taura. 18 12.3. Descripción del método diagnóstico………………………………………. 20 13. Capacitación……………………………………………………………………….. 20 14. Divulgación……………………………………………………………………....... 20 15. Bibliografía………………………………………………………………………… 21 16. Anexos…………………………………………………………………………….. 22 PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 3 de Versión 01 22 1. INTRODUCCIÓN El Síndrome de Taura es una enfermedad listada en el Código Acuático de la OIE, y según el decreto de declaración obligatoria N° 34699-MAG, Gaceta Nº 156 publicado el 13 de agosto del 2008 es una enfermedad notificable. La producción de camarón en Costa Rica, se ubica en la costa Pacífica y es muy importante para el país, porque genera gran cantidad de empleo de forma directa e indirecta, en lugares donde el trabajo es poco y las personas que allí habitan son de escasos recursos. Además la generación de divisas que produce esta explotación acuícola es muy superior a otros productos tradicionales, según datos del INEC en el 2013 se exportó 114.932 kg de camarón de cultivo, para un total de $1.357.184. La vigilancia de esta enfermedad, forma parte de una de las muchas tareas que efectúa el SENASA para la protección de la salud animal de Costa Rica El presente protocolo es una guía donde se documente como se desarrolla la vigilancia para el Síndrome de Taura y brinde un apoyo al sector productivo mediante el trabajo técnico que brinda el SENASA. 2. ANTECEDENTES El síndrome de Taura fue reconocido por primera a vez como una enfermedad única en granjas camaroneras en la cercanía de la boca del río Taura en Guayaquil, Ecuador, en junio de 1992. Sin embargo, a través de un análisis retrospectivo de muestras de camarón tomadas en la región de Taura en Ecuador en septiembre de 1991, se demostró que la enfermedad ya estaba presente en esta región antes de 1992. De la misma manera, algunos granjeros de la región sospechan que la enfermedad ya estaba presente a mediados de 1990, cuando se observaron pérdidas inexplicables durante la fase de crianza de P. vannamei forzando a varios granjeros a abandonar el uso de estanques de crianza y adoptando en su lugar la práctica de “siembra directa” de postlarvas a densidades relativamente bajas en los estanques de engorda. Análisis retrospectivos de muestras de P. vannamei tomadas en Colombia en febrero de 1990 también han revelado la presencia de lesiones similares a las observadas en casos de síndrome de Taura (Laramore, 1995). A partir de 1992, el síndrome de Taura se ha dispersado a muchas de las regiones del continente americano, en donde ha sido observado tanto en camarones silvestres como cultivados. Casos documentados de síndrome de Taura se han originado en: PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 4 de Versión 01 22 • Regiones de cultivo a lo largo de las zonas camaroneras de Ecuador (1991 al presente). • La región de Tumbes, Perú (1993 al presente). • Costas del Pacífico y Caribe de Colombia (1993/94 al presente). • El Golfo de Fonseca en la región de Honduras y en El Salvador (1994 al presente). • Guatemala (1994). • Noreste del Brasil (1994). • Nicaragua (1995). • Estados de Sonora, Sinaloa, Chiapas y Guerrero en México (1995). • Texas (1995), Hawai (1994) y Florida (1994) en los Estados Unidos de Norteamérica. TSV se encuentra distribuido en países de Centro y Sudamérica. Tambien fue detectado en Taiwan en granjas donde se habían introducido postlarvas de P. vannamei. Se han tomado medidas de prevención como todo nauplio o post larva que se importe, debe de provenir de laboratorios certificados que están libres de enfermedades de declaración obligatoria de la OIE entre ellas el Síndrome de Taura; muestreos de control en los puestos fronterizos y en casos que se presente la enfermedad debe de hacerse la declaración obligatoria del caso. Hoy día somos un país donde la enfermedad es endémica y por diferentes factores ambientales, nutricionales o de stress, se puede desencadenar un evento de la enfermedad. Actualmente no se conoce la prevalencia de la enfermedad. 3. JUSTIFICACIÓN La aparición del síndrome de Taura en el camarón afecta la producción en el país. Esta actividad productiva provee una fuente de trabajo muy amplia desde el cuido en la granja hasta el proceso de planta. Los mercados a los cuales Costa Rica exporta camarón son el estadounidense y el europeo. Una de las directivas de la Comunidad Económica Europea, específicamente la 88 /2006 CE, plantea que los países que exporten sus productos acuícolas a ese mercado deben de garantizar mediante normas generales el control de enfermedades y la bioseguridad. Las directivas de la CE establecen que existan medidas de control de las enfermedades, exigiendo para ello que las muestras sean oficiales, es decir, muestras tomadas por la autoridad competente y analizadas en laboratorios autorizados por la autoridad competente para proceder al examen de una muestra oficial. