E-041 - Universidad Nacional del Nordeste

Resumen: E-041
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Comparación entre el contenido de benzoilecgonina en orina de:
bebedores de te de hojas de coca y de coqueadores con el de adictos.
Galassi, Fernando - Ramirez, Elena W. - Prada, Gerardo D.
Instituto de Ciencias Criminalísticas y Criminología. UNNE.
Catamarca 375. C.P. 3400. Corrientes. Argentina.
Teléfono-Fax: 03783-422096. e-mail: cscrimin@unne.edu.ar
- Antecedentes:
Coat-a-Count metabolitos de la cocaína, es un radio inmuno análisis en fase sólida diseñado para la determinación
cuantitativa de benzoilecgonina en orina, su uso diagnóstico es estrictamente in vitro, en el contexto de un programa
que involucra un análisis de confirmación; es decir, proporciona sólo un resultado de prueba analítica preeliminar.
Cualquier resultado de un análisis de abuso de drogas debe someterse a consideraciones clínicas y a un juicio
profesional cuando se trata de resultados preeliminares positivos.
La cocaína (benzoilmetilecgonina), un ester del ácido benzoico y la ecgonina, se encuentra en las hojas de la planta
de coca (Erythroxylon coca). En el organismo el metabolismo a ecgoninametilester ocurre por la acción de la
colinesterasa sérica y hepática. En el organismo como en muestras acuosas la benzoilecgonina no se produce
enzimáticamente sino por hidrólisis simple. La pérdida del metilester ocurre espontáneamente en un proceso
dependiente del pH y la temperatura. Las colinesteresas pueden convertir la benzoilecgonina a ecgonina
enzimáticamente. También se pueden producir otros metabolitos incluidos los metabolitos hidroxiaril.
La vida media de la cocaína en sangre es de 30 a 120 minutos, mientras que la benzoilecgonina tiene una vida media de
7 a 9 horas.
En la orina la benzoilecgonina es el principal metabolito que se detecta.
Cabe recordar que la droga (cocaína) puede consumirse por vía oral o en forma intravenosa o por insuflación
intranasal o inhalarse como un vapor.
*Datos extraídos del Coat-A-Count (Cocaína Metabolito) D.P.C., y de la bibliografía consultad.
Cabe aclarar que el trabajo que corresponde a los consumidores de te de coca fue realizado por la Becaria Lic.
Elena Wilma Ramírez (perfeccionamiento) y el de los coqueadores fue realizado por el Becario Lic. Gerardo
Damián Prada (iniciación). Luego ambos becarios hicieron un análisis de los consumidores de cocaína y analizaron
los datos obtenidos en forma individual con los datos obtenidos en forma conjunta.
- Materiales y Métodos:
Materiales:
15 muestras de orina (primera de la mañana) de consumidores de te de coca.
15 muestras de orina (primera de la mañana) de coqueadores.
11 muestras de orina (primera de la mañana) de adictos.
Pipetas graduadas de 5 ml
Micropipetas automáticas de 25 microlitros
Agua destilada.
Espectrómetro. Marca α Nuclear Modelo MOS- Contador de Pozo Modelo M2.
Kit de benzoilecgonine Coat-A-Count. Cocaine Metabolite de D.P.C.
Técnica:
Utilizar 6 tubos recubiertos para el trazado de la curva de calibración correspondiente a 0 – 100 – 300 – 900 –
2700 – 5400 nanogramos/mililitros.
Tubos recubiertos para cada muestra a analizar.
Pipetear directamente en el fondo de cada tubo 25 microlitros de los calibradores y de las muestras
correspondientes según el caso, y cambiando la punta de la pipeta de muestra a muestra para evitar la contaminación
por arrastre.
Añadir 1,0 mililitro de benzoilecgonina marcada
Mezclar en vortex
Incubar durante 2 horas a temperatura ambiente (15-28 ºC)
Decantar cuidadosamente
Contar durante 1 minuto en un contador gama.
