LABORATORIO No. 9 DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS INTRODUCCIÓN Todos los seres vivos, uni- y pluricelulares tienen como misión fundamental la de reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones. Los fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del proceso conocido como ciclo celular (Ver figura No. 9.1). Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos que involucran la integración de diferentes señales que conducen a la duplicación de DNA, su condensación, segregación y posterior descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas. Aunque la mitosis, de por sí es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los c ambios morfol ógi cos que va experimentando la célula y que se continúan con la citocinesis. Durante esta práctica, el estudiante identificará los principales cambios morfológicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en células meristématicas de raíces de cebolla; como se observa en la galería de imágenes. 9.1 OBJETIVOS: 9.1.1 OBJETIVO GENERAL: ♦ Valorar la importancia de la división celular en el desarrollo, el crecimiento y la reposición de células en tejidos desgastados. 9.1.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS: ♦ Ejecutar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas permanentes de mitosis. ♦ Reconocer la función de cada uno de los reactivos que se emplean en la citada técnica. ♦ Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la mitosis en raíz de cebolla. ♦ Describir las diferencias los procesos mitóticos de célula animal y vegetal. entre una Figura No. 9.1 Ciclo Celular 9.2 MATERIALES: 9 Microscopios 9 Porta objetos 9 Cubre objetos 9 Bisturí o cuchilla 9 Tijeras 9 Pinzas 9 Raíz de cebolla 9 Solución de carnoy 9 Acido clorhídrico al 10% 9 Acetocarmín 9 Esmalte 9.3 PROCEDIMIENTO: a. Cinco o seis días antes de comenzar los experimentos, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un vaso desechable coloque la cebolla como aparece en la figura No. 9.1. Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente. 51 Figura No. 9.2. Montaje para obtención de raíces de cebolla b. Cuando las raíces nuevas alcancen 3 cm. Aproximadamente de longitud, extraiga la cebolla del recipiente y corte el último centímetro de la punta. c. Deposite estas raíces en la solución fijadora Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético) durante 20 minutos. d. Traslade las raíces a un recipiente que contiene ácido clorhídrico al 10% durante 10 minutos. Este tiempo varía según el tipo de célula. e. Coloque las raíces en un recipiente con agua y lávela por cinco minutos. f. Traslade las raíces a un recipiente con acetocarmín. Este colorante las debe cubrir totalmente durante 20 minutos. g. Saque la raíz del recipiente que contiene acetocarmín y póngala en un porta objeto. h. Corte nuevamente la raíz, dejando el extremo inferior (ápice) y deseche el otro. i. Coloque en ángulo recto el cubre objeto, bájelo lentamente hasta que se pose en el preparado, y luego haga una leve presión con el dedo hasta conseguir una extensión del preparado. j. Selle los bordes del cubre objeto con esmalte y deje secar. k. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitóticas, y posteriormente con el objetivo de mayor aumento para discriminar detalles. Guiándose por las figuras de la galería de imágenes, identifique las diferentes fases de la mitosis y dibújelas. 9.4. CUESTIONARIO: ♦ ¿ Cuál es la función de la solución fijadora? ♦ ¿ Cuál es la función del ácido clorhídrico? ♦ ¿ Cuántos cromosomas tienen las células de cebolla? ♦ ¿Qué diferencias existen entre la mitosis de una célula vegetal y una animal? ♦ ¿ Qué tipo de tejido vegetal se utilizó para observar la mitosis? ♦ ¿En que fase de la mitosis, los cromosomas llegan a su máxima condensación? ♦ ¿ En la metafase de la mitosis, como se llama la parte de la célula donde se localizan los cromosomas? ♦ ¿En que fase de la mitosis se separan las cromátidas? 9.5 ENLACES: ♦ http://www.whfreeman.com/lodish/ Página del libro "Molecular cell biology", con buenas imágenes, esquemas y videos. ♦ http://cellbio.utmb.edu/cellbio/cellsc h.htm : Curso interactivo sobre biología celular con numerosos esquemas y microfotografías. ♦ http://www.biology.arizona.edu/defa ult.html Curso de biología incluyendo biología celular, bioquímica, desarrollo y otras áreas afines. ♦ http://highered.mcgrawhill.com/sites/0070271348/studen t_view0/chapter27/elearning.html Curso sobre Biología con muy buenos documentales para visualizar con Real Player. • Retornar a tabla de contenido 52 GALERIA DE IMÁGENES PROFASE ANAFASE METAFASE TELOFASE INTERFASE PROFASE METAFASE ANAFASE PROMETAFASE TELOFASE ; VOLVER 53