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 5 de Versión 01 22 Además, las directivas establecen la necesidad que los países tengan protocolos de vigilancia, planes y toda la documentación necesaria que permita demostrar que se cuenta con una producción sana. Asimismo, la documentación permite dar trazabilidad a las diferentes acciones y tareas que se desarrollan en atención al camarón. Los Estados Unidos y la Unión Europea confiarán en un servicio u organismo público que cuente con protocolos, planes y programas nacionales que realicen la coordinación de las actividades de los servicios centrales y regionales, encargados de efectuar la vigilancia sobre las diferentes enfermedades y la recogida de los resultados de los controles y las informaciones que se deben comunicar a las autoridades competentes El 23 de Marzo del 2007 se ha comunicado a las plantas exportadoras de productos y subproductos acuícolas la posibilidad del cierre de las exportaciones a la Unión Europea, por las no equivalencias con el control relacionado a sustancias y residuos en acuicultura (Directiva 96/23/CE). El Programa Nacional de Sanidad Acuícola permite que Costa Rica someta a los socios comerciales los planes relacionados con el Sindrome de Taura cumpliendo con el autocontrol exigido y con el muestreo necesario. Cuando el examen de una muestra oficial revele la presencia del virus, el Programa como autoridad competente vela por obtener, sin demora, los datos necesarios para la identificación los camarones infestados, así como también y las granjas de origen, con el fin de diseñar y ejecutar las medidas de control que sean necesarias. 4. EJECUTORES DEL PROGRAMA Será responsable de la ejecución del programa El Servicio Nacional de Salud Animal (SENASA) del Ministerio de Agricultura y Ganadería. En la tabla N°1 se resume el responsable de ejecución según la actividad involucrada. Tabla Nº 1 Ejecutores del programa según actividad y responsable de la ejecución ACTIVIDAD Elaboración del protocolo de vigilancia Recepción de denuncias de casos Investigación y seguimiento de casos RESPONSABLE DE EJECUCION Coordinador del Programa Nacional de Sanidad Acuícola y la Unidad de Epidemiología Personal Técnico de las Direcciones Regionales Personal Técnico de las Direcciones Regionales, Coordinador del Programa de Sanidad Acuícola y la Unidad de Epidemiología PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Toma de muestras Diagnóstico laboratorial Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 6 de Versión 01 22 Médicos Veterinarios, técnicos del SENASA así como el personal oficializados del sector acuícola. Dirección de laboratorio de Servicios Veterinarios y el laboratorio de Patología en Acuacultura de la Universidad de Arizona Capacitación en toma de muestra, Coordinador del Programa Nacional de reconocimiento de la enfermedad etc. Sanidad Acuícola 4.1. ELABORACIÓN DEL PROTOCOLO DE VIGILANCIA Es responsabilidad del Coordinador del Programa Nacional de Sanidad Acuícola, junto con el Director Técnico de la Unidad de Epidemiología, analizar y actualizar de ser necesario este protocolo cada año, después de la Asamblea General de la OIE o cuando por cambios en el status sanitario o cambios en la epidemiología de la enfermedad así lo requieran. 4.2. RECEPCIÓN DE DENUNCIAS DE CASOS CLÍNICAMENTE COMPATIBLE CON SÍNDROME DE TAURA EL Es responsabilidad de los funcionarios de las Direcciones Regionales, de recibir las denuncias de los casos con sintomatología compatible con Taura. 4.3. INVESTIGACIÓN Y SEGUIMIENTO DE CASOS CLÍNICAMENTE COMPATIBLE CON TAURA. Es responsabilidad de los médicos veterinarios oficiales analizar la información de la denuncia y clasificarla según corresponda, si la denuncia clasifica para atención de caso deberá darle seguimiento a la misma. Es responsabilidad del Médico Veterinario Oficial durante la visita utilizar los formularios: Hoja de Visita (anexo1), Registro de Información sobre Episodios de Enfermedades Agudas (EA1) (anexo 2). Es responsabilidad del médico veterinario oficial que realizó la visita, entregar la información al jefe del Departamento de Registro de la Dirección Regional que corresponda, para la Incorporación y registro de los eventos en la base de datos del “Sistema de Vigilancia Epidemiológica (SIVE)”. 4.4. TOMA DE MUESTRAS Es responsabilidad de los médicos veterinarios, técnicos del SENASA así como los oficializados, la toma de muestra de animales con sintomatología compatible con el síndrome de Taura. Para la toma de muestras se utilizará el Procedimiento para la toma y envío de muestras (PN-ACUI-PG-02Procedimiento para la toma y envió de muestras de especies de acuicultura) (anexo 3). PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 7 de Versión 01 22 4.5. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Es responsabilidad de la Dirección de Laboratorio de Servicios Veterinarios recibir la muestra y asignarle un número de identificación (protocolo) y de procesar la muestra a la mayor brevedad posible. 