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- Resultados:
Tipo de Consumo
26%
37%
Infusión
Coqueo
Adicción
37%
VALORES HALLADOS EXPRESADOS EN
NANOGRAMOS/MILILITROS (ng/ml)
Tipo de Consumo
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 5
Muestra 6
Muestra 7
Muestra 8
Muestra 9
Muestra 10
Muestra 11
Muestra 12
Muestra 13
Muestra 14
Muestra 15
Infusión
840
2900
4500
3500
4000
2700
1950
2800
3200
2650
2500
1250
1450
1800
950
Coqueo
3700
4200
5400
1450
2300
4800
5400
2050
5400
5400
4450
1820
680
750
650
Adicción
900
1250
950
340
430
670
1300
165
174
99
670
x
x
x
x
Tratamiento estadístico:
Se puede observar en el grafico correspondiente a las muestras de orina de personas que consumieron te de coca, que se
pueden hallar valores en todos los rangos de concentraciones, menos en el último que corresponde al de mayor
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concentración. El rango donde se encuentra el mayor número de muestras es el que va de 2001 a 3000 nanogramos por
mililitro de Benzoilecgonina.
Se puede observar en el grafico correspondiente a persona que practican el Coqueo, se ecuentran valores de
concentraciones de Benzoilecgonina todos los rangos. Pudiéndose observar que el mayor número de muestras se
encuentran en el rango de mayor concentración de Benzoilecgonina que va desde 5001 a 6000.
Se puede observar en el grafico correspondiente a la personas que consumen cocaína (adictos), que los valores de
Benzoilecgonina hallados en las muestras de orinas analizadas, son muy bajos con respecto a los coqueadores y los
tomadores de te de coca y no superan los 2000 nanogramos por mililitros. El mayor de número de muestras analizadas
se encuentra en el primer rango que va de 0 a 1000 nanogramos por mililitros. (Se debe tener en cuenta que los adictos
se encontraban bajo tratamiento, al momento de recolección de la muestra)
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Gráfico Comparativo entre Infusión (Serie 1),
Coqueo (Serie 2) y Adicción (Serie 3)
Número de Muestras
10
9
8
7
6
Serie1
Serie2
5
4
Serie3
I
3
2
1
500
1-
600
0
-5
000
400
1
0
400
130
0
300
0
1200
-2
000
100
1
0-
100
0
0
Rango de Concentraciones en ng/ml
- Discusión:
Si bien el trabajo realizado no contiene la suficiente cantidad de muestras como para analizarlos
estadísticamente en forma adecuada, se puede observar que en el caso de la adicción las concentraciones de
Benzoilecgonina en las muestras analizadas son menores que los que se encontraron en las muestras que corresponden
a los consumidores de te de coca, y los coqueaderes, encontrándose en éstos últimos valores muy elevados. También se
puede observar que existe una superposición de concentraciones del derivado de la cocaína (Benzoilecgonina) en los
diferentes tipos de consumo, lo cual no nos permite encontrar los parámetros que estamos buscando para poder
diferenciarlos.
- Conclusiones:
Tratándose de un trabajo preeliminar, en el sentido que el número de muestras procesadas son escasas,
no podemos llegar a una conclusión definitiva, por lo que es necesario seguir procesando muestras con el objeto de
encontrar los parámetros que permitan diferenciar: un consumidor de te de coca ó coqueador de un adicto a la cocaína,
teniendo en cuenta que la metodología aplicada proporciona sólo un resultado de prueba analítica preliminar.
- Bibliografía:
Appel TA, Wade NA, Screening of blood and urine for drugs of abuse utilizing diagnostic products corporation’s
Coat-A-Count radioimmunoassay Kits, J. Anal. Toxicol., 1989, 13 [5]: 268-273.
Cone EJ, Validaty testing of commercial urine cocaine metabolite assays: III Evaluation of an enzyme-linked
immusorbent assay (ELISA) for detection of cocaine metabolite, J Forensic Sci., 1989,34 [4]: 991:995
Farina M, Yonamine M, SilvaOA, One-step liquid-liquid extraction of cocaine from urine samples for gas
chromatographic analysis, Forensic Sci Int., 2002, 127 [3]: 204-207.
Fernandez P, Lafuente N., Bermejo AM, Lopez-Rivadulla M, Cruz A, HPLC determination of cocaine and
benzoylecgonine in plasma and urine from drug abusers, J. Anal. Toxicol., 1996,20 [4]: 224-228.
Garside D, Goldberger BA, Preston KL, Cone EJ, Rapid liquid-liquid extraction of cocaine from urine for gas
chromatographic-mass spectrometric analysis, J. Chromatogr.B Biomed.Sci.Appl., 1997, 692 [1]: 61-65.
Jeanville PM, Estape ES, Needham SR, Cole MJ, Rapid confirmation/quantitation of cocaine and benzoylecgonine
in urine utilizing high performance liquid chromatography and tendem mass spectrometry, J.Am.Soc.Mass Spectrom.,
2000, 11 [3]: 257-263.