4.6. APLICACIÓN DE PROHIBICIONES A LA IMPORTACIÓN Es responsabilidad de la Dirección de Cuarentena Animal a nivel central establecer los controles necesarios con las importaciones de animales vivos, para cumplir con las recomendaciones emitidas por la OIE y con la normativa nacional. Es responsabilidad de los médicos veterinarios oficiales, a nivel de los puestos regionales, realizar la comprobación de los requisitos sanitarios exigidos a las mercancías de origen animal que sean importadas. 4.7. CAPACITACIÓN Es responsabilidad del coordinador del Programa Sanidad Acuícola, brindar la capacitación a los médicos veterinarios de las regiones, en el reconocimiento de las enfermedades, y toma de muestra de los animales para el envío al laboratorio, así como en las Buenas Prácticas en Acuicultura según especie. 5. COBERTURA DEL PROGRAMA El programa de vigilancia epidemiológica para el Síndrome de Taura se llevara a cabo en el litoral Pacífico del país en el área de manglar, en la provincia de Puntarenas en los cantones de Puntarenas, Osa, Parrita, Aguirre, y en la provincia de Guanacaste en los cantones de Abangares, Nicoya y Nandayure. La vigilancia que se realiza en el país es pasiva, y la notificación es por sospecha. Anualmente en el laboratorio se reciben cerca de 50 muestras y de ellas 2 o 3 muestras resultan positivas para otras enfermedades, también se ha determinado que la subnotificación es muy alta, ya que muchos productores prefieren cosechar los estanques antes que empiecen a morir los animales, y esto repercute en sus ganancias porque el camarón baja su calidad y es destinado principalmente a mercado nacional. 6. OBJETIVO GENERAL El objetivo de la vigilancia del Síndrome de Taura es de detectar la enfermedad lo antes posible, para tomar las medidas oportunas para que la enfermedad no se extienda a otros establecimientos, y para que se controla y erradique lo antes posible. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 8 de Versión 01 22 7. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 7.1.1. Contar con las bases conceptuales de la vigilancia del Síndrome de Taura. 7.1.2. Establecer y definir las estrategias de la vigilancia del Síndrome de Taura. 7.1.3. Implementar un sistema de capacitación tanto para el sector oficial como el privado. 7.1.4. Contribuir con el cumplimiento de las demandas de los socios comerciales relacionados con las medidas sanitarias de la actividad de acuicultura 8. ENFERMEDAD A VIGILAR SINDROME DE TAURA (3, 6,8) 8.1. NOMBRE DE LA ENFERMEDAD El síndrome de Taura fue reconocido por primera vez como una enfermedad única en granjas camaroneras en la cercanía de la boca del río Taura en Guayaquil, Ecuador en junio de 1992. 8.2 HISTORIA NATURAL DE LA ENFERMEDAD El síndrome de Taura es uno de las enfermedades más devastadoras que afectan a la industria de las granjas camaroneras a nivel mundial. Desde su primera descripción en Ecuador, se ha esparcido a todos los países productores de camarón de América y se han informado brotes en muchas regiones del sureste asiático. Inicialmente se creyó que la enfermedad tenía una etiología tóxica y era causada por pesticidas usados en plantaciones de plátano cercanas a las granjas de camarones. Sin embargo, ahora es ampliamente aceptado el origen infeccioso de la enfermedad. TSV ha sido documentado en postlarvas y adultos silvestres de P. vannamei capturados cerca de la costa de Ecuador, El Salvador, y el estado mexicano de Chiapas, cerca de la frontera con Guatemala. Es posible que la distribución geográfica del síndrome de Taura se expandió debido a que la industria depende en gran parte de las poblaciones silvestres de nauplios, postlarvas y reproductores, los cuales son transportados a diferentes regiones geográficas e incluso países. Actualmente muchos de los laboratorios de maduración han obtenido mediante selección genética larvas más resistentes al síndrome, porque no se han presentado animales con signos clínicos compatibles con la enfermedad. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA 8.3 Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 9 de Versión 01 22 AGENTE ETIOLÓGICO En el Comité Internacional sobre Taxonomía de Virus (el ICTV) el TSV se consideró dentro de la Familia Dicistroviridae como una especie no asignada. Las partículas del TSV son icosaedros sin envoltura, de 32 nm, y con una densidad de flotación de 1.338 g/ml. El genoma del TSV está formado por un ARN lineal monocatenario de polaridad positiva con 10.205 nucleótidos, excluyendo la cola de poli-A en el extremo 3´, y contiene dos grandes fases de lectura abierta (ORFs). La ORF 1 comprende las secuencias de las proteínas no estructurales, como la helicasa, la proteasa y la ARN polimerasa dependiente de ARN. La ORF 2 comprende las secuencias para las proteínas estructurales del TSV, incluyendo las principales proteínas de la cápsida VP1, VP2 y VP3 (de 55, 40, y 24 kDa, respectivamente). El virus se replica en el citoplasma de las células del hospedador 8.4. HUÉSPEDES, VECTORES, RESERVORIOS Especies susceptibles: las principales especies hospedadoras para el TSV son el langostino blanco (o camarón blanco) Litopenaeus vannamei y el langostino americano L. stylirostris. Aunque todas las principales especies hospedadoras del TSV pertenecen a los peneidos del género Litopenaeus, hay otras especies de peneidos que pueden ser infectadas por el TSV mediante exposición directa, pese a que no desarrollan síntomas. Los hospedadores naturales y experimentales que han sido documentados para el TSV incluyen: L. setiferus, L. schmitti, Penaeus monodon, Metapenaeus ensis, Fenneropenaeus chinensis, Marsupenaeus japonicus, Farfantepenaeus aztecus y Fa. duorarum. Fases vitales susceptibles de las especies hospedadoras: el TSV se ha documentado en todas las fases de la vida de L. vannamei (es decir, PLs, juveniles y adultos) excepto en los huevos, zigotos y larvas. En epizootias de TSV dentro de camaroneras que afectan a las existencias no seleccionadas de L. vannamei, las mortalidades acumuladas típicas varían del 40 al >90% en poblaciones cultivadas de las formas postlarvarias (PL), las fases juveniles, y las de subadulto. Los supervivientes de infecciones por TSV pueden mantener el virus toda la vida. Se han encontrado líneas seleccionadas resistentes al TSV de L. stylirostris (genotipo 1, MAb 1A1 tipo A) y éstas han llegado a convertirse en las existencias cultivadas dominantes en el oeste de México después de que el TSV alcanzó a México en 1994. Sin embargo, en 1998–1999, emergió una nueva “cepa” de TSV (Tipo B; 13, 15, 28, 29, 62) y causó un epizootia masiva en L. stylirostris. La aparición de esta nueva “cepa” de TSV fue seguida poco después, a finales de 1999, por la introducción del virus del síndrome de la Mancha Blanca en plantas productoras de langostinos del oeste de México, al que L. stylirostris no ofrecía resistencia, terminando de modo efectivo con el interés por el cultivo de L. stylirostris. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 10 Versión 01 de 22 Infección persistente y portadores asintomáticos: algunos miembros de las poblaciones de L. vannamei o L. stylirostris que sobreviven a infecciones y/o epizootias por el TSV llevan el virus toda la vida y, aunque no está documentado, pasan el virus a su progenie por transmisión vertical. Vectores y fuentes de contaminación: Aves marinas: se ha demostrado que el TSV permanece infeccioso hasta 48 horas (tras la ingestión de cadáveres de gambas infectadas por el TSV) en las heces depositadas por gaviotas silvestres o cautivas (Larus atricilla) y por pollos (Gallus domesticus, empleados como sustitutos de laboratorio para todas las aves comedoras de langostinos). Estos hallazgos revelan que las aves son un importante vector mecánico en la transmisión del virus dentro de cultivos afectados o de regiones de cultivos afectados. Insectos acuáticos: también se ha visto que el llamado barquero de agua (Trichocorixa reticulata [Corixidae], un insecto acuático que se alimenta de langostinos muertos en estanques de langostinos cultivados), sirve de vector mecánico del TSV. Productos comerciales congelados infectados por TSV: en muestras del mercado de EE.UU., originadas en Latinoamérica y en el sudeste asiático, se ha encontrado el TSV en productos comercializados de langostinos blancos (L. vannamei). Una inadecuada eliminación de los desechos (líquidos y sólidos, es decir, de cáscaras peladas, cabezas, tractos intestinales etc.) que se originan en el procesamiento de productos con valor añadido, procedentes de langostinos infectados por el TSV en localidades costeras, puede suponer una fuente de TSV que a su vez puede contaminar las existencias silvestres y cultivadas que estén próximas al punto de descarga de los desechos. 8.5. MECANISMOS DE TRANSMISIÓN (6) La transmisión del Síndrome de Taura puede ser por vía horizontal y vertical. La Transmisión horizontal por canibalismo o por agua contaminada y la transmisión vertical de padrotes infectados a su descendencia es una fuerte sospecha pero no está confirmado experimentalmente. 9. DEFINICIÓN DE CASO (3, 6,9) 9.1 CASO SOSPECHOSO Altas mortalidades repentinas en las formas PLs tardías, juveniles o subadultas de L. vannamei o de L. stylirostris en regiones donde el TSV es enzoótico. Presencia repentina de numerosas aves marinas “pescando” en uno o más criaderos de langostino (gaviotas, cormoranes, garzas, golondrinas marinas, etc.) PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 11 Versión 01 de 22 Muestras de L. vannamei o L. stylirostris cultivadas procedentes de los viveros que sirven de alimentación a abundantes aves marinas, que presentan síntomas evidentes en fase aguda o de transición, tales como una coloración general rojiza, letargia, caparazones blandos, intestino vacío, y presencia de numerosas manchas negras irregulares en la cutícula. Demostración de focos de necrosis en el epitelio cuticular a bajo aumento al examinar los bordes de apéndices tales como los urópodos, los pleópodos o las branquias (es decir, con una lupa de mano de ×10 o por examen microscópico directo de preparaciones con montaje en húmedo). 9.2 CASO CONFIRMADO Cualquier combinación de al menos dos de los tres métodos siguientes (con resultados positivos): Demostración histológica de un diagnóstico basado en lesiones de fase aguda por el TSV, especialmente en el epitelio cuticular del tubo digestivo anterior (esófago, cámaras anteriores o posteriores del estómago) y/o en las branquias, apéndices, o cutícula general. Tales lesiones, producidas por el TSV, son patognomónicas para ese virus solo cuando ocurren sin una necrosis aguda acompañante (con picnosis y cariorrexis nuclear) en las células parenquimatosas de los túbulos del órgano linfoide (la cual puede ocurrir en fase aguda de la Infección del Virus de la Cabeza Amarilla). ISH-Positiva (con una sonda de ADN específica para el TSV) o IHC (con MAb 1A1) que den una señal histológica positiva para lesiones de tipo TSV en fase de infección aguda, de transición o crónica los esferoides distintivos del órgano Linfoide (LOS) en el órgano linfoide de camarones con lesiones de fase crónica de ST. Resultados positivos de RT-PCR para TSV. 10. ESTRATEGIAS PARA LA VIGILANCIA Y SEGUIMIENTO EPIDEMIOLÓGICO Bases legales y reglamentarias Ley SENASA N° 8495, Gaceta 93 publicada el 16 de mayo de 2006 Ley General de Salud N° 5395, Gaceta 222, alcance 172, publicada el 24 de noviembre de 1973 Ley para el control de la elaboración y expendio de alimentos para animales N° 6883, Gaceta 182, publicado el 27 de setiembre de 1983 PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 12 Versión 01 de 22 Ley General de Pesca y Acuicultura N° 8436, Gaceta 78, publicada el 25 de abril del 2005. Ley constitutiva del Servicio Nacional de Aguas Subterráneas, Riego y Avenamiento, SENARA N° 6877, publicada el 18 de julio de 1983 Ley Constitutiva de Acueductos y Alcantarillados N° 2726, publicada el 18 de mayo del 2004 Decreto ejecutivo para la oficialización del Reglamento Sanitario Internacional. N° 34038-S Gaceta N° 243, publicada el 18 de diciembre del 2007 Reglamento de límites máximos y microbiológicos y de residuos de medicamentos y contaminantes para los productos y subproductos de la pesca y de la acuicultura destinados al consumo humano. Nº 34687, Gaceta 160, publicado el 20 de agosto del 2008. Listado de enfermedades de animales de declaración obligatoria N° 34669-MAG, Gaceta 156, publicado 13 de agosto del 2008. Reglamento de la estructura organizativa del SENASA N° 34319-MAG, Gaceta 41, publicado el 27 de febrero del 2008 Reglamento para la prohibición de productos que contengan verde de malaquita para uso en animales N° 33720, Gaceta 96, publicado el 21 de mayo del 2007 Creación de registro de importadores de animales, productos, subproductos y derivados de origen animal, frescos o congelados sin procesar o mínimamente procesados destinados para consumo humano y o industrial N° 33102, Gaceta 134, publicado el 16 de julio del 2006 Reglamento de Registro y control de medicamentos veterinarios N° 28861-MAG, Gaceta 161, publicado el 23 de agosto del 2000 Reglamento para la importación de insumos agropecuarios y alimentos para animales previamente registrados N° 28852, Gaceta 161, publicado el 23 de agosto del 2000 Prohibición del uso de los isómeros del Lindano, DDT. N° 27773- MAG-S-TSS, Gaceta 70, publicado el 13 de abril de 1999. Prohibición de uso de cloranfenicol. N° 26146-MAG, Gaceta 136, publicado el 16 de julio de 1997 Prohibición de uso de Nitrofuranos y Furazolidona N° 24401-MAG, Gaceta 130, publicado el 10 de julio de 1995 PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 13 Versión 01 de 22 Reglamento para laboratorios oferentes de referencia y con ensayos oficializados por SENASA N° 34493-MAG, Gaceta 88, publicado el 8 de mayo de 2008 10.1. SISTEMA DE INFORMACIÓN Y NOTIFICACIÓN 10.1.1. Reporte de sospechas de enfermedad: Los funcionarios de las Direcciones Regionales, reciben las denuncias de los casos con sintomatología compatible con el Síndrome de Taura mediante el formulario Registro de Notificación de Denuncia (anexo). 10.1.2. Seguimiento de casos clínicamente compatible con el Síndrome de Taura: Los directores de las regionales analizan la información de la denuncia y la clasifican según corresponda, si la denuncia clasifica para atención de caso procede a darle seguimiento a la misma. Durante la visita procede a realizar el análisis de los signos clínicos de los animales en el sitio de producción. Durante la visita deberá utilizar los formularios: Hoja de Visita, Censo de Población Animal y Registro de Información sobre Episodios de Enfermedades Agudas (EA1). 10.1.3. Toma y remisión de muestras al Laboratorio: El médico veterinario de la región, procede a la toma y el envió de la muestra, de acuerdo a lo establecido en el Procedimiento para la toma y envió de muestras (PN-ACUI-PG02). 10.1.4. Registro en el SIVE: El médico Veterinario Oficial y/o el técnico del SENASA, envía copia de la información recopilada al jefe del Departamento de Registro de la Dirección Regional que corresponda, para la Incorporación y registro de los eventos en la base de datos del “Sistema de Vigilancia Epidemiológica (SIVE)”. 10.1.5. Diagnóstico Laboratorial Las muestras son recibidas en el Laboratorio Nacional de Servicios Veterinarios (LANASEVE), donde les será asignado un número de identificación y posteriormente se procesan las muestras a la mayor brevedad posible. 10.1.6. Resultado Laboratorial El médico veterinario encargado de la Sección de Seguridad del LANASEVE, emite un resultado, el cual envía al Jefe de la Unidad de Servicios Generales del LANASEVE. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 14 Versión 01 de 22 10.1.7. Entrega de Resultados: De resultar negativo el resultado, el Jefe de la Unidad de Servicios Generales del LANASEVE, entrega o envía el resultado a la dirección Regional donde corresponda y además entrega una copia al Coordinador del Programa de Sanidad Acuícola, para su archivo. De resultar positivo el resultado, el Jefe de la Unidad de Servicios Generales del LANASEVE, comunica al Director General del SENASA, a los Coordinadores del Programa de Sanidad Acuícola, a la dirección Regional donde corresponda y la Unidad de Epidemiología. En caso de ser necesario se puede realizar una confirmación del resultado emitido por el laboratorio oficial, enviando la muestra al laboratorio de referencia de la OIE. Los responsables del envío de la muestra al laboratorio de referencia de la OIE serán el jefe de la Unidad de Servicios Generales y el encargado del Programa de Sanidad Acuícola. Cuando se informa del resultado, El Jefe de la Unidad de Servicios Generales del LANASEVE, comunica al Director General del SENASA, a los Coordinadores del Programa de Sanidad Acuícola y de la Unidad de Epidemiología, al director de la Regional y al médico veterinario que toma la muestra. Posteriormente el Coordinador del programa y el Director de la Unidad de Epidemiologia coordinan cuales son los pasos a seguir según el protocolo de contingencia de la enfermedad. 10.1.8. Elaboración de informes y comunicación en caso de eventos según el nivel que corresponda, a saber: 10.1.8.1. Reporte semanal de los funcionarios de las Direcciones Regionales al Director de cada región del país siguiendo los procedimientos e instrumentos definidos para este efecto. 10.1.8.2. Reporte Trimestral del Director de Operaciones dirigido al Coordinador del Programa de Sanidad Acuícola, recopilando la información suministrada por los Directores de cada región. 10.1.8.3. Reporte mensual de los jefes de puestos cuarentenarios al Director de Cuarentena Animal 10.1.8.4. Reporte mensual del Director de Cuarentena Animal al Coordinador del Programa de Sanidad Acuícola. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 15 Versión 01 de 22 10.1.8.5. Informe mensual del Coordinador del Programa de sanidad Acuícola, dirigido al Director de Programas Nacionales y al de la Unidad de Epidemiología para que este informe sea utilizado para actualizar la página web del SENASA. 11. VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA Ejercer vigilancia significa realizar investigaciones continuas sobre una población determinada, en el presente caso, sobre la población camaronícola en el territorio nacional con vistas a detectar la presencia de enfermedad lo más pronto posible a efectos de control sanitario; someter parte de esa población a pruebas diagnósticas puede formar parte de las investigaciones. 11.1. DESCRIPCIÓN DE LAS CARACTERÍSTICAS DE LA POBLACIÓN HUÉSPED Las unidades de explotación primarias están ubicadas en área Pacífica en las provincias de Guanacaste y Puntarenas. La población blanco a los cuales se da una vigilancia es a los 90 productores pequeños, medianos y grandes, con un área total es de 1.500 hectáreas, y una producción de 3.931.773 kilogramos, principalmente de la especie Litopenaeus vannamei y muy poco de la Litopenaeus stylirostris. En Costa Rica existe una gran variedad de tamaños de las fincas hay productores que poseen desde una hectárea de espejo de agua hasta otros con más de 45 hectáreas. El porcentaje de producción para consumo nacional como para exportación es muy variable ya que depende del precio en los mercados internacionales y por comunicación personal con algunos productores dicen que en muchos casos es mejor vender el producto al mercado nacional que el internacional. 11.2. TIPO DE VIGILANCIA (1 3, 4,8) 11.2.1. VIGILANCIA PASIVA Todos los animales que se encuentren en la finca deben de estar clínicamente sanos, en caso que presente algún signo clínico de una enfermedad como que se presente en la fase de crianza lo cual ocurre de los 14 a 40 días después de sembrados Por lo tanto, los camarones afectados tienden a ser típicamente juveniles de aproximadamente 0.05 g a menos de 5 g. Los camarones más grandes también pueden ser afectados, especialmente si nunca han sido expuestos al virus. La enfermedad exhibe una fase aguda y otra de recuperación (crónica), las cuales pueden distinguirse a simple vista. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 16 Versión 01 de 22 Fase Peraguda/aguda: en los camarones moribundos, durante la fase peraguda de la enfermedad, los signos observables a simple vista incluyen expansión de los cromatóforos rojos, lo cual le imparte al camarón una coloración general que va de rosada a rojiza y a los urópodos una coloración roja (de ahí el nombre de la enfermedad de la cola roja). Los animales en la fase peraguda tienden a morir durante la ecdisis (proceso de muda). En estos animales, cuando se examina con más detenimiento el epitelio cuticular, por ejemplo de un apéndice (en la punta de los urópodos o de los pleópodos, por ejemplo), es posible observar evidencia de necrosis multifocal del epitelio. Los camarones que muestran estos signos peragudos, generalmente también tienen la cutícula suave, el intestino vacío y se encuentran en el estadío “D” del ciclo de muda (ecdisis). Los animales con infección peraguda severa mueren típicamente durante la ecdisis, lo cual sugiere que el proceso de muda es una parte importante de la patogénesis del síndrome de Taura. Fase crónica/recuperación: en los estanques, cantidades bajas o moderadas de camarón tienden a presentar lesiones multifocales melanizadas del tipo de la enfermedad de la concha. Los camarones en esta fase de la enfermedad pueden o no presentar su cutícula blanda y expansión de los cromatóforos rojos. Es posible observar a tales camarones comportándose y alimentándose normalmente. Estos camarones son sobrevivientes de la etapa peraguda o aguda de la enfermedad, los cuales al haber mudado exitosamente muestran las lesiones melanizadas en vías de recuperación. Aunque una epizootia de síndrome de Taura puede resultar en mortandades acumuladas que van del 80% al 90% de la población en un estanque, los sobrevivientes típicamente muestran supervivencias de 60% o más al tiempo de la cosecha. Es obligación de toda persona que labore en la finca de notificar de forma inmediata, a la Dirección Regional del SENASA más cercana. Visitaran el lugar, tomaran y remitirán muestras al LANASEVE para el diagnóstico, desde que se emite la denuncia se brinda información de forma ágil y constante al coordinador del Programa Nacional de Sanidad Acuícola y a la Unidad de Epidemiología. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 17 Versión 01 de 22 Como verificación de requisitos de importación de camarones importados sean vivos (nauplios o post larvas) o muertos para la venta, al ingresar al país por los puestos cuarentenarios de frontera, se toma una muestra de ellos, y se envía al LANASEVE donde se corren pruebas de PCR. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 18 Versión 01 de 22 12. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL 12.1. LABORATORIOS DESIGNADOS PARA EL PROCESO DE LAS MUESTRAS . 12.1.1. Laboratorio Nacional EL LANASEVE es el laboratorio designado como laboratorio de diagnóstico para el Síndrome de Taura 12.1.2. Laboratorio de Referencia El Servicio Nacional de Salud Animal ha designado al Laboratorio de Patología en Acuacultura de Ciencias Veterinaria y Microbiología de la Universidad de Arizona en Tucson, Arizona USA. 12.2. Prueba laboratorial a utilizar para el diagnóstico del Síndrome de Taura: (3,6) Diagnóstico presuntivo La presencia de signos clínicos tal y como se describió anteriormente. Un historial ya sea de las instalaciones de cultivo, de la especie cultivada o de la región, que indique la posibilidad de infección por TSV (por ejemplo la importación de P. vannamei originario de Ecuador o de otras regiones en donde se sabe que existe TSV). • Preparaciones húmedas de apéndices (urópodos, escalas antenales, pleópodos, etc.) que muestren necrosis multifocal del epitelio cuticular en animales juveniles durante la fase per aguda/aguda de la enfermedad. Métodos para la detección y el diagnóstico definitivo del virus Para llegar a un diagnóstico definitivo de TSV, tanto en camarones individuales como en poblaciones enteras, se pueden utilizar cualquiera de los siguientes métodos: PCR Las pruebas moleculares utilizadas son: PCR Transcriptasa Reversa convencional: (RT)-PCR y PCR tiempo real: ha sido un método desarrollado teniendo ventajas en rapidez, sensibilidad y especificidad. La sensibilidad del RT-PCR es de 100 copias de la secuencia objetivo del genoma del virus de Taura. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 19 Versión 01 de 22 Métodos histológicos • El diagnóstico histológico de la enfermedad (con tinción H&E), durante la fase Aguda/peraguda, se basa en la demostración de áreas de necrosis multifocal en el epitelio cuticular del caparazón, apéndices, branquias, esófago, estómago e intestino posterior. • Sólo muy raramente el epitelio de los túbulos de la glándula antenal se ve afectado. • Con frecuencia, el tejido conectivo subcuticular y las fibras adyacentes de músculo estriado también se ven afectadas. • Las lesiones cuticulares multifocales son muy sobresalientes y consisten en lo siguiente: • El citoplasma de las células afectadas muestra un incremento en la eosinofilia. La picnosis nuclear y cariorrexis son una característica común en las lesiones de síndrome de Taura. • En ocasiones es posible observar la presencia de inclusiones citoplásmicas y frecuentemente una abundancia extrema de cuerpos esféricos (de 1 a 20 μm de diámetro) que van de eosinofílicos a basofílico pálido. • Los núcleos picnóticos y cariorrécticos dan una reacción positiva con la tinción de Feulgen (para ADN), lo cual los distingue de las inclusiones citoplásmicas eosinófilas/basófilas pálidas que no contienen ADN. • La ausencia de infiltración hemocítica, o de otro tipo de respuesta inflamatoria, distingue la fase per aguda de la fase de recuperación o crónica de la enfermedad. • La presencia de núcleos picnóticos y cariorrécticos así como de las inclusiones citoplásmicas generalmente esféricas, le dan a las lesiones de la fase aguda/per aguda una apariencia “aperdigonada” o “apimentada”, lo cual es considerada como una característica patognomónica de la enfermedad. • Durante la fase de recuperación o crónica de la enfermedad, las lesiones cuticulares asemejan aquellas ocasionadas por infección bacteriana de la concha (“Shell disease”). • Estas lesiones pueden llegar a presentar erosión de la cutícula, colonización bacteriana superficial e invasión de la cutícula por presuntas especies de Vibrio. • Una marcada infiltración hemocítica, la cual puede o no estar melanizada, se encuentra con frecuencia en posición basal con respecto a las lesiones cuticulares melanizadas. • Durante la fase de recuperación o crónica de la enfermedad, es común observar la presencia de estructuras dentro del órgano linfoide conocidas como “esferoides”. Se ha observado que en camarones durante esta fase crónica (los cuales pueden carecer de las lesiones cuticulares diagnósticas), estos esferoides muestran una reacción positiva a la sonda genética, sugiriendo una relación estrecha con el proceso de la enfermedad. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA 12.3. Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 20 Versión 01 de 22 DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO DIAGNÓSTICO (3,6) El virus del Síndrome de Taura es sistémico, y no se replica en tejido entérico (Hepatopáncreas, intestino medio, o ciego), por ello el tejido entérico es inapropiado para la detección de la infección. Muestras de camarones jóvenes enteros, hemolinfa, branquias o pleópodos, congelados o preservados en alcohol etílico (95%) para análisis por medio de PCR. Muestras de camarón entero fijado con solución de Davidson (AFA; Alcohol etílico: Formaldehído: Ácido acético) para análisis histopatológico, hibridación in situ e inmunohistoquímica. 13. Capacitación Capacitación al sector oficial: En los meses de mayo y junio se realizará una visita a las Direcciones Regionales del SENASA que tienen unidades de explotación camaronera en su zona, allí se impartirá la capacitación sobre información que ha elaborado o actualizado el Programa de Sanidad Acuícola, así como las no conformidades detectadas de las visitas realizadas. Además cada vez que el sector privado u otro ente oficial realicen capacitaciones en el tema, los directores regionales serán informados para que designen a un funcionario que asista al evento. Capacitación al sector productivo: Se convocaran a reuniones de capacitación una vez al año, pero también se citaran para que participen con su opinión en la elaboración de documentos que realiza el Programa Sanidad Acuícola, como las Buenas Prácticas para establecimientos de Producción Primaria de Acuicultura en Camarón (PN-ACUI-MC-IN-01) (Anexo 4) 14. Divulgación Elaboración de brochures o plegadizos, documentos, y entrega de ellos a los productores de camarón, divulgación a través de la prensa, información de las enfermedades de los animales acuáticos en la página web del SENASA, invitaciones a eventos de carácter nacional e internacional. PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 21 Versión 01 de 22 15. Bibliografía 1. Cenaim. 2010. http://www.cenaim.espol.edu.ec/publicaciones/cientif/revistas/200305003.pdf 2. Comunicación personal Cámara Nacional de Exportadores de Productos Pesqueros CANEPP. 3. CYTED Red II-D Vannamei. 2008. Guía Técnica Patología e Inmunología de camarones penaeidos. 4. En Internet 2010. http://es.wikipedia.org/wiki/S%C3%ADndrome_de_Taura 5. FAO.ORG.2009. Oficina Regional para América Latina y el Caribe. http://www.fao.org/docrep/009/a0086s/A0086S08.htm 6. OIE. Organización de la Salud Animal, 2009. Manual de Pruebas de Diagnóstico para los animales acuáticos. Ed. V. Paris. 7. OIE.2009. Organización Mundial de la Salud Animal. Código Sanitario de los Animales Acuáticos. http://www.oie.int/ESP/normes/fcode/es_chapitre_1.9.5.pdf 8. Revista Aquahoy.2010. http://www.hoy.com.ec/noticias-ecuador/sindrome-detaura-ataca-a-camaroneras-70322-70322.html 9. Revista Científica Universidad de Zulia. http://redalyc.uaemex.mx/pdf/959/95918203.pdf PROGRAMA NACIONAL DE SANIDAD ACUICOLA Rige a partir de: 09/01/14 ANEXOS Código: PNACUI-MC-PV-03 Página 22 Versión 01 